Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
discussions, stats, and author profiles for this publication at: http://www.researchgate.net/publication/260364679
READS
998
1 AUTHOR:
Boucherit Otmani Zahia
Abou Bakr Belkaid University of Tlemcen
41 PUBLICATIONS 67 CITATIONS
SEE PROFILE
Phytothrapie
Springer-Verlag France 2014
DOI 10.1007/s10298-014-0834-x
Article original
Pharmacognosie
Introduction
La part de plantes inexplores la fois en chimie et en biologie est encore immense. Ce qui offre lespoir de dcouvrir
des traitements pour des maladies encore dvastatrices et de
proposer des alternatives thrapeutiques peu onreuses avec
moins deffets indsirables. Les tudes actuelles portant sur
les mtabolites secondaires sattachent bien videmment
explorer surtout leurs activits pharmacologiques [10,40].
La flore algrienne regorge de plusieurs espces de plantes encore peu ou pas tudies, mais dotes de relles proprits pharmacologiques [7,14,15]. La matrise totale et
parfaite des diffrentes proprits de ces plantes, qui passe
par la dtermination de lensemble des groupes physicochimiques capables dengendrer un ou plusieurs effets pharmacologiques, est aujourdhui un objectif qui occupe un ordre
de premire place [1].
Cest pourquoi nous nous sommes intresss effectuer
une tude phytochimique de la plante Fredolia aretioides de
la rgion de Bchar (Algrie) et valuer lactivit
Lextrait eau/mthanol (macration 48 heures et vaporation sec) est solubilis dans le mthanol une concentration de 1 g/l pour le dosage des polyphnols totaux. Le taux
de polyphnols totaux des racines est dtermin par spectrophotomtrie en utilisant le ractif de Folin-Ciocalteu. La
coloration produite, dont labsorption maximum est comprise entre 700 et 760 nm, est proportionnelle la quantit
de polyphnols prsente dans les extraits vgtaux [8]. Le
dosage de ces polyphnols est ralis selon la mthode
dcrite par Vermerius et Nicholson [39]. 0,1 ml de lchantillon est mlang avec 2 ml dune solution de carbonate de
sodium 2 %. Aprs agitation et dincubation de cinq minutes, 100 l du ractif de Folin-Ciocalteu 1 N sont additionns ; aprs 30 minutes dincubation temprature ambiante,
la lecture des densits optiques (DO) est faite 700 nm
contre un blanc. Une courbe dtalonnage est ralise en
parallle dans les mmes conditions exprimentales en utilisant lacide gallique comme contrle positif concentrations finales allant de 0,1 1 mg/ml par palier de 0,1.
Matriels et mthodes
Extraits bruts
Matriel vgtal
Ltude phytochimique et lvaluation de lactivit antioxydante ont ncessit un matriel vgtal reprsent par les
racines de Fredolia aretioides rcolte en dcembre 2011
dans la rgion de Bchar (Algrie). La plante utilise a t
identifie au sein du laboratoire dcologie vgtale de luniversit Abou-Bekr-Belkaid de Tlemcen. Les racines sches
ont t pulvrises et utilises pour la prparation des diffrents extraits.
tude phytochimique
Lexamen phytochimique est ncessaire pour identifier les
grandes familles de mtabolites secondaires existants dans
les racines de la plante tudie. Nous avons caractris la
prsence de ces derniers (saponosides, alcalodes, flavonodes, tanins, coumarines et composs rducteurs) en prparant trois extraits de polarit croissante (ther dithylique,
thanol et eau) 10 % chaud et sous agitation continue,
Rsultats et discussion
tude phytochimique
Tests phytochimiques
Les tests phytochimiques consistent dtecter les diffrentes
familles de mtabolites secondaires existants dans la partie
tudie de la plante par des ractions qualitatives de caractrisation. Ces ractions sont bases sur des phnomnes de
prcipitation ou de coloration par des ractifs spcifiques
chaque famille de composs [16]. Les rsultats des tests phytochimiques effectus sur lextrait aqueux, lextrait thanolique et lextrait dther dithylique des racines de Fredolia aretioides sont regroups dans le Tableau 1.
