Desnaturalizacion de Proteinas

DESNATURALIZACION DE PROTEINAS
JIMENEZ OSORIO DAVID ANTONIO

CODIGO: 20131181021
CLAVIJO VARON YEFERSSON STEVENS

CODIGO: 20131181033
BIOQUIMICA
DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA
UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOS DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
INGENIERA SANITARIA
BOGOT
2014
RESUMEN
informacin necesaria y suficiente para
Se conoce como desnaturalizacin a la

Perdida por parte de las protenas de su
estructura de orden superior (Secundaria,
Terciaria, cuaternaria), y queda una cadena
polipeptidica
reducida
estadstico
sin
polmero
ninguna
tridimensional
fija.
cualquiera,
estructura
la
un
En
estructura
una
protena
nativa
la
desnaturalizada solo tienen en comn la

estructura primaria, es decir la secuencia de
aminocidos que la componen, los dems
niveles
de
organizacin
estructural
desaparecen en la estructura desnaturalizada.

La
desnaturalizacin
trae
diversas
adoptar niveles superiores de estructuracin.

ABSTRACK
It is known as the Lost denaturation of
proteins by their higher order structure
(secondary, tertiary, quaternary), and is
reduced to a statistical polymer without any
fixed
dimensional
polypeptide
chain
structure. Any protein in the native and

denatured structure have in common only the
primary structure , ie the sequence of amino
acids composing , the other levels of
structural organization to the denatured
structure disappear .
Denaturation brings various effects
as
consecuencias como: el cambio en las
changes in the hydrodynamic properties i.e.
propiedades hidrodinmicas es decir el
increase in viscosity, while the diffusion
aumento de la viscosidad, a la vez que
coefficient decreases, on the other hand a
disminuye el coeficiente de difusin,
por
decrease in solubility occurs because the
otro lado se produce una disminucin de su
hydrophobic residues of the interior appear
solubilidad, debido a que
at the surface, and finally the loss of the
los residuos
hidrofbicos del interior aparecen en la

superficie, y finalmente se produce la
perdida de las propiedades biolgicas.
Una
protena
desnaturalizada
cuenta
biological properties occurs.

A denatured protein has only its primary
structure, for this reason; in many cases the
denaturation process is reversible, as it is the
nicamente con su estructura primaria, por
primary
este motivo, en muchos casos el proceso de
information necessary and sufficient to adopt
desnaturalizacin es reversible, ya que es la
higher
estructura primaria la que contiene la
structure
levels
that
of
contains
the
structure.
PALABRAS CLAVES
Suspensin
Estructura
Desnaturalizacin
Calor
PH
10, se llama polipptido y si el nmero
KEYWORDS
suspension
structure
denaturation
heat
PH
estructurales, las
es superior a 50 aa, se habla ya

de protena.
Las
protenas
tienen
distintas
cuales
formas
se encuentran
organizadas de la siguiente manera:
Estructura primaria: La estructura

primaria es la secuencia de aminocidos
OBJETIVOS
de
la
protena.
aminocidos
NO OLVIDAR LOS OBJETIVOS
Nos
componen
indica
la
qu
cadena
polipeptdica y el orden en que dichos
MARCO TEORICO
aminocidos se encuentran. La funcin
Las protenas son biopolmeros de gran
de una protena depende de su secuencia
peso
y de la forma que sta adopte.1
molecular,
las
cuales
estn
constituidas por: Carbono (C) Nitrgeno

(N),
Oxigeno
(O),
aunque tambin
Hidrogeno
(H),
pueden contener
azufre (S) y Fosforo (P) y, en menor

proporcin elementos tales como Hierro
(Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg) entre
otros compuestos.
Estos elementos qumicos se agrupan
para
formar
unidades
estructurales
(monmeros) Llamados Aminocidos

