Sunteți pe pagina 1din 38

INGENIERA DE PROCESOS AGROINDUSTRIALES II

Prctica N8: OBTENCION Y EVALUACION DE GELATINA A


PARTIR DE HUESOS, PIEL Y PATAS DE ANIMALES
Profesor:

Ing. Jorge Dominguez Castaeda

Alumnos:
PRIETO ZARE SHYLLA
VASQUEZ AGUIRRE GABRIEL
VERA MOSTACEROS CATERINE

Nuevo Chimbote - Noviembre del 2015

INDICE
INTRODUCCION:............................................................................................................3
OBJETIVOS:.....................................................................................................................4

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


FUNDAMENTO TEORICO:............................................................................................4
GELATINA.................................................................................................................4
COLAGENO..............................................................................................................5
OBTENCION DE GELATINA..............................................................................6
Extraccin cida.-......................................................................................................7
Extraccin alcalina.-..................................................................................................7
Extraccin enzimtica.-.............................................................................................7
Extraccin microbiana.-............................................................................................7
COLGENO HIDROLIZADO..............................................................................8
RENDIMIENTO.......................................................................................................9
VALOR BIOLGICO DE LA GELATINA........................................................9
FUERZA DE GEL DE LA GELATINA..............................................................9
USOS DE LA GELATINA...................................................................................10
METODOS USADOS EN LA OBTENCION DE GELATINA.................10
INDUSTRIALIZACIN:......................................................................................11

El proceso cido para la gelatina de tipo A:......................11

El proceso alcalino para la gelatina de tipoB:..................11

DIAGRAMA DE FLUJO PARA OBTENCION DE GELATINA TIPO A


.....................................................................................................................................13
DIAGRAMA DE FLUJO PARA OBTENCION DE VITAMINA TIPO B
.....................................................................................................................................14
APLICACIONES....................................................................................................16
MATERIALES Y METODOS:.......................................................................................17
MATERIALES:.......................................................................................................17
METODOS DE ANALISIS Y CONTROL:....................................................17
PROCEDIMIENTO:.......................................................................................................18
5.2 Descripcin de los anlisis a realizar.................................................................19
RESULTADOS :..............................................................................................................20
DISCUSION:...................................................................................................................21
CONCLUSIONES......................................................................................................22
BIBLIOGRAFIA.........................................................................................................23

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 2

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


OBTENCIN Y EVALUACION DE GELATINA A PARTIR DE
HUESOS, PIEL Y PATAS DE ANIMALES

INTRODUCCION:
La Gelatina es una mezcla coloide (sustancia semislida),
incolora, translcida, quebradiza y casi inspida que se obtiene
a partir del colgeno procedente del tejido conectivo de
despojos animales hervidos con agua.
En el animal, la gelatina no existe como componente, se
obtiene, como ya se dijo, por hidrlisis parcial irreversible del
colgeno, su precursor insoluble. En el colgeno, la unidad
bsica

est

formada

por

tres

cadenas

de

polipptidos,

enrolladas en forma de hlice y estabilizadas por uniones


intramoleculares. Esto hace que el colgeno exhiba propiedades
mecnicas nicas y forme la estructura del tejido conectivo de
la piel, los tendones, los cartlagos y los huesos de los animales.
La gelatina es una protena compleja, es decir, un polmero
compuesto

por

aminocidos.

Como

sucede

con

los

polisacridos, el grado de polimerizacin, la naturaleza de los


monmeros y la secuencia en la cadena proteica determinan
sus propiedades generales. Una notable propiedad de esta
molcula

es

su

comportamiento

frente

temperaturas

diferentes: se derrite con el agua caliente y se solidifica


nuevamente y se hincha con el agua fra.
Pocos alimentos renen tantas propiedades positivas como la
gelatina. Sirve de fuente protenica de primera, no dispone de
potencial alrgeno, es libre de colesterol, azcar y grasa, se
digiere sin problemas y no contiene aditivos. Con la gelatina se
puede crear platos bajos en caloras que, a pesar del bajo
contenido en grasas, no pierden en sabor y garantizan un plus de
protena
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 3

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Tradicionalmente relegada a la repostera, la gelatina es algo ms
que un postre fcil de hacer. No slo es un ingrediente muy
atractivo a la hora de cocinar platos elaborados y deliciosos, tanto
dulces como salados, sino que tiene un alto valor nutritivo. De
hecho, la gelatina es protena en estado puro.

OBJETIVOS:
Obtener gelatina a partir de patitas de res, de pollo y cuy
tierno.

Determinar los parmetros ms importantes del proceso de


obtencin.

Realizar un balance de materia para el proceso.

Evaluar fsico qumica y sensorialmente el producto final.

FUNDAMENTO TEORICO:
GELATINA
La gelatina, es una sustancia orgnica nitrogenada por hidrlisis
parcial del colgeno contenido en la piel, tejidos conjuntivos o
huesos de los animales.
La gelatina es un material proteico dotado de propiedades
gelificantes y espesantes nicos, a diferencia de los espesantes
de origen vegetal, la gelatina es la nica protena natural de
importancia

comercial,

capaz

de

producir

geles

termo-

reversibles en agua a temperatura cercanas a la temperatura


corporal. Esta ventajosa capacidad de re-derretimiento a
temperatura corporal, que no puede ser producida por otros
materiales o sistemas, es la que imparte a los geles de gelatina
su inigualable textura superior y su inconfundible palatabilidad
y sensacin bucal.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 4

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Segn la materia prima empleada y el mtodo de extraccin,
las gelatinas varan en composicin molecular y propiedades
fsicas. Por consiguiente, difieren de un fabricante a otro y no se
pueden comparar fcilmente para aplicaciones especficas sin
un adecuado conocimiento cientfico.
En general, la propiedad ms importante de una gelatina desde
el punto de vista comercial es su fuerza gelificante (medida en
unidades Bloom). Otras propiedades fisicoqumicas tales como
viscosidad, color y claridad, as como tambin su pureza
qumica

bacteriolgica

los

procesos

de

produccin

utilizados, contribuyen al valor global del producto. Rodrguez,


G. Muoz, J.
La gelatina se forma mediante la hidrlisis del colgeno y se
prepara a partir de materiales ricos en esta sustancia tales
como la piel de cerdo, piel de ganado vacuno o huesos. La
carne de animales jvenes en la que el colgeno todava no ha
experimentado un entrecruzamiento intenso produce gelatina
con

facilidad

mediante

el

proceso

de

cocinado

ordinario.Ranken, M (1993)
COLAGENO
El colgeno, es una fraccin principal del tejido conectivo, viene
a ser una protena de estructura fibrosa, organizada y casi
cristalina, se encuentra en los tejidos de todos los organismos
multicelulares, desde los ms primitivos hasta el hombre.
El colgeno representa aproximadamente el 30% del conjunto
proteico en los mamferos, siendo la caracterstica de esta
protena

el

composicin:

predominio
glicina,

de

alanita,

cuatro

aminocidos

prolina

en

su

hidroxiprolina,

representando ste ltimo el 14% en peso total de aminocidos


componentes del colgeno, adems la suma de estos 4
aminocidos representa casi el 75% de los aminocidos totales
del colgeno.
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 5

