Fundamentos tcnicos de las pruebas de ADN

La informacin gentica de cualquier persona es idntica en todas las clulas

nucleadas de su cuerpo y es distinta a la de cualquier otro individuo
(exceptuando el caso de hermanos gemelos). Todos los seres humanos reciben
la mitad de la informacin gentica de su padre y la otra mitad de su madre.
Esta informacin gentica se localiza en una molcula situada en el ncleo de
las clulas del organismo llamada cido desoxiribonucleico o ADN.

En nuestro laboratorio extraemos y aislamos el ADN de las muestras biolgicas

que recibimos y, a partir de l, realizamos una seleccin de determinadas
regiones empleando una tcnica muy sofisticada conocida como la
amplificacin en cadena de la polimerasa o PCR. Estas regiones son los
llamados marcadores genticos, microsatlites o STRs.

Estos marcadores genticos son regiones conocidas del ADN, muy variables de
un individuo a otro (son muy "polimrficos") y que se heredan sin cambios de
una generacin a la siguiente. A las distintas formas heredables de estos
marcadores genticos las denominamos "alelos". Por lo tanto constituyen una
herramienta muy valiosa en los estudios de identificacin gentica y filiacin
ya que :

Cada individuo tendr unos marcadores genticos distintos a los del resto,
tendr sus propios alelos.

Necesariamente, la mitad de estos marcadores sern idnticos a los de su

padre y la otra mitad idnticos a los de su madre. Para un determinado
marcador gentico el hijo tiene dos alelos, uno cedido por el padre y otro
cedido por la madre (y stos a su vez los heredaron de sus padres, los abuelos,
del mismo modo).

La informacin sobre los alelos de cada individuo la obtenemos del anlisis

mediante un secuenciador automtico de ADN del producto de la amplificacin
por PCR.

De la comparacin de los alelos encontrados en el hijo se deducen aquellos

que obligadamente han debido ser aportados por el padre biolgico. De la
comparacin se puede desprender que :

El presunto padre biolgico estudiado no ha podido aportar al hijo los

marcadores correspondientes al padre biolgico, es decir, existen
determinados alelos en el hijo que no estn presentes en el padre en cuestin,
en cuyo caso la paternidad quedar excluida.

El presunto padre biolgico s ha podido aportar esos marcadores, es decir, los

alelos encontrados en el hijo estn presentes en el padre en cuestin, en cuyo
caso procedemos a realizar un complejo anlisis estadstico que contrasta la
probabilidad de que esa persona sea el padre con la probabilidad de que lo sea
cualquier otra persona tomada al azar de la poblacin, dada la evidencia
gentica que se desprende del anlisis.

En ADFTecnoGen analizamos un mnimo de 15 marcadores genticos lo que nos

permite obtener probabilidades de paternidad superiores al 99,999 %, en el
caso de participar la madre en el estudio, y superiores al 99,9 % en el caso de
estudios de paternidad en ausencia de la madre. Estas probabilidades permiten
garantizar una seguridad absoluta tanto en la asignacin como en la exclusin
de paternidad.

La informacin gentica como herramienta: el ADN

Los polimorfismos de ADN
Polimorfismos de ADN y la Pruebas de Paternidad
La exclusin de paternidad
La Probabilidad de Paternidad
El ndice de Paternidad
La "fiabilidad" de la prueba
Limitaciones de las pruebas de ADN
El ADN mitocondrial

El Cromosoma Y
La informacin gentica como herramienta: el ADN

El cido Desoxirribonucleico o ADN es una molcula grande, de estructura

compleja, que porta la informacin gentica del organismo. Esta informacin
gentica es importantsima ya que es la que nos hace lo que somos y cmo
somos y est basada en un cdigo derivado de la combinacin de cuatro
elementos que son las bases nitrogenadas: Adenina, Timina, Citosina y
Guanina.

Dentro de los seres humanos podemos encontrar ADN dentro del ncleo de
cada clula (ADN nuclear) y fuera del ncleo, en el citoplasma de la clula,
dentro de unos orgnulos pequeos denominados mitocondrias (ADN
mitocondrial).

El ADN nuclear se estructura en grandes "paquetes" denominados

cromosomas. Los seres humanos tenemos 46. Exactamente, 23 pares.

Por qu decimos mejor 23 pares? Porque, en realidad, la informacin gentica

de un ser humano est integrada en un "juego" de 23 cromosomas, 22
autosmicos (cromosomas 1 al 22) y 1 sexual (cromosoma X o Y), lo que
sucede es que los seres humanos somos organismos diploides, esto es, todas
nuestras clulas (salvo las germinales) tienen dos de estos "juegos" completos:
uno que recibimos un de nuestra madre (22 + 1X) y otro que recibimos de
nuestro padre (22 + 1X 1Y).

En total pues, 46 cromosomas. De los cuales, los cromosomas sexuales

determinan el sexo de la persona. Dos cromosomas X (XX): sexo femenino; Un
cromosoma X y un cromosoma Y (XY): sexo masculino.

Curiosamente, de todo el ADN nuclear, slo aproximadamente el 10 % es el

que porta el cdigo gentico con la informacin que configuran los genes (ADN
codificante), el restante 90% es, simplemente, ADN no codificante.

Precisamente, en el ADN no codificante, es donde la gentica forense ha

encontrado una herramienta valiossima para la identificacin de las personas:
los polimorfismos de ADN.

Subir
Los polimorfismos de ADN

Ya hemos visto que tan slo el 10% del ADN nuclear codifica lo que somos y
como somos. Pues, por si fuera poco, de ese 10% los seres humanos
compartimos casi todo... (si no, no seramos seres humanos). As que, si lo que
queremos es algo que nos sirva para discriminar a unas personas de otras, el
ADN codificante, en trminos generales y aunque tambin tenga sus
polimorfismos, nos va a servir de poco.

En cambio, dentro del ADN no codificante nos encontramos con zonas de una
extraordinaria variabilidad de unas personas a otras, de ah que las
denominemos "polimorfismos". Tambin, por el uso que le damos, los llamamos
"marcadores" de ADN.

Hay distintos tipos de polimorfismos pero para entender lo que son, su utilidad
y no extendernos demasiado, nos basta con referirnos slo a los denominados
STR (del ingls Short Tandem Repeats, o "repeticiones cortas en tandem").

Un STR est formado por una secuencia corta de bases (por ejemplo, de
cuatro, "AATG", como en el sistema TPOX) que se repite un nmero
determinado de veces (...AATGAATGAATGAATGAATGAATGAATGAATGAATG...).
La secuencia "AATG" forma lo que denominamos la unidad de repeticin. Esta
unidad de repeticin "AATG" es igual para todas las personas; lo que vara de
unas personas a otras, y esto es muy importante, es el nmero de veces que
se repite.

Cada STR tiene su "unidad de repeticin" caracterstica. Y el nmero de

repeticiones ser variable desde un nmero mnimo a uno mximo.

Cada nmero de repeticiones concreto constituir un "alelo", que es como

denominamos a cada forma que puede tomar este sistema en funcin del
nmero de repeticiones.

Si seguimos con nuestro STR ejemplo, en la secuencia anterior, la unidad

"AATG" se repite 9 veces. Estamos, pues, ante el alelo 9 de muestro ejemplo.

Cada persona tendr, para cada sistema o marcador gentico analizado, sus
propios dos alelos, uno procedente del padre y otro procedente de la madre.

Los polimorfismos de ADN que utilizamos en gentica forense han sido

previamente validados para tal uso, es decir, cumplen una serie de requisitos
cuyo fin ltimo es que su poder de discriminacin entre personas sea lo
suficientemente alto.

Subir
Polimorfismos de ADN y las Pruebas de Paternidad

En el apartado anterior, hemos descrito como todos los seres humanos

recibimos la mitad de la informacin gentica de nuestro padre y la otra mitad
de nuestra madre. Es decir, heredamos un "juego" completo de 23
cromosomas (22 autosmicos + 1 sexual) de nuestro y otro "juego" completo
de nuestra madre.

As que tenemos dos cromosomas 1, dos cromosomas 2, dos cromosomas 3,

, as hasta el 22 y dos cromosomas sexuales.

Entonces, de nuestros dos cromosomas 1, uno de ellos contendr informacin

gentica procedente exclusivamente de los cromosomas 1 de nuestro padre y
el otro contendr exclusivamente informacin gentica de los cromosomas 1
de nuestra madre.

Llegados a este punto podemos deducir que, si queremos saber si alguien es el

padre biolgico de una persona, y basndonos en el principio anterior,
deberamos comprobar que ambas comparten la mitad de su informacin
gentica. Cmo?, mediante el estudio de polimorfismos de ADN. Veamos un
ejemplo:

Investigamos una paternidad biolgica y contamos con la madre, el hijo y un

presunto padre biolgico. Decidimos analizar el polimorfismo denominado TPOX
y obtenemos los siguientes resultados:

El hijo porta los alelos 9 y 10 (se informa como [9,10]); la madre, [9,11] y el
presunto padre biolgico, [7,8].

Nos encontramos con una EXCLUSIN de paternidad, ya que los posibles hijos
de esa pareja slo pueden ser, para ese marcador analizado: [7,9], [7,11], [8,9]
y [8,11], como combinacin de sus alelos correspondientes, y el genotipo del
hijo [9,10] no se encuentra entre ellos. El resultado no es compatible con la
hiptesis de que sean padre e hijo biolgicos.

Imaginemos que analizamos a un segundo presunto padre biolgico y resulta

ser [7,10] para el sistema TPOX.

Nos encontramos con una compatibilidad gentica que implica NO EXCLUSIN

de paternidad ya que los posibles hijos de esta nueva pareja pueden ser: [7,9],
[7,11], [9,10] y [10,11]. El hijo analizado es portador de la tercera combinacin
posible. El resultado es compatible con la hiptesis de que sean padre e hijo
biolgicos.

Un solo sistema no es suficiente para alcanzar una respuesta concluyente,

debemos analizar el mayor nmero posible (en principio, cuantos ms, mejor)
para encontrar el mayor nmero de exclusiones de paternidad o una
compatibilidad gentica completa que no permita excluir la relacin y permita
alcanzar unos valores elevados para el ndice y la Probabilidad de Paternidad.

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La exclusin de paternidad

Cuando se afronta un estudio de paternidad se deben estudiar el mayor

nmero de marcadores posibles para poder encontrar el mayor nmero de
exclusiones o la mayor compatibilidad gentica entre el presunto padre
biolgico y el hijo.

De forma clsica y general se puede considerar que una paternidad queda

excluida si se encuentran ms de 2 exclusiones entre los marcadores
analizados, en cuyo caso, podremos considerar que la persona estudiada no
puede ser la padre biolgico del hijo.

En nuestras pruebas de paternidad, en los que analizamos un gran nmero de

marcadores, solemos obtener entre seis y diez exclusiones cuando la madre ha
participado en el estudio y entre cuatro y seis exclusiones cuando slo hemos
estudiado al presunto padre biolgico.

Subir
La Probabilidad de Paternidad

Ahora bien, si la compatibilidad gentica entre el presunto padre biolgico

analizado y el hijo es completa podramos ya afirmar que es su padre
biolgico?

Nuestro sentido comn nos dice que s: primero sospechamos que una persona
es el padre biolgico de otra, para comprobarlo, decidimos analizar sus perfiles
genticos y, al final, resultan ser perfectamente compatibles!. Parece muy
poco probable que se produzca esa compatibilidad y despus de todo el padre
biolgico sea otro.

Pues bien, podemos y debemos cuantificar esa incertidumbre. Tenemos

herramientas para calcular, una vez comprobada esa compatibilidad gentica,
cunto es de probable un hecho (S es el padre) y cuanto es de probable el otro
(NO es el padre).

En 1938, Eric Essen-Mller, basndose en el Teorema de Bayes, describi su

frmula para calcular la probabilidad de paternidad (W):

W = X / ( X + Y ), donde X es la probabilidad de que la evidencia biolgica

observada en el hijo proceda del presunto padre biolgico analizado e Y la
probabilidad de que la evidencia biolgica observada en el hijo proceda de
cualquier otro varn tomado al azar de entre la poblacin. Esto significa asumir
que, antes de hacer la prueba de ADN, el presunto padre biolgico analizado
tiene tantas posibilidades de ser el padre como de no serlo y que, de no serlo,
cualquier otro varn de la poblacin tiene la misma probabilidad "a priori" de
ser el padre.

En 1981, K. Hummel describi sus predicados verbales, que conjugaban

distintos intervalos de valores de Probabilidad de Paternidad (W) con sus
respectivas interpretaciones, con el objetivo de hacer comprensibles los valores

y armonizar las interpretaciones. Consider que un valor de W igual o superior

a 99,73% era suficiente para considerar probada una paternidad desde un
punto de vista prctico (W mayor o igual al 99,73% igual a "paternidad
prcticamente probada").

Los predicados verbales de Hummel fueron aceptados internacionalmente.

Tambin la Jurisprudencia Espaola los ha descrito y admitidos como vlidos
(ver Sentencia del Tribunal Supremo del 24 de noviembre de 1992).

La tecnologa que ADFTecnoGen utiliza, permite superar ampliamente los

valores que propuestos por Hummel, por lo que nos hemos impuesto el criterio
actual y aceptado por la comunidad cientfica de superar una Probabilidad de
Paternidad del 99,9% para informar como probada una paternidad biolgica.

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El ndice de Paternidad

Cuando afrontamos una prueba de investigacin biolgica de la paternidad

tratamos de averiguar, mediante evidencias biolgicas, si una persona es el
padre biolgico de otra, por lo tanto, nos planteamos dos hiptesis
mutuamente excluyentes:

H1 = "El presunto padre biolgico analizado S es el padre biolgico"

H2 = "El presunto padre biolgico analizado NO es el padre biolgico, lo es

cualquier otro varn de la poblacin no relacionado familiarmente con l".

No existen ms hiptesis posibles, por lo tanto las probabilidades de las dos

hiptesis tienen que sumar 100%. SI queremos calcular la probabilidad de
paternidad utilizando la ecuacin de Essen-Mller debemos asumir que la
probabilidad "a priori" de ambas hiptesis es del 50% (esto es, que tan
probable es una como otra). Esto tericamente es vlido pero, en general, es
bastante conservador. (Baste un ejemplo: Para poder ser padre biolgico hay
que cumplir, respecto a la madre, ciertos requisitos sobran las explicaciones y este requisito no parece lgico que lo pueda cumplir cualquier otro varn
escogido al azar de entre la poblacin, y al revs, si el presunto padre nunca
hubiese cumplido tal requisito, la probabilidad "a priori" debera ser 0%).

Para evitar tener que comunicar una probabilidad de paternidad "a priori", que
siempre distorsiona la realidad por ser subjetiva, podemos informar mediante
el uso de un ratio denominado ndice de Paternidad o IP:

ndice de Paternidad = Probabilidad de la hiptesis 1 / Probabilidad de la

hiptesis 2 [ IP = P(H1) / P(H2) ]

Si en un determinado estudio la probabilidad de H1 resulta ser del 99,99%

entonces la probabilidad de H2 ser del 0,01%, el ndice de Paternidad ser del
9.999 (IP = 99,99 / 0,01 = 9.999)

Esto significa que el perfil gentico observado en el hijo es nueve mil

novecientas veces ms probable si procede del presunto padre biolgico
analizado que si procede de cualquier otro varn tomado al azar de entre la
poblacin.

Los predicados verbales de Hummel consideran que un valor de IP igual o

superior a 400 se corresponde con "una paternidad prcticamente probada".

La tecnologa que ADFTecnoGen utiliza permite superar ampliamente los

valores que propuestos por Hummel, por lo que nos hemos impuesto el criterio
actual y aceptado por la comunidad cientfica, de superar un ndice de
Paternidad de 1.000 para informar como probada una paternidad biolgica.

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La "fiabilidad" de la prueba

Es habitual encontrar en Internet, incluso en sitios web de laboratorios que se

dedican a realizar pruebas de paternidad, a quienes identifican el valor
obtenido de Probabilidad de Paternidad con la fiabilidad de la prueba y esto es
FALSO.