(aa), Estos a su ven son los monmeros
de la protenas. La unin de un bajo
nmero de aminocidos da lugar a
un pptido; si el nmero de aa que
forma la molcula no es mayor de 10, se
denomina oligopptido; si es superior a
Estructura
secundaria:
La estructura secundaria es la disposicin

de la secuencia de aminocidos en el
espacio. Los aminocidos, a medida que van
siendo enlazados durante la sntesis de
protenas y gracias a la capacidad de giro de
sus enlaces, adquieren una disposicin
espacial estable, la estructura secundaria.
de zigzag, denominada disposicin en

lmina plegada.
Presentan esta estructura secundaria la
queratina de la seda o fibrona.1
Existen dos tipos de estructura secundaria:

1.- La (alfa)-hlice
Esta estructura se forma al enrollarse
helicoidalmente sobre s misma la estructura
primaria.
Se debe a la formacin de enlaces de
hidrgeno entre el -C=O de un aminocido y
el -NH- del cuarto aminocido que le sigue.
ESTRUCTURA
TERCIARIA:
La estructura terciaria informa sobre la

disposicin de la estructura secundaria de un
polipptido al plegarse sobre s misma
originando una conformacin globular.
Esta conformacin globular se mantiene
estable gracias a la existencia de enlaces
entre los radicales R de los aminocidos.
Aparecen varios tipos de enlaces:
1.- el puente disulfuro entre los radicales de
aminocidos que tienen azufre.
2.- los puentes de hidrgeno.
3.- los puentes elctricos.
4.- Las interacciones hidrfobas.1
2.- La conformacin beta ()
En esta disposicin los aminocidos no

forman una hlice sino una cadena en forma
Como la estructura tridimensional de una
protena se mantiene mediante interacciones
dbiles, si se alteran las condiciones que
mantienen estas fuerzas de atraccin se
produce la desnaturalizacin de la protena:
Modificacin estructural que conduce a la
prdida de su funcin.
FACTORES DE DESNATURALIZACION:
ESTRUCTURA CAUTERNARIA:
El calor Afecta principalmente a los
Esta estructura informa de la unin,
enlaces de puente de hidrogeno y
mediante enlaces dbiles (no covalentes) de
produce una desnaturalizacin de las
varias cadenas polipeptdicas con estructura
protenas suele ocurrir de forma
terciaria, para formar un complejo proteico.
brusca al alcanzar una determinada
Cada una de estas cadenas polipeptdicas
temperatura.
recibe
el
nombre
de protmero.1
El PH
La unin covalente de los aminocidos para
formar las protenas hace que los grupos
funcionales amino y carboxilo de todos los
aminocidos, excepto el primero y el ltimo,
se vean modificados debido a la formacin
del enlace peptdico. Por este motivo, en los
polipptidos, la naturaleza qumica de la
cadena lateral de los aminocidos es la que
va a condicionar su solubilidad en agua, su
reaccin
y el tipo de interacciones no
covalentes que se pueden establecer. Las

cadenas
laterales
de
los
diferentes
aminocidos pueden ser de naturaleza
las protenas), cambia con el PH. Por este
Hidrofobica (Apolar),
polar sin carga, o
motivo, un cambio de PH puede alterar las
pueden presentar carga a determinados
interacciones electrostticas que participan
valores de PH.
en el mantenimiento de la estructura de la
Los aminocidos presentan un grupo amino
protena.
con carcter bsico (aceptor de protones) y

un grupo carboxlico con carcter acido
(dador de protones). Como a PH fisiolgico
los aminocidos se encuentran en su forma
ion dipolar, en realidad el carcter acido lo
PRESENCIA DE SALES:
presenta el grupo amino protonado y el
La presencia de sales o agentes como el ion
carcter bsico el grupo carboxilo ionizado.
guanidino tambin pueden afectar a las
IMAGEN 6
interacciones electrostticas ya que los iones

disueltos compiten a la hora de establecer
interacciones electrostticas de este tipo.
Uno de los agentes desnaturalizantes que se
utiliza con ms frecuencia es la urea puesto
que compite en la formacin de enlaces de
puentes de hidrogeno. Las interacciones
hidrofobicas se vern alteradas por
sustancias que puedan establecer
interacciones de la misma naturaleza con los
residuos, como lo son los disolventes
apolares y los detergentes.
Tomada de conceptos esenciales de Bioquimica.