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


La obtencin de la gelatina de diversas calidades se ve
influenciada por la complejidad del colgeno (influenciada a su
vez por el tipo de tejido, edad y especie animal), as como de
los diferentes procesos qumicos disponibles para la ruptura de
las estructuras y enlaces del polmero.
Tabla 1: Contenido de colgeno en diferentes tejidos
Contenido
Tejido

base
Peso seco%

Tendones

90

Piel

90

Cartlago

40

Huesos

20

Inicialmente el colgeno es insoluble en agua, debido a su


estructura fibrosa, organizada y casi cristalina, pero bajo la
accin de tratamientos cidos o bsicos moderados, esta
estructura organizada se desorganiza, provocando el paso de
fibras a fibrillas, luego a tropocolgeno (unidad monomrica
bsica) y posteriormente la desorganizacin de las tres
constitutivas

de

las

hlices

mediante

los

siguientes

mecanismos:

Apertura

en

tres

cadenas

alfa

desorganizadas

independientes (peso molecular de 80 000 a 125 000),


siendo la gelatina con esta composicin la de ms alta
calidad tcnica.

Apertura

en

dos

molculas,

una

de

ellas

alfa

desorganizada y la otra molcula doble beta (unin de 2


PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 6

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


alfas mediante enlaces) de peso molecular de 160 000 a
250 000.

La no apertura y desorganizacin de la espiral nos da una


molcula gama de 240 000 a 375 000 dltons.

(tres

cadenas alfa unidas covalentemente (tres cadenas alfas


unidades
Las tres cadenas alfa unidas entre s forman una hlice triple y
compacta denominada tropocolgeno, en donde la localizacin
de sus componentes prolina e hidroxiprolina les proporciona
esta configuracin helicoidal. . Rodrguez, G. Muoz, J.
OBTENCION DE GELATINA
Para obtener gelatina, es necesario transformar el colgeno
hasta obtener un producto de la mejor calidad comercial
posible, en este caso el colgeno se puede disponer de las
siguientes materias primas:

Piel fresca de cerdo

Huesos

Pieles de ternero, bovinos, bfalos, etc.

Cartlagos
Existen cuatro mtodos utilizados para obtener la gelatina,
siendo las ms utilizadas en la actualidad el mtodo cido y el
mtodo bsico:

Extraccin cida.es el mtodo ms rpido, se aplica a materia prima con


poco grado de entrecruzamiento, por ello se utiliza ms
en las pieles de cerdo, obtenindose una gelatina
denominada A.
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 7

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Extraccin alcalina.es el mtodo ms lento y se utiliza frecuentemente
tiempos que van de tres a cinco meses a temperaturas
menores a 20C, ste mtodo se aplica de preferencia a
materiales con alto grado de entrecruzamiento tales como
las pieles de bovinos y bfalos. En este proceso, el
colgeno es desorganizado en su estructura fibrilar y solo
el calentamiento en medio acuoso sin accin qumica
complementaria puede completar la transformacin hasta
gelatina. La gelatina obtenida por este proceso se
denomina gelatina B.
Extraccin enzimtica.se han realizado investigaciones sobre este mtodo, para
ello se ha empleado la enzima pronasa en presencia de
cloruro de calcio, el tiempo necesario es inclusive menor
al mtodo cido.
Extraccin microbiana.se han tratado pieles con mycoderma y torulopsis y se ha
obtenido gelatina en 21 das. Esta tcnica y la enzimtica
son relativamente nuevas.
Para obtener la gelatina se requieren tres etapas bien
diferenciadas:
Preparacin de la materia prima
La materia prima, al margen de su procedencia, debe
primero seleccionarse, clasificarse, cortarse en tamaos
uniformes y purificarse (lavado, desgrasado, eliminacin
de pelo, etc.), luego mediante los tratamientos cidos,
bsicos o biotecnolgicos, se incrementa la blandura y el
volumen de la materia prima, adems a nivel de
estructuras moleculares, se produce una ruptura parcial
de uniones peptdicas y una disociacin parcial de los
enlaces covalentes existentes entre las cadenas.
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 8

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Extraccin
Durante la extraccin de la gelatina, mediante
tratamientos con agua a temperaturas altas (promedio de
80C), se acenta la ruptura de estos enlaces incluido los
puentes hidrgeno, separndose en cadenas individuales,
permitiendo mayor conversin de colgeno a gelatina.
Un pretratamiento alcalino de la materia prima, produce
una

gelatina

con

punto

iso-elctrico

ms

bajo,

aproximadamente 5, en tanto que un pretratamiento


cido, limitado casi exclusivamente a material de piel de
cerdo, produce una gelatina con un punto iso-elctrico
entre 7 y 9.
Purificacin y secado
La suspensin de gelatina obtenida despus de la
extraccin se clarifica mediante centrifugado y filtracin,
adems mediante la desionizacin se purifica la gelatina
an ms eliminando sales inorgnicas.
Mediante la evaporacin se concentra la suspensin de
gelatina en preparacin para el secado. Una filtracin
secundaria pule la suspensin y resulta en una gelatina
de mayor brillo, luego a fin de asegurar el grado mximo
de pureza se pasteuriza y se enfra rpidamente y se
extruda el gel resultante en forma de fideos, los que se
distribuyen en bandejas o fajas transportadoras, para su
traslado hasta los tneles de secado hasta reducir la
humedad del producto entre 10 y 12%. Posteriormente
estos fideos se trituran y el polvo resultante se tamiza a
travs de mallas ajustadas a distintas especificaciones y
se envasa. Rodrguez, G. Muoz, J.
COLGENO HIDROLIZADO
El colgeno hidrolizado es una protena de bajo peso
molecular (es decir escaso poder gelificante) para su uso
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 9

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


especial en aplicaciones alimenticias y no alimenticias en
las

cuales

se

requiere

propiedades

espesantes

texturizantes de la gelatina sin sus efectos gelificantes.


