PROGRAMA COOPERATIVO GUBERNAMENTAL

FAO - ITALIA

Por
Laura Torrentera Blanco
Albert G.J. Tacon

DOCUMENTO PREPARADO PARA EL PROYECTO GCP/RLA/075/ITA

APOYO A LAS ACTIVIDADES REGIONALES DE ACUICULTURA
PARA AMERICA LATINA Y EL CARIBE

Las denominaciones empleadas en esta publicacin y la forma en que aparecen

presentados los datos que contiene no implican, de parte de la Organizacin de las
Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin, juicio alguno sobre la condicin
jurdica de pases, territorios, ciudades o zonas, o de sus autoridades, ni respecto de la
delimitacin de sus fronteras o lmites.

RESUMEN
El presente trabajo es el resultado de la recopilacin de la literatura existente relevante a
nivel mundial y de la experiencia de trabajo de investigacin de los autores sobre las
principales tcnicas de cultivo a nivel laboratorio, sistemas intensivo y extensivo de las
principales especies de fitoplancton y zooplancton, seleccionadas por su alto contenido
nutricional y facilidades de manejo en cultivo.
Asimismo, contiene datos importantes de la biologa bsica de estas especies, los
parmetros ambientales ptimos para su desarrollo en condiciones de cultivo, as como
una lista extensa de las principales formulaciones de los medios de cultivo de mayor
uso, tanto minerales como enriquecidos y orgnicos.
Cada uno de los captulos que conforman este trabajo, est reforzado por tablas y
figuras en las que se ha extractado la informacin ms importante en relacin a cada
tpico.
FAO
Proyecto GCP/RLA/075/ITA
1

APOYO A LAS ACTIVIDADES REGIONALES DE ACUICULTURA

PARA AMERICA LATINA Y EL CARIBE
ANTECEDENTES
Dentro de los objetivos del proyecto de apoyo a las actividades regionales de
acuicultura para Amrica Latina y el Caribe, se han contemplado una serie de
actividades para la formacin de instructores e investigadores en Acuicultura a nivel
superior y tcnico, quienes podrn desarrollar la actividad de Acuicultura dentro de la
regin y subregin de sus respectivos pases en Latinoamrica y el Caribe. Podemos
mencionar dentro de estas actividades el curso subregional de Capacitacin en Nutricin
y Alimentacin de Peces y Camarones, desarrollado en Mxico durante el mes de
Octubre de 1987 y que fue impartido por el Dr. Albert J. Tacon, experto en Nutricin y
Alimentacin Acucola de FAO y un grupo de investigadorese instructores mexicanos,
seleccionados por la FAO por su experiencia y disponibilidad, pertenecientes al Centro
de Investigacin y de Estudios Avanzados (CINVESTAV) del IPN-Unidad Mrida y a
la Direccin General de Acuacultura de la Secretara de Pesca de Mxico, anfitriones de
dicho curso.
Para apoyar las actividades del mismo, los participantes contaron con una importante
recopilacin de informacin actualizada sobre alimentacin y nutricin de peces y
camarones en sistemas de cultivo semi-intensivo e intensivo, recopilada por el Dr.
Tacon y colaboradores en una serie de cuatro manuales, que permiti a los participantes
evaluar crticamente los requerimientos nutricionales conocidos para las principales
especies acucolas, encontrar la metodologa adecuada para evaluar los requerimientos
nutricionales a nivel subregional, para abrir nuevos caminos tendientes al desarrollo de
la nutricin acucola aplicada.
Como uno de los resultados de este curso, el grupo de investigadores del CINVESTAVIPN-Unidad Mrida, Mxico y el Dr. Tacon, analizando la fuerte necesidad de
informacin para Latinoamrica y el Caribe, han desarrollado una serie de trabajos de
recopilacin de informacin actualizada sobre alimentacin y nutricin de peces y
camarones a nivel mundial y de su propia experiencia de investigacin, que facilitar la
labor de los instructores acuicultores e investigadores en todos los aspectos prcticos de
la nutricin y alimentacin acucola en sus respectivos pases. A esta serie de trabajos
pertenece el presente, titulado La produccin de alimento vivo y su importancia en
Acuicultura.
ORGANIZACION DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA
ALIMENTACION
Braslia, Brasil
Abril, 1989

Los hiperenlances que remiten a sitios Internet distintos de los de la FAO no implican,
de parte de la Organizacin, ratificacin oficial o responsabilidad respecto a
opiniones, ideas, datos o productos presentados en dichos sitios, o una garanta de
validez acerca de las informaciones que contienen. El nico propsito de los enlaces a
2

sitios distintos de los de la FAO es proporcionar otras informaciones disponibles sobre

asuntos conexos.
La presente versin electrnica de este documento ha sido preparada utilizando
programas de reconocimiento ptico de texto (OCR). La FAO declina cualquier
responsabilidad por las eventuales diferencias que puedan existir entre esta versin y la
versin original impresa.

INTRODUCCION
En la Acuacultura, uno de los factores limitantes es la obtencin y produccin de
alimentos que cubran todos los requerimientos para las especies de cultivo y que
resulten costeables. El alimento vivo (fitoplancton y zooplancton) es esencial durante el
desarrollo larvario de peces, crustceos y moluscos. En la actualidad la investigacin
orientada hacia los microorganismos como fuente de alimentacin est en pleno
desarrollo. En pases como Japn, donde se practica con xito la Maricultura, los
cultivos masivos de microalgas, rotferos, coppodos y cladceros son la base de la
produccin comercial.
Dado el inters que existe por la Acuacultura en Latinoamrica y el Caribe, dirigido
principalmente a las especies de importancia comercial de peces, moluscos y crustceos
en condiciones controladas para la produccin y alta supervivencia de semillas en
sistemas de cultivo semi-intensivo e intensivo, se hace necesario el conocer las
diferentes alternativas de produccin de alimento vivo a gran escala, ya que es difcil
sustituir el alimento natural, pues las dietas artificiales generalmente provocan altas
mortalidades por deficiencias nutricionales cuando no estn balanceadas.
Por otra parte, en la ltima dcada se ha tratado de sustituir los alimentos vivos por
dietas microencapsuladas o por tcnicas que permitan el almacenamiento por congelado
o liofilizacin por tiempo indefinido de estos alimentos y en trminos generales no
resuelven el problema real que es la demanda constante de alimento vivo y resultan
incosteables.
Una solucin a este problema se fundamenta en el conocimiento, optimizacin y
automatizacin de los sistemas de cultivo de fitoplancton y zooplancton, para llevarlos a
niveles masivos de produccin semicontinua o continua. Se logra optimizar un cultivo
conociendo la concentracin adecuada de nutrientes, buscando una coordinacin entre
el crecimiento y la utilizacin de estos nutrientes, estandarizando una taza de dilucin o
cosecha ptima a intervalos peridicos para lograr una produccin alta y sostenida a
largo plazo.
El conocimiento y control de los parmetros ambientales ptimos en los cultivos de
fitoplancton y zooplancton es muy importante, ya que no slo permiten la supervivencia
3

y desarrollo de los organismos en cultivo, sino adems factores como la temperatura y

la salinidad regulan la concentracin y calidad de nutrientes esenciales como son las
vitaminas, los aminocidos y los cidos grasos.
Las especies de microalgas y zooplancton de mayor uso en Acuacultura, se muestran en
la Tabla I (Guillar, 1973; Hirata, 1974; Watanabe et al., 1978).
Estas especies han sido seleccionadas en base a su aporte nutricional y a las facilidades
que permiten su produccin masiva. En los siguientes captulos se presentan las
alternativas de produccin de las principales especies de alimentos vivos, as como sus
caractersticas biolgicas, que permiten el establecimiento de su cultivo.
TABLA 1
Skeletonema costatum, Thalassiosira
Bacillariophyceae
pseudonana, Chaetoceros calcitrans
Isochrysis galbana, Isochrysis sp., Pavlova
Haptophyceae
lutheri
Chrysophyceae Tetraselmis suecica, Tetraselmis chuii
Chlorella autotrophica, Chlorella
Chlorophyceaea
saccharophila
Chryptophyceaea Chroomonas salina
Cyanophyceae
Spirulina sp., Spirulina maxima
Rotfera
Brachionus plicatilis
Coppoda
Tigriopus japonicus
Branquiopoda
Artemia salina
Cladocera
Daphnia sp.
Cladocera
Moina sp.
TABLA 2
EFECTO DE LA SALINIDAD Y TEMPERATURA EN LA COMPOSICION DE
ACIDOS GRASOS EN Chlorella saccharophila (Hirata, et al., 1985)
Exp.

20:4
Temperatura
Lpidos
18:2
20:5
Salinidad
18:3 6
del agua
totales 14:00 16:00 16:1 18:1 6
3
(%)
+ 20:3
(C)
(%)
+
+
3
14.5

8.5

4.9

17.2

22.9 3.5

2.5

0.4

7.1

33.1

14.5

7.9

4.2

13.5

25.4 3.6

2.3

0.3

6.0

36.8

14.5

12

12.7

5:4

15.4

29.1 3.1

2.4

0.5

6.3

29.4

14.5

15

11.1

5.4

16.6

26.1 5.0

3.1

0.7

5.4

31.1

14.5

18

11.1

5.0

13.5

24.1 3.7

2.3

0.3

6.5

33.8

14.5

22

11.9

5.6

15.7

28.8 3.3

1.8

0.3

5.0

32.5

14.5

26

10.3

6.2

16.1

28.7 3.8

1.9

0.3

5.0

29.5

14.5

30

12.9

5.7

14.8

26.7 3.9

2.1

0.4

5.4

33.3

14.0*

25

9.0

8.1

16.6

32.2 2.8

2.1

0.6

3.4

28.2

21.0

25

9.0

8.1

19.4

22.3 4.2

1.8

0.1

6.5

29.5

24.7

25

7.0

8.5

14.5

21.4 2.3

1.3

1.1

4.2

38.4

28.0

25

8.9

12.1

36.3

22.7 3.7

3.7

1.3

3.5

13.9

28.5

25

11.0

32.9

18.7

18.7 2.8

1.5

0.8

3.9

16.0

28.5

25

7.4

11.0

32.9

18.7 2.8

1.5

0.8

3.9

16.0

+ Acidos grasos esenciales

* 14.5 0.7C
En el experimento 2, temperatura variabley S%

I. IMPORTANCIA NUTRICIONAL DE
ALIMENTO VIVO
En los ecosistomas naturales acuticos, la continuidad de las especies depende del
equilibrio establecido entre los diferentes niveles de la trama trfica. As, el desarrollo y
supervivencia de larvas y juveniles depende de la presencia de organismos que
conforman el fitoplancton y el zooplancton, quienes a su vez se producen en presencia
de los nutrientes adecuados.
Es de gran importancia el conocer la composicin qumica de los alimentos vivos, pues
el utilizar un recurso pobre en nutrientes esenciales puede causar el desarrollo anormal y
muerte masiva de las especies en cultivo. Existen estudios que as lo demuestran, como
es el caso del desbalance nutricional que causa el uso de la levadura Saccharomyces
sereviceae en la produccin masiva de larvas de especies marinas (Hirata, 1980).
Se han hecho una gran cantidad de estudios para conocer la composicin de las especies
de alimento vivo ms utilizados en Acuacultura en diferentes condiciones y con
diferentes tipos de nutrientes (Tablas 3 y 4). Estos trabajos han revelado que el
contenido nutricional de estas especies est en funcin directa de su alimento (Fogg,
1975; Watanabe et al., 1978a, 1983; Hirata et al., 1985). De acuerdo a lo anterior, es
importante conocer y manejar las diferentes tcnicas de cultivo del alimento vivo para
establecer las condiciones ms adecuadas, que permitan el obtener un alimento de alto
contenido nutricional principalmente ricos en aminocidos y cidos grasos esenciales
entre otros nutrientes, que favorezcan el desarrollo y supervivencia de las diferentes
especies de crustceos, moluscos y peces que se obtienen por Acuacultura (Tabla 5 y 6).
Existen diferentes tcnicas que permiten obtener este enriquecimiento que van desde la
manipulacin de parmetros fsicos (Tabla 2), como son la temperatura y el fotoperodo;
los parmetros qumicos como la concentracin y tipo de macronutrientes, y hasta la
adicin de fuentes orgnicas (aminccidos, vitaminas, etc.) en bajas concentraciones.

TABLA 3
COMPOSICION GENERAL DE ALGUNAS MICROALGAS
UILIZADAS EN ACUICULTURA (Fogg, 1975)
5

Tetraselmis
Dunaliella
Monochrysis
Chaetoceros
Skeletonema
Phaeodactylum

PROTEINA
1.42
1.43
0.94
1.12
1.38
0.88

CARBOHIDRATO
0.41
0.80
0.59
0.22
0.79
0.64

GRASA
0.70
0.15
0.22
0.21
0.17
0.17

La composicin celular reportada, corresponde a resultados de cultivo en condiciones

fsicoqumicas y nutricionales similares para las seis espcies (las cantidades de protena,
carbohidratos y grasas estn expresadas en relacin a cantidad total de Carbono).

TABLA 4
COMPOSICION PROXIMAL Y MINERAL DE CINCO ESPECTES DE ALIMENTO
VIVO
DE MAYOR USO EN ACUACULTURA*
ESPECIE
S

Tigriopus
japonicus

Brachionus plicatilis

MEDIO
LEVADUR
LEVADUR
LEVADUR
Chlorel
DE
A+
A+
A
la
CULIVO
Chlorella
Chlorella

Acati Daphni
a
a
sp
sp
-

Moina
sp
LEVADUR
A

Humedad 89.6

89.1

87.6

87.3

88.1

89.3

87.2

Protenas 7.2

7.9

7.8

9.0

8.5

7.5

8.8

Lpidos

2.3

2.3

3.8

2.8

1.3

1.4

2.9

Ceniza

0.4

0.4

0.5

0.5

2.1

0.7

Ca mg/g

0.12

0.26

0.21

0.15

0.39

0.21

0.12

Mg mg/g 0.14

0.17

0.14

0.23

0.76

0.12

0.12

P mg/g

1.48

1.44

1.37

1.31

1.48

1.46

1.85

Na mg/g

0.41

0.30

0.29

0.61

6.63

0.74

1.09

K mg/g

0.35

0.12

0.23

0.84

2.21

0.72

0.92

Fe g/g

15.9

52.5

43.3

33.8

11.5

72.2

46.4

Zn g/g

7.4

9.8

8.2

12.3

39.0

12.8

10.0

Mn g/m

0.4

1.1

1.1

1.0

0.2

13.2

0.5

Cu g/g

1.1

1.5

1.7

2.4

2.8

1.1

5.8

* Watanabe et al., 1983.

TABLA 5. COMPOSICION DE AMINOACIDOS ESENCIALES EN CINCO

6

ESPECIES DE ZOOPLANCTON DE MAYOR USO EN ACUACULTURA

Artenia sp
nauplios

117 3.5 8.8

Tigriopus
japonicus

117 2.5 6.7

Leucina

6.1 17.3 128 6.1 15.8 117 5.5 13.8 102 5.0 13.3 99

Metionina

0.9 2.6

48* 0.8 2.1

39* 1.5 3.8

70

1.1 2.9

54* 1.0 2.7

50*

Cistina

0.4 1.1

41* 0.6 1.6

59* 0.8 2.0

74

0.7 1.9

70

0.6 1.6

59*

3.9 10.1 106 3.7 9.3

98

3.5 9.3

98

3.6 9.5

100

138 4.0 10.7 165 3.3 8.8

135

Tirosina

3.7 10.5 162 3.1 8.0

123 3.6 9.0

Treonina

1.7 4.8

45* 3.2 8.3

78

Triptofano

1.0 2.8

165 1.2 3.1

182 1.1 2.8

Valina

3.2 9.1

96

Lisina

6.1 17.3 103 6.1 15.8 94

Arginina

5.0 14.2 122 4.6 11.9 103 4.3 10.8 93

Histidina

1.3 3.7

77

***

**

4.2 10.5 99

3.8 10.1 95

165 1.1 2.9

4.2 10.9 115 4.5 11.3 119 3.3 8.8

1.5 3.9

81

5.4 13.5 80
1.9 4.8

89

Moina spp

2.6 7.4

96

3.4 8.8

Acartia
clausi

Isoleucina

Fenilalanina 3.2 9.1

99

Brachionus
plicatilis

2.5 6.6

88

6.0 15.9 118

3.8 10.1 95

171 1.2 3.2

188

93

89

5.7 15.2 90

3.2 8.5

5.8 15.4 92

5.2 13.9 120 5.1 13.5 116

100 1.6 4.3

90

1.6 4.2

88

* g/100 g protena cruda (Watanabe et al., 1978a)

** Expresado como total de aminocidos esenciales (a.a.e.)
*** Registros basados en la composcin con a.a.e. requeridos para peces
-el 100 indica los mismos requerimientos

TABLA 6. ORGANISMOS MARINOS CULTIVADOS CON MICROALGAS EN

JAPON (U. UMEBAYASHI, 1975)
ESPECIE
SUPERVIVEN
MICROAL CONCENTRAC PRODUCCI
REFERENC
CULTIVA
CIA
GA
ION
ON
IA
DA
%
BIVALVOS
3,000
Sato &
Ostrea
Chaetoceros cel/da/larva
14,000
Takeda.
edulis
calcitrans
(estadio
org/200 l
1970
temprano)
Monochrysi 10,000
s lutheri
cel/da/larva
Andara
Chaetoceros
10,000
40,000 cel/ml
59.3%
Ito et al.,
broughtonii calcitrans
org/35 l
1968
Monas sp 10,000 cel/ml
Meretrix
Chaetoceros
Tanaka,
30,000 cel/ml
20%
lamarckii
calcitrans
1968
Nitzschia
50,000 cel/ml
closterium
7

Spisula
sachalinens
is
Patinopecte
n yezoensis

Chaetoceros 30,000 a 150,000

100,000 org 61%
calcitrans
cel/ml

Chaetoceros
calcitrans
Skeletonem
a costatum
Ostrea
Chaetoceros
edulis
calcitrans
Monochrysi
s lutheri
CRUSTACEOS
Penaeus
Skeletonem
japonicus a costatum
Penaeopsis Skeletonem
monoceros a costatum
Chaetoceros
calcitrans

20,000 cel/ml

Akimoto et
al., 1964

88%

Takeda,
1965

4%

Imai, 1967

20,000 cel/ml
2,000 cel/ml

12,000
org/ton

15,000 cel/ml

10,000 cel/ml
-

56%

25%

Hudinaga,
1962
Funada,
1966

(naupliopostlarva)

II. CULTIVO DE MICROALGAS

Son llamadas microalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el fitoplancton
que abarca desde organismos auttrofos hasta microflagelados y microciliados
auxtrofos.
Su posicin taxonmica ha sido de gran polmica entre botnicos y zologos, como
ejemplo podemos mencionar el grupo de los dinoflagelados, conocidos por unos como
microalgas y por otros como protozoarios.
En este trabajo no pretendemos apoyar o rechazar ninguna de las lneas en relacin a la
sistemtica taxonmica pero mencionaremos los ejemplos ms representativos por su
importancia en acuacultura de acuerdo con la clasificacin que se muestra en la Tabla 1,
seguida por Guillard, 1973, 1975; Hirata, 1974 y Watanabe et al., 1978.
Estas especies aportan un alto contenido nutricional para peces, crustceos y moluscos,
adems de ofrecer facilidades de manejo en sistemas de cultivo tanto en laboratorio
como en produccin a gran escala con fines comerciales.
1. CONSIDERACIONES GENERALES DE LOS CULTIVOS DE
MICROALGAS

Muchos factores contribuyen para el desarrollo ptimo de los cultivos de microalgas,

algunos de stos afectan las caractersticas del crecimiento.
Los recipientes de cultivo ms comnmente usados son de materiales no txicos como
las cajas de Petri, matraces Erlenmeyer, matraces Ferenback, carboys o garrafas, etc.,
adecuados para cultivos de laboratorio. Para cultivos a gran escala los recipientes de
plstico, madera y concreto son los ms recomendables, incluyendo los estanques
rsticos en reas rurales son los sistemas ms econmicos.
En cultivos masivos la aereacin es un factor muy importante para la homogenizacin
de los nutrientes y para evitar la sedimentacin de las microalgas. Las diatomeas suelen
acumularse en lugares donde el agua no se mezcla, sto tambin depende de la forma
del recipiente de cultivo que cuando no es adecuado retarda el crecimiento.
Otro factor importante es la penetracin de la luz en el cultivo; en los cultivos masivos
la profundidad es tan grande que la intensidad de la luz insidente no es suficiente para la
fotosntesis, hasta el fondo del tanque. En los cultivos masivos a la intemperie la
penetracin de la luz es ms efectiva, pero se debe reducir la intensidad de la luz fuerte,
cubriendo estos estanques con una malla. En cultivos a gran escala es recomendable la
inyeccin de CO 2 (0.5%) para contribuir al proceso fotosinttico.
Para muchas especies de Diatomeas la temperatura ptima oscila entre los 15 y 20C,
pocas especies de esta familia crecen a ms de 28C, las cloroficeas pueden soportar
altas temperaturas; un ejemplo es el cultivo masivo a la intemperie de Chlorella
saccharophila, cuyas temperaturas oscilan entre 12.5 30C (Hirata et al., 1974, 1975,
1977; Torrentera, 1983).
El crecimiento y la divisin celular son afectados por la intensidad de la luz y el
fotoperodo (horas de iluminacin y obscuridad) en relacin tambin a la temperatura,
por ejemplo en Diatomees a 20C y 1,000 lux se obtiene un crecimiento favorable.