Cap 4. Pag 61.
En algunos casos, si se establecen las

condiciones fisiolgicas la protena recupera
su conformacin nativa y su funcin en un
El estado de ionizacin de las cadenas
proceso denominado re naturalizacin este
laterales de los aminocidos (monmeros de
hecho demuestra que toda la conformacin
necesaria para que se produzca el
Vasos de precipitado de 250 ml
plegamiento se encuentra en la secuencia de
PH metro
aminocidos de la protena.
MATERIALES
Reactivos
Albumina
Gelatina
Casena
Clara de huevo
Acido ntrico concentrado
Acetona
Etanol
Agua Destilada
Instrumentos
Aro
Malla de asbesto
soporte universal
Gradilla
Agitador de vidrio
tubos de ensayo (8)
Pipeta graduada (5 ml)
Muestras
RESULTADOS
Compuest
pH
inicial
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR PH EXTREMO

pH final
Observado
Imagen
Se
presenci
desprendimiento
de
calor
la
desnaturalizacin de las
Clara de
9.38
1.22
huevo
protenas, donde viro

del color original de
clara de huevo a un
color amarillo as como
blanco
solidificacin
la
de
la
misma.
Se presenci que en la
Gelatina
5.14
1.20
muestra hubo un viraje

de color blanco a una
tonalidad
transparente.
amarilla
Se presenci que en la
muestra hubo un viraje
Casena
0.96
de color blanco a una

tonalidad
transparente
ligeramente amarilla.
Se presenci el viraje
de Color blanco
Albumina
6.46
1.10
amarillo
precipitado,
a
con
es
decir
hubo desnaturalizacin
de esta.
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR CALOR

Observado
Imagen
Compuest
o
Clara de
Se presenci solidificacin de la
huevo
muestra, es decir la protena se

desnaturalizo.
Gelatina
Se presenci el cambio de textura

as como el viraje de color blanco
a incoloro.
Se evidencio la desaparicin de
la tonalidad blanca existente
antes de la prueba. (Existi un
Casena
viraje de Color en la solucin de

uno de tonalidad blanco a uno de
transparente).
No se evidencian cambios fsicos
Albumina
en la solucin terminada la
prueba, respecto a las
caractersticas fsicas de la
solucin antes de la prueba.
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR PRECIPITACIN DE SOLVENTES ORGNICOS

ETANOL
Compuesto
Observado
Imagen
Se presenci el viraje a color blanco con
Clara de huevo
solidificacin de muestra, es decir se

desnaturalizo.
Se presenci que la muestra viro de una

Gelatina
tonalidad blanca a una incolora, este

cambio
fsico
nos
indica
desnaturalizacin de la protena.
la
Casena
Se presenci que la muestra viro de una

tonalidad blanca a una incolora, este
cambio
fsico
nos
indica
la
desnaturalizacin de la protena.
Albumina
Se
presenci
tres
fases
de
color:
incoloro, blanco y un blanco con un tono

ms claro respectivamente.
CETONA
Compuesto
Clara de huevo
Observado
Se presenci el viraje a
color
blanco
con
solidificacin de muestra, es
decir se desnaturalizo.
Gelatina
Se presenci que la muestra

continua incolora pero con
la separacin de una nube de
color blanco en el centro del
tubo.
Casena
Se presenci un anillo de
tubo.
Imagen
Albumina
Se presenci tres fases de

color incoloro, blanco con
un tono claro y blanco
respectivamente.
ANLISIS DE RESULTADOS
Compuest
pH inicial
o
Clara de
9.38
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR pH EXTREMO

