Sunteți pe pagina 1din 20

Universidad de Guanajuato

Identificacin de parsitos
en Naturales y
Divisin de Ciencias
Noria Alta
aves de corral

Laboratorio de Parasitologa M

Laboratorio de Parasitologa Mdica

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO

MATERIA: LABORATORIO DE PARASITOLOGA MDICA

IDENTIFICACIN DE PARSITOS EN AVES DE CORRAL

CICLO ESCOLAR
ENERO JUNIO 2015

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Identificacin de parsitos en aves de corral: pollos


Objetivo
Llevar a cabo la obtencin e identificacin de endoparsitos en aves de corral,
especficamente en pollos.
Introduccin
La localizacin de estos parsitos en el organismo es interna y externa, los
helmintos y protozoarios se observan en rganos y tejidos, por lo que son
llamados endoparsitos; los insectos y caros que viven en las plumas y piel de
las aves se les denomina ectoparsitos. A continuacin se muestra una tabla
con los ecto y endoparsitos localizados en aves de corral.

Laboratorio de Parasitologa Mdica

A continuacin se describe cada uno de los endoparsitos encontrados en las


muestras analizadas de heces, intestinos y coln.
Eimeria spp.
PHYLUM
PROTOZOARIO
S

CLASE
Coccidias

Flagelados

HELMINTOS

Cestodos

Nematodos

ARTROPODOS

Insectos

Arcnidos

GENERO y ESPECIE
Eimeria sp.
Cryptosporidium sp.
Leucocytozoon caullergi
Plasmodium gallinaceum
Trichomonas sp.
Tritrichomonas
eberthi
Histomonas
meleagridis
Raillietina sp.
Choanotaenia infundibulum
Amaebotaenia sphenoides
Davainea proglottina
Hymenolepis sp
Ascaridia galli
Heterakis gallinarum
Capillaria sp.
Acuaria sp.
Syngamus trachea
Subulura brumpti
Tetrameres americana
MALOFAGOS
Menancanthus
(PIOJOS)
stramineus
Geoniocotes gallinae
Menopon gallinae
Lipeurus caponis
Goniodes gigas
Chelopistes meleadridis
Oxylipeurus politrapezius
Cuclotogaster
heterograpus
Cimex culumbarius
MOSCAS
M. domestica
Fannia canniculauris
PULGAS
Ceratophyllus
gallinae
Echidnophaga gallinacea
GARRAPATAS
MITES
(pequeos
caros rojos)

Argas persicus
Dermanyssus gallinae
Ornithonyssus sp.
Cnemidocoptes sp.
4
Cytodites nudus
Epidermoptes bilobatus

Laboratorio de Parasitologa Mdica

La coccidiosis en pollos es una importante enfermedad parasitaria, causada


principalmente por varias especies del gnero Eimeria. Clnicamente se
caracteriza por diarrea con sangre y anemia, y en la forma subclnica por su
sndrome de mala digestin, con gran
repercusin econmica.
Etiologa
Eimeria acervulina
Eimeria brunetti
Eimeria hagani
Eimeria mxima
Eimeria mivati

Eimeria mitis
Eimeria necatrix
Eimeria praecox
Eimeria tenella

Morfologa
Especie
Eimeria
acervulina

Eimeria
brunetti
Eimeria
hagani
Eimeria
mxima

Eimeria mivati

Eimeria mitis
Eimeria
necatrix

Ooquiste
Forma ovoide.
Pared lisa.
Tamao: 12 a 23 por 9 a 17 micras.
Tienen un grnulo polar.
Forma ovoide.
Pared lisa.
Tamao: 23 25 por 19 20 micras.
Tienen un grnulo polar.
Forma: anchos, ovoides de pared lisa y
con grnulo polar.
Tamao: 16-21 por 14-19 micras.
Tienen forma ovoide, pared lisa o
algunas veces rugosa de color amarilo.
Tamao: 21-42 por 16-80 micras.
Anchos de forma elipsoide u ovoide
tienen pared lisa, con micrpilo y
grnulo polar.
Tamao: 11-20 por 12-17 micras.
Forma subesfrica, con pared lisa
descolorida, tienen grnulo polar.
Forma oblonga u ovoide, pared lisa y
descolorida, tienen grnulo polar.

Esporoquistes
Forma ovoide con cuerpo
de Stiedae.

Forma ovoide con cuerpo


de Stiedae y residuo.

Cuerpo de Stiedae

Cuerpo de Stiedae

Cuerpo de Stiedae

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Tamao: 12-19 por 11-24 micras.


