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PROGRAMA DE MEDICINA
INMUNOLOGA
PRCTICA # 4
REACCIONES Y TCNICAS DE
INMUNOAGLUTINACIN
Autores: Martinez Prez Jose1, Oviedo Cali Claudia1, Parra
Tangarife Danny Daniel1.
Estudiantes de IV semestre de Medicina de la Universidad de Sucre
Sincelejo Colombia
RESUMEN: Gran parte de los progresos alcanzados por la biologa moderna se
deben al perfeccionamiento de los mtodos analticos de medida. La introduccin
de los procedimientos basados en las reacciones inmunolgicas ha representado
un importante avance en el anlisis de sustancias de inters en biologa animal y
vegetal difciles de medir empleando los mtodos bioqumicos habituales. Dentro
de los procedimientos inmunolgicos, los ms tiles y prcticos son aquellos que
se basan en la especificidad de la unin Ag-Ac. la propiedad que tienen la Igs de
unirse a un Ag, la especificidad de esta unin y el hecho de que pueda ser
visualizable por los fenmenos de precipitacin, aglutinacin y otros mecanismos
indirectos. Nosotros utilizamos principalmente la inmunoaglutinacin.
La inmunoaglutinacin es una reaccin que tiene lugar cuando se combinan
antgenos particulados (aglutingenos) con sus anticuerpos especficos
(aglutininas). Esta reaccin se ha usado ampliamente debido a la facilidad con que
se lleva a cabo y su alto nivel de detectabilidad. Aunque no permite la
cuantificacin exacta de anticuerpos, los resultados pueden expresarse
semicuantitativamente en funcin de la dilucin mayor del suero que permite aun
observar aglutinado (titulo). En la aglutinacin, las partculas quedan asociadas en
retculo por anticuerpos bivalentes (IgG) o pentavalentes (IgM), y se combina cada
extremidad de la molcula anticuerpo (regin fab) con un sitio antignico idntico
portado por partculas distintas. Las reacciones de inmunoaglutinacin necesitan
poco antgeno y aun menos anticuerpo para manifestarse. Los sitios antignicos
son dependientes de una estructura relativamente voluminosa, de ah que una
ligera modificacin del estado de dispersin de las partculas sea suficiente para
exteriorizar la reaccin serolgica. En el laboratorio pudimos observar la
inmunoaglutinacin realizando diferentes procesos para lograr esto para que este
nos d un resultado.1
Palabras Claves: Inmunoaglutinacin indirecta, I. directa Rh, precipitado.
INTRODUCCIN
Tcnicas de aglutinacin
En estas tcnicas se hacen visibles
los
complejos
Ag-Ac
por
la
aglutinacin
que producen los
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Tabla.1.determinacion
sanguneo.
del
grupo
Hemaglutinacin indirecta
Se basa en el principio de la
inhibicin de la hemaglutinacin. Para
su realizacin se precisan glbulos
rojos a los cuales se les ha unido la
misma sustancia que se desea
detectar o cuantificar. Si estos
glbulos rojos son puestos en
presencia de anticuerpos preparados
Para
realizar
la
prctica
correspondiente de reacciones y
tcnicas de inmunoaglutinacin fue
necessrio el uso de:
Tubos de centrfuga
Tubos de ensayo
Pipetas
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Guantes
Centrfuga
Microtcnica
para
titular
anticuerpos anti A y anti B en
suero humano.
Se Centrifug las sangres a 2500
r.p.m durante 10 minutos, se retir el
plasma con pipeta pasteur, no se
decant; se prepar suspensiones de
eritrocitos A y B al 2 %, se hizo por
duplicado dos series de diluciones
dobles del suero problema, para ello
se aadi 50 uL de suero fisiolgico
(SF) a partir del segundo pozo en
todos los pozos de 4 hileras, luego
se desech 50 uL del ltimo pozo,
posteriormente se prepar por
duplicado dos controles con 50 uL de
SF y 50 uL de cada una de las
suspensiones (control de eritrocitos
del grupo A y control de eritrocito del
grupo B), se aadi a todos los pozos
de dos hileras (A y B) 50 uL de la
suspensin de eritrocitos del grupo A
y a todos los pozos de las otras dos
hileras (C y D), 50 uL de la
suspensin de eritrocitos del grupo B,
se Mezcl los inmunoreactantes
dndole unos golpes laterales a la
placa varias veces, se Cubri y se
dej en reposo a temperatura
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La
presencia
del
precipitado,
determina la capacidad de reaccin
de los antgenos encontrados en la
superficie del eritrocito con los
anticuerpos, hecho que permite
formar la malla caracterstica de los
procesos de hemaglutinacin.
DISCUSIN
Partiendo de los resultados, la
reaccin de hemaglutinacin fue muy
escasa, sin embargo este es un
proceso que se presenta por la
capacidad de los anticuerpos de
ligarse o asociarse con los antgenos
que se encuentran en la superficie de
los eritrocitos. La escasa reaccin de
hemaglutinacin se di por que al
momento observar el desarrollo de la
reaccin se perturbaba por medio de
movimiento, lo cual destrua la
aglutinacin ya creada en el
desplazamiento de la muestra de un
mesn a otro; sin embargo tanto en el
control para la muestra B y en los
pozos C y D, especialmente C se
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hemaglutinacin.
Por
tanto,
aglutinacin (+) indica ausencia de la
sustancia a estudiar, y aglutinacin (-)
indica presencia de la misma. La
medida de gonadotrofina corinica
(HCG) para el diagnstico de
embarazo puede realizarse por esta
tcnica.3
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