Objetivos

Conocer las caractersticas y componentes de los diferentes tipos de microscopio

y electrnicos.
Comprender los procedimientos experimentales de procesamiento de muestras b
para su observacin a nivel microscpico.
Introducir las modernas tcnicas de histologa molecular in situ y de anlisis de im
Iniciar al estudiante en el anlisis de problemas cientficos relacionados
contenidos de la asignatura y en la metodologa bsica para su resolucin.

Metodologa

El criterio que hemos elegido para el desarrollo y aprovechamiento ptimo del curso con
que el alumno deber:

Asimilar los fundamentos tericos de cada tema. No consiste en memorizar a pies ju

los conceptos planteados, si no ms bien en entenderlos y tener claras las implicac
derivadas de los mismos. Los temas sern expuestos por el profesor, en el aula desig
efecto, en veintitrs clases presenciales de una hora de duracin cada una.

Resolver las relaciones de problemas y cuestiones cientficas que se aportarn du

curso. Con ellas se pretende iniciar al alumno en la resolucin de problemas cientf
las implicaciones que se derivan de los fundamentos tericos impartidos. Las re
sern entregadas al profesor, en los plazos que se indiquen, para su evaluacin.

Dado el carcter experimental de la asignatura, asistir a las siete sesiones prc

laboratorio, de dos horas diarias de duracin, que se realizarn a lo largo del semes
sesin semanal durante cinco semanas y las dos ltimas sesiones en otra sema
prcticas 2, 3, 5, 6 y 7 tendrn lugar en el laboratorio de prcticas de Biologa Celu
A2, dependencia 223A), y las prcticas 1 y 4 en el aula de informtica I-24 del edi
Las fechas asignadas y la distribucin horaria de los grupos figuran a continuac
alumnos podrn elegir el grupo que mejor les convenga entre cuatro diferentes. En
no poder asistir a alguna prctica en la hora y grupo elegidos y con objeto de no p
sesin correspondiente, podrn cambiarse con un compaero de otro grupo.

El material iconogrfico y los esquemas utilizados en clase, as como los guiones de prctic
actividades propuestas y tutoriales de manejo de los programas informticos utilizados en
prcticas, estarn a disposicin de los alumnos en la Plataforma Virtual de la Universidad d

Temario
Tema 1. Medios de observacin y obtencin de imgenes microscpicas.
1.1. El mmicroscopio. Tipos de microscopios.
1.2. Captura y anlisis de imagen.
TEMA 2. PROCESADO DE LAS MUESTRAS PARA SU ESTUDIO MICROSCPICO.
2.1. Examen directo de los tejidos: preparacin de cortes y extensiones.
2.2. Fijacin, inclusin y microtoma.
2.3. Soportes para las secciones.
Tema 3. El proceso general de tincin.
3.1. Fundamentos de la tincin en microscopa ptica.
3.2. El contraste en microscopa electrnica.
3.3. Mtodos citolgicos e histolgicos selectivos.
TEMA 4. TCNICAS DE HISTOLOGA MOLECULAR.
4.1. Citoqumica e histoqumica.
4.2. Inmunohistoqumica. Lectin-histoqumica.
4.3. Hibridacin in situ. PCR in situ.
4.4. Autorradiografa.
4.5. Criofractura.

Sesiones prcticas de laboratorio

La duracin de cada sesin ser de 2 horas. Los alumnos podrn elegir el grupo que mejor les c
entre cuatro grupos diferentes, distribuidos en dos das, del siguiente modo:
Prctica Grupos

Hora

8.30-10-30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10-30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10-30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

8.30-10-30

10.30-12.30

8.30-10.30

10.30-12.30

3
4
3
4

8.30-10.30
10.30-12.30
8.30-10.30
10.30-12.30

Fecha
4 marzo
5 marzo
1 abril
2 abril
15 abril
16 abril
29 abril
30 abril
13 mayo
14 mayo
27 mayo
28 mayo
3 junio
4 junio

Prctica
1. Introduccin
al
anlisis
de
Aula de Informtica (I-24 del edificio A-4): martes 4 y mircoles 5 de marzo.
Prctica 2. Tincin vital. Tincin de colgeno de secciones hepticas y observacin con el micro
polarizacin.
Laboratorio: martes 1 y mircoles 2 de abril.
Prctica
3. Cuantificacin
colorimtrica
de
colgeno in
situ.
Captura
de
i
Laboratorio: martes 15 y mircoles 16 de abril.

Prctica
4. Anlisis
de
las
imgenes
ca
Aula de Informtica (I-24 del edificio A-4): martes 29 y mircoles 30 de abril.
Prctica
5. Tcnica
histoqumica de
Laboratorio: martes 13 y mircoles 14 de mayo.
Prcticas
6
y
7. Immunocit
Laboratorio: martes 27 y mircoles 28 de mayo: intensivas grupos 1 y 2; martes 3 y mi
de junio: intensivas grupos 3 y 4.

Evaluacin
El alumno deber:

Realizar un examen final de la asignatura, que podr ser bien en la fecha fijada por la Facu
bien en una fecha alternativa (acordada entre los alumnos y el profesor), pero teniendo en
que cada alumno slo se examinar una vez por convocatoria. La calificacin obtenida ser
mximo el 70% de la nota final.

El examen constar de 50 preguntas de respuesta muy breve, versando sobre la tota

temario impartido en clase (terico y prctico), as como problemas y cuestiones sim
las realizadas por los alumnos.