Y es fcil de entender y deducir si sabe, se asume y se tiene en cuenta que el

valor que se obtiene de probabilidad de paternidad depende directamente de

la informacin gentica que poseen los participantes y slo indirectamente de

la forma que el laboratorio aborda la investigacin.

Si el presunto padre biolgico y el hijo son totalmente compatibles

genticamente, pero comparten una informacin gentica relativamente
frecuente en la poblacin, el valor que obtendremos de probabilidad de
paternidad ser menor que si la informacin gentica que comparten es
relativamente rara.

Si afrontamos las pruebas exactamente de la misma manera en ambos casos,

utilizando los mismos recursos tcnicos y humanos, y aplicando exactamente
los mismos criterios de calidad y control, y en el primer caso obtenemos una
probabilidad de paternidad del 99,995% y en el segundo del 99,9995%,
significa que es ms fiable el segundo resultado que el primero? La respuesta
es NO. Ambos son igual de fiables.

Como la informacin gentica de los participantes no se conoce "a priori", es

por lo que se establecen criterios homogneos a la hora de abordar una
investigacin gentica de paternidad y umbrales de decisin que se deben
alcanzar para considerar concluyentes los resultados.

En condiciones normales, cualquier prueba de paternidad normal puede

considerarse probada si la probabilidad de paternidad alcanza o supera el
99,9%.

Ahora bien Cules son los recursos tcnicos y humanos y los criterios de
calidad y control, que utilizar y aplicar el laboratorio que va a hacer la
prueba? Llegados a este punto, quizs la cuestin ms importante que
debamos plantearnos sea, qu laboratorio me inspira ms confianza a la hora
de afrontar mi investigacin gentica?

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Limitaciones de las pruebas de ADN

Todo lo descrito en los apartados anteriores es vlido para aquellas pruebas de

ADN que investigan la paternidad o maternidad biolgicas y en las que son
analizables, como mnimo, el hijo y el progenitor cuya relacin biolgica se
investiga.

El ADN se hereda de padres a hijos. Si tratamos de investigar cualquier otra

relacin biolgica la eficacia de la prueba desciende notablemente, lo que hace
delicada su valoracin.

El que una prueba de investigacin biolgica de parentesco (distintas de la

paternidad y/o la maternidad) se pueda afrontar con unas mnimas garantas
de xito depender, fundamentalmente, del nmero de personas necesarias
para la investigacin que puedan o se presten a participar.

En cualquier caso es necesario plantear una hiptesis concreta. En los estudios

de ADN no se pueden plantear cuestiones abiertas, del tipo: "Creo que una
persona es familiar mo pero no se qu podemos ser, puedo hacer una prueba
de ADN que me diga qu somos?, planteada as la investigacin la respuesta es
NO.

Hay que plantear preguntas concretas basadas en indicios previos no

biolgicas, que permitan establecer hiptesis claras y mutuamente
excluyentes. Por ejemplo: "Creo haber encontrado una persona que puede ser
mi hermano biolgico por parte de padre". Este caso s es abordable ya que
nos permite plantear dos hiptesis mutuamente excluyentes:

Hiptesis A: "los individuos analizados son hijos del mismo padre biolgico"

Hiptesis B: "los individuos analizados no son hijos del mismo padre biolgico".

La prueba de ADN nos permitir calcular las probabilidades de ambas hiptesis.

Es decir, nos permitir saber cuantas veces es ms probable una hiptesis que
otra una vez obtenidos los respectivos perfiles de ADN. Pero esta prueba
necesitara de la participacin de las madres biolgicas de los dos
participantes, ya que su estudio pondra en evidencia qu informacin gentica
procede de sus madres y as poder comparar slo aquella que necesariamente
debieron recibir de sus respectivos padres biolgicos.

Existe adems el problema aadido de desconocer "a priori" el poder de

discriminacin intrnseco que tendrn los perfiles genticos de las personas
analizadas. Si dos personas comparten en un determinado marcador gentico
un alelo rarsimo de la poblacin la hiptesis del parentesco biolgico estudiada

podra verse muy favorecida, pero si la informacin gentica encontrada en

ambos individuos analizados es bastante comn, el estudio podra no alcanzar
resultados concluyentes.

Con todo lo explicado queremos sealar que cualquier prueba de parentesco

biolgico debe ser consultada con el laboratorio para que ste aconseje
respecto a cmo afrontarla con unas garantas mnimas de xito. Existen
infinidad de detalles a tener en cuenta antes de decidir si merece la pena
realizar el estudio.

Como norma general, desconfe de aquel laboratorio que le diga que cualquier
estudio se puede afrontar con una prueba de ADN.

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El ADN mitocondrial

Las mitocondrias son orgnulos citoplasmticos con carga gentica propia: el

ADN mitocondrial. Su funcin es proporcionar energa a la clula y su nmero
vara entre 100 y 1000 por clula. Hasta lo que conocemos hoy, todas las
mitocondrias que tienen nuestras clulas proceden de las que portaba el vulo
de nuestra madre en la fecundacin, lo que hace que el ADN mitocondrial sea
de herencia exclusivamente materna.

As pues, una madre y todos sus hijos (independientemente de su sexo)

tendrn el mismo ADN mitocondrial. Es por esto que el estudio del ADN
mitocondrial es especialmente til en el estudio de linajes maternos y en
pruebas complejas de maternidad.

La interpretacin de los resultados del anlisis del ADN mitocondrial es

compleja, y su poder de discriminacin relativamente bajo. Si el ADN
mitocondrial encontrado en dos individuos no coincide, se puede concluir que
no tienen un mismo origen materno, pero si s coinciden, no es evidencia
suficiente para considerar probada una madre comn.

El ADN mitocondrial tiene tres caractersticas fundamentales que lo hacen

especialmente resistente a la degradacin frente al ADN nuclear a la hora de
estudiar muestras biolgicas crticas: su reducido tamao (16.569 pares de
bases frente a los 6.000 millones del ADN nuclear), su estructura es circular y

su gran cantidad de copias (dentro de cada clula, por cada copia de ADN
nuclear puede haber entre 100 y 1.000 copias de ADN mitocondrial).

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El Cromosoma Y

De los 23 pares de cromosomas presentes en los seres humanos slo uno

determina el sexo.

El par de cromosomas sexuales puede estar formado por 2 cromosomas X, en

cuyo caso el individuo ser mujer o 1 cromosoma X y 1 cromosoma Y, en cuyo
caso el individuo ser varn.

As pues, el cromosoma Y slo est presente en los varones y slo los varones
lo dan en herencia a sus hijos que, por recibirlo, sern varones.

El cromosoma Y apenas recombina con el X, as que se puede considerar, a

efectos prcticos, que todos los hijos varones de un mismo padre comparten
idntico cromosoma Y.

El anlisis de polimorfismos propios del cromosoma Y nos permite abordar

investigaciones de linaje paterno, siempre y cuando en todas las generaciones
involucradas se analicen varones.
Bbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbb
LA PRUEBA DE PATERNIDAD CON ADN
Una descripcin para abogados, laboratorios clnicos y pblico en general
Dr. en C. Hctor Rangel Villalobos [1]

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Resumen

La facilidad para obtener perfiles genticos ha revolucionado la identificacin

humana para resolver casos criminales as como determinar relaciones
biolgicas de parentesco, comnmente paternidad. Las repeticiones cortas en

tndem, ms bien conocido como STRs son los marcadores genticos ms

utilizados con este fin. Un perfil de ADN se compone de los genotipos para
varios STRs, que forman un cdigo casi nico para diferenciar o relacionar a
una persona biolgicamente. Actualmente el anlisis de laboratorio se basa en
tres tcnicas: 1) extraccin de ADN, 2) PCR multiplex, y 3) electroforesis
capilar, y existen kits comerciales para desarrollar fcilmente esta tarea. En
paternidad se espera que entre el perfil de ADN de un supuesto padre (SP) e
hijo (H) exista al menos una concordancia por cada marcador. Cuando para
ms de un marcador no hay concordancia entre SP y H, se establece una
exclusin y prcticamente el resultado es incuestionable. Sin embargo, cuando
todo concuerda entre SP y H se debe hacer una valoracin bioestadstica del
caso, estimando la probabilidad de que algn otro individuo tomado al azar de
la poblacin pudiera concordar con el hijo. Para esto se debe haber estudiado a
los marcadores STRs en la poblacin donde se realizan las pruebas de ADN,
para usar las frecuencias allicas de los STRs en el anlisis bioestadstico. A
dicha estimacin se le denomina ndice de paternidad (IP), que indica cuantas
veces es ms probable haber encontrado la concordancia SP-H considerando
que s es el padre, respecto a que fuera un individuo tomado al azar de la
poblacin. Este IP puede ser transformado a porcentaje de paternidad (W), para
facilitar la interpretacin. Por ejemplo, un IP de 1000 se convierte en W=
99.9%. Existen formulas especificas para calcular el IP, las cuales cambian
segn el genotipo de cada marcador analizado, y segn el caso de paternidad,
ya sea que participe o no la madre, si no est el padre pero s estn los
abuelos, si se duda de la paternidad de ambos padres, etc. En Mxico existen
estos estudios que sustentan su correcta aplicacin, suele ser ms preocupante
que no hay suficiente personal capacitado, tanto en el mbito laboratorial
como en la imparticin de justicia, que garanticen siempre la correcta
interpretacin de la prueba sobre bases cientficas.

Introduccin

En 1985 Alec Jeffreys implement el uso del material gentico (ADN[2]) para
identificacin humana, obteniendo un patrn de bandas parecido a un cdigo
de barras al que denomin huella digital del ADN (DNA fingerprinting) (Figura
1). Actualmente a esta prueba se le conoce como perfil de ADN, huella
gentica, o simplemente prueba de ADN. Este perfil de ADN se ha demostrado
que es prcticamente nico e irrepetible, a excepcin de los gemelos
monocigotos[3], lo que permite diferenciar a cualquier persona de otra y
establecer sus relaciones biolgicas de parentesco. Las aplicaciones de la
prueba de ADN son diversas, pero destacan dos, las pruebas de paternidad y
los anlisis forenses; este ltimo en casos criminales para establecer la relacin
de un sospechoso con la evidencia dejada en la escena de un crimen (p. ejem.
mancha de sangre o semen), para incriminarlo o, en su caso, exonerarlo. Otras
aplicaciones menos comunes son para establecer relaciones familiares de

restos cadavricos en casos de desastres o personas desaparecidas, en

investigaciones histricas (p. ejem. restos de la familia Romanov, origen de
Cristobal Coln, etc.), o en antropologa al analizar poblaciones humanas para
estudiar su origen y evolucin. Esta revisin sobre la prueba de ADN se
centrar en su aplicacin en paternidad, revisando para ello aspectos bsicos
del genoma humano y de los marcadores moleculares, tcnicas para obtener
un perfil de ADN, aspectos bioestadsticos para la interpretacin del resultado
emitido por un laboratorio, y preguntas frecuentes sobre la prueba de ADN.

Figura 1.
Alec Jeffreys, quin ideo el uso del ADN para identificacin humana en
Leicester, UK. Al fondo se observa la huella gentica del ADN (DNA
fingerprinting) como Jeffreys llamo al patrn de bandas que obtuvo, parecido a
un cdigo de barras, presumiblemente nico para cada individuo.

Genoma Humano

La estructura del cido desoxirribonucleico o ADN es bien conocida: una doble

cadena que gira sobre s que contiene informacin hereditaria codificada solo
por cuatro letras o nucletidos[4]: A, G, C y T (adenina, guanina, citosina y
timina, respectivamente) (Figura 2). El ADN es importante porque su
informacin es necesaria para el funcionamiento de la clula, ya que contiene
las instrucciones para sintetizar protenas[5], quienes propiamente llevan a
cabo las diferentes funciones celulares, en forma de enzimas, hormonas,
receptores, transportadores, molculas estructurales, de contraccin, soporte,
inmunolgicas, etc.

Figura 2.
Estructura de doble hlice (izquierda) del ADN o cido desoxirribonucleico. Los
nucletidos (A, G, C, y T) se encuentran en el interior de la doble cadena de
ADN.

A la dotacin completa de material gentico que recibimos de nuestros padres

se le denomina genoma[6], y se localiza en el ncleo de prcticamente todas
nuestras clulas, por lo que tericamente es posible realizar la prueba de ADN
a partir una sola clula de casi cualquier tejido. Los humanos recibimos una
dotacin gentica doble, va paterna y materna, que constituye nuestro
genoma, y que contiene 6,000 millones de nucletidos. De toda la informacin
que constituye el genoma, solo una pequea parte sirve o se expresa para
formar protenas (menos del 5%); a los fragmentos del genoma con una
secuencia de nucletidos que sirve para formar una protena se les denomina
genes[7] (Figura 3).

Figura 3.
Localizacin del genoma humano en el ncleo de la clula. Se muestra un
cromosoma y un gen, este ltimo caracterizado por tener informacin para
sintetizar una protena

Marcadores Moleculares

Considerando la gran cantidad de informacin que contiene el genoma,

podemos visualizar su potencial para identificacin humana. En particular la
prueba de ADN se realiza analizando secuencias del genoma muy variables, es
decir, que entre los individuos de una poblacin puede tener diferentes formas
alternas denominadas alelos . Estas secuencias permiten diferenciar a un
individuo de otro y, al heredarse de padres a hijos, tambin permite establecer
relaciones biolgicas de parentesco, por lo que se les conoce como marcadores
genticos o marcadores moleculares (por estar en la molcula del ADN). Cabe
sealar que para cada marcador una persona tendr dos alelos, uno materno y
otro paterno, y a dicha combinacin de alelos que recibimos de nuestros
padres se le denomina genotipo . Especficamente las secuencias o marcadores
empleados para realizar una prueba de ADN se caracterizan por tener
repeticiones cortas en tndem , y son ampliamente conocidos por sus siglas en
ingls como STRs (short tandem repeats) o microsatlites. A lo largo del
genoma se encuentran miles de STRs que pueden ser usados como
marcadores moleculares. Como su nombre lo dice, los STRs se componen de
secuencias cortas repetidas, por ejemplo GATA, formando diversos alelos que
se nombran por el nmero de veces que se encuentre la secuencia repetida;
por ejemplo, el alelo 6 presentar seis veces la secuencia (p. ejem.
GATA,GATA,GATA,GATA,GATA,GATA), y en una poblacin podran existir los
alelos 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, etc. El par de alelos o genotipo de una
persona para cada marcador STR (p. ejem. 6/9), permite diferenciarlo o
relacionarlo con otras personas (Figura 4). Cuando la persona presenta dos

alelos diferentes (uno materno y otro paterno), se dice que su genotipo es

heterocigoto ; mientras cuando tiene un solo alelo se asume que recibi el
mismo alelo de ambos padres, y se dice que su genotipo es homocigoto para el
STR en cuestin. En una pareja de heterocigotos para alelos diferentes se
pueden generar cuatro genotipos distintos en sus hijos, lo que permite
diferenciar individuos estrechamente relacionados como los hermanos (Figura
4). Un perfil de ADN , que tambin suele llamarse huella gentica, se genera
obteniendo los genotipos de varios STRs, formando un cdigo que
presumiblemente puede llegar a ser nico e irrepetible (6/9, 12/16, 17/21,
22/23, etc.). Hay que sealar que la nomenclatura (rango de alelos) de cada
STR puede ser diferente, por ejemplo, para el marcador X los alelos pueden ir
del 9 al 12, mientras para el marcador Y la nomenclatura va del 12 al 33, etc.

Figura 4.
Uso de los marcadores STRs para identificacin humana. Los genotipos
permiten establecer las relaciones de parentesco y diferenciar a un individuo
de otro. De una pareja de heterocigotos se generan multiples genotipos en sus
hijos.