Eimeria
praecox

Forma ovoide de pared lisa descolorida.


Tienen grnulo polar.
Tamao: 20-25 por 16-20 micras.

Eimeria tenella

Forma ovoide, anchos de pared lisa y


tienen grnulo polar.
Tamao: 14-31 por 9-25 micras.

Ooquiste NO esporulado

Ooquiste esporulado

Ciclo de vida
1.- La fase infectante es el ooquiste esporulado, el cual contiene cuatro
esporoblastos, con 2 esporozoitos cada uno.
2.- El ooquiste al ser ingerido por el ave sufre la accin de los jugos gstricos y
la accin mecnica de la molleja, provocando la liberacin de los 8
esporozoitos, que penetran a las clulas epiteliales del intestino, formando
trofozoitos.
3.- Estos al seguir desarrollndose, reciben el nombre de esquizontes, que
posteriormente dan lugar a merozotos de 1 generacin.
4.- Procediendo a una 2 y 3 generacin, liberan merozotos que
posteriormente se transforman en microgametocitos (clulas masculinas) y
macrogametocitos (clulas femeninas) para formar la fase sexual del ciclo en la
cual el microgametocito penetra al macrogametocito dando origen a un
ooquiste no esporulado, que sale con las heces y cae al suelo en donde
esporular si existen condiciones favorables de temperatura, humedad y
oxigenacin.
5.- Ya esporulado puede permanecer viable por un ao o ms si se mantienen
las condiciones ambientales favorables.

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Localizacin de coccidias de pollos


Eimeria acervulina
Eimeria brunetti
Eimeria hagani
Eimeria mxima
Eimeria mivati
Eimeria mitis
Eimeria necatrix
Eimeria praecox
Eimeria tenella

Duodeno
+

Yeyuno
-

leon
+

+
+
+
+

+
+
-

Ciego
-

+ Localizacin principal
- Localizacin secundaria

Blastocystis hominis
Blastocystis hominis es un protozoo que causa cuadros diarreicos. Para
su diagnstico en materia fecal se reconocen las formas vacuolar, avacuolar,
granular y qustica. En muestras procedentes de medios de cultivo se han
reconocido adems las formas de esquizonte y trofozoto. Existen diversos
tipos de Blastocystis que, adems de infectar a los humanos, pueden infestar
animales de granja, aves, roedores, anfibios, reptiles, peces e incluso
cucarachas.

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Morfologa
Blastocystis presenta una gran diversidad morfolgica. Por lo general, son
organismos de forma esfrico-ovalados, incoloros, hialinos y refringentes. El
tamao vara entre 5-40 m de dimetro, con una masa central granular,
rodeada por refringencia con uno o dos ncleos. En ciertos preparados puede
notarse un cariosoma que es central, grande y negro.
Se describen comnmente cuatro formas: vacuolar (tambin denominada de
cuerpo central), granular, ameboide y qustica. La forma de aparicin de este
organismo es dependiente en gran medida de las condiciones ambientales, ya
que es extremadamente sensible al oxgeno.
Forma
Vacuolar

Caractersticas
Tiene un tamao muy variable, entre 2-200 m de
dimetro con una media de 4-15 m y se
caracteriza por la presencia de una gran vacuola
central. En la periferia se encuentran el
citoplasma con mitocndras, aparato de Golgi y
retculo endoplasmtico y varios ncleos. Esta
forma predomina en las heces frescas y puede
observarse en los cultivos.

Granular

Parece proceder de la transformacin de la


vacuolar
por
diferentes
estmulos.
Es
morfolgicamente similar a la forma vacuolar pero
el citoplasma circundante o la vacuola estn
finamente granulados.

Imagen

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Amoeboide

Qustica

Esta forma es inmvil y fuertemente adhesiva.Es


polimorfa, capaz de emitir pseudpodos por
extensin y retraccin y con una marcada
actividad fagocitaria demostrada por la presencia
de restos bacterianos y celulares en su interior.
Se ha sugerido que es una fase intermedia entre
la forma vacuolar y la qustica y estara
encargada de la fagocitosis para obtener energa
para la enquistacin Es la forma predominante en
los cultivos fundamentalmente si las heces
proceden de pacientes sintomticos por lo que se
especula que puede ser un indicador de
patogenicidad o contribuir a la patogenicidad de
Blastocystis hominis.
Tienen un pequeo tamao (3-5 m) y apariencia,
considerarlos como artefactos. Existen 2 tipos de
quistes: fecales o de pared gruesa y quistes de
pared fina.
Los quistes fecales son esfricos u ovoides y
estn protegidos por para pared multilaminar.
Poseen de 1 a 4 ncleos, mltiples vacuolas y
depsitos lipdicos y de glucgeno. Estn
rodeados por una capa fibrilar independiente que
parece producida por el organismo cuando
madura.

