Guía Práctica de Histología y Embriología

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ESCUELA DE CIENCIAS 810MDICAS V TECNOlGECAS
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DEPA,RTAMENTO DE ClENJCtlAS MORFOlGlCAS
FORENSES
GUA PRCTICA DE HISTOLOGA y EMBRIOLOGA
ACTUALIZADA EN 2015
Tcnica histolgica: la morfologa microscpica de los tejidos se

estudia acondicionando un rgano o un trozo del mismo. En las
prcticas histolgicas el estudiante debe conocer los pasos a seguir en
la preparacin del rgano en el cual, una vez procesado identificar
microscpicamente los tejidos y estructuras que lo conforman. El
proceso a seguir para obtener una lmina con el corte del rgano
debidamente coloreado se denomina Tcnica Histolgica para
Microscopa ptica o Tcnica de la Parafina, dicha tcnica consta
de varias etapas, a saber:
Objetivo general
- Obtencin de la muestra: extraccin de pequeos trozos de tejido
de un rgano especfico, proveniente de un animal de experimentacin
o de seres humanos.
Conocer la tcnica para la preparacin de tejidos para microscopa

ptica y el manejo y cuidado del microscopio ptico.
Objetivos Especficos
- Fijacin: es una etapa muy importante y su propsito es mantener

la morfologa del tejido 10 ms parecida posible a la que ste tenia
antes de hacer la extraccin. Con este paso se evita la alteracin del
tejido, ya que al tomar un fragmento, ste se muere y pierde sus
caractersticas normales. De all que este paso es fundamental para
preservarlo. Para los cual se debe fijar el tejido por alguno de los
mtodos que se explican a continuacin:
Reconocer los pasos de la tcnica histolgica para microscopa ptica.

Conocer la importancia diagnstica de una correcta orientacin del
tejido al momento de la inclusin en parafina.
<,
Diferenciar los conceptos de, frotis o extendido y corte histolgico
Identificar las partes del microscopio ptico de campo claro (mocc)
Qumica: por inmersin o perfusin
Diferenciar los grados de aumentos del microscopio (mocc) y para qu

se utilizan.
Lograr que el participante
obtenga y desarrolle
manejar el microscopio (mocc).
Fsica: congelacin
En esta prctica se considera solo la fijacin qumica por inmersin
que consiste en sumergir el tejido en una sustancia qumica fijador,
por un tiempo determinado, el cual es proporcional al tamao del
tejido. Este hecho se fundamenta en que, el fijador tiene coeficiente de
penetracin en el tejido; entonces a mayor tamao del tejido, mayor
ser el tiempo de fijacin y mayor la cantidad de fijador utilizado; sin
embargo hay que tener en cuenta que los trozos de tejido que se
manipulan deben ser preferiblemente pequeos, as el fijador penetra
las destrezas para
Enfocar cortes de diferentes tejidos en el microscopio ptico de campo

claro.
delgados, cuyo grosor para microscopa

micrmetros.
ms rpido. Si tomamos una muestra grande cuando el fijador penetre

hasta el centro del tejido, ste ya estara estructuralmente alterado. Las
causas que alteran la morfologa del tejido son: el ataque bacteriano
externo y la autolisis interna debido a sus propias enzimas celulares.
ptica varia entre 5-10
Este paso es muy importante y se debe tener cuidado en obtener

cortes verdaderamente delgados que permitan el paso de luz a travs
del tejido para la .formacin de la imagen y la visualizacin de los ms
pequeos detalles.
Existen muchos tipos de fijadores, como el cloruro de mercurio,

cido pcrico, Bouin, Zenker, formalina, entre otros, siendo ste ltimo
el fijador ms usado, que es una disolucin de formal en agua al 10%.
Una vez hechos los cortes, se colocan en una piscina de agua y de all
se montan en una lmina portaobjeto, en donde la muestra de tejido
queda disponible para seguir el proceso.
- - Deshidratacin: como su nombre lo indica, es una etapa en la que

se extrae el agua del tejido y se reemplaza con alcohol, utilizando para
ello una serie de baos crecientes de alcohol, comenzando con alcoholal 70%, 95% y 3 baos de alcohol al 100% por 30 minutos en cada
uno. Lo que se busca con este paso es preparar al tejido para su
encuentro con el medio de inclusin, que en este caso es la parafina.
- Aclaramiento: la muestra que fue colocada en la lmina contiene

parafina la cual se extrae usando nuevamente el xilol que disuelve la
parafina.
- Rehidratacin: el xilol que penetr en la muestra durante
. - Aclaramiento: una vez deshidratado el tejido, debemos sustituir el

alcohol por una solucin miscible . en. el medio de inclusin.
Generalmente se usa xilol. La duracin de este paso es de 30 minutos.
la fase anterior, se debe desplazar con agua. Esto se logra con baos de
alcohol con agua en concentraciones decrecientes, es decir, de alcohol
al 100% al 70% y al 50%. Este paso es fundamental para que ocurra la
coloracin, pues la reaccin qumica que ocurre entre el colorante y las
estructuras celulares requiere un medio acuoso.
- Inclusin: una vez aclarado el tejido se coloca en el medio de