Tcnica para obtener el Perfil de ADN

La forma de obtener un perfil de ADN se basa en generar millones de copias o

amplificar las secuencias del genoma que permiten diferenciar individuos, en
este caso los marcadores STRs. Esta tcnica permite replicar al ADN in vitro, y
se conoce ampliamente por sus siglas en ingls como PCR[15] (polymerase
chain reaction). La PCR se realiza por ciclos de temperatura en los que
bsicamente suceden los siguientes tres pasos en cada ciclo: 1)
desnaturalizacin, por calor se abren las cadenas de ADN, 2) alineamiento de
secuencias cortas conocidas como primers[16], que delimitan las regiones que
se van a replicar, y 3) extensin, formndose cadenas nuevas de ADN por
accin de la Taq polimerasa[17], una enzima termoestable capaz de aadir
nucletidos a los extremos de los primers. En cada ciclo de PCR se duplica la
secuencia de inters (STRs), por lo que en solo 25 ciclos tericamente habr
millones de copias, a lo que se conoce como amplificado, lo que facilitar
enormemente su anlisis posterior (Figura 5). Para el anlisis post-PCR hay que
recordar que los alelos STRs se diferencian por el nmero de veces que se
repite una secuencia, esto significa que el tamao o longitud va a ser diferente
de un alelo de otro (Figura 4). Para ver estas diferencias se emplea la

electroforesis[18], tcnica para separar molculas en una superficie de soporte

(gel) por accin de un campo elctrico en base a la carga y tamao de la
molcula; las ms pequeas corren ms rpido mientras las grandes se van
retrasando (Figura 6).

Figura 5.
Amplificacin exponencial de una secuencia de ADN por ciclos de temperatura
por la tcnica de PCR
Figura 6.
Amplificacin de STRs y deteccin por electroforesis en geles verticales de
poliacrilamida en un caso forense. Ntese que el perfil de ADN de la mancha de
sangre en ropa del sospechoso es igual al de la vctima.

Para ello simultneamente se someten a electroforesis muestras con

fragmentos de tamao conocido, tambin llamados marcadores de peso
molecular o estndar de tamao, y/o una mezcla de los diferentes alelos
posibles para los STRs que se estn analizando, y que se conoce como escalera
allica[19] o ladder; con lo que resulta relativamente sencillo definir los
alelos/genotipos y posteriormente el perfil gentico de una persona. La
electroforesis en una prueba de ADN se realiza de dos formas: 1) por geles
verticales de poliacrilamida, tcnica que ha cado francamente en desuso, y 2)
electroforesis capilar (EC)[20], cuyo proceso es ms preciso y automatizado,
por lo que constituye el mtodo de eleccin en los laboratorios de gentica
forense en el mundo. Finalmente, para observar el ADN amplificado (STRs) y
sometido a electroforesis es necesario teirlo; existen mtodos tradicionales
como la tincin con nitrato de plata de los geles de poliacrilamida (Figura 6), o
ms sofisticados que involucran la deteccin de fluorescencia aadida durante
la PCR y que se detecta en sistemas automatizados de electroforesis capilar.

La siguiente descripcin se enfocar en el anlisis de varios STRs

simultneamente (PCR mltiplex), seguido por electroforesis capilar (EC) para
obtener un perfil de ADN, donde existen diferentes kits o sistemas
genticos[21] que permiten amplificar hasta 16 marcadores, 15 STRs y un
marcador sexual llamado amelogenina[22] que define el sexo de la muestra.
Los kits comerciales ms empleados son AmpFlSTR Identifiler kit (Applied
Biosystems, Foster City, CA), y el PowerPlex 16 (Promega Corp., Madison, CA).
En ambos casos, durante la PCR los productos amplificados (STRs) se marcan
con diferentes fluorocromos[23], formndose as grupos de STRs que fueron
marcados con el mismo color, pero evitando que alelos de STRs diferentes se
sobrelapen en tamao (Figura 7).

Figura 7.
Los dos principales kits comerciales para identidad humana que analizan 15
STRs y el marcador sexual amelogenina (A). Los nombres de los STRs estn en
recuadros de colores, y en la parte de abajo un estndar de tamao o marcador
de peso molecular para definir el tamao de los alelos STRs. Ntese que cada
STR abarca un rango de tamao por los diferentes tamaos que sus alelos
pueden tener, y que no se sobrelapa con otro STR.

Los amplificados deben someterse a electroforesis capilar, es decir, este

proceso se hace a travs de un tubo del tamao de un capilar relleno de un
polmero, donde bajo el mismo principio de separacin por la carga y tamao
de la molcula, los amplificados se van separando al aplicar corriente elctrica.
Para este fin se usan analizadores genticos, como el ABI-Prism 310 de Applied
Biosystems, que de forma automatizada carga la muestra en el capilar para
luego aplicar voltaje. De esta forma se separan los STRs hasta llegar a una
ventana donde pasa un rayo laser que excita a los fluorocromos, que a su vez
emiten fluorescencia detectada en una cmara CCD, la cual convierte esa luz
en impulsos electrnicos que, con ayuda de un software, se representan
grficamente en un electroferograma[24] (Figura 8).

Figura 8.
Representacin de los pasos que involucra el anlisis de fragmentos de ADN
por electroforesis capilar (EC).

Cabe sealar que la luz (longitud de onda) de las diferentes fluorescencias se

sobrelapa, y la separacin de colores se logra mediante el uso de valores que
indican cuanto se sobrelapan cada uno de los colores, a lo que se denomina
matriz. Durante el anlisis del electroferograma para definir el perfil de ADN es
muy importante que simultneamente se corra en la EC una escalera allica
(ladder) con todos los alelos los STRs, lo que por comparacin directa se facilita
enormemente la asignacin correcta de los alelos, genotipos, y finalmente
perfil de ADN del individuo. Cabe sealar que todo este proceso dura alrededor
de 30 minutos por muestra, facilitando enormemente esta labor. Una vez

realizada la electroforesis capilar se observa el perfil de ADN de un individuo en

un electroferograma, donde los picos de acuerdo a su color y posicin nos
indican los alelos (genotipo) que tiene la persona para cada STR. Si un
individuo presenta uno o dos picos (alelos), indica que su genotipo es
homocigoto o heterocigoto, respectivamente, para el STR en cuestin (Figura
9).

Figura 9.
Electroferograma del perfil gentico de un individuo. El tamao en nucletidos
(pb) y nombre del STR se muestra en la parte superior de cada carril. Debajo
de cada pico se indican los alelos del individuo. Para amelogenina (A) se
observa solo un pico y una X (mujer, XX).

Interpretacin de resultados

Despus de obtener los perfiles en una prueba de ADN para determinar la

paternidad entre un supuesto padre y un hijo en disputa, existen dos
resultados posibles al comparar sus perfiles: 1) Que para al menos dos
marcadores no exista ninguna coincidencia entre los alelos/genotipos del
supuesto padre e hijo, lo que se denomina exclusin[25], y se descarta de
inmediato la paternidad biolgica (Figura 10); 2) Que s coincida el padre con el
hijo en al menos un alelo en todos los marcadores analizados, lo que se puede
interpretar como que el supuesto padre es el padre biolgico del hijo en
disputa. Pero cuidado, antes de llegar a esta conclusin se debe hacer una
valoracin bioestadstica del caso que permita contestar la siguiente pregunta:
qu tan probable sera que el perfil de ADN de cualquier persona, que NO sea
el padre biolgico, hubiera coincidido por azar o casualidad con el perfil de ADN
del hijo en disputa? (Figura 10). Para hacer esta valoracin correctamente es
necesario saber la frecuencia en la poblacin de los alelos que concuerdan
entre el supuesto padre e hijo. Para entender la importancia de estos datos
poblacionales en la interpretacin de una prueba de paternidad vamos a poner
un ejemplo. Supongamos que en una prueba de paternidad el alelo
concordante entre el supuesto padre e hijo lo tiene el 95% de las personas de
la poblacin mexicana, esta sera una prueba contundente en el caso?, seguro
que no, inclusive podemos inferir que esta es una evidencia muy pobre y que
sera injusto concluir, considerando solo esta evidencia, que el supuesto padre
es realmente el padre biolgico, ya que la mayora de varones que hubieran
puesto en su lugar hubiera coincidido con el hijo. Por el contrario, si el alelo

concordante entre el supuesto padre e hijo es muy raro y se observa solo en 1

de 10,000 personas de la poblacin, intuitivamente inferimos que esta
evidencia es valiosa para establecer la paternidad, ya que sera muy poco
probable que hubiera concordado el hijo con el supuesto padre si ste ltimo
no lo fuera realmente.

Figura 10.
Diferencia en la interpretacin de un anlisis de paternidad donde concuerda el
supuesto padre (SP) y el hijo (H), respecto a una exclusin de paternidad.

Las frecuencias poblacionales para hacer esta interpretacin se obtienen de

estudios en la poblacin donde se realizan las pruebas de ADN y,
preferentemente, deben estar publicados en revistas cientficas serias
(indizadas). En Mxico ya se cuenta con varios estudios que permiten hacer
esta valoracin y la mayora se citan al final de este trabajo. Se abordar la
explicacin sobre cmo interpretar una prueba de paternidad biolgica con
ADN a partir de un ejemplo donde la prueba indique paternidad, discutiendo
posibles cuestiones que pudieran surgir al pblico no-experto.

ndice de Paternidad (IP) y Probabilidad de Paternidad (W)

Haciendo algunas simplificaciones diremos que la interpretacin de un caso de

paternidad consiste en contrastar dos hiptesis o posibilidades contrarias:

X: el supuesto padre (SP) es el padre biolgico del hijo

Y: el supuesto padre (SP) NO es el padre biolgico y por lo tanto es otro hombre

A este contraste se le conoce como ndice de paternidad (IP), que indica

cuantas veces es ms probable que el SP sea el padre (X), respecto a que no lo
sea (Y), y suele describirse como: IP = X/Y.

El IP se estima a partir de los alelos/genotipos de cada STR usado en una

prueba de paternidad; luego se obtiene un IP total multiplicando el IP de todos
los STRs, es decir: IP total= IPSTR-1 x IPSTR-2 x IPSTR-3 etc. Otra manera de
interpretar el IP total es convirtindolo a probabilidad de paternidad,
ampliamente conocido como W, usando la siguiente frmula:

W = IP/ (1+ IP)

Ejemplo 1 (tro)

Ahora vamos a emplear las frmulas en casos reales a partir de diferentes

combinaciones de genotipos. Comenzaremos con un caso de un tro donde
participan padre, madre e hijo (Cuadro 1).

De la formula de IP= X/Y, normalmente X equivale en probabilidad a uno (1), ya

que asume que el SP s es el padre biolgico; otra forma de describir esta
probabilidad de haber encontrado esa concordancia pero en porcentaje es
100%. Mientras como Y asume que SP no es el padre, entonces se infiere que
fue otra persona de la poblacin y su probabilidad corresponde a la frecuencia
poblacional del alelo concordante entre SP y H. Estas frecuencias se obtienen
preferentemente de estudios gentico-poblacionales del lugar donde se hizo la
prueba, ya que las frecuencias pueden variar entre una poblacin y otra. Otro
detalle importante que se observa en las frmulas para calcular el ndice de
paternidad (IP) del Cuadro 1, es que no todas son iguales, principalmente
cambia la probabilidad de que sea un hombre al azar (Y), ya que la frmula
depende de la combinacin de genotipos del tro, y particularmente involucra
al alelo que concuerda entre SP y H. Por ejemplo, la lgica de la frmula
empleada en el los genotipos del tro para el primer STR (D21S11), es que el
hijo es homocigoto 30 (30/30) por lo que hay dos posibilidades de que el hij@
haya recibido al alelo 30 de una hombre al azar de la poblacin, ya sea de
parte de la madre o del padre, de all que resulte la frmula igual a 1/frec
(frecuencia del alelo concordante SP-H). Explicar los detalles de cada una de
las formulas para los posibles genotipos de un tro se escapa de los objetivos
de esta revisin, por lo cual se recomienda la lectura el libro de Evett y Weir
(1998).

Ejemplo 2 (do)

Este caso es relativamente comn y quin no participa normalmente es la

madre. Se tomar la misma combinacin de genotipos del ejemplo anterior
eliminando a la madre, para notar los cambios en las frmulas y el resultado
final (Cuadro 2).

Comparando el cuadro l y 2 inmediatamente sobresalen dos aspectos: 1)

Cambian algunas formulas, y por lo general disminuye la probabilidad de
paternidad (W) y los ndices de paternidad (IPs) estimados. Esta disminucin se
debe a la informacin que se pierde de la madre, por lo que no se puede estar
seguro cul de los alelos del hijo es el paterno y cul es el materno (i. e. 10/11
para CSF1PO), mientras en el caso anterior se poda inferir fcilmente (11 para
CSF1PO). Por lo anterior, al estimar que cualquier otro hombre de la poblacin
sea el padre biolgico de H, se amplan las posibilidades. A pesar de esto, en
general los sistemas genticos comerciales que incluyen 15 STRs logran
valores de W> 99.9%. Existen otras situaciones de paternidad ms complejas
donde cambia la interpretacin matemtica o bioestadstica, como 1)
establecer una paternidad cuando se duda de ambos padres, por ejemplo
cuando se piensa que se les cambio al beb en el hospital o se quiere
emparentar restos cadavricos con una pareja de supuestos padres, 2) cuando
no est el padre y se quiere saber si dos individuos son hermanos, 3) cuando
no est el padre pero se cuenta con los abuelo paternos, etc. La interpretacin
bioestadstica en cada caso tiene que analizarse por separado para llegar a una
conclusin cientficamente correcta, e igual se recomienda a los interesados la
lectura del libro del libro de Evett y Weir (1998).

Cuntos marcadores son necesarios para la prueba?

Se ha sugerido por parte del FBI[26], entre otros organismos, el uso de 13 STRs
para identificacin gentica humana que constituyen el CODIS[27] (Figura 11),

los cuales son suficientes para resolver la mayora de casos de paternidad. Sin
embargo, en realidad el nmero de marcadores depende del caso, pudiendo
ser menor o mayor a 13 marcadores; en realidad lo fundamental es llegar a
una conclusin lo suficientemente confiable. Cundo es suficientemente
confiable?, esta pregunta tiene una respuesta en realidad subjetiva que suele
ser arbitraria. Hasta hace algunos aos se empleaban algunos enunciados para
interpretar el porcentaje de paternidad (W); entre los ms famosos estn los
postulados de Hummel, donde W 99,73% (equivalente a un IP de 400) se
traduca como paternidad prcticamente probada y era lmite mximo para
valorar W. El desarrollo cientfico tecnolgico hace que estos enunciados y
valores a la fecha se consideren obsoletos e insuficientes. Actualmente entre
los laboratorios hay dos tendencias: 1) reportar el valor de W e IP obtenido a
partir del sistema gentico ofertado; o 2) fijar un lmite mnimo, por ejemplo de
1,000 o hasta 10,000 para el IP. En caso de no llegar al lmite mnimo
establecido se procedera a incrementar el nmero de marcadores, hasta
alcanzar una exclusin clara o un valor aceptable de IP.

Figura 11.
Nombres de los 13 marcadores STRs que constituyen el Combined DNA Index
System (CODIS), as como su posicin en los cromosomas del genoma humano.

Exclusiones

En un caso estndar de un tro de SP-H-M analizado con 13 a 16 marcadores,

es tpico encontrar de 7 a 10 exclusiones, lo que no significa que podamos
encontrar un caso con slo 2 o 3 exclusiones, u otros con 12. En casos de
paternidad con un solo progenitor el nmero de exclusiones tpico es entre 4 y
5. En casos ms complicados donde se pierde informacin gentica se reduce
el nmero de exclusiones que se espera encontrar, por lo que hay que
aumentar el nmero de marcadores investigados. Existe un caso particular
denominado exclusin de segundo orden[28], donde SP y H son homocigotos
para alelos diferentes. Este resultado se puede explicar, adems de la nopaternidad, porque comparten un alelo invisible (alelo nulo) y SP realmente
es el padre biolgico del hijo en disputa. Todos los dems casos de exclusiones
se denominan de primer orden.

