Biocatalizadores.

Del laboratorio a la industria

UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES

Rector
Gustavo Eduardo Lugones
Vicerrector
Mario E. Lozano

Biocatalizadores.
Del laboratorio a la industria

Elizabeth Lewkowicz

(compiladora)

Bernal, 2011

Coleccin Nuevos enfoques en ciencia y tecnologa

Dirigida por Florencia M. Rembado

Biocatalizadores: del laboratorio a la industria / compilado por

Elizabeth Lewkowicz - 1a ed. - Bernal : Universidad Nacional de
Quilmes, 2011.
216 p. : il. ; 22x15 cm. - (Nuevos enfoques en ciencia y tecnologa /
Florencia Mabel Rembado)
ISBN 978-987-558-221-7
1. Biotecnologa. 2. Enzimas. I. Lewkowicz, Elizabeth, comp.
CDD 574

Diseo de coleccin: Hernn Morfese

Realizacin: Mariana Nemitz
Elizabeth Lewkowicz. 2011
Universidad Nacional de Quilmes. 2011
Universidad Nacional de Quilmes
Roque Senz Pea 352
(B1876BXD) Bernal, Provincia de Buenos Aires
Repblica Argentina
http://www.unq.edu.ar
editorial@unq.edu.ar
ISBN: 978-987-558-221-7
Queda hecho el depsito que marca la ley 11.723

NDICE

Los autores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
Agradecimientos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
Prlogo, por Elizabeth Lewkowicz. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
Captulo 1. Fuentes de biocatalizadores. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
Elizabeth Lewkowicz y Daniela Gamenara
Captulo 2. Los vegetales en biocatlisis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Marcela Kurina-Sanz y Alejandro A. Orden
Captulo 3. Biocatlisis en medios no convencionales. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77
Adolfo M. Iribarren
Captulo 4. Aplicaciones de la biologa molecular en biocatlisis.
Tcnicas de clonacin, sobreexpresin y evolucin dirigida. . . . . . . . . . . . . 95
Paola Panizza y Sonia Rodrguez
Captulo 5. Aplicaciones del modelado molecular a la biocatlisis. . . . . . . . . . 125
Jos Mara Snchez Montero y Andrs R. Alcntara Len
Captulo 6. Biocatlisis enzimtica industrial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 151
Andrs Illanes
Captulo 7. Procesos industriales biocatalizados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 191
Pablo Domnguez de Mara

LOS AU TORES

Andrs R. Alcntara Len, Grupo de Biotransformaciones (btg), Departamento de Qumica Orgnica y Farmacutica, Facultad de Farmacia,
Universidad Complutense de Madrid, Espaa; <andresr@farm.ucm.es>.
Pablo Domnguez de Mara, Institute of Technical and Macromolecular Chemistry, rwth Aachen University, Alemania; <dominguez @itmc.
rwth-aachen.de>.
Daniela Gamenara, Grupo de Fisicoqumica Orgnica y Bioprocesos,
Laboratorio de Sntesis Orgnica, Departamento de Qumica Orgnica,
Facultad de Qumica, Universidad de la Repblica (UdelaR), Montevideo, Uruguay; <dgamenar@fq.edu.uy>.
Andrs Illanes, Laboratorio de Biocatlisis, Escuela de Ingeniera Bioqumica, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Chile; <aillanes@ucv.cl>.
Adolfo M. Iribarren, Laboratorio de Biotransformaciones, Departamento de Ciencia y Tecnologa, Universidad Nacional de Quilmes, Argentina;
<airibarren@unq.edu.ar>.
Marcela Kurina-Sanz, intequi-Conicet, Facultad de Qumica, Bioqumica y Farmacia, Universidad Nacional de San Luis, Argentina; <mkurina@
unsl.edu.ar>.
Elizabeth Lewkowicz, Laboratorio de Biotransformaciones, Departamento de Ciencia y Tecnologa, Universidad Nacional de Quilmes, Buenos Aires, Argentina; <elewko@unq.edu.ar>.
Alejandro A. Orden, intequi-Conicet, Facultad de Qumica, Bioqumica y Farmacia, Universidad Nacional de San Luis, Argentina; <aaorden@
unsl.edu.ar>.

Paola Panizza, Ctedra de Microbiologa, Departamento de Biociencias,

Facultad de Qumica, Universidad de la Repblica, Montevideo, Uruguay;
<ppanizza@fq.edu.uy>.
Sonia Rodrguez, Ctedra de Microbiologa, Departamento de Biociencias, Facultad de Qumica, Universidad de la Repblica, Montevideo,
Uruguay; <soniar@fq.edu.uy>.
Jos Mara Snchez Montero, Grupo de Biotransformaciones (btg), Departamento de Qumica Orgnica y Farmacutica, Facultad de Farmacia,
Universidad Complutense de Madrid, Espaa; <jsanchez@farm.ucm.es>.