Esta caracterstica abre nuevas perspectivas para su
aplicacin en industrias que anteriormente no podan
utilizar las propiedades fisicoqumicas de la gelatina
debido a su poder gelificante.
El peso molecular promedio del colgeno hidrolizado se
ubica dentro de la escala de

4 000 a 20 000, siendo el

valor calrico de 4 cal/gramo. El colgeno hidrolizado es


un producto adecuado para incrementar el contenido
proteico de los alimentos debido a su elevado contenido
de protenas. Rodrguez, G. Muoz, J.

RENDIMIENTO
El siguiente cuadro, se muestra el rendimiento de gelatina en
base a pieles de diferentes animales:
Tabla N2: Rendimiento de gelatina
Materia Prima
Piel

de

Rendimiento (%)

ternero 35 52

(seco)
Piel de bfalo (seco)

15 50

Tendn de ternero

50 70

Piel

de

cerdo 18 22

(congelado)
Hueso

de

ternero 14 18

(seco)

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 10

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


VALOR BIOLGICO DE LA GELATINA
El colgeno, es una protena muy resistente a la accin
hidroltica de los enzimas digestivos; mientras que la
gelatina es de fcil digestin pero su valor biolgico es muy
bajo, debido a su deficiencia de los aminocidos esenciales
lisina y triptfano.
FUERZA DE GEL DE LA GELATINA
La fuerza del gel se expresa mediante los grados BLOOM, en
el mercado existen gelatinas que van desde 50 a 320 grados
Bloom, la tcnica toma las siguientes condiciones: Se aplica
a aquellas preparaciones gelificadas a 10C y maduradas
durante 16 a 18 horas, y corresponden a peso en gramos,
necesarios para obtener un hundimiento de 4 mm. El gel de
un

pistn

cilndrico

de

12,7

mm

de

dimetro

geomtricamente definido.
USOS DE LA GELATINA
Su uso en la Agroindustria es variada debido a sus
propiedades

fisicoqumicas

sensoriales,

entre

estos

tenemos:

Postres de gelatina en agua


Industria Lctea (espumante, flan de leche, en quesos
mejora el rendimiento, en yogurt ayuda a estabilizar la
viscosidad, en helados, en mantequilla, etc.)
Postres espumosos (estabilizacin de crema chantilly)
Pastelera, mejora el espumado
Industria Crnica, absorbe y estabiliza los lquidos presentes
en los jamones, salchichas, etc.
Encapsulantes de sabores y aromas durante su secado,
mediante la formacin de un matriz.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 11

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Clarificantes de vino y jugo de fruta, mediante la formacin
de flculos con los taninos, los que al precipitar, clarifican
estos lquidos.
Confitera, en la elaboracin de malvaviscos y caramelos
suaves, marshmellows, etc. Rodrguez, G. Muoz, J.
METODOS USADOS EN LA OBTENCION DE GELATINA
Existen cuatro mtodos utilizados para obtener gelatina, siendo las
ms utilizadas en la actualidad el mtodo cido y el mtodo bsico:
Extraccin cida.- es el mtodo ms rpido, se aplica

materia prima con poco grado de entrecruzamiento, por ello se


utiliza ms en las pieles de cerdo, obtenindose una gelatina
denominada A.
Extraccin enzimtica.- Se han realizado investigaciones
sobre ste mtodo, para ello se ha empleado la enzima pronasa
en presencia de cloruro de calcio, el tiempo necesario es
inclusive menor al mtodo cido.
Extraccin

microbiana.-

Se

han

tratado

pieles

con

mycoderma y torulopsis y se ha obtenido gelatina en 21 das.


sta tcnica y la enzimtica son relativamente nuevas.
Extraccin alcalina.- es el mtodo ms lento y se utiliza
frecuentemente tiempos que van de tres a cinco meses a
temperaturas menores a 200C, ste mtodo se aplica de
preferencia a materiales con alto grado de entrecruzamiento
tales como las pieles de bobinos y bfalos. En este proceso, el
colgeno es desorganizado en su estructura fibrilar y solo el
calentamiento

en

medio

acuoso

sin

accin

qumica

complementaria puede completar la transformacin hasta


gelatina. La gelatina obtenida por este proceso se denomina
gelatina B.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 12

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


INDUSTRIALIZACIN:
La gelatina se obtiene por calentamiento y ataque cido o alcalino
del colgeno. El colgeno es el tejido bsico de la piel, los
cartlagos y parte de los huesos. El colgeno es en s muy poco
soluble y, por ello, poco utilizado en alimentacin. Cuando se
convierte en gelatina cambian sus propiedades y aumenta el
nmero de aplicaciones posibles.
Tratamiento previo: Despus de una limpieza intensiva de la
materia prima continan, de acuerdo a sta, diversas etapas del
proceso para obtener la gelatina. En la produccin de gelatina son
utilizados dos procesos bsicos diferentes
El proceso cido para la gelatina de tipo A:
La materia prima (mayormente piel de cerdo) toma un procedimiento
de desintegracin de tres das. En este proceso la materia prima es
tratada con cidos y al final est lista inmediatamente para la
extraccin de la gelatina.
El proceso alcalino para la gelatina de tipoB:
A travs de varias semanas de un tratamiento alcalino, se obtiene
una cuidadosa transformacin de la estructura del colgeno. Como
materia prima se puede utilizar aqu solamente osena y recortes de
piel. Posteriormente el colgeno obtenido aqu se puede disolver en
agua.
a) Extraccin: Los materiales preparados as, son mezclados con
agua caliente y extrada en varias etapas. Las primeras
extracciones

que

son

obtenidas

con

las

ms

bajas

temperaturas, rinden el ms alto poder de gelificacin de la


gelatina derretida. Este produce una solucin de algo de un 5%.
Posterior a los primeros procesos de extraccin, se agrega agua
caliente a la parte que queda del material extrado, se le
somete a altas temperaturas y una vez ms a extraccin. Este
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 13

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


proceso se realiza tan frecuente, hasta que el ltimo resto de
gelatina, esta vez en temperaturas de ebullicin, se ha
convertido en solucin. Como el tratamiento previo de la
materia prima ha efectuado una buena limpieza, despus de la
extraccin no quedan casi restos.
b) Purificacin: La solucin de un 5% de gelatina obtenida
durante la extraccin es liberada de los restos de grasa de la
materia prima y de pequeas fibras a travs de separadores de
alta potencia. Con los filtros de diatomita con los cuales se
puede retener hasta las partculas ms pequeas y con un
sistema de filtracin con placas filtrantes de celulosa, como se
conocen en la industria de las bebidas, se completa la
purificacin previa.
El material purificado es entonces pasado a travs de columnas
que contienen resinas de recambio inico (o un proceso
anlogo) durante el cual, y dependiendo de los requerimientos
la gelatina es liberada de calcio, sodio, los restos de cidos y
otras sales presentes en la solucin.

