Esquema general de diferenciacin

de bacterias de inters clnico

GRAM

NEGATIVO

Cocos

Bacilos

Cocos

Bacilos

Respiracin

Respiracin

Respiracin

Respiracin

Aerobia

Anaerobia

Veillonella
Moraxella
Branhamella
Neisseria

POSITIVO

Aerobia

Anaerobia

Anaerobia
facultativa

Alcaligenes
Bacteroides
Actinobacillus
Bordetella
Fusobacterium
Aeromonas
Brucella
Chromobacterium
Flavobacterium
Enterobacteriaceae
Francisella
Gardnerella
Kingella
Haemophilus
Legionella
Pasteurella
Pseudomonas
Vibrio
Acinetobacter

Anaerobia
Anaerobia
Aerobia Anaerobia facultativa Aerobia Anaerobia facultativa

Micrococcus

Peptostreptococcus

Actinomyces Corynebacterium
Clostridium
Lactobacillus

Staphylococcus
Streptococcus Bacillus
Mycobacterium
Nocardia
Streptomyces

a)
b)
c)

Clave diferencial cocos Gram (+)

Aerobios y Anaerobios facultativos
a)
b)
c)

Catalasa
Agrupacin en racimos o grupos
Colonias >1mm
a)
b)
c)

Streptococcus

Staphylococcus, Micrococcus
a)
b)
c)

Tipo
Hemlisis

Crecimiento
ClNa 6,5%

Crecimiento
ClNa 6,5%

S. viridans
S. pneumoniae

+
S. Grupo D

a)Optoquina
b)Solubilidad en bilis Hidrlisis hipurato

a) b)
S. viridans

Crecimiento
Micrococcus
ClNa 6,5%

+
a)
+
b)
+
S. pyogenes S. agalactiae
S. pneumoniae
Grupo B
Grupo A

+
S. faecalis
S. Grupo B

S. viridans
S. Grupo B

Hidrlisis esculina

Hidrlisis hipurato

S. Grupo B

+
S. faecalis

S. viridans

+
S. Grupo B

O-F
Cultivo en anaerobiosis
Voges-Proskauer

a)Oxidativo
b)
c) -

S. Grupo A
S. Grupo B

+
+
+

+
S. faecium
S. avium
S. Grupo B

a)Fermentativo
b) +
c) +

Staphylococcus

a)Fermentacin manitol
en anaerobiosis
b) COAGULASA

a)
b)
Hidrlisis esculina
S. epidermidis
S. saprophyticus

S. Grupo B

+
S. faecium
S. avium

a)
+
b)
+
S. aureus

Caractersticas de la Familia Micrococcaceae y G.

Streptococcus
Familia Micrococcaceae
G. Micrococcus

G. Staphylococcus

G. Streptococcus

Morfologa

Cocos; 0,5-2um
Esfricos, aislados,
parejas,racimos,
tetradas

Cocos; 0,5-1,5um
Esfricos, aislados,
parejas,racimos,
tetradas

Cocos; <2um
Esfricos a ovoides,
aislados, parejas,
cadenas

Gram

Gram (+)

Gram (+)

Gram (+)

Requerimientos de
Oxgeno

Aerobios

Anaerobios
facultativos

Anaerobios
facultativos

Catalasa

Positivo

Positivo

Negativo

O-F Glucosa

Oxidativo

Fermentativo

Fermentativo

Catalasa
- Streptococcus
S. pyogenes (Grupo A)
Hemlisis
Sensibilidad a bacitracina +
S. agalactiae (Grupo B)

Clave diferencial de
Streptococcus y Staphylococcus

o Hemlisis
CAMP Test +
Hidrlisis hipurato +
Grupo D
, Hemlisis
Bilis esculina +
Crecimiento con ClNa 6,5%
S. pneumoniae
Hemlisis
Sensibilidad a optoquina +
Solubilidad en bilis +
Otros grupos
Pruebas serolgicas

+ Staphylococcus
Chapman Manitol
Manitol
Aerbico

+ S. aureus
Anaerbico

+ S. aureus

+ S. aureus

V S. saprophyticus

- S. epidermidis
- S . saprophyticus

- S. epidermidis

COAGULASA

DNasa
- SCN

+ S. aureus
- S. saprophyticus
-S. epidermidis

Pruebas bsicas de identificacin de Streptococcus

Hemlisis

Sensibilidad
a

CAMP

Bacitracina

Hidrlisis
del
Hipurato

Bilisesculina

Crecimient
o en medio
con ClNa

Sensibilidad a

Optoquina

Solubilidad
en bilis

6,5%
S. pyogenes
Grupo A

S. agalactiae
Grupo B

Enterococos
Grupo D

, ,

No enterococos
Grupo D

S. pneumoniae

Estreptococos
viridanos

Bacillus sp.
Corynebacterium sp.
Erysipelothrix sp.
Listeria sp.
Mycobacterium sp.
Nocardia sp.
Streptomyces sp.

