Conceptos actuales

acerca del shuttle de

lactato

Licenciada en Ciencias Biolgicas con orientacin

en Biologa Celular
Becaria de Doctorado del Consejo Nacional de
Investigaciones Cientficas y
Tecnolgicas (CONICET), en el Laboratorio de
Neurobiologa del Desarrollo del Instituto de
Investigaciones Bioqumicas de Baha Blanca INIBIBB.

Mara Fernanda
Insua

mfinsua@criba.edu.ar
(Argentina)

http://www.efdeportes.com/ Revista Digital - Buenos Aires - Ao 8 - N 58

- Marzo de 2003

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Aunque alguna vez supo ser considerado como la inevitable

consecuencia de la falta de oxgeno en el msculo en contraccin,
este producto de la gluclisis, se forma y degrada continuamente en
condiciones aerbicas.
Los conceptos de "shuttle, lanzadera o transporte de lactato
intracelular" y "shuttle clula-clula", describen los roles del lactato
en el transporte de sustratos oxidativos y gluconeognicos, como as
tambin su papel en la sealizacin intercelular.
Algunos ejemplos de shuttles clula-clula incluyen los
intercambios de lactato entre las fibras blancas (glucolticas) y las
rojas (oxidativas) en el msculo activo, entre el msculo esqueltico
en accin y el corazn, y entre los tejidos de liberacin de lactato y la
gluconeognesis. El intercambio de lactato entre las neuronas y los
astrocitos (clulas no neuronales del sistema nervioso), que est
ligado a una sealizacin mediada por el neurotransmisor glutamato
en el cerebro, es un ejemplo del shuttle de lactato como modulador
de la sealizacin entre clulas.
La captacin de lactato por la mitocondria y el intercambio
piruvato/lactato en el peroxisoma son ejemplos de shuttles de lactato
intracelulares. El intercambio de lactato entre los sitios de produccin
y remocin se halla facilitado por protenas de transporte
monocarboxilado, de las cuales existen varias isoformas.
El transportador mitocondrial de piruvato/lactato parece actuar en
conjuncin con la lactato deshidrogenasa mitocondrial (LDH), enzima
que permite la oxidacin del lactato en las clulas que se hallan
respirando activamente. Por lo tanto, la mitocondria funciona
estableciendo la concentracin y los gradientes de protones

necesarios para las clulas con altas densidades mitocondriales (por

ej. los cardiocitos), puedan captar y oxidar lactato.
Otros ejemplos de shuttles de lactato intracelulares incluyen la
captacin y oxidacin de lactato en las mitocondrias de los
espermatozoides y la facilitacin de la -oxidacin en los peroxisomas
por el intercambio piruvato/lactato.
La presencia de shuttles de lactato tanto intra como intercelulares,
da lugar a la nocin de que los caminos glucoltico y oxidativo pueden
ser considerados como enlazados, en lugar de alternativos, ya que el
lactato es el producto de uno de los caminos y el sustrato para el otro.
Se sabe que junto con la glucosa sangunea, tambin se movilizan
las reservas de glucgeno de diversos tejidos, para proveer lactato,
un producto glucoltico que es utilizado tanto en las clulas en las que
se origin, o transportado a travs del espacio intersticial hacia otras
clulas adyacentes para su utilizacin. Por lo tanto el lactato es un
sustrato oxidable cuantitativamente importante, como as tambin un
medio por el cual se coordina el metabolismo en diversos tejidos. El
ejercicio fsico, es un ejemplo claro de esta ltima funcin, cuando la
estimulacin simptica de la glucogenlisis muscular y el
reclutamiento de fibras musculares glucolticas rpidas, causan un
mayor flujo de lactato. Por otra parte el lactato funciona como
regulador redox celular, va el intercambio y la conversin a piruvato,
su anlogo ms oxidado, a travs de la accin de la lactato
deshidrogenasa (LDH).
Cuando el lactato es liberado a la circulacin sistmica y capturado
por tejidos distantes y rganos, tambin se ve afectado el estado
redox de las clulas, tejidos y rganos que lo liberaron.
Consecuentemente durante el ejercicio, el lactato se convierte en una
pseudo-hormona, una lactormona.
La aceptacin de que existen tanto efectos intra como
extracelulares originados por la produccin y remocin de lactato, ha
conducido a reformular la "hiptesis del shuttle de lactato". Por otra
parte, el rpido progreso de las investigaciones al respecto, han
propuesto una extensin de la hiptesis original, para permitir incluir
un componente intracelular. La "hiptesis del shuttle de lactato
intracelular", fue desarrollada cuando se comprob que las
mitocondrias aisladas de corazn, msculo esqueltico o hgado de
rata eran capaces de oxidar lactato directamente.
A pesar de la controversia originada hace algunos aos atrs, el
concepto de los shuttles de lactato dentro y entre clulas ha sido
confirmado por varios estudios que observaron intercambio de lactato
entre diversas clulas y tejidos, incluyendo astrocitos y neuronas.

