Mtodos especficos para deteccin de microorganismos: Salmonella y Shigella

1. INTRODUCCIN
Shigella, que debe su nombre al cientfico japons que la descubri en 1897, es un tipo de
bacteria que puede infectar el aparato digestivo. Hay cuatro grupos diferentes de Shigella
los cuales son: S. flexneri, S. dysenteriae, S. sonnei y S. boydii que pueden infectar a los
humanos, algunos de ellos provocan una enfermedad leve, y en otros ms grave. Esta
infeccin es ms frecuente durante los meses de verano y raramente afecta a los
lactantes de menos de 6 meses, aunque es frecuente en nios de 2 a 4 aos,
especialmente los que asisten a centros de preescolar.
Shigella y Salmonella son del gnero bacteriano perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae, integrado por bacterias de forma bacilar, no esporuladas, inmviles,
son gram negativos, aerobios-anaerobios facultativos, citocromo-oxidasa negativos,
fermentan la glucosa sin produccin de gas, no descarboxilan la lisina, no fermentan la
lactosa, no utilizan el citrato como nica fuente de carbono, Salmonella produce H2S. Pero
su actividad bioqumica es muy reducida.
En los alimentos que podemos encontrar estas bacterias pueden ser: pollo, leche,
camarn, papa, lechuga y otras verduras tratadas con aguas contaminadas. La va de
transmisin casi siempre es va feco-oral y por aguas contaminadas con heces.
Shigella puede provocar diversos sntomas. Algunas personas con una forma leve de la
enfermedad slo tienen heces blandas y acuosas, y otras no presentan ningn sntoma.
Otras desarrollan una enfermedad ms grave conocida como disentera, con retortijones,
fiebre alta, prdida de apetito, nuseas, vmitos y diarrea, que puede contener
mucosidades y sangre. Algunos nios con formas graves de infeccin por Shigella pueden
requerir hospitalizacin. La principal complicacin es la deshidratacin.
Para aislamiento de Shigella y Salmonella se puede utilizar el agar XLD (xilosadesoxicolato-lisina) y el agar SS (Salmonella y Shigella). Tambin el agar McConkey, ya
que esta medio permite la diferenciacin entre bacteria que fermentan la lactosa y las que
no lo hacen. Para confirmar se puede usar pruebas bioqumicas como: TSI, LIA, SIM,
Citrato, para la diferenciarla de Salmonella. Para la identificacin de especies de Shigella
se hace a travs de una prueba serolgica con sus sueros respectivos.
2. MATERIALES

1
1
0
m

Balanza analtica
Lechuga o pollo

l
o

g
2

2
2
2
2
4
1

4
1

Frascos de 90 mL con caldo

tripticasa soya
Caldo Selenito-Cistina
Agar Sangre
MacConkey
Agar SS
Bateras
Pipeta automtica de 100 uL a
1000 uL
Tips azules
Reactivo de Kovacs

3. DESARROLLO DE LA PRACTICA

a. Pesar 10 g o ml del alimento en la balanza analtica.

b. Agregar a 90 mL de caldo TS. Esta ser la dilucin 1:10
c. Agregar 1 mL de la dilucin 1:10 a 9 mL de caldo Selenito-Cistina
d. Incubar el caldo Selenito-Cistina a 37C por 24 horas.
e. Sembrar del caldo Selenito-Cistina con asa en argolla en agar Sangre, MacConkey
y SS
f. Incubar todas las cajas a 37C por 24 horas.
g. Leer las cajas y realizar Batera a colonias sospechosas (una para Salmonella y otra
para Shigella).
h. Incubar las bateras a 37C por 24 horas.
i. Leer las bateras y realizar prueba de Indol.
j. Reportar como presencia o ausencia.