TABLA 7. CARACTERISTICAS DE ALGUNAS DE LAS

ESPECIES DE ALGAS UNICELULARES
UTILIZADAS EN ACUACULTURA (COLL-MORALES
J., 1983)
GENERO

CICLO

TEMPERATURA DIAMETRO
OPTIMA
MEDIO

Phaeodactylum
(diatomea)

10 h

25C

10.4

Skeletonema
(diatomea)

13.1 h

18C

>20

Dunaliella
(cloroficea)

24 h

16C

17.8

Chlorella
(cloroficea)

7.7 h

25C

Tetraselmis

18 h

18C

18.4

(cloroficea)
Monochrysis
(crisoficea)

15.3 h

2025C

10

Isochrysis
(crisoficea)

30.2 h

20C

10.2

Estas especies se han utilizado en acuicultura marina dados su valor nutritivo y

digestibilidad, adems de su capacidad para crecer en cultivos masivos. La duracin del
ciclo celular como los requerimientos de temperatura son suceptibles de variacin
mediante seleccin de variedades.
TABLA 8. REQUERIMIENTOS PRINCIPALES DE LOS
CULTIVOS DE MICROALGAS
COMPUESTOS
REQUERIMIENTOS
VALORES
QUIMICOS
Fsicos
2,000
Luz
4,000 lux
Temperatura
15 22C
Salinidad

0.37
79

pH
Redox

g/100 ml

O, H
N

CO2 CO3
O2 H2 O
N2 NH4 + NO 3

PO4

g/100 ml

Nutritivos C

SO4
Na, K, Ca, Mg
Sales
Fe, Zn, Mn, B, Br, Si Sales
Cu, Co, Cl, I, Sr, Rb,
Sales
Al, et
B12 , tiamina,
Vitaminas
biotina
S

g/100 ml
g/100 ml
g/100 ml
g/100 ml
mg/100 ml
g/100 ml
g/100 ml

En esta tabla se exponen los requerimientos principales de los cultivos de microalgas y

sus valores aproximados. En cada caso habr que estudiar los reqerimientos
particulares de la especie y de la variedad que se vaya a cultivar en las condiciones
concretas de cultivo que se van a utilizar, por lo que estos datos son slo orientacin
(Kinne, 1979).
El fotoperodo es un factor que regula la divisin celular, en diatomeas la reproduccin
asexual (divisin) ocurre durante el perodo de luz y ste es acelerado bajo iluminacin
continua. En contraste las especies formadoras de auxosporas (sporas sexuales), dan
lugar a clulas del mismo tamao y sto ocurre en el perodo de obscuridad. Por lo
tanto, el perodo de iluminacin puede ajustarse de acuerdo a los objetivos del cultivo:
10

el fotoperodo continuo (horas de iluminacin prolongada) produce crecimientos

rpidos, un fotoperodo con horas de luz y obscuridad semejante al fotoperodo solar
mantiene un crecimiente normal y saludable.
En la Table 7 se muestran las caractersticas de algunas de las especies de microalgas
unicelulares utilizadas en acuacultura para la nutricin de moluscos y crustceos.
Adems del control de los parmetros antes mencionados es necesario considerar que
para el establecimiento de un sistema de produccin de alimento vivo es importante el
dominio de las tcnicas de aislamiento, purificacin y mantenimiento de cepas, as
como el conocimiento de la fisiologa, ciclo de vida, bioqumica, etc. de las especies
para determinar su factibilidad de cultivo y sobre todo su contenido nutricional para
poder llevarse a niveles masivos de produccin para fines acuaculturales. La Tabla 8
muestra algunos de los principales requerimientos de los cultivos de microalgas.
2. MEDIOS DE CULTIVO
Se han desarrollado diferentes medios para el cultivo de microalgas que van desde las
frmulas para enriquecer el agua de mar natural, hasta el uso de medios artificiales que
permitan resultados constantes en contraste con los resultados tan variables que brinda
el uso del agua de mar natural que entre otros factores depende del lugar donde se
colecta sta, y el tiempo de almacenamiento de la misma.
Los medios artificiales se usan principalmente para fines experimentales, ya que como
se ha mencionado, brinda resultados constantes, aunque existen algunas especies que no
crecen en medios artificiales por factores desconocidos que afectan su crecimiento, las
principales frmulas utilizadas van desde el agua de Miguel, que data de 1910,
desarrollada por Allen-Nelson; el medio de End-Schereiber de 1934, hasta frmulas
especficas para familias como la frmula del Laboratorio Haskins de Nueva York para
diatomeas, Provasoli et al., 1975; Matthiesen & Thorner, 1966; McIachlan, 1973;
Guillard F., 1973; Droop, 1975, 1979; Schoene, 1982, etc. Las principales
formulaciones de los medios de cultivo, tanto de mantenimiento de cepas como de
produccin masiva (minerales, enriquecidos y orgnicos), se describen desde la Tabla 9
hasta la Tabla 16.
El fitoplancton se desarrolla y multiplica en relacin de las condiciones fisicoqumicas
del medio. En trminos generales son los macronutrientes o factores limitantes del
crecimiento el carbono, Nitrgeno, Fsforo, Silicio, Magnesio, Potasio y Calcio, que se
requieren en cantidades relativamente grandes, mientras que los llamados
micronutrientes (Fierro, Manganeso, Cobre, Zinc, Sodio, Molibdeno, Cloro y Cobalto)
se necesitan en menores cantidades.
Existen otros medios que incluyen en su composicin sustancias orgnicas (vitaminas,
aminocidos) necesarios para aquellas especies de microalgas Auxtrofas, es decir que
no sintetizan por medio de la fotosntesis este tipo de compuestos y resultan factores
que pueden limitar su crecimiento; tal es el caso de Platimonas, Chrysophytas y algunas
Bacillariophyceas.

TABLA 9. MEDIO CHU 10 (MODIFICADO POR

11

GERLOFF)
(0. UMEBAYASHI, 1975)
(Recomendado para aislamiento de microalgas de hbitats
oligotrficos y eutrficos)
Ca(NO 3 )2
0.04%
K2 HPO 4

0.01%

Na2 CO 3
MgSO 4 .7H2 O

0.02%
0.025%

Na2 SiO 3

0.025%

Citrato de Fierro Amoniacal

0.005%
NOTA: Puede usarse para medio solidificado
Agar-Agar

1.0%

TABLA 10. MEDIO ENRIQUECIDO

MEDIO MIGUEL (ALLEN-NELSON, 1910)
Solucin KNO3
20. 2 g
A:
H2 O
100 ml
Solucin Na2 HPO 4 12H2 O
4g
B:
CaCl2 6H2 O
4g
HCl conc.
2 ml
FeCl3
2 ml
H2 O
80 ml
Agregar 2 ml de la Solucin A y 1 ml de la Solucin B a un
litro de agua de mar natural, y calentar a 70C por 20
minutos.
MEDIO ERD-SAHREIBER ENRIQUECIDO (FOYN,
1934a,b)
NaNO 3
10 mg
Na2 HPO 4 12H2 O
2 mg
Extracto de suelo
5 ml
Agua de mar
100 ml
MEDIO ERD-SCHREIBER
*Agua de mar
1 litro
Extracto de suelo
50 ml
NaNO 3
0.2 g
Na2 HPO 4 .12H2 O
0.03 g
* Se recomienda usar el agua filtrada y pasteurizada,y adicionar los
ingredientes.

TABLA 11. MEDIO DE YASHIMA (SISFFAA, 1964a)

(Para cultivo masivo de cloroficeas marinas)
Sulfato de Amonio (para la agricultura 21%)
100 g/t
12

Superfosfato de Calcio (para la agricultura

21%)
Urea (para la agricultura 21%)
Clewat 32

15 g/t
15 g/t
3050
g/t

Componentes de Clewat 32:

FeCl2 (como fuente de Fe)
0.385%
ZnCl2 (como fuente de Zn)
0.166%
MnCl2 (como fuente de Mn)
0.775%
CoCl2 (como fuente de Co)
0.017%
CuSO 4 (como fuente de Cu)
0.007%
(NH4 )6 Mo7 O24 (como fuente de Mo)
0.632%
H3 BO 3 (como fuente de B)
2.470%
EDTA
0.005%
MEDIO DE YASHIMA MODIFICADO (HIRATA, 1975)
Medio de Yashima (en la misma concentracin)
Peptona
50 g/t
Peptidasa
0.005%
Diaminasa
0.005%
(recomendado para cultivos axnicos)
TABLA 12. YANASE & IMAI (1968) PARA Monochrysis
lutheri, Platymonas sp.,
Nitzschia closterium, Chaetoceros calcitrans
NaCl

18 mg

Metal Mix*

600 mg

Fe (as Cl )

100 g

NaNO 3

500 mg

Tris

1g

MgSO 4 . 7H2 O

5g

Vit.B12

3g

Ca (as Cl-)

100 mg

Na2 SiO3

80 mg

K2 HPO 4

30 mg

Vitamin Mix

1 ml

H2 O

1l

KC

30 ml

* Mezcla de metales 100 ml, contanido: Na2 EDTA, 100 mg; Fe,
1 mg; Zn, 0.5 mg; Mn, 4 mg;Co, 0.01 mg; Cu, 0.004 mg; B, 20
mg.
Mezcla de vitaminas 50 ml, contenido: B12 , 10 g; biotina, 50
g; B1 , 5 mg
TABLA 13. MEDIO DE GUILLARD & RHYTER (PARSONS & STRICKLAND,
1961)
A. SOLUCIONES NUTRIENTES
1. Disolver 0.08 gr de clorhidrato de Cobalto CoCl2 .6H2 O y 0.8 gr de Sulfato de
Cobre CuSO 4 .5H2 O; en 100 ml de H2 O destilada.
13

2. Aadir 1 ml de solucin A.1. a aproximadamente 800 ml de H2 O destilada, que

previamente se le ha adicionado:
0.2 gr de Tricloruro Frrico FeCl3 .6H2 O
0.06 gr de Sulfato de Zinc ZnSo4 .7H2 O
0.12 gr de Sulfato de Manganeso
MnSO4 .H2 O
0.03 gr de Molibdato de Sodio
Na2 MoO4 .2H2 O
3. Aadir 1.2 gr de Etilenodiaminotetracetato Disdico (EDTA) diludo a cerca de
900 ml de H2 O destilada.
4. Ajustar el pH de la solucin con Hidrxido de Sodio IN-Na(OH), hasta 7.5.
5. Evitar la formacin de precipitado, el cual puede elevar la adicin de mucho
alcali.
6. Aadir 10 gr de Nitrato Potsico KNO 3 y 1.4 gr de Fosfato Dihidratado de
Potasio KH2 PO4 .
7. Diluir la solucin a 1 litro y en autoclave a menos de 15 libras de presin por 15
minutos.
8. Guardar la solucin en botellas de vidrio en la obscuridad.
B. SILICATO DE SODIO
1. Disolver 10.5 gr de Metasilicato Pentahidratado de Sodio Na2 SiO 3 .5H2 O 14 gr
de Na2 SiO 3 .9H2 O en 1 litro de agua destilada.
2. Esterilizar la solucin por filtracin a travs de un filtro de vidrio.
3. Guardarla en un envase de polipropileno esterilizado.
C. ACIDO HIDROCLORHIDRICO
1. Preparar una solucin 0.1N-HCL.
2. Determinar por titulacin la cantidad de esta solucin necesaria para neutralizar
10 ml de la solucin B.2-Si ml de 0.IN-HCL han sido utilizadas para
neutralizar 10 ml de solucin B.2, multiplicar por 100 y esta cantidad llevarla a
1 litro de H2 O destilada.
3. Esterilizar la solucin cida por filtracin a travs de un filtro de vidrio.
4. Guardarlo en una botella de polipropileno esterilizado.
D. SOLUCION DE VITAMINA
1. Disolver 10 mg de Tiamina hidroclrica y 10 mg de Biotina en 100 ml de H2 O
destilada.
2. Diluir 10 ml de solucin D.1 en 100 ml de H2 O destilada.
3. Esterilizar solucin D.2 pasndola a travs de un filtro de vidrio.
4. Guardarla en porciones de 10 ml en tubos estriles de tapa enroscada a menos de
20C.
TABLA 14. MEDIO DE GUILLAR F/2 (J. STEIN, 1979)

14

Nutrientes Mayores
NaNo3
7.5
NaH2 PO4 .H2 O 0.5
NH4 Cl
2.65

Solucin Primaria
% w/v
% w/v
% w/v
% w/v (calentar para
disolver)

Na2 SIO 3 .9N2O 3

Usar un mililitro de estas soluciones por litro de agua de mar, para preparar el medio
F/2. Sugerencia: Preparar el NaNO 3 junto con NaH2 PO . H2 O en 100 mililitros.
Metales Traza
CuSO 4 .5H2 O
ZnSO 4 .7H2 O
ZnCl2
CoCl2 .6H2 O
MnCl2 .4H2 O
Na2 MnO4 .2H2 O

Solucin Primaria
0.98 % w/v
2.2 % w/v
1.05 % w/v
1.0 % w/v
18 % w/v
0.63 % w/v

Es conveniente hacer las soluciones primarias en forma individual.

y con una concentracin menor de 10 6 ms concentrada que en el medio F/2.
Solucin Primaria de Metales Traza
A. Con Secuestrante Frrico (Cloruro Frrico):
Disolver 5 gr del Secuestrante Frrico en 900 ml de agua destilada y aadir 1 ml de cada
una de las soluciones primarias de metales traza preparados anteriormente; aforar a un
litro y asegurar que el pH quede cerca de 4.5. Use 1 ml de esta solucin por cada litro de
agua de mar para hacer el medio de cultivo. Agua de mar filtrada (5, 10, etc.) y de ser
posible irradiada con UV.
B. Con EDTA y Cloruro Frrico (FeCl.6H2 O)
Disuelva 3.15 g de FeCl.6H2 O 4.36 de EDTA (Na2 ) en 900 ml de agua destilada,
agregue 1 ml de cada una de las soluciones stock primarias de metales traza y afore a 1
litro, asegure un pH de 2.0.
Use 1 ml de esta solucin por litro de agua de mar para preparar el medio f/2.
Solucin Primaria de Vitaminas

Solucin Primaria de Biotina: Se prepara a partir de cristales de Bl, disolver 10

mg de biotina en 96 ml de agua destilada. Haga esta solucin ligeramente cida
para ser autoclavada y mantngase en un congelador.

15

Solucin de Bitamina B12 : A partir de Cyanocobalamina U.S. de 1000 mg/ ml

solucin inyectable. Tomar 1 ml y aforarlo en 100 ml de agua destilada. La
solucin se acidifica para ser autoclavada y se congela.

Solucin Primaria de Vitaminas

Tomar 1 m de la solucin primaria de Biotina y 0.1 ml de la solucin stock

primaria de B12 , aforar a 100 ml con agua destilada y aadir 20 mg de Tiamina
HCl.
Se pueden preparar ampolletas de 2, 5 10 ml y almacenarlas estriles
(acidificas) en el congelador.
Use ml de esta solucin por cada litro de agua de mar para preparar el medio
f/2.

Preparacin del Buffer Tris

Tome 50 g de Tris y disulvase en 200 ml de agua destilada y ajuste el pH a 7.2 en
HCL. Use de 1 a 5 ml por litro de medio antes de la autoclave, ajustando el pH a 7.4
(recomendado usar 1 ml por litro cuando el pH del medio es 7.98.2).
TABLA 15. MEDIO DE CULTIVO (AGUA DULCE)
(Guillard, In: Stein, 1979)
Guillard (comunicacin personal a J. Steinn, 1973. Handbook of phycological methods,
Culture Methods and Growth Measurements. Cambridge at the University Press: 448
pp.
a. Macronutrientes:
CaCl2 .2H2 O 36.76 g/l
MgSO 4 .7H2 O 36.97 g/l
NaHCO 3
12.60 g/l
K 2 HPO 4
8.71 g/l
NaNO 3
85.01 g/l
Na2 SiO 3 .9H2 O 28.42 g/l
De esta solucin rotulada como
a se obtiene 1 ml y se le
adiciona a 1 litro de agua
esterilizada.
b. Micronutrientes:
Na2 EDTA
FeCl3 .6H2 O
CuSO 4 .5H2 O
ZnSO 4 .7H2 O
CoCl2 .6H2 O
16

4.36 g/l
3.15 g/l
0.01 g/l
0.022 g/l
0.01 g/l

MnCl2 4H2 O
0.18 g/l
Na2 MoO4 .2H2 O
0.006 g/l
De esta solucin rotulada como
b, se obtiene 1 ml y se le
adiciona a 1 litro de agua
esterilizada.
c. Vitaminas:
0.1
mg/l
Biotin
0.5 g/l
Cyanocobalamina
0.5 g/l
De esta solucin rotulada como
c, se obtiene 1 ml y se le
adiciona a 1 litro de agua
esterilizada.
Thiamine. HCl

d. Tris:
Tris
50.g/200
(Hydroxymethyl)ml H2 O
Aminomethano
dest.
(Cuando el cultivo se encuentra
axnico el tris puede reemplazarse
por Glycylaglycine). De esta
solucin rotulada como d, obtener
2 ml y adicionar al litro de agua
esterilizada que se est preparando
el cultivo. Una vez preparado el
medio de cultivo, se debe hacer
ajuste de pH a 7.2 con HCl
cuidadsamente para no obtener el
pH cido.