Catalasa

+
-

Bacillus sp.,Corynebacterium sp.

Listeria sp.,Nocardia sp.
Streptomyces sp.

Erysipelothrix sp

Clave diferencial de bacilos

Gram (+) aerobios y anaerobios a)Disposicin de las clulas
b)Capacidad de esporulacin
facultativos
a)
b)

En cadenas
+

a)

En empalizada
o letras chinas

b)

a)
b)

SH2 +
H. Esculina
R. Nitrato
Glucosa +

a)
b)

Ramificadas
-

G. Corynebacterium
G. Listeria

G. Streptomyces
G. Nocardia

a) Voges-Proskauer
b) Movilidad a 20-25C

Acido-alcohol resistencia

G. Bacillus

B. anthracis

E. rhusiopathiae

+
+

a)
b)

G. Listeria

G. Corynebacterium

L. monocytogenes

C. diphtheriae

+ Nocardia

- Streptomyces

Caractersticas diferenciales del G. Corynebacterium, L. monocytogenes y E. rhusiopathiae

Corynebacterium

Listeria
monocytogenes

Erysipelothrix
rhusiopathiae

Morfologa

Bacilos cortos, rectos o

curvados. Agrupados en
parejas, formas en L o V,
empalizadas, letras
chinas.

Bacilos cortos,
cocobacilares,
extremos
redondeados. A
veces, cadenas
cortas.

Bacilos rectos o
curvados. A veces,
filamentos largos.

Gram

Formacin de esporas

Hemlisis

Variable

Requerimientos de Oxgeno

Anaerobios facultativos

Anaerobios
facultativos

Anaerobios
facultativos

O-F Glucosa

Fermentativos,
Oxidativos, Inertes

Fermentativo

Fermentativo dbil

Catalasa

Positiva

Positiva

Negativa

Movilidad

Negativa

Positiva a 20-25C

Negativa

Voges-Proskauer

Negativo

Positivo

Negativo

SH2

Negativo

Negativo

Positivo

Hidrlisis esculina

Negativo

Positivo

Negativo

Clave diferencial de bacilos

Gram (-) aerobios o facultativos
Aerobios
Acinetobacter sp.
Alcaligenes sp.
Bordetella sp.
Brucella sp.
Flavobacterium sp.
Francisella sp.
Kingella sp.
Legionella sp.
Moraxella sp.
Pseudomonas sp.

Necesidad de oxgeno

Microaerfilos

Facultativos

Campylobacter sp.

Actinobacillus sp.
Aeromonas sp.
Chromobacterium sp.
Enterobacteriaceae
Gradnerella sp.
Haemophilus sp.
Kingella sp.
Pasteurella sp.
Plesiomonas sp.
Vibrio sp.

O-F Glucosa
(Hugh y Leifson)

Inertes

Acinetobacter sp.
Alcaligenes sp.
Legionella sp.
Moraxella sp.
Pseudomonas sp.

O-F Glucosa
(Hugh y Leifson)

Fermentadores

Oxidativos

Francisella sp.
Kingella sp.

Acinetobacter sp.
Bordetella sp.
Brucella sp.
Flavobacterium sp.
Pseudomonas sp.

Fermentadores
Actinobacillus sp.
Aeromonas sp.
Chromobacterium sp.
Enterobacteriaceae
Granerella sp.
Haemophilus sp.
Kingella sp.
Pasteurella sp.
Plesiomonas sp.
Vibrio sp.

Oxidativos

Chromobacterium sp.

