Anlisis de la Columna de Winogradsky

Microbiologa

Zona anaerobia: dentro de esta zona existen condiciones para el crecimiento de dos tipos
microorganismos. La fermentacin de materia orgnica o la respiracin anaerobia, en este
caso se observa la formacin de H2S, lo cual utilizan este substrato como aceptor final de
electrones, es decir para su respiracin.

Zona anaerobia ms profunda

-Bacterias reductoras del sulfato (BRS): Desulfovibrio, Desulfobacter, Desulfotomaculum o
Desulfomonas. Usan el sulfato, u otras formas parcialmente oxidadas de azufre como el tiosulfato, y
generan grandes cantidades de H2S en el proceso. La reaccin de reduccin bacteriana del sulfato
es la siguiente: SO42-+ 8 H+ H2S + 2 H2O + 2 OH- . Este H2S reaccionar con el hierro presente en
el sedimento, produciendo sulfuro de hierro (II), que precipita y da el color negro.

Se debe tener en cuenta que no todo el H2S reacciona con el sulfuro de hierro (II), porque existen
partes que se difunden y son utilizadas por las bacterias verdes y rojas del azufre.
Dentro de la columna se puede observar el metabolismo bacteriano a travs de colores por:
Zona anaerobia ms superficial
-Bacterias rojas no del azufre: dentro de estas podemos encontrar a Rhodospirillum,
Rhodomicrobium o Rhodopseudomonas, las cuales son bacterias fotoorganotrofas, que solo pueden
realizar fotosntesis en presencia de carbono orgnnico; estos microorganismos forman una capa de
color rojo-anaranjado.
6 CO2 + 6 SH2

C6H12O6 + 6 S (fotosntesis de las bacterias anaerobias)

-Bacterias rojas del azufre: (Chromatium, Thiospirillum, Thiocapsa, Amoebobacter, forman una capa
de color rojo-prpura) y las bacterias verdes del azufre (Chlorobium, Pelodyctium), son bacterias
fotolitrtofas y realizan una fotosntesis anoxignica, utilizan como reductor el H2S, generando
sulfatos (SO42 -), las bacterias verdes del azufre utilizan la energa luminosa para transferir tomos
de hidrgeno desde el sulfuro de hidrgeno hasta el NADP. Utilizan para la obtencin de ATP una
cadena transportadora de electrones simple, en una forma de fotosntesis no cclica. En otras zonas
cercanas, bacterias como Gallionella procesan el Hierro formando una capa negra.

Amoebobacter: es un gnero de bacterias prpura del azufre (familia Thiorhodaceae) que tienen las
clulas esfricas o alargadas, que se agrupan en colonias ameboides sin una cpsula que encierra y
que ocurren en el barro y el agua estancada.
-Bacterias fermentadoras: dentro de estas bacterias aparece el gnero de Clostridium las cuales son
anaerobias estrictas y solo crecen cuando hay ausencia de oxgeno en el sedimento, esta bacteria
es celuloltica degradando la celulosa hasta convertirla en glucosa y as la fermentan en compuestos
simples como: etanol, cido actico, cido lctico, cido succnico, etc., siendo estos productos
finales de la fermentacin. Estos compuestos a su vez sern respirados por las bacterias sulfatoreductoras.
-Bacterias metangenicas: pueden desarrollarse bacterias productoras de metano CH 4 las cuales se
observan como burbujas de gas en el fondo de la columna. Cuando ese metano es transportado a
ambientes con oxgeno es oxidado por bacterias metanotrficas a CO2.
CH4 + 2O2 CO2 + 2H2O +ATP