El shuttle de lactato clula-clula

La hiptesis original del shuttle de lactato fue propuesta en 1984, y
estaba basada en estudios llevados a cabo con sustancias trazadoras
marcadas con istopos radiactivos, y en el conocimiento de la
liberacin de lactato proveniente de tejidos metablicamente activos.
Resultados de investigaciones subsecuentes, como as tambin, la
lectura ms cuidadosa de resultados publicados previamente,
apoyaron este concepto.
La enzima lactato deshidrogenasa (LDH), la cual controla la
formacin y utilizacin de lactato, ha sido clasificada en cinco
isoformas con distintas afinidades por el lactato. La isoforma H
(isoforma cardaca) es sensible a la inhibicin por piruvato y se ha
sugerido que cataliza la transicin de lactato a piruvato, mientras que
la isoforma M (isoforma muscular) posee una mayor afinidad por la
conversin de piruvato a lactato.
Las fibras glucolticas poseen la mayor actividad total de LDH, y un
alto porcentaje de la isoforma M (LDH4 y LDH5), mientras que las
fibras oxidativas tiene una actividad total de LDH menor y un alto
porcentaje de la isoforma H (LDH1 y LDH2).
Liberacin y captacin de lactato en la clula muscular
Mediciones del flujo sanguneo y de las concentraciones de lactato
arterial y venoso en la sangre que baa al msculo, permiten la
cuantificacin de la liberacin neta de lactato in situ e in vivo. La
hiptesis de que la produccin de lactato es causada por la limitacin
del suministro de oxgeno a la mitocondria fue estudiada por primera
vez en el msculo esqueltico de perros. En estos estudios se observ
que la NAD+ /NADH se oxidaba ms durante las contracciones, en
forma suficiente como para iniciar una liberacin neta significativa de
lactato. Estudios posteriores, en los que se midieron los niveles de
oxgeno en el msculo en contraccin, demostraron que la produccin
de lactato ocurra en el msculo plenamente oxigenado. Estos
resultados confirmaron las observaciones iniciales de que la
produccin de lactato ocurre en los msculos en contraccin
oxigenados en los que el transporte de electrones en la mitocondria
no se encuentra limitado por la falta de O2.
Tambin se realizaron estudios en humanos utilizando protocolos
progresivos de ejercicio, resonancia magntica nuclear y
espectroscopa para medir la saturacin en la mioglobina y las
diferencias de concentracin arteriovenosa, el consumo de O2 y el
balance de lactato en el cudriceps humano. Luego fue posible
calcular la presin parcial de O2 intramuscular (PO2), y los resultados
indicaron que la PO2 intracelular es bastante alta en los msculos en

reposo de sujetos sanos respirando aire atmosfrico a nivel del mar.