c) Concentracin: Evaporadores vacuum de mltiples etapas,


con equipamientos de calentamiento previo, esterilizan la
solucin de gelatina y retiran el agua de la solucin y
concentran la gelatina cuidadosamente hasta conseguir una
consistencia como la miel. Estas soluciones altamente viscosas
son conducidas sobre filtros pulidores de placas celulosas, que
son capaces de retirar los ms finas partculas en suspensin.
d) Secar: Estas soluciones de gelatina altamente concentradas
son sometidas una vez ms por un corto tiempo a una
esterilizacin de seguridad usando un esterilizador de alta
temperatura, luego son enfriadas y solidificadas. Con este
proceso se forman "fideos de gelatina", que son repartidos en
forma uniforme sobre la banda de una secadora. En esta
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 14

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


secadora, la gelatina es secada con un aire filtrado, lavado,
deshumedecido y descontaminado. Al final del secado, la
gelatina que ahora es dura y quebradiza, es molida en
partculas uniformes para ser almacenada en almacenes
intermedios hasta su prxima utilizacin.
Los lotes o cargos de gelatina de cada uno 1,000 hasta 2.000
Kg.

son

sometidos

exmenes

fsicos,

qumicos

bacteriolgicos antes de recibir la autorizacin final


e) Moler, tamizar, mezclar: Estos son los ltimos pero los ms
importantes pasos que son necesarios para hacer el producto
digno de utilizacin en las aplicaciones especiales y satisfacer
las demandas de cada uno de los clientes. Aqu son utilizados,
de acuerdo a la necesidad, los ms diversos molinos y
mezcladores. Despus de haber diente son transportados a los
clientes. A sido llenados en silos, en Big-Bag, o bolsas y de
haber recibido la autorizacin correspondiente.

DIAGRAMA DE FLUJO PARA OBTENCION DE GELATINA TIPO A

DIAGRAMA DE FLUJO PARA OBTENCION DE VITAMINA TIPO B

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 15

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Como forma de presentacin encontramos gelatina en lminas,


en forma de grnulos ms o menos pulverulentos.
Las caractersticas comerciales de una determinada gelatina, por
ejemplo de tipo A (cerdo), se miden segn la dureza de sus geles
(grados Bloom) y el tamao de la partcula o polvo (Mesh o
Malla). A mayor grado Bloom, ms fuerza de gel (suele oscilar
entre 80-100 a 200-220Bloom) y, en cuanto al tamao de
partcula, a mayor nmero de Mesh, ms fino es el polvo.
Una gelatina muy castigada por el tratamiento de extraccin y
que al final no tenga fuerza

para gelificar (0Bloom) se llama

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 16

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


hidrolizado de gelatina y slo tiene inters en cosmtica
(cremas de belleza) y farmacia (productos que mejoran el
cartlago de las articulaciones, que endurecen las uas...) o como
aporte proteico en alimentos (especialmente en productos
crnicos).
Finalmente existe una gelatina que acta en fro, sin necesidad
de calentar como las otras. Se denomina Gelatina Instant y
se utiliza en postres para preparar en fro (preparar, montar,
refrigerar, dejar reposar y comer). Esta gelatina se obtiene por un
proceso especial de secado.
APLICACIONES
La gelatina se utiliza en pastelera por su capacidad de formar geles.
Para ello hay que trabajarla de la siguiente manera:
Dejarla hidratar un tiempo en agua fra. El tiempo depender del
grosor de la partcula. En el agua fra veremos que los grnulos, o la
lmina de gelatina, se hinchan y se vuelven ms flexibles y
pegajosos, pero no se solubilizan. Si no se remoja la lmina o no se
hidrata bien el producto en polvo, es muy probable que, al final,
queden grnulos de gelatina sin disolver.
Seguidamente hay que calentar el agua para lograr la completa
solubilizacin de la gelatina. Cuando est perfectamente solubilizada,
la gelatina no se ve en el agua y tampoco aporta viscosidad a la
misma. Se puede solubilizar a partir de los 45-50 C.
Mientras ms caliente est el agua, antes se solubiliza, pero un
exceso de calentamiento (autoclave, olla a presin) puede hacer que
se hidrolice y pierda fuerza de gel. Tambin el medio cido (zumos de
frutas, cido ctrico o tartrico...) aceleran la hidrlisis de la gelatina y
forman geles menos duros si el calentamiento en medio cido se
mantiene un tiempo prolongado.
Tras el calentamiento se puede dejar atemperar y no gelificar hasta
alcanzar los

35- 40C. Se puede mezclar con otros ingredientes,

montarla en forma de espuma, etc.


PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 17

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Colocarla en el molde adecuado y dejarla en el refrigerador,
preferiblemente 24 horas, para que alcance toda su fuerza.
Las aplicaciones ms habituales de la gelatina para pastelera son:
- Estabilizacin de espumas (en sifn), mousses, babaroises, etc.
- Gelificacin de cremas o lquidos para postres o interiores de tartas,
gelatinas de frutas, hierbas, etc.
- Glaseados y gelatinas para recubrimiento de tartas
- Gominolas, marsmalow, caramelos (en algunos casos).
La gelatina tiene un amplio uso en la industria alimenticia,
principalmente como emulsificante en la repostera y heladera; se
usa tambin en la industria farmacutica como cubierta de las
cpsulas, y en la fotografa como base para la emulsin de cristales
de haluros de plata (la parte sensible a la luz) de las pelculas y
papeles fotogrficos.

MATERIALES Y METODOS:
MATERIALES:

Balanza analtica

Materiales de vidrio diversos: pipetas, probetas,


vasos de precipitados.

Olla grande

Estufa

pH-metro

Termmetro

Molino de martillos

Materia prima: huesos, patitas de cerdo y pollo.

Reactivos: HCl diluido, NaOH 0.05 N

METODOS DE ANALISIS Y CONTROL:

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 18

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Determinar el pH

de remojo y temperatura de

extraccin.

Determinar los slidos totales en la etapa de

concentracin

Determinar humedad del producto final y grado de

gelificacion

Realizar

un

anlisis

sensorial

al

producto

final,

preparando una gelatina.

PROCEDIMIENTO:
5.1 Diagrama de Flujo para la obtencin de gelatina a
partir de patitas pollo.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 19

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Materia Prima

Restos de grasa

Lavado

Cortado

Tamao: 40
gua caliente
T =
t = 50 min

Desengrasado

Remojo en medio acido


pH 1,8

t = 24 h
Neutralizacin

NaOH 0.05 N

Extraccin, T060- x 4 h. pH neutro

Filtracin
Concentracin a vaco, hasta 20% slidos.

