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Cir.plst. iberolatinoam.-Vol. 36 - N 3
Julio -Agosto -Septiembre 2010 / Pag. 215-221
La s s o , J M.*, Cortina , E.**, Go i, E.***, Are na s , L.***, Na va , P.****, Fe rn nde z, ME.*****, P re z Ca no, R.******
Resumen
Abstract
Durante la ltima dcada, la terapia celular ha emergido como una estrategia til en el tratamiento de diversas enfermedades como la isquemia miocrdica y las
fstulas en la enfermedad de Crohn; pero ltimamente,
hay tambin ya lneas de investigacin centradas en su
uso en reconstruccin mamaria, cuyos resultados van
siendo publicados paulatinamente. Existen varios tipos
de clulas madre adultas que han sido investigadas en estudios preclnicos y clnicos diseados para este propsito: clulas de medula sea, clulas del sistema
circulatorio y mioblastos y, recientemente se est trabajando en una poblacin de clulas madre en el tejido adiposo, que presentan una fcil extraccin y manipulacin.
Estas clulas son capaces de diferenciarse en mltiples
lneas celulares, como los adipocitos y las clulas endoteliales entre otras. En el presente artculo, trataremos de
hacer una revisin de los principios bsicos de las clulas madre derivadas del tejido adiposo (tipos, caractersticas, procesos de obtencin y multiplicacin), los
primeros estudios experimentales y los ensayos clnicos
que estn siendo realizados en la actualidad.
Palabras clave
Key words
Tejido adiposo.
Cdigo numrico 19
*
**
***
****
Numeral Code
19
Lasso, JM., Cortina, E., Goi, E., Arenas, L., Nava, P., Fernndez, ME., Prez Cano, R.
Introduccin
de manera sencilla y eficaz en un husped autlogo y alognico; 5- Ser manufacturada de acuerdo a los requisitos
de la Good Manufacturing Practice (4).
Estado actual de las terapias con clulas madre derivadas de tejido adiposo en el mbito de la Ciruga Plstica
cluyendo el medio, tipo de plstico, concentracin celular, etc.) pueden afectar a la capacidad de diferenciacin
y proliferacin de ASCs (8). En los estudios realizados en
el hospital Gregorio Maran, el hecho de realizar extracciones en varones para regeneracin miocrdica y en
mujeres para reconstruccin mamaria, ha permitido demostrar una mayor proporcin de CM en el abdomen de
las mujeres con respecto al de los varones.
A pesar de los grandes avances que se realizan en la
actividad clnica, todava no existe un acuerdo claro
acerca de la nomenclatura utilizada para describir las clulas progenitoras del estroma del tejido adiposo, lo cual
genera confusin en los foros cientficos. Los trminos
Clulas Estromales Derivadas del Tejido Adiposo (Adipose Tissue-Derived Stromal Cell: ADSC), Clulas de la
Fraccin Vascular de la Grasa (Adipose Stromal-Vascular Cell Fraction: SVF) y Clulas Regeneradoras Derivadas de la Grasa (Adipose-Derived Regenerative Cells:
ADRCs) corresponden a clulas obtenidas inmediatamente despus de la digestin del tejido adiposo por colagenasas.
Por el contrario, los trminos Clulas Provenientes del
Lipoaspirado (Processed Lipoaspirate Cells: PLA) y Clulas Madre Derivadas del Tejido Graso Adherentes al
Plstico (Plastic-Adherent Adipose-Derived Stem Cells:
ASCS) describen a aquellas CM obtenidas despus de
cultivar las anteriormente mencionadas.
Como trmino unificador, podemos referirnos a estos
tipos celulares como Clulas Madre Derivadas del Tejido Adiposo (Adipose-Derived Stem Cells: ASCs) de
acuerdo con el Consenso de La Sociedad Internacional
de la Tecnologa Aplicada a la Grasa (International Fat
Applied Technology Society Consensus) (9); sin embargo,
las propiedades de las clulas frescas sin cultivar distan
bastante de las que presentan las que han sido sometidas
a cultivos, siendo estas ltimas clulas, en principio, de
menos calidad en la reconstruccin de tejidos.
La Sociedad Internacional para la Terapia Celular (International Society for Cell Therapy: ISCT) define los siguientes criterios mnimos para ser consideradas ASCs:
En los primeros datos obtenidos en humanos se ha detectado tambin un mayor nmero de CM en la regin
periumbilical que en la de los flancos. Parece incluso evidente que la densidad de CM derivadas de la grasa es
mayor en el tejido abdominal que en los trocnteres (7).