Sin embargo, al comienzo del ejercicio, se observ un descenso
dramtico en la PO2 muscular (cerca de 533 pascales), un valor an
por encima de la PO2 mitocondrial crtica. Adems la PO2 intracelular
se mantuvo por encima de la PO2 mitocondrial crtica, a medida que
se incrementaba la respuesta muscular al esfuerzo. El msculo en
contraccin libera lactato a un valor equivalente aproximado al 50%
del VO2max a pesar de no haber signos de escasez de O2 muscular.
Cintica del lactato sanguneo en mamferos durante el
ejercicio
Estudios realizados por el grupo del Dr. Depocas, fueron
fundamentales para conocer el metabolismo integral del lactato en el
cuerpo. Estos hallazgos muestran que 1) existe un recambio activo de
lactato durante la condicin de reposo; 2) una gran fraccin (aprox.
50%) del lactato formado durante el reposo es removido por
oxidacin; 3) la tasa de recambio de lactato se incrementa durante el
ejercicio en comparacin con la de reposo, an si slo existe un
pequeo cambio en la concentracin sangunea de lactato; 4) la
fraccin de lactato removida a travs de la oxidacin aumenta
aproximadamente 75% durante el ejercicio; y 5) una fraccin menor
(1025%) del lactato removido se convierte en glucosa va el ciclo de
Cori durante el ejercicio. En trminos cuantitativos, cuando se miden
los flujos de glucosa y lactato con trazadores radiactivos, y los valores
se comparan en ratas en reposo y en ejercicio, se vuelve obvio que
mucho del flujo glucoltico ocurre a travs del lactato, especialmente
cuando la tasa metablica es alta. A pesar de que los valores estn
sujetos a diferencias de especies y variaciones experimentales, se
hallaron resultados esencialmente similares en estudios con ratas,
perros y caballos, y la observacin de que el lactato se produce y
remueve bajo condiciones de plena aerobiosis, ha sido demostrado
muchas veces, en diferentes investigaciones.
Un estudio realizado recientemente demostr que existe una
significativa produccin y oxidacin de lactato en reposo y en ejercicio
en hombres. Durante el ejercicio, la mayor parte (7580%) del lactato
fue removido va oxidacin, y gran parte del resto, convertido en
glucosa.
Transporte de lactato facilitado a travs de las membranas
celulares
El transporte de lactato es llevado a cabo por una familia de
protenas de transporte monocarboxiladas (MCTs), que se expresan
diferencialmente en clulas y tejidos.

En el msculo esqueltico de rata, el transportador MCT1 ha sido

encontrado predominantemente en msculos mayormente oxidativos,
y slo en pequeas cantidades en los msculos con predominio
glucoltico, mientras que el MCT2 parece estar ausente o presente en
muy bajas concentraciones en ambos tipos. Recientemente se
identificaron los MTC3 al MCT7, y la isoforma MCT4 (antes
denominada MCT3) ha sido observada tanto en msculo de rata
oxidativo como en el glucoltico.
Algunos estudios han mostrado los efectos del entrenamiento en la
expresin de estos transportadores. Estos cambios en la expresin del
MCT1 de la membrana plasmtica muscular (sarcolema) y en la
expresin de protenas mitocondriales, desembocan en un aumento
del lavado (clearance) de lactato durante el ejercicio.
Adems es bien sabido que la mayor parte del flujo de lactato a
travs del sarcolema, es mediado por sistemas de transporte
lactato/H+, tanto en msculo de animales como de humanos, y este
tipo de transportadores son los que poseen mayor capacidad para
remover los H+ en msculo de rata. Algunas investigaciones llevadas
a cabo, muestran que el entrenamiento fsico de alta intensidad,
incrementa la capacidad de transporte de lactato/H+ en el msculo
esqueltico humano, como as tambin la habilidad del msculo para
liberar lactato y H+ durante las contracciones, y el contenido de las
protena transportadoras MCT1 y MCT4.
Es bien sabido que las fibras musculares oxidativas comienzan a
captar lactato a una concentracin sangunea del mismo ms baja y a
velocidades mayores en comparacin con las fibras musculares
glucolticas, y que las fibras oxidativas predominantemente oxidan
lactato, mientras que las glucolticas principalmente convierten
lactato en glucgeno.
Tambin se ha demostrado que el transporte de lactato es
significativamente ms rpida (aproximadamente entre 37-109%) en
las fibras oxidativas que en las glucolticas. A primera vista este
hecho contradice la idea de que las fibras musculares glucolticas son
proclives a velocidades de produccin de lactato ms altas durante
las contracciones/ejercicio y que deberan estar preparadas para un
transporte rpido del lactato hacia el espacio extracelular. Sin
embargo, las fibras oxidativas producen lactato y usualmente son
activas por perodos de tiempo mayores que las glucolticas. Una
mayor capacidad para transportar lactato (y H+ al mismo tiempo)
fuera de las fibras oxidativas podra explicar parcialmente la mayor
resistencia a la fatiga de estas fibras. Por otra parte, la velocidad de
transporte mayor en las fibras oxidativas podra reflejar el rol del
lactato como un sustrato energtico para estas fibras, mientras que la
velocidad de transporte menor en estas ltimas, podra contribuir a
una retencin mayor de lactato durante la recuperacin del ejercicio