Secado,
Triturado y envasado
Almacenado

5.2 Descripcin de los anlisis a realizar

Determinacin de pH: Preparar una solucin acuosa al 1% y


medir pH

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 20

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Determinacin de la viscosidad:
Se pesa 7,5 g de gelatina en 105 ml de agua
Se vierte sobre el recipiente del viscosmetro Brookfield
Se usa la aguja N1 y la T debe estar en 40C
Se mide la viscosidad a 20, 50 y 100 RPM
Los resultados se expresan en centipoise (cp)
Determinacin de color, olor y turbidez: Estos anlisis se
evaluaran con una escala hednica de 5 puntos que cada grupo
elaborara para su gelatina obtenida
Determinacin de Grados Bloom: Se determinara en forma
cualitativa a travs de un cuadro elaborado para tal caso.

RESULTADOS :
6.1.

Determinacin de Grados Bloom:


Gelatina:

102 gr

1500ml
10 gr

X
X = 147.06 ml
ml

Colapiz :
102 gr

1500ml
7.5 gr

X
X = 110.3 ml

Tipos de gelatina

Grados
bloom

200 230

ml
caractersticas
Tiene una
formados

buena solidez de los geles

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 21

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


2

120 -150

Los geles formados tiene


muy consistente

una solides no

50 80

Los geles formados no tienen poca solides

Los geles formados por la gelatina comercial y por el colapiz


tuvieron una

buena consistencia esto se debi ya que

gelatinas comerciales por lo cual estuvieron

son

en el tipo de

gelatina 1 con 200 230 grados bloom.


6.2.

Determinacin de pH:
Gelatina: 7.5
Colapiz:

7.2

Determinacin de color, olor y turbidez:


Gelatina

sabor a fresa: al ser una gelatina comercial la

que se aplico para el experimento el laboratorio el color


fue un rojo caracterstico

el olor a fresa

como es

la

caracterstica de dicho producto.


Para el colapiz no tenia olor y era de un color tranparente
ya que fue comercial tambin el colapiz es un tipo de
gelatina sin olor ni sabor que se utiliza para aumentar los
grados bloom de la gelatina comercial y as esta pueda
gelatinizar ms rpido.

DISCUSION:
Segn Ranken, M (1993). La gelatina se forma mediante la
hidrlisis del colgeno y se prepara a partir de materiales ricos
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 22

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


en esta sustancia tales como la piel de cerdo, piel de ganado
vacuno o huesos. La carne de animales jvenes en la que el
colgeno todava no ha experimentado un entrecruzamiento
intenso produce gelatina con facilidad mediante el proceso de
cocinado ordinario. En la prctica realizada se trabajo

con

gelatina comercial (gelatina y colapiz)


Segn Rodrguez, G. Inicialmente el colgeno es insoluble en
agua, debido a su estructura fibrosa, organizada y casi
cristalina, pero bajo la accin de tratamientos cidos o bsicos
moderados,

esta

estructura

organizada

se

desorganiza,

provocando el paso de fibras a fibrillas, luego a tropocolgeno


(unidad

monomrica

bsica)

posteriormente

desorganizacin de las tres constitutivas de las hlices.

la
A

travs de varias semanas de un tratamiento alcalino, se obtiene


una cuidadosa transformacin de la estructura del colgeno..
Segn Rodrguez, G. Los huesos desengrasados usados para
la extraccin de gelatina se reducen de tamao de hasta 5-10
mm. En el proceso de extraccin, la materia prima neutralizada
y desmineralizada, se somete a la extraccin en caliente,
siendo muy importante la influencia de la temperatura y el
tiempo de extraccin en la calidad de la gelatina; en la prctica
realizada se utilizo una temperatura de 60-80C por 2-4 horas.
7.1 Con respecto al pre tratamiento con cido:
Segn Berta Mara Carballo Garca y col. Menciona que La
pata de pollo, a diferencia de la res, es sacrificado todava
relativa- mente joven. Como el tejido de la piel en esta edad no
est muy fuertemente arraigado, no es necesario el tratamiento
preliminar alcalino. La concentracin del cido(s) y el tiempo de
permaneca en l depender del estado de la materia prima,
grado de entrecruzamiento del colgeno, etc.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 23

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


7.2 Con respecto a la extraccin:
Segn Alzamora, S.M. La caracterstica principal de la gelatina es
su capacidad de formar un gel en medio acuoso a temperaturas
inferiores a 35 40C y disolverse en agua caliente (40 50C) sin
dejar residuos ni grumos.
De la prctica podemos decir que se obtuvo una gelatina con
impurezas y de una apariencia oscura, esto debido a la mal filtracin
y el tiempo de remojo como dice la bibliografa por un tiempo de 10 a
30 horas.
7.3 Con respecto al rendimiento:
Menciona que le rendimiento de extraccin de gelatina es de 2.5-3%,
en la prctica sali 159% lo que nos puede decir que hubo prdidas al
momento de la extraccin.

CONCLUSIONES.
Se experiment, analizo y evalu el proceso de obtencin de la

gelatina, utilizando como materia prima patas de pollo.


Se determin los parmetros ms importantes del proceso de

obtencin.
Se evalu fsico, qumica y sensorialmente el producto final.

Se utilizo gelatina comercial ( colapiz y gelatina)

Los grados Bloom se miden segn la dureza de sus geles . A


mayor grado Bloom, ms fuerza de gel (suele oscilar entre 80100 a 200-220Bloom)

Un criterio importante para determinar la calidad de la gelatina


son los grados Bloom que generalmente est entre 50 y 300.
Con este valor se determina la estabilidad y el poder de
gelificacin de la gelatina. Cuanto ms alto sea el valor Bloom
tanto ms alta es la intensidad de gelificacin

Hay varios tipos de gelatina segn la especie animal, el


origen del colgeno, el proceso de obtencin y la forma
de secado. Las ms frecuentes son: Gelatina de cerdo:
tambin llamada gelatina A ya que se obtiene con un
tratamiento cido. Es la ms utilizada en alimentacin en
los pases no rabes. Gelatina de vacuno: llamada

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 24

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


gelatina B ya que las pieles y huesos de vacuno se deben
alcalinizar para obtener la gelatina.

La gelatina obtenida est catalogada como gelatina Tipo


A.

El componente principal de la gelatina es la protena


colgeno.

Para la gelatina comercial se

prepara 102gr en una

dilucin de 1.5 litros igualmente para el colapiz ya que es


una gelatina sin sabor.

El colapis es un tipo de gelatina que no tiene sabor ni olor


y es utilizado para

aumentar los grados bloom de la

gelatina comercial.