Enterobacteriaceae
Francisella
Gardnerella

Haemophilus
Pasteurella
Vibrio

Clave diferencial de bacilos

Gram (-) fermentadores de
Glucosa

Crecimiento en medios
de cultivo

Con aditivos
especiales

Francisella
(cistena)

Haemophilus
(Factor X y/o V)

Aislamiento
favorecido con
sangre o suero

Normales

Gardnerella
Kingella
Pasteurella

Aeromonas
Enterobacteriaceae
Vibrio

a)Tincin bipolar
b)Monomrficas

OXIDASA

a) b) Actinobacillus

a) +
b) +
Pasteurella

+
Enterobacteriaceae

Aeromonas
Vibrio
Plesiomonas

Caractersticas del G. Francisella

Morfologa

Cocobacilos con marcado

pleomorfismo, pudiendo dar lugar a
formas filamentosas

Gram

Negativo (coloracin bipolar)

Formacin de esporas

Negativa

Requerimiento de Oxgeno

Aerobios estrictos

O-F Glucosa

Fermentativo

Oxidasa

Negativo

Catalasa

Positivo (dbil)

Movilidad

Negativa

Crecimiento en MacConkey

Negativo

Caractersticas del G. Haemophilus

Morfologa

Cocobacilos en ocasiones
filamentosos

Gram

Negativos (coloracin bipolar)

Formacin de esporas

Negativa

Requerimiento de Oxgeno

Anaerobios facultativos

O-F Glucosa

Fermentativos

Movilidad

Negativa

Crecimiento en Agar MacConkey

Negativo

Requerimiento de factores Xy/o V

Positivo

Reduccin de nitratos

Positiva

Catalasa

Variable

Oxidasa

Variable

Caractersticas diferenciales de las especies de Haemophilus

Hemlisis

Requerimiento

Requerimiento

Factor V

Factor X

H. influenzae

H. parainfluenzae

H. haemolyticus

SH2

Oxidasa

H. parahaemolyticus

H. aphrophilus

H. paraphrophilus

H. ducreyi

H. segnis

H. aegyptius

Caractersticas Familias Vibrionaceae, Pseudomonadaceae y Enterobacteriaceae

Morfologa

Gram

Esporas

Requerimi
-entos
Oxgeno

O-F
Glucosa

Oxidasa

Catalasa

Movilidad

Reduccin
Nitrato

Crecimiento
Agar
MacConkey

Vibrio

Bacilos
rectos,
curvados

Anaerobio
facultativo

Fermen
tativos

i
o
n

Aeromonas

Bacilos
rectos,
aislados

Anaerobio
facultativo

Fermen
tativos

a
c
e
a
e

Plesiomonas

Bacilos
rectos,
aislados

Anaerobio
facultativo

Fermen
tativos

F.
Pse
udo
mo
nad
ace
ae

Pseudomonas

Bacilos
rectos o
curvos

Aerobios
Estrictos

Oxidati
vos o
Inertes

F.
Ent
ero
bac
teri
ace
ae

Escherichia
Salmonella
Shigella
Proteus
Klebsiella..

Bacilos
variables

Anaerobios
facultativos

Fermen
tativos

F. V
i
b
r

Caractersticas diferenciales de las Familias Vibrionaceae, Pseudomonadaceae y Enterobacteriaceae

Requerimiento
de Oxgeno

O-F Glucosa

Oxidasa

Anaerobios
Facultativos

Fermentativo

F. Pseudomonadaceae

Aerobios
Estrictos

Oxidativo o
Inerte

F. Enterobacteriaceae

Anaerobios
Facultativos

Fermentativo

F. Vibrionaceae

Caractersticas de la F. Enterobacteriaceae
Morfologa

Bacilos rectos de tamao

variable

Gram

Negativo

Formacin de esporas

Negativa

Requerimiento de Oxgeno
O-F Glucosa

Anaerobios Facultativos
Fermentativo

Oxidasa

Negativo

Catalasa

Positivo

Crecimiento en Agar MacConkey

Positivo

Reduccin de nitrato

Positivo

Escherichia
Shigella
Edwardsiella
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Morganella
Proteus
Providencia
Salmonella
Citrobacter
Hafnia
Yersinia

Caractersticas del G. Pseudomonas

Morfologa

Bacilos rectos o curvados

Gram

Negativo

Formacin de esporas

Negativa

Requerimiento de Oxgeno

Aerobios estrictos

O-F Glucosa

Oxidativo o Inerte

Oxidasa

Positiva

Catalasa

Positiva

Movilidad

Positiva (con excepciones)

Reduccin del Nitrato

Variable

Indol

Negativo

Rojo de Metilo

Negativo

Voges-Proskauer

Negativo

Crecimiento en Agar MacConkey

Positivo

P. aeruginosa
P. putida
P. fluorescens
P. maltophilia
P. alcaligenes
P. pseudomallei
P. mallei
P. cepacia
P. putrefaciens
P. testosteroni
P. acidovorans
P. vesicularis
P. diminuta
P. stutzeri
P. mendocina