TABLA 16. MEDIO MET 44 (SCHONE & SCHONE, 1982)

(Para microalgas marinas de la Familia Bacilarioficea)
NaNO 3
Na2 HPO 4 .12H2 O
Na2 SiO 3 .9H2 O
Na2 EDTA.2H2 O
FeSO 4 .7H2 O
MnCl2 .4H2 O
Vitamina B12
Biotina

3.4 mg
0.925 mg
10.14 mg
0.803 mg
60.0 g
14.4 g
0.5 g
0.5 g
17

Tiamina-HCl
0.5 g
Para enriquecer un litro de agua de mar
NOTA: La solucin stock de Fierro y Silicato debe de acidificarse un poco con una gota
de Acido Sulfrico concentrado, y la solucin de EDTA debe acidificarse con Acido
Clorhdrico.
El EDTA puede ser adicionado antes que el Fierro.
Para la produccin de microalgas a nivel comercial se usa el agua de mar enriquecida
con fertilizantes agrcolas (Urea, Fosfato triple, Nitrato de Amonio, etc.) (Chu, 1942, y
Tamiya, 1957; SISFFAA, 1964a) y tradicionalmente la fertilizacin de estanques con
abonos orgnicos, en cultivos de especies herbvoras como las carpas.
3. TECNICAS DE AISLAMIENTO Y PURIFICACION
Muchos mtodos se han desarrollado para obtener cultivos monoespecficos (de una
sola especie) y axnicos (libres de contaminantes). A continuacin se brinda una breve
descripcin de algunos de los principales mtodos que se utilizan para aislar y purificar
microalgas (O. Umebayashi, 1975) (Fig. 1).
1) Aislamiento

Pipeteo capilar: Se utiliza para separar microalgas mayores de 10, mediante

una pipeta construda con un tubo capilar, a travs del microscopio ptico se
pesca las clulas y se separan en pequeas gotas de nutrientes colocados
alrededor de una Caja de Petri o en portaobjetos escabados.
Rayado de Placas de Agar: Se transfieren pequeas gotas de plancton con una
asa de siembra, extendiendo por estras (rompiendo un poco el agar). Este agar
se prepara con una solucin nutritiva para microalgas y con una relacin de 1
1.5% w/v de agar disuelto en el medio nutritivo, se incuba la placa bajo
iluminacin a 1820. De este primer crecimiento se transfiere a tubos con agar
inclinado sembrando por estras o bien, se transfiere a medios lquidos en
subcultivos sucesivos para su purificacin, de tal manera que en cada dilucin se
reduzca el nmero de organismos en una gota, es recomendable combinar la
tcnica de diluciones con la de transferencia en placa de agar o tubo inclinado
para obtenr cultivos clonales (de una sola colonia o clula) y poder establecer el
cultivo monoespecfico. Despus de 10 das, pequeas colonias aparecen sobre
la superficie del agar, que se pueden transferir mediante el Mtodo de Hocking o
de la micropipeta a medios lquidos.

2) Purificacin
Como ya se mencion al describir las tnicas de aislamiento, estas mismas nos permiten
purificar el ultivo a travs de las resiembras clonales sucesivas, pero adems es
recomendable entre otros mtodos el uso de antibiticos para eliminar otros
microorganismos, generalmente de tipo bacteriano que estn contaminando el cultivo de
microalgas de nuestro inters. En el inciso 5 de este mismo captulo correspondiente a
Mtodos de Esterilizacin se amplian las alternativas.
3) Control Bacteriolgico
18

Para determinar el desarrollo bacteriolgico realizamos lo siguiente:

1. Preparacin del Medio de Zobell:
Trypticase
Extracto de levadura
Fosfato Frrico
Agar
Agua envejecida (3 meses)
pH = 7.0 7.2

Fig. 1a) Mtodo de filtracin a travs

de una columna empacada con
algodn.

1.0 gr
1.0 gr
5 mg
15.0 gr
1 litro

Fig. 1b) Aislamiento y purificacin de

microalgas por el mtodo de diluciones
sucesivas y subcultivos repetidos.

Fig. 1c) Mtodo de aislamiento y

Fig. 1d) Aislamiento mediante micropipeta y el
purificacin de microalgas en placa de
uso de microscopio.
agar.
Una vez preparado colocar en Cajas de Petri, una capa no muy gruesa. Someter a
esterilizacin a 15 lbrs. de presin y 125C. Con una asa de Platino picar el agar con la
muestra que se desea analizar y colocar a la luz y observando si hay crecimiento
bacteriano.
2. Si el cultivo presentara bacterias es aconsejable someter a la accin combinada de
diferentes tipos de penicilina, por ejemplo:
19

Penicilina sdica
Estreptomicina
Agua destilada

400 mg
200 mg
10 c.c.

Filtrar en equipo estril, adicionar volmenes de 3.0, 2.0, 1.0, 0.5 y 0.25 que dan
concentraciones de:
Ejemplo:
TUBO

ml

3.0

2.0

1.0

0.5

0.25

Penicilina ug/ml

12.000 8.000 4.000 2.000 500

Estreptomicina ug/ml

8.000

4.000 2.000 1.000 250

4. DETERMINACION DE LA DENSIDAD DE POBLACION DE LAS

MICROALGAS
Cuando el plancton es utilizado para alimentar larvas u organismos filtroalimentadores
como los moluscos, el suministro constante y la concentracin de estos alimentos son
factores que determinan la supervivencia y desarrollo de los organismos en cultivo. A
continuacin se hace una descripcin breve de los mtodos que se utilizan para
determinar el nmero de clulas presentes en una muestra de plancton.
1) Hematocitmetro o Cmara de Neubaver (Fig. 2)
Mediante una pipeta Pasteur se toma una muestra de plancton y se desliza en la cmara
que previamente tiene adherido el cubreobjetos, se deja pasar 5~10 minutos para que la
muestra se estabilice; se procede a contar mediante un contador de mano, en algunos
casos es necesario diluir la muestra cuando la densidad es alta y tambin fijada cuando
el plancton es mvil, siguiendo los siguientes pasos:
1. Se toma un milmetro de la muestra.
2. Se aade un mililitro de agua de mar filtrada ya preparada con formaldehido
todo al 4%.
3. Se deja reposar por tres minutos.
4. La muestra se homogeniza con una Pipeta Pasteur.
5. Se cuentan las clulas de cada una de las cmaras.
Una vez que se tiene el promedio de clulas de las cmaras, el clculo total de clulas
por mililitro se lleva a cabo de la siguiente manera:

20

Fig. 2a) Conteo celular en homatocmetro.

Fig. 2b) Cuadrantes de la cmara de conteo.

a. Primero calcule el factor de dilucin

21

m = Muestra problema (ml)

f = Agua de mar con formaldehido
b. Se requiere tambin la profundidad del hematocmetro, la cual est incluida en el
mismo en la parte inferior derecha.
P.H. = Profundidad del Hematocmetro
c. Todo el clculo se multiplica por 1,000 para convertir a mililitros.
d. Se requiere el nmero promedio de clulas de la muestra problema.
N.P. = Nmero promedio de clulas por ml
Con todos los incisos anteriores se realiza el clculo de nmero de clulas de la
muestra problema por ml y la frmula queda as:
No. de Clulas = (F.D.) (P.H.) (1,000) (N.P.)
2) Densidad Optica
Mediante un espectrofotmetro se determina la concentracin celular de la muestra por
densidad ptica (calibrando con anterioridad el aparato, siguiendo las instrucciones del
manual correspondiente), se determina la transmitancia (Nm), que se extrapola con la
recta patrn antes determinada que corresponda a la especie problema (se construye
graficando transmitancia vs. num. de clulas/ml). As en la interseccin de la recta
conociendo la concentracin (Nm) se puede calcular la cantidad de microalgas de la
muestra problema. Por otro lado, conociendo la ecuacin de la recta de cada grfica,
segn la especie, se determina directamente la concentracin de clulas de la muestra
sustituyendo el valor d la transmitancia en esta ecuacin.
3) Volumen Celular
Por centrifugacin, se obtiene un paquete o pastilla celular que desechando el
sobrenadante, puede ser pesado y determinado en unidades de peso W/v, la cantidad de
clulas o biomasa de la muestra problema en peso hmedo o peso seco.
4) Composicin Qumica
En algunos estudios se puede determinar la concentracin de clorofila A,B y otros
pigmentos presentes en la muestra. Debe considerarse que la composicin qumica del
fitoplancton vara de acuerdo al tipo de cultivo usado, medio nutritivo y otros factores
por lo que es necesario realizar el estudio de la composicin qumica (anlisis proximal)
de la especie de estudio en relacin al tipo de cultivo desarrollado.
5. METODOS DE ESTERILIZACION

22

Existen diferentes mtodos para lograr las mejores condiciones de desarrollo de las
microalgas, libres de microorganismos contaminantes, tanto del aire como del agua. A
continuacin se describen brevemente los mtodos ms comnes de esterilizacin que
varan en los resultados de eficiencia, costos y tiempo invertido.
1) Esterilizacin Qumica
Uno de los mtodos ms comnes dentro de este tipo de esterilizacin, es el uso del
Hipoclorito de Sodio (Cloro comercial), resulta ser de bajo costo y brinda buenos
resultados para desinfectar recipientes de cultivo, material de cristalera y adems
podemos esterilizar el agua de mar con la que preparamos el medio de cultivo,
utilizando 50 mg de Tiosulfato de Sodio por cada 1 ml de Hipoclorito de Sodio usado;
es decir, se utiliza 416 ml de Cloro comercial (6%) y se afora sta a 1,000 ml (mantenga
esta solucin en la oscuridad); de esta solucin agregue 0.25 ml por litro de agua, deje
reposar por 12 h y aada 0.1 ml de una solucin de Tiosulfato (sta se prepara con 248.1
gr de Tiosulfato, Na2 S2 O3 .5H2 O aforado a 1,000 ml), y posteriormente introduzca
aereacin al recipiente de cultivo (carboy o garrafon) y djelo as por una hora. Una vez
esterilizado de esta manera, agregue los nutrientes y vitaminas previamente
esterilizados.
Esterilizacin con Formol
Se recomienda su uso en los casos en que exista una contaminacin en las instalaciones
o laboratorio por hongos y otros microorganismos. Se utiliza una concentracin de 0.1%
al 10% (no se utilice para material de cristalera o recipiente de cultivo).
Solucin de Alcohol Etlico al 70%
Se recomienda para material de cristal (pipeta, cajas de Petri, tubos de ensayo, etc.). Se
pueden utilizar otro tipo de alcoholes (Isopropanol, o Propanol e incluso el Fenol, pero
ste ltimo es muy txico).
2) Esterilizacin Fsica
Esterilizacin por Calor Hmedo
Utilizando difusores de vapor a una temperatura de 100~110C, se recomienda para
estanques y tuberas de agua y de aire, destruye microorganismos vivos e incluso
destruye esporas. Se recomienda utilizarlo por tres das consecutivos. Este mtodo
recibe el nombre de Tindarizacin.
Autoclave
Se recomienda para la esterilizacin de medios de cultivo, vitaminas, material de cristal.
Tiene la desventaja del tiempo que se invierte y el volumen que se puede esterilizar.
Filtracin
Se utiliza para separar partculas orgnicas o microorganismos en los medios de cultivo
o instalaciones del sistema de aereacin. Existen diferentes tipos de los que podemos
23

mencionar: filtros milipore (membranas, vidrio, celulosa, etc), filtros de fibra (algodn,
vidrio, materiales sintticos), filtros de tierra de diatomeas, geles de acrilamida (esferas
de diferentes tamaos en micras), empaques de algodn y carbn activado, y finalmente
existen unidades comerciales de esterilizacin con cartuchos sintticos (0.45, 3, 5,
20) etc.
Esterilizacin por U.V.
Los efectos de la irradiacin ultravioleta son bacteriostticos y fungiostticos en
logitudes de onda menores de 500 NM (Jerlov, 1970). Se recomienda para estos fines
las longitudes de onda de 240 a 280 NM las mximas eficiencias se obtienen cerca de
los 254 NM (Kinne, 1976). Los rayos ultravioleta desinfectan el agua. El dato ms
importante y preciso sobre un tratamiento con rayos U.V. es la dosis de U.V.
(normalmente expresada en W seg/cm2 ) requerida para matar a un determinado
porcentaje de la poblacin de organismos contaminantes. Un antecedente importante
son las experiencias reportadas sobre la utilizacin de unidades de U.V. para desinfectar
criaderos de peces y ostiones, cultivos de microalgas, agua de mar almecenada (Fig. 3 y
Tabla 4) (Kinne, 1976; Wheaton, 1977; Aguirre, 1981; Torrentera & Franco, 1988).
3) Criterios de Eficiencia para la Seleccin y Utilizacin de los Mtodos de
Esterilizacin Mencionados
a. Mtodo Indirecto: Se analiza el estado de salud y las tasas de supervvencia de
los organismos en cultivo.
b. Mtodo Directo: Se calcula el porcentaje de reduccin de microorganismos,
analizando el nmero de stos presentes en muestras no tratadas y el nmero de
los mismos presentes en muestras obtenidas despus de la aplicacin del
tratamiento de esterilizacin seleccionado. Esto se puede determinar mediante
anlisis bacteriolgicos (mtodo standard en placa de agar); cuantificando el
nmero de colonias presentes en la caja despus de haber inoculado 1 ml de cada
muestra por un perodo de revisin de 24 h, 48 h, 96 h. Para muestras de agua
marina se recomienda el Medio de Zobell que selecciona el crecimiento de
bacterias marinas; para Coliformes totales se recomienda el Medio McConkey,
entre otros. En las Figs. 3 y 4 se muestran resultados de diferentes mtodos de
esterilizacin.
6. EQUIPO E INSTALACIONES
a. Sala o Laboratorio de Cultivo: Se recomienda para fines de mantenimiento de
cepas, transferencias sucesivas de cultivos, crecimiento de cultivos en pequeos
y medianos volmenes. Generalmente para fines de investigacin las siguientes
caractersticas:
Laboratorio con temperatura controlada 1820C.
Paredes y pisos de azulejo en color blanco.
Instalaciones para el cepario y cultivo intermedios con lmparas de luz
blanca fra fluorescente (20W37W).
Instalaciones tipo invernadero (ventanas de cristal o plstico con
temperatura controlada).
b. Cuarto de Siembra: Puede instalarse dentro del mismo laboratorio una cabina
con campana de flujo laminar o bien una simple mesa de laboratorio con
24

instalacin de gas para dos mecheros para la inoculacin en condiciones

acpticas.
c. Sala de Produccin: Para volmenes de 200 l o ms, se requieren recipientes de
materiales plsticos no txicos y de preferencia transparentes para el desarrollo a
nivel masivo de las diferentes especies del plancton. En este tipo de instalacin
es recomendable el uso de la luz solar, pues el uso de la luz artificial es de muy
alto costo y se require adems, de equipo para mantener la temperatura a 18
20C. En zonas de clima templado para cultivos masivos se pueden desarrollar
stos a la intemperie, cubriendo los recipientes en caso de lluvia. En la Figura 5
se muestra un ejemplo de instalaciones para cultivo masivo, utilizando la luz
solar.

FIGURA 3a Promedlo de las Bocterlas viables formadoras de Colonla (C.F.U.) por

mllmetro despues de diversos tratamientos. (Barroso, 1987).
<

25

FIGURA. 3b Rorcontajes do Reduccin (C.F.U.) obtenldos con dlversos tratamlentos.

(Barroso, 1987)./p>
TABLA 17. RESULTADOS REPORTADOS SOBRE EL USO DE
ESTERILIZACION U.V. EN ACUACULTURA
(TORRENTERA & FRANCO, 1988)
% DE
TIPO DE
OBJETO DE
AUTOR FLW DENSIDA
REDUOCIO CONTAMINANT INVESTIGACIO
(AO)
O
D DE U.V.
N
E
N
Okinami et
Tratamiento de
?
90 W/cm2 90
Bacterias
al., 1952
agua de mar.
Shelton and
Cultivos de
?
?
ptimos
Bacterias
Green, 1954
almejas.
Kowobata y
Tramiento de
?
90 W/cm2 90
Bacterias
Harada, 1958
agua de mar.
Cultivos de
150
960
Kelly, 1961
99.96
Bacterias
Crasostrea
1t/min W/cm2
Viroinica.
32
Sistemas de
Wood, 1961
?
100.00
Bacterias
1t/min
cultivo cerrado.
26

Herald, et al.,
1962
Burrows y
Combs, 1968
Eagleton y
Herald, 1968
Lasker y
Vlymen,
1969
The Fishery
Oceanograph
y Center al
La Jolla,
(USA)
Sanders y
Fryer, 1972
Murchelano,
1975
Kimura, et
al., 1976
Bullock y
Stuckey,
1977
Bonnefoy, et
al., 1978

32
1t/min

100.00

Bacterias

significativa

Bacterias

ptimos

Bacterias

1000
1t/min
?

?
significativa
215,500
90 %
W/seg/cm2

3
?
ptimos
1t/min
8.5
22,100 W
99.0
1t/min seg/cm2

20,000 W 50.0
seg/cm2

3.751 60.95 W
99.63
1t/min seg/cm2

Cultivo de peces.

10,000 W 90 %
seg/cm2

Agratzek, et
?
al., 1983

91,900 W
seg/cm2

Cultivo bivalvos.

Poblacin
microbiana
mezclada.

Tratamiento de
aguas negras.

Bacterias

Sako, et al.,
1985
Sako, et al..,
1985
Sako, et al..,
1985
Torrentera y

161,600
99.9
W seg/cm2
32,300 W
?
seg/cm2
19,400 W
100
seg/cm2
140,059 100 %

Virus

Bacterias
Hongos
Virus
Bacterias
Bacterias
27

Cultivo de C.
Crasostrea gigas.
Tratamiento de
agua de mar.

Bacterias

Bacterias

Maisse, et al., ?
1981

31
l/min
15
l/min
25
l/min
3.75

Bacterias

Bacterias

Brown y
32
30,000 W
significativo
Russo, 1979 1t/min seg/cm2
Aguirre,
1981

Bacterias

Esterilizacin de
agua de mar.

Bacterias

2
13,100 W
99.99
1t/min seg/cm2

Sistemas de
cultivo cerrado.
Cultivo de
Salmn.
Desinfeccin de
acuarios marinos.

Cultivos de
Crasostrea
virginica.
Esterilizacin de
medios de
cultivos continuos
de microalgas.
Sistema de
recirculacin para
peces.
Sistema de
recirculacin para
peces.
Tratamiento de
aguas negras.
Cultivo de peces
marinos.
Cultivo de peces
marinos.
Tratamiento de

Franco, 1988 l/min

W seg/cm2

agua de mar
almacenada.