El ph de la gelatina comercial fue de 7.5 y del colapis fue


de 7.2

BIBLIOGRAFIA.
Berta Mara Carballo Garca, Berta Carballo, G. Lpez de Torre
(2001). Tecnologa de la carne y de los productos
crnicos. Pas, Espaa. Ediciones, Mundi-Prensa, - 321 pginas.
Alzamora,
S.M.
(1997).
Preservacin.
Alimentos
Conservados por factores Combinados.
Welti-Chanes, J.(1995). Investigacin en Ciencia y
tecnologa de alimentos: estado actual y desarrollo
futuro en la conservacin y procesamiento de
alimentos. Cuadernos de Nutricin. 21(4): 21-28. Pas,
Mxico. Ediciones, Mundi-Prensa. Pginas, 250.
Rodrguez, G. Muoz, J. Procesos Agroindustriales II.
Universidad Nacional del Santa.
Ranken, M (1993). Manual de la Industria de los alimentos,
segunda edicin, Editorial Acribia S.A Zaragoza.Espaa

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 25

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

CUESTIONARIO

Por qu la gelatina se obtiene por hidrlisis parcial del


colgeno?
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 26

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

El colgeno es una protena fibrosa que contribuye muy


significativamente a las singulares funciones desempeadas por los
tejidos conectivos de la piel, los tendones, los cartlagos, los huesos
etc. La unidad estructural del colgeno es el tropocolgeno, una
protena en forma de varilla, formada por tres cadenas polipeptdicas
superenrrolladas en una triple hlice y estabilizadas por uniones
intramoleculares. Estos enlaces influyen en las propiedades
moleculares de la gelatina resultante.
Inicialmente el colgeno es insoluble en agua, debido a su estructura
fibrosa, organizada y casi cristalina, pero bajo la accin de
tratamientos cidos o bsicos moderados, esta estructura organizada
se desorganiza, provocando el paso de fibras a fibrillas, luego a
tropocolgeno (unidad monomrica bsica) y posteriormente la
desorganizacin de las tres cadenas constitutivas de alfa hlices ; las
tres cadenas alfa unidas entre s forman una hlice triple y compacta
denominada tropocolgeno, en donde la localizacin de sus
componentes prolina e hidroxiprolina les proporciona esta
configuracin helicoidal.
La obtencin de gelatina de diversas calidades se ve influenciada por
la complejidad del colgeno, as como de los diferentes procesos
qumicos disponibles para la ruptura de las estructuras y enlaces del
polmero.
El producto hidrolizado depende de los enlaces cruzados que queden
entre las cadenas peptdicas y de los grupos reactivos terminales
aminos y carboxilos libres que se formen.
Dado que las tres cadenas no son idnticas, despus de la
degradacin resultan tres tipos bsicos de nuevas cadenas:
Las cadenas alfa, compuestas de una sola cadena peptdica.
Las cadenas beta, formadas por dos cadenas peptdicas conectadas.
Las cadenas gamma, con tres cadenas peptdicas interconectadas
Segn esto, una muestra de gelatina tiene varios pesos moleculares.
La distribucin de pesos moleculares de la gelatina determina
caractersticas como la dispersabilidad en agua, la viscosidad, la
adherencia y la resistencia de los geles. Cuando la concentracin
relativa de molculas de bajo peso molecular aumenta, se reduce la
viscosidad y la resistencia de los geles.
Por qu la extraccin de gelatina a partir de la piel y huesos
de pescado es por extraccin bsica?
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 27

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Es el mtodo ms lento y se utiliza frecuentemente tiempos que van


de tres a cinco meses a temperaturas menores a 20C, ste mtodo
se aplica de preferencia a materiales con alto grado de
entrecruzamiento tales como las pieles de bovinos y bfalos. En este
proceso, el colgeno es desorganizado en su estructura fibrilar y solo
el calentamiento en medio acuoso sin accin qumica complementaria
puede completar la transformacin hasta gelatina. La gelatina
obtenida por este proceso se denomina gelatina B.
Este mtodo se aplica de preferencia a materiales con alto grado de
entrecruzamiento. En este proceso, el colgeno es desorganizado en
su estructura fibrilar y solo el calentamiento en medio acuoso sin
accin qumica complementaria puede completar la transformacin
hasta gelatina. La gelatina obtenida por este proceso se denomina
gelatina B.
El grado de entrecruzamiento se define como la concentracin de
puntos de unin efectivos en la red polimrica.

Cmo precipitara usted las protenas que acompaan al


colgeno despus del remojo de las patitas de res en medio
acido?
El procedimiento de la obtencin del producto se caracteriza por
someter las pieles y/o tejido conectivo a una serie de lavados,
seguido de un tratamiento con lcali diluido para obtener una
completa
limpieza
del
producto
y
preparacin
para
la
presolubilizacin. Su duracin e intensidad depender del estado de
la materia prima.
Posteriormente, tras un lavado para neutralizar se somete a un
tratamiento con cido diluido. Las propiedades que infiere el cido
seleccionado predisponen para obtener unas propiedades finales del
producto elevadas. La concentracin del acido(s) y el tiempo de
permanecia en l depender del estado de la materia prima, grado de
entrecruzamiento del colgeno, etc. Una vez pregelatinizada la
protena se lava abundantemente y se procede a la extraccin de la
gelatina en un bao de agua. Segn la temperatura y tiempo aplicado
se obtendrn unas caractersticas y rendimiento determinado.
Las protenas pueden precipitarse del colgeno de distintos mtodos
entre ellos tenemos:
Mtodos de rotura celular y extraccin de protenas
Mtodos cromatogrficos
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 28

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


Mtodos electroforticos
Mtodos de rotura celular y extraccin de protenas.

El primer paso en el aislamiento de una protena es la rotura celular,


para posteriormente poder extraer la protena con un tampn
adecuado. El mtodo de rotura a elegir depende de las caractersticas
mecnicas del tejido o clulas de donde se va a aislar la protena, as
como de su localizacin. Entre los distintos mtodos ellos estn:
"
Lisis celular. Vlido para clulas sin pared celular como las
clulas de tejidos animales, pero no es suficiente para clulas
vegetales o bacterias. Consiste en suspender las clulas en una
solucin hipotnica (ms diluida que el interior celular). Debido a la
diferencia osmtica el agua difunde al interior de la clula, causando
su hinchamiento y rotura.
"
Destruccin mcanica. Entre estos mtodos se encuentran la
homogenizacin (hacer pasar las clulas entre un tubo y un pistn de
vidrio que ajustan casi totalmente); moler en un mortero con arena o
almina; molino con perlas de vidrio, la prensa de French (que hace
pasar las clulas a gran velocidad a travs de un pequeo orificio), la
sonicacin (someter las clulas a vibraciones de ultrasonido).