Ciclo de vida
Los quistes se ingieren y luego en el intestino grueso se produce el
desenquistamiento, con el desarrollo de la forma vacuolar. A medida que
avanza el bolo fecal se da el proceso de enquistamiento formndose quistes
que tienen una cubierta fibrilar la cual se pierde en el proceso de maduracin
del quiste. Hay un estadio granular transitorio entre la forma qustica y la
vacuolar y es sta ultima la que sufre la divisin celular. La forma vacuolar
tambin puede transformarse a forma ameboide y se propone que estas no
pueden dividirse, por lo cual deben revertir a la forma vacuolar.

10

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Iodamoeba butschlii
Es
una
ameba
relacionada
con
el
gnero
Entamoeba.
Es
un parsito comensal exclusivo del intestinohumano, es decir, vive a expensas
del hombre; mas no le ocasiona dao. Aunque no causa enfermedades en el
hombre, es un buen marcador de contaminacin oral-fecal por los alimentos o
agua en las poblaciones en donde sus habitantes se les detecten el parsito.
Es un poco mayor que la pequea E. nana, mide unos de 10 m. Tiene dos
estadios de desarrollo, uno trofozoto y otro quiste.
Su localizacin en el husped: Luz del colon y ciego.
Forma
Trofozoitos

Quistes:

Tamao
(Miden de 8-20 m,
promedio 12 a 15
m)

Caractersticas
Su movimiento es lento y no progresivo. Ncleo
nico, que no se ve en preparaciones sin teir.
Cuando se tie el cariosoma es grande y casi
siempre de localizacin central. A menudo hay
grnulos acromticos refringentes, difciles de
visualizar, alrededor del cariosoma o entre
cariosoma y la membrana nuclear. Carece de
cromatina perifrica sobre la membrana nuclear.
El citoplasma es granular grueso, vacuolado y
puede contener bacterias, levaduras y otros
detritos.
Miden alrededor de Su forma es muy variable, desde esfrica hasta
5
a
20
m elptica.
(promedio
10-12 Los quistes maduros tienen un solo ncleo, no
m)
visible en preparaciones sin teir o teidas con
yodo. Con tinciones permanentes, el ncleo
contiene un cariosoma grande, por lo general
excntrico, y pueden ser visibles o no grnulos
acromticos alrededor del cariosoma o a un lado
11

Laboratorio de Parasitologa Mdica

de ste. La caracterstica ms destacada del


quiste es la presencia de una masa de
glucgeno compacta en el citoplasma. En
preparaciones en fresco con yodo la vacuola de
glucgeno toma un color pardo rojizo. Esta
vacuola no se tie con tinciones permanentes,
pero aparece como una masa bien definida.
Morfologa

Ciclo de vida
La infeccin ocurre por ingestin de quistes maduros en alimentos, agua o
manos contaminados con heces. El desenquistamiento ocurre in el intestino
delgado y los trofozotos son liberados y migran al colon. Los trofozotos se
reproducen por fisin binaria y producen quistes que se eliminan con las
heces.. Los trofozotos en el medio externo mueren rpidamente. En muchos
casos los trofozotos permanecen confinados en la luz intestinal de los
infectados, quienes son entonces portadores asintomticos o eliminadores de
quistes.

12

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Metodologa
La
metodologa que se
para
aislar
los
parsitos de inters
este proyecto fue
una tcnica de
diagnstico
coprolgico en
las aves de
corral,
as
como tambin
necropsia del
para
el
aislamiento de los
parsitos al analizar
el intestino, el coln y
el contenido de estos, ya
principales rganos en los
cuales se puede encontrar
parsitos. A continuacin se
dicha metodologa.

sigui
en

la
ave

que

son

los

describe

Recoleccin
de
materias fecales: Las
materias fecales que
se utilizan para diagnsticos parasitarios se deben tomar directamente del recto
por encontrarse libres de elementos extraos que puedan impedir su
interpretacin. De no lograr extraerlas directamente del recto, pueden tomarse
para el estudio, las materias fecales logradas al momento de la deposicin o en
caso extremo las materias frescas encontradas en el piso, libres de cuerpos
extraos.
Obtencin: Las muestras se pueden obtener mediante el uso de guantes
quirrgicos o bolsas de polipropileno, estas ltimas tienen la ventaja de ser
desechables y permiten ser utilizadas como medio de envase, conservacin y
transporte.
Cantidad de materia fecal para diagnsticos: La cantidad de materia fecal a
enviar est relacionada con el nmero de exmenes o tcnicas a practicar, o
la posibilidad de contar con material si se desea repetir algunos exmenes. En
aves se recomienda enviar el intestino completo o un ave con signos
representativos del problema parasitario que se sospecha o que se desea
confirmar.
Cuando exista dificultad para realizar el examen pocas horas despus de la
toma, se deben conservar en refrigeracin (climas fros) o agregar a las
muestras soluciones de formaldehdo o formalina al 10 o 20 % en agua o
solucin salina fisiolgica.