pH final
Observado
Anlisis
1.22
huevo
Se
presenci
desprendimiento de calor y
la desnaturalizacin de las
protenas, donde viro del
color original de clara de
huevo a un color amarillo
as
Gelatina
5.14
1.20
como
6
6.46
0.96
1.10
la
El estado de ionizacin de las cadenas laterales de los

solidificacin de la misma.
Se presenci que la muestra aminocidos (monmeros de las protenas), cambia con el PH.
hubo un viraje de color Por este motivo, un cambio de PH puede alterar las
blanco
Casena
Albumina
blanco
una
tonalidad interacciones electrostticas que participan en el mantenimiento

de la estructura de la protena. Al agregar el HNO3 a las
amarilla.
No se presenci cambio.
diferentes protenas, se produce una ruptura del enlace
Se presenci el viraje de
peptidico (hidrlisis), lo cual genera la formacin del grupo
incoloro a amarillo con
Amoniaco (NH3), en la parte hidrofobica de los aminocidos.
precipitado, es decir hubo
El PH final, de predominancia acida se debe a que a PH acido,
desnaturalizacin de esta.
en los aminocidos dominan las formas protonadas con carga
positiva.
(vase Imagen 6 Marco teorico), El viraje de color es producto
de la reduccin de los aminocidos que conforman la protena.
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR PRECIPITACIN DE SOLVENTES ORGNICOS

ETANOL
Compuesto
Observado
Anlisis
Clara de huevo
color
blanco
con La polaridad del disolvente en la solucin proteica disminuyo en presencia
solidificacin de muestra, es de las protenas, Esto genero la disminucin del grado de hidratacin de los
Gelatina
grupos inicos superficiales de la molcula proteica, provocando la
continua incolora y una
nube en suspensin de color
Casena
blanca.
Se presenci
incoloras
dos
fases
y un pequeo
sedimento de color blanco,

es
decir
si
desnaturalizacin
muestra.
hubo
de
la
desnaturalizacin y precipitacin de la protena (estructura primaria).
Albumina

color incoloro, blanco y un
blanco con un tono mas
claro respectivamente.
CETONA
Compuesto
Clara de huevo
Observado
color
blanco
Anlisis
con La mezcla entre disolventes organicos y una solucion proteica produce la
solidificacin de muestra, es interaccion del disolvente oranico con el interior hidrofbico de las protenas
Gelatina
lo cual genera la desorganizacin de la estructura terciaria, lo cual produce
continua incolora pero con
la separacin de una nube de
Casena
tubo.
Se presenci un anillo de
Albumina
tubo.
color incoloro, blanco con
la desnaturalizacin y precipitacin de la protena.
un tono claro y blanco

respectivamente.
Compuest
DESNATURALIZACIN DE PROTEINAS POR CALOR

Observado
Imagen
Anlisis
o
Clara de
Se presenci solidificacin de la
huevo
muestra, es decir la protena se
Cuando la temperatura es elevada aumenta la energa
desnaturalizo.
cintica
de
las
desorganizacin de
molculas,
lo
cual
genera
una
la envoltura acuosa de las protenas,
Gelatina
Se presenci el cambio de textura
dicha
desorganizacin
as como el viraje de color blanco
desnaturalizacin de la protenas. Asimismo, un aumento de
a incoloro.
la
temperatura
destruye
genera
las
finalmente
interacciones
dbiles
la
desorganiza la estructura de la protena, de forma que el
Se evidencio la desaparicin de
la tonalidad blanca existente
antes de la prueba. (Existi un
Casena
interior hidrfobo interacciona con el medio acuoso y se

produce la agregacin y precipitacin de la protena
desnaturalizada.
viraje de Color en la solucin de

