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La celulosa y el hongo trichoderma reesei

La celulosa es un polisacrido cuya frmula qumica corresponde a: C 6H10O5. Es el principal componente de la


membrana celular de la mayor parte de las plantas. La celulosa est constituida por molculas de D- glucosa unidas
por enlaces b (1 4) glucosdicos y es el polmero ms abundante en la biosfera.
Generalmente resistente a la fermentacin, no significa que no se pueda hidrolizar, pues existen microorganismos
celulticos que poseen enzimas como: las CELOBIOHIDROLASAS y las ENDOGLUCANASA que se encargan de
su degradacin (4).
El hongo Trichoderma reesei es un microorganismo celultico que contiene cuatro grandes celulasas ( 1,4-beta-Dglucan celobiohirolasas CBH I y CBH II, endo-1,4-beta-D-glucanasa EG I y EGII ) (5).
Para producir cada una de las enzimas que degrada a la celulosa (celulasas), se hace uso de tcnicas biotecnolgicas
de enzimologa que han ganado gran importancia medioambiental y comercial.
Desde el punto de vista gentico, se han estudiado genes que codifican para la celulasas ( cbh1, cbh2, egl1 y egl2),
mediante sustitucin por el marcador gentico amds de Aspergillus nidulans. Estas investigaciones has sugerido que
la CBH II y la EG II son las ms importantes en la actividad enzimtica de la celulasa porque intervienen en la
formacin eficiente del inductor de stas en T. reesei y que la eliminacin de ambas cadenas celobiohidrolasas
( CBH II y EG II ) imposibilita a la enzima para desdoblar la celulosa cristalina (6).
Se ha observado que la celulosa microcristalina (10 g/L) es hidrolizada principalmente por dos de estas celulasas
(celobiohidrolasa CBH I y endoglucanasa EG II ) del hongo Trichoderma reesei. Medve J et al (1998) realizaron dos
tipos de experimentos, donde ambas enzimas se agregaron especficamente y de forma equimolecular, analizando la
adsorcin de las enzimas y la produccin de los azcares solubles por tcnicas de FPLC y HPLC, respectivamente.
Los resultados obtenidos por este grupo de investigacin sugieren que la CBH I produce azcares ms solubles que
la EG II, excepto a concentraciones menores del 1% (7).
Adems, mediante simulaciones computacionales , se encontr que existe un modelo comn de hidrlisis para las
enzimas de CBH I y otro modelo claramente discernible para las enzimas del CBH II de muestras de T reesei (8).
En experimentos posteriores, la clonacin del gen beta-glucosidase (bgl4) y su homlogo (bgl2) del hongo
celultico Humicola grisea y del T reesei respectivamente, se ha encontrado que la sacarificacin o transformacin
de los polisacridos en azcares fermentables de la celulosa, por celulasas de la T. reesei es mejorada por la adicin
del gen recombinante BGL4 H. grisea (9).
La endoglucanasa I (EG I) es la celulasa ms abundante en el hongo T. reesei, comprendiendo entre el 5 y el 10% de
la suma total de las celulasas producidas por este microorganismo.
Por medio de una sustitucin molecular en T. reesei y Humicola insolens, a una resolucin 3.6 A la endoglucanasa I
( EGI) posee un centro activo abierto para la celulosa como sustrato, presentando diferencias con respecto a enzimas
relacionadas en cuanto a su funcin biolgica de degradacin de sustratos especficos y pHs de actividad ptima
(10).
La T. reesei (cepa w272) tambin posee una celobiohidrolasa Ce16A (CBH II ), que forma un sitio activo con cuatro
subsitios interiores para las unidades de glucosa en un residuo de triptfano presente en la superficie del dominio.
Se ha encontrando que la mutagnesis de dicho residuo de triptfano inhibe la funcin de la enzima sobre la celulosa
cristalina pero no sobre sustratos solubles o amorfos (11).
5. Conclusiones
De acuerdo con lo expuesto anteriormente se podra concluir que:
La eliminacin de ambas cadenas celobiohidrolasas (CBH II y EG II) del hongo T. reesei imposibilita a la
enzima para desdoblar la celulosa cristalina.
Segn los resultados de las investigaciones realizadas con la cepa w272 del hongo T. reesei, es posible que
se forme un subsitio a la entrada del sitio activo de la celobiohidrolasa CBH II, que cumpla una funcin
primordial en la degradacin de la celulosa cristalina , relacionada con la orientacin de una cadena de
glucano al sitio activo (12).
La endoglucanasa I (EGI) posee un centro activo abierto para unir a la celulosa.
La celulosa puede ser degradada por hidrlisis enzimtica utilizando celulasas procedentes del hongo T. reesei,
constituyendo una opcin efectiva en el proceso de reciclaje del papel, al disminuir el factor econmico y la
contaminacin ambiental a nivel mundial.
6. Bibliografia

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