Zona microaerfila

Aparecen bacterias oxidadoras del azufre como Beggiatoa, Thiothrix o Thiobacillus, que usan como
fuente de carbono la materia orgnica, y oxidan el H2S que llega por difusin desde las capas
inferiores a azufre elemental. La reaccin qumica que se lleva a cabo es la siguiente (reaccin de
Bunsen): O2+ H2S H20 + S0. Son, por lo tanto, microorganismos mixtrofos. Estos
gneros acumulan grnulos de azufre en sus citoplasmas por oxidacin del H2S. Si se deja
evolucionar el sistema, cuando la concentracin de H2S es muy baja, los grnulos de azufre
elemental intracitoplasmtico presentes en estas bacterias empiezan a desaparecer por oxidacin
total a sulfato (H2S S0 SO42-)
Agar Fea
Colonias observadas:
Hongos filamentosos
1. Colonia de color caf, bordes irregulares, de
aspecto rugoso, opaca.
2. Colonia brillante, bordes definidos, color blanco,
brillante
3. Colonia de color mbar, bordes irregulares, de
aspecto liso, con halo transparente

Agar Almidn con lugol

Agar Nutritivo

Zona aerobia

Esta es la parte de la columna ms rica en oxgeno y ms pobre en azufre. El agua de la parte

superior de la columna contiene abundantes poblaciones de microorganismos aerobios, que
aparecen normalmente en hbitats acuticos ricos en materia orgnica. Suelen ser microorganismos
flagelados, lo que les permite moverse y establecerse en nuevas reas, as como microorganismos
fotosintticos: algas (diatomeas) y cianobacterias filamentosas. El oxgeno que producen estos
productores primarios difunde desde la superficie, creando condiciones similares a las que existen
en un lago con sedimentos ricos en nutrientes. Las cianobacterias y todos los vegetales actuales
(cloroplastos) utilizan como dador de protones y electrones el agua, necesitan para ello dos
fotosistemas, Es una forma de fotosntesis no cclica.

Agar ENDO
1. Colonia de bordes definidos, puntiforme,
opaca, de color rosa. Se observaron bacilos
Gram negativos.
2. Colonia brillante, color rosado claro con halo
transparente alrededor, apariencia lisa. Se
observaron bacilos Gram negativos.
3. Colonia brillante, bordes definidos, color
rosado oscuro, brillante de aspecto liso. Se
observaron bacilos Gram negativos
4. Colonia de bordes irregulares, brillante,
color rosado claro, aspecto rugoso. Se
observaron bacilos Gram variables.

FOTOS DE LOS GRAM:

1.

3.

4
.

Se realizaron pruebas bioqumicas

TSI a travs del caldo tioglicolato de la mesa 1

A/A con produccin de gas

TSI / MIO (3) +++ / SC (2) +

Segn estas pruebas MIO y SC, se obtuvo un BGN fermentador de glucosa, oxidasa positiva.
BBL CRYSTAL

BBL CRYSTAL (POSITIVOS)

El BBL Crystal Enteric/ NF identific a Aremonas hydrophila

Esto nos indica una concordancia desde la caracterstica morfolgica de la colonia, hasta su
comportamiento dentro de las pruebas bioqumicas, tanto el BBL Crystal como en Tubo.
Entonces con estos resultados podemos determinar que Aeromonas hydrophila es un
microorganismo que est presente en ambientes acuticos (agua del subsuelo, aguas superficiales,
marinas, agua potable y residual). Aeromonas es fcil de detectar en aguas dulces. En el caso de las
aguas de consumo tratadas, su desarrollo se debera sobre todo a su proliferacin en sistemas de
distribucin.
Se conoce que Aeromonas hydrophila es un bacilo Gram negativo fermentador de glucosa, oxidasa
positiva, este microorganismo es altamente patgeno y que puede ser transmitido a travs de los
peces, heridas abiertas, consumo de agua, etc.

El BBL Crystal para GP no se pudo leer, ya que uno de los controles dio positivo y se esperaba un
control negativo.

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioBiodiversidad.htm
http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?
option=com_content&view=article&id=134&Itemid=112
Brock Biologa de los microorganismos. 10 edicin (2003). J. Parker, J.M. Martinko,M.T. Madigan.
Pearson Education.
Manual Prctico de Microbiologa. 3 edicin (2005). R. Daz, C. Gamazo, I. Lpez-Goi.ElsevierMasson