"
Congelacin-descongelacin. La rotura se produce al someter
las clulas a un cambio brusco de temperatura, congelando primero a
-196 C (con nitrgeno lquido) y pasndolas rpidamente a
temperatura ambiente (25 C).

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 29

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Tras la rotura o bien, si se requiere, durante el proceso de rotura, se


utilizan tampones de extraccin para solubilizar las protenas. Pueden
utilizarse como tales disoluciones acuosas de tampones especficos
para protenas solubles o bien que contengan adems detergentes si
se pretende purificar protenas asociadas a membranas, si bien en
este caso hay que cuidar que la enzima no se desnaturalice.
Una vez que la protena se ha extrado de su entorno natural est
expuesta a muchos agentes que pueden daarla. Los cambios
bruscos de pH, cidos y bases fuertes, temperaturas extremas y la
accin de las proteasas (enzimas que hidrolizan los enlaces peptdico)
son los principales factores que pueden desnaturalizar las protenas.
Para evitar o minimizar estos factores la manipulacin de las
protenas durante el proceso de purificacin suele llevarse a cabo en
disoluciones tamponadas, a bajas temperaturas (4C) y se procura
que el proceso sea lo ms corto posible, adems en ocasiones es
necesario aadir el tampn de extraccin agentes protectores de
grupos funcionales especficos de la protena o bien inhibidores de
proteasas. El resultado de todos estos tratamientos es un lisado u
homogenado que contiene una mezcla de enzimas, membranas y
clulas rotas. Esta preparacin se somete a centrifugacin (10.000 15.000 rpm) para eliminar los restos celulares y separar, el
sobrenadante, que contiene las protenas solubles, del precipitado
que adems de restos celulares tambin contienen protenas
asociadas a membranas y que para solubilizarlas requiere un
tratamiento adicional con detergentes. En cualquier caso, la fase
soluble (con o sin detergente) constituye el extracto crudo donde se
encuentra la protena de inters objeto de la purificacin. A la hora de
centrifugar hay que tener en cuenta que la centrfuga sea refrigerada,
balancear los tubos y asegurarse siempre que los rotores estn fijos.
Para purificar una protena es imprescindible tener un mtodo para
detectar cuantitativamente su presencia. Es deseable que este
mtodo sea especfico y fcil de llevar a cabo. En este sentido es
mucho ms cmodo trabajar con enzimas, pues se detectaran
mediante su ensayo de actividad, en caso de purificar protenas no
enzimticas, se requieren mtodos de seleccin ms especficos.
2.

Mtodos cromatogrficos para separacin de protenas

Las separaciones cromatogrficas se basan en las diferencias de


carga, tamao o afinidad de las diferentes protenas. Uno de los
mtodos ms habitualmente utilizados para la separacin de

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 30

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


protenas es la cromatografa en columna, aunque tambin existe la
cromatografa en papel y en placa.
La columna est rellena con un material slido con las caractersticas
qumicas adecuadas (fase estacionaria), y una solucin tamponada se
hace pasar a travs de la columna (fase mvil). El extracto crudo se
aplica en la parte superior de la columna y va poco a poco entrando
en la columna con la fase mvil. Cada protena migrar a distinta
velocidad segn su grado de afinidad por la fase estacionaria.
Generalmente estas cromatografas se realizan de una forma
semiautomtica, la fase mvil se hace pasar a la columna a travs de
una bomba peristltica y un colector de fracciones va recogiendo el
eluyente que sale de columna. Este colector hace que el tubo vaya
cambiando cada cierto nmero de gotas o de volumen. Despus hay
que localizar en que tubo o tubos est la protena que se pretende
purificar.
Existen distintos tipos de cromatografas en tres ellos:
o
o
o
o

La filtracin o exclusin molecular


El cromatografa de intercambio inico
La cromatografa hidrofbica
La cromatografa de afinidad

a.
Filtracin en gel o cromatografa de exclusin molecular.
La fase estacionaria esta constituida por partculas de polmeros de
diferente porosidad. La separacin se basa en el tamao de las
partculas. Las protenas ms grandes que no pueden penetrar en los
poros de las partculas de la matriz de filtracin son eluidas con ms
rapidez que las protenas ms pequeas que penetran por los poros
de las partculas y siguen un camino ms tortuoso y ms largo. El
tamao de los poros internos depende de la naturaleza del polmero
en cuestin, y permite la entrada a protenas por debajo de un
determinado peso molecular.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 31

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

b.
Cromatografa de intercambio inico. En ella, la columna est
rellena con un soporte al que van unidos grupos cargados
positivamente (intercambio aninico) o negativamente (intercambio
catinico). Estos grupos cargados normalmente estn neutralizados
por iones del tampn. Estos iones son reversiblemente reemplazados
por las protenas con ms tendencia a unirse al soporte. Las protenas
cargadas pueden por lo tanto unirse a intercambiadores catinicos o
aninicos dependiendo de su carga neta. Las protenas ms cargadas
se unirn ms fuertemente al intercambiador y por lo tanto sern ms
difciles de eluir. La afinidad con la que una protena se une a un
intercambiador inico depende de la fuerza inica del medio, debido a
la competencia entre los grupos cargados de la protena y los iones
de la fase mvil.
Una vez pegadas las protenas, para eluirlas (retirarlas) de la
columna, se suele ir subiendo la fuerza inica de la fase mvil
(aumentando la concentracin de sal, NaCl), de esta forma se eluyen
primero las protenas mas dbilmente retenidas y cuando la fuerza
inica sea mayor saldrn las protenas ms cargadas y por lo tanto
ms retenidas.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 32

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

c.
Cromatografa hidrofbica.
Se trata de un mtodo similar al anterior con la nica diferencia de
que la fase estacionaria es apolar (hidrofbica), es decir, la protena
se pega al soporte por los resto de aminocidos apolares, cuanto ms
residuos de este tipo tenga en su superficie, ms apolar ser, ms se
retendr en la columna y se eluir ms tarde. En este caso a elusin
se realiza aumentando la apolaridad de fase mvil.
d.
Cromatografa de afinidad.
Muchas protenas tienen la capacidad de unirse especficamente a
ciertas molculas, mediante uniones fuertes, pero no covalentes. En
esta tcnica la molcula que se une especficamente a la protena se
conoce con el nombre de ligando y se une covalentemente a una
matriz inerte. Cuando el extracto con la mezcla de protenas se aplica
a la columna, la protena buscada se unir al ligando inmovilizado
mientras que las dems saldrn de la columna con el tampn. En este
caso tambin se utiliza el incremento de fuerza inica para eluir las
protenas.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 33

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Todos estos sistemas pueden automatizarse, en base a sistemas


cromatogrficos tales como el FPLC, en el que se hace uso de bombas
de alta presin (100-400 bares) y columnas con materiales que
soportan altas presiones. Este sistema reduce notablemente los
tiempos de purificacin y utilizan fases estacionarias con mayor poder
de retencin, lo que se incrementa los porcentajes y rendimiento de
las purificaciones.

