Oeno 6-2000es.

doc

RESOLUCIN OENO 6-2000

PROTOCOLO DE VALIDACIN DE MTODOS DE ANLISIS
ASAMBLEA GENERAL
Visto el artculo 5,prrafo 4 de la Convencin internacional de unificacin de mtodos de
anlisis y de valoracin de vinos del 13 de octubre de 1954,
A propuesta de la Subcomisin de mtodos de anlisis y de apreciacin de vinos
DECIDE
Introducir en el Anexo A de la Recopilacin de los mtodos internacionales de anlisis de
vinos, el Protocolo para la planificacin, el desarrollo e interpretacin de los ensayos para la
validacin de los mtodos de anlisis (revisada en 1994 Informe tcnico)
Synopsis. Los mtodos de anlisis deben ser validados para ser contrastados a requerimiento
de tipo profesional o frente a posibles litigios jurdicos. El protocolo revisado incorpora los
cambios sugeridos tras la experiencia adquirida por la aplicacin del Primer Protocolo a nivel
internacional, Cf. Pure Appl. Chem.,
67.2, 331 343 (1995). Tambin incorpora unas
revisiones menores en la redaccin para mejorar la lectura del Primer Protocolo.

INTRODUCCIN
Tras un cierto nmero de reuniones y seminarios prcticos, un grupo de representantes de 27
organizaciones ha adoptado por consenso un Protocolo para la planificacin el desarrollo y la
interpretacin de los ensayos colaborativos, publicado en Pure & Appl. Chem. 60, 855-864,
(1998). Un determinado nmero de organizaciones han aceptado y utilizado este protocolo.
Basndose en su experiencia y en las recomendaciones del Comit del Codex de Mtodos de
Anlisis y Toma de Muestras (programa conjunto FAO/OMS de Normas Alimentarias, Informe
de la Decimoctava Sesin, 9-13 de Noviembre de 1992; FAO, Roma, Italia, ALINORM 92/93,
secciones 34-39), se ha recomendado la inclusin de 3 revisiones menores en el protocolo
original. Estas son: (1) eliminar el diseo mediante pares de subniveles (en ingls: double
split level) porque el trmino de interaccin que genera depende de la eleccin de los niveles
y si la interaccin es estadsticamente significativa, no puede interpretarse desde el punto de
vista fsico (2) Desarrollar la definicin de material (3) Se incrementa de 1 a 2,5% el
criterio utilizado para eliminar un resultado aberrante.
El protocolo revisado que incluye estos cambios se reproduce aqu. Con el fin de mejorar la
lectura, se han hecho algunas revisiones en la redaccin. El vocabulario y las definiciones del
documento Nomenclatura de los Estudios Inter-laboratorios (Recomendaciones 1994)
[publicado en Pure Applied Chem., 66, 1903-1911 (1994)] se han incluido en esta revisin, y
tambin cuando ha sido posible, los trminos apropiados de la Organizacin Internacional de
Normalizacin (ISO) modificados para aplicarlos a la qumica analtica.

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PROTOCOLO
1.0.

Trabajo preliminar
Los ensayos (colaborativos) para la comprobacin de los mtodos requieren un
esfuerzo considerable y deben ejecutarse solamente para aquellos que hayan superado
un test preliminar adecuado. Este test interno de laboratorio, deber incluir a ser
posible (cuando sea aplicable), la informacin sobre los siguientes puntos:

1.0.1. Estimacin preliminar de la precisin

Estimacin de la desviacin tpica total de los resultados analticos intralaboratorio en
el intervalo de concentracin seleccionado, estudiado al menos con el lmite superior y
el lmite inferior del intervalo de concentracin, con una atencin especial para el valor
estndar o el valor de la especificacin.
NOTA 1: La desviacin-tpica total intralaboratorio es una medida de la imprecisin
ms global que la desviacin tpica de la repetibilidad de ISO,3.3, que se incluye. Esta
desviacin-tpica representa la variacin intralaboratorio ms elevada que puede
esperarse de los ensayos del mtodo; comprende al menos la variabilidad entre das
diferentes y tambin preferentemente entre curvas de calibracin diferentes. Incluye
las variaciones entre-series (entre-lotes) e intra-serie, (intra-lote). En este sentido
puede considerarse como una medida de la reproducibilidad dentro de un laboratorio.
Si este valor est dentro de los lmites aceptables, no se debe esperar que la
desviacin tpica entre laboratorios (desviacin-tpica de la reproducibilidad) sea mejor.
Este criterio de fidelidad no se estima a partir del estudio mnimo descrito en este
protocolo.
NOTA 2: La desviacin-tpica total intralaboratorio puede estimarse tambin a partir de
los ensayos de robustez que indican con qu rigor deben controlarse los factores
experimentales y cuales son los lmites de variacin autorizados. Estos lmites
determinados experimentalmente deben estar incluidos en la descripcin del mtodo.
1.0.2. Errores sistemticos (sesgo)
Estimaciones del error sistemtico de los resultados analticos en el intervalo de
concentracin y para las sustancias a analizar, estudiados como mnimo en los lmites
superior e inferior del intervalo de concentracin, con una atencin particular sobre el
valor estndar o el valor especificado. Deben anotarse los resultados obtenidos por la
aplicacin del mtodo a los materiales de referencia adecuados
1.0.3 Recuperacin
Recuperacin con adicin efectuada sobre muestras reales, sobre los extractos,
sobre las soluciones de digestin, o sobre otras soluciones derivadas de su
tratamiento.
1.0.4. Campo de aplicacin
Posibilidad del mtodo para identificar y medir las formas fsicas y qumicas del analito
susceptibles de estar presentes en los materiales, teniendo en cuenta el efecto matriz.
1.0.5. Interferencia
Efecto de otros constituyentes que son susceptibles de estar presentes en
concentraciones apreciables en las matrices consideradas y que pueden interferir en el
resultado.
1.0.6. Comparacin del mtodo
Comparacin de los resultados del mtodo con los mtodos existentes ya comprobados
y destinados a usos similares.
1.0.7. Procedimientos de calibrado

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Los procedimientos especificados para el calibrado y la correcin del blanco no deben

introducir ningn sesgo importante en los resultados.
1.0.8. Descripcin del mtodo
El mtodo debe estar descrito de manera clara y sin ambigedad.
1.0.9.Cifras significativas
El laboratorio que inicia el estudio deber indicar el nmero de cifras significativas que
se deben dar basndose en los datos que se obtienen en los instrumentos de medida.
NOTA: Al hacer los clculos estadsticos a partir de los datos, es preciso utilizar
totalmente la potencia de la calculadora o del ordenador y no redondear o recortar los
resultados antes de obtener la media final o la desviacin tpica. Alcanzado este punto,
las desviaciones tpicas se redondean a dos cifras significativas y las medias y las
desviaciones correspondientes se redondean para que tengan el mismo nmero de
cifras significativas que la desviacin-tpica. Por ejemplo, si s R = 0,012, el valor de x se
da como 0,147 y no como 0,1473 o 0,15, el coeficiente de variacin obtenido es 8,2%
(los smbolos estn definidos en el Apndice 1). Si los clculos de las desviacionestpicas deben establecerse manualmente por etapas con transferencia de los resultados
intermedios, el nmero de cifras significativas a retener para los nmeros elevados al
cuadrado debern tener al menos dos veces el nmero de cifras obtenidas por los
datos ms 1.
2.0.

Diseo del estudio de validacin del mtodo

2.1.

Nmero de materiales
Para un nico tipo de sustancia, se necesitan al menos 5 materiales (muestras para el
anlisis); este nmero mnimo puede reducirse a 3, nicamente si se trata de un solo
nivel para una matriz nica. Para este parmetro, las dos partes de un subnivel y las
dos partes individuales de duplicados ciegos para cada laboratorio se consideran como
una sola muestra.
NOTA 1:
Un material es una combinacin de analito/matriz/concentracin a la que se aplican
los parmetros de validacin del mtodo: Este parmetro determina la aplicabilidad de
un mtodo. Para aplicar el mtodo a un cierto nmero de sustancias diferentes, deber
elegirse un nmero suficiente de matrices y de niveles, para tener en cuenta las
interferencias potenciales y la concentracin ms utilizada.
NOTA 2: Los materiales de ensayo replicados o ciegos o no ciegos en nmero igual
o superior a 2 constituyen desde el punto de vista estadstico un solo material (no son
independientes).
NOTA 3: Un subnivel (par de Youden) analizado en estadstica como un par, constituye
un solo material; si el anlisis estadstico se realiza y se informa considerando que las
muestras son independientes, se considera como 2 materiales. Adems, el par puede
utilizarse para calcular la desviacin-tpica intralaboratorio s r:
sr =

( di2 ) / 2 n

sr =

( di2 ) / 2 ( n 1 )

(para ensayos duplicados, en ciego o no)

(para el par de Youden)

en donde di es la diferencia entre los 2 valores individuales del subnivel para cada
laboratorio y n el nmero de laboratorios. En este caso particular la desviacin-tpica
entre laboratorios sR es solamente la media de dos valores s R calculados a partir de
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los componentes individuales del subnivel y solamente se utiliza para comprobar los
clculos.

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NOTA 4: El blanco o el control negativo puede ser o no un material segn la finalidad

del anlisis. Por ejemplo, en el anlisis de trazas en donde hay niveles muy dbiles
(prximos al lmite de cuantificacin), los blancos se consideran como materiales y son
necesarios para determinar los lmites de determinacin. Sin embargo si el blanco es
solamente un control de procedimiento en macro anlisis (por ejemplo, la materia
grasa en el queso) no se considerar como un material.
2.2.

Nmero de laboratorios
Al menos 8 laboratorios deben comunicar los resultados para cada material; cuando no
sea posible obtener este nmero (por ej., se requieran aparatos muy caros o
laboratorios especializados) se podr realizar el ensayo con un nmero inferior, pero
con un mnimo de 5 laboratorios. Si el
ensayo se realiza para la utilizacin
internacional del mtodo, debern participar en l laboratorios de diferentes pases.
Cuando los mtodos exijan la utilizacin de aparatos especializados, el ensayo podr
incluir el conjunto de laboratorios disponibles. En tales casos, n se emplea como
denominador para el clculo de la desviacintpica en vez de n1. Los laboratorios
que se incorporen posteriormente a este campo, deben demostrar que pueden realizar
los anlisis con la misma fiabilidad que los laboratorios participantes originales.

2.3.

Nmero de replicados
Los parmetros de la repetibilidad deben estimarse utilizando una de los siguientes
diseos (indicados por orden aproximado de preferencia):

2.3.1. Subniveles (Split level)

Para cada nivel que est dividido y constituye solamente una muestra nica, desde el
punto de vista del diseo y anlisis estadstico, utilizar tomas de ensayo de muestras
de anlisis casi idnticas que solo difieran ligeramente en su concentracin de analito
(por ejemplo < 1 a 5 %). Cada laboratorio debe analizar cada muestra de ensayo una
vez y solamente una vez.
NOTA : El criterio estadstico que debe cumplirse para que un par de muestras a
analizar constituya un subnivel es que la desviacin-tpica de la reproducibilidad de las
2 partes del subnivel sea la misma.
2.3.2. Combinacin de replicados ciegos y de subniveles
Emplear subniveles para algunas muestras y replicados ciegos para otras dentro del
mismo ensayo (valores nicos para cada muestra de anlisis).
2.3.3. Replicados en ciego
Emplear replicados ciegos idnticos para cada material; cuando los productos no
puedan ser censurados (por ej.: entrada, clculo e impresin automtica), ser posible
emplear replicados idnticos no realizados en ciego.
2.3.4. Replicados conocidos
Emplear replicados conocidos para cada material (al menos 2 tomas de muestra para
anlisis de una misma muestra de ensayo) pero solamente cuando la utilizacin de uno
de los diseos precedentes no sea aplicable.
2.3.5. Anlisis independientes
En el estudio emplear solamente una toma de muestra nica de cada muestra (es
decir, no realizar anlisis mltiples), pero compensar la imposibilidad de calcular los
parmetros de la repetibilidad con el estudio de los parmetros del control de calidad
o de los otros datos intralaboratorios obtenidos independientemente del estudio de
validacin del mtodo.
3.0.

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Anlisis estadstico (ver diagrama, A.4.1.)

Para realizar el anlisis estadstico de los datos, se deben aplicar los procedimientos
estadsticos convenientes que se incluyen en este documento e informar de los

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resultados obtenidos.
descartados.

Los

procedimientos

suplementarios

adicionales

no

son

3.1.

Datos vlidos
Solo los resultados vlidos se deben comunicar y someter al tratamiento estadstico.
Los datos vlidos son los resultantes de la realizacin normal de los anlisis de
laboratorio; no estn afectados por desviaciones del mtodo, por el mal
funcionamiento de los aparatos, por incidencias inesperadas durante la realizacin del
mtodo o por errores de escritura, de tipografa y de aritmtica.

3.2.

Anlisis de la varianza de un factor

El anlisis de varianza de un factor y el tratamiento de los valores aberrantes deben
aplicarse separadamente a cada material (muestra de anlisis) para estimar los
componentes de la varianza y los parmetros de la repetibilidad y reproducibilidad.

3.3.

Estimacin inicial
Calcular la media x (= la media de las medias de los laboratorios), el coeficiente de
variacin de la repetibilidad RSD r, y el coeficiente de varianza de la reproducibilidad
RSDR, sin desechar los valores aberrantes pero utilizando solamente los datos vlidos.

3.4.

Tratamiento de los valores aberrantes

Los parmetros estimados de precisin que deben reportarse estn basados en los
datos iniciales eliminando todos los datos aberrantes sealados por el procedimiento
armonizado de 1994 para la eliminacin de los valores aberrantes. Este procedimiento
consiste esencialmente en aplicar los test de Cochran y de Grubbs (al nivel de
probabilidad P de 2,5%, unilateral para el de Cochran y bilateral para el de Grubbs)
hasta que no haya ms valores aberrantes indicados, o hasta que el nmero inicial de
laboratorios que han remitido resultados vlidos descienda un 22,2% (2/9).
NOTA: Una consulta rpida a un laboratorio que comunica valores sospechosos puede
permitir corregir los fallos o descubrir las condiciones que han conducido a los datos no
vlidos, 3.1. Es preferible reconocer los fallos y los resultados invalidados per se que
basarse en tests estadsticos para eliminar valores con desviaciones.

3.4.1. Test de Cochran

En primer lugar aplicar el test de Cochran para los resultados aberrantes (test
unilateral para P = 2,5%) y eliminar al laboratorio cuyo valor crtico exceda el valor
tabulado para el nmero de laboratorios y de replicados considerados, Apndice
A.3.1,3.4.2.
3.4.2. Tests de Grubbs
Aplicar el test de Grubbs simple bilateral a los valores individuales y eliminar todos los
laboratorios aberrantes. Si ningn laboratorio aparece como aberrante aplicar ahora el
test de Grubbs doble (bilateral), P = 2,5% del total. Eliminar todo(s) lo(s)
laboratorio(s) sealado(s) por estos tests cuyo valor crtico exceda del valor tabulado
en la columna apropiada de la tabla, Apndice A.3.3. Interrumpir el proceso de
eliminacin cuando la aplicacin siguiente del test indique ms del 22,2% (2 sobre 9)
de los laboratorios como aberrantes.
NOTA: Los test de Grubbs deben aplicarse sobre un material a la vez, a las series de
medias replicadas de todos los laboratorios, y no a los valores individuales obtenidos a
partir de los diseos de replicados porque la distribucin de todos los valores tomados
conjuntamente es multimodal no Gausiana, es decir, que sus diferencias con la media
general para este material no son independientes.
3.4.3. Estimacin final
Volver a calcular los parmetros como en 3.3. previa eliminacin de los laboratorios
sealados por el clculo precedente. Si no se han encontrado datos aberrantes
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aplicando la secuencia Cochran-Grubbs, terminar el test. Si no, aplicar de nuevo la

secuencia Cochran-Grubbs a los datos depurados de los resultados aberrantes
sealados, hasta que no haya ninguno ms sealado o hasta que ms del 22,2% (2
laboratorios sobre 9) sean eliminados en el ciclo siguiente. Ver diagrama A.3.4.
4.0.

Informe final
Debe publicarse un informe final e

incluir todos los resultados vlidos. El resto de

informacin y los parmetros deben comunicarse siempre que sea posible. en un

formato similar (para cada materia informada) al que aqu se indica.
Los tests de validacin del mtodo [x] llevados a cabo a nivel internacional en [ao(s)]
por[la organizacin] en la que han participado [y e z] laboratorios, realizando cada uno
[k] replicados, produce los siguientes resultados estadsticos:
TABLA DE PARMETROS PARA LA VALIDACIN DEL MTODO
Analito; Resultados expresados en [unidades]
Material [Descripcin y listado en columnas en un tabla en orden creciente de
magnitud de las medias]
Nmero de laboratorios considerados tras la eliminacin de los resultados aberrantes
Nmero de laboratorios aberrantes
Cdigo (o designacin) de los laboratorios aberrantes
Nmero de resultados aceptados
Media
Valor verdadero o aceptado como verdadero, si se conoce
Desviacin-tpica de la repetibilidad (S r)
Coeficiente de variacin de la repetibilidad (RSD r)
Lmite de repetibilidad, r (2,8 x s r)
Desviacin tpica de la reproducibilidad (s R)
Coeficiente de varianza de la reproducibilidad (RSD R)
Lmite de reproducibilidad R (2,8 x s R)
4.1.

Smbolos
Se adjunta en el Apndice 1 (A.1.) una serie de smbolos para utilizar en los informes
y publicaciones.

4.2.

Definiciones
Se adjunta en el Apndice 2 (A.2.) una serie de definiciones para utilizar en los
informes del estudio y publicaciones.

4.3.

Varios

4.3.1. Recuperacin
La recuperacin de un analito aadido para controlar el mtodo o el sesgo de un
laboratorio debe calcularse de la siguiente manera :
Recuperacin [Marginal], % =
(Analito total encontrado - analito presente originariamente) x 100/(analito aadido)
Aunque el analito pueda expresarse en concentracin o en cantidad, las unidades
deben ser siempre idnticas. Cuando la cantidad de analito viene determinada por el
anlisis, se determinar siempre de la misma manera.
Los resultados analticos para el enriquecimiento deben darse sin correccin. Informar
por separado los datos del enriquecimiento
4.3.2. Cuando sL es negativo
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Por definicin en los ensayos de validacin de un mtodo s R es mayor o igual a s r; a

veces puede ocurrir que la estimacin de sr sea superior a la estimacin de sR (la
varianza de replicados es superior a la varianza entre laboratorios y el valor calculado
sL2 es entonces negativo). Cuando esto ocurra poner s L= 0 y sR = sr.
5.

REFERENCIAS
Horwitz, W (1988) Protocolo para el diseo, realizacin e interpretacin de los ensayos
para la validacin de mtodos. Pure & Appl. Chem. 60,855-864.
Pocklington, W.D. (1990) Protocolo armonizado para la adopcin de mtodos analticos
normalizados y para la presentacin y validacin de sus caractersticas. Pure and Apll.
Chem. 62, 149-162.
Organizacin Internacional de Normalizacin. Norma Internacional 5725-1986. Bajo
revisin en 6 partes, los ejemplares se pueden conseguir
Nacionales de Normalizacin

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en las Asociaciones

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A. APNDICES

A.1.

APNDICE 1. SIMBOLOS

Utilizar las siguientes series de smbolos y trminos para designar los parmetros expuetos
en el estudio de validacin de un mtodo.
Medida (de las medias de los laboratorios)
Desviaciones tpicas
Repetibilidad

x
s (estimacin)
sr

Interlaboratorios

sL

Reproducibilidad

sR

Varianzas :
sR2 = sL2 + sr2

s2 (con los ndices r, L y R)

Coeficiente de variacin
RSD (con los ndices r, L y R)
Diferencias mximas
(como las definidas en ISO 5725-1986) ;
Ver A.2.4. y A.2.5.)
Lmite de repetibilidad
r = 2,8 x Sr)
Lmite de reproducibilidad
Nmero de replicados por laboratorio
Nmero medio de replicados por laboratorio i

R = (2,8 x SR)
k (general)
ki (para un diseo equilibrado)

Nmero de laboratorios
L
Nmero de material (muestras de anlisis)
m
Nmero total de resultados del ensayo
n (= kL para un diseo equilibrado)
Nmero total de valores para un determinado ensayo N (= kLm para un diseo totalmente
equilibrado).

__________________________________________________________________________
_
Si se utilizan otros smbolos, es necesario explicar totalmente su relacin con los
smbolos recomendados.

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APNDICE 2. DEFINICIONES
A.2.
Emplear las siguientes definiciones. Las tres primeras definiciones se basan en el documento
de IUPAC Nomenclatura de Ensayos Interlaboratorios (aprobado para publicacin en 1994).
Las dos definiciones siguientes utilizan los conceptos de la norma ISO 3534-1: 1993. Todos los
resultados de los ensayos se supone que son independientes, es decir, se han obtenido sin
haber sufrido la influencia de cualquier resultado precedente sobre la misma muestra o sobre
una muestra de anlisis similar.