No obstante, hay quienes sealan que ni el tipo de procedimiento quirrgico empleado, ni la localizacin anatmica de la cual se obtiene la grasa (abdominal,
subcutnea, o subcutnea perifrica), afecta al nmero
total de clulas viables obtenidas de la fraccin estromal
e indican que parece cierto que factores tales como la
Lasso, JM., Cortina, E., Goi, E., Arenas, L., Nava, P., Fernndez, ME., Prez Cano, R.
SVF
PLA
CD 44
+++
CD 73
+++
CD 90
+++
CD 166
+++
CD 34
SP (subpoblaciones)
CD 11b
SP
CD 14
SP
CD 19
SP
CD 45
SP
CD 105
CD 146
HLA-DR
Estado actual de las terapias con clulas madre derivadas de tejido adiposo en el mbito de la Ciruga Plstica
de las CM derivadas de la grasa en la regeneracin de determinados tejidos, incluso sin aplicarlas en animales de
experimentacin. Mizuno demostr la regeneracin in
vitro del tejido adiposo mediante ASCS con tcnicas de
inmunofluorescencia, despus de 8 semanas (11).
En extremidades isqumicas de ratas, la administracin tanto intramuscular como endovenosa de ASCs aument la vascularizacin. Este hecho se produjo tanto por
la diferenciacin de las mismas en clulas endoteliales,
como por su secrecin de factores de crecimiento (12).
En estudios realizados en colgajos, la necrosis originada por un inadecuado aporte sanguneo es una complicacin comn. La poblacin de CM en el tejido adiposo
posee un potencial angiognico elevado, lo que podra
contribuir en el tratamiento preventivo y efectivo de los
colgajos; en este sentido se han desarrollado trabajos en
ratones en los que se prueba que mejora la viabilidad de
colgajos randomizados de piel. Hay autores que han
constatado que el mecanismo de prevencin de la necrosis podra deberse a la diferenciacin directa de las CM
derivadas de tejido adiposo en clulas endoteliales o por
un efecto indirecto debido a la liberacin de factores de
crecimiento angiognico (13), al igual que en las extremidades isqumicas.
Tambin se ha probado su eficacia en la cicatrizacin
de lceras mediante aplicacin tpica, as como en ulceras en ratones diabticos (14).
En ciruga periodontal o en la regeneracin del hueso
craneal se han obtenido tambin resultados satisfactorios,
incluso en la regeneracin de la pared miocrdica despus de un infarto (15).
2007, prospectivo, doble ciego, randomizado, que incluy 36 pacientes. Los primeros resultados se han presentado en el 7th International Symposium on Stem Cell
Therapy and Cardiovascular Innovations celebrado en
Mayo de 2010. En este ensayo clnico, se extrajeron CM
procedentes del tejido adiposo, que fueron inyectadas en
el espesor del miocardio infartado. Mediante un mapeo
de diferencia de potenciales con la tcnica NOGA, se
identific con exactitud la zona infartada del corazn, de
manera que, mediante cateterismo, se realizaron inyecciones intramiocrdicas de las CM procedentes de la
grasa. Estas clulas inyectadas se encontraban en suspensin y eran clulas frescas, que no haban recibido
ningn pase o expansin. En dicho Simposium se presentaron resultados que demuestran la mejora de la calidad de vida de estos pacientes tratados.
La transferencia de ASCs combinadas con grasa libre
ha desempeado un papel importante en el mantenimiento del volumen de grasa inyectada (17). Estas clulas tambin se estn aplicando en Ciruga Plstica para
promover el mantenimiento del tejido graso autlogo
trasplantado para aumentar el volumen mamario en pacientes sometidas a cuadrantectoma mamaria, mediante
una tecnologa similar a la empleada en el estudio PRECISE. Aunque existe un precedente en Japn, donde se
realiz un estudio para regenerar tejido mamario despus
de reseccin parcial de la mama, no existen resultados
publicados a largo plazo, por lo que el primer ensayo clnico multicntrico a nivel mundial es el que se est llevando a cabo en Europa (Estudio RESTORE). Quiz en
el futuro este tipo de tcnica podra ser un accesorio importante en los procesos de reconstruccin mamaria.
En Espaa, el estudio RESTORE est siendo realizado en el Hospital General Universitario Gregorio Maran, junto con otros 5 centros europeos localizados en
Reino Unido, Italia, Blgica y Francia. En este ltimo
pas se centralizan las pruebas de imagen realizadas en
las pacientes, sobre las que se evaluar la seguridad y la
eficacia del tratamiento. Se trata de un estudio de fase IV,
en el que se practican rellenos de cuadrantectomas mamarias con grasa autloga enriquecida con CM de origen
mesenquimal procedentes de la grasa abdominal (Fig.4).