intenso, haciendo mucho ms probable que el lactato postejercicio

retenido en las fibras glucolticas sea resintetizado en glucgeno.
El shuttle de lactato intracelular
En los estudios llevados a cabo en los ltimos aos de la dcada
del 80, Brandt, Kline y colegas demostraron que las mitocondrias
asiladas del hgado eran capaces de oxidar lactato, al menos tan
rpidamente como piruvato. Ellos interpretaron sus resultados
postulando un shuttle de lactato. Seguidamente se confirm la
capacidad de oxidar lactato de las mitocondrias aisladas del msculo,
y se identific al MCT1, como el transportador mitocondrial de
lactato/piruvato.
Como los protones y los gradientes de concentracin son
necesarios para el flujo de lactato va difusin y transporte facilitado,
y como la remocin de lactato ocurre va oxidacin y gluconeognesis
(ambos, procesos mitocondriales), son esenciales las mitocondrias
respirando activamente para que el shuttle de lactato opere.
En la actualidad se sabe que algunos tipos de clulas facultativas
pueden ser cultivadas con lactato como combustible de preferencia,
porque sus mitocondrias poseen los medios para consumir y oxidar
lactato directamente, sin la conversin a piruvato en el citosol, (por
ejemplo las clulas de la levadura Saccharomyces
cerevisiae contienen un flavocitocromo, que acopla la
deshidrogenacin del lactato a la reduccin del citocromo c)
Adems del shuttle de lactato citosol-mitocondria, parecen existir
otros shuttles intracelulares, por ejemplo entre el citosol y los
peroxisomas, donde se sabe que un sistema para la re-oxidacin del
NADH es esencial para el funcionamiento de la -oxidacin. De hecho
la LDH es la nica enzima glucoltica localizada en los peroxisomas.
Para que haya un balance redox peroxisomal, se debe llevar a cabo el
intercambio lactato/piruvato a travs de la membrana peroxisomal, y
estudios preliminares del grupo del Dr. Brooks, sugieren que un MCT
est involucrado en dicho mecanismo.
Aunque resultados de estudios realizados con resonancia
magntica nuclear (RMN), apoyan el concepto de los shuttles de
lactato in vivo, los datos sugieren que el conocimiento del
intercambio de lactato intra y clula-clula, se encuentra en sus
inicios.
De hecho, un estudio realizado por Rasmussen y colegas en el ao
2002, utilizando un cuidadoso mtodo de fraccionamiento subcelular
y de aislamiento mitocondrial, no pudieron hallar actividad de la
enzima LDH (la enzima que cataliza la formacin de piruvato a partir
de lactato), en la fraccin correspondiente a las mitocondrias,

proponiendo que la LDH no es una enzima mitocondrial en el msculo

vasto lateral de humanos y ratones, con lo cual esta organela sera
incapaz de metabolizar lactato, y por lo tanto tambin puso en dudas
la nocin del shuttle intracelular de lactato, el cual involucra el
transporte de lactato hacia la matriz mitocondrial, seguido de
oxidacin a piruvato.
En sntesis se puede decir que el entendimiento actual acerca del
rol del metabolismo del lactato ha cambiado dramticamente desde
aquella visin clsica que lo mostraba como una consecuencia
inevitable de la falta de oxgeno en el msculo esqueltico en
contraccin. Se sabe ahora que el lactato se produce y se utiliza
continuamente bajo condiciones plenamente aerbicas.
Se oxida activamente en todo momento, especialmente durante el
ejercicio, cuando la oxidacin se hace cargo del 7075% de la
remocin, ocupndose la gluconeognesis de la mayor parte de lo
que resta de lactato. El msculo en contraccin produce y utiliza
lactato como combustible, mucho del cual es formado en la fibras
glucolticas y luego captado y oxidado en fibras oxidativas
adyacentes. Como se encuentra en un estado ms reducido que su
ceto-cido anlogo (el piruvato), el secuestro y la oxidacin de lactato
a piruvato afecta el estado redox de la clula, promoviendo tanto el
flujo de energa como eventos de sealizacin celular.
El transportador mitocondrial lactato/piruvato parece trabajar en
conjunto con la LDH mitocondrial, permitiendo que el lactato se oxide
en las clulas que estn respirando activamente, estableciendo los
gradientes que conducen al flujo de lactato.
A la luz de un nuevo siglo, podemos afirmar que an sigue siendo
correcto que la hipoxia tisular conduce a un aumento en la
concentracin de cido lctico, pero que no necesariamente la
elevada produccin y acumulacin del mismo, indica una condicin de
hipoxia.