Odos sordos a los IPs cuando se establece la exclusin

Qu se debe hacer cuando en una prueba con 13 marcadores, 3 excluyen o

indican que no es el padre y los otros 10 concuerdan entre SP y H, lo que
alguien podra interpretar como indicio de paternidad por ser la mayora?, A
quin le hago caso?, Cmo lo interpreto?. La respuesta es: Cuando se ha
llegado a la conclusin de exclusin, por haber encontrado al menos dos
exclusiones de primer orden, se hace odos sordos hacia los dems
marcadores. Cmo se explica esto?. Sucede que los alelos detectados con
marcadores en una prueba de ADN no son exclusivos de una familia, en
realidad en una poblacin mucha gente tiene los mismos alelos o genotipos sin
que esto signifique que estn emparentados; es como tener ojos cafs, pelo
negro o castao en la poblacin mexicana, mucha gente presenta estos rasgos
sin que sean familiares cercanos. La fortaleza de la prueba es que se generan
muchas combinaciones distintas entre los individuos de la poblacin, an entre
hermanos, por lo que es muy poco probable que al tomar dos individuos al azar
ellos tengan ya sea el mismo perfil de ADN (caso forense), o que un varn
concuerde con un hijo en disputa, en al menos un alelo por cada STR de sus
perfiles genticos (caso de paternidad). Clsicamente con ms de una
exclusin de primer orden se consideraba una exclusin probada
(definitivamente no es el padre), aunque cada vez se tiene ms cuidado porque
se han descrito casos de paternidad con hasta 3 cambios en el material
gentico (mutaciones) que ocasionan que no coincidan el SP y H[29], aunque el
SP si sea padre biolgico de H.

Como interpretar las mutaciones en paternidad

En un caso tpico de mutacin, una prueba de ADN con 13 o 15 marcadores

indicara que solo uno de ellos no concuerda entre SP y H, lo que hace pensar
que la nica exclusin observada en realidad se trata de una mutacin. Una de
las soluciones ms sencillas se basa en la sugerida por la AABB[30], donde el IP
del marcador que indica exclusin se obtiene con una formula sencilla IP=
/PE. El smbolo mu () indica la tasa de mutacin que se ha estimado en
general para los marcadores STRs (i. e. 7x10-3), y el poder de exclusin (PE)
[31], parmetro de paternidad estimado y reportado junto con las frecuencias
allicas en los estudios poblacionales antes mencionados.

Paternidad sin el padre? Uso del cromosoma sexual Y

Cada vez que la clula se va a dividir el material gentico se compacta en

estructuras llamadas cromosomas[32]. La presencia del cromosoma Y en el
esperma determina el sexo masculino en el futuro hijo en la mitad de las
fertilizaciones, y establece una herencia exclusiva del cromosoma Y de padres
a hijos varones (Figura 12). A diferencia de la mayor parte del material
gentico en el humano (23 cromosomas maternos y 23 paternos), los
cromosomas Y no se mezclan durante la formacin de los gametos en la
meiosis[33]. Por esta razn, cada hombre recibe un cromosoma Y idntico al de
su padre. Cabe mencionar que existe una pequea regin en los extremos del
cromosoma Y (aprox. 5%) que s se mezcla con el otro cromosoma sexual (X).
Dicha regin en general es de poco inters con fines de identificacin humana.

Figura 12.
Comparacin de la herencia directa varn-varn del cromosoma Y (gris
pequeo). Los dems cromosomas se mezclan cuando pasan de una
generacin a la siguiente. Por esta razn, los varones tenemos un cromosoma
Y prcticamente igual al de nuestros padres y abuelos paternos.

Cuando se analizan varios marcadores del cromosoma Y, estos se heredan en

bloque o en conjunto de padres a hijos varones, a lo que se le conoce como
haplotipo[34]. Tambin para el cromosoma Y los marcadores ms utilizados en
identificacin humana son los STRs, ya que presentan un mayor nmero de
alelos en la poblacin, y a su vez una mayor capacidad de discriminar dos
haplotipos y/o varones no-relacionados. Al analizar varios STRs del cromosoma
Y (Y-STRs) en un varn se forma un cdigo que constituye su perfil de ADN
masculino. El anlisis de laboratorio de los Y-STRs es el mismo que para los
STRs no sexuales usados en las pruebas de paternidad normales, es decir
PCR mltiplex y electroforesis capilar. Existen kits comerciales para este
anlisis, donde destacan los kits Powerplex 16 (Promega Corp.) y el Y-filer
(Applied Biosystems) y donde se analizan 12 y 16 Y-STRs, respectivamente
(Figura 13).

Figura 13.
Kit comercial para analizar 16 Y-STRs del cromosoma Y. Se muestran los colores
(fluorocromos) con los que estn marcados los diferentes Y-STRs. Se describe el
rango de tamao de los diferentes alelos de cada Y-STR en pares de bases (pb).

En casos criminales o anlisis forense, el potencial del cromosoma Y recae en

el hecho de que la mayora de crmenes violentos son llevados a cabo por
varones. Adems, permite resolver casos en situaciones forenses particulares,
como violaciones, donde existe una mezcla de ADN de hombre/mujer, ya que
estos marcadores al ser especficos del varn generarn un perfil de ADN
especfico del agresor. Por su parte, en pruebas de paternidad, los Y-STRs
tienen un gran poder de exclusin cuando el hijo en disputa es varn, y
permiten resolver casos donde el supuesto padre no est disponible, ya que
sus parientes varones por lnea paterna (hermanos, tos, abuelo, primos, etc.)
sirven de referencia por tener el mismo haplotipo para el cromosoma Y (Figura
14).

Figura 14
Establecimiento de paternidad mediante Y-STRs en un caso donde el supuesto
padre no est disponible. Se toma como referencia cualquier varn
emparentado va paterna. La exclusin es irrefutable, pero la concordancia
debe confirmarse con STRs no sexuales.

Es importante considerar que los haplotipos del cromosoma Y son compartidos

por todos los parientes va paterna, que constituyen los llamados linajes
paternos y que suelen agruparse dentro de las poblaciones de formas muy
particulares de acuerdo a sus historias. Por consiguiente, es necesario
considerar que en una prueba forense o de paternidad puede existir un nmero
indeterminado de varones con el mismo haplotipo, adems de los parientes por

lnea paterna del sujeto implicado. Por esta razn, aunque los haplotipos Y-STRs
tienen un gran poder de exclusin y esta no necesita ser confirmada, en casos
donde concuerda el SP-H o el sospechoso con la evidencia del crimen, es
conveniente confirmar la relacin biolgica con STRs no-sexuales. La
desventaja ms importante del cromosoma Y en pruebas de paternidad es que
slo sirve en aproximadamente el 50% de los casos, es decir, cuando el hijo en
disputa es varn.

Interpretacin de haplotipos del cromosoma Y en identidad humana

A diferencia de las pruebas de ADN normales donde se considera la frecuencia

de cada uno de los alelos que concuerdan entre SP y H, para el cromosoma Y
que se hereda en bloque, se debe considerar la frecuencia de toda la
combinacin de alelos, es decir, el haplotipo completo. En este sentido, los
estudios en Mexico son ms escasos que los STRs no-sexuales, aunque
recientemente hemos publicado la base de datos de Y-STRs que casi triplicar
las poblaciones hasta ahora estudiadas (Salazar-Flores y cols. 2009). La forma
ms sencilla de comparar la frecuencia de un haplotipo de Y-STRs en un caso
de identidad humana es va internet, ya que los datos antes mencionados se
han ingresado a una base de datos internacional (www.yhrd.org). En esta
pgina se puede ingresar un haplotipo de Y-STRs para que se busque cuantas
veces se ha observado en alguna poblacin seleccionada o en toda la base de
datos, y con esta informacin se procede a estimar el ndice de paternidad (o
en su caso de hermandad va paterna) as como la probabilidad respectiva.

Ejercicios de Control de Calidad

El ms reconocido por su trayectoria desde 1992 e impacto en el mbito

cientfico de poblaciones hispanoamericanas es el GEP-ISFG (www.gep-isfg.org)
o Grupo Espaol-Portugus de la Sociedad Internacional de Gentica Forense
(International Society of Forensic Genetics), que organiza ejercicios de
colaboracin con el objetivo de avanzar en la estandarizacin de los mtodos
empleados por distintos laboratorios para el anlisis de marcadores genticos
para identificacin humana. El ejercicio de control es coordinado por la Unidad
de Garanta de Calidad del Departamento de Madrid del Instituto Nacional de
Toxicologa. En este ejercicio pueden participar todos los laboratorios

interesados del grupo. A cada laboratorio se le asigna un cdigo para

garantizar el anonimato de los resultados. A los laboratorios participantes se
les remiten seis manchas (preferentemente de sangre, pudiendo incluir otro
fluido biolgico) sobre distintos soportes, se les solicita la obtencin de perfiles
de ADN con los marcadores habitualmente utilizados en su laboratorio. En el
ejercicio se incluye una investigacin de paternidad, solicitando a los
laboratorios una valoracin estadstica de resultados y una interpretacin final.
Los resultados se recogen sobre un formulario va internet que incluye detalles
sobre metodologa y resultados obtenidos los cuales deben ser enviados por el
laboratorio en un periodo de tiempo de tres meses desde la recepcin de las
muestras. Se ofrece la posibilidad al laboratorio de enviar resultados para cada
marcador al control de calidad o simplemente como intercambio de resultados
para aquellos nuevos marcadores, en los que se est montando y validando la
tcnica. El centro coordinador elabora un informe con el resumen de la
informacin remitida por los laboratorios, incluyendo metodologas y
resultados. El centro coordinador emite certificados para los laboratorios
participantes, incluyendo los marcadores en los que ha participado y obtenido
un resultado acorde con el consensuado y en los que hay al menos tres
laboratorios que han emitido resultados.

Otra de las instancias que organiza ejercicios de control de calidad es el SLAGF

o Sociedad Latinoamericana de Gentica Forense (www.slagf.org). La mecnica
es similar, se reciben muestras en papel, se procesan para obtener el perfil
gentico con los sistemas genticos del laboratorio, se reportan los perfiles en
un formulario y adems de resuelve un caso terico de paternidad. Si se ha
resuelto adecuadamente el ejercicio se emite una constancia.

Conclusiones

En los ltimos aos el desarrollo de las tcnicas de biologa molecular ha

facilitado enormemente la tarea de identificacin gentica, gracias a sistemas
genticos estandarizados (STRs) que pueden compararse entre laboratorios. A
pesar del desarrollo de nuevas tecnologas para analizar marcadores genticos
de un nucletido (SNPs[35]), suena difcil que desplacen a los STRs de las
cuales se han generado ya bases de datos gigantescas en diferentes pases,
principalmente como auxiliares en la investigacin criminal, por ejemplo
comparando el perfil de ADN de una escena de un crimen con una base de
datos que facilita la labor de buscar sospechosos.

Sin embargo, cabe sealar la importancia de la capacitacin de personal de

laboratorios y los involucrados en la imparticin de justicia, ya que desde mi
punto de vista este es uno de los retos ms importantes en Mxico para lograr
la correcta interpretacin de la prueba de ADN con bases cientficas,
estableciendo perfectamente la responsabilidad tanto de los peritos en
gentica forense como de los jueces. Por ejemplo, en un caso criminal la
funcin del perito no es sealar si los sospechosos son o no culpables, sino
establecer si, por ejemplo, el perfil de ADN de una mancha de sangre
encontrada en la escena del crimen corresponde a la del sospechoso, lo que
indica que ste estuvo all ms no que l sea un criminal. En cambio, al juez le
tocar decir la culpabilidad o inocencia del sospechoso, considerando no solo la
evidencia gentica, sino tambin la informacin no gentica de relevancia, por
ejemplo si conoca o haba amenazado a la vctima, si tiene antecedentes de
violencia, si lo vieron en la zona antes del crimen, etc. En paternidad, aunque
el resultado de la prueba s se relaciona directamente con la resolucin que
dar finalmente el juez, debe considerarse la posibilidad de situaciones
especiales como que el supuesto padre haya recibido un transplante (lo que
cambiara su perfil de ADN), o que el padre biolgico estuviera relacionado con
l supuesto padre, lo que incrementara la posibilidad de coincidencia.
Finalmente, esto nos llevar a concluir que las pruebas de ADN actualmente son
tcnicamente confiables y relativamente fciles de realizar, nuestro mayor reto
ahora es que el pblico y el personal de laboratorio y de justicia la entienda
correctamente, para lo cual se realz este trabajo.

Literaturas Recomendadas

Butler JM. (2005). Forensic DNA typing. Elsevier Academic Press, Burlington,
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Ma. Begoa Martnez Jarreta (1999). La prueba del ADN en Medicina Forense.,
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Estudios Poblacionales para la interpretacin de la Prueba de ADN en Mxico

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[1] El Dr. Hctor Rangel es Bilogo, Maestro y Doctor en Gentica Humana
egresado de la Universidad de Gudalajara (UdeG); adems de ser asesor
cientfico de DNA Profile SC, es profesor-investigador titular del CUCienegaUdeG, donde dirige el Instituto de Investigacin en Gentica Molecular en
Ocotln, Jalisco. Es miembro del Sistema Nacional de Investigadores (SNICONACyT), del Grupo Espaol-Portuges de la International Society of Forensic
Genetics (GEP-ISFG), y de la misma ISFG, de la Sociedad Latinoamericana de
Gentica Forense (SLAGF), y de la Asociacin Mexicana de Gentica Humana
(AMGH) .

Es autor de varios captulos en libros y artculos de divulgacin cientfica

relacionados con la prueba de ADN y la aplicacin de marcadores moleculares
para estudios en la poblacin mexicana, los cuales estn publicados en
artculos cientficos. Ha dirigido y/o asesorado varias tesis de licenciatura,
maestra y doctorado en el rea de Ciencias de la Salud, y ha participado como
ponente o conferencista en docenas de eventos cientficos relacionados con la
gentica desde 1997. Ha recibido varias distinciones, entre las que destacan:
mencin honorfica en tesis de maestra (1998), presea al mrito acadmico en
el rea de Ciencia e Investigacin por el STAUdeG (2002), dos veces 1er lugar y
una vez segundo del premio HECTOR MARQUEZ MONTER al mejor trabajo de
investigacin por la Asociacin Mexicana de Gentica Humana (1999, 2004 y
2008), nombrado Bilogo Destacado por los Bilogos Colegiados de Jalisco
(2005). Fue asesor del trabajo que obtuvo el Premio Chihuahua 2006 en
Ciencias Biolgicas, y ganador de un Premio Nacional del INAH (2007) por su
trabajo de divulgacin indito en Antropologa Molecular.

[2] ADN: cido desoxirribonucleico, tambin conocido como DNA por sus siglas
en ingls.

[3] Gemelos monocigotos: Aquellos hermanos que provienen del mismo cigoto.

[4] Nucletido: Unidad fundamental del ADN, formado por la azcar ribosa, un
fosfato y una base nitrogenada: Adenina (A), Guanina (G) Citosina (C) o Timina
(T).

[5] Protena: Cadena de aminocidos unidos por enlaces pptidicos, por lo que
se denominan tambin polipptidos, que desarrollan la mayora de funciones
celulares.

[6] Genoma: Dotacin gentica completa que caracteriza a un individuo o una

especie

[7] Gen: Fragmento de ADN con informacin para codificar una protena.

[8] Alelo: Forma alterna de una secuencia o fragmento de ADN

[9] Marcador gentico-molecular: Secuencia de ADN variable que presenta ms

de un alelo en la poblacin, y que permite diferenciar el genoma materno del
paterno en un individuo, como diferenciar individuos entre s

[10] Genotipo: Combinacin de alelos de un individuo para un gen o secuencia

de ADN especifica

[11] Marcador STR: Del ingls, short tandem repeats, cuya variabilidad se basa
en el nmero de veces que se repite una secuencia corta (p. ejem. GATA); los
alelos suelen definirse por el nmero de repeticiones

[12] heterocigoto: Individuo que presenta un genotipo con un par de alelos

diferentes para cierta secuencia de ADN (gen o marcador gentico)

[13] homocigoto: Individuo que presenta un solo alelo en cierta secuencia de

ADN (gen o marcador gentico). Presumiblemente ambos padres le heredaron
el mismo alelo

[14] Perfil de ADN: Conjunto de genotipos de un individuo para varios STRs

[15] PCR: siglas en ingls de Reaccin en cadena de la polimerasa, tcnica

para replicar in vitro alguna secuencia de inters en el ADN, que genera
millones de copias (amplifica) de sta

[16] Primers: Pequeas secuencias de nucletidos usadas en la PCR para

delimitar la regin que se quiere amplificar; su extremo 3 es usado por la Taq
polimerasa para aadir nucletidos

[17] Taq polimerasa: Enzima termoestable capaz de aadir nucletidos al

extremo de un primer para sintetizar una nueva cadena; fue extrada de la
bacteria Thermus aquaticus, de donde deriva su nombre.