.inclusin, que en este caso es la parafina a 60C, se pasa por dos o tres
envases con parafina lquida, a fin deque sustituya el xilol que haba
penetrado en el tejido. Por ltimo se coloca el tejido en un molde y se
aade parafina a temperatura ambiente hasta que solidifique y luego se
saca del molde el tejido incluido en la parafina. Ahora tenemos
formado un bloque slido llamado taco que se lleva al micrtomo para
hacer los cortes. Es necesario endurecer el tejido lo suficiente como
para obtener delgadsimos cortes con la hojilla del micrtomo.
- Tincin: para microscopia ptica se cuenta con un gran nmero de

colorantes, pero la coloracin de rutina es la Hematoxilina y Eosina
(H-E).
- Montaje: es el ltimo paso de la tcnica y consiste en deshidratar
el tejido para evitar la descomposicin y as la lmina se conserva por
mucho ms tiempo, colocar una gota de Blsamo de Canad sobre el
tejido (que est sobre la lmina portaobjetos) y cubrirlo finalmente con
una laminilla o lmina cubreobjetos.
- Cortes: para realizar el corte del tejido el taco se coloca en el

micrtomo (micra: pequeo, tomo: corte), que es un aparato equipado
con una hoja de acero y un brazo que hace avanzar al bloque tisular en
incrementos iguales y especficos, para obtener cortes sumamente
2
queratina y citoplasma celular, y azul claro en el mucngeno

colgeno, o sea en el tejido conjuntivo.
Colo raciones utilizadas en microscopia ptica:

L Hematoxilina-Eosina
(H-E): es una coloracin que utiliza dos
tipos de colorantes. Fundamento: la hematoxilina que es un colorante
bsico, colorea los componentes cidos de la clula (ncleo) de color
morado y la eosina que es un colorante cido se une a estructuras
bsicas de la clula (citoplasma) otorgndole una tonalidad rosada. Es
decir, que ocurre una reaccin qumica entre una base y un cido para
formar una sal coloreada.
4. Coloracin con metales: varios metales se emplean en las

tcnicas histolgicas, ms que como colorantes actan impregnando a
ciertos componentes celulares. Las sales de plata se usan para
demostrar aparato de Golgi, y las Neurofibrillas. El Tetrxido de
Osmio es til para demostrar ciertos lpidos como la mielina de los
nervios motores y el Cloruro de Oro se usa en Neurohistologa para
demostrar las terminaciones nerviosas.
Completar (l,Sptos):
5. Coloracin con hematoxilina frrica: til para estudiar detalles
celulares finos. Ej. Las fibras elsticas y las mitocondrias presentes en
el citoplasma de ciertas clulas.
Esta mezcla de colorantes permite diferenciar el ncleo y el

citoplasma celular ya que ambas estructuras adquieren colores (violeta
y rosado), as la coloracin H-E evidencia fundamentalmente la forma
y estructura externa del ncleo. Tambin las sustancias extracelulares
se tien con la eosina, por lo que podrs observarlas de color
, mientras que las sustancias que se tien con
hematoxilina las observars de color ------
6. Tricrmico de Cajal y Gallego: implica el uso de tres colorantes.

Para demostracin diferencial y selectivamente las fibras colgenas y
del msculo.
7. La Orcena y la Fucsina resorcina: son colorantes para fibras
elsticas. La orcena es un colorante especfico para fibras elsticas, la
cual veremos entre bordes castao oscuro, mientras que las dems
estructuras tisulares se tien de color marrn plido. Las fibras
elsticas teidas con resorcina fucsina las veremos de color ms
violceo o azulado.
- Los tejidos que reaccionan con un colorante bsico como la

Hematoxilina, se dice que son
y que presentan
______
, un ejemplo de ello es el ncleo.
- Los componentes texturales que se tien de colorantes cidos se
dice que son
y que presentan
"
Ejemplo de ello es la mayor parte del citoplasma.
8. Carmn de Best: para tincin nuclear y deteccin de glucgeno.

Artificios de Tcnicas (Artefactos)
2. cido Peridico - Schiff (P AS): se usa para determinar la

presencia de macromolculas ricas en glcidos como glucgeno,
glicoprotenas
y
Glucosaminoglucanos.
Una lmina de tejido
coloreada con PAS se observar de color fucsia al microscopio ptico.
Son todas las alteraciones que se producen en los preparados

histolgicos por defectos o fallas en una o ms de las etapas de la
tcnica.
3. Coloracin con Azn (Tricrmico):

se obtiene tres colores
diferentes: Azul oscuro en los ncleos de la clula; rojo en el msculo,
3
- Defectos de fijacin, deshidratacin,

desgarros y retracciones.
inclusin, pueden causar
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- Durante el corte puede aparecer desgarros por melladuras en la

cuchilla.
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Si el corte no es cuidadosamente
pliegues o arrugas.
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extendido pueden aparecer
.
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- Defectos en la coloracin son inherentes a la calidad y preparacin

de los colorantes as como escasez o exceso de colorante, genera una
coloracin poco definida de las estructuras.
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Interpretacin de los cortes histolgicos:
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Una vez que se obtiene el corte de tejido en una lmina,

el
estudiante debe imaginarse lo que ver al microscopio, primero debe
conocer el rgano que va a estudiar y visualizarlo en tres dimensiones,
entender sus caractersticas macroscpicas y tener nociones sobre su
estructura interna.
Recordando que los rganos son estructuras
tridimensionales y cuando se realiza un corte, lo que veremos en la
lmina estar en dos dimensiones. Completar la siguiente imagen en
base al tipo de corte sealado para ste rgano tubular: (1,5 ptos)
Responda las siguientes preguntas: (2ptos.c/u)

1. A su criterio Cul es el paso clave de la Tcnica de la
Parafina? Por qu?
2. Mencione y explique los tipos de Microtomo.
Investigue los conceptos de: Biopsia, Biopsia Excisional,