Caractersticas de Gardnerella vaginalis

Morfologa
Gram
Formacin de esporas
Requerimientos de Oxgeno
Tipo de metabolismo

Bacilos y cocobacilos aislados

Gram negativos a variables
Negativa
Anaerobio Facultativo
Fermentativo

Oxidasa

Negativo

Catalasa

Negativo

Hemlisis

Gran -hemlisis de contorno difuso

Movilidad

Negativa

Crecimiento en Agar MacConkey

Negativo

Reduccin de Nitrato

Negativo

Hidrlisis de Almidn

Positivo

Hidrlisis de Hipurato

Positivo

Maltosa

Positivo

-Glucosidasa

Positivo

-Glucosidasa

Negativo

Caractersticas del G. Bordetella

Morfologa
Gram
Formacin de esporas
Requerimiento de Oxgeno
O-F Glucosa

Cocobacilos aislados, en parejas

Negativo (bipolar)
Negativo
Aerobio estricto
Oxidativo

Catalasa

Positiva (excepto B. pertussis-V)

Oxidasa

Variable

Crecimiento en Agar MacConkey

Variable

Hidrlisis de Gelatina

Negativa

B. pertussis
B. parapertussis
B. bronchiseptica

Caractersticas del G. Brucella

Morfologa

Cocobacilos aislados, en parejas

Gram

Negativo

Formacin de esporas

Negativa

Requerimiento de
Oxgeno
O-F Glucosa

Aerobio estricto
Oxidativo

Catalasa

Positiva

Movilidad

Negativa

B. melitensis
B. abortus
B. suis
B. canis
B. ovis
B. neotomae

Caractersticas del G. Campylobacter

Morfologa
Gram
Formacin de esporas
Requerimiento de Oxgeno

Bacilos curvos, forma de S.

Negativo
Negativa
Microaerfilo

Oxidasa

Positiva

Movilidad

Positiva

Reduccin de Nitrato

Positiva

O-F Glucosa

Inerte

25C

42C

C. jejuni

C. laridis

C. coli

C. fetus

Caractersticas diferenciales de la F. Neisseriaceae

Morfologa

Gram

Formacin
esporas

Requerimiento
Oxgeno

O-F
Glucosa

Oxidasa

Catalasa

Movilidad

Reduccin
Nitrito

Reduccin
Nitrato

Acinetobacter

Cocobacilos
en parejas y
cadenas
cortas

Aerobios
estrictos

Oxidativos
o Inertes

Moraxella

Bacilos muy
pequeos, en
parejas y
cadenas
cortas

Aerobios
estrictos

Inertes

Branhamella

Cocos muy
pequeos,
aislados o en
parejas

Aerobios
estrictos

Inertes

Neisseria

Cocos,
aislados o
parejas, con
lados
adyacentes
aplanados

Aerobios
estrictos

Oxidativos

Bacilos
rectos, en
parejas o
cadenas
cortas

Aerobio o
Anaerobio
facultativo

Fermentati
vo

Kingella

Muestra con posibles anaerobios

Examen macroscpico de la muestra:
aspecto purulento, gas en los tejidos,
olor ftido
Tincin Gram

Aislamiento e identificacin
preliminar de los Anaerobios
ms frecuentes

Cultivos:
Tioglicolato suplementado
Tincin Gram
Agar Sangre
Aerobiosis
37C, 24-48h
Agar Brucella
Anaerobiosis
37C, 24-48h

Resembrar cada tipo de colonia

Valorar su relacin con el Oxgeno
Agar Sangre
Aerobiosis
37C, 24-48h
Agar Brucella
Anaerobiosis
37C, 24-48h

G. Veillonella
G. Peptococcus
G. Peptostreptococcus
G. Bacteroides
G. Fusobacterium
G. Clostridium

Proseguir con las colonias

desarrolladas en anerobiosis
y no en aerobiosis
Examen de las placas
Morfologa,
pigmento, hemlisis

Tincin Gram
Prueba de la catalasa
Resiembra en tioglicolato suplementado
Gram, movilidad, identificacin
por sensibilidad a diferentes compuestos

