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Arequipa, 30 de Marzo del 2015.

Biotecnologa Mdica

PRACTICA 1
PREPARACIN DE SOLUCIONES, USO Y MANEJO DE
MICROPIPETAS

RESUMEN
Las soluciones en qumica, son mezclas homogneas de sustancias en iguales o distintos estados
de agregacin. La concentracin de una solucin constituye una de sus principales caractersticas
y sebe ser siempre expresada en mol/lt (segn el SI).
Bastantes propiedades de las soluciones dependen exclusivamente de la concentracin. Su estudio
resulta de inters tanto para la fsica como para la qumica.
La sustancia presente en mayor cantidad suele recibir el nombre de solvente, y a la de menor
cantidad se le llama soluto y es la sustancia disuelta.
Al momento de preparar soluciones hay que tomar en cuenta varios aspectos, en el anlisis
qumico son de particular importancia las micropipetas.

La Micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir


pequeos volmenes de lquidos por lo cual es indispensable que sean lo ms precisas y
exactas
posibles.
Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms
habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20, 200 y 1000 l,
respectivamente.
Es de destacar que el uso de Micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener que
lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente
son estriles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear
volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l), y las azules para pipetear volmenes grandes
(por ejemplo, 800 l).
Palabras Clave: Exactitud, precisin, tips, rack, molaridad, disolucin.

ABSTRACT
Chemical solutions are homogeneous mixtures of substances in the same or different
states of aggregation. The concentration of a solution is one of its main characteristics
and sebe always be expressed in mol / l (according to SI).
Quite a few properties of solutions depend solely on concentration. Their study is of
interest to both physics and for chemistry.
This substance in greater quantity is often called solvent, and the lowest amount is called
the solute and the dissolved substance.
When preparing solutions must take into account several aspects, in chemical analysis
they are of particular importance micropipettes.

MANRIQUE MURILLO, JOS LUIS

Arequipa, 30 de Marzo del 2015.

Biotecnologa Mdica

The micropipette is a laboratory instrument used to absorb and transfer small volumes of
liquid so it is essential to be as precise and accurate possible.
The captables volumes by these instruments vary by model: the most common, called
p20, p200 and p1000, support a maximum of 20, 200 and 1000 .mu.l, respectively.
It is noteworthy that the use of micropipettes allows to use different liquids without
having to wash the apparatus: for that, disposable tips, plastic, which are usually used
sterile. Several types of points: for example, yellow for pipetting small volumes (eg, 10
.mu.l), and blue for pipetting large volumes (eg, 800 .mu.l).
Keywords: Accuracy, precision, tips, rack, molarity, dissolution.
b. Se presiona el botn superior
suavemente hasta el primer tope.
MATERIALES Y METODOS
c. Se sumerge la punta, en la
solucin que se necesita pipetear
REACTIVOS
estando seguros que la punta este
Tris Base
bien colocada y que no haya
Cloruro de Amonio
ningn
tipo
de
SDS
residuos
entre
la
punta
y
el
cuerpo
NaCl
de la pipeta.
Etanol
d. Mantenga la pipeta verticalmente
Isopropanol
mientras toma la solucin.
EDTA
cido Actico
e. Para descartar la solucin de la
Bromuro de Etidio
punta presione el botn hasta el
Azul de bromoenol
segundo
tope.
f. Descarte las puntas utilizando el
MATERIALES
eyector que traen las pipetas
Balanza Analtica

Potencimetro
Probetas
Beakers
Fiolas
Micropipetas p200 y p1000

Control Gravimtrico para la Precisin y


Exactitud de la Micropipetas
Se pipete agua destilada; la medidas
de 50ul, 100ul y 200ul con la
Micropipeta p200 y 250ul, 500ul y
1000ul con la Micropipeta p1000.
b. Se hicieron diez (10) repeticiones de
cada medicin.
c. Se pes en balanza analtica cada uno
de las repeticiones y se anotaron los
pesos.
a.

PROCEDIMIENTO PARA EL MANEJO


DE MICROPIPETAS

Operacin del Equipo


a. Seleccionar

la Micropipeta a

utilizar

MANRIQUE MURILLO, JOS LUIS

Arequipa, 30 de Marzo del 2015.

Biotecnologa Mdica

PROCEDIMIENTO
PARA
LA
PREPARACION DEL BUFFER DE LISIS
DE ERITOCITOS.
a.

Se prepar el buffer partiendo de las


soluciones Stock que se detallan a
continuacin.

b.

Se hicieron los clculos para el


volumen que exiga la prctica
(50ml)

Stock:
NaHCO3 (0.1M)

ClNH4 (1.6M)

NaHCO3 5ml
ClNH4

2ml

EDTA

1.8612 g

EDTA (PM=372,24gr/mol)

RESULTADOS
P200

p1000

Valores
Nominales

50

100

200

250

500

1000

Pesaje 1

0.0473

0.0986

0.1873

0.2543

0.5125

1.0106

Pesaje 2

0.0506

0.0985

0.1936

0.2568

0.5108

1.0055

Pesaje 3

0.0492

0.0984

0.1986

0.2542

0.5087

1.0087

Pesaje 4

0.0503

0.0986

0.1982

0.2572

0.5111

1.0312

Pesaje 5

0.0501

0.0986

0.1998

0.258

0.5127

1.0032

Pesaje 6

0.0502

0.099

0.1952

0.2582

0.5131

1.0215

Pesaje 7

0.0499

0.0991

0.199

0.2582

0.5108

1.0411

Pesaje 8

0.0494

0.0995

0.198

0.2605

0.5112

1.0133

Pesaje 9

0.05

0.0998

0.1998

0.2575

0.511

1.0135

Pesaje 10

0.0502

0.0995

0.2

0.2572

0.5128

1.0129

0.04972

0.09896

0.19695

0.25721

0.51147

1.01615

-99.90056

-99.901

-99.9015

-99.8971

-99.8977

-99.8983

(ul) ->

Valor Medio
(X)
Exactitud
EXACTITUD
p200

EXACTITUD
p1000

-99.901041
-99.897735

MANRIQUE MURILLO, JOS LUIS

Arequipa, 30 de Marzo del 2015.

Biotecnologa Mdica

CONCLUSIONES

La Micropipeta p200 no presenta mayor desviacin estndar respecto al valor nominal por
lo cual es considerada apta para el trabajo en laboratorio.
La exactitud de la Micropipeta p1000 se aleja imperceptiblemente del valor nominal por lo
cual recomendamos calibrarla y usarla solo en caso de no disponer de otra.
Durante la prctica la cantidad de EDTA fue insufiente por lo cual se prepar ms para el
resto de alumnos, con ellos quedaron solidos los conocimientos adquiridos respecto a la
preparacin de soluciones.

MANRIQUE MURILLO, JOS LUIS

Arequipa, 30 de Marzo del 2015.

Biotecnologa Mdica

BIBLIOGRAFA
LIBROS.

Conceitos Basicos de Tecnicas em Biologia Molecular


Ministerio de Agricultura, Pecuaria e Abastecimiento (Brasil)
Editorial Embrapa
Setembro, 2008

Instrumental en el laboratrio de Analisis Clinico


HNCASE (ESSALUD AREQUIPA)
Afiche SINESSS
Abril 2005

VIRTUAL.

https://es.wikipedia.org/wiki/Precisi%C3%B3n_y_exactitud
www.monografias.com

MANRIQUE MURILLO, JOS LUIS

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