Incisional y Autopsia.
Biopsia
3. Explique en que consiste la tcnica de inclusin en medio

slido.
Microscopa: con el fin de estudiar la morfologa microscpica de

cualquier rgano es necesaria su observacin en un microscopio, para
lo cual, el tejido debe someterse a una serie de procesos, con el fin de
lograr mantener la morfologa del rgano in vivo, acondicionndolo
para su correcta interpretacin. En las prcticas de histologa se utiliza
el microscopio ptico como herramienta, el cual est compuesto por
sistema ptico y un sistema mecnico.
sumergido, en su parte inferior, en una gota de aceite de inmersin

para lograr ver la imagen con total nitidez. En las prcticas de
histologa se trabajar casi siempre con los objetivos secos.
- Ocular: es un lente cercano alojo que aumenta aun ms la imagen
(10 o 12X) y la proyecta sobre el ojo del observador.
Actividad: indique basado en el aumento total de estas imgenes,
Qu aumento tendra el ocular y el objetivo, para obtener este
resultado? (2 ptos).
El sistema ptico:
- Lmpara:
produce la energa luminosa.
a) Un aumento total de 400X:
- Condensador:
agrupa la energa luminosa proveniente de la
lmpara, en un haz de luz, y lo proyecta directamente al objeto en
estudio.
- Diafragma:
condensador.
Aumento Objetivo:
Aumento Ocular: -----~------
regula la cantidad de luz que entra a travs del
b) Un aumento total de lOOOX:

Aumento Objetivo:
- Objetivos: son lentes de aumento, llamados as por estar ms cerca.

del objeto a estudiar, su funcin es recolectar el haz de luz que ha
atravesado el objeto, aumentar la imagen del mismo y proyectar dicha
imagen hacia el ocular. El microscopio generalmente consta de tres
objetivos secos, (llamados as porque no requieren aceite de inmersin
para poder ver con nitidez la imagen):
Aumento Ocular: ------El sistema mecnico: El soporte mantiene la parte ptica, se divide en
dos: pie o base y el brazo.
- Base o pie: es el soporte del microscopio
1. Objetivo de poco aumento (2,5 o 5 X) o lupa
- Brazo: conecta el pie a las partes pticas
2..0bjetivo de mediano aumento (10 X)
- Tornillos de enfoque:
3. Objetivo de gran aumento (40 o 45 X)
que evita que se caiga.
- Tornillo macromtrico: permite mover la platina hacia arriba

y hacia abaj o para enfocar la lmina.
El aumento de cada lente, indica las veces que el objeto ha sido

agrandado. Existe adems otro objetivo llamado de Inmersin que es
de gran aumento (lOOX) y que debe su nombre a que necesita ser
Tornillo
micromtrico:
tiene igual funcin que el
macromtrico, solo que sus movimientos son casi imperceptibles y
6
permite un ptimo enfoque de la lmina, es decir que este corrige el

enfoque.
B.- Identifique las partes del microscopio ptico que se muestran a

continuacin: (3 ptos.)
- Platina: es un soporte para colocar la lmina u objeto de estudio.

- Cabezal: contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser
monocular o binocular.
1"
..('.
- Revolver: contiene los sistemas de lentes objetivos. Al girarlo,

permite cambiar los objetivos.
j'
- Carro: En algunos microscopios, la plataforma donde se coloca la

muestra se denomina carro y contiene pinzas para sujetar la
preparacin y tornillos para el movimiento horizontal y vertical, con
escalas graduadas.
A.Responda: Por qu es importante
histologa? (1 ptos.):
el microscopio
para la
l-
INVESTIGUE:
(6 ptos- 2e/u)
En esta prctica utilizaremos como herramienta para lograr un buen

enfoque diversas lminas, segn el programa prctico vigente. El
profesional de la salud puede utilizar diferentes mtodos para el
estudio de los tejidos y fluidos corporales con fines diagnsticos. El
objetivo de estas lminas es que el estudiante observe las diversas
formas celulares que podemos encontrar en los diferentes fluidos,
secreciones y tej idos corporales.
Qu es el poder de resolucin?
El frotis de sangre perifrica y la citologa vaginal, tienen tcnicas

especiales y representan una herramienta que se utiliza en el
laboratorio de rutina. Se debe tener presente la importancia tanto de los
frotis como de los cortes histolgicos en el anlisis y diagnstico de
enfermedades.
Qu es el aumento total? y Cmo se calcula el aumento total?
Qu se entiende por enfoque? Y Qu caracterstica

enfoque para que se considere ptimo?
debe tener un
"
DESCRIBA, los siguientes cortes histolgicos de acuerdo a los

objetivos de la prctica: (2ptos.c/u)
Lamina # 1 Esfago (Azn)
Lmina #2 Ovario (H.E.)
Lmina #3 Rin (H.Frrica)
1-
Prctica 2. Morfologa celular
Observacin de lminas: (15 ptos. 5 ptos c/u)