3.
Mtodos electroforticos
Para comprobar si la protena de inters se ha separado del resto, es
decir si la protena est pura, se requieren las tcnicas
electroforticas. La electroforesis de protenas se lleva a cabo
generalmente en geles de poliacrilamida. Se trata de geles porosos,
cuya porosidad se puede regular en funcin de la concentracin de
acrilamida.
Durante la electroforesis la fuerza que provoca la migracin de las
protenas es
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 34

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


un campo elctrico, y el gel acta como filtro molecular, ralentizando
la migracin de las protenas en funcin de su relacin carga/masa. A
diferencia de lo que ocurra en la cromatografa de filtracin, en las
electroforesis las protenas mayores son retardadas y se mueven ms
lentamente a travs del gel, ay que las va frenando el tamao del
poro y las protenas ms pequeas avanzan ms rpidamente.
En la figura vemos un tpico aparato de electroforesis. El gel se
encuentra entre dos placas (normalmente de vidrio). La colocacin de
un peine de electroforesis en la parte superior antes de que la
acrilamida gelifique permite la formacin de unos pocillos, donde se
colocarn posteriormente y una vez retirado el peine, las muestras,
que se desplazarn por calles paralelas al aplicar el campo elctrico.

Las muestras de protena se disuelven en una pequea cantidad de


una solucin tampn, que contiene glicerol, que hace que la muestra
se site en el fondo del pocillo y un colorante azul (azul de
bromofenol) de pequeo peso molecular que nos indica migracin del
frente. El tampn de electroforesis cierra el circuito entre el ctodo
(+) y el nodo (-). El sistema se conecta a una fuente de alimentacin
y las protenas migran hacia el polo positivo, situado en la base del
gel.
Despus el gel se saca del recipiente que lo contiene y se incuba en
presencia del colorante adecuado (azul de Coomassie), que tie por
completo el gel. A continuacin se destie con una disolucin de
etanol/actico y el gel queda transparente y las bandas de protenas
quedan teidas de color azul.
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 35

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Existen dos tipos principales de electroforesis, en condiciones Nativas


las protenas se separan en funcin de su carga/masa; y en
condiciones desnaturalizantes la electroforesis se realiza en presencia
de un detergente, el SDS (dodecil sulfato sdico). El SDS es un
detergente aninico, que se une a todas las protenas en la misma
proporcin formando una especie de micela cargada negativamente.
La gran carga negativa del SDS enmascara la carga intrnseca de las
protenas, con lo que stas se separan solo en funcin de su masa e
independientemente de su carga. El nico inconveniente de esta
tcnica es que el SDS desnaturaliza las protenas y las protenas
multimricas se separan en sus subunidades. Las electroforesis en
SDS adems de permitir calcular el peso molecular de las cadenas
polipeptdicas, nos indican las distintas subunidades que posee la
protena. Generalmente la protena inters se analizan incluyendo
calles con marcadores moleculares, que son protenas de peso
molecular conocido que nos permiten determinar el peso molecular
de la cadena polipeptdica, como se muestra en la siguiente figura.
En la calle 1 se encuentran los patrones de peso molecular conocido,
en la calle 2 se encuentra la protena sujeta a estudio, de tal manera
que se puede hacer una relacin lineal entre el Log del peso
molecular de las protenas y la distancia que recorren en el gel
(Rf=distancia de la banda/distancia del frente).
La siguiente figura nuestra la diferencia entre la electroforesis nativa
(NATIVAPAGE) y la electroforesis desnaturalizante (SDS-PAGE). Como
se aprecia en la figura una banda en la Nativa, puede dividirse en
varias en SDS, si la protena tiene varias subunidades de distinto peso
molecular, o bien en una banda de menor peso molecular, si las
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 36

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


subunidades poseen el mismo peso molecular. De la figura se deduce
que, la protena est pura (pues solo aparece
un banda) y que adems posee 2 subunidades de 15000 g/mol (o lo
que es lo mismo 15 kDa ) cada una.

Por qu la extraccin de gelatina a partir de los huesos de


vacuno involucra una desmineralizacin? por que se realiza
en medio acido?
La desmineralizacin del hueso a travs del tratamiento intermedio
con cido clorhdrico diluido, en procesos de corriente inversa a bajas
PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 37

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA


temperaturas por varios das, remueve el fosfato contenido en el
hueso.
Este procedimiento es conocido como maceracin, el hueso
calibrado desmineralizado se denomina osena. Al final los cidos
excedentes son retirados a travs de un lavado intensivo.
Los huesos se tratan con una solucin cida para extraer los
minerales (fosfato de calcio) sin afectar los contenidos orgnicos.
Despus de un lavado, este producto llamado osena, se vuelve
flexible. Los fosfatos se separan por precipitacin con cal.
La osena y las pieles se procesan con cidos para su hidrlisis a
temperatura ambiente por un tiempo relativamente corto. Por otra
parte, los cueros y la osena se ponen en contacto con una solucin
de cal durante 5 a 10 semanas a temperatura ambiente. Luego se
ajusta al pH requerido para la extraccin de gelatina propiamente
dicha.
Qu es el grado Bloom en gelatinas y cual es la metodologa
para medirlo?
Un criterio importante para determinar la calidad de la
gelatina es el llamado valor Bloom que generalmente est entre 50 y
300. Con este valor se determina la estabilidad y el poder de
gelificacin de la gelatina. Cuanto ms alto sea el valor Bloom tanto
ms alta es la intensidad de gelificacin.
ndice de Bloom o Resistencia de Gel. El Bloom es la
medida de fuerza necesaria para formar una depresin de 4 mm por
medio de un mbolo de 12.7 mm de dimetro en una solucin al
6.66% de gelatina mantenido a 10C x 18.
La tcnica es la siguiente: Se aplica a aquellas preparaciones
gelificadas a 10C y maduradas durante 16 a 18 horas, y
corresponden al peso en gramos, necesarios para obtener un
hundimiento de 4 mm. En el gel de un pistn cilndrico de 12.7 mm.
De dimetro geomtricamente definido.

PROCESOS AGROINDUSTRIALES IIPgina 38

S-ar putea să vă placă și