7. TIPOS DE CULTIVO
1. Cultivo Esttico
Desarrollo del cultivo hasta fase de crecimiento exponencial y la utilizacin del
volumen total del mismo. Generalmente el uso de estos cultivos es para fines de
bioensayo o bien para transferencia a volmenes mayores (ver la Figura 6, que
ilustra la secuencia del cultivo).
2. Cultivo Continuo
De acuerdo a Kubitschek (1970), un cultivo continuo es un sistema de flujo en el
cual las clulas individuales estn suspendidas en un volumen constante en un
estado de equilibrio dinmico, establecido por una remocin de cultivo y adicin
de medio nutritivo por unidad de tiempo con tendencia al infinito. Se habla de
una diferencia entre un cultivo semicontinuo y un cultivo continuo. Al parecer
sto es incorrecto, ya que la diferencia estriba en el nmero de perodos de
remocin del cultivo y adicin del medio nutritivo y en los sistemas continuos
este perodo de remocin y adicin es generalmente automtico en aparatos
llamados turbidostatos y Quimiostatos.
Cuando se requiere de grandes cantidades de clulas a intervalos frecuentes para
alimentar especies en cultivo (peces, crustceos, moluscos), los cultivos
semicontinuos o continuos proveen un gran nmero con mayor consistencia en
forma uniforme y constante. En estos cultivos es importante determinar la
concentracin ptima de los nutrientes por unidad de tiempo en relacin a la tasa
de dilucin o cosecha del cultivo. Cuando se establece el estadio de equilibrio
del sistema, la produccin es mxima. En las Figuras 7 y 8 se muestran dos
ejemplos de cultivo semicontinuo.
3. Cultivo Masivo
Se considera cultivo masivo a aquellos que se utilizan como alimento vivo de
peces crustceos y moluscos y cuya produccin es a gran escala en tanques u
otros recipientes de volumen no controlado.
Existen muchas alternativas para la produccin de microalgas en cultivo masivo,
desde la utilizacin de tanques de plstico, madera, concreto hasta los estanques
rsticos, as como la utilizacin de fertilizantes minerales de tipo agrcola hasta
una gran variedad de escretas de ganado como fuentes de nutrientes.
En relacin a la utilizacin de luz artificial o natural, sta depender del tipo de
infraestructura con que se cuente.
El control de la temperatura ser necesario en relacin del tipo de microalga en
cultivo y de la regin climtica en donde se establezca el mismo. En la Tabla 17
se muestran algunas alternativas de produccin en cultivo masivo de microalgas.
28

Fig. 4a) Esquema del ivnernadero de Wachapreague (USA). Cultivo masivo con
temperatura controlada en invernadero con ventilador.

Fig. 4b) Cultivo masivo a la intemperie de algas unicelulares en tanques de fibra de

vidrio (la temperatura es controlada por enfriadores sumergibles. La Joya, San Diego,
U.S.A).
29

Stock primario
Obtenido de
laboratorio
(Cepario)
Inoculacin
ascptica de
plancton on agua
esterilizada filtrada
y enriquecida. El
plancton
permanece en
contendores de
stock. Crecimiento
de 4 das sin aire.

(Agitar los
recipientes 2
3 veces al
da)

Contenedor
Cultivo
intermedio
Garrafn de
20 its.

Inoculacin
ascptica de un
stock de cultivo de
agua marina
esterilizada en
outoclave, filtrada
y enriquecida.
Crecimiento de 4
das. Flujo bajo de
aire.

Contenedor
de 200 its.
Inoculacin del
garrafn de cultivo
en agua marina
filtrada,
enriquecida e
irradiada.
Crecimiento de 2
das. Flujo bajo de
aire.

Cosecha o
transferencia

30

Fig. 5) Secuencia de cultivo en sistema esttico. Cuando se ha alcanzado una densidad

ptima de clulas, se utiliza todo el cultivo como inculo de la siguiente fase.

Fig. 6) Cultivo semicontinuo (R. Ukeles, en Stein, 1979). Esquematizacin diagramtica

de un cultivo semicontinuo (1), cilindro de CO 2 , (2) botella colectora de cultivo, (3)
cmara de llenado ascptico, (4) flujmetro de gas, (5) filtro de aire, (6) regulador de
presin, (7) compresor de aire, (8) salida de gas, (9) campana de llenado ascptico sobre
el inoculador, (10) sifn de cosecha, (11) vlvula de aguja para regular la presin del
gas, (12) entrada de gas con filtros de algodn y difusores de aire, (13) regulador de
voltaje, (14) unidad de crecimiento, (15) matraz Fernbach con inculo.

31

FIG. 7) Cultivo semicontinuo (Cceres, 1979; Aguirre, 1981). Sistama de cultivo

semicontinuo de Tetraselmis suecica usando medio de cultivo esterilizado con
autoclave. A) Reserva de medio de cultivo (20 1); B) Sifn para el medio de cultivo; C)
Escape de aire; D) Recipiente de cultivo (bolsa de plstico); E) Dosificador de aire; F)
Filtro de aire; G) Sifn de cosecha; H) Recipiente de cosecha.
8. MODELOS DE PRODUCCION
Alrededor de 1960 se inici la modelacin de los cultivos continuos con bacterias
(Fencl, 1966), basados en la teora bsica desarrollada por Monod (1950). En relacin a
estas teoras matemticas se han desarrollado numerosos trabajos con microalgas bajo el
sistema de cultivo continuo, con diferentes fines de estudios: bioqumicos, fisiolgicos,
nutricionales, etc., como es el explorar los mecanismos de limitacin de nutrientes
(Droop, 1966; Caperon, 1968).
Ahora se llevan a cabo numerosos trabajos con microalgas en sistemas de cultivo
continuo con el objeto de determinar la mayor produccin posible (Droop, 1975;
Ukeles, 1973; Canzonier & Brunetti, 1975; Cceres, 1979; Aguirre, 1981; Pares &
Leyva, 1982; Torrentera, 1983). Estos trabajos tambin han contribuido en la
implementacin de sistemas de cultivo, algunos muy complejos usados para estudiar la
32

fisiologa y bioqumica de las microalgas en condiciones axnicas, otros menos

sofisticados para producir las microalgas y as utilizarlas como alimento de
invertebrados marinos y larvas de peces.
Algunos de estos modelos se construyen con los datos de densidad (No. de cl/ml) u
otros tipos de medicin, como la densidad ptica (Nm), en relacin a las tasas de
dilucin (volumen/da). En el caso del Modelo de Monod (1950), la relacin entre la
densidad y la dilucin describe una curva exponencial negativa, mientras que el Modelo
de Droop (1966) asume esta relacin como lineal. En ambos casos la produccin se
describe como una parbola simtrica (Droop, 1966) o asimtrica (Monod, 1950). En
las Figuras 9, 10 y ll se muestran tres ejemplos de modelos de produccin de tipo
parablico en donde el punto de inflexin de la curva describe la produccin mxima
sostenible en la tasa de dilucin ptima para tres diferentes especies de microalgas en
sistemas de cultivo semicontinuo.
TABLA 18. ALTERNATIVAS DE PRODUCCION A GRAN ESCALA DE
MICROALGAS PARA ALIMENTACION EN ACUICULTURA
ALTERNATIVAS
VENTAJAS
INCONVENIENTES
(granjas que las utilizan)
Produccin controlada en
Control de las especies de
10
escala pequea (Conwy) 10 algas A pequea escala no es Luz artificial
clulas*/da
caro
Produccin controlada en
Control de las especies de
Luz artificial
escala media (Horn-Point &
algas
Generalmente caro
Ribadeo) 101112 clulas/da
Produccin controlada y
Control de las especies de
masiva (Lewes) en
algas Aprovechamiento de la Generalmente caro
invernadero 1013 clulas/da luz solar
Generalmente barato, poca
Florecimiento natural en
mano de obra, produccin
invernadero (Wachapreague)
Control limitado
masiva, aprovechamiento de la
1013 clulas/da
luz solar
Generalmente barato,
Florecimiento natural en
aprovechamiento de
Control limitado sobre
piscina con aguas de desecho
nutrientes,
aprovechamiento
las especies de algas
(Woods Hole) 1014 clulas/da
de la luz solar
Conwy (Inglaterra): 5106 Ostrea de 0.3 cm/ao
Wachapreague (Virginia, USA): 200106 almejas de 0.5 cm/ao
Ribadeo (Lugo, Espaa): 3106 Ostrea de 1 cm/ao
Horn-Point (Maryland, USA): 15106 Crassostrea de 1 cm/ao
Lewes (Delaware USA): 5103 Crassostrea de 6 cm/ao
Woods-Hole (Massachusetts, USA): 2103 Crassostrea de 6 cm/ao
* Clulas (Tetraselmis equivalentes)

33

FIG. 8a) Relacin entre la densidad y la dilucin para un cultivo semicontinuo de

Tetraselmis suecica, donde se muestran las medias de los valores obtenidos con los
lmites de confianza al 95% de una distribucin normal. La relacin se obtiene de
acuerdo al Modelo de Monod (1950). Aguirre, 1981.

34

FIG. 8b) Relacin entre la produccin y la dilucin en el cultivo semicontinuo de

Tetraselmis suecica. La dilucin ptima se encuentra en el punto de inflexin de la
curva.

35

FIG. 9a) Relacin entre la densidad y la dilucin para un cultivo semicontinuo de

Isochrysis galbana, donde se muestran las medias de los valores obtenidos con los
lmites de confianza al 95% de una distribucin normal. La relacin se obtiene de
acuerdo al Modelo de Monod (1950) (Pares & Leyva, 1987).

FIG. 9b) Relacin entre la produccin y la dilucin en el cultivo semicontinuo de

Isochrysis galbena. La dilucin ptima se encuentra en el punto de inflexin de la curva
(Pares & Leyva, 1982).

36

FIG. 10a) Modelo de Droop (1966) que asume la distribucin de los datos en forma
lineal de la densidad (X) de Chlorella saccharophila en funcin de la tasa de dilucin
(D) (Torrentera, 1983).

FIG. 10b) Modelo de produccin de Droop, para Chlorella saccharophila basado en los
datos de la regresin lineal (Torrentera, 1983).
37

II. CULTIVO DE ROTIFFROS

En el phylum rotfera se encuentran especies muy importantes objeto de estudio de
Zologos y Eclogos, pues son organismos muy activos considerados depredadores en
el mundo del plancton pues consumen altas concentraciones de microorganismos, tienen
una alta tasa de reproduccin y su afloramiento abate rpidamente la concentracin de
oxgeno en el medio. Es por ello que su localizacin en los ambientes acuticos
permiten indicar la presencia de materia orgnica (medios eutrficos) por lo que
revisten gran inters en estudios de Ecologa y contaminacin.
En la dcada de los 60's empezaron a considerarse seriamente como una alternativa de
alimentacin en Acuacultura por sus caractersticas de desarrollo, facilidad de cultivo y
aporte nutricional.
Una de las especies seleccionadas para su uso en Acuaultura es Brachionus plicatilis
del que presentamos sus alternativas de produccin en cultivo en los siguientes incisos.
1. CONSIDERACIONES CENERALES SOBRE LOS CULTIVOS DE ROTTFEROS
Brachionus plicatlis es miembro de la Familia Brachionidae. El ciclo de vida de este
organismo involucra una alternancia en la reproduccin sexual y asexual; la taxonoma
de este organismo es descrita por Ruttner & Kolisko (1974). Este organismo ha sido
tema de polmica sobre su sistemtica, ya que los datos aportados en cuanto a talla y
forma concluyen que esta especie en relacin al hbitat es variable, ya que soporta
amplios rangos paramtricos y est ampliamente distribuida, y esta distribucin se debe
a la alta longevidad y resistencia de huevos latentes. Los rangos de salinidad que
soporta van desde 1 a 97 ppm (Ruthner & Kolisko, 1974) con el lmite extremo de 200
ppm. Este mismo autor concluye que el agua de mar es el medio ptimo de este
organismo. Es tambin importante mencionar que en dilucin rpida del agua de mar se
obtiene un incremento en el nmero de hembras y produccin de huevos. El nmero de
huevos producidos por hembra, es un indicador de las condiciones ptimas del medio.
Su amplia distribucin indica que es una especie Euriterma (5~20C). La Figura 12
describe la anatoma de B. plicatilis (R. Huches, en: B. Pejler et al., 1983).
B. plicatilis es una especie que no selecciona su alimento (polfago), es un filtroalimentador, se puede alimentar de microalgas: Cianoficeas, Chloroficeas, Pheoficeas,
etc., bacterias y levaduras (Hirayama, 1973 y otros). Pejler (1983) seala que no se
inlcuye en su dieta las Familias Cryptomonas y Chrysophytas. Otros trabajos
demuestran que slo pueden ingerir partculas de 1215 en tamao (Hirayama, 1978).
Existen diferentes trabajos que reportan tasas de ingestin de: 0.14 1/min de
Chlamidomonas, 0.034 1/min de Olisthodiscus, 0.1 1/min de Chlorella, 0.025 1/min de
Dunaliella (Hirayama et al., 1972, y otros.
2. CULTIVO MASIVO Y CALIDAD NUTRICIONAL
La produccin masiva del rotfero Brachionus plicatilis se inici en Japn alrededor de
los aos 60's. Estos se cultivaron inicialmente transfirindolos de un estanque a otro de
Chlorella con una densidad de 10 a 20 106 c/ml (SISFFA, 1964a, b). Por lo imprctico
de la tcnica se iniciaron una serie de investigaciones tratando de encontrar el mtodo
38

adecuado para la produccin continua de rotferos, sin depender de los cultivos masivos
de Chlorella y otras microalgas; una de stas propuso el uso de la levadura de pan
(Saccharomyces cerevisiae) como alimento (Hirata & Mori, 1963). Se pens que sta
resolvera la produccin de rotferos, pues esta tcnica permite obtener densidades muy
altas de ms de 100 rotferos/ml, despus de la publicacin de estos resultados, otros
investigadores se interesaron en estudiar la composicin qumica de los rotferos
alimentados con diferentes microalgas y levaduras (Fukusho et al., 1976; Hirata et al.,
1980; Imada, 1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al., 1980).

FIG. 11) Anatoma de Brachionus plicatilis (Rotfera) en: B. Pejler et al., 1983).
En la Figura 13 se muestran los resultados obtenidos por Hirata et al., en relacin a la
utilizacin de: a) Chlorella, b) Levadura y c) Levadura/Chlorella. Como se puede
observar los resultados obtenidos con las dietas a y c, son densidades altas hasta de 100
R/ml. Por otro lado, se realizaron investigaciones en cuanto al aporte nutricional de los
rotferos para el cultivo de larvas de peces y se observ que en las larvas de peces
alimentados con rotferos producidos a partir de ladieta de levadura o la mezcla 95%
levadura y 5% Chlorella ocurran altas mortalidades. Se identific la causa como un
desvalance nutricional en cuanto a los cidos grasos esenciales (Fukusho et al., 1976;
Kitajima et al., 1980ab; Watanabe, 1978). Otras investigaciones aportaron la utilizacin
de una levadura mejorada con cidos grasos del tipo W 3 altamente insaturados, la cual
recibe el nombre de Levadura Omega (Imada, 1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al.,

39

1980a,b, etc.). En la Tabla 18 se muestra la composicin de aminocidos en B. plicatilis

con diferentes dietas.
Los estudios comparativos de la concentracin de cidos grasos W 3 que Chlorella
(especies marinas) posee, es de 29%, la levadura de pan 1.3% y la Levadura Omega
34.7%. Esta ltima se produce comercialmente en Japn (Kitajima, 1980). Otros
trabajos ms prcticos y baratos aportaron datos en relacin a la determinacin del
contenido nutricional de diferentes especies del zooplancton: Acartia clausi, Tigriopus
japonicus, Artemia sp y Moina sp. Se encontr que la abundancia y calidad de estas
especies de zooplancton dependen de su nutricin, y que la eleccin de una especie de
microalgas, levadura u otro microroganismo para alimentar a stos depende de la
composicin qumica, temperatura, fotoperodo y tipo de cultivo al que est sometida
esta especie de microorganismo. Por ejemplo, las especies de zooplancton alimentados
con Chlorella obtienen un enriquecimiento en cidos grasos de un 12.7 a un 18.8%
(Imada et al., 1979; Imada, 1980; Watanabe, 1978b, 1980).
Para fines prcticos, la produccin masiva de microalgas y la utilizacin de levadura de
pan aportan buenos resultados en la produccin masiva de larvas de peces y otros
invertebrados, tomando en cuenta que esta utilizacin permita un enriquecimiento de los
cultivos de zooplancton llamado tratamiento verde, (6 a 12 h en un cultivo de
microalgas) despus de haber obtenido una alta densidad con levadura por tres a cuatro
das (pueden ser obtenidos ms de 100 R/M).
Esto permite que el zooplancton obtenga la concentracin necesaria de cidos grasos y
aminocidos esenciales para el buen desarrollo de las diferentes especies de
invertebrados y peces producidos mediante esta tcnica. En la Tabla 19 se muestra la
composicin de aminoacidos en cuatro especies del zooplancton de uso en acuacultura.

40

FIG. 12) Densidad de rotferos con diferentes alimentos A) Chlorella; B) Levadura; C)

Chlorella/Levadura; D) Control (Hirata, 1980).
TABLA 19. COMPOSICION DE AMINOACIDOS EN Brachionus
plicatilis, CULTIVADO CON DIFERENTES MICROALGAS
Y LEVADURAS (g/100 g PROTEINA CRUDA)
Nagasaki

Gifu

1975

1976
1

1975

Levadu
3
Levadur 3
1
Levadu ra +
Chlore Levadu
Chlore Levadu 4 Chlore
a+
ra
Chlorell lla
ra
lla
ra
lla
Chlorella
a
2

41

Isoleucina

2.9

2.8

3.1

4.4

4.0

4.0

3.2

3.4

Leucina

5.5

5.3

5.6

6.9

6.1

6.2

6.2

6.1

Methionina 0.8

0.8

0.8

1.0

0.9

0.9

0.9

0.8

Cystina

0.7

1.1

0.8

0.7

0.7

0.7

0.9

0.6

Phenylalan
3.5
ina

3.4

3.5

4.5

4.1

4.1

3.9

3.9

Tyrosina

3.0

3.0

3.2

3.0

2.8

2.9

3.2

3.1

Threonina

3.5

3.1

3.4

4.0

3.5

3.4

3.4

3.2

Tryptopha
no

1.1

1.2

1.2

1.1

1.1

1.2

1.2

1.2

Valina

3.6

3.5

3.8

4.4

4.0

4.2

4.0

4.2

Lysina

5.7

5.8

5.8

6.6

6.0

6.0

5.5

6.1

Arginina

4.2

4.5

4.6

5.2

4.6

4.8

4.4

4.6

Histidina

1.4

1.4

1.4

1.7

1.5

1.7

1.5

1.5

Alanina

3.2

3.2

3.7

3.9

3.5

3.5

3.9

3.8

Acido
Asprtico

7.7

7.5

8.0

9.8

8.9

8.8

8.5

8.0

Acido
Glutmico

8.9

8.8

9.3

10.1

9.7

9.5

10.1

9.8

Glycina

2.9

2.9

3.1

3.6

3.1

3.2

3.1

3.1

Prolina

5.2

5.9

5.8

5.0

4.8

4.9

6.1

6.7

Serina

3.7

3.7

3.9

3.7

3.6

3.7

4.2

4.0

TOTAL

67.5

67.9

71.0

79.5

72.9

73.7

74.2

74.1

Muestra obtenida con Etanol al 80%, por hidrlisis con ter dietlico.
1. Rotferos cultivados con Chlorella minutissima.
2. Rotferos cultivados con levadura.
3. Rotferos cultivados con Chlorella marina y levadura (1 g de
levadura/10 cel/ml agua de mar/da).
4. Rotferos cultivados con levadura y enriquecidos con Chlorella
marinapor 36 horas (Watanabe, et al., 1978b; Hirata, 1983).
TABLA 20. COMPOSICION DE AMINOACIDOS EN
DIFERENTES
MICROCRUSTACEOS (g/100 g PROTEINA CRUDA)
(WATANABE et al., 1978b)
Aminocidos

Artemia
salina1

Acartia
clausi

Trigriopus
japonicus

Moina
sp.