Nous remarquons que les alcalodes, les tanins (tanins
galliques) et les flavonodes sont prsents en quantits
importantes dans lextrait aqueux par rapport aux deux
autres extraits. Les saponosides sont prsents uniquement
dans lextrait aqueux. Nous remarquons galement la prsence des composs rducteurs avec une faible intensit
dans les racines de Fredolia aretioides.
Dosage des polyphnols totaux
Le dosage des polyphnols totaux est ralis selon la
mthode de Folin-Ciocalteu. Nous avons utilis lacide gallique comme standard [24]. En se basant sur la valeur dabsorbance de la solution de lextrait, ayant ragi avec le ractif
de Folin-Ciocalteu et compare la solution talon en quivalence dacide gallique, les rsultats de lanalyse colorimtrique des composs phnoliques totaux sont reprsents sur
les Figures 1, 2. Les rsultats obtenus sont exprims en milligramme quivalent dacide gallique par 100 g de la matire
vgtale sche (mg GAE/g), en utilisant lquation de la
rgression linaire de la courbe dtalonnage trace de
lacide gallique.
Tableau 1. Rsultats des ractions de caractrisation des diffrents groupes chimiques recherchs dans les diffrents extraits
de Fredolia aretioides.
Classes
recherches
Extrait
aqueux
Extrait
thanolique
Extrait ther
dithylique
Alcalodes
Flavonodes
Tanins
Coumarines
Saponosides
Composs
rducteurs
++
+
++
+++
+
++
Fig. 3. Rendements en extraits obtenus partir des deux parties de la plante. exbAR : extrait brut
aqueux racine ; exsTAR : fraction tanins actate dthyle racine ; exbMeOHR : extrait brut eau/MeOH
racine ; exTBR : fraction butanolique racine ; exsAR : alcalode racine
Fig. 1. Courbe dtalonnage de lacide gallique pour le dosage des polyphnols totaux
Tableau 2. Les rendements en extraits obtenus pour les deux parties de la plante.
Les extraits
Solvants utiliss
Rendements (%)
Extrait brut
Extrait brut
Tanins : fraction actate
dthyle
Tanins : fraction 1butanol
Alcalodes
Eau
Eau/mthanol
Actate dthyle
38,875
13,70
5,096
1-butanol
10,30625
Chloroforme
2,395
la mthode dextraction et la mthode de quantification peuvent galement influencer lestimation de la teneur des phnols totaux [23].
> alcalodes racines > aqueux racines > taninsfraction 1-butanol racines > taninsfraction actate dthyle
racines > brut mthanol racines.
Pigeage du radical libre DPPH
Fig. 4. Histogramme des DO des extraits tudis par FRAP en fonction de diffrentes concentrations
Lactivit antioxydante dun compos correspond sa capacit rsister loxydation [33]. De nombreuses mthodes
sont utilises actuellement pour valuer cette activit. Le
radical DPPH a t largement utilis pour ltude de lactivit antiradicalaire des diffrents extraits vgtaux. Le compos chimique 2,2-diphnyl-1-picrylhydrazyle fut lun des
premiers radicaux libres utiliss pour tudier la relation
structureactivit antioxydante des composs phnoliques
[9]. Il possde un lectron non appari sur un atome du pont
dazote. La rduction de ce radical saccompagne par son
passage de la couleur violette caractristique de la solution
de DPPH la couleur jaune mesurable par spectrophotomtrie 514518 nm. La mesure de labsorbance (ou DO) a t
effectue par spectrophotomtrie 514 nm. partir des
valeurs obtenues, nous avons calcul les pourcentages dinhibition en utilisant la formule donne auparavant. Les
valeurs obtenues ont permis de tracer des courbes reprsentes sur les Figures 59, qui montrent la variation du pourcentage dinhibition en fonction des concentrations de nos
extraits. Nous avons dtermin graphiquement la concentration correspondante 50 % dinhibition (IC50).