[18] Electroforesis: Separacin de una molcula en un medio de soporte por

accin de un campo elctrico, en base a su carga, peso molecular y forma.

[19] Escalera allica: Fragmentos de ADN que contienen todos o la mayora de

alelos de uno o varios STRs de un sistema gentico, los cuales sirven de
referencia para definir por comparacin el alelo del individuo.

[20] Electroforesis Capilar (EC): Mtodo de electroforesis a travs de un tubo

del tamao de un capilar relleno de polmero. Permite aplicar mayores voltajes,
separar ms rpido la molcula, y detectar la fluorescencia de ADN marcado
con un fluorforo de forma automtica.

[21] Kit o sistema gentico: Conjunto de marcadores genticos (STRs) que

pueden ser analizados simultneamente, por ejemplo por PCR multiplex y
electroforesis capilar

[22] Amelogenina: Marcador que define en el perfil gentico si el individuo es

hombre (XY) o mujer (XX)

[23] Fluorocromo: Molcula capaz de emitir fluorescencia despus de un

perodo de excitacin

[24] Electroferograma: Grfica cuyos picos que representan fragmentos de

ADN amplificados (STRs) marcados con fluorocromos y como fueron migrando
a travs del capilar, determinando as su tamao (pb) y la fluorescencia que
emiten (color).

[25] Exclusin de Paternidad: Cuando no concuerda ningn alelo entre

supuesto padre e hijo; o cuando el alelo que le heredo el padre biolgico al hijo
en disputa no se encuentra presente en el supuesto padre. Lo anterior para
uno o ms marcadores genticos, aunque en un caso real se requiere que dos
marcadores excluyan la paternidad.

[26] FBI, siglas de Federal Boreau Investigation

[27] CODIS, siglas de Combined DNA Index System, que es un conjunto de

STRs sugerido para identificacin humana, con el fin de crear bases de datos
de perfiles genticos que permitan intercambiar informacin de inters para la
imparticin de justicia, etc. (crmenes violentos, crmenes contra la libertad
sexual, identificacin de militares, entre otros.)

[28] Exclusin de segundo orden, aquella exclusin donde SP y H son

homocigotos para alelos diferentes, lo que abre la posibilidad de que en
realidad compartan un alelo invisible, denominado alelo nulo.

[29] Mutacin, Cambio en el material gentico, en paternidad estas mutaciones

se dan en los gametos (espermatozoides u vulos) que darn origen a una
falsa exclusin entre el padre biolgico y el hijo.

[30] AABB, American Association of Blood Banks.

[31] Poder de Exclusin, probabilidad que ofrece un marcador para excluir a un

SP falsamente implicado en una prueba de paternidad (es decir, se sabe que el
no es el padre)

[32] Cromosoma, forma compactada del material gentico que se forma

cuando la clula se va a dividir, ya sea para formar ms clulas del cuerpo
(mitosis) o clulas reproductivas (espermatozoides u vulos).

[33] Meiosis, divisin celular mediante la cual se forman clulas reproductivas

con la mitad de la carga gentica normal (doble o diploide)

[34] Haplotipo, combinacin de material gentico que se hereda de padres a

hijos en bloque o en conjunto, para el cromosoma Y refiere a los alelos
obtenidos con varios marcadores STRs

[35] SNPs, polimorfismos de un nucletido (i.e. AG), del ingls Single

nucleotide polymorphisms.

*********************vvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvv
Conceptos bsicos sobre el estudio de paternidad

Basic concepts about paternity testing

Marcela Lagos L.1, Helena Poggi M.1,a, Cecilia Mellado S.2

1Departamento de Laboratorios Clnicos. 2Departamento de Pediatra. Facultad

de Medicina, Pontificia Universidad Catlica de Chile. Santiago de Chile.
aBioqumica.

Direccin para correspondencia

Nowadays, the analysis of genetic markers is a very important and validated

tool for the identification of individuals, and for paternity testing. To do so,
highly variable regions of the human genome are analyzed, making it possible
to obtain the genetic profle of an individual, and to distinguish between
different individuals. The methodology used is basically the same all over the
world, consisting in the analysis of 13 to 15 markers. To assign biological
paternity the child must have inherited the characteristics from the alleged
father in each of the genetic markers analyzed. This analysis achieves a
certainty higher than with any other test, which is expressed as the probability
of paternity. This probability has to be at least 99.9%, but greater probabilities
are usually obtained, especially if the mother is included in the analysis. If the
characteristics of two or more genetic markers from the alleged father are
absent in the child, biological paternity is excluded.

Key words: forensic genetics; Genetic testing; Paternity.

RESUMEN

El anlisis de marcadores genticos se ha convertido en una herramienta muy

importante y ampliamente reconocida para la identificacin de individuos y
para el estudio de paternidad. Para esto se estudian distintas regiones del
genoma humano que son altamente variables en la poblacin y que permiten
obtener el perfil gentico y distinguir entre distintos individuos. La metodologa
que se utiliza es bsicamente la misma en todo el mundo y consiste en el
anlisis de entre 13 a 15 marcadores. La paternidad biolgica se asigna cuando
el hijo/a presenta las caractersticas que debe heredar del presunto padre en
cada uno de los marcadores genticos estudiados. A travs de este anlisis es
posible asignar paternidad con un grado de certeza ms alto que con cualquier
otro sistema, el que se expresa como probabilidad de paternidad. Esta
probabilidad debe alcanzar al menos 99,9%. Sin embargo, es posible obtener
probabilidades mucho ms altas, sobre todo si se incluye a la madre en el
estudio. Si las caractersticas genticas del supuesto padre estn ausentes en
el hijo/a en al menos dos marcadores, se excluye la paternidad biolgica.

DE LA VIDA REAL

Un hombre de 30 aos, soltero, tiene dudas sobre la paternidad de un menor

de 3 aos y se realiza estudio de paternidad. En el informe de resultados se

indican las fechas de toma de muestra, los datos personales, los distintos
marcadores genticos estudiados y los alelos presentes en el hijo y en el padre.
En la conclusin del estudio se indica que la probabilidad de paternidad es de
99,89%. El estudio no incluye a la madre, quien no quiso tomarse muestra de
sangre, pero autoriz el estudio del nio, ya que no est reconocido por el
padre. Madre y padre le consultan por la interpretacin de estos resultados y el
grado de certeza del examen.

Con qu grado de certeza se puede asignar paternidad y cmo se expresa?

Es importante incluir a la madre en un estudio de paternidad?

Un problema antiguo con soluciones nuevas

Desde los tiempos del Imperio Romano hay registros sobre disputas por la
paternidad, con fines del pago de alimentos o de herencia, pero tambin con el
slo fin de que sta sea reconocida. Sin embargo, existan difcultades
importantes para probar la paternidad, ya que "las pruebas" se basaban
principalmente en el parecido fsico. La posibilidad de asignar o excluir
paternidad era tan incierta que, por ejemplo, en francia a comienzos del siglo
XIX se prohibieron las demandas por paternidad, basndose en el principio de
pater semper incertus1. En la primera mitad del siglo XX hubo avances
importantes, dado que fue posible contar con herramientas objetivas como la
determinacin de los grupos sanguneos que permitan excluir paternidad
claramente, pero asignar paternidad con altos niveles de certeza aun segua
siendo un desafo. Recin en los ltimos 20 aos se produjeron los avances
tecnolgicos que han tenido el mayor impacto en el estudio de paternidad
gracias a la identificacin de individuos basada en el anlisis de determinadas
regiones del ADN.

El perfil gentico

como organismos diploides que somos, todos los seres humanos poseemos dos
sets de informacin gentica, uno heredado del padre y otro de la madre, por
lo tanto, la informacin gentica del padre biolgico debe estar presente en el
hijo. Esta informacin est contenida en los cromosomas y su ADN, y tiene una
alta homologa entre individuos (99,9%). Sin embargo, hay regiones (0,1%) que
son altamente variables y que nos diferencian de otros individuos, sobre cuya
base es posible obtener el perfil gentico de un individuo2. a la variante
heredada de uno o el otro progenitor se le denomina alelo materno o paterno.

La identificacin de individuos basada en el estudio de ADN se puede realizar a

partir de prcticamente cualquier muestra biolgica: sangre, mucosa bucal,
pelo, orina, dientes o incluso de material biolgico degradado. Es por eso que
este anlisis no slo es til para el estudio de paternidad/maternidad y otros
parentescos3, sino que tambin se utiliza en estudios forenses, en
investigaciones histricas y estudios antropolgicos, as como tambin se
aplica en otras reas de la medicina como el anlisis de quimerismo post
trasplante de mdula sea4.

Qu regiones del genoma se estudian y cmo?

Las regiones variables o polimrficas que se utilizan actualmente para

identificacin humana son secuencias cortas repetidas en tndem o STR (Short
Tandem Repeats). Las secuencias utilizadas se componen de unidades que
contienen cada una 4 a 5 pares de bases nucleotdicas (por ejemplo, acag) y lo
que vara es el nmero de veces que estas unidades se repiten en cada
individuo5. En el ejemplo de la figura 1, el hijo hereda de la madre un alelo con
15 repeticiones, lo que implica que del padre recibi el alelo con 18
repeticiones; a este alelo que necesariamente se hereda del padre dado que se
conoce el alelo de la madre, se le llama alelo paterno obligado. aunque estas
regiones son polimrfcas, el nmero de repeticiones de un determinado STR no
es nico de un individuo, es decir, el alelo paterno obligado del hijo/a puede
coincidir por azar con uno de los alelos del supuesto padre, por lo que es
necesario estudiar varios STR conjuntamente.

La metodologa que se utiliza es bsicamente la misma en todo el mundo y

consiste en el anlisis de entre 13 a 15 STR distribuidos en su mayora en
distintos cromosomas, as como un STR adicional para identificar el sexo6
(Tabla 1). Todas estas regiones se analizan simultneamente, utilizando una
metodologa llamada reaccin en cadena de la polimerasa o PcR (Polymerase
Chain Reaction), con la que se obtienen millones de copias de cada regin. Esto
permite el anlisis de cantidades muy pequeas de ADN, lo que es
especialmente importante en las investigaciones forenses. Los productos de la
PcR, que varan en el tamao de acuerdo al nmero de repeticiones que cada
individuo tenga, se separan por electroforesis capilar y se detectan por
fuorescencia. finalmente, se obtiene el nmero de repeticiones que presentan
el presunto padre, la madre y el hijo/a para cada uno de los STR estudiados.

Con qu certeza se excluye o asigna paternidad?

Una vez que se han comparado los perfiles del hijo/a con los del supuesto
padre y hay dos o ms STR en que no se observan alelos que tengan el mismo
nmero de repeticiones, se excluye la paternidad y no se requiere realizar
ningn clculo probabilstico. En Chile, al igual que en otros pases, se exige
que la exclusin de paternidad se demuestre en al menos dos marcadores7,
aunque por lo general, es posible excluir la paternidad en base a ms
marcadores. En el ejemplo de la Tabla 2, que no incluye a la madre, hay 6 STR
en que el hijo/a no presenta alelos del supuesto padre, lo que excluye la
paternidad. En los otros STR, los supuestos padre e hijo/a comparten alelos con
el mismo nmero de repeticiones por azar.

El hecho que no se excluya paternidad en base a slo un marcador, se debe a

que existe la posibilidad de que, de una generacin a otra, ocurran cambios o
mutaciones en el ADN que afecten los resultados en ese marcador. como
consecuencia, es posible que el padre presente un alelo que no se observe en
el hijo, aun siendo el padre biolgico. Estas mutaciones son poco frecuentes y
los laboratorios que realizan este examen tienen como norma confirmar los
resultados con un segundo anlisis cuando esto sucede.

En el ejemplo de la Tabla 3, el hijo/a presenta en todos los STR un alelo

heredado de la madre y el otro del presunto padre, por lo que se asigna
paternidad. La certeza, sin embargo, no es de 100%, dado que tericamente no
se puede excluir la posibilidad que otro sujeto en la poblacin posea el mismo
perfil gentico para los STR estudiados.

Para estimar el grado de certeza con que se asigna la paternidad es necesario

contrastar la probabilidad que los alelos presentes en el hijo provengan del
presunto padre versus la probabilidad que los haya recibido de cualquier otro
individuo en la poblacin. De acuerdo a eso, se calcula la razn entre ambas
probabilidades, denominada ndice de paternidad (IP), que expresa cuantas
veces es ms probable que el presunto padre sea el padre biolgico a que lo
sea cualquier otro sujeto en la poblacin. El IP se modificar principalmente en
funcin de la frecuencia con que se observen los alelos heredados del padre en
la poblacin general; a menor frecuencia allica, mayor el IP y mayor la
probabilidad de que sea el padre biolgico. En el ejemplo de la Tabla 3, el IP en
el STR D8S1179 es de 4,26, es decir, es 4,26 veces ms probable que el
supuesto padre sea el padre biolgico respecto a que lo sea otro sujeto de la
poblacin elegido al azar. En cambio, para el STR TPOX el IP alcanza slo 1,06
ya que en este caso el alelo heredado del padre es ms frecuente en la
poblacin.

Dado que los STR incluidos en un estudio de paternidad se heredan en forma

independiente, es posible calcular la probabilidad para todos los STR en
conjunto, multiplicando los IP obtenidos para cada STR (IP combinado). a partir
del IP combinado, se calcula la probabilidad de paternidad (PP) segn la
frmula: PP = IP/IP+1. Por lo tanto, la PP se acercar a 100%, en la medida que
el IP combinado sea ms alto.

Es necesario que se estudie a la madre?

aunque se podra asumir que en un estudio de paternidad no es necesario

incluir a la madre, la posibilidad de identificar con certeza el alelo heredado de
la madre permite definir el alelo paterno obligado y alcanzar IP ms altos y
probabilidades de paternidad tambin ms altas y, por lo tanto, ms seguras.
cuando no se estudia a la madre, se deben utilizar frmulas que, comparadas
con la que se aplica para casos con la madre, disminuyen el IP combinado y la
PP8. En el ejemplo de la Tabla 3, el estudio incluye a la madre, con lo que se
obtiene un IP combinado de 4.018.051 y una PP de 99,9999%. En cambio, si en
el mismo caso la madre no se estudia, el IP disminuye a 939 (4.000 veces
menor) y la probabilidad de paternidad a 99,89%. De acuerdo a la normativa
emitida por el Servicio Mdico Legal el ao 2000, la paternidad biolgica se
considera acreditada cuando la probabilidad de paternidad es mayor al
99,9%7.

En casos de exclusin de paternidad, el incluir a la madre tambin hace ms

seguro el estudio de paternidad, porque permite tomar en cuenta slo el alelo
paterno obligado para definir si hay exclusin de paternidad. En cambio, si slo

se estudian supuestos padre e hijo/a, los dos alelos del hijo/a debern estar
ausentes en el supuesto padre para que se pueda excluir paternidad; por lo
tanto, se encontrarn menos STR que permitan excluir la paternidad que en un
caso en que se estudie tambin a la madre. En el ejemplo de la Tabla 2, el
nmero de STR que excluye paternidad aumenta de 6 a 9 marcadores, si se
incluye a la madre en el estudio. Esto adquiere especial relevancia, si hay
parentesco entre dos presuntos padres.

Calidad, aspectos ticos y legales

La fuerza legal de la prueba de ADN para el estudio de paternidad est

ampliamente aceptada en Chile, lo que se refleja en las modificaciones
introducidas ya en el ao 2000 a nuestra ley de fliacin9.

En nuestro pas es posible acceder a realizarse el estudio de paternidad en

forma privada o por solicitud de un juez. Para los estudios realizados en forma
privada existen aun algunas interrogantes, por ejemplo, respecto a que en
algunos laboratorios sea posible que un hombre, an no siendo el padre legal
de un nio/a menor de edad, pueda acceder a un estudio de paternidad sin el
conocimiento y consentimiento de la madre o tutor legal.

Los estudios solicitados a travs de un tribunal se realizan en el Servicio

Mdico Legal y tambin en laboratorios privados, si los involucrados asumen
los costos del examen. Sin embargo, para que estos resultados tengan validez
legal, los laboratorios deben estar habilitados por el Servicio Mdico Legal de
Chile y cumplir con las exigencias de la normativa emitida por este Servicio7.

Dada la implicancia que tiene un estudio de paternidad en la vida de un ser

humano, es importante que los laboratorios donde se realicen estudios de
paternidad, tengan stos validez legal o no, estn inmersos en un sistema de
aseguramiento de la calidad, incluyendo aspectos como confdencialidad,
cadena de custodia, control de calidad, entre otros.

Cierre del caso

En el caso presentado, la probabilidad de paternidad es de 99,89%, lo que

corresponde a una paternidad biolgica altamente probable, pero no alcanza el
mnimo aceptado para paternidad biolgica acreditada (> 99,9%), de acuerdo a
la normativa vigente en Chile y a lo aceptado por los tribunales de familia de

nuestro pas. al no estudiar a la madre, estando ella disponible, se le rest

fuerza estadstica al estudio, por lo que se debera recomendar que se le
incluyera para as alcanzar una probabilidad > 99,9%. Otro antecedente a
considerar es que los estudios de paternidad sin la madre (dos) tienen un
costo similar a los que la incluyen (tros). Si en cualquier caso existen dudas
sobre la probabilidad de paternidad, es posible estudiar marcadores genticos
adicionales.
Hhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh
La prueba de paternidad es el anlisis de ADN que permite determinar el
vnculo gentico entre un individuo y su progenitor masculino.

El ser humano, al tener reproduccin sexual, hereda una copia de la

informacin gentica de la madre y otra del padre. La prueba de paternidad
gentica se basa en comparar la informacin gentica de ambos.

La prueba de anlisis de ADN tiene alta confiabilidad pero carece de certeza. La

probabilidad de certeza se relaciona con la probabilidad estadstica de que dos
personas tengan las mismas huellas de ADN, como sucede, por ejemplo, en los
gemelos univitelinos. La seguridad depende de cuantos marcadores se
comparen y eso vara segn el caso y lo que se quiere buscar o probar.
Tambin depende de cun frecuentes sean esos mismos marcadores en la
poblacin estudiada.

En caso de no estar disponible el presunto padre es posible obtener un ndice

de paternidad utilizando muestras de los abuelos paternos.

Para determinar estadsticamente la exactitud de la prueba, se calculan los

siguientes parmetros:

ndice de Paternidad (IP): El IP nos indica cuntas veces es ms probable que el

hijo tenga el material gentico procedente del Presunto Padre que tomndolo al
azar entre los otros individuos de su misma poblacin.
Probabilidad de paternidad (W): La probabilidad de paternidad (W) es la
probabilidad de certeza de nuestra prueba de ADN expresada en porcentajes,
es decir, es la probabilidad de que individuo determinado sea hijo de otro,
partiendo de una probabilidad a priori igual para todos los varones de la
poblacin.
Prueba de paternidad/maternidad TRO: Ambos progenitores e hijo/hija

Es el caso ms sencillo dentro de las pruebas de paternidad/maternidad, y para

el que los distintos marcadores presentan una mayor probabilidad de exclusin
a priori, ya que es el caso en el que ms informacin tenemos.

Se trata de calcular la probabilidad de que los progenitores hayan tenido un

hijo o hija con ese determinado genotipo, calculando los casos favorables y
dividindolos por el nmero de combinaciones posibles.

Prueba de paternidad/maternidad DO: En ausencia de uno de los progenitores

En este caso, el enfoque ms prctico es calcular el ndice de

paternidad/maternidad asumiendo que el progenitor no disponible no se pone
en duda.

Prueba de paternidad/maternidad indirecta a partir de abuelos

paternos/maternos

Cuando no se dispone de muestras de uno de los progenitores es posible hacer

la prueba de paternidad/maternidad utilizando los perfiles genticos de los
abuelos paternos/maternos, adems del perfil del progenitor disponible. El
clculo estadstico permite obtener un ndice de exactitud equiparable a la
prueba de paternidad/maternidad estndar.

Prueba de paternidad/maternidad post-mortem

Est prueba puede implicar la exhumacin de restos del presunto padre/madre.

Se utilizan preferentemente huesos largos o piezas dentales para la
determinacin del perfil gentico.

Dado que el proceso de exhumacin puede ser largo y costoso, le

recomendamos nos consulte para hacer una valoracin y ver otras
posibilidades de realizar la prueba
Ggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggggg
Gentica Forense

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Con la denominacin de gentica forense se define el uso de ciertas tcnicas

empleadas en gentica para la identificacin de los individuos en base al
anlisis del ADN. El hecho de utilizar el anlisis de ADN para identificar a una
persona sigue un razonamiento sencillo. Cada ser humano es diferente; dos
personas pueden ser ms o menos parecidas, sobre todo entre familiares
cercanos, pero nunca son idnticos, salvo en el caso de los gemelos
univitelinos. Esta diferenciacin entre las personas se debe a que existen
millones de combinaciones posibles de ADN entre un vulo y un
espermatozoide, debido a la recombinacin gentica que se produce en la
meiosis. Pero a pesar de ello, los genes de todos los seres humanos son poco
variables y constituyen un gran porcentaje de la informacin contenida en la
molcula de ADN; la informacin restante, incluye sectores que pueden exhibir
un cierto grado de variabilidad entre los individuos, en consecuencia: todos
los seres humanos tenemos sectores del ADN en comn y otros que no lo son.
El llamado Anlisis de ADN es un conjunto de tcnicas utilizadas para detectar
sectores en la cadena de ADN que son variables en la poblacin. Estas regiones
son denominadas regiones polimrficas o polimorfismos. El trmino
polimorfismo expresa la variabilidad que existe dentro de un fragmento de
ADN, es decir, el nmero de alelos que hay en un locus. Como regla general
cuantos ms alelos haya, mayor polimorfismo, y por tanto mayor poder de
identificacin. Al analizar un determinado nmero de regiones polimrficas la
probabilidad de que dos individuos sean genticamente iguales es
prcticamente nula, excepto en los gemelos univitelinos.
ndice [ocultar]
1

Origen

Marcadores genticos que se usan en gentica forense

Tipos de ADN en los que se estudian los marcadores genticos

3.1

ADN nuclear

3.2

ADN mitocondrial

3.3

Polimorfismos del cromosoma Y

Tcnicas para analizar los polimorfismos del ADN extrado

Individualizacin de las muestras biolgicas

Criminalstica

6.1

Muestras dubitadas e indubitadas

Anlisis de muestras biolgicas

Exclusin e inclusin

Investigacin de la paternidad

10

La probabilidad de paternidad

11

ndice de paternidad

12

Identificacin de restos cadavricos

13

Catstrofes masivas

14

Bases de datos

15

Bibliografa

Origen[editar]
La gentica forense no surge como tal, sino que evoluciona a partir de otra
rama conocida como hemogentica forense; nace a principios del siglo XX,
cuando Karl Landsteiner describe el sistema ABO de los hemates y Von Durgen
y Hirschfeld descubren su transmisin hereditaria. El objetivo de esta ciencia
era la identificacin gentica en crmenes y casos de paternidad. Inicialmente,
las investigaciones se centraban en el estudio de antgenos eritrocitarios
(sistema ABO, Rh, MN), protenas sricas y enzimas eritrocitarias. Con el
estudio de dichos marcadores poda incluirse o excluirse una persona como
posible sospechoso por poseer una combinacin gentica igual o diferente a la
del vestigio biolgico hallado en el lugar de los hechos.
Pero fue a mediados de siglo cuando gracias al descubrimiento del ADN y de su
estructura y al posterior avance en las tcnicas de anlisis de dicha molcula la
Hemogentica Forense evolucion considerablemente hasta el punto de que
hoy en da puede hablarse de una nueva subespecialidad dentro de la Medicina
Forense: la Gentica Forense, puesto que en la actualidad no solo se emplean
marcadores sanguneos sino tambin muchos otros. Aunque la ciencia posea
las herramientas necesarias para el estudio del ADN, su aplicacin en la
resolucin de casos judiciales no se produjo hasta 1985.
Esta subespecialidad se centra bsicamente en tres reas:
Investigacin de la paternidad: Impugnacin por parte del supuesto padre o
reclamacin por parte de la madre y/o del hijo.
Criminalstica: Asesinato y delitos sexuales (violacin sexual). Se analizan
restos orgnicos humanos (sangre, pelo, saliva, esperma, piel).

Identificacin: Restos cadavricos (por ejemplo, los restos del zar Nicols II de
Rusia y su familia) o personas desaparecidas (como sucedi en Argentina con
los nios desaparecidos durante la dictadura militar).
Marcadores genticos que se usan en gentica forense[editar]
Los marcadores genticos que se utilizan actualmente estn constituidos por
regiones de ADN repetitivo que presentan una gran variabilidad de tamao
entre los distintos individuos de una poblacin. Estas regiones como ya hemos
dicho, se conocen con el nombre de regiones polimrficas. El principio bsico
de estos polimorfismos genticos de estas regiones reside en la variacin del
nmero de veces que se repite en tndem una secuencia determinada (una
repeticin en tndem es una secuencia corta de ADN que se repite
consecutivamente, en un locus especfico). Segn esto se clasifican en:
VNTR (acrnimo ingls: Variable Number of Tandem Repeats: nmero variable
de repeticiones en tndem). Son locus cuyos alelos difieren por tener un
nmero variable de repeticiones en tndem. Un ejemplo de VNTR en humanos
es una secuencia de ADN de 17 pb que se repite entre 70 y 450 veces en el
genoma. El nmero total de pares de bases en ese locus puede as variar entre
1190 y 7650. Ventajas de estos polimorfismos:
Son muy variables en la poblacin: los perfiles de ADN varan de una persona a
otra, por tanto podemos afirmar que no existen dos personas con el mismo
nmero de repeticiones en tndem. Cuando se comparan los perfiles de un solo
locus VNTR para individuos no relacionados entre s, habitualmente son
diferentes. No obstante, es posible que dos personas tengan el mismo perfil en
uno o dos loci por casualidad. Sin embargo, la probabilidad de que dos
personas tengan el mismo perfil de ADN en 4, 5 o 6 loci VNTR diferentes es
extremadamente baja. Cuando se usan los perfiles de ADN con fines medicolegales, se analizan de 4 a 6 loci VNTR diferentes.
El nmero de repeticiones es heredable. Dado que recibimos un cromosoma de
cada tipo del padre y otro de la madre, tendremos un nmero de repeticiones
proveniente de ste y otro de sta. En forma de esquema, consideremos los
individuos A y B. Supongamos que existen dos hipotticos VNTR, uno de ellos
en una cierta regin del cromosoma 6 y otro en el 15.
Existen dos tipos de polimorfismos de repeticin de uso en diagnstico
gentico, los VNTR-minisatlites y los VNTR-microsatlites.
Los VNTR-minisatlites o MVR (minisatellite variant repeats) son loci que
corresponden a secuencias de ADN de unas pocas decenas de nucletidos
(sobre 30 pares de bases) repetidas en tndem. El nmero de dichas
repeticiones vara de cromosoma a cromosoma. La singularidad ms especial
de este tipo de polimorfismos est en que cada loci puede presentar muchos
alelos distintos (tantos como repeticiones), sin embargo presentan el
inconveniente que no estn distribuidos por todo el genoma y por lo tanto solo
pueden ser utilizados en el diagnstico de un nmero muy reducido de casos.
Los VNTR-minisatlites han encontrado su mxima aplicacin en la

determinacin de la paternidad y en los protocolos de identificacin gentica

en el mbito judicial. Cuando se habla de huellas dactilares del ADN se est
hablando de este tipo de polimorfismo.
Los VNTR-microsatlites o STR (short tandem repeats) Corresponden a la
repeticin en tndem de secuencias de entre 2 y 5 nucletidos. Los
microsatlites presentan dos caractersticas que los hacen ideales para su uso.
En primer lugar, estn distribuidos de forma casi homognea por todo el
genoma y en segundo lugar, presentan un nmero elevado de alelos con
frecuencias similares entre s, de forma que la probabilidad de que un individuo
sea heterocigoto es muy elevada (presentan una alta heterocigosidad).
Estas regiones hipervariables pertenecen al denominado ADN no codificante
son regiones no conservadas y por tanto no sujetas a una presin selectiva
intensa, originando un gran nmero de variantes, que son los que
denominamos alelos. Estas zonas llamadas polimrficas son las que nos
interesan en gentica forense para poder diferenciar unas muestras de otras.
Por tanto, no es interesante analizar la molcula de ADN completa,
principalmente por dos razones:
Se tardara mucho tiempo y
La mayor parte de la molcula es comn en todos los humanos y no se podran
distinguir.
Tipos de ADN en los que se estudian los marcadores genticos[editar]
ADN nuclear[editar]
Siempre que sea posible se realizar el anlisis de polimorfismos de este ADN,
pues son los que ms informacin nos darn en cuanto a la identidad de la
muestra. Se encuentra en el ncleo, y se hereda mitad de la madre y mitad del
padre, con excepcin del ADN presente en el cromosoma Y masculino, que slo
se hereda por lnea paterna.
Las caractersticas ms importantes del ADN nuclear para identificacin
humana son:
Es nico para cada persona, excepto en el caso de los gemelos univitelinos.
Permite establecer relaciones entre hermanos, primos, abuelos nietos, y otro
grados de parentesco, porque como veremos, otros tipos de ADN slo nos
permitirn establecer relaciones de paternidad (cromosoma Y) y de maternidad
(ADN mitocondrial).
Sirve para determinar el sexo de la persona de la que proviene una muestra
porque se puede establecer la presencia de XX o XY en el par 23.
Posee un enorme potencial de estudio, por la gran cantidad de ADN no
codificante y las regiones tipo STR y SNP.