Isoleucina

2.6

3.5

2.5

2.5

Leucina

6.1

5.5

5.0

6.0

42

Methionina

0.9

1.5

1.1

1.0

Cystina

0.4

0.8

0.7

0.6

Phenylalanina

3.2

3.7

3.5

3.6

Tyrosina

3.7

3.6

4.0

3.3

Threonina

1.7

4.2

3.8

3.8

Tryptophano

1.0

1.1

1.1

1.2

Valina

3.2

4.5

3.3

3.2

Lysina

6.1

5.4

5.7

5.8

Arginina

5.0

4.3

5.2

5.1

Histidina

1.3

1.9

1.6

1.6

Alanina

4.1

5.4

4.9

4.9

Acido
Asprtico

7.5

9.0

9.0

8.3

Acido
Glutmico

8.8

9.5

10.8

9.8

Glycina

3.4

4.6

4.5

3.7

Prolina

4.7

4.6

4.8

4.2

Serina

4.6

3.3

4.3

4.0

TOTAL

68.3

76.4

75.8

72.6

1. Nauplios de Artemia recien eclosionados

3. TECNICAS ALTERNATIVAS DE PRODUCCION MASIVA
Para el cultivo de B. plicatilis en condiciones ptimas se recomienda la utilizacin de
agua de mar (32~35%), la temperatura ptima de 25C (Hirata & Mori, 1963;
Watanabe, 1978, e Hirata 1980), y en cuanto a la seleccin del mejor mtodo de cultivo
masivo a continuacin se describen esquemticamente, algunos ejemplos de sistemas de
cultivo desarrollados por diferentes autores para la produccin masiva de rotferos.
El primer sistema utilizado fue el llamado mtodo de estanque de transferencia en
cultivos sucesivos de Chlorella (SISFFA, 1964a,b) (Figura 14).
Posteriormente la produccin de B. plicatilis con levadura de pan (Hirata & Mori, 1967)
(Figura 15) sustituye la transferencia sucesiva por tanques de recirculacin, mejorando
el tanque con grava en el fondo y colocando un ascensor de aire en el centro.
La Figura 16 muestra un cultivo sistemtico, alternando la dieta de Chlorella y levadura
llamado thinning out method (Fukusho et al., 1976). Este mtodo es el de mayor uso
en cultivos masivos pues reporta una alta produccin de rotferos (300 R/ml).
Y finalmente el mtodo desarrollado por Hirata et al. (1977), llamado sistema de
retroalimentacin, semejando un ecosistema con la participacin de bacterias
43

pseudomonas (produccin de nutrientes por biodegradacin) para Chlorella y sta como

alimento de rotferos, los desechos de stos hacia un biodepsito, etc. (Figura 17)
(Feedback System; Hirata, 1980). Las tasas de conversin de alimento de este tipo de
sistemas diariamente se incrementan. Se puede concluir que los sistemas de
retroalimentacin tienen dos ventajas al mismo tiempo: la purificacin del agua y la
minimizacin de prdida de energa a travs de la alimentacin. Esto permite el
establecimiento de un cultivo de produccin continua, como se muestra en las Figuras
18 y 19.
4. IMPORTANCIA DEL CULTIVO DE Brachionus plicatilis
Las principales ventajas que ofrece el cultivo de Brachionus plicatilis son: rangos
amplios de T y S%, y diferentes alternativas prcticas de cultivo masivo, su pequeo
tamao (100300), lo que permite a las lavas de peces y crustceos ingerirlos cuando
todava no pueden ingerir nauplios de artemia, su fcil y barata alimentacin con
diferentes especies de fitoplancton, levaduras y dietas artificiales. Su alta velocidad de
reproduccin bajo condiciones ptimas de cultivo, pudiendo duplicarse la poblacin en
menos de 24 horas, lo que permite obtener altas densidades (Theilacker & McMaster,
1971; Amat, 1975; Funikowa & Idaka, 1973; Hirayama & Kusano, 1972; Hirata, 1975;
Hirata et al., 1985; Watanabe et al., 1979; Kitajima et al., 1979; Imada et al., 1979;
Yufera et al., 1983; Trotta, 1983).
En cuanto a su contenido nutricional, como ya se mencion anteriormente B. plicatilis
ofrece la gran ventaja de incrementar su contenido nutricional en relacin de su dieta
como lo demuestran los trabajos de Watanabe et al. (1983) y cuyos resultados en
relacin a contenido de cidos grasos esenciales se presentan en las Tablas 20 y 21.
Para el buen manejo de la poblacin de rotferos en cultivo, es recomendable el uso de
ecuaciones sencillas como las que se muestran en la Tabla 22, que nos permiten conocer
la concentracin adecuada de alimento y la tasa de reproduccin y fecundidad, factores
que nos indican el buen desarrollo del cultivo, que si son bien controlados nos
permitirn el establecimiento de cultivos continuos y densos para su uso como alimento
vivo.

FIG. 13) Mtodo del tanque de transferencia.

44

FIG. 14) Esquema del sistema de cultivo en tanque de recirculacin: A) Bomba de aire;
B) Rotferos en el medio; C) Tubo de vinil (25 cm de dimetro); D) Filtro de
recirculacin; E) Tina de policarbonato (Pan-light), cubierta de fibra de vidrio..

FIG. 15) Tcnica de cultivo desarrollada por la asociacin The Seto Inland Farming
Fisheries Association (SISSFFA) y la Estacin de Maricultura de Nagasaki. Este
45

mtodo es el ms comnmente utilizado y es llamado Thinning out method (Fukusho

et al., 1976).

FIG. 16) Sistema de retroalimentacin de nutrientes (Feedback System) para el

cultivo masivo de rotferos (Hirata, 1980).

FIG. 17) Variaciones en la densidad de rotferos en el sistema de cultivo de

retroalimentacin (Feedback System) en tanque de 2,700 l (Hirata et al., 1980).
46

FIG. 18) Seccin del sistema de retroalimentacin del cultivo de rotferos: A) Tanque de
2,700 l; B) Biodepsito en zig-zag; C) Aereador mvil; D) Motor de reduccin; E)
Regulador de automvil; F) Compresor.
TABLA 21. TIPO DE ACIDOS GRASOS PRESENTES EN
ROTIFEROS PRODUCIDOS
EN VARIOS SUSTRATOS
ROTIFERO ROTIFERO
ACIDOS
ROTIFERO ROTIFERO
LEVADURA LEVADURA
GRASOS
Chlorella
AGUA
(S.
+ Chbrella
CULTIVO
marina
DULCE
cereviceae) marina
16:0
8.7
11.7
16.8
8.9
16:17
24.2
16.6
24.3
18.9
18:0
4.8
6.0
1.7
1.6
18:19
33.9
22.8
10.1
9.0
18:26 + 5.8 +
10.4 +
3.2 +
15.7 +
18:33 + 0.6 +
2.2 +
0.4 +
10.2 +
20:1
6.0 +
3.3
2.4+
0.3
20:33
0.4
2.3
4.4
0.8
20:46
0.4
2.3
4.4
0.8
20:43
0.5
0.6
0.2
1.1
20:53
1.0
8.1
24.1
1.9
22:1
1.7
1.5
1.3
22:53
0.2
1.7
3.8
0.3
22:63
0.5
0.9
0.5
-
3HUFA 2.2
11.3
28.6
-
* Watanabe et al., 1983

Acido graso esencial para especies marinas

+ Acido graso esencial para especies de agua dulce

47

TABLA 22. TIPO DE ACIDOS GRASOS PRESENTES EN

ROTIFEROS ALIMENTADOS
CON LEVADURA (Saccharomyces cerviceae) Y LEVADURA
OMEGA (W)
CULTIVADOS
LEVADURA
ACIDOS
LEVADURA ROTIFEROS EN
(S.
GRASOS
OMEGA
LEVADURA LEVADURA
cereviceae)
OMEGA
16:0

8.3 20.0

13.4 16.9

67

10 12

16:17

14.2 38.2

5.0 6.6

2627

10 11

18:0

3.4 8.4

2.3 2.6

34

23

18:19

26.1 43.9

15.5 16.4

2630

22 24

18:26

2.8 15.1

1.0 1.1

79

24

18:33

0.5 6.4

0.8 0.9

20:1

tr - 1.6

8.4 9.2

34

8 10

20:33

3.0 3.4

12

34

20:46

3.0 3.4

12

34

13.4 17.4*

12*

9 12*

0.9 1.4

00.4

23

20:53*

-*

22:53

0.7 0.8

22:6 3

-*

12.8 15.6*

7 9*

3
HUFA*

-*

33.5 35.8*

244*

25 26*

W La levadura W est enriquecida con una fuente de cidos grasos

esenciales
* Son cidos grasos esenciales

TABLA 23. TASAS DE ALIMENTACION, REPRODUCCION Y

FECUNDIDAD
EN CULTIVOS DE ROTIFEROS Brachionus plicatilis
donde: R = tasa de alimentacin
S = suplemento alimenticio (g)
Tb = peso total de la muestra de
rotferos (g)

Reproduccin:
donde: P.H. = produccin de huevos
NRh = nmero de rotferos con
huevos
T.R. = nmero total de rotferos
48

de la muestra
donde: D.H. = densidad de
huevos
D.R. = densidad de
rotferos

Indice de fecundidad:
Tasa de recuperacin:
donde: A = poblacin en momento t1
B = poblacin en momento t2

IV. CULTIVO DE Artomia salina

1. CONSIDERACIONES GENERALES
La Artemia salina es un crustcco que en estado adulto mide entre 1718 mm, posee un
par de apndices prenciles, ojos pedunculados, 17 pares de apndices, una furca
(rameada o bifurcada). La hembra adulta posee un ovisaco en el que incuba de 10 a 30
huevecillos generalmente y en condiciones ptimas hasta 70 huevecillos. Algunos
autores reportan de 50200, segn la especie (Figura 20). Presenta un ciclo de vida
sexual y asexual. Existen especies bisexuales y especies patenogenticas en ambas.
Pueden presentarse dos alternativas de desarrollo del huevo: uno es el desarrollo de
larvas (prenauplio, nauplio) o bien que en condiciones adversas se presente el fenmeno
de Criptobiosis, en el cual se producen los quistes. Este fenmeno se debe a que la
gstrula permanece en este estado en perodos de desecacin ambiental; esta gstrula
enquistada en condiciones favorables se hidrata y continua su desarrollo hasta
eclosionar el nauplio (Figura 21).
Esta capacidad de la Artemia de la formacin de huevos resistentes es lo que la ha
hecho ser uno de los recursos de alimentacin en Acuacultura ms importantes, pues los
quistes pueden conservar su variabilidad durante varios aos hasta que se dan las
condiciones necesarias para la eclosin.
1.1) Areas de Distribucin
A finales de los 60's la demanda de quistes de Artemia era insuficiente, por lo que se
encareci. Debido a esta gran demanda se incrementaron las investigaciones sobre este
organismo, principalmente por el Reference Center de la Universidad de Ghent,
Blgica, en colaboracin con laboratorios de Estados Unidos e Inglaterra, explorndose
varias zonas naturales de produccin de Artemia en Europa, Asia, Amrica y Australia
(Sorgeloos, 1974) (Tabla 23).

49

Aunque su distribucin es cosmoplita, la mayor abundancia ocurre en zonas tropicales

y subtropicales. Existen dos categoras generales en cuanto a salinidad se refiere de las
zonas de produccin natural de Artemia: Thalasso-halino donde la mayor concentracin
de sales son de NaCl (menor nmero de localidades). Athalasso-halino con sales de
Sulfatos, Carbonatos y Sales de Potasio (mayor nmero de localidades). Estas
categoras son importantes, pues determinan las diferentes especies de Artemia.
2. OBTENCION Y CONSERVACION DE QUISTES
Existen cinco etapas fundamentales para la preparacin de quistes que son: colecta en
zonas naturales o en cultivos intensivos, filtrado, lavado, secado, envasado y
almacenado. En zonas naturales (salinas, lagos, zonas estuarinas), los quistes se
acumulan en las orillas mezclndose con arena, lo que permite variaciones del nivel del
agua y stos estn sometidos a deshidratacin e hidratacin, lo que disminuye su
viabilidad, por lo que al colectarlos deben de ser pasados por tamices, lavarse
alternativamente con agua de mar y agua dulce, incluso se recomienda su centrifugacin
para eliminar la mayor parte de quistes no viables, y su secado por varios mtodos, entre
ellos corrientes de aire. Existen muchos mtodos para la obtencin de quistes y tcnicas
de decapsulacin reportadas por la bibliografa, ya que A. salina es objeto de estudios
muy intensos. En la Table 24 se muestra un ejemplo de la tcnica de decapsulacin de
quistes de Soogeloos, 1982.
FIG. 19. CICLO DE VIDA DE Artemia salina

50

51

FIG. 20a) Artemia salina (Ivleva et al., 1973): A) Hembra, B) Cabeza de macho, C)
Cabeza de hembra, 1. Ojo nauplio, 2. antenuelas, 3. antena, 4. apndice torxico, 5. saco
ovigero, 6. segmento abdominal, 7. furca, 8. ojo pedunculado.

FIG. 20b) Estados nauplio de Artemia salina.

TABLA 24. ZONAS NATURALES DE PRODUCCION DE
Artemia
salina EN EL MUNDO (P. SORGELOOS, 1974)
52

NUMERO
PRINCIPALES NUMERO DE
CONTINENTE TOTAL DE
PAISES
LOCALIDADES
LOCALIDADES
ASIA
19
EUROPA
77
ESPAA
37
AMERICA
37
U.S.A.
34
DEL NORTE
MEXICO
9
AMERICA
*REGION
11
6
CENTRAL
CARIBE
AMERICA
19
ARGENTINA 7
DEL SUR**
ASIA
19
URSS
15
AFRICA
18
Mxco (Baja California, Sonora, Sinaloa, Culiacn, S.L. Potos,
Estado de Mxico, Hidalgo, Zacatecas, Yucatn).
* (Bahamas, Puerto Rico, Santo Domingo, Martinica)
** (Argentina, Bolivia, Brasil, Colombia, Ecuador, etc.)
TABLA 25. TECNICAS PARA DESCAPSULAR QUISTES DE
Artemia salina (P. SORGELLOS, 1982)
1. Hidratar el huevo de artemia una hora con aereacin.
2. Cerrar el aire de la incubadora y dejar reposar unos minutos. Los huevos que
sedimenten sacarlos con un tamiz y los que floten desecharlos.
3. Pasar la artemia a la solucin descapsulante de siete a diez minutos como
mximo. Evitar que suba la temperatura a ms de 35C (al terminar se ve el
quiste de color anaranjado y transparente al microscopio).
4. Regresar los huevos al tamiz y lavarlos con agua de la llave hasta que pierdan el
olor a cloro (unos diez minutos).
5. Lavar los quistes con HCl .1 normal (18 ~ 20 segundos).
6. Regresar la artemia al tamiz y lavarla con agua de la llave unos cinco minutos.
7. Pasar los huevos a la incubadora con agua de mar y esperar la eclosin en 24
horas.
OBTENCION DE LA SOLUCION DESCAPSULANTE
La solucin descapsulante est formada con agua marina, Hidrxido de Sodio e
Hipoclorito de Sodio.
1. Volumen de solucin descapsulante
14 ml por gramo de quiste (71.88 ml)
2. Cantidad de Hipoclorito de sodio
H.S.

(10 g/68.12
ml)
53

3. A = .5 por gramo de quiste

B = 3000 por ndice de refraccin del Hipoclorito - 4003
4. Cantidad de agua de mar
Es igual a la diferencia que hay entre el volumen de la solucin descapsulante
menos la porcin del Hipoclorito de Sodio.
5. Cantidad de Hidrxido de Sodio 0.15 g por g de quiste (1.5 g/10 g)
a. Produccin de Quistes
Es importante mencionar que a salinidades bajas (100 g/l), existe alta
reproduccin. Este dato debe considerarse, pues permite un
reclutamiento continuo, pudiendo partir de una pequea poblacin, se
puede obtener en pocas semanas producciones altas. A salinidades muy
altas no hay reclutamiento, se gener la produccin de quistes,
acompaada de la muerte de los adultos.
La produccin de quistes no slo se desencadena por altas salinidades,
sino por alta temperatura y desecacin, niveles txicos de iones (K, Ca,
etc.).
La Artemia es un organismo osmoregulador, por lo que dentro de su
cuerpo la salinidad es baja y deshecha constantemente sales.
b. Produccin Comercial
Los mayores productores a nivel mundial de quistes de Artemia son:
Estados Unidos, URSS y Bulgaria. La Tabla 25 presenta los principales
aislamientos de quistes y nauplios de Artemia correspondientes a nueve
localidades geogrficas a nivel mundial de importancia comercial.
Es sumamente difcil establecer un programa simple para controlar la
produccin y cosecha de Artemia en zonas naturales, por todos los
factores antes mencionados por lo que se recomienda: 1) Un monitoreo
peridico de las poblaciones en estudio. 2) Caracterizar su ciclo de vida a
travs del ao (nmero de organismos adultos, nauplios, quistes). 3) Lo
anterior permitir conocer la concentracin de alimento adecuado y el
tiempo idneo para fertilizar y el establecimiento de la cosecha.
En las salinas, la introduccin del cultivo de Artemia contribuye a la
precipitacin de la sal, ya que la Artemia controla la poblacin de algas
disminuyendo la viscosidad.
Al introducir Artemia, se contribuye a obtener mayor pureza de la sal por
otros compuestos o partculas (Sorgeloos, 1982).
3. CULTIVO DE ARTEMIA
3.1) Parmetros Ambientales

Temperatura: En relacin a la temperatura, el lmite inferior es de 6C y el lmite

superior de 37C. Despus de este rango hay alta mortalidad.
54

Composicin Qumica: La composicin qumica del medio debe de tener iones

de Na, K, Mg en proporciones adecuadas. La relacin Na:P y Cl:SC 4 es muy
importante. Cabe mencionar que se han transferido especies de medios con sales
de Carbonatos a medios con sales de Sulfatos, y se ha reportado que pueden
adaptarse a ellos, observndose cambios de inters en la cepa adaptada diferente
a la cepa original.
pH: En relacin al pH, se considera adecuado el rango de 8.0 a 10.0.
Oxgeno: El rango de O 2 es amplio desde 1.0 mg/l hasta saturacin de O 2 .