Calcul des IC50
La capacit antioxydante de nos diffrents extraits est dtermine partir des IC50. Cest la concentration en extrait
ncessaire pour rduire 50 % du radical DPPH. LIC50 et
lactivit antioxydante de lextrait test sont inversement
proportionnelles. Les valeurs des IC50 trouves pour tous
les extraits tests sont reprsentes dans le Tableau 3. La
valeur dIC50 de lacide ascorbique que nous avons trouv
(0,08 mg/ml) est proche de celle trouve par Rached et al.
Fig. 5. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utilises pour les extraits bruts aqueux des racines de Fredolia aretioides
Fig. 7. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utilises pour les extraits des alcalodes des racines de Fredolia aretioides
Fig. 6. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utilises pour les extraits bruts eau/mthanol des racines de Fredolia aretioides
Fig. 8. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utilises pour les extraits des tanins (fraction actate dthyle) des racines de Fredolia aretioides
tude faite par Kang et al. [19] a suggr que les molcules
polaires prsentes dans les extraits vgtaux contribuent
laugmentation de lactivit antiradicalaire.
Dans lhistogramme (Fig. 4), nous pouvons classer les extraits
par ordre de ractivit dcroissante : acide ascorbique > extrait
des alcalodes racines > extrait brut eau/mthanol racines
> taninsfraction actate dthyle racines > extrait brut
aqueux racines > tanins1-butanol racines. Le classement
des extraits selon la mthode du pigeage du radical DPPHest
totalement diffrent du classement obtenu par la mthode de
rduction du fer. En gnral, les activits de nos extraits sont
bonnes , sauf lextrait des alcalodes qui prsente une grande
activit, cela suggre que cette partie de notre plante est riche en
Fig. 9. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utilises pour la fraction 1-butanol (tanins) des racines de Fredolia aretioides
Tableau 3. Valeurs des IC50 trouves pour les extraits des racines
de la plante.
Lextrait/IC50
Racines (mg/ml)
Aqueux
Eau/MeOH
Alcalodes
Tanins1-butanol
Taninsactate dthyle
1,81 0,841
1,06 0,839
0,54 0,794
1,90 0,978
1,61 0,577
Conclusion
Dans lindustrie pharmaceutique, sachant que les antioxydants contribuent de manire significative la prvention
Conflit dintrt :
les auteurs dclarent ne pas avoir de conflit dintrt.
Rfrences
1. Abdelwahed A, Bouhlel I, Skandrani I, et al. (2007) Study of antimutagenic and antioxidant activities of gallic acid and 1,2,3,4,6pentagalloylglucose from Pistacia lentiscus Confirmation by microarray
expression profiling. Chemico-Biol Interact 165: 113
2. Attou A (2011) Contribution ltude phytochimique et activits biologiques des extraits de la plante Ruta chalepensis (Fidjel) de la rgion dAin
Tmouchent. Thse de magister de luniversit de Tlemcen, pp. 656
3. Baba-Aissa F (1999) Encyclopdie des plantes utiles. Flore dAlgrie et
du Maghreb. dition Edas, p. 368
4. Benhammou N, Atik Bekkara F, Kadifkova Panovska T (2009) Antioxidant activity of methanolic extracts and some bioactive compounds of
Atriplex halimus. C R Chimie 12: 125966
5. Benmehdi H (2000) Synthse des molcules double activit anti-PAF
et anti-VIH. Thse de doctorat luniversit de Bchar
6. Bertoncelj J, Dobersek U, Jamnik M, Golob T (2007) Evaluation of the
phenolic content, antioxidant activity and colour of Slovenian honey.