Rin
Coloracin:
Descripcin:
Objetivo General
Caracterizar morfolgicamente, algunos tipos celulares y reconocer
los elementos constituyentes de estos.
Observar las caractersticas morfolgcas de diferentes tipos celulares
(forma, tamao, nmero, organizacin)
Reconocer el complejo degolg en las clulas coloreadas para tal fin.
Reconocer las mitocondrias en las clulas teidas con colorantes
especficos.
Diferenciar el glucgeno como inclusin en el citoplasma celular del
. preparado histolgico seleccionado para tal fin.
Introduccin
El ser humano est constituido por clulas en toda su extensin y estas
adoptan diferentes formas segn la funcin que desempeen; es decir
.que podemos encontrar una gran variedad de formas y tamaos
celulares, la forma ms .frecuente como se estudia la clula es la
.' esferoidal, pero 'ellas pueden ser cbicas, planas, cilndricas,
prismticas, irregulares, variables, etc. El tamao de las clulas'
tambin es variable pudindose encontrar clulas muy pequeas como
por ejemplo los espermatozoides y clulas de mayor tamao como
algunas neuronas y el ovocito. Adems de la forma y el tamao, las
clulas pueden organizarse de distintas maneras: en estratos, hileras,
fascculos, formando corpsculos, folculos, tbulos, etc.
Las clulas poseen, para poder ejercer sus funciones, estructuras
. intracitoplasmticas, denominadas organelas, que varan en cantidad
de acuerdo al tipo celular estudiado. Dichas organelas son muy
pequeas, por lo que el poder de resolucin del microscopio ptico
(0.25 um) no logra captarlas de manera ntida ni con suficiente
aumento, es por esto que para su estudio con el microscopio ptico, se
hace necesario el uso de tcnicas de coloracin diferencial, las cuales
colorean de manera selectiva un tipo de organela.
Esquema con Objetivo de 40X:
10
Ganglio Raqudeo
Coloracin: ---------------------Descripcin:
Hgado
Coloracin: ----------------------Descripcin:
11
Actividad de cierre: (5 ptos)
2) De ejemplos de inclusiones citoplasmticas

glucgeno) (1 ptos)
Investigue:
1) Enumere las organelas no membranosas
funcin de cada una. (2 ptos)
y explique
(diferentes al
la
3) Diga cuales son los tipos celulares estn representados en el

ciclo celular de una clula Eucariota y explique. (2 ptos)
12
L..
I
Prctica 3. Morfologa celular, ciclo celular y Mitosis
Objetivo General
Reconocer el ncleo de algunos tipos celulares y las diferentes fases
establecidas en el proceso de mitosis.
Distinguir la forma, tamao y nmero de los ncleos de las clulas
seleccionadas.
Apreciar -la relacin ncleo/citoplasma
en los tipos celulares
observados.
Observar, caracterizar y dibujar las diferentes fases de fa mitosis en el
corte suministrado.
Ovario
Introduccin
El ncleo es un importante elemento celular, ya que en l se encuentra
el material gentico de la clula, el cual es el responsable de codificar
la informacin que condiciona la morfologa celular. El tamao del
ncleo varia de acuerdo a cada tipo celular y por lo general se
mantiene una relacin de ncleo citoplasma constante entre cada
clula. La.forma del ncleo tambin V2Ia entre cada tipo celular, 10
que ayuda. a su identificacin, pero -por To genera! mantienen el
siguiente esqucmar.s
esfrico para las clulas redondas o cbicas,
alargadas-u ovoides para las clulas cilndricas y las ahusadas.
Esquema-con Objetivo de 40X:

/'
Debido a que el proceso de mitosis se observar en clulas vegetales,

es necesario comentar un poco respecto a la morfologa de las mismas:
En primer lugar las clulas vegetales poseen pared celular rgida y
compuesta por celulosa; son comunes las grandes vacuoIas
citoplasmticas, as como los nuclolos mltiples y muy prominentes.
Adems este tipo celular carece de centriolos.
13
Cerebelo
Coloracin:
----------------------Descripcin:
Hgado
14
1-
Raz de Cebolla

~
15
Prctica 4. Meiosis, Gametognesis
y Embriologa
regulado
por
la clula
misma,
manteniendo
elevada
las
concentraciones y actividad de la quinasa Cdk entre ambas divisiones
celulares. Entre la meiosis 1 y la meiosis Il no existe duplicacin de
A.D.N. ".
bsica
Objetivo General
Reconocer las fases del proceso de Meiosis, las diferencias entre la
gametognesis femenina y masculina, las caractersticas morfolgicas
del embrin.
Caracterizar y dibujar las diferentes fases de 'la meiosis I y II con la
ayuda' de libros de texto y atlas y con los cortes suministrados
Identificar las fases de la gameto gnesis femenina y masculina.
Observar las caractersticas histolgicas del embrin humano.
Debido a los acontecimientos especiales que ocurren durante la

meiosis 1, la profase de sta suele dividirse en varias sub fases:
leptoteno; cigoteno, paquiteno, diploteno, diacinesis.
Es importante aclarar el trmino "cromosomas homlogos"; que ser
usado en la descripcin de la meiosis, y que forma parte de las
diferencias con la mitosis: Mediante la realizacin de una prueba
gentica de laboratorio, denominada cariotipo qued demostrado que
la carga gentica de un humano, sin ninguna patologa relativa al
nmero de cromosomas (aneuploidas), es de 46 cromosomas (2n).
sta tcnica permiti distinguir que segn sus caractersticas
morfolgicas, los cromosomas existen en pares homlogos, los cuales
fueron designados diferencialmente con la numeracin del 1 al 22 para
cada par de cromosomas somticos (autosomas) y en el caso del par de
cromosomas sexuales se designan con las letras "X" o "Y".
Meiosis.
Es el proceso de divisin celular que produce cuatro clulas hijas con
la mitad del material cromosmico
(haploide), que la clula
progenitora (diploide); es decir, que involucrala reduccin del nmero
de cromosomas simples de 46 (2n) a 23 (n). Es un tipo de divisin
celular, que nicamente es utilizado por las clulas .sexuales, para
. formar los gametos: espermatozoides y vulos. La importancia de este
tipo de divisin celular radica en que, se procura, con la unin de los
gametos femenino y masculino durante el proces de la fecundacin,
la formacin de un huevo o cigoto diploide. Adems durante la
meiosis ocurre intercambio gnico entre los cromosornas paterno y
materno, lo que se traduce en el mantenimiento de una diversidad
gen tica, mediante la cual, el producto de la fecundacin, tendr un
fenotipo nico, reflejo de la combinacin de los genes matemos y
paternos.
Queda claro entonces que en una clula diploide en divisin, se le

puede evidenciar la presencia de dos representantes de cada tipo, es
decir dos cromosomas "1", dos cromosomas "2" y as sucesivamente.
Los cromosomas homlogos sern los miembros de cada par, por
ejemplo: El par de cromosomas "1" son homlogos entre s.
Gametognesis
humana.
Se define como el proceso mediante el cual, ocurre la

conversin y maduracin de las clulas germinativas primordiales
hacia los gameto s femenino y masculino (vulo y espermatozoide,
respectivamente). Para efectos de esta revisin se considera que la
gameto gnesis ocurre en 4 fases:
Para su mejor comprensin, el proceso de la meiosis se divide en dos

grandes fases: La Meiosis I o divisin reduccional, en la cual esta
involucrada la segregacin de crornosornas hornlogos, permaneciendo
unidas las cromtides hermanas en cada cromo soma, por lo cual se
reduce la carga gnica para las primeras dos clulas hijas; y la Meiosis
11o divisin ecuatorial, la cual es bsicamente igual a la mitosis, con la
segregacin de las cromtides hermanas, exceptuando que no se
produce la duplicacin de A.D.N. previa a la misma, evento que es
A) Diferenciacin de las clulas germinales primordiales.

B) Proliferacin de las clulas germinales.
C) Produccin de clulas haploides.
16
D) Citodiferenciacin.
La gameto gnesis involucra dos procesos diferentes denominados
la Ovognesis en la mujer y la Espermatognesis
en el hombre. En la
Figura 11 se puede observar lo que, graso modo, ocurre en ambos
procesos:
Existen tanto similitudes como diferencias
en la
gameto gnesis femenina y masculina; entre las similitudes estn, que
ambos procesos implican los dos tipos de divisin celular estudiados
(Mitosis y Meiosis); durante la Proliferacin,
un grupo de clulas
progenitoras (Ovogonias o Epermatogonas), ubicadas en las gnadas
respectivas, sufren-divisiones
mitticas iseriadas, de tal manera de
aumentar la cantidad de clulas que sern potencialmente formadoras
de gametos. Una vez culminada la proliferacin las ovogonias o
, espermatogonias formadas, cambian (se Diferencian) a un tipo celular
huevo, las clulas sexuales (Ovocitos o Espermatocitos,
primarios)
que son el tipo celular que entrar en divisin Meitica 1, para
finalmente producir los gameto s (vulo o Espermatozoides).
Una de
las primeras diferencias que se puede observar en la Figura 11, es que,
el producto de la Gametognesis femenina u Ovogness es un solo
vulo grande conabundante
citoplasma y tres cuerpos polares o
polocitos pequeos con escaso citoplasma, 10 que evidencia la
existencia de una citocinesis desigual. Por su parte en la gameto gnesis
masculina o Espermognesis, por cada espermatocito primaria que
entraen meosis se producen cuatro espermstides, las cuales a pesar
de ser clulas haploides deben modificar su morfologa mediante un
procl'':zOque se encuentra incluido dentro cela espermatognesis y que
se denomina espermiognesis
para finalmente originar cuatro
espermatozoides,

Testculo
17
~-
Ovario
Coloracin: ----------------------Descri pci n:
Embrin
Esquema con Objetivo de lOX:
18
Actividad de Cierre: (5ptos)
3) Esquematice la Gametognesis Femenina. (2 ptos)
Investigue:
1) Estructuras que surgen como consecuencia del plegamiento en
el plano lateral del embrin. (2 ptos)
2) Mencione las diferencias morolgicas entre un testculo de un

infante y uno de un adulto. (Lptos)
19

Placenta a trmino
Prctica 5. Embriologa bsica: Placenta y anexos fetales

Objetivo General
Reconocer las caractersticas morfolgicas de la placenta y anexos
fetales.
Observar los elementos que constituyen la placenta a trmino
Identificar los componentes del cordn umbilical como ejemplo de
anexo fetal.
Placenta
La placenta se crea al mismo tiempo que el embrin en desarrollo
invade el endometrio del tero y que el trofoblasto forma el corin
velloso. La formacin del corin velloso pasa por tres etapas:
vellosidades corinicas primarias, vellosidades corinicas secundarias
y vellosidades corinicas terciarias. La placenta humana tiene dos
porciones a saber:
QLaporcin materna que consiste en la decidua basal (procedente
.-del endometrio deltero situado entre el blastocsto y el miometrio), la
decidua parietal (incluye todas las porciones del endometrio, excepto
el punto de "implantacin) y la decidua capsular (porcin del
endometrio que recubre el blastocisto y lo separa de la cavidad uterina,
se atena y acaba degenerando a la semana 22 del desarrollo, debido a
una disminucin" del riego sanguneo). La superficie materna se
caracteriza por tener 8 Q 10 compartimientos llamados cotiledones que
estn separados por tabiques placentarios.
QLa porcin fetal que est formada por las vellosidades corinicas
terciarias procedentes tanto del trofoblasto como del mesodermo
extraembrionario, que en conjunto se conoce como el corin velloso.
Existe otra rea no vellosa conocida como corin liso, el cual est
relacionado con la decidua capsular.
La superficie fetal de la placenta se caracteriza por una placa corinica
bien vascularizada que contiene los vasos sanguneos fetales.
20
Cordn umbilical
Actividad de Cierre: (5ptos)

Investigue:
1) Diga qu es la amniocentesis y cul es su importancia clnica.
(2,5 ptos)
Esquema con Objetivo delOX:
2) Mencione cul es el destino del Alantoides. (2,5 ptos)
21
Prolongaciones citoplasmticas mviles.

Especializaciones
de la Superficie LATERAL de las clulas
epiteliales:
1-. UNIONES OCLUYENTES
Ubicada en la zona ms apical.
e
No permite el paso intercelular
de lpidos
y protenas
especializadas.
Atraen molculas de sealizacin diversas hacia la superficie

celular.
No. es un sello continuo, sino mas bien una serie de fusiones entre las
clulas
2. UNIONES ADHERENTES
Uniones a travs de protenas que vinculan el citoesqueleto

de las clulas contiguas.
Tipos de uniones adherentes:

Zonula adherens; interacciona con la red de filamentos de actina
dentro de la clula.
* Macula adherens o desmosoma; interacciona con los filamentos
intermedios.
3-. UNIONES COMUNICANTES o NEXOS
Consisten en la acumulacin de poros o canales transmembrana
dispuestos muy juntos.
Tambin llamados uniones de hendidura o nexos.

o
Presentes en gran variedad de tejidos, incluidos los epitelios, el
msculo liso y cardaco y los nervios.
Prctica 6. Epitelio de revestimiento

Objetivo General
Reconocer las caractersticas morfolgicas de los diferentes tipos de
epitelios de revestimiento
Observar el epitelio que reviste a diversos rganos.
Observar las caractersticas particulares de las clulas que conforman
cada tipo de epitelio de revestimiento.
Introduccin:
Tapiza la superficie. del cuerpo, reviste las cavidades corporales y
forma glndulas
Matriz extra celular: ESCASA o NULA.
. . Sus clulas Abundantes que poseen caractersticas especiales.
Es A VASCULAR: Se nutren por difusin del Estroma sobre el
cual descansan . .. Membrana basal.
. Forma la porcin secretora de las glndulas y sus conductos
excretores.
Funcionan como receptores sensoriales
.Lasclllh~s.
que : integran
los epitelios poseen caractersticas
especiales:
Tienen.vpolartdad
morfolgica y funcional: Superficies apical,
laterales y basaL
Posee especializaciones de Superficie: Apical; lateral y basal
Que le permiten:
Comunicacin entre clulas.
Seleccionar paso de sustancias a travs de las clulas
e
Fijarse a la membrana basa! de la cual se nutren
>1<
Especializaciones de la Superficie BASAL de las clulas epiteliales:

La regin basal de las clulas epiteliales se caracteriza por varios
elementos:
o
Membrana basal
" Uniones clula-matriz extracelular
Repliegues de la membrana celular basal
Especializaciones de la Superficie Apical de las clulas epiteliales:

1. Microvellosidades
Prolongaciones citoplasmticas que se extienden desde la
superficie apical celular para aumentar la extensin de la misma
(absorcin).
.
2. Estereocilios (estereovellosidades)
Microvellosidades de una gran longitud.
3. Cilios
e .
Clasificacin segn la forma de las clulas

~ Plano (escamosas, pavimentosas): el ancho y la profundidad
de la clula son mucho mayores que su altura.
22
~
~

Yeyuno
Coloracin: --------------------Descripcin:
Cbico: cuando el ancho, la altura y la profundidad son mas o

menos iguales.
Cilndrico (columnares): predomina la altura de las clulas
sobre las otras dos dimensiones.
Clasificacin del Epitelio de revestimiento

Segn el nmero de capas (estratos) celulares:
Simple: Un solo estrato celular de espesor.
Estratificador Dos o ms estratos celulares.
Epitelio Pseudoestratifcado: Todas las clulas descansan sobre la
membranabasal, pero no todas llegan a la superficie luminal.
Epitelio de Transicin
(urotelio):
Epitelio estratificado
con
caractersticas morfolgicas especficas. Presencia de Clulas de
Dogiel o en paraguas (variaciones de la superficie epitelial).
A la nomenclatura de un epitelio, se adiciona la presencia de
especializaciones
. de la superficie
apical
y de queratina.
Nomenclaturas especiales: Mesotelio, Urotelio, Endotelio.
23
Cordn Esperrntico
Tiroides
<,
"
/-...
24
Esfago
Coloracin:
---------------------Descripcin:
Piel
/'
~<
25
Vejiga o Urter (escriba cual vio)

Actividad de Cierre: (2 ptos)

Investigue, los siguientes trminos:
1) Parnquima:
2) Estroma:
26
Glndulas
Paracrinas:
clulas individuales que
secretan molculas seal que no llega a la sangre sino
que difunde al liquido extracelular y afecta a clulas
vecinas, del mismo epitelio.
~ Glndulas
Anficrinas:
Poseen ambos tipos de
secrecin externa e interna. Ej: El pncreas.
****Clulas Autocrinas: El producto de secrecin afecta a la misma
clula que lo secreta.
Existen clulas secretoras no epiteliales: Macrfagos, jibroblastos,
etc.
Glndulas EXOCRINAS.
}> Poseen un ciclo de secrecin: Sntesis intercelular, transporte
y mecanismo de liberacin del producto.
}>
La liberacin del producto puede variar de acuerdo a la
periodicidad y la necesidad de estmulos; as se conocen dos
maneras de liberacin del producto:
~ Secrecin constitutiva: Se encuentra en casi todas las
clulas glandulares; Es una liberacin continua del
producto de secrecin la cual.NO REQUIERE de
estmulos externos.
}> Secrecin regulada: Se observa en clulas glandulares
especializadas, las cuales REQUIEREN de estmulos
externos para la liberacin de productos de secrecin
especficos. El producto de secrecin se almacena en
vesculas en espera de un estmulo.
~ Clasificaciones de las glndulas EXOCRINAS
}> Segn el MECANISMO de secrecin de sus productos:
Glndulas Exocrinas de secrecin Merocrinar El producto de
secrecin se empaqueta en vesculas limitadas por membranas, son
enviadas a la superjicie apical de la clula y liberadas por exocitosis.
Ej: Glndulas exocrinas del pncreas. Glndulas sudorparas de la
piel.
. Glndulas exocrinas de secrecin Apocrina: El producto de
secrecin se libera en la superficie apical de la clula junto con una
porcin de la clula (plasmalema y citoplasma). Ej: Glndula
. mamarta activa y glndulas sudorparas apocrinas.
Prctica 7. Epitelio glandular y Tejido Muscular

Objetivo General
Reconocer las caractersticas morfolgicas del epitelio glandular y del
tejido muscular
Observar las caractersticas morfolgicas de las glndulas salivares
como ejemplo de glndulas exocrinas
Observar las caractersticas morfolgicas del pncreas como ejemplo
de glndula anficrina.
Diferenciar 'las caractersticas morfolgicas de cada tipo de tejido
muscular.
Introduccin:
Concepto de glndula,
Son clulas o grupos de clulas cuya funcin es la secrecin de
un producto que ella misma elabora.
Se{:f'ecir. proceso por el cucl Ciertas clulas transforman
. compuestos de bajo peso molecular que han captado de la sangre, en
productos especificas que son liberados de la clula.
Tambin recibe este nombre ia sustancia.producida.
Si se mantiene una conexin con el epitelioque le dio origen se habr
formado una glndula exocrina, de lo corurario ser, una glndula
endocrina,
Clasificaciones de las glndulas.
~ Segn el DESTINO de sus productos:
}> Glndulas
Exocrinas: son aquellas que liberan el
producto de secrecin por medio de un sistema de
conductos excretores que se abren a una superficie
externa o interna.
}> Glndulas
Endocrinas:
liberan el producto de
secrecin directamente hacia el tejido conjuntiva en
donde se introduce en el torrente sanguneo (hormonas)
para alcanzar sus clulas diana.
27
Glndulas exocrinas de secrecin Holocrina: El producto de

secrecin se libera por un mecanismo de apoptosis celular. Tanto el
producto de secrecin acumulado como los detritos celulares se
eliminan hacia la superficie libre de la glndula. Id": Glndulas
sebceas de la Piel, Glndulas tarsales del prpado (Meibomio)
-Clasificaciones de las glndulas EXOCRINAS.
Mucosas, Serosas y Mixtas.
~ Secrecin mucosa.' Es espesa y viscosa, como consecuencia de
la glicosilacin de protenas con oligosacridos aninicos. El
mucingeno
as formado
se almacena
en grnulos
intracelulares. (Son PAS positivos) y son hidrosolubles, por lo
que se pierden durante la preparacin
de rutina para
microscopia ptica. Su citoplasma se observa vacio en los
cortes con HE.
~ Secrecin serosa: son claras y acuosas ya que producen
secreciones proteicas
no glicosiladas
o glicosilaciones
escasas; por lo tanto su citoplasma se tie con hematoxilinaesosina y sus grnulos de secrecin se encuentran preservados
luego de aplicar la tcnica de rutina para microscopia ptica.
De acuerdo al TIPO de su producto de Secrecin: Mucosas, Serosas y .
Mixtas.
',~
Glndula Mucosa: Cuando las clulas secretoras que la
conforman: tienen secrecin mucosa, Las clulas mucosas
poseen caractersticas morfolgicas que la diferencian: Debido
,;
'a-la accin cornpresiva de la secrecin viscosa, el ncleo suele
estar aplanado contra su plasmalema. El citoplasma se observa
vaco (muy claro). Las clulas suelen ser grandes.
~ Glndula Serosa: Cuando las clulas secretoras que la
conforman .son de secrecin serosa. Las caractersticas
celulares son: su ncleo es redondeado u oval, el citoplasma
apical; contiene los grnulos de secrecin, por lo cual suele
colorearse intensamente con eosina; mientras que el citoplasma
, basal es bas filo como consecuencia del abundante retculo '
endoplasmtico rugoso.
~ Glndula Mixta: Cuando posee clulas de secrecin mucosa y
serosa.
Observacin de lminas: (20 ptos.)

Piel (2,5 ptos)
28
l.
Glndula Partida (2,5 ptos)

Glndula Submaxilar o Sublingual (escriba cual vio) (2,5 ptos)

29
Pncreas (2,5 ptos)

Cordn espermtico (3,5 ptos)

30
l-
Msculo estriado cardaco (miocardio) (3,5 ptos)

Coloracin:
---------------------Descripcin:
Msculo estriado esqueltico (3 ptos)

31
t .)
Prctica 8. Tejido Conjuntivo general

Objetivo General
Reconocer las caractersticas morfolgicas del tejido conjuntivo
Observar las caractersticas morfolgicas de las clulas del Te.
Observar las caractersticas morfolgicas de las fibras del Te.
Diferenciar las caractersticas morfolgicas de cada tipo de Te.
Observacin de lminas: (20 ptos, 2 ptos c/u)

Hgado
Introduccin:
La matrizextracelular
de tejido conjuntiva se puede subdividir
en fibras, sustancia fundamental arnorfa y liquido tisular. Desde
el punto de vista histolgico se diferencias tres tipos de fibras:
colgenas, reticulares y elsticas. Por lo general las fibras de
. colgeno se presentan como haces de fibras no elsticas de
variado espesor. Las fibras reticulares son delgadas fibras
ramificadas cubiertas por hidratos de carbono, que forman
delicados retcuJos alrededor de las clulas musculares lisas,
ciertas clulas epiteliales, adipocitos, fibras nerviosas y vasos
sanquneos. Tambin constituyen el marco estructural de
:' aigunos rganos, como el hgado y el bazo. Y por ltimo, las
.fibras elsticas, tiene gran elasticidad y se pueden estirar hasta
alcanzar .alrededor del 150% de su longitud en reposo, sin
romperse. Estn 'compuestas por una protena amorfa, la
efastina,' rodeada por un componente microfibrilar. Las fibras
. elsticas no vpresentan periodicidad
y se encuentran las
regiones del organismo que requieren considerable flexibilidad y
elasticidad.
La sustancia fundamental amorfa constituye la matriz smil gel
en la que estn incluidas las fibras y las clulas, y a travs de la
cual se difunde el lquido tisular. La sustancia fundamental esta
compuestas por glucosaminoglucanos, proteoglucanos y
glicoprotenas como la fibronectina, que es esencial para
facilitar la fijacin y la migracin de las clulas a lo largo d los
elementos de tejido conectivo, como las fibras de
colgeno.
32
Frotis sanguneo
Bola de edema
/---------~~~
33
l-....--
'1
Bola de edema
Rin o ganglio linftico (escriba cual vio)

34
, J
Aorta
Coloracin:
----------------------Descripcin:
Cordn espermtico
35
1-
Glndula mamaria inactiva (4 ptos)

Coloracin:
----------------------Descripcin:
h
"

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DEPA,RTAMENTO DE ClENJCtlAS MORFOlGlCAS

GUA PRCTICA DE HISTOLOGA y EMBRIOLOGA

Tcnica histolgica: la morfologa microscpica de los tejidos se

Conocer la tcnica para la preparacin de tejidos para microscopa

- Fijacin: es una etapa muy importante y su propsito es mantener

Reconocer los pasos de la tcnica histolgica para microscopa ptica.

Qumica: por inmersin o perfusin

Diferenciar los grados de aumentos del microscopio (mocc) y para qu

las destrezas para

Enfocar cortes de diferentes tejidos en el microscopio ptico de campo

delgados, cuyo grosor para microscopa

ms rpido. Si tomamos una muestra grande cuando el fijador penetre

ptica varia entre 5-10

Este paso es muy importante y se debe tener cuidado en obtener

Existen muchos tipos de fijadores, como el cloruro de mercurio,

- - Deshidratacin: como su nombre lo indica, es una etapa en la que

- Aclaramiento: la muestra que fue colocada en la lmina contiene

. - Aclaramiento: una vez deshidratado el tejido, debemos sustituir el

- Inclusin: una vez aclarado el tejido se coloca en el medio de

- Tincin: para microscopia ptica se cuenta con un gran nmero de

- Cortes: para realizar el corte del tejido el taco se coloca en el

queratina y citoplasma celular, y azul claro en el mucngeno

Colo raciones utilizadas en microscopia ptica:

4. Coloracin con metales: varios metales se emplean en las

Esta mezcla de colorantes permite diferenciar el ncleo y el

6. Tricrmico de Cajal y Gallego: implica el uso de tres colorantes.

- Los tejidos que reaccionan con un colorante bsico como la

8. Carmn de Best: para tincin nuclear y deteccin de glucgeno.

2. cido Peridico - Schiff (P AS): se usa para determinar la

Son todas las alteraciones que se producen en los preparados

3. Coloracin con Azn (Tricrmico):

- Defectos de fijacin, deshidratacin,

inclusin, pueden causar

- Durante el corte puede aparecer desgarros por melladuras en la

extendido pueden aparecer

- Defectos en la coloracin son inherentes a la calidad y preparacin

Interpretacin de los cortes histolgicos:

Una vez que se obtiene el corte de tejido en una lmina,

Responda las siguientes preguntas: (2ptos.c/u)

2. Mencione y explique los tipos de Microtomo.

Investigue los conceptos de: Biopsia, Biopsia Excisional,

3. Explique en que consiste la tcnica de inclusin en medio

Microscopa: con el fin de estudiar la morfologa microscpica de

sumergido, en su parte inferior, en una gota de aceite de inmersin

produce la energa luminosa.

a) Un aumento total de 400X:

Aumento Ocular: -----~------

regula la cantidad de luz que entra a travs del

b) Un aumento total de lOOOX:

- Objetivos: son lentes de aumento, llamados as por estar ms cerca.

1. Objetivo de poco aumento (2,5 o 5 X) o lupa

- Brazo: conecta el pie a las partes pticas

2..0bjetivo de mediano aumento (10 X)

3. Objetivo de gran aumento (40 o 45 X)

que evita que se caiga.

- Tornillo macromtrico: permite mover la platina hacia arriba

El aumento de cada lente, indica las veces que el objeto ha sido

permite un ptimo enfoque de la lmina, es decir que este corrige el

B.- Identifique las partes del microscopio ptico que se muestran a

- Platina: es un soporte para colocar la lmina u objeto de estudio.

- Revolver: contiene los sistemas de lentes objetivos. Al girarlo,

- Carro: En algunos microscopios, la plataforma donde se coloca la

En esta prctica utilizaremos como herramienta para lograr un buen