3.2) Alimentacin
Se han encontrado en anlisis del contenido del tubo digestivo desde algas y detritus
hasta granos de arena, lo que demuestra que es un organismo filtrador no selectivo, por
lo que puede ingerir materiales contaminados. Ingiere partculas de 1.2 a 50 . Slo se
alimenta de partculas, no de alimentos solubles. La Artemia no regula su nutricin (se
alimenta las 24 h). Estos factores deben de considerarse para la adecuada seleccin de
las especies silvestres, y para calcular la concentracin y la dieta adecuada para fines
acuaculturales.
En las poblaciones silvestres es difcil determinar el rendimiento mximo sostenible
(RMS), ya que ste depende de los factores ambientales.
3.3) Proceso de Eclosin
El fenmeno de eclosin es un fenmeno qumico puro (intercambio inico),
relacionado con la concentracin de glicerol que posee el embrin, a mayor produccin
de glicerol hay mayor absorcin de agua; en etapas crticas de presin osmtica la
membrana se rompe, y despus la concentracin de glicerol sbitamente baja a cero, el
glicerol es liberado. Si bien se ha observado que en altas densidades de quistes la
presencia de glicerol es importante, pues interviene en la sincrona de la eclosin (ya
que no acta txicamente sobre las larvas). Es recomendable cambiar esta agua antes de
que transcurran diez horas de la eclosin, ya que la presencia del glicerol incrementa las
poblaciones bacterianas.
3.4) Parmetros que permiten la eclosin de quistes

Temperatura ptima de eclosin de quistes: 25 a 30C.

Salinidad: 5 ppm (lmite variable). A mayor S de 30 ppm, los quistes no

alcanzan el perodo crtico de ruptura o eclosin, y en tal caso no se consigue
sta.
Decapsulacin: En la decapsulacin se controla el proceso de osmo-regulacin.
Permitindose la decapsulacin es ms fcil conseguir la eclosin (en el anexo
se incluye la tcnica de decapsulacin recomendada por P. Sorgeloos).
pH: A un pH de 8.0 hay una buena eficiencia de eclosin. Debajo de ste la
eclosin disminuye. Se recomienda el uso de 2 g de NaHOO 3 /1 para asegurar
una mayor eclosin.
Oxgeno: En el metabolismo de Carbohidratos de Artemia, la presencia de O 2 es
relevante. Para conseguir una eclosin eficiente se recomiendan altos niveles de
O2 (condiciones anaerbicas afectan la eclosin y el metabolismo de
Carbohidratos).

55

En la Tabla 26 se muestran las concentraciones de sales recomendables para eclosin y

para cultivo de Artemia.
TABLA 26. PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE
AISLAMIENTO DE Artemia DE NUEVE
LOCALIDADES GEOGRAFICAS (QUISTES Y NAUPLIOS)
Eclosin:
Tiempo de
mg
cosecha (h)
nauplio/g de
incubacin
quiste

Nauplio
en peso
seco (g)

435.5 - B

24

1.63

Baha San
497.7 - B
Pablo (USA)

24

1.92

Macau,
Brasil

529.0 - B

24

1.74

Gran Lago
Salado
(USA)

467.0 - B

24

2.43

Baha Snaik
(Australia)

537.5 - P

29

2.47

Lago Chaplin
400.4 - B
(Canad)

27

2.04

474.6

Lavaldulc
(Francia)

561.8 - P

31

3.08

509.0

Tientsin
(China)

400.5 - P

29

3.09

515.0

Margherita di
Savoia
458.2 - P
(Italia)

29

3.33

Localidad

Longitud
total del
nauplio
(m)

Baha de San
Francisco
(USA)

443.3

Peso hmedo (80.2%H2 O)

Sorgeloos (1982)
Tiempo de incubacin a 25C
B - bisexual o
P - partenogentica

TABLA 27. CONDICIONES OPTIMAS EN CUANTO A

COMPOSICION Y CONCENTRACION DE SALES
REQUERIDAS PARA LA PRODUCCION DE Artemia EN
CULTIVO Y PARA LA ECLOSION DE QUISTES (P.
SORGELOOS, 1982)
56

CONDICIONES QUIMICAS CONDICIONES QUIMICAS

PARA ECLOSION
PARA CULTIVO
FUENTE

CONC. g/l

CONC.g/l

NaCl

50

31.08

MgCO

13

7.74

MgCl2

10

6.09

CaCl2

0.3

1.53

KCl

0.2

0.97

NaHCO 3

2.0

2.00

O2 - 55 ppm
pH - 8.0

3.5) Cultivo Intensivo

Se han desarrollado diferentes sistemas para el cultivo de Artemia en condiciones de
laboratorio para fines de investigacin sobre la Fisiologa, Bioqumica, los mecanismos
de formacin de quistes, eclosin y el aporte nutricional de la Artemia, entre otros
muchos estudios importantes, que han permitido el establecimiento de cultivos para la
nutricin de larvas de peces y crustceos de importancia en Acuacultura.
Estos cultivos se pueden clasificar en dos grupos: los llamados cultivos intensivos, en
recipientes de volumen controlado (tanques de concreto, tinas de plstico, estanques
rsticos, etc.). En estos sistemas las condiciones ambientales y los nutrientes estn
controlados, por lo que se logran altas densidades de cosecha. En la Tabla 27 se
muestran algunos ejemplos de dietas utilizadas para Artemia en condiciones de cultivo
y en la Tabla 28 se muestran algunas caractersticas de los cultivos de Artemia, entre
ellos el sistema intensivo.
3.6) Cultivo Extensivo
El aprovechamiento de zonas naturales de produccin de Artemia (salinas, estuarios,
lagos salinos), as como su buen manejo para incrementar su produccin, permite el
establecimiento de los cultivos extensivos.
En los cultivos extensivos puede esperarse una cosecha de 1020 kg org/m2 /da, siendo
una produccin anual mayor de 30 ton/ha/ao. En la Tabla 27 se muestran algunos
ejemplos de sustratos utilizados para el cultivo extensivo y la Tabla 28 muestra algunas
caractersticas de los diferentes tipos de cultivo de Artemia.
Hay que esperar un ptimo en la poblacin para poder manipular los parmetros que
inducen la formacin de quistes (S, Oxgeno, T).
En relacin a la produccin de quistes por estacin, se calcula en 20 kg/Ha/estacin
(cinco meses).
3.7) Recomendaciones para la optimizacin de la cosecha de quistes

57

Diseo de estanques bien orientados (contra el viento) para favorecer la

acumulacin de quistes (lugares tropicales).
Construccin de barreras (bamb, plstico, etc.).
Determinar la frecuencia ptima de cosecha (una vez al da, preferentemente por
la maana).
Diseo de redes colectoras de malla doble de l mm (exterior) y 50 de luz
interior).
Coleccin de los quistes en solucin saturada y aereacin continua (para
deshidratacin de quistes).
Aplicacin de tcnicas para provocar diapausa.
Procesar los quistes (salado, desecado, empaque).
TABLA 28. DIETAS UTILIZADAS PARA CULTIVOS
DE Artemia (Coll-Morales J., 1983)
TIPO DE
ALIMENTO

RECURSO

TIPO DE
CULTIVO

Microalgas

Chlorella, Chlamidomonas,
Dunaliella, diferentes especies de
dinoflagelados (Ej. Anacystis sp.,
especies de diatomeas (Skeletonema,
Thallassiosira, etc.)

Laboratorio e
intensivo

Dietas
inherentes

Spirulina (seca). Desechos de soya,

salvado de arroz

Intensivo

Fertilizacin

Gallinaza, abonos agrcolas

minerales

Extensivo

TABLA 29. PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE LOS DIFERENTES TIPOS

DE CULTIVO DE Artemia (P. SORGELOOS, 1982)
TIPO DE
RECIPIENTE ALIMENTO OBJETIVO DENSIDAD
CULTIVO
Diferentes
Bioensayos
Acuarios,
especies de y
Cultivos de botellones
microalgas,
alimentacin 5g/10 l
Laboratorio bolsas de
salvado de
a pequea
plstico
arroz
escala
Salvado de
INTENSIVOS
Obtencin
Estanques,
arroz+ S de biomasa
Cultivos
rsticos,
35 ppm + alta y quistes
Intensivos
10,000 org/l
estanques de concentracin
(por lote)
para
concreto
de O 2 + Fe
Acuacultura
EDTA
Manejo de
Manejo de las Obtencin La
zonas de
condiciones de biomasa produccin
Estuarios,
produccin
est en
EXTENSIVOS*
lagos salinos, naturales
y quistes
natural
funcin de
salinas
(S, O2 ,pH, para
(depende de
la estacin
Acuacultura
nutrientes)
las
climtica
58

condiciones
naturales del
sistema)
En salinas
estacionales
Introduccin
Conocimiento
inoculacin
de especies
y control de Obtencin de 100 a
(depende de Estuarios,
condiciones de biomasa 500 g
las
lagos salinos, naturales (pH, y quistes
quistes/Ha.
condiciones salinas
para
Salinas
S,O2 ,
naturales del
Acuacultura
permanentes
nutrientes)
sistema)
1015 g
quistes / Ha.
*

1. Para favorecer la produccin en los cultivos extensivos es recomendable el uso

de sales para la agricultura:200 kg/Ha de Monofosfato de Amonio100 kg/Ha de
Nitrato de Amonio500 kg/Sales de Calcio (regula el pH)
2. Es importante el control del nivel del estanque para favorecer el desarrollo del
fitoplancton y no el de planctonbentnico.
3. Puede usarse la tcnica de fertilizacin combinada usando 1.8 ton/Ha de gallinaza
(cada tres das) despus dehaber fertilizado con fertilizantes minerales).

TABLA 30. COMPOSICION DE DIETAS MEZCLADAS

USADAS PARA LA ALIMENTACION DE ROTIFEROS Y
Artemia EN CULTIVO Y DIETAS ENRIQUECIDAS
Ingredientes g/100 g Dieta para
mezcla
rotferos

Dieta para
Artemia

Polvo de espirulina
seca

40 1

40 3 40 1

40 2

Levadura IFP

40

40

40

40

Pescado autolizado
DL-Metionina

Mezcla
enriquecida
+12

73

73

D-Glucosa HCL

0.5

0.5

0.5

Almidn de maz

9.9

9.9

7.9

9.4

10

10

Aceite de hgado de
4
bacalao
Colesterol

Mezcla de
vitaminasa)

3.2

3.2

3.2

9.6

10

Cloruro de Colina

CaHPO 4

0.3

0.5

0.3

0.3

0.8

FeSO 4 .7H2 O

0.1

0.1

0.1

0.1

0.4

0.2

59

+1

Gatesoupe et al., 1977

Gatesoupe et al., 1981
3
Gatesoupe et al., 1981
a)
Gatesoupe & Luquet (1981) - (mezcla de vitaminasde Halver
(1972).
*2

4. IMPORTANCIA NUTRICIONAL DE Artemia

La Artemia es un excelente alimento vivo en la Acuacultura por sus caractersticas de
desarrollo, su pequeo tamao de nauplio y metanauplio (adecuado para las larvas y
juveniles de crustceos y peces) y fcil manejo, etc. El valor nutritivo de los nauplios
recin eclosionados es muy alto; este valor decrece en ausencia de alimento. Si la
Artemia (metanauplio y nauplio) es alimentada adecuadamente, podomos obtener un
enriquecimiento de nutrientes esenciales en un sustrato de microalgas (vivas o secas), o
en una mezcla artificial de nutrientes (lpidos, aminocidos, cidos grasos, etc.) (Tacon,
1987).
Se ha calculado que se requiere entre un 2.5 a 5 g de la fuente, enriquecida para un
milln de nauplios, y este enriquecimiento se logra en un perodo no menor de 6 h. En
la Tabla 29 se presentan diferentes mezclas de nutrientes y mezclas enriquecidas que se
utilizan para Artemia y rotferos.
Los recursos nutricionales que posee Artemia (protenas, cidos grasos, etc.). Su
composicin qumica y su concentracin varan de una cepa a otra, como se muestra en
la Tabla 30. De estos nutrientes, las principales fuentes a considerar son los cidos
grasos y aminocidos esenciales en los nauplios y metanauplios.
Se ha mencionado ya en captulos anteriores, que la importancia de los llamados
alimentos vivos (fitoplancton y zooplancton), radica en el aporte de cidos grasos y
aminocidos esenciales que puedan brindar para el desarrollo larvario de peces y
crustceos (Watanabe et al., 1983).
En la Tabla 31 se muestra la composicin en cidos grasos de cuatro cepas de Artemia
(nauplios recin eclosionados) de diferentes localidades.
Para lavas de peces marinos, los nauplios de Artemia contienen una alta proporcin de
cidos grasos esenciales de tipo W,(20:5W3 y 22:6W3 ) que son los ms nutritivos y que
permiten el buen desarrollo y alta supervivencia de las larvas.
Para especies de agua dulce, los nauplios de Artemia contienen una alta proporcin de
los cidos grasos esenciales W3 (18:2W6 y 18:3W3 ) (Watanabe et al., 1983).
La calidad nutricional de Artemia vara de un aislamiento a otro, de tal forma que en el
mercado internacional alcanzan un alto valor aquellas cepas de Artemia cuyos quistes
poseen concentraciones altas de aminocidos esenciales y cidos grasos.
En Latinoamrica y el Caribe se reporta un gran nmero de localidades en donde se
produce Artemia en forma natural en salinas y zonas estuarinas, de las que se conoce
muy poco en relacin a su produccin, caracterizacin de la cepa (biologa bsica,
anlisis proximal, ecologa), y potencialidad de industrializacin para ser utilizadas en
60

Acuacultura. Es importante el desarrollo de trabajos de investigacin que permitan la

explotacin de este importante recurso en los pases latinoamericanos y del Caribe.
TABLA 31. ANALISIS PROXIMAL Y MINERAL DE LA
COMPOSICION DE HUEVOS Y
NAUPLIOS DE Artemia DE TRES LOCALIDADES
Nauplios de Artemia
(recin eclosionados)

Huevos Artemia
Compuestos

San
S.
San
S.
Canada
Canada
Francisco America
Franciso America

Humedad
%

89.7

90.9

88.2

Protena %

54.4

51.5

47.5

6.1

6.5

6.8

Grasa %

6.4

10.5

4.8

2.0

1.6

2.1

Ceniza %

6.3

13.0

15.3

1.2

1.0

1.5

Ca mg/g

3.73

2.21

1.41

0.23

0.24

0.41

Mg "

2.80

2.53

5.59

0.44

0.20

0.68

"

7.60

6.95

7.63

1.33

1.21

1.44

Na "

6.13

31.91

28.58

4.02

1.43

4.93

"

5.73

5.34

7.12

1.08

0.96

1.16

Fe /g

1298

1277

1022

52.2

294.6

287.3

Zn "

91.2

96.0

61.4

16.1

21.1

24.1

Mn "

98.3

50.9

14.8

2.1

2.6

3.7

Cu "

10.6

9.1

15.9

0.6

1.1

1.9

* Watanabe et. al. (1983)

TABLA 32. COMPOSICION DE ACIDOS

GRASOS (%) DE NAUPLIOS (RECIEN
ECLOSIONADOS) DE Artemia EN CUATRO
LOCALIDADES
Baha
ACIDOS
RAC de San Canad China Francia
GRASOS
Pablo
14:0
1.79 0.43 0.83
1.80 1.73
14:1
2.92 2.26 1.67
2.24 3.03
16:0
12.70 7.79 9.99
11.40 11.90
16:17
16.78 5.24 9.03
19.06 11.34
16:34/17:18 4:33 2.44 1.47
2.54 2.20
18:0
4.07 3.08 5.12
3.99 4.21
61

18:19
18:26*
18:33*
18:43
20:26/20:36
20:33/20:46
20:53**

30.37
9.62
2.55
nd
0.20
5.82
8.45

29.15
4.60
33.59
4.88
0.24
1.48
1.68

28.24
7.95
19.87
1.60
0.44
4.21
9.52

26.81
4.68
7.38
1.26
0.15
3.34
15.35

24.73
6.14
20.90
2.04
1.13
2.45
8.01

Datos de Klein-Macphee et al., 1982

*
Acidos grasos esenciales para pecesde agua dulce
**
Acidos grsos esenciales para pecesmarinos
Todos los valores estn experesadoscomo % total de cidos grasos.

V. CULTIVO DE COPEPODOS
1. CONSIDERACIONES GENERALES
Los coppodos son crustceos de pocos milnetros que son considerados entre las
alternativas de alimentacin en Acuacultura. Se han logrado cultivos de Calanoideos
(Calanus sp., Acartia sp., etc.) y de Harpacticoideos (un ejemplo es Tigriopus
japonicus).
Tigriopus japonicus es un coppodo Harpacticoideo, cuyo adulto mide alrededor de 230
m. Posee un desarrollo larvario con seis estadios nauplio. Los nauplios recin
closionados miden alrededor de 120 m. El estadio de copepodito est dividido en seis
subestadios; el sexto estadio de copepodito es el estado adulto. En la Figura 22 se
muestra el desarrollo de este organismo.
1.1) Tcnicas de Cultivo
El cultivo de coppodos an no disponde de tcnicas sencillas para considerarlos
posibles substitutos de la Artemia. La principal especie que se ha cultivado
masivamente es Tigriopus japonicus, que se ha utilizado para la nutricin de larvas de
peces y camarones (Kitajima et al., 1980a,b; Koga, 1979 en: Hirata et al., 1985). Otras
especies que se han cultivado en forma masiva son Tiste, Amphiascella, Calanus etc.,
pero la que ha ofrecido las mayores ventajas para su produccin masiva es T. japonicus
por su resistencia a cambios ambientales, como son la temperatura (1027C), salinidad
(018), concentracin y tipo de alimento, etc. A continuacin se brinda la
informacin necesaria sobre el cultivo de esta especi.
En condiciones de cultivo se ha alimentado con una gran variedad de microorganismos
(becterias, fitoplancton) detritus o cualquier otro material orgnico de pequeo tamao.
En la Tabla 32 se muestran las diferentes dietas que se han utilizado en el cultivo de T.
japonicus. La seleccin del alimento determinar el contenido nutricional que pueda
aportar esta especie para la alimentacin de larvas de peces y crustceos. Las
dificultades para su cultivo masivo no son en razn de un estricto control de parmetros

62

ambientales como la temperatura y salinidad, pues como ya se mencion anteriormente,

esta especie es may resistente a variaciones externas del medio ambiente.
Las dificultades para su cultivo estn en relacin con el sustrato, ya que esta especie es
bentnica, por lo que se ha experimentado con diferentes formas y materiales de
sustrato artificial. En la Figura 23, se muestran algunos de estos materiales probados.
Los mejores resultados de produccin se han encontrado cuando se utiliza como
sustrato alguna especie de macroalga (Ulva, Enteromorpha, Porfira, etc.), pues no slo
juegan el papel de sustrato sino que aportan material de alimento y constituyen en los
sistemas de cultivo un filtro biolgico que purifica el agua del mismo. Investigaciones
de Koga (1979) consideran que la temperatura ptima en cultivo es de 20C.
En el cultivo de T. japonicus y de otros coppodos en general, es importante
proporcionar la temperatura ptima, el pH, el tipo de alimento y su concentracin
ptima, as como la preparacin de hbitats adecuados (para aquellas especies que as lo
requieran).
1.2) Importancia de los Coppodos
Existe an un largo camino por recorrer en la investigacin encaminada a la produccin
en cultivo de diferentes especies de coppodos, tanto bentnicas como fltoplanctnicas,
pues la lista de especies alternativas se encuentra en proceso de experimentacin en
laboratorio. Es importante recordar que en el ambiente marino los coppodos ocupan un
importante papel en las poblaciones que conforman el zooplancton, pues es este grupo
uno de los recursos de alimentacin ms importantes para peces y crustcoos.

