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Entre les annes 1950 1970, la structure de lADN, son mode de rplication, les modalits dexpression des
gnes et le code gntique ont t dcouverts. On ne dispose cependant daucun outil permettant de
manipuler facilement lADN et les gnes quil contient. La dcouverte des enzymes de restriction constitue
une avance dcisive en ce sens.
Quels sont les apports des enzymes de restriction ?
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PS : nuclases de restriction=
enzymes de restriction.
Note : en employant plusieurs enzymes de restriction diffrentes, on obtient des fragments de restriction de
tailles diffrentes que lon peut rorganiser par la suite, de manire obtenir des cartes de restriction.
Qu4. tablir la relation qui existe entre la taille des fragments et leur vitesse de migration. Comment peut-on
estimer leur taille en nombre de paires de bases ?
Doc4. la recherche des gnes. Cette mthode, mise au point par E. Southern, sappelle un Southern Blot.
Qu5. Pourquoi dnaturer lADN avant de lhybrider avec une sonde ?
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Les bactries ont t les premiers organismes utiliss pour cloner les gnes. Ces microorganismes possdent, en
plus de leur grand chromosome, des petites molcules dADN circulaire, les plasmides qui peuvent tre coups
par une enzyme de restriction au niveau dun site unique et se refermer aprs avoir intgr un gne dun
organisme quelconque dcoup par la mme enzyme. De plus, les bactries se reproduisent trs vite (une
division toutes les 20 minutes dans des conditions trs favorables).
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