13

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Mtodo de Frotis directo (Preparaciones frescas).


De gran utilidad en el diagnstico de formas vegetativas o qusticas de
protozoarios intestinales, y de huevos de helmintos. Se requiere de muestras
frescas para evitar la alteracin de formas vegetativas o qusticas
de protozoarios o el desarrollo de huevos de helmintos a estados de mrula o
larvas que impiden el adecuado reconocimiento.
Tcnica:
1. En una lmina portaobjeto colocar una o dos gotas de solucin salina
fisiolgica o isotnica.
2. Con un palillo o esptula, colocar sobre la solucin un poco de heces
frescas, evitando la presencia de partculas de arena u otros cuerpos
extraos.
3. Mezclar con la solucin salina hasta obtener una pelcula poco gruesa y
clara.
4. Colocar una laminilla sobre la preparacin de heces.
5. Observar al microscopio con objetivo de 10X y 40X.
Mtodos de concentracin o enriquecimiento.
Se fundamenta en la utilizacin de soluciones que obligan a la concentracin
de las formas parasitarias como huevos o larvas, para luego ser recuperadas y
observadas. Son varias las tcnicas de enriquecimiento que permiten la
utilizacin de mtodos de flotacin, sedimentacin o migracin larvaria.
Mtodo de Flotacin con Sulfato de Zinc.
Tcnica
1. Colocar de 2-5 g de heces en un mortero.
2. Agregar de 30 a 50 de agua destilada.
3. Disolver con una esptula o varilla de vidrio.
4. Filtrar con una malla fina.
5. Llenar uno o dos tubos de ensayo hasta una tercera parte, agregar agua
destilada hasta dos terceras partes del tubo, homogenizar la muestra.
6. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos. Descartar el sobrenadante;
realizar paso 5 y 6 hasta obtener un sobrenadante claro
(aproximadamente tres lavados).
7. Una vez eliminado el sobrenadante, agregar Sulfato de zinc, agitar y
centrifugar (1500 rpm por 5 min.).
8. Agregar Sulfato de zinc hasta obtener un menisco cncavo.
9. Colocar un cubreobjetos encima del tubo por 10 min.
10. Retirar la laminilla y colocarla en un portaobjeto con una gota de
colorante de Anthony.
11. Observar al microscopio con objetivo de 10X y 40X.
Mtodo de Sedimentacin.
Tcnica
1. Colocar de 2-5 g de heces en un mortero.
2. Agregar de 30 a 50 de agua destilada.
3. Disolver con una esptula o varilla de vidrio.
4. Filtrar con una malla fina.

14

Laboratorio de Parasitologa Mdica

5. Llenar uno o dos tubos de ensayo hasta una tercera parte, agregar agua
destilada hasta dos terceras partes del tubo, homogenizar la muestra.
6. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos. Descartar el sobrenadante;
realizar paso 5 y 6 hasta obtener un sobrenadante claro
(aproximadamente tres lavados).
7. Una vez eliminado el sobrenadante, agregar 3 ml de formol y 1 ml de
ter, agitar y dejar reposar 5 min.
8. Centrifugar a 1500 rpm por 5 min.
9. Despegar el cogulo y decantar.
10. Al sedimento obtenido colocar una gota de colorante Anthony evitando
tocas las paredes del tubo para no contaminar el sedimento.
11. Tomar muestra con una pipeta Pasteur, colocar en un portaobjetos y
cubrir con un cubreobjetos.
12. Observar al microscopio con objetivo de 10X y 40X.
Tcnica de aislamiento de parsitos
1. Tomar el tracto digestivo obtenido de la necropsia.
2. Cortar entre las dobles ligaduras separando esfago, estmago, intestino
delgado, ciego e intestino grueso.
3. Trabajar independientemente cada uno de los segmentos digestivos en
diferentes cajas de petri.
4. Lavar a chorro de agua logrando que la mucosa quede en el lavado, incubar
a 37C por 10 min.
5. Se revisa todo el contenido mirando al esteromicroscopio.
Si no se observan larvas o indicios de parsitos, concentrar los lavados.
Filtrar el contenido con una malla, llenar uno o dos tubos de ensayo,
centrifugar a 1500 rpm por 10 min (3x). Emplear sedimentacin o flotacin
(a partir del paso 7).
Anlisis y discusin de resultados
Se recolectaron muestras de heces de pollos de un establecimiento dedicado a
la venta de piezas de dicha ave para consumo humano, en la ciudad de
Guanajuato, as como tambin se estudiaron los rganos donde se consider
ms probable encontrar endoparsitos, siendo estos los intestinos, el coln y
su contenido.
Se realiz un anlisis microscpico de las muestras obtenidas mediante las
tcnicas de concentracin de flotacin de Faust y sedimentacin de Charles,
encontrando tres estructuras de microorganismos con caractersticas
morfolgicas que nos permitieron lograr diagnosticar los gneros a los que
pertenecen los parsitos encontrados, las mediciones con micromtrico ocular
contribuy tambin a realizar dicha la identificacin.
La informacin recabada de la literatura y nuestras muestras se presenta en las
siguientes tablas comparativas:
Eimeria spp.
Literatura

Caractersticas

15

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Ooquiste no
esporulado de
Eimeria spp.
(40x).

El tamao del ooquiste


varia de especie a
especie.
El rango es de 12 80
por 9 25 m.

Proyecto (Muestra analizada)


Ooquiste no
esporulado de
Eimeria spp.
(40X). En
muestra de
lavado intestinal.

Tamao: 22.5 m de
largo por 17.5 m de
ancho.

Ooquiste no
esporulado de
Eimeria spp.
(40X). En
muestras de
concentracin
de heces.

Tamao: 22 m de
largo por 17.5 m de
ancho.

Ooquiste no
esporulado de
Eimeria spp.
(40X).
Encontrado en
intestino
delgado de
pollo.
Tamao: 17.5 m.

16

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Ooquistes no esporulados de Eimeria spp (40X).

Blastocystis hominis
Literatura

Caractersticas

17

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Quiste de
Blastocystis
hominis

Tienen un
pequeo tamao
3-5 m.
Los quistes
fecales son
esfricos u
ovoides y estn
protegidos por
para pared
multilaminar.

Proyecto (Muestra analizada)

Quiste de
Blastocystis
hominis (40x).

Poseen de 1 a 4
ncleos,
mltiples
vacuolas y
depsitos
lipdicos y de
glucgeno.
Tamao:
5 m.

18

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Iodamoeba btschlii
Literatura

Caractersticas
Quiste de
Iodamoeba
Btschlii*

Mide de 6 17 m a lo largo
de su eje mayor.

Proyecto (Muestra analizada)


Quiste de
Iodamoeba
btschlii
(40X) en
muestra de
heces de pollo

Tamao: 7.5 m.
Forma: circular.

* Todos los quistes muestran la vacuola de glucgeno tpica sin teir y un ncleo nico. El
rasgo ms caracterstico es la presencia de una gran vacuola de glucgeno claramente visible
en cada uno de ellos. Los quistes son uninucleados, tienen un cariosoma grande y carecen de
cromatina perifrica sobre la membrana nuclear.

Conclusiones
Mediante la realizacin de esta prctica logramos llevar a cabo la obtencin de
parsitos en muestras provenientes de aves de corral, en especfico de pollos,
as como la identificacin de dichos parsitos , determinando por su morfologa
y medicin, comparando con la literatura, que se trata de Eimeria spp.,
Blastocystis hominis y Iodamoeba btschlii.
Los resultados obtenidos nos indican que en el establecimiento en donde se
obtuvieron las muestras debera de existir un cuidado e higiene ms
exhaustivos con el cuidado de las aves, ya que estas se emplean para
consumo humano y podran representar un riesgo para la salud causando
infecciones.

19

Laboratorio de Parasitologa Mdica

Bibliografa

Kaufmann, J. (1996). Parasitic Infections of Domestic Animals: A


diagnostic manual. Birkhuser: Berln. Pp. 423.
Quiroz. (2005). Parasitologa y enfermedades parasitolgicas de
animales domsticos. Mxico: Limusa. Pp. 162 170.

Cruz, A. et al. (2001). Glosario de trminos en


parasitologa y ciencias afines. Mxico: Plaza y Vldes.
Pp. 83.
Blood D.C., Henderson J.A. (1993). Medicina veterinaria. Mxico:
Interamericana.

20

S-ar putea să vă placă și