63

FIG. 21) Estadios de crecimiento de Tigriopus japonicus (Koga, 1979)

1 6: Estadios de Nauplio 1 6
7 15: Estadios de copepodito y adulto
7 9: Copepodito 1 3
10 11: Copepodito 4 5 (hembra)
12: Adulto hembra
13 14: Copepodito macho 4 5
15: Adulto macho

64

FIG. 22) Esquema de tres diferentes tipos de sustrato para el cultivo masivo de
Tigriopus japonicus.
A. Estructura tipo panal
1. Base de polivinil transparente
2. Tubos aereadores
B.
1. Lmina acanalada de polivinil
2. Lnea de acero cubierta con tubo de silicn
3. Aereador
C.
1. Tela de mosquitero de plstico (luz de 1.6 mm)
2. Aereador
(Estacin Experimental de Pesca de la Prefectura Hyogo, Japn 1978).
TABLA 33. CRECIMIENTO DE Tigriopus
japonicus CON
DIFERENTES DIETAS (KOGA, 1979)
Tipo de alimento

Tasa de
65

Crecimiento

alimentacin
Levadura de
repostera

125625 g/t

Alimento sinttico
30g 7
para anguila y peces
veces/t
carnvoros

(Ind/1)
4,000
6,000

Alimento sinttico
para camarn

0.1 1.0 g/2

1/5 das

4,000 8,000

Alimento sinttico
para yellowtail

10
15g/t/3das

3,000

Nitzchia sp

5 105
cel/ml/da

9,000

Leche en polvo

0.1 0.5g/2
1/5/das

6,000
36,000

Levadura seca

1 mg/1/da

4,000

Fragmentos de
Undaria sp

5 20g/1/20
das

12,000
18,000

Fragmentos de Ulva 5 20g/1/20

sp
das

17,000
36,000

Fragmentos de
Enteromrpha sp

28,000

1 kg/t

VI. CULTIVO DE
MICRCORUSTACUOS DE AGUA
DULCE
1. CONSIDERACIONES GENERALES
Dentro de esta clase de organismos existen dos gneros de agua dulce de gran
importancia en Acuacultura, que son Daphnia y Moina, las cuales se localizan en
diversos medios. El gnero Daphnia comprende ms de 20 especies, de las cuales las
ms conocidas son: Daphnia magna, D. pulex, D. longispina, D. strauss.
En relacin al gnero Moina podemos mencionar a las especies: Moina rectirostris, M.
macrocopa, M. brachiata y M. affinis.
1.1) Morfologa

66

Estos organismos se caracterizan por poseer un cuerpo comprimido lateralmente y

ovalado (Figura 24); no se distinguen segmentos como en otros crustceos. Presentan
dimorfismo sexual marcado, la hembra es ms grande que el macho (Figura 25).
Presentan un carapacho de quitina transparente, las antenas o apndices con numerosas
setas; ojos compaestos y simples (ojo nauplio). Una cavidad embrinica con huevos y
embriones situados en la parte dorsal, entre el carapacho y el dorso del cuerpo. Para la
identificacin de especies son importantes los apndices torxicos en la forma y nmero
de espinas y setas (Figura 24).
2. PARAMETROS AMBIENTALES
2.1) Hbitat
Son organismos ampliamente distribuidos en lagos, reservorios artificiales, charcos
temporales y aguas de desecho. Poseen huevos de resistencia llamados efipios con una
envoltura quitinosa que el aire y los animales pueden distribuir. Son abundantes en
ambientes con alta concentracin de materia orgnica en donde proliferan hacterias,
levaduras y microalgas. Especies de Daphnia pueden cohabitar con Moina, Coppodos
y Brachipodos.
2.2) Temperatura
D. magna es especialmente resistente a cambios extremos de temperatura desde OC a
22C y se consideran 18C-20C como su temperatura ptima.
D. longispina, D. pulex y Moina rectirostris no sobreviven a cambios extremos de
temperatura, se desarrollan en temperaturas de 28C 29C.
Moina macrocopa se desarrolla tambin en un rango amplio de temperatura desde 5C a
30C y se considera de 24C 26C como su temperatura ptima.
Moina brachiata crece en temperaturas de 8C 13C.
2.3) Requerimientos de Oxgeno
Estos organismos habitan en medios donde la concentracin de O 2 es variable, ya que
pueden crecer tanto en completa saturacin de O 2 hasta concentraciones muy bajas.
Estas concentraciones estn en relacin a temperatura, concentracin de materia
orgnica, concentracin de microalgas, etc.
La supervivencia en medios pobres de oxgeno depende de la capacidad de sintetizar
hemoglobina. Este fenmeno est en relacin directa del oxgeno ambiental. Un
incremento en hemoglobina est en razn directa de alta temperatura y excesiva
densidad de poblacin. Incluso la hemoglobina est presente tambin en los huevos y la
sntesis de hemoglobina tambin est relacionada con la concentracin de CO 2
ambiental.

67

FIG. 23) Daphnia pulex (hembra) Vollmer, 1951

1. Antenula
2. Antena
Msculos de las
3.
antenas
4. Ojos compuestos
5. Ganglio ptico
6. Msculo del ojo
7. Cerebro
8. Procesos hepticos
9. Intestino
10. Corazn
11. Ovario

12. Cmara embrionaria

13. Embrios
14. Proceos abdominales
15. Postabdomen
16. Ano
17. Huevo torxico
18. Saco respiratorio
19. Seta filtradora
20. Carapacho
21. Glndula maxilar
Primer par de
22.
apndices
23. Mandbula

68

FIG. 24) Estructura de antenulas en macho y hembra de D. magna (Irleva, 1973).

FIG. 25) Huevo de resistencia efipios en D. pulex (a) y D. magna (b). (Irleva, 1973).
2.4) Requerimientos en pH
El pH ptimo en estas especies es difcil de determinar. En trminos generales, el pH
oscila entre 7.1 8 y por ejemplo en D. pulex el pH ptimo es de 5 a 6.
2.5) Otros Requerimientos
Existe en estas especies una alta sensibilidad a cambios del equilibrio inico a diferentes
concentraciones de cationes en el medio.
Las reacciones de Daphnia a la presencia de sales de fosfatos y nitratos (0.5 mg/l) es
interesante, pues estimula la reproduccin y la madurez sexual.
69

Los huevos contienen carotenoides y su sntesis requiere de la presencia de luz. Es

importante mencionar que la madurez sexual tambin est influenciada por la presencia
de luz.
La abundancia y distribucin de estas especies depende de la variacin estacional pues
el nmero y tamao de huevos de resistencia partenogenticos y la medurez sexual
dependen de las variaciones de T, S, pH y luz, entre otros. Un exceso de luz solar
reduce considerablemente una poblacin.
En relacin a la produccin de huevos Ephippia (Figura 26) (huevos de resistencia
partenogenticos) dependen de la temperatura principalmente. Por ejemplo, en Moina
rectirostris stos se producen a 20~27C en M. macrocopa a 14C.
La alimentacin en Daphnia y Moina es ms compleja que en Branchipodos, ya que
estas especies se alimentan de bacterias, levaduras y microalgas. La Daphnia se adapta a
cambios ambientales y puede adaptarse a ambientes nuevos en tres - siete das,
reproducindose partenogenticamente. Las colectas de estos organismos de los medios
naturales para su cultivo, deben hacerse en Primavera y Verano.
3. TIPOS DE CULTIVO
La produccin de Daphnia y Moina en condiciones de cultivo es relativamente sencilla
por su resistencia a variaciones ambientales y diversas dietas altenativas que se pueden
usar como se ha mencionado en prrafos anteriores.
Como en otras especies de alimento vivo, las alternativas de produccin de estas
especies pueden ser: cultivo en laboratorio para fines de investigecin, cultivo intensivo
y cultivo extensivo. La Tabla 33 muestra la produccin de microcrustceos de agua
dulce con diferentes especies de microalgas y bacterias.
3.1) Condiciones Optimas de Cultivo
TC - 15C a 25C
O 2 - 3 a 6 mg/l
pH - (6.8 7.8)
Grado de Oxidacin - 14.826.2 mg O 2 /l
3.2) Medios de Cultivo Recomendables

Medios minerales (sales de fosfatos y nitratos)

Medios orgnicos (estircol de caballo, res, cerdo, gallina)
Medios enriquecidos (combinacin de medios orgnicos e inorgnicos o
estractos de suelo

Se recomienda cosechar estos organismos a intervalos regulares para mantener un

equilibrio en el cultivo. En condiciones ptimas de cultivo para iniciar la cosecha (de 20
a 25 das despus del inicio del cultivo), se puede obtener una biomasa de 10 g/m3 . Las
Tablas 34 y 35 muestran los diferentes medios de cultivo recomendables para sistemas
intensivos y extensivos.
4. IMPORTANCIA NUTRICIONAL
70

Las especies ms estudiadas en relacin de su aporte nutricional para la acuacultura son

Daphnia y Moina. La Tabla 36 nos muestra el contenido nutricional reportado para
Daphnia.
Estas dos especies de cladceros de agua dulce han sido seleccionadas dentro del grupo
de zooplancton que ofrece alto contenido nutricional y facilidades de produccin en
cultivo.
La Tabla 37 muestra la composicin mineral y proximal de cinco especies seleccionadas
como alimento vivo; entre stas se encuentran Daphniay Moina.
Es importante considerar que el contenido nutricional de estas especies est en funcin
directa del sustrato en el que se desarrollan. La Tabla 5 muestra la composicin de
aminocidos esenciales de estas cinco especies seleccionadas; dentro de stas, Daphnia
y Moina tienen un buen aporte.
Los cladceros en Acuacultura han sido objeto de estudios muy serios en pases
desarrollados como el Japn y La Unin Sovitica. Estos trabajos han permitido
conocer las condiciones ptimas para su produccin en cultivo masivo, as como las
alternativas de produccin en diferentes medios de cultivo.
TABLA 34. PRODUCCION DE MICROCRUSTACEOS DE AGUA DULCE CON
DIFERENTES ALIMENTOS (IRLEVA I.V., 1973)
ESPECIE ALIMENTO

CONSUMO
CONCENTRACION
DE
DE ALIMENTO
TC
REFERENCIA
ALIMENIO
ccl/ml.
cel/hr
1,000

Daphnia
magna

bacterias
coliformes

15

2,000

700

3,000

1,050

4,000

1,700

410

18

750
D. magna

Chlorella
pyrenoidosa

D. magna Soenedesmus sp

200

124
255

1,140

299

1,580

24

393

2,160

405

2,300

327

58

415

275

22

D. magna

Azotobacter y
bacteria Coli

D. pulex

Chlamydomonas 25

Manuflcva,
1964

Sushchenya,
1958

Vasilleva,
1953
Rodina, 1984a

470
20

71

4.5

Richman, 1958

reinhardti

Moina
affinis

Soenedesmus
dimorphus

Moina sp Soenedesmus sp

50

5.8

75

13.8

100

19.1

6,000

24.0

Shirota, 1966

26.5
200

212 16.6

500

48.0

Torrentera,
1986
(observacin
personal)

TABLA 35. MEDIO DE CULTIVO PARA PULGA DE AGUA PARA

SISTEMA INTENSIVO (SEPESCA-ACUACULTURA, 1983, COM. PERS.)
-I1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Pngase 6.6. gr de salvado de trigo en 1 litro de agua.

Dejar fermentar en un lugar moderadamente caliente durante una semana.
Diluir el litro a 100 litros de agua.
Agregar 25 a 50 gr de Cloruro de Sodio (sal).
Agregar 25 a 50 gr de Sulfato de Calcio.
Colocar la solucin en un sitio donde le de bastante sol.
Sembrar el medio con Pulgas de Agua.
-II-

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Pngase 6.6 gr de salvado de trigo en 1 litro de agua.

Dejar fermentar en un lugar moderadamente caliente durante una semana.
Diluir 1.5 litros en 100 litros de agua.
Agregar 25 a 50 gr de Cloruro de Sodio (sal).
Agregar 25 a 50 gr de Sulfato de Calcio.
Agregar 5 a 10 gr de hgado cocido en rebanadas de 1 mm de grueso. El hgado
debe cocerse lo ms rpidamente hasta que las protenas se coagulen.
7. No es necesario poner la solucin al sol.
8. Simbrese el medio con Pulgas de Agua.
9. Si falta oxgeno disuelto en la solucin, debe retirarse un poco de agua (5 litros)
y agregar la misma cantidad de agua limpia fresca y aereada.
10. Se aadir salvado fermentado e hgado cuando sea necesario.
-III1. Mezclar hasta formar una suspensin uniforme 1/4 de paquete de levadura para
pan fresca en 100 cc. de agua.
2. Adase la suspensin a 70 litros de agua.
3. Debe mantenerse burbejeo de aire en la solucin para evitar la falta de oxgeno
disuelto.
4. Simbrese el medio con Pulga de Agua.
5. Se agregar la suspensin cada cinco o seis das.
72

TABLA 36. RESULTADOS DE CULTIVOS DE MICROCRUSTACEOS DE AGUA

DULCE (CLADOCEROS) CON NUTRIENTES
ORGANICOS E INORGANICOS - SISTEMAS INTENSIVO Y EXTENSIVO
(IRLEVA, I.V., 1973)
TIEM
PO DE
VOLL
MAD
NO.
DURA BIOMA
MEN
DOSIS DE
U
FUENTE
INICIAL
CION SA
COSE TOTA
FERTILIZ
RACI
DE
DE
DEL
MAX. CHA L DEL REFERE
ACION
ON
NUTRIE
ORGANI
CULTI OBTEN DIARI CULTI NCIA
POR m3 DE
DEL
NTES
SMOS
VO
IDA
A g/m3 VO
AGUA
CULT
3
3
g/m
(DIAS) g/m
M3 1H2
IVO
O
(DIAS
)
1.5 kg
Excreta (inicial)
Shipet,
de
0.75 kg
10
2025
40
1950
caballo
(cada 810
das)
1.5 kg
Excreta (inicial)
Asketou,
de
0.75 kg
10
612.5
1954
caballo
(cada 810
das)
Infusin
de
Meshkow
excreta
10 litros
550
1016 945
250
25.8
30.6
a, 1957
de
caballo
Infusin
34.4
de pasto 10 litros
250
Meshkov
1520
1519 2647
(30
5.5
(2 kg/100 cada 4 das
1,500
a, 1957
38.5)
1)
Infusin
de
10 litros
excreta
250
Meshkov
cada 24
10275
1024 1442
27.3
27.5
de
1,000
a, 1957
das (10:3)
caballo y
pasto
1620 g
120
800
Briskina,
3040
1820
3050 2530
Levadura inicial
130
1,200
1960
proteoliza
810 g/5
da
das
1620 gr
180
Briskina,
1040
2025
16
280
Levadura inicial
270
1960
proteoliza
810 g/5
da
26
525
das
73

23
Fertilizan
tes
minerales

Fertilizan
tes
minerales

37.5 g
nitratos (13
mg N/l) 2
2040
mg/l
superfosfat
os
37.5 g
50
nitrato de
amonio y 100
20 gr de
levadura (al
inicio) 19 g
de nitrato
de amonio 150
y 10 g de
levadura c/5
das

Excreta
de
caballo
trozos de
vegetales 0.5 1 kg
superfost
atos y
sulfato de
amonio
Levadura
0.5 kg
proteoliza
da y
fertilizant
es
minerales
10:2

557

12

15

13.4

2025
(verano)

Asketov,
1958
2540 2035 1960

34

34

332

Bogatova
&
Askerov,
1958

3545
(inviern
o)

1015

28

Konovalo
v&
Binting,
1956

106

Askenov,
1960

a
110

TABLA 37. CONTENIDO DE

AMINOACIDOS EN Daphnia (IRLEVA I.V.,
1973)
Tyrosina
4.27%
Tryptophano
3.62%
Arginina
10.92%
Histidina
2.69%
Cistina
1.17%
Methionina
3.45%
TABLA 38. COMPOSICION MINERAL Y PROXIMAL DE CINCO
ESPECIES
74

ESPECIE
Medio de
cultivo
Mezcla%
Protena%
Lipidos%
Cenizas
%
Ca mg/g
Mg mg/g
P mg/g
Na mg/g
K mg/g
Fe mg/g
Zn mg/g
Mn mg/g
Cu mg/g

DE ALIMENIO VIVO SELECCIONADO

Brachionus
Tigriopus
Plicatilis
japonicus
Acartia Daphnia
Levadura
Levadura sp
sp
Levadura +
Chlorella +
Chlorella
Chlorella
89.6
89.1
87.6
87.3
88.1 89.3
7.2
7.9
7.8
9.0
8.5
7.5
2.3
2.3
3.8
2.8
1.3
1.4

Levadura

87.2
8.8
2.9

0.4

0.4

0.5

0.5

2.1

0.7

0.12
0.14
1.48
0.41
0.35
15.9
7.4
0.4
1.1

0.26
0.17
1.44
0.30
0.12
52.5
9.8
1.1
1.5

0.21
0.14
1.37
0.29
0.23
43.4
8.2
1.1
1.7

0.15
0.23
1.31
0.61
0.84
33.8
12.3
1.0
2.4

0.39
0.76
1.48
6.63
2.21
11.5
39.0
0.2
2.8

0.21
0.12
1.46
0.74
0.72
72.2
12.8
13.2
1.1

0.12
0.12
1.85
1.09
0.92
46.4
10.0
0.5
5.8

* Watanabe et al., 1983

REFERENCIAS
- Allen E.J. & Nelson E.W., 1910. On the artificial culture of marine plankton
organisms, In: A. Kinne (Eds.) Marine Ecology, Vol. III, Cultivation Part I,
London.
- Aguirre M.A., 1981. Fstudios con un cultivo scmicontinuo de Teraselmis suecia
(Kylin, 1935), nutrientes, vitaminas, desinfeccin del medio con U.V. y produccin
del sistema a largo plazo. Tesis Esc. Sup. de Ciencias Marinas, U.A.B.C., 62 pp.
- Barroso R.B., 1987. Anlisis comparativo de diferentes sistemas de esterilizacin de
agua de mar y su importancia en acuacultura. Tesis de licenciatura, UADY,
Mrida, Yucatn, Mxico. 41 pp.
- Cceres M.C.J., 1979. Sistema de cultivo de Monochrysis lutheribajo condiciones
rudimentarias y el desarrollo de un nuevo mtodo de aproximacin a la ecuacin de
Monod (1950). Tesis Esc. Sup. de Ciencias Marinas. U.A.B.C., Ensenada, Baja
California, Mxico, 49 pp.