Actinomyces Bifidobacterium Eubacterium Propionibacterium

Arachnia
Clostridium
Lactobacillus

Formacin de esporas

Clave diferencial de
Bacilos Gram (+) Anaerobios

+
Clostridium

Actinomyces, Eubacterium
Arachnia,
Lactobacillus
Bifidobacterium,
Propionibacterium

Bacilos ramificados

Actinomyces, Arachnia
Propionibacterium

Eubacterium, Lactobacillus
Propionibacterium

Crecimiento miceliano
(filamentos areos)

Catalasa

+
Actinomyces

Arachnia
Bifidobacterium

+
Propionibacterium

Reduccin de nitrato

+
Arachnia

Bifidobacterium

Eubacterium
Lactobacillus

Requerimiento de Oxgeno

Anaerobio estricto
Eubacterium

Microaerfilo
Lactobacillus

Diagnstico general de micobacterias responsables de

Tuberculosis humana

Muestra de

ESPUTO
T. Ziehl-Neelsen: BAAR

M. tuberculosis

Decontaminacin

Colonias rugosas
Excrecentes
Color marfil
Aspecto cerebroide

Neutralizacin
Centrifugacin
3000 rpm/30min

Sedimento

M. bovis
Colonias lisas
Poco excrecentes
Color marfil

ORINA
Concentracin
por Centrifugacin

Cultivo

T. Ziehl-Neelsen: BAAR

Lowenstein Jensen
Sin piruvato
(no crece M. bovis)

Decontaminacin
Neutralizacin
Centrifugacin

Sedimento
LCR
LIQUIDO SINOVIAL
LIQUIDO PLEURAL
Concentracin
Por centrifugacin

T. Ziehl-Neelsen: BAAR

Sedimento

Lowenstein Jensen
con piruvato
(para M. bovis)

M. africanum
Aerobiosis
o 5-10% CO2
37C
15-30 das

Colonias rugosas

MICOBACTERIAS

Crecimiento
rpido
<7 das

No
pigmentadas

M. fortuitum
M. chelonae
M. smegmatis

Crecimiento
lento
>7 das

Pigmentadas

Escotocromgenas
(pigmento
en oscuridad)

M. phlei
M. flavescens

Fotocromgenas
(pigmento con luz)

M. marinum

No
pigmentadas

Pigmentadas

M. tuberculosis
M. bovis
Escotocromgenas
M. africanum
M. avium-complex
M. gastri
M. terrae
M. triviale
M. scrofulaceum
M. szulgai
M. gordonae
M. flavescens
M. xenopi

Fotocromgenas

M. kansasii
M. marinum
M. simiae

Caractersticas diferenciales de las especies de Mycobacterium tuberculosas

Poder
patgeno

Crecim
iento
<7das

Crecimi
ento
>7das

Escotocromg
eno

Fotocromgeno

Aspecto
colonias

Niacina

M.
tuberculosis

Rugosas
y
excrecen
tes

M. bovis

Lisas

M.
africanum

Rugosas

Red.
Nitrato

Catalasa
a 68C

Hidrlisis
de
Tween

Crecimiento
en Lowenstein
con 5%ClNa

LEVADURAS

Cultivo en SabouraudCloranfenicol
2-4 das
25-37C
Aerobiosis

Tincin Gram

Test
Filamentacin

Formacin
clamidosporas

Resistencia a
Actidiona

Reduccin
de
Tetrazolium

Zimograma

Auxonograma

0,5ml plasma
+ 1-2 colonias

Medio Corn Meal

Tween 80

Medio Sabouraud
con Actidiona

Medio Sabouraud
con Tetrazolium

Fermentacin
HC

Asimilacin
HC

1-4h
37C

24-48h
25-28C

24h
25-37C

24-48h
25-28C

AG Acido+Gas
- Sin reaccin
A acido sin gas

+
Crecimiento
alrededor del
disco

Examen
microscpico

Examen
microscpico

+
Tubos
germinativos

+
Colonias
Rosa-rojo-violeta

Identificacin de levaduras patgenas

Forma
levaduriforme

Tubo
de germinacin

Agar Corn Meal

Tween 80, 72h

+
C. albicans

No hifas

Hifas

Cpsula

Artrosporas

Ureasa

Ureasa

Slo blastosporas

Clamidosporas

Morfologa

Geotrichum

Asimilacin

Cryptococcus sp.

Slo glucosa y
trehalosa

Otros azcares

+
Trichosporum

Fermentacin

Torulopsis glabrata

Ascosporas

+
Saccharomyces
Hansenula

Candida sp.

Torulopsis

C. albicans