Las medidas cuantitativas de precisin dependen de una

manera crtica de las condiciones fijadas. Las condiciones de repetibilidad y de reproducibilidad

constituyen conjuntos particulares de condiciones extremas estipuladas.
A.2.1. Ensayo de la validacin del mtodo
Ensayo interlaboratorio en el que todos los laboratorios siguen el mismo protocolo escrito y
utilizan el mismo mtodo de anlisis para determinar un parmetro en series de muestras
idnticas (muestras, muestras de anlisis). Los resultados obtenidos se utilizan para estimar
las caractersticas de validacin del mtodo. Normalmente estas caractersticas son la
precisin intralaboratorio e interlaboratorio, y si fuera necesario y posible, otras caractersticas
pertinentes como el error sistemtico, la recuperacin, los parmetros de control interno de la
calidad, la sensibilidad, el lmite de cuantificacin y el mbito de aplicacin.
A.2.2. Ensayo de validacin del laboratorio
Ensayo interlaboratorio que consiste en un nmero de anlisis o medidas superior a uno,
realizado utilizando el mtodo elegido o empleado por cada laboratorio. Los resultados
obtenidos se comparan a los de otros laboratorios o con un valor conocido o asignado como
referencia, con el objetivo general de evaluar o mejorar la validez de un laboratorio.
A.2.3. Ensayo de certificacin de un material
Ensayo interlaboratorio que asigna un valor de referencia (valor verdadero) a una cantidad
(concentracin o propiedad) en un producto a comprobar, indicando habitualmente una
incertidumbre declarada.
A.2.4. Lmite de repetibilidad (r)
Cuando la media de los valores obtenidos a partir de dos determinaciones independientes con
el mismo mtodo y en artculos idnticos dentro del mismo laboratorio y por el mismo
analista, utilizando el mismo aparato y en un corto intervalo de tiempo, se sita en el intervalo
de los valores medios citados en el Informe Final, 4.0., la diferencia absoluta entre dos
resultados de los anlisis deber ser inferior o igual al lmite de repetibilidad (r) = [2,8 x s r]
que puede ser deducido generalmente por interpolacin lineal de s r basndose en el Informe.
NOTA: Esta definicin y la definicin correspondiente al lmite de reproducibilidad, se han
obtenido a partir de cinco trminos generados los unos de los otros; estas definiciones han
sido concebidas para permitir su aplicacin por interpolacin para una muestra a analizar,
cuya media no es la misma que la utilizada para establecer los parmetros de origen, lo que
es un caso habitual cuando se aplican estas definiciones. El Trmino lmite de repetibilidad
[y reproducibilidad] se aplica especficamente con una probabilidad del 95% y se toma como
2,8 x sr [o sR]. El trmino general para este concepto estadstico aplicado en toda la extensin

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de su tendencia (por ejemplo, la mediana) y con otras probabilidades (por ejemplo, 99%) es
la diferencia crtica de repetibilidad [y reproducibilidad]
A.2.5. Lmite de reproducibilidad (R)
Cuando la media de los valores obtenidos a partir de dos valores nicos con el mismo mtodo
sobre dos muestras de anlisis idnticas en diferentes laboratorios con diferentes analistas,
utilizando equipos diferentes, se sita dentro del intervalo de los valores medios citados en el
Informe Final, 4.0, la diferencia absoluta entre dos resultados del anlisis debe ser inferior o
igual al lmite de reproducibilidad (R)[= 2,8 x s R] que se puede deducir generalmente por
interpolacin lineal de s R basndose en el Informe.
NOTA 1:

Cuando los resultados del ensayo interlaboratorio lo permitan, los valores r y R

pueden expresarse como valores relativos (por ejemplo, porcentaje del valor medio
determinado) en lugar de valores absolutos.
NOTA 2:
Cuando el resultado final obtenido en el ensayo es una media obtenida a partir
de ms de un valor, es decir k es superior a 1, el valor de R debe ajustarse segn la siguiente
frmula, antes de emplear R para comparar los resultados del anlisis de rutina realizados en
ejemplares simples entre dos laboratorios:
R' = R2 + r2 (1 - [1/k])1/2
Es necesario realizar ajustes similares en los casos de resultados repetidos que conforman los
valores finales para s R y RSDR si estos parmetros van a ser comunicados para el control de
calidad.
NOTA 3 :
El lmite de repetibilidad r, valor por debajo del cual se sita, en el 95% de los
casos, el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados obtenidos en el mismo
laboratorio. El lmite de la reproducibilidad R, valor por debajo del cual se sita, en el 95% de
los casos, el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados obtenidos en distintos
laboratorios.
NOTA 4: Las estimaciones de s R pueden obtenerse solamente a partir de un ensayo de
validacin del mtodo planificado y organizado ; las estimaciones de s r pueden obtenerse a
partir del trabajo de rutina en un laboratorio utilizando los grficos de control. Para los anlisis
ocasionales, en ausencia del grfico de control, la precisin intralaboratorio puede evaluarse
aproximadamente como la mitad de s R (Pure and Appl. Chem., 62, 149-162 (1990), Sec. I.3.
Nota.).
A.2.6. Anlisis de la varianza de un factor
El anlisis de la varianza de un factor es el procedimiento estadstico para obtener las
estimaciones de la variabilidad intralaboratorio e interlaboratorio, muestra por muestra. Los
ejemplos de los clculos para los diseos a un solo nivel y a un solo subnivel pueden
encontrarse en la norma ISO 5725-1986.

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APNDICE 3. VALORES CRTICOS

A.3.1. Valores crticos para la obtencin de la varianza mxima de Cochran

a un nivel de

rechazo del 2,5% (prueba unilateral) expresado en porcentaje de la varianza ms alta

en

relacin a la varianza total; r = nmero de repeticiones.

N de lab.

r=2

r=3

r=4

r=5

r=6

94,3

81,0

72,5

65,4

62,5

88,6

72,6

64,6

58,1

53,9

83,2

65,8

58,3

52,2

47,3

78,2

6,2

52,2

47,3

42,3

73,6

55,6

47,4

43,0

38,5

69,3

51,8

43,3

39,3

35,3

10

65,5

48,6

39,9

36,2

32,6

11

62,2

45,8

37,2

33,6

30,3

12

59,2

43,1

35,0

31,3

28,3

13

56,4

40,5

33,2

29,2

26,5

14

53,8

38,3

31,5

27,3

25,0

15

51,5

36,4

29,9

25,7

23,7

16

49,5

34,7

28,4

24,4

22,0

17

47,8

33,2

27,1

23,3

21,2

18

46,0

31,8

25,9

22,4

20,4

19

44,3

30,5

24,8

21,5

19,5

20

42,8

29,3

23,8

20,7

18,7

21

41,5

28,2

22,9

19,9

18,0

22

40,3

27,2

22,0

19,2

17,3

23

39,1

26,3

21,2

18,5

16,6

24

37,9

25,5

20,5

17,8

16,0

25

36,7

24,8

19,9

17,2

15,5

26

35,5

24,1

19,3

16,6

15,0

27

34,5

23,4

18,7

16,1

14,1

28

33,7

22,7

18,1

15,7

14,1

29

33,1

22,1

17,5

15,3

13,7

30

32,5

21,6

16,9

14,9

13,3

35

29,3

19,5

15,3

12,9

11,6

40

26,0

17,0

13,5

11,6

10,2

50

21,6

14,3

11,4

9,7

8,6

Las tablas A.3.1 y A.3.3 fueron calculadas por R. Albert (Octubre 1993) por simulacin con
ordenador utilizando varios pasajes de unos 7000 ciclos cada uno para cada valor y han sido
ligadas enseguida. Aunque la tabla A.e.1 no sea estrictamente aplicable ms que a un diseo
equilibrado (todos los laboratorios realizan el mismo nmero de repeticiones) puede aplicarse
a un diseo no equilibrado sin muchos errores, si solamente hubiera algunas desviaciones.
A.3.2. Clculo del estudio de la varianza mxima de Cochran para eliminacin de los
resultados aberrantes
Introducir en el ordenador la varianza intralaboratorio para cada laboratorio y dividir la mayor
de las varianzas por la suma de todas ellas y multiplicar por 100. El cociente resultante es el
estadstico de Cochran que indica la presencia de un resultado aberrante a eliminar si este

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Oeno 6-2000es.doc

cociente supera el valor crtico indicado en la tabla de Cochran que se adjunta aqu para el
nmero de repeticiones y de laboratorios especificados.

