VIROLOGA

BACTERIFAGOS: QU SON?, SU ESTRUCTURA,

Y COMO SE USAN EN TCNICAS Y TERAPIAS.

UNIVERSIDAD INTERAMERICANA A. C.

VIROLOGA

HUGO SORIANO CRUZ

LESLIE ANAHI H LUZ CARREO

BACTERIFAGOS: QU SON?, SU ESTRUCTURA, Y COMO SE USAN EN TCNICAS Y

TERAPIAS.
BACTERIFAGOS CON RNAMC (CICLO DE VIDA Y HUSPEDES)
BACTERIFAGOS CON DNAMC (CICLO DE VIDA Y HUSPEDES)
BACTERIFAGOS CON DNABC (CICLO DE VIDA Y HUSPEDES)

FECHA: 10 DE DICIEMBRE DEL 2015

PROF. JORGE ALBINO ARRAMBIDE GONZALEZ

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BACTERIFAGOS: QU SON?, SU ESTRUCTURA,

Y COMO SE USAN EN TCNICAS Y TERAPIAS.

BACTERIOFAGOS
Son virus capaces de infectar, multiplicarse y provocar lisis celular, liberando nuevas
partculas infectivas, en una bacteria. Pueden tener tres tipos de simetra en la cpsida:
Icosadricos.
Helicoidales.
Complejos y de simetra binaria: icosadricos y helicoidales.

Los CIDOS NUCLEICOS son de los cuatro tipos: DNA mono, DNA bicatenario, RNA mono y
bicacatenario.
FAGO

HUSPED

CABEZA

COLA

CIDO
NUCLEIC
O

ESTRUCTU
RA

TIPO

T1

E. coli

Hexagona
l

Simple

ADN +/-

Lineal

Virulento

T2,T4,T
6

E. coli

Icosadric
o

Compleja

ADN +/-

Lineal
y
bases
modificadas

Virulento

T3,T7

E. coli

Hexagona
l

Corta

ADN +/-

Lineal

Virulento

T5

E. coli

Hexagona

Simple

ADN +/-

Lineal y una

Virulento

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cadena
segmentada

LAMBD
A,
fi80, P2,
Mu

E. coli

Hexagona
l

Simple

ADN +/-

Lineal
y
extremos
cohesivos

Atempera
do

N4

E. coli

Hexagona
l

Corta

ADN +/-

Lineal

Virulento

P22

Salmonell
a

Hexagona
l

Compleja

ADN +/-

Lineal

Virulento

SP01

Bacillus

Hexagona
l

Compleja

ADN +/-

Lineal

SP82

Bacillus

Hexagona
l

Compleja

ADN +/-

Lineal

S13

E. coli

Icosadric
o

No

ADN +

Circular

Virulento

M12,G4

E. coli

Icosadric
o

No

ADN +

Circular

Virulento

PM2

Pseudomo
na

Hexagona
l,
envoltura

No

ADN+/-

Circular

M13

E. coli

Filamento
so

No

ADN +

Circular

Virulento

MS2, f2

E. coli

Icosadric
o

No

ARN +

Lineal

Virulento

fi-6

Pseudomo
na

Polidrico
y
envoltura

No

ARN +

3
Segmentos

Virulento

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f1, fd

E. coli

No

Filamento
so

ADN +/-

Virulento

P1

Salmonell
a

Icosadric
a

Compleja

ADN +/-

Atempera
do

MORFOLOGA
Hay varios tipos morfolgicos:
1) Fagos de simetra binaria, ADN bicatenario y cola contractil. Ej: fagos T-par.
2) Fagos de simetra binaria, DNA bicatenario y cola no contractil. Ej: fago lambda de E.
coli.
3) Fagos icosadricos sin cola y de ADN bicatenario. Ej: X174.
4) Fagos sin cola, ARN monocatenario. Ej: colifago f2
5) Fagos filamentosos de ADN monocatenario. Ej: fago fd de E.coli.
6) Otros: fago PM2 de P. aeruginosa, que posee una cpsida de simetra helicoidal flexible
de hasta 850 nm de longitud y con lpidos.
El FAGO COMPLEJO consta de:
a) El TALLO es de simetra helicoidal, y puede ser corto o largo, rgido o flexible, y puede
presentar aditamentos adicionales con simetra o no helicoidal. El tallo puede estar
desnudo o recubierto una parte por una vaina. La zona no cubierta por la vaina se
denomina cuello.
En la regin terminal de la vaina o en la parte superior pueden aparecer placas proteicas:
Placa superior sirve para inyectar el AN en el espacio periplsmico.
Placa inferior puede ir acompaada por espculas y fibras que sirven para anclarse a la
membrana de la bacteria.
b) La CABEZA es de simetra icosadrica y contiene el AN.

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CICLO VRICO
A. CICLO VRICO DE LOS FAGOS ADN duplex.

1. CONTACTO CON EL VIRUS

La adsorcin se da en sitios especficos para un determinado fago. Se fijan en la pared
celular, a fimbrias, pelos, flagelos. Este primer contacto es reversible, con lo que

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obtenemos virus infectivos. Al poco tiempo se hace irreversible y no podemos recuperar

fagos infectivos porque han inyectado el AN en la bacteria.
El Rc celular para el fago suelen ser polisacridos complejos con especificidad de unin
con el fago y antignica. El fago lambda se adhiere a una protena transportadora de
manosa.
2. INYECCIN DEL AN EN EL ESPACIO PERIPLSMICO Y DE AH, AL INTERIOR DE LA
BACTERIA (SLO PASA EL CIDO NUCLEICON).
Cada tipo de virus tiene algo de especial. Ej: en los fagos complejos, la fijacin se da a
nivel de la placa o la vaina, y la inyeccin depende del tipo de morfologa. En el caso ms
complejo, se da la penetracin del tallo por una contraccin de la vaina (pasa por un poro
que lo realiza una lisozima virus especfica). Es un proceso activo y usa ATP (hay unas 100
molculas de ATP en el virin) y ATPasa virus especfica.
Despus de la inyeccin, la bacteria repara la zona lisada. Si son muchos los fagos que
infectan la clula o el metabolismo de la bacteria no est al 100