El alumno deber, adems:

Participar de modo activo en la resolucin de los problemas y cuestiones cientficas

propuestas y obtener una evaluacin positiva (mximo 10% de la nota final) de las
relaciones entregadas al profesor.

Asistir a las sesiones prcticas de laboratorio (mximo 10% de la nota final) y prese
cuaderno con los procedimientos experimentales y los resultados obtenidos en las m
(mximo 10% de la nota final).

Para los alumnos que se examinen en convocatorias posteriores a la de Junio de 2007 (por
superar la asignatura en junio o por no presentarse a la misma):

El examen constar de 50 preguntas de respuesta muy breve, versando sobre la tota

temario impartido en clase (terico, prctico y actividades).

Bibliografa

BOZZOLA JJ, RUSSELL LD. (1992). Electron Microscopy: Principles and Techniques for B
Jones and Bartlett Publishers, Boston.
CARRASCAL E. (1999). Prcticas de Histologa. Ed. Librera Cervantes, Salamanca.

HAYAT MA. (2000). Principles and techniques of electrn microscopy. Biological app
Cambridge University Press.

HERMAN B, LEMASTER JJ. (1992). Optical microscopy. Emerging methods and app
Academic Press Inc.

JUAN J. (1998). Tcnicas Instrumentales en Biologa Celular. Ed. Club Universitario. S Vicen
LOCQUIN M, LANGERON M. (1985) Manual de microscopa, Ed. Labor
MARTI O, AMREIM M. (1993). STM and SFM in biology. Academic Press Inc.

MERCER EH, BIRBECK MSC. (1974). Manual de microscopa electrnica para bilogos. Ed
Madrid.

OJEDA JL. (1997). Mtodos de microscopa electrnica de barrido en biologa. Univer

Cantabria.

PEDROSA, JA, ESTEBAN, FJ, DEL MORAL ML, HERNNDEZ R, BLANCO S, PEINADO MA.
Manual prctico de histologa animal y vegetal, Universidad de Jan, Coleccin Apuntes en
PEINADO MA, PEDROSA JA, RODRIGO J.(1996), Avances en inmuno-citoqumica y tcnicas
relacionadas, Universidad de Jan.

RENAU J, MEGAS L. (1998). Manual de tcnicas de microscopa electrnica (M.E.T.), Uni

de Granada.

SAMAR ME, VILA RE, ESTEBAN FJ. (2000). Tcnicas Histolgicas: fundamentos y aplicacio
Kosmos, Argentina.

Pginas web relacionadas

http://www.itg.uiuc.edu/technology/atlas/
Microscopa confocal y de fluorescencia
http://www.leica-microsystems.com/llt_index.html
Pgina de la casa Leica, sobre fundamentos de este microscopio y modelos

http://www.denniskunkel.com/
Curiosas microfotografas con microscopa de barrido y posibilidad de manejar virtualmente uno
microscopios
http://www.nottingham.ac.uk/pathology/default.html
Completa coleccin de tcnicas de tincin, con sus correspondientes protocolos

http://www.cs.ubc.ca/spider/ladic/intro.html
Pgina de introduccin al funcionamiento del microscopio confocal, preparacin de muestras y proc
las imgenes
http://bris.ac.uk/pathandmicro/cpl/lablinks.html
Manual de tcnicas de preparacin de muestras y tincin
http://wwwcivm.mc.duke.edu/civmGallery/L1Gallery.html
Fundamentos de la microscopa de resonancia magntica y completa galera de imgenes animadas

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/index.html
Una de las mejores pginas sobre microscopa, con amplios textos sobre los diversos tipos de micro
su funcionamiento. Numerosos tutoriales en java sobre el manejo de distintos microscopios.
descargar un completo manual sobre microscopa en formato Acrobat.
http://www.mos.org/sln/sem/
Descripcin y funcionamiento del microscopio electrnico de barrido y galera de imgenes

http://www.mse.iastate.edu/microscopy/home.html
Fundamentos del microscopio electrnico de barrido, descripcin del funcionamiento con n
esquemas. Galera de imgenes

http://em-outreach.sdsc.edu/web-course/toc.html
Completo tratado sobre microscopa electrnica: fundamentos, microscopios, preparacin de m
procesado digital de las imgenes
http://www.btrip.mednet.ucla.edu/bri/homepage.htm
Fundamentos tericos de microscopa ptica, fluorescencia y confocal
http://www.unl.edu/CMRAcfem/em.htm
Descripcin y fundamento de los microscopios electrnicos de transmisin y barrido
http://www.library.cornell.edu/preservation/tutorial-spanish/contents.html
Completo tutorial de digitalizacin de imgenes, donde se explican los trminos bsicos

http://www.scioncorp.com/frames/fr_scion_products.htm/ http://rsb.info.nih.gov/ij/
Direcciones desde donde pueden descargarse dos programas de anlisis de imagen (Scion Image e Im
respectivamente.
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTO.html
Se describen numerosos protocolos de tincin y otras tcnicas histolgicas
http://swehsc.pharmacy.arizona.edu/exppath/index.html
Pgina con numerosos enlaces relacionados con microscopa y tcnicas
http://olan.marseille.inserm.fr/confocal/plus-conf.html#principe
Principios sobre la microscopa confocal y la fluorescencia