Uno de los fragmentos de ADN nuclear ms estudiados es la amelogenina. Se

trata de un marcador muy til porque nos informa sobre el sexo del individuo al
que pertenece la muestra.
La amelogenina es un locus localizado en una regin homloga de los
cromosomas sexuales. Existe una diferencia de 6 pares de bases entre el
tamao del alelo presente en el cromosoma X y el Y, que se debe a una
pequea delecin en el cromosoma X. El resultado de la amplificacin por PCR
de este locus en un ADN femenino (XX) ser de una nica banda, mientras que
si el ADN es masculino (XY), el resultado sern dos bandas de distinto tamao.
No obstante, hay que tener en cuenta que, aunque ocurre con muy baja
frecuencia, se ha detectado la existencia de deleciones en esta regin del
cromosoma Y, de tal forma que una muestra masculina podra asignarse
errneamente como femenina. En este caso, el anlisis de marcadores
especficos del cromosoma Y permitiran una correcta asignacin del sexo. El
inconveniente que presenta el estudio de marcadores concretos del
cromosoma Y, es que se heredan sin cambios significativos en una misma
familia de padre a hijo, de modo que nos permiten identificar a un varn de la
familia pero tendremos que estudiar otros marcadores para distinguir entre
abuelo, padre, hijo, etc.
Despus de una extraccin de ADN en muestras que se encuentran en muy
mal estado de conservacin, se obtienen fragmentos de slo 100-200
nucletidos debido a su estado de degradacin (rotura), con el agravante de
que muchas veces estas muestras van acompaadas de ADN bacteriano. Por el
contrario las muestras de tejido fresco proporcionan fragmentos de ADN de
ms de 10.000 nucletidos.
Pero existen situaciones en las que es recomendable el anlisis de otros tipos
de polimorfismos como son los polimorfismos de ADN mitocondrial y
polimorfismos ligados al cromosoma Y.
ADN mitocondrial[editar]
Existen numerosas mitocondrias en cada clula (entre 250 y 1000 segn el tipo
celular, las necesidades metablicas y el tipo funcional) y varias copias de ADN
mitocondrial en cada mitocondria, es decir, existen mayor cantidad de copias
de ADNmt que de ADN nuclear por clula, de forma que hay una sola copia de
ADN nuclear en una clula mientras que puede haber miles de copias de
ADNmt. Este hecho hace que en muestras forenses muy crticas (con escasa
cantidad de ADN o con ADN en mal estado) tenga ms xito el anlisis de
ANDmt que el de ADN nuclear. Sin embargo, el ADNmt presenta una
peculiaridad, se hereda nica e ntegramente de la madre, sin que exista
ninguna combinacin con el material del padre. Por este motivo se dice que es
un genoma haploide.
La causa de que no exista mezcla con el material del padre es la siguiente: las
mitocondrias del espermatozoide se localizan en el cuello (entre la cabeza y la
cola), con el fin de aportar la energa que esta clula necesita para mover la

cola y desplazarse en busca del vulo. Al producirse la fecundacin solo

penetra en la clula femenina la cabeza del espermatozoide (con el ADN
nuclear) quedando fuera la cola y el cuello, y con l todas las mitocondrias.
Esto hace que el padre no aporte dicho material a su descendencia.
Las caractersticas bsicas que lo hacen til en investigacin forense y
antropolgica son:
El elevado nmero de copias por clula que hace alguna de ellas resista las
condiciones adversas sin ser degradada.
Su pequeo tamao. Esto facilita la conservacin en el tiempo a pesar de que
las condiciones no sean apropiadas: al ser ms pequeo que el ADN nuclear la
probabilidad de verse afectado es menor.
Estas 2 caractersticas garantizan las estabilidad postmortal y una mayor
resistencia que el nuclear.
Pero tambin tiene desventajas o puntos dbiles como:
No es especfico de cada persona, sino que se asocia a todas las personas que
proceden de la misma madre, abuela materna, etc.
Slo es til cuando se trata de hacer estudios por va materna, de modo que
permite identificar a cualquier persona (hombre o mujer) frente a su madre, no
frente a su padre.
Presenta gran dificultad tcnica por lo que restringe su uso a laboratorios
especializados.
Este tipo de ADN se utiliza sobre todo en los casos siguientes:
Cuando existe una gran degradacin de las muestras por las malas condiciones
de conservacin en que permanecieron hasta que fueron encontradas en lugar
del crimen o por la antigedad que tienen. En este caso el ADN mitocondrial se
encontrar en mejor estado que el nuclear debido a su mayor nmero de
copias por clula. Tal es el caso de restos seos y dientes antiguos o sometidos
a condiciones extremas.
Cuando la cantidad de muestra de que se dispone es mnima (pelos sin bulbo
por ejemplo). Un pelo con bulbo caduco o un fragmento de pelo contendr una
cantidad de ADN nuclear tan escasa que en principio los anlisis de estas
muestras mediante ADN nuclear resultar negativo.
En la identificacin de restos biolgicos y el establecimiento de una relacin
familiar cuando no se dispone de los progenitores y no queda ms remedio que
realizar una comparacin con familiares ms lejanos. Si se trata de familiares
va materna tendrn exactamente el mismo ADN mitocondrial aunque se trate
de familiares lejanos. Un estudio de ADN nuclear en estos casos sera poco
informativo ya que cuanto ms alejada sea su relacin familiar, menos alelos
compartirn.

Cuando existe un sospechoso en un hecho delictivo pero se dispone de

muestra de la cual no se conoce su procedencia, se puede recurrir al estudio
del ADN mitocondrial de un familiar relacionado matrilinialmente para excluirlo.
Polimorfismos del cromosoma Y[editar]
El cromosoma Y slo existe en varones y todos los individuos varones
emparentados por lnea paterna comparten el cromosoma Y (casi en su
totalidad) pues se hereda directamente de padres a hijos sin mezclarse con
ningn material procedente de la madre. Por tanto, slo es posible identificar
linajes paternos mediante el estudio de su cromosoma Y, mientras que no es
posible identificar individuos. Respecto a los polimorfismos del cromosoma Y se
analizan microsatlites (STRs).
Los principales problemas derivan de las caractersticas hereditarias del
cromosoma Y:
No es nico de cada persona, sino que es comn para todos los pertenecientes
a un linaje paterno comn.
Slo se puede aplicar a los hombres de modo que en un estudio de paternidad,
como por ejemplo, no sirve para determinar si un hombre es padre de una
mujer.
Existen varios casos especiales en los cuales el anlisis de los polimorfismos
del cromosoma Y son de gran utilidad:
Casos de paternidad:
Casos de paternidad en los que no se dispone de material biolgico de la
madre. Nos bastar con disponer de la muestra del padre y compararla con la
del presunto hijo para comprobar si ambas presentan idnticos polimorfismos Y.
En casos complejos en los que falta el padre, pero tenemos por ejemplo al
abuelo.
Casos de mezclas en agresiones sexuales:
Agresiones en las que el semen del sospechoso varn se encuentra mezclado
con clulas de una vctima mujer: los polimorfismos del cromosoma Y son
detectados de forma ms sensible en el ADN de un individuo a pesar de que
ste se encuentre inmerso en una gran cantidad de ADN femenino. Con
marcadores nucleares esto no ocurre pues se detecta antes el material
femenino sobre todo si la cantidad de clulas epiteliales femeninas es muy
superior al nmero de espermatozoides. Adems, el uso de polimorfismos de
ADN del cromosoma Y nos permite incluir o excluir a un sospechoso
cmodamente.
Delitos en los que el agresor es un individuo azoosprmico: los individuos
azoosprmicos tienen ausencia de espermatozoides en el eyaculado. Los
espermatozoides son la mayor fuente de ADN en las muestras de semen, por lo
que un individuo azoosprmico tiene mucho menos ADN seminal para el

anlisis. La cantidad de ADN por mililitro (mL) en el eyaculado de un individuo

esprmico es aproximadamente de 450 microgramos (gr) en los
espermatozoides y de 30 gr en los leucocitos y clulas epiteliales.
Por ello, en un individuo azoosprmico, el contenido de ADN es
aproximadamente de slo el 6.3% del contenido en un individuo esprmico. Por
las mismas razones que en el caso anterior, es posible la deteccin de ADN de
las clulas epiteliales y los leucocitos en eyaculados de individuos
vasectomizados aunque se encuentre mezclado con ADN de la vctima.
Agresiones sexuales mltiples: el uso de los microsatlites del cromosoma Y en
estos casos permite determinar el nmero mnimo de agresores.
Otros tipos de mezclas: En mezclas de sangre-sangre, o de sangre-saliva, o de
sangre-pelos, el cromosoma Y es una herramienta de trabajo que puede
aportar valiosa informacin.
Como herramienta de screening:
En casos de agresin sexual: los polimorfismos Y pueden servir para relacionar
rpidamente estos casos (bases de datos) y excluir sospechosos de manera
rpida antes de profundizar en marcadores autosmicos.
En grandes catstrofes: Cuando en una catstrofe aparece un gran nmero de
cadveres puede ser interesante clasificarlos segn sus polimorfismos Y para
poder discriminar qu cadveres tendremos que cotejar con cada familia antes
de realizar los estudios de ADN nuclear autosmico. Esto resulta muy til
cuando, por ejemplo, los familiares vivos que se usan como muestras de
referencia son los hermanos de las vctimas.
Para terminar este apartado diremos que tanto el ADNmt como los
polimorfismos del cromosoma Y tienen mucho menos poder de discriminacin
que el ADN nuclear autosmico utilizado habitualmente. Ninguno de estos tipos
de ADN identifica individuos, sino lneas familiares maternas y paternas.
Tcnicas para analizar los polimorfismos del ADN extrado[editar]
En un principio la manera de estudiar dichos marcadores se hizo por medio de
la tcnica llamada hibridacin con sondas o Southern blot.
El tipo de sondas que se utilizan en esta tcnica pueden ser de dos tipos:
Sondas Uni-locus (SLP): La tcnica permite detectar loci minisatlites nicos.
son especficas para una regin de un determinado cromosoma. Se unen a
secuencias largas de nucletidos y presentan mayor variabilidad que las
sondas multi-locus. Como resultado se observan una o dos bandas por
individuo, segn sea homocigoto o heterocigoto. El patrn de bandas obtenido
con estas sondas se denomina perfil unilocus de ADN o DNA profiling. Se
utiliza principalmente en investigaciones de paternidad porque identifica loci
minisatlites muy informativos.

Sondas Multi-locus (MLP): permiten identificar simultneamente muchas

regiones hipervariables. Son sondas de 10 a 15 nucletidos que se repiten
mltiples veces y tras el revelado se observan de 10 a 20 bandas por persona.
Este patrn de mltiples bandas es caracterstico de cada individuo, constituye
algo as como su huella dactilar de ADN y se conoce como huella gentica
multilocus o DNA fingerprint.
Las sondas multi y uni-locus presentan una serie de ventajas e inconvenientes
segn:
Informacin aportada: las sondas multi-locus tienen una mayor capacidad
discriminativa al aparecer mltiples bandas. No obstante, las uni-locus son ms
especficas ya que el fragmento de ADN con el que hibridan es de mayor
tamao. Por consiguiente, para analizar 7 o 8 loci, se deberan utilizar 7 o 8
sondas uni-locus, mientras que con una sola sonda multi-locus podra hibridar
de un solo paso esas 7 o 8 regiones hipervariables.
Cantidad y calidad del ADN: cuando se usan sondas multi-locus se requiere
aproximadamente un microgramo de ADN sin degradar mientras que en el
caso de las uni-locus se necesita menos de 100 ng y este ADN no
necesariamente debe estar en perfecto estado, siempre y cuando el fragmento
complementario a la sonda est intacto.
Especificidad entre especies: las sondas multi-locus permiten su uso sobre el
ADN humano y de cientos de animales superiores, mientras que las uni-locus
son exclusivas de ADN humano.
Aunque las SLP han sido y son bastante tiles en estudios de paternidad no
puede decirse lo mismo de su aplicacin a la Criminalstica ya que presenta
una serie de inconvenientes como son:
La cantidad de ADN que se necesita est entre 20 y 100 ng, cantidad difcil de
conseguir en casos de criminalstica en los que los indicios biolgicos
encontrados son mnimos.
En cuanto a la calidad del ADN, es muy difcil encontrar en buen estado toda la
cantidad de ADN que se necesita para un anlisis con sondas mono-locus.
El tiempo requerido para este tipo de anlisis es de dos o tres das, debido a la
necesidad de tener que utilizar ms de una SLP.
El hecho de que se requieran cantidades elevadas de ADN hace que
normalmente, con el primer anlisis se consume la totalidad de la muestra, con
lo que se dificulta un contraste de pruebas o una posterior revisin del caso.
Todas estas limitaciones se superaron tras la aparicin de una tcnica muy til,
la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR: Polymerase Chain Reaction).
Individualizacin de las muestras biolgicas[editar]

En una primera fase se deber aislar la molcula completa, posteriormente

slo estudiaremos ciertas regiones de ella, concretamente las zonas ms
polimrficas.
La analtica de ADN se realiza en cuatro fases:
Extraccin de ADN: consiste en separar la molcula de ADN del resto de
componentes celulares. La duracin de este proceso depende del tipo de resto
biolgico que se analice, por ejemplo en las muestras de sangre o de saliva el
proceso de extraccin es ms rpido que a partir de un resto seo o dentario
donde el ADN es menos accesible.
Cuantificacin de ADN: se realiza para saber qu cantidad de ADN se ha
logrado aislar y en qu estado se encuentra (completo o roto).
Amplificacin de ADN: consiste en copiar muchas veces el fragmento concreto
de ADN que queremos estudiar para obtener una cantidad adecuada que nos
permita su deteccin, esto se lleva a cabo por PCR.
Deteccin del producto amplificado o tipaje: esta es la fase final del anlisis y
nos permite caracterizar y clasificar los fragmentos de ADN estudiados en cada
muestra para diferenciar unas de otras.
Criminalstica[editar]
Desde siempre el delito ha venido acompaado de la necesidad de investigarlo,
de aclararlo, de buscar y de castigar al culpable. Se puede definir criminalstica
como la ciencia aplicada que estudia cientficamente los indicios y las
evidencias con el objeto de convertirlos en pruebas para permitir la
identificacin de las vctimas y de los delincuentes y esclarecer las
circunstancias de un presunto delito.
Muestras dubitadas e indubitadas[editar]
Las muestras con las que se trabaja en criminalstica se pueden clasificar en
dos tipos:
Muestras dubitadas o evidencias: son restos biolgicos de procedencia
desconocida, es decir, no se sabe a quin pertenecen (por ejemplo las
muestras recogidas en la escena del delito o de un cadver sin identificar).
Los tipos de muestras dubitadas ms frecuentemente analizadas por tcnicas
gentico moleculares son: sangre (habitualmente en forma de mancha), semen
(lavados vaginales o manchas sobre prendas de la vctima), saliva (colillas de
cigarrillo, chicles, sobres y sellos), pelos, uas, tejidos blandos, restos seos y
dentarios (estos ltimos relacionados fundamentalmente con la identificacin
de cadveres).
Muestras indubitadas o de referencia: son restos biolgicos de procedencia
conocida, es decir, se sabe a quin pertenecen (por ejemplo la sangre tomada
de un cadver identificado, o las muestras tomadas a familiares de un

desaparecido). El tipo de muestras indubitadas ms habituales son sangre y

saliva (frotis bucal).
Para la gentica forense, son de inters los denominados indicios biolgicos
que son los que contiene ADN, y por ello se definen como toda sustancia
lquida o slida que provenga directamente del cuerpo humano o que haya
estado en contacto con el mismo, y en cuya superficie o interior pueda haber
restos de clulas.
Algunos ejemplos de indicios biolgicos obtenidos en la escena del crimen son:
sangre, semen, pelos, saliva, tejidos blandos, huesos y dientes, orinas, heces,
sudor, etc. En cuanto a los indicios no biolgicos, algunos ejemplos son: fibras
y tejidos, restos de plvora y material de disparos, restos de tierra, semillas,
plantas y hierbas, tinta pintura, madera, material de engrase, etc.
Anlisis de muestras biolgicas[editar]
Sangre: se puede encontrar bien en estado lquido o en forma de mancha. La
sangre lquida bien conservada no ofrece ningn tipo de problema, pero es
frecuente que al laboratorio llegue sangre putrefacta bien porque se ha
estropeado durante el transporte o bien porque pertenece a un cadver en el
cual se ha iniciado la descomposicin. Para evitar el primer problema es
conveniente realizar una mancha sobre una gasa antes de proceder al
transporte de la muestra y para el segundo hay que tratar de buscar otra
muestra para el anlisis, bien sea un tejido blando, uas, o un resto seo,
dependiendo del estado de conservacin del cuerpo. Por el contrario, la sangre
en forma de mancha se conserva ms fcilmente y puede analizarse tras varios
aos si las condiciones de secado fueron adecuadas. Quizs las manchas sobre
cueros, maderas tratadas, restos vegetales y tierras sean de las ms crticas
pues estos materiales tienen diferentes grados de absorcin y en ellos se
encuentran presentes gran cantidad de inhibidores de la PCR como los taninos,
que impiden que la reaccin funcione. Para detectar muestras de sangre en la
escena de una agresin, se utilizan una serie de mtodos como: colorimetra
(deteccin mediante oxidasas), cristalografa, quimioluminiscencia (mediante
luminol), inmunocromatografa, etc.
Saliva: estas muestras no suelen presentar problemas en la analtica de ADN.
Suelen llegar al laboratorio en forma de mancha, sobre filtros de cigarrillo,
sellos, chicles o prendas o bien en otros soportes como vasos, botellas o
huesos de fruta. Se detectan mediante alfa-amilasa.
Esperma: se recoge en los casos de agresiones sexuales. El principal problema
es que adems de los espermatozoides del agresor se suele encontrar las
clulas del epitelio vaginal de la vctima. Por ello, a la hora de analizar estas
muestras aparece una mezcla de perfiles genticos, pero como el perfil
gentico de la vctima s lo conocemos podemos determinar cul es el del
agresor.
Pelos: estas muestras requieren un anlisis microscpico previo a la analtica
molecular con el fin de determinar el tipo de anlisis que es posible en ellos