10

| los autores

AGRADECIMIENTOS

En primer lugar a los autores de los captulos que conforman esta obra
por su disposicin a participar en la difusin de la biocatlisis entre
los miembros de la comunidad cientfica de habla hispana y su siempre amable colaboracin en todos los emprendimientos que venimos
llevando a cabo para hacer importante esta poco conocida rama de la
ciencia.
A la Universidad Nacional de Quilmes por darnos el espacio y el
apoyo necesarios para que el Laboratorio de Biocatlisis pueda crecer
da a da.
A las entidades nacionales (Conicet, anpcyt, etc.) e internacionales
que subsidian nuestras investigaciones.
A todos los integrantes del Laboratorio de Biocatlisis por su esfuerzo y su dedicacin y por crear un mbito maravilloso de trabajo.
Al doctor Adolfo Iribarren, alma mter del grupo, por su fuerza para
llevarlo adelante, por compartir el cario por la ciencia y principalmente por su calidez humana y su apoyo incondicional.
Y finalmente a mi familia, Roberto, Florencia y Vanesa, por estar
siempre a mi lado, por entender y soportar las tardanzas, las ausencias y
las preocupaciones que involucra el trabajo cientfico y por ser las personas maravillosas con las que amo compartir la vida.
Elizabeth Lewkowicz

11

Prlogo
Elizabeth Lewkowicz

En la biotecnologa las enzimas desempean una funcin clave como

catalizadores y esa funcin es aprovechada por muchas industrias que
intentan satisfacer las necesidades humanas cotidianas. El amplio espectro de sus aplicaciones abarca desde la produccin de alimentos
procesados pan, queso, jugos de fruta o cerveza y productos farmacuticos o de qumica fina hasta el procesamiento del cuero y textiles o
como adyuvantes en detergentes e ingeniera ambiental.
La llamada biotecnologa blanca utiliza catalizadores biolgicos,
entre ellos clulas y enzimas, para garantizar una actividad ms ecolgica
en los procesos industriales. Estos biocatalizadores presentan ventajas
tales como alta especificidad, eficiencia, reduccin de la contaminacin
y ahorro de energa, caractersticas que los hacen aptos para ser empleados en el desarrollo de nuevos procesos de produccin sostenible,
lo que ha representado un incentivo importante para el desarrollo de
la biocatlisis y la tecnologa enzimtica.
Un conocimiento exhaustivo de las enzimas como biocatalizadores
requiere la integracin de conocimientos de qumica, bioqumica, biologa e ingeniera, en particular de aspectos fisicoqumicos de cintica e interacciones moleculares, catlisis, biotransformaciones, sistemas
heterogneos, procesos de transferencia de masa, reactores y procesos
de separacin, de escalado y de tratamiento de residuos. Las estrategias
utilizadas actualmente para la bsqueda de nuevos procesos quimioenzimticos seguros para el ambiente, que implican el uso de herramientas
modernas de biologa molecular y de ingeniera de protenas, tambin
desempean un papel importante en la obtencin de biocatalizadores
nuevos y ms eficientes. En los siete captulos de este libro se abordan
algunos de estos temas con el objetivo de brindar una visin general,
actualizada y concisa de los distintos pasos de un proceso biocatalizado durante la transicin del laboratorio a la planta.
|

13

En el captulo 1 se puede hallar un panorama general de los distintos tipos de biocatalizadores, de sus usos y sus fuentes y tambin de
las diversas tcnicas de screening y seleccin que permiten una rpida
identificacin de actividades enzimticas con propiedades adecuadas
para su aplicacin en biocatlisis. En el captulo 2 se presenta un anlisis particularmente detallado del uso de catalizadores de origen vegetal, de sus diversas formas y de sus mltiples aplicaciones, que ofrecen
alternativas nicas frente a otros sistemas.
En la naturaleza los biocatalizadores desarrollan su actividad ptima en
entornos acuosos y ambientes con pH neutro, temperaturas por debajo de
40 C y presin osmtica baja. A la hora de optimizar una reaccin, estas
condiciones pueden resultar una complicacin en cuanto a la relacin espacio-tiempo-rendimiento o bien para obtener una alta concentracin
de producto a fin de facilitar el procesamiento posterior. Por ese motivo existe una bsqueda continua de condiciones alternativas que permitan lograr mejoras respecto de la solubilidad del sustrato, la selectividad,
el rendimiento y la estabilidad del biocatalizador. El uso de medios no
convencionales de reaccin fue uno de los grandes hitos de la biocatlisis
durante el siglo xx. Si bien los solventes orgnicos fueron los compuestos
ms utilizados, en los ltimos aos se han desarrollado medios ms favorables en trminos ambientales, los que se describen en el captulo 3. Ms
recientemente la ingeniera de protenas ha aadido nuevas y potentes
herramientas para el desarrollo de mejores biocatalizadores. En el captulo 4 se explica la forma de mejorar los procesos biocatalizados mediante
el uso de enzimas fcilmente accesibles en cantidad y con propiedades
que puedan ser modificadas a demanda. La bioinformtica tambin ha
contribuido a este propsito. El modelado molecular constituye una herramienta de gran utilidad pues permite interpretar de manera racional
los procesos biocatalizados, como se describe en el captulo 5.
Finalmente, todos los avances mencionados han confluido para favorecer
la transformacin del proceso biocatalizado desarrollado en el laboratorio
en un proceso industrial. En los captulos 6 y 7 se analizan los requerimientos, las caractersticas y las motivaciones, junto a diversos ejemplos,
para disear procesos industriales biocatalticos rentables y sostenibles.
Esta obra, dirigida a un pblico interdisciplinario y de habla castellana, ha sido diseada como libro de texto para cursos de pregrado y
posgrado sobre biocatlisis y temticas relacionadas, aunque tambin se
espera que sea de inters para todos los que trabajan en este campo.

14

| prlogo