Food Chem 105: 8228
7. Bnouham M, Mekhfi H, Legssyer A, Ziyyat A (2002) Medicinal plants
used in the treatment of diabetes in Morocco. Int J Diabetes Metab 10:
3350
8. Boizot N, Charpentier J (2006) Mthode rapide dvaluation du contenu
en composs phnoliques des oranges dun arbre forestier. Mthodes et
outils pour lobservation et lvaluation des milieux forestiers, prairiaux
et aquatiques, INRA, pp. 7982
9. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C (1995) Use of a free radical
method to evaluate antioxidant activity. Lebensmitel-Wissenschauft und
Technologie 28: 2530
10. Cai YZ, Sun M, Corke H (2003) Antioxidant activity of betalains from
plants of the Amaranthaceae. J Agric Food Chem 51: 228894
11. Ciulel I (1982) Methodology for analysis of vegetable drugs. Ed IPAC
Romania, 67p
12. El Mansouri L, Ennabilli A, Bousta D (2011) Socioeconomic interest
and valorization of medicinal plants from the Rissani oasis (SE of
Morocco). Boletn Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales
y Aromticas 1: 3045
8
13. Fabri RL, Nogueira MS, Braga FG, et al. (2009) Mitracapus frigidus
aerial parts exhibited potent antimicrobial, antileishmanial, and antioxidant effects. Bioresour Technol 100: 42833
14. Gonzalez-Tejero MR, Casares-Porcel M, Sanchez-Rojas CP, et al. (2008)
Medicinal plants in the Mediterranean area: synthesis of the results of the
project Rubia. J Ethnopharmacol 116: 34157
15. Graham JG, Quinn ML, Fabricant DS, Farnsworth NR (2000) Plants
used against cancer extension of the work of Jonathan Hartwell. J Ethnopharmacol 73: 34777
16. Hagerman AE, Muller-Harvey I, Makkar HPS (2000) Quantification of
tanins in tree foliage. Joint FAO/IAEA Division of Nuclear Techniques
in Food and Agriculture. Vienna, 26p
17. Harbone JB (Ed) (1998) Phytochemical methods: a guide to modern
techniques of plant analysis, Chapman and Hall, London, p. 302
18. Hughes JB, Sousa JS, Barreto RA, et al. (2005) Cytotoxic effects of an
extract containing alkaloids obtained from Prosopis juliflora Sw. DC
(Algaroba) pods on glioblastoma cells. Rev Bras Saude Prod Ann 6:
3141
19. Kang DG, Yun CK, Lee HS (2003) Screening and comparison of antioxidant activity of extracts of herbal medicines used in Korea. J Ethnopharmacol 87: 2316
20. Karagzler A, Erdag CS, almaz Emek Y (2008) Antioxydant activity
and proline content of leaf extracts from Dorystoechas hastate. Food
Chem 111: 4007
21. Karumi Y, Onyeyili PA, Oyugbuaja VO (2004) Identification of active
principals of M. Balsamia (Balsam Apple) leaf extract. J Med Sci 4:
179182
22. Khady B, Emmanuel T, Jacqueline D, et al. (2009) tude comparative
des composs phnoliques, du pouvoir antioxydant de diffrentes varits de sorgho sngalais et des enzymes amylolytiques de leur malt. Biotechnol Agron Soc Environ 14: 1319
23. Lee KW, Kim YJ, Lee HJ, Lee CY (2003) Cocao has more phenolic
phytochemicals and a higher antioxidant capacity than teas and red
wine. Food Chem 51: 72925
24. Li HB, Cheng KW, Wong CC, et al. (2007) Evaluation of antioxidant
capacity and total phenolic content of different fraction of selected
microalgae. Food Chem 102: 7716
25. Liuk L, Sun Y, Laura T, et al. (2009) Determination of polyphenolic
content and antioxydant activity of Kudingcha made from Ilex kudingcha C.J. Tseng. Food Chem 112: 3541