75

- Canzonier W.J. & R. Brunetti, 1975. Low-cost continuous algal culture system, In: G.
Persoone & E. Jaspers (Eds.) Proc. 10th Europ. Symp. Mar. Biol. Ostend. Bel.,
Sep. 1723, 1975. Universa Press, Wetteren, p. 2731.
- Caperon J., 1968. Population growth response of Isochrysis galbana to nitrate variation
at limiting concentrations. Ecology, 49:866872.
- Chu S.P., 1942. The influence of the mineral composition of the medium on the
growth of planktonic algae. I. Methods and culture media. J.Ecol. 30:284325.
- Coll Morales J., 1983. Acuicultura: Marina Animal. Mundi-Prensa, Medrid, p. 237
371.
- Davis H.C. & R. Ukeles, 1961. Mass culture of phytoplankton as foods for metazoans.
Science 134:562564.
- Droop M.R., 1962. On cultivation Skeletonema costatum some problems. Vortr.
Gesamtgeb. Botanik, N.F.F., 1:7782.
- Droop M.R., 1966. Vitamin B12 and Marine Ecology III. An experimental with a
chemostat. J. Mar. Biol. Ass. U.K., 46: 659671.
- Droop M.R., 1968. Vitamin B12 and Marine Ecology IV. The kinetics of uptake,
growth and inhibition in Monochrysis lutheri. J. Mar. Biol. Ass. U.K., 48:689733.
- Droop M.R., 1975. The chemostat in Mariculture, In: G. Persoone & E. Jaspers (Eds.),
Proc. 10th Europ. Symp. Mar. Biol. Ostend. Bel., Sep. 1723, 1975. Universa
Press, Wetteren, p. 7193.
- Droop M.R., 1979. On the definition of x and q in cell quota model. J. Exp. Mar. Biol.
Ecol. 39(2):203.
- Emerson W.D., 1984. Predation and energetics of Penaeus indicus (Decapoda:
Penaeidae) larvae feeding on Brachionus plicatilis and Artcmia nauplii.
Aquaculture 38: 201209.
- Eusebio J.A., B.I. Rabino, E.C. Eusebio, 1976. Recycling system in integrated plant
and animal farming. Vol. I No. I, pp. 127. Technical Bulletin.
- Fbregas J., C. Herrera, B. Cabezas & J. Abalde, 1985. Mass culture and biochemical
variability of the marine microalga Tetraselmis suecica Kylin (Butch) with high
nutrient concentration. Aquaculture 49(1985), 231244.
- Fbregas J., C. Herrero, B. Cabezas & J. Abalde, 1986. Biomass production and
biochemical composition in mass culture of the marine microalga Isochrysis
galbana Parke at varying nutrient concentrations. Aquaculture 53:101113.
- Fbregas J., C. Herrero, J. Abalde, R. Liao & B. Cabezas, 1986. Biomass production
and biochemical variability of the marine microalga Dunaliella tertiolecta (Butcher)
with high nutrient concentrations. Aquaculture 53, (1986), pp. 19871999.
76

- Fencl Z., 1966. Theoretical analysis of continuous culture systems, In: Malek & Fencl
(Eds.). Theoretical and methodological basis of continuous culture of microorganisms. Academic Press, New York and London, pp. 69102.
- Fogg A.E., 1975. Algal cultures and phytoplankton ecology. Second Ed. The
University of Wisconsin Press, 175 pp.
- Foyn B., 1934a. Lebenszyklus, cytologie und sexualitat dec chlorophycee Cladophora
subriana, In: O. Kinne (Ed.). Marine Ecology Vol. IIi, Part I, London.
- Foyn B., 1934b. Lebenszyklus und sexualitat der chlorophycee Ulva lactuca, In: O.
Kinne (Ed.). Marine Ecology Vol. III, Part I, London.
- Frank F.J., P.L. Welch, P.S. Galstoff, J.G. Needham, 1959. Culture methods for
invertebrate animals. XIV Arthropoda, Class Crustacea, 205227.
- Fukusho K., O. Hara & J. Yoshino, 1976. Mass production of rotifer fed Chlorella and
yeast in the 40 ton tank. Aquaculture 24: (3), 96101.
- Fukusho K., 1987. Mass culture of food organisms, In: Topics in Technology. Japan
International Cooperation Agency, pp. 4147.
- Gatesoupe F.J. et al., 1977. Alimentation lipidique de turbot (Scoparthalmus maximus
L.) I. Influence de la longever dechaine des de la serie e. Annl. Hydrobiol. 8:8997.
- Gatesoupe F.J. et al., 1981. Alimentation lipidique requirement du turbot
(Scophthalmus maximus) II. Influence de la supplimentation en esters mighyliques
de l'acide linoleinque et de la complimentation in acids gras de la serie 9 sur la
croissance. Ann. Hydrobiol., 8:237254.
- Gatesoupe F.J. & P. Luquet, 1981. Practical diet for mass culture of the rotifer
Brachionus plicatilis: applications to larval rearing of sea bass Dicentrarchus
labrax. Aquaculture 22:149163.
- Goldman J.C. & J.H. Ryther, 1975. Nutrient transformation in mass culture of marine
algae. Nature Vol. 254, pp. 594595.
- Guillard R.R.L., 1959a. Further evidence of the destruction of bivalve larvae by
bacteria. Biol. Bull 117:258266.
- Guillard R.R.L., 1959b. Division rates. Handbook of phycological methods. London,
Cambridge. Universa Press, 181194.
- Guillard R.R.L., 1972. Culture of phytoplankton for feeding marine invertebrates.
Culture of Marine Invertebrates Animals. New York; Plenum 409 p.
- Guillard R.R.L., 1973. Divisions rates, In: J.R. Stein (Ed.). Handbook of phycological
methods. Culture methods and growth measuremens. Cambridge, Universa Press,
pp. 289311.

77

- Halvert J.E., 1972. The vitamins, In: Fish Nutrition, Edited by J.E. Halver. Academic
Press, New York and London, pp. 29103.
- Hirata H., 1974a. An attempt to apply an experimental microcosms for the mass
culture of marine rotifer, Brachionus plicatilis. O.F. Miller. Mem. Fac. Fish.
Kagoshima, Univ. 24: 16.
- Hirata H., 1974b. An attempt to apply an experimental microcosms for the mass
culture of marine rotifer, Brachionus plicatilis. O.F. Miller. Mem. Fac. Fish.
Kagoshima, Univ. 23, 163172.
- Hirata H., 1975. Preliminary report on the photoperiodic acclimation for growth of
Chlorella cells in sinchronized culture. Mem. Fac. Fish. Kagoshima, Univ. 24: 16.
- Hirata H. & M. Murakoshi, 1977. Effects of aeration volume on the growth of marine
Chlorella in culture. Mem. Fac. Fish., Kagoshima Univ. 26, pp. 1521.
- Hirata H., 1980. Culture methods of the marine rotifer, Brachionus plicatilis. Mem.
Rev. Data File Fish. Res., 1, 2746.
- Hirata H. & Y. Mori, 1963. Mass culture of marine rotifer Brachionus plicatilis fed the
bread yeast Saibai-Gyogyo, 5:3640.
- Hirata H., A. Mavrikos & Y. Shigehisa, 1985. Evaluation of the use of Brachionus
plicatilis and Artemia nauplii for rearing prawn Penaeus japonicous larvae on a
laboratory scale. Mem. Fac. Fish., Kagoshima Univ. 34, No. 1, pp. 2736.
- Hirata H., & Y. Mori, 1963. Mass culture of marine rotifer Brachionus plicatilis fed
the bread yeast Saibai-gyogyo, 5:3640.
- Hirata H. & Y. Shigehisa, 1985. Steady state of zooplankton community in a feedback culture systems. Proc. VI Ser. Ecol. Symp. Microcosms in ecol. Rest. Georgia
(in print).
- Hirata H., M. Ushiro & I. Hirata, 1982. Ecological succession of Chlorella
saccharophila, Brachionus plicatilis and autogenous bacteria in culture water. Mem.
Fac. Fish., Kagoshima Univ., 31:153160.
- Hirata H., S. Yamasaki, I. Hirata & Mask, 1980. Marine zooplankton culture in a
feedback system. Proc. Szymberk Conf. Aquaculture.
- Hirayama K. & T. Watanabe, 1973. Fundamental studies on physiology of rotifer for
its mass culture IV. Nutritional effects of yeast on population growth of rotifer.
Bull. of the Japanese Society of Sci. Fish., Vol. 39(1), pp. 11291133.
- Hirayama K. & S. Ogawa, 1972. Fundamental studies on physiology of rotifer for its
mass culture I. Filter feeding of rotifer. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 38: 12071214.

78

- Hirayama K., T. Watanabe & T. Kusano, 1973. Fundamental studies on physiology of

rotifer for mass culture III. Influence of phytoplankton density on population
growth. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 39(11):11231127.
- Imada O., 1980. The yeast supplemented with fish liver oil as feed for rotifer.
Yoshuku, 17(5):3642.
- Imada O., Y. Kageyama, T. Watenabe, L. Kitajima, S. Fujita & Y. Yone, 1979.
Development of a new yeast as a culture medium for living food in the production
of fish seed. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 45(8):955959.
- Imai T., 1967. Mass production of molluscs by means of rearing the larvae in tanks.
Venus, 25:159167.
- Ito T., 1955. Studies on the Misukawari in eel-culture pond - II the changes in pH
and oxygen in the Misukawari by Brachionus plicatilis (Rotifer). Rept. Fac. Fish.
Pref. Univ. Mie, 2:168177.
- Ito T., 1968. Fundamental problems on the rearing of ayu fish. 36th Japan Lakes
Rivers. Aquacultural Res. Conf. Esp. Ed., 124.
- Irleva I.V., 1973. Mass cultivation of invertebrates biology and methods. Academy of
Sciences of the USSR. All Union Hydrobiological Society and Israel Program for
Scientific Translations. Cap. Branchiopoda 5278, Daphnia 79120.
- Jerlov N.G., 1970. Light: general introduction, In: O. Kinne (Ed.). Marine Ecology,
Vol. I, Part I. Wiley, London, pp. 95102.
- Kinne O., 1976. Biological water treatment; culture water treatment, In: O. Kinne
(Ed.) Marine Ecology, Vol. III, Cultivation, Part I, London. pp. 122134.
- Kinne O., 1977. Bivalvia: Mollusca. Cultivation of animals - research cultivation, In:
O. Kinne (Ed.), Marine Ecology Vol. III, Cultivation, Part II. Wiley London, pp.
900934.
- Kylin H., 1935. Uber rhodomona, platymonas und prasinocladus. Kfysiogr. Salsk
Lund. Forth Bd. 5, Nr. 22:112.
- Kitajima C., T. Arakawa, F. Oowa, S. Fujita, O. Imada, T. Watanabe, Y. Yone, 1980a.
Dietary value for red sea bream larvae of rotifer Brachionus plicatilis cultured with
a new type of yeast. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 46(1), 4346.
- Kitajima C., T. Arakawa, F. Oowa, S. Fujita, O. Imada, T. Watanabe, 1980b. Dietary
value for ayu Plecoglossus altivelis of rotifer Brachionus plicatilis cultured with
bakers yeast Saccharomyces cerevisiae. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 46(1), 4750.
- Kubitscheck H.E., 1970. Introduction to research with continuous cultures. PrenticeHall, Inc. Englewood Cliffs, N.J., 195 pp.

79

- Laing I. & M.N. Helm, 1981. Factors affecting the semicontinuous production of
Tetraselmis suecica (Kylin) Butch in 200 1. Vessels Aquaculture, 22:137148.
- Matthiesen G.C. & Thorner, 1966. Artificial culture of shellfish. Plankton culture, Part
I - Sec. 1, pp. 324.
- Monod J., 1950. La technique de culture continue: theorie et applications. Ann. Inst.
Pasteur, Paris, 79:390410.
- Natural Environment Research Council. 1974 Culture Centre of Algae and Protozoa.
Cambridge.
- Novick A. & Szilard L., 1950a. Experiments with the chemostat on spontaneous
mutations of bacteria. Proc. Nat. Acad. Sci. Wash., 36:708.
- Pares S.A. & A. Leyva, 1982. Cultivo semicontinuo de las microalgas Isochrysis
galvana y Tetraselmis suecica para su uso como alimento de larvas y adultos de
Mytilus californianus. Tesis UABC. Esc. Sup. Cienc. Mar, Ensenada, B.C.
- Parsons T.R., K. Stephens & D.H. Strickland, 1961. On the chemical composition of
eleven species of marine phytoplankters. J. Fish. Res. Board. Can. 18(6):1001
1016.
- Pejler B., R. Starkweather & T. Nogrady, 1983. Biology of rotifers. Proc. of the Third
International Rotifer Symposium. Reprinted in Hydrobiology, Vol. 14.
- Pillay T.V.R. (Ed.), 1972. Coastal aquaculture in the Indo-Pacific region. IV
Aquaculture Techniques - culture of shellfish. Food and Agriculture Organization
of the United Nations by Fishing News (books) Ltd.
- Provasoli L., J.J.A. Mclaughlin & M.R. Droop, 1975. The development of artificial
media for merine algae. Anch. Microbiol, 25:392428.
- Provasoli L. & I.J. Pintcher, 1975. The Pymatuning Symposia in Ecology. Edited by
C.A. Tryon, Jr. & R.T. Hartman.
- Ruttner-Kolisko A., 1974. Plankton rotifers. Biology and taxonomy. Biological Station
Lunz of the Austrian Academy of Science. E. Schweizebart sche verlagsbuch
handlung, p. 6269.
- SISFFA, 1964a. Cultivation of live food organisms in the Yashima Station I.
Fertilizers for Marine Phytoplankton Culture. Saibai-gyogyo News, 3,4:18.
- SISFFA, 1964b. Cultivation of live food organisms in the Yashima Station II.
Collections of single-cellci green algae and its culture. Saibai-gyogyo News, 3,4:9
18.
- Stein J.R., 1979. Handbook of phycological methods. Culture methods and growth
measurements. Cambridge, Univ. Pres, pp. 446.

80

- Sorgeloos P., 1974. The influence of algal food preparation on its nutritional
efficiency for Artemia salina L. larvae. Thalassia jugoslavica, 10(1/2):313320.
- Sorgeloos P., 1982. Curso Artemia sp. en la investigacin, la enseanza y la
acuacultura (com. pers.). UAM-Xochimilco, 1982.
- Spectorova L.V., O.I. Goronkova, L.P. Nosova & O.N. Albitskaya, 1982. Highdensity culture of marine microlagae-promising items for Mariculture. I. Mineral
feeding regime and installations for culturing Dunaliella tertiolecta (Butch).
Aquaculture, 26(1981/1982), 229302.
- Spektorova L.V., O.I. Goronkova, L.P. Nosova, O.N. Aklbitsaya & G.Y. Danilova,
1986. High density culture of marine microalgae promising items for mariculture
III. Mass culture of Monochrysis lutheri (Droop). Aquaculture 55, pp. 231240.
- Spektorova L.V., L.P. Nasova, O.I. Goronkova, O.N. Albitskaya & Y.N. Filippouskij,
1986. High density culture of marine microalgae-promising items for mariculture
II. Determination of optimal light regime for Chlorella sp. F. marine under highdensity culture condition. Aquaculture 55(1986), 221229.
- Schne H.K. & A. Schne, 1982. MET 44: A weekly enriched-sea water medium for
ecological studies on marine plankton algae, and some examples of its application.
Botnica Marina, Vol. XXV, pp. 117122.
- Tacon A.G.J., 1987. The nutrition and feeding of farmed fish and shrimp - a training
manual I. The essential nutrients. FAO Field Document No. 2., Project GCP/RLA/
075/ITA, September 1987, pp. 129.
- Tamiya H., 1957. Mass culture of algae. A Rev. PI Physiol, 8, 309334.
- Trotta P., 1983. An indoor solution for mass production of the marine rotifer,
Brachionus plicatilis Mller fed on the marine microalgae Tetraselmis suecica
Butcher. Aquaculture Engineering, 2:93110.
- Torrentera B.L., 1983. Cultivo semicontinuo de Chlorella saccharophila Kruger. Tesis.
Esc. Nal. est. Prof. iztacala, UNAM, pp. 68. Mxico, D.F.
- Torrentera B.L. & J. Franco C., 1988. Unidad de esterilizacin por irradiacin ultravioleta (U.V.). Rev. AMAC, Mxico, pp. 10.
- Umebayashi O., 1975. Practical culture of microalgae, In: Culture of Marine Life
Textbook for Marine Research Course. Japan International Cooperation Agency,
Government of Japan, 6:131144.
- Ukeles R., 1973. Continuous culture - a method for the production of unicellular algal
foods, In: J.R. Stein (Ed.). Handbook of Phycological Methods. Culture Methods
and Growth Measurements. Cambridge Univ. Press, pp. 233254.
- Watanabe T., 1978. Nutritive value of plankton for fish larvae in the view point of
lipids. Fish. Sarv 22, pp. 93111. Koseisha-Koseikaku (Tokyo).
81

- Watanabe T., T. Arakawa, K. Kitajima & S. Fujita, 1978b. Nutritional evaluation of

proteins of living feeds used in seed production of fish. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish.,
44:985988.
- Watanabe T., C. Kitajima, T. Arakawa, K. Fukusho & S. Fujita, 1978c. Nutritional
quality of rotifer, Brachionus plicatilis as a living food from the view point of
essential fatty acids for fish. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 44:11091114 (in
Japanese).
- Watanabe T., F. Oowa, C. Kitajima & S. Fujita, 1978d. Nutritional quality of brine
shrimp Artemia salina, as a living feed from the view point of essential fatty acids
for fish. bull. Japan. Soc. Sci. Fish. 44:11151121.
- Watanabe T., F. Oowa, C. Kitajima, S. Fujita & Y. Yone, 1979. Relationship between
the dietary value of rotifers Brachionus plicatilis and their content of W, highly
unsaturated fatty acids. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 45:883839 (in Japanese).
- Watanabe T., F. Oowa, C. Kitajima & S. Fujita, 1980. Relationship between dietary
value of brine shrimp, Artemia salina and their content of W, highly unsaturated
fatty acids. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 46:3541.
- Watanabe T., 1982. Lipid nutrition in fish. Comp. Biochem. Physiol., 73B:315.
- Watanabe T., M. Ohta, C. Kitajima & s. Fujita, 1982. Improvoment of dietary value of
brine shrimp Artemia salina for fish larvae by feeding them on W, highly
unsaturated fatty acids. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 48:177751782.
- Watanabe T., C. Kitajima & S. Fujita, 1983. Nutritional values of live organisms used
in Japan for mass propagation of fish: a review. Aquaculture, 34(1983):115145.
- Wheaton F.W., 1977. Aquacultural engineering. Wiley & Sons, pp. 703.
- Yamesaki S. et al., 1984. Influence of marine Chlorella density on food consumption
and growth rate of rotifer, Brachionus plicatilis. Mem. Fac. Fish. Kagoshima Univ.,
Vol. 33,4:5761.
- Yamasaki S. & H. Hirata, 1985a. Efficient rates of food supply for cultivation of
rotifer Brachionus plicatilis fed on marine Chlorella sp. The Aquaculture, Vol. 32:4
(225229).
- Yamasaki S. & H. Hirata, 1985b. Effects of salinity on food conversion rate of rotifer
(Brachionus plicatilis). Aquaculture 32(4):230235.
- Yanase R. & T. Imai, 1968. The effects of light intensity and temperature on the
growth of several marine algae useful for rearing molluscan larvae. Tohoku J. Agr.
Res. 19:7582.

82