(estudios de ADN nuclear o de ADN mitocondrial) adems de otras

caractersticas importantes. Con el anlisis microscpico se determinan, entre
otros, los siguientes puntos:
- Si se trata de pelos de origen animal o humano.
- Si se trata de pelos completos (con bulbo) o de fragmentos de pelos (sin
bulbo). En el caso de fragmentos de pelos los estudios a realizar son los de
ADN mitocondrial como veremos en el siguiente apartado. En el caso de los
pelos con bulbo se puede determinar en qu fase vital se encuentra ste. En
los pelos con bulbo telognico (en fase de cada) se suele realizar anlisis de
ADN mitocondrial y en los pelos con raz anagnica (en fase de crecimiento) se
puede realizar un anlisis de ADN nuclear.
Tejidos: las muestras suelen estar relacionadas sobre todo con la identificacin
de cadveres en los que han comenzado los procesos de putrefaccin. Los
mejores resultados se obtienen con msculo esqueltico tomado de las zonas
que se estn ms preservadas de la putrefaccin.
Huesos y dientes: estas muestras se obtienen de los cadveres ya
esqueletizados y son las ms problemticas en cuanto a identificacin
gentica. Los huesos largos (fmur o hmero) y los molares (muelas) son las
muestras que ofrecen mejores resultados. La extraccin de ADN a partir de
este tipo de restos es ms larga y costosa que en los casos anteriores.
Exclusin e inclusin[editar]
Una vez que se ha estudiado todo lo anterior y se han obtenidos los resultados
de ADN de las muestras y se tienen supuestos sospechosos, hay que decidir si
el sospechoso es el verdadero autor del crimen o sin embargo se ha inculpado
a la persona equivocada. Para ello se definen dos conceptos: Exclusin e
inclusin.
En las muestras tomadas del supuesto criminal como en las muestras
recogidas en la escena del crimen se han analizado una serie de loci
polimrficos, los mismos en los dos casos:
Si al analizar los loci de ambos, tanto en la muestra problema como en el
sospechoso aparecen los mimos alelos, se habla de inclusin, pero esta
inclusin nunca es del 100% ya que se est trabajando con probabilidades.
Estas probabilidades hacen referencia a las frecuencias de los alelos en la
poblacin. As, para obtener este valor hay que multiplicar la frecuencia de que
los dos alelos del locus 1 se den en la poblacin, por la frecuencia de que los
alelos del locus 2 se encuentren en la poblacin, y as sucesivamente hasta
multiplicar todas las frecuencias de los loci polimrficos analizados. Este valor
ser un nmero muy pequeo, por lo que para dar el resultado final se hace
una conversin. Por convenio, est establecido que si tras hacer la conversin
se obtiene una probabilidad del 99.73% y todos los alelos de todos los loci
coinciden, se estar en lo cierto con una probabilidad altsima si se inculpa al
presunto sospechoso como verdadero sospechoso.

Si por el contrario, al analizar los loci de ambos, hay algn alelo en el que la
muestra problema y sospechoso no coinciden, aunque slo sea uno, se habla
de exclusin, y en este caso s es del 100%, es decir, que se tiene certeza
absoluta cuando se rechaza al supuesto sospechoso como verdadero autor y
por tanto hay que seguir buscando al verdadero sospechoso.
Ejemplo:
Loci analizados
Muestra problema (alelos)
Sospechoso 2 (alelos)
Locus 1

2,4

2,4

Locus 2

12,15 12,15 12,14

Locus 3

1,6

Locus 4

3,10 3,10 3,10

Locus 5

4,9

Locus 6

2,12 2,12 2,12

Locus 7

5,7

1,6

4,9

5,7

Sospechoso 1 (alelos)

2,4

1,7

4,9

5,7

Se puede concluir diciendo que hay una probabilidad cercana al 100% de que
el sospechoso 1 sea el verdadero autor del crimen, ya que todos los alelos de
todos los loci coinciden y se puede afirmar que el sospechoso 2 queda excluido
con una certeza del 100% como sospechoso, ya que hay dos de los alelos que
no coinciden con los de la vctima.
En este caso, son las bandas del sospechoso 1 las que coinciden con las
bandas de la muestra analizada. Se puede descartar por tanto al sospechoso 2
ya que hay algunas bandas que no coinciden con las de la muestra.
Investigacin de la paternidad[editar]
En la investigacin de la paternidad se parte del presupuesto lgico siguiente:
todo el ADN que una persona posee es mitad del padre y mitad de la madre.
Para estudiar si alguien es hijo/a biolgico de unos padres determinados el
procedimiento es sencillo: se selecciona un locus determinado de ADN y se
analiza para ver el genotipo del hijo cuestionado. Despus se analizan los
genotipos del ADN del padre y de la madre.
En esta ocasin tambin se tienen en cuenta los conceptos de exclusin e
inclusin vistos en el apartado anterior.
El anlisis de la paternidad se basa en las leyes de la herencia mendeliana. Por
tanto si en un hijo encontramos un alelo que no posee el presunto padre, la
paternidad queda excluida con seguridad absoluta. Si por el contrario el hijo
tiene un alelo que pueda haber heredado de un presunto padre, hay que
realizar clculos estadsticos con el objetivo de calcular cuantas personas,
entre la poblacin general, podran ser padres potenciales por tener ese alelo.

Las inclusiones en los supuestos de paternidad tienen que hacerse igual que
los casos de criminalstica, usando probabilidades estadsticas que deben ser lo
ms altas posibles. En todo caso, habra que tratar de conseguir siempre una
probabilidad de paternidad (escrita como W) superior al 99,9%. O, si se expresa
en ndice de paternidad (IP), debe ser superior a 1000; esta cifra de 1000
significa que es mil veces ms probable que el seor analizado sea el padre a
que lo sea otra persona de esa poblacin. La validez de la inclusin depende
del nmero de loci examinados y de la frecuencia con que el perfil de ADN se
encuentre en la poblacin general.
Existen dos reglas fundamentales que determinan dos tipos de exclusiones:
La primera regla de Landsteiner o exclusin directa: establece que todo
carcter presente en el hijo que no lo posea la madre, debe forzosamente
proceder de su padre biolgico. Si el supuesto padre no lo posee, se produce la
exclusin de primer orden.
La segunda regla de Landsteiner o exclusin indirecta: el hijo y el padre son
homocigotos para un alelo distinto en un mismo locus. Si esto sucede se
produce la exclusin de segundo orden, denominado as porque es menos
categrica que la anterior. En este caso se debe tener en cuenta la posibilidad
de que existan alelos silentes, mutaciones o alelos presentes pero no
identificados.
Estadsticamente el hecho de investigar a la madre es menos frecuente, ya que
en el momento del nacimiento la madre queda perfectamente identificada. Sin
embargo hay excepciones, como confusiones de recin nacidos en hospitales,
el abandono de menores tras partos clandestinos, el secuestro infantil y las
desapariciones.
La probabilidad de paternidad[editar]
La probabilidad de paternidad (W) se calcula mediante la frmula descrita por
Essen-Moller, cientfico escandinavo que en 1938 desarroll los aspectos
bioestadsticos de las pruebas de paternidad, derivados del teorema de Bayes.
W=X/X+Y
Indica la probabilidad que tiene ese individuo de ser el padre biolgico (X),
comparado con un hombre al azar de la poblacin (Y). As, el valor de X
depende exclusivamente del resultado de los anlisis realizados al tro, y el
valor de Y corresponde a la frecuencia en la poblacin del alelo del hijo que
obligatoriamente ha recibido del padre. Generalmente se asume que la madre
y el presunto padre no estn relacionados.
ndice de paternidad[editar]
Indica cuantas veces es mayor la probabilidad del presunto padre de ser el
padre biolgico del hijo con respecto a un hombre tomado al azar.
IP = X/Y

X = Probabilidad de que el presunto padre sea el padre biolgico del hijo/a.

Y = Probabilidad de que lo sea un hombre al azar en la poblacin de referencia.
A la hora de investigar la paternidad, si el supuesto padre ha fallecido y se
hace una reclamacin de filiacin, se presentan diversas estrategias de anlisis
para responder a la pregunta de filiacin:
Proceder a la exhumacin del cadver.
Recurrir a familiares vivos del supuesto padre, para intentar deducir su
patrimonio gentico.
Utilizar muestras biolgicas del individuo fallecido, que hayan sido obtenidas
antes de su muerte.
Identificacin de restos cadavricos[editar]
La identificacin de los restos cadavricos procedentes de los accidentes de
trfico, grandes catstrofes, personas desaparecidas, etc., constituye un tipo
de anlisis muy solicitado en gentica forense.
Cuando se produce la aparicin de un cadver o restos cadavricos cuya
identidad se sospecha pero no se pueda establecer con total seguridad por
mtodos tradicionales (antropolgicos, odontolgicos, etc.), se puede recurrir a
un estudio gentico como complemento como nica va posible de
identificacin.
Los cadveres de los que no haya sospechas sobre quin se trata deben ser
igualmente analizados y sus perfiles genticos deben ser almacenados en una
base de datos annima que permita su comparacin con muestras de
referencia de personas que tengan familiares desaparecidos.
Como consecuencia de la gran variedad de situaciones con las que nos
podemos encontrar, vamos a tratar de ordenar clasificar los casos que
pueden ser resueltos primero en funcin del tipo de muestra que debemos
analizar y segundo en funcin del tipo de caso.
- Atendiendo al estado de conservacin de la muestra, los casos ms tpicos
son:
Restos cadavricos en buen estado de conservacin. la recogida de muestras
se realiza inmediatamente despus de la muerte, las muestras ms adecuadas
son sangre y/o msculo. En los casos en los que se producen vctimas
carbonizadas, el ADN es muy estable a las altas temperaturas a las que se ve
sometido y en general es posible obtener ADN de alta calidad.
Restos cadavricos con un avanzado estado de putrefaccin esqueletizados.
Se trata de restos en los que la toma de muestras se realiza despus de un
periodo de tiempo largo tras la muerte, en este caso las muestras ms
adecuadas son piezas dentales huesos largos. Son los casos que entraan
mayor dificultad en cuanto a la obtencin y el anlisis del ADN.

Restos cadavricos embalsamados. Normalmente son los casos que entraan

la mayor dificultad puesto que lo ms comn es que la conservacin del
cadver se realice mediante formol derivados y est demostrado que el
formol produce grandes modificaciones de los cidos nucleicos.
Restos cadavricos momificados. En ciertos cadveres se producen fenmenos
naturales de momificacin como consecuencia de la rpida evaporacin del
agua del cuerpo, con lo que se detiene el desarrollo de microorganismos y por
tanto la putrefaccin y por tanto el material gentico de los tejidos blandos
momificados se preserva en condiciones que permiten su anlisis, que en
condiciones habituales no sera posible debido a los procesos destructivos del
cadver.
Catstrofes masivas[editar]
La muerte de un elevado nmero de personas en un mismo evento puntual es
lo que se denomina gran catstrofe. El objetivo primordial en stas es el de
identificar correctamente lo antes posible a las vctimas. Esto no siempre es
fcil, porque las presiones de los medios de comunicacin, de los familiares, de
las autoridades, inducen a los profesionales a cometer errores.
Desde una perspectiva forense, centrados ya en las vctimas, se pueden
clasificar las catstrofes en dos tipos:
Catstrofe cerrada: aqulla en la que se conoce el nmero exacto o muy
aproximado de vctimas. Ej.: accidentes de aviacin, autobs, tren, etc. En
estos casos incluso se sabe los nombres de las vctimas.
Catstrofe abierta: aqulla en la que no se sabe el nmero de vctimas a priori.
Ej.: las catstrofes naturales, incendios en edificios o los famosos atentados del
11-S (Nueva York) y el 11-M (Madrid).
Los mtodos de identificacin de ADN disponibles en una gran catstrofe son:
Patologa forense: el examen externo e interno del cadver en la autopsia
(cicatrices, tatuajes, prendas de vestir, lesiones internas y prtesis).
Inconvenientes: la lentitud y que slo sirve para cuerpos enteros y no muy
daados.
Huellas dactilares: se pueden obtener por medio de la denomina necrodactilar,
til en las catstrofes cerradas. Es rpida, fiable y econmica.
Odontologa forense: es de alta fiabilidad, relativamente econmica pero a
veces limitada por la falta de material de referencia y por la lentitud derivada
de la necesidad de comparar todas las muestras una a una.
Antropologa forense: es econmica y fiable pero a veces resulta muy lenta.
Gentica forense: basada en el anlisis de ADN. Ventajas: resulta til en casi
todos los casos, puede utilizarse todo tipo de fragmentos, es muy fiable y sus
costes son cada da menores. Inconvenientes: hay casos en los que no

funciona, a veces faltan laboratorios especializados, es relativamente lento, y

los precios aunque disminuyen son relativamente elevados.
Bases de datos[editar]
Muchos de los delitos que quedan sin resolver porque en un momento
determinado no hay un sospechoso, pueden ser resueltos, incluso aos
despus de que se hayan cometido, gracias al desarrollo de las bases de datos.
stas pretenden colaborar en la resolucin de casos criminales permitiendo la
comparacin automatizada de perfiles de ADN procedentes de diversas
fuentes: indicios no identificados de la escena del crimen, muestras de
referencia de sospechosos y muestras de referencia de vctimas. Tras las
comparaciones pertinentes, y con un nmero suficiente de muestras
analizadas, se puede comprobar si una persona (imputado o procesado) ha
dejado indicios biolgicos en ms de una escena criminal o sobre ms de una
vctima. ste es uno de los medios ms eficaces de controlar a los criminales
en serie y a delincuentes reincidentes, algo muy tpico en casos de violaciones.
As, se puede encontrar que una serie de violaciones han sido cometidas por la
misma persona, porque el ADN del esperma coincide en todos los casos, pese
que an no se haya podido detener a ningn responsable.
En la prctica y para su uso, las bases de datos de identificacin gentica
permiten la comparacin automatizada a gran velocidad de los llamados
perfiles de ADN. Estos no son si no los nmeros y letras que identifican los
fragmentos de ADN, y cuya cadena exacta es nica para cada persona y
presenta ciertas caractersticas comunes en el caso de parientes. Existen
diferentes bases de datos y entre todas ellas la de mayor capacidad de
aplicacin para el rea latinoamericana es el sistema CODIS (Combined DNA
Index System), desarrollado en los EE.UU. por el FBI.
Aunque resulta obvio y evidente, no hay que olvidar que un grupo de personas
es la suma de individuos y que debemos tratar de mantener su derecho
individualmente. En el momento actual existen mltiples problemas de tipo
tcnico, cientfico, econmico y social para llevar a cabo un proyecto de banco
gentico general para toda la poblacin, por lo que no se plantea su
elaboracin. S se estn realizando sin problemas en determinadas profesiones
de riesgo en las que los profesionales de forma voluntaria y con consentimiento
explcito donan una muestra de saliva o sangre para ser analizada en caso de
accidente, con vistas a solucionar todas las cuestiones civiles que pueden
presentarse ante la falta de identificacin del cadver o de sus restos. En todos
los casos se aprecia un beneficio en la realizacin de este tipo de bancos,
desde el punto de vista social se ha planteado la conveniencia de proceder al
archivo de estas muestras en determinados individuos con vistas a evitar un
dao a la sociedad, concretamente la discusin se ha centrado en los casos
criminales, hablando de la necesidad de proceder al archivo de todos los
criminales autores de delitos graves, limitndolas en principio al homicidio y a
las agresiones sexuales. Las decisiones han variado segn los pases, y en la
actualidad los dos nicos que tienen una base de datos gentica de utilizacin

rutinaria en los casos prcticos son Estados Unidos y Gran Bretaa. El primero
de ellos slo archiva el perfil de los criminales que han sido juzgados y
condenados por agresiones sexuales, decidiendo instaurar este tipo de archivo
debido fundamentalmente a la existencia de los denominados "violadores en
serie" tendentes a repetir el mismo tipo de conductas y a las limitaciones para
combatirlos, sobre todo por la movilidad y la diferente jurisdiccin entre los
distintos estados. En el Reino Unido se ha ido ms all y se procede al archivo
de muestras biolgicas de todas aquellas personas que se han visto envueltas
en un hecho delictivo. En Espaa no es posible llevar a cabo un proyecto de
este tipo debido a la falta de un marco legal apropiado para su realizacin,
especialmente por las posibles consecuencias negativas que del mal uso de los
mismos se pudiera hacer.