A.3.3. Valores crticos para las pruebas de los resultados aberrante de Grubbs para un nivel de
rechazo del 2,5% (prueba bilateral), 1,25% (prueba unilateral), expresado en porcentaje de
disminucin de la desviacin tpica como resultado de la eliminacin del (los) valor(es)
sospechosos.
N de laboratorios

Un valor el superior

Dos valores, los

Un valor, superior o un

o el inferior

superiores o los

valor inferior

inferiores
4

86,1

98,9

99,1

73,5

90,9

92,7

64,0

81,3

84,0

57,0

73,1

76,2

51,4

66,5

69,6

46,8

61,0

64,1

10

42,8

56,4

59,5

11

39,3

52,5

55,5

12

36,3

49,1

52,1

13

33,8

46,1

49,1

14

31,7

43,5

46,5

15

29,9

41,2

44,1

16

28,3

39,2

42,0

17

26,9

37,4

40,1

18

25,7

35,9

38,4

19

24,6

34,5

36,9

20

23,6

33,2

35,4

21

22,7

31,9

34,0

22

21,9

30,7

32,8

23

21,2

29,7

31,8

24

20,5

28,8

30,8

25

19,8

28,0

29,8

26

19,1

27,1

28,9

27

18,4

26,2

28,1

28

17,8

25,4

27,3

29

17,4

24,7

26,6

30

17,1

24,1

26,0

40

13,3

19,1

20,5

50

11,1

16,2

17,3

A.3.4. Clculo de los valores del test de Grubbs

13/15

Oeno 6-2000es.doc

Para hacer la estadstica del test de Grubbs simple, introducir en el ordenador la media de
cada laboratorio y calcular la desviacin tpica (SD) para estas L medias (designado por s en
un principio). Calcular la desviacin tpica del conjunto de medias eliminando la ms alta (s H);
calcular la desviacin tpica del conjunto de medias eliminando la ms baja (S L). El clculo del
porcentaje de la disminucin de la desviacin tpica, para las dos es:
100 x [1 - (sL/s] y 100 x [1 - sH/s]

La disminucin ms importante obtenida para estos dos clculos es el estadstico de Grubbs

simple, que indica la presencia de un resultado aberrante que hay que eliminar para un nivel P
= 2,5%, en test bilateral, si su valor excede el valor crtico tabulado en la columna 2 de la
tabla A.3.3., para el nmero de medias de laboratorio utilizado para calcular el valor de origen
s.
Para calcular el estadstico de Grubbs doble, calcular el porcentaje de disminucin de la
desviacin tpica eliminando las dos medias ms altas, as como las ms bajas, segn se
indica. Comparar el porcentaje de cambio de la desviacin tpica ms alta con los valores
tabulados de la columna 3 y proceder segn (1) o (2):
(1) Si el valor tabulado se supera, eliminar al par de valores responsable. Volver a comenzar el
proceso partiendo desde el principio con el test de Cochran para la varianza mxima, el test
de Grubbs para el valor mximo y el test de Grubbs doble para el valor mximo.
(2)

Si no se eliminan ms valores, calcular el porcentaje de variacin de la desviacin tpica

obtenida al rechazar al mismo tiempo el valor extremo ms alto y el ms bajo y comparar con
los valores tabulados en la ltima columna de A.3.3. Si el valor tabulado se supera, eliminar el
par alto-bajo de medias, y volver a comenzar el procedimiento con el test de Cochran hasta
que los siguientes valores no sean eliminados.

En todos los casos, detener el test de los

resultados aberrantes cuando ms del 22,2% (2/9) de las medias sean eliminadas

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Oeno 6-2000es.doc

A.4.

APNDICE 4
A.4.1. Diagrama para eliminar los valores aberrantes
IUPAC 1994 PROCEDIMIENTO ESTADSTICO ARMONIZADO

Eliminar los
resultados
no
vlidos

Comienzo de circuito
calcular la precisin
de las medidas

Laboratorio aberrante

SI

segn test

Eliminar el lab. excepto si la

la fraccin total de los lab.
eliminados llega al 2/9

de Cochran?
NO
Resultado aberrante

SI

test de Grubbs,
valores nicos ?

Eliminar el laboratorio excepto

si la fraccin total de lab.
eliminados llega al 2/9

NO
Resultado aberrante
test de Grubbs,
par de valores ?
NO
SI

Laboratorios
eliminados en
este circuito
NO

Informe final
Precisin
inicial y final
por ordenador

15/15

SI

Eliminar el laboratorio except

si la fraccin total de
laboratorios eliminados llega
al 2/9