Dicho estudio est llegando a su fase final y los primeros
resultados se han presentado en Julio de 2010 en el Simposium Winchester/Jersey Masterclass in Oncoplastic
Breast Surgery and Modern Concepts: Breast Aesthetics
& Reconstruction Symposium celebrado en Coventry
(Reino Unido). La seleccin del hospital Gregorio Maran se efectu por la experiencia previa de su Servicio
de Ciruga Plstica en el estudio RESTORE y por el amplio volumen de pacientes con cncer de mama que a lo
largo del ao pasan por este Servicio. En este estudio europeo se incluyeron 70 pacientes con cuadrantectoma
mamaria y un perodo libre de enfermedad de ms de 2
aos. Las pacientes no podan tener un estado tumoral
Lasso, JM., Cortina, E., Goi, E., Arenas, L., Nava, P., Fernndez, ME., Prez Cano, R.
lutivos tipo atrofia hemifacial, etc. Sin embargo, se recomienda variar la estrategia de relleno con grasa autloga
mediante un enriquecimiento de la propia grasa con clulas adiposas progenitoras. Los resultados preliminares sugieren que este tratamiento es efectivo y seguro (19).
Pero el uso de CM en Ciruga Reconstructiva no est
exento de problemas ticos y legales. Sabemos que existe
un tipo de clulas llamadas Tumor Initiating Cell o Cancer Stem Cells (CSC), cuya presencia est demostrada en
algunas lneas celulares de cncer de mama. Segn esta
hiptesis, ciertos tumores estaran producidos por clulas
cuyas propiedades coinciden con las de las CM: autorrenovacin, teratogenicidad y deferenciacin multilinear,
lo cual podra explicar la heterogenicidad del cncer de
mama. De hecho, los tumores mamarios que expresan la
molcula de superficie CD44, pero no expresan la CD24,
se clasifican como tumores derivados de las CSC. Esto
obligara a replantear el abordaje de estos tumores y a
modificar las lneas de actuacin (20).
No obstante, dado que no se conoce con profundidad
la interaccin que estas CSC pueden tener con las ASCs,
es importante destacar que el uso de las mismas ha de ser
siempre controlado, procurando que las actuaciones sobre
los pacientes estn dentro de ensayos clnicos, puesto que
es la manera efectiva y legal de obtener resultados fiables y reproducibles con esta nueva forma de tratamiento,
sin descuidar la seguridad de los pacientes y valorando la
posibilidad de que se puedan producir efectos adversos
que deben ser comunicados a las autoridades sanitarias.
Conclusiones
Las ASCs han emergido como un nuevo y prometedor
tipo de CM con dos claras ventajas sobre las clulas de la
mdula sea, sangre o msculo esqueltico anteriormente
utilizadas. Las CM derivadas del tejido adiposo tienen
una manera fcil y reproducible de tratamiento, lo que
permite su obtencin en grandes cantidades por un mtodo mnimamente invasivo, as como un potencial proliferativo incrementado para expandirse en cultivos, ya
sea debido a las propiedades de las clulas o como resultado de una mayor frecuencia de CM dentro de la poblacin usada al inicio del cultivo.
Existen algunas preguntas cientficas y mdicas relacionadas con las CM que necesitan encontrar respuesta
antes de su aplicacin clnica sistemtica. Una de ellas es
el desarrollo a gran escala de tcnicas de procesamiento
de acuerdo a los requerimientos de las Buenas Prcticas
de Produccin (Good Manufacturing Practices, GMP).
Esto permitir determinar cmo manipular, almacenar y
moldear las ASCs, siempre bajo condiciones GMP para
evitar la contaminacin.
Un punto interesante, que merece una investigacin
preclnia profunda, es la inmunogenicidad de las ASCs.
Como hemos observado, clase I y II del complejo mayor
Estado actual de las terapias con clulas madre derivadas de tejido adiposo en el mbito de la Ciruga Plstica
ASCs y por lo tanto, se ha hipotizado sobre que estas clulas podran comportarse como clulas donantes universales y por tanto, podran ser usadas para trasplantes
autlogos y alognicos. Otra propiedad interesante de
estas clulas es su capacidad de producir un efecto inmunosupresor, lo que podra ser utilizado para control de
la enfermedad injerto contra husped.
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9.
10.
11.
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Bibliografa
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18.
19.
20.