uno de tonalidad blanco a uno de
transparente).
No se evidencian cambios fsicos
Albumina
en la solucin terminada la
prueba, respecto a las
caractersticas fsicas de la
solucin antes de la prueba.
Conclusiones
Se determin el ndice de protenas por medio del Lowry donde las muestras problemas se encuentran entre el patrn dos y tres, el
ndice de ppm disueltas en la muestras son altas si esto se vertiera de manera masiva en las aguas servidas sera de un alto grado de
contaminante, es decir a nivel industrial se deberan tratar antes de enviar por el alcantarillado.
Se elabor una curva de calibracin donde se observa que a mayor grado de absorbancia mayor el ndice de protenas, esto es debido a
que los enlaces peptdicos retienen la incidencia de la luz.
BIBLIOGRAFIA
1 http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/ProteinasEstruct.htm
Humberto M. Zamora E. (2012). Mtodos selectivos de Bioqumica Experimental. Pg. 7-13.

Juan C. Martnez V.(1972). Anlisis orgnico cualitativo. Colombia.
Aspectos Tericos Relacionados Con el Laboratorio de Bioqumica.
http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2bch/b1_bioquimica/t13_glucidos/test.htm
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_04.htm
http://www.uco.es/master_nutricion/nb/Mataix/proteinas.pdf
http://acasti.webs.ull.es/docencia/practicas/4.pdf
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/

Desnaturalizacion de Proteinas

Încărcat de

Informații document

Descriere originală:

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Desnaturalizacion de Proteinas

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

DESNATURALIZACION DE PROTEINAS

JIMENEZ OSORIO DAVID ANTONIO

CLAVIJO VARON YEFERSSON STEVENS

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOS DE CALDAS

informacin necesaria y suficiente para

Se conoce como desnaturalizacin a la

desnaturalizada solo tienen en comn la

desaparecen en la estructura desnaturalizada.

adoptar niveles superiores de estructuracin.

structure. Any protein in the native and

consecuencias como: el cambio en las

changes in the hydrodynamic properties i.e.

propiedades hidrodinmicas es decir el

increase in viscosity, while the diffusion

aumento de la viscosidad, a la vez que

coefficient decreases, on the other hand a

disminuye el coeficiente de difusin,

decrease in solubility occurs because the

otro lado se produce una disminucin de su

hydrophobic residues of the interior appear

solubilidad, debido a que

at the surface, and finally the loss of the

hidrofbicos del interior aparecen en la

biological properties occurs.

nicamente con su estructura primaria, por

este motivo, en muchos casos el proceso de

information necessary and sufficient to adopt

desnaturalizacin es reversible, ya que es la

estructura primaria la que contiene la

10, se llama polipptido y si el nmero

es superior a 50 aa, se habla ya

organizadas de la siguiente manera:

Estructura primaria: La estructura

NO OLVIDAR LOS OBJETIVOS

polipeptdica y el orden en que dichos

aminocidos se encuentran. La funcin

Las protenas son biopolmeros de gran

de una protena depende de su secuencia

y de la forma que sta adopte.1

constituidas por: Carbono (C) Nitrgeno

azufre (S) y Fosforo (P) y, en menor

(monmeros) Llamados Aminocidos

La estructura secundaria es la disposicin

de zigzag, denominada disposicin en

Existen dos tipos de estructura secundaria:

La estructura terciaria informa sobre la

En esta disposicin los aminocidos no

El calor Afecta principalmente a los

Esta estructura informa de la unin,

enlaces de puente de hidrogeno y

mediante enlaces dbiles (no covalentes) de

produce una desnaturalizacin de las

varias cadenas polipeptdicas con estructura

protenas suele ocurrir de forma

terciaria, para formar un complejo proteico.

brusca al alcanzar una determinada

Cada una de estas cadenas polipeptdicas

covalentes que se pueden establecer. Las

las protenas), cambia con el PH. Por este

polar sin carga, o

motivo, un cambio de PH puede alterar las

pueden presentar carga a determinados

interacciones electrostticas que participan