ESTIRILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO

INTRODUCCIN
La esterilizacin implica la destruccin de todos los microorganismos,
incluyendo los esporos. La desinfeccin supone la destruccin de los
microorganismos vegetativos que pueden causar enfermedades o en el
contexto de las industrias de alimentos, los que pueden producir
alteraciones. La desinfeccin no mata necesariamente a los esporos.

I.

II.

OBJETIVOS
Reconocer cuales son los agentes de control ms empleados
para combatir los microorganismos en el laboratorio
Adquirir la destreza de esterilizacin en el laboratorio
El alumno aprender el procedimiento para empacar diversos
materiales de uso en microbiologa as como el procedimiento
de la esterilizacin
MARCO TERICO

ESTERILIZACION DE MATERIAL
La esterilizacin consiste en la destruccin de toda forma de vida
microbiana, incluidas las esporas (las esporas son los microorganismos ms
resistentes al calor as como a los agentes qumicos y radiaciones). El
estado estril de un material no puede ser demostrado de forma eficaz, bien
porque los medios que disponemos no son suficientes para demostrar la
presencia de organismos vivos en un objeto, encontrndonos con falsos
negativos, o bien el mismo proceso de verificacin producira una
contaminacin involuntaria, en donde el material parece no estril cuando
en realidad lo est, encontrndonos con un falso positivo. La esterilidad de
un objeto hace referencia a la probabilidad de que un objeto no este
contaminado. La farmacopea europea ha fijado como lmite mximo de no
esterilidad 106 .
Esto significa que podremos encontrar un objeto no estril de entre en
milln de objetos sometidos a la esterilizacin. Lo cual es prcticamente
imposible de demostrar, por lo que consideraremos en la prctica, que un
objeto esta estril cuando ha sido sometido a los diversos procesos de
esterilizacin, y la enfermera de la central de esterilizacin ha validado
todos los controles realizados en el proceso. En todo momento es muy
importante tener en cuenta y respetar las recomendaciones, que el
fabricante nos indica en la etiqueta, sobre reesterilizacin del material, as
como el cumplimiento de la normativa CEE correspondiente, rechazando
todo material de un solo uso una vez utilizado.
Sistemas de esterilizacin
Son mltiples los medios y sistemas de esterilizacin aunque a nivel
hospitalario y ambulatorio los ms importantes son: fsicos y qumicos.
1.1. ESTERILIZACIN POR MEDIO FSICO
1.1.1. ESTERILIZACIN POR CALOR SECO

La esterilizacin por este mtodo se realiza con aire seco calentado en los
denominados hornos de Pasteur o estufas de Poupinell. Por la accin del
calor las esporas y bacterias se desecan producindose una coagulacin de
sus protenas. Qu materiales se pueden esterilizar con este sistema? Por
regla general se puede esterilizar por este mtodo todo material que no sea
inflamable. Instrumental de curas tijeras, pinzas, grasas, aceites, vidrios,
jeringas, pipetas, polvos de talco, boro, porcelanas etc. Por este mtodo no
se puede esterilizar materiales textiles ni termosensibles (gomas plsticos
etc.) sustancias acuosas ni objetos esmaltados. Para conseguir una perfecta
esterilizacin la relacin entre temperatura y tiempo es la siguiente. A una
temperatura de 180 se requiere un tiempo de esterilizacin de 30 minutos.
A una temperatura de 170 se requiere un tiempo de esterilizacin de 60
minutos. A una temperatura de 150 el tiempo ser de 150 minutos. A una
temperatura de 120 el tiempo ser de 6 horas. Hemos de tener en cuenta
que el tiempo de esterilizacin empezar a contar cuando la temperatura
sea homognea en toda la cmara, por lo que los tiempos reales del ciclo
son considerablemente ms largos.
Ventajas Su mantenimiento es ms sencillo y econmico que otros
sistemas. Inconvenientes Deteriora el material al requerir altas
temperaturas, ciclos muy largos. Hoy en da ste sistema solo se
utiliza para esterilizar material de curas en algunos ambulatorios,
siendo su uso hospitalario muy escaso.
Parmetros a controlar por el profesional de enfermera: Fsicos, el
profesional validar la temperatura y el tiempo por el medio del
termmetro, el reloj y manmetro externos. Qumicos, mediante
dispositivos impregnados de compuestos qumicos, que detectarn el
cumplimiento de los distintos parmetros de esterilizacin mediante
el cambio de color de los mismos.
1.1.2. ESTERILIZACIN POR CALOR HMEDO
El calor hmedo en forma de vapor saturado a presin es muy eficaz, para
la destruccin de toda forma de vida microbiana incluso las esporas. La
accin esterilizante se produce por el doble efecto del calor y de la
humedad. El vapor penetra a travs de las clulas ocasionando la muerte de
las mismas.
Ventajas Es el procedimiento ms rpido eficaz y seguro de los
existentes a nivel hospitalario, es barato, no produce residuos txicos.
Todo material que no se altere por este procedimiento se deber
esterilizar por vapor hmedo. Para que la esterilizacin sea eficaz, el
vapor debe ser puro, no debe contener gases condensables y debe
ser saturado, es decir estar en equilibrio con el agua a una
determinada temperatura.
En este sistema es necesario el contacto del vapor con todos los puntos del
material esterilizar. Con el vapor hmedo por medio de sus ciclos y
programas se puede esterilizar:
a) Materiales metlicos, contenedores quirrgicos, instrumental de curas,
textil, gomas, etc.

b) Materiales textiles (grasas, ropa de quirfano, vendas etc.)

c) Materiales de vidrio (jeringas, pipetas, biberones etc.)
d) Numerosos materiales plsticos y gomas.
Inconvenientes
Corroe los materiales metlicos, estropea los cortes. Deteriora los
materiales de goma o plstico.Requiere mucho tiempo para la preparacin
de paquetes, bultos y tambin requiere mucho cuidado en la carga del
autoclave.
Para asegurar el xito de un proceso esterilizante es necesario
considerar las siguientes pautas:
1. Esterilizacin previa: Ser necesaria cuando el material y/ o equipos
hayan sido utilizados con material infeccioso o presunto infeccioso, por
ejemplo placas de Petri inoculadas, tubos conteniendo cultivos de
microorganismos, frascos empleados en el cepario, etc. Sern esterilizados
en autoclave a 1 atm. de presin durante 15 30 minutos. Para las pipetas,
micropipetas y tubos de hemlisis puede emplearse este mtodo o
sumergirlas inmediatamente despus de ser utilizadas en solucin
desinfectante de formol al 10 % durante una hora.
2. Limpieza previa: Se realizar para eliminar las partes gruesas de suciedad
o residuos no infecciosos (gratitud, resto de pegamento, cinta adhesiva,
carbono, tinta de rotulado, etc.). Se emplear el raspado con esptulas,
cepillo, esponjas metlicas, paos, etc. Se enjuagar repetidas veces bajo el
chorro de agua corriente a presin (conectando a la canilla un tapn
perforado o tapando parcialmente con un dedo).
Se aconseja un ltimo enjuague con agua destilada. Se dejar secar en
canasto o rejilla de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a
60 80 C. El material de vidrio que luego de este tratamiento an quedase
manchado ser sumergido en una solucin sulfocrmica durante 24 hs (Este
procedimiento lo realiza personal especializado del Droguero).
3. Preparacin del material de vidrio: este acondicionamiento debe
realizarse de manera tal de asegurar la perfecta esterilizacin del mismo en
todos sus puntos y evitar la posterior contaminacin.
a. Placas de Petri: se envuelven en papel madera segn la tcnica indicada
por el instructor (se esterilizan en estufa a 160- 180C durante dos o una
hora respectivamente).
AUTOCLAVE

Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. El modelo ms

usado es el de Chamberland. Esteriliza a 120 a una atmsfera de presin
(estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30
minutos. Este proceso de esterilizacin es el que mejor resultados d en
microbiologa. El vapor de agua a fuerte presin acta a mayores
temperaturas.

III.

RESULTADOS

Se debe utilizar el papel correcto, de lo contrario se romper y el

materia no queda esterilizado.
Si la cinta testigo no se colorea, la prctica se rechaza.
Si el material no se envuelve correctamente a pesar de que la cinta
se coloree, el materia no est estril.
No se necesita mucho tiempo para la esterilizacin.

A) CAJAS DE PETRI

Corta el papel estraza, en forma de rectngulos adecuados para la cantidad

de 2 a 3 cajas. Colcalas en la parte central y Envulvelas, Se toman los
extremos de Papel y se unen, Se hace un nuevo doblez recargando
ligeramente en la caja para marcarlo, Los extremos se doblan en forma
triangular .Ya en forma triangular se doblan hacia atrs quedando listas para
esterilizar.
B) PIPETAS

Introduce una pequea porcin de algodn en el cuello de la pipeta,

procurando que quede lo suficientemente apretada. Con tiras de papel de 3
cm de ancho envulvelas, comenzando por la punta y en forma de espiral
gira hacia arriba hasta el final de la pipeta.
IV.

CONCLUSIONES

La esterilizacin es un procedimiento primordial para llevar a cabo la

eliminacin de microorganismos.
Al trmino de esta prctica he aprendido que el empacado del material de
laboratorio para su esterilizado es de suma importancia, ya que debemos
protegerlos de la contaminacin por suciedad, polvo y bacterias para que al
emplearlos una vez ya esterilizados tengamos un ptimo resultado en
nuestros trabajos de laboratorio
El paquete debe preservar la esterilidad de su contenido hasta el momento
de su apertura, momento a partir del cual sern utilizados en rea estril.
V.

Bibliografa

http://www.fpsanidad.es/apuntes/hmhlm/esterilizacion.pdf
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfPTkAL/practica-no-1
http://analisisaproductoscarnicos.blogspot.pe/2012/06/practica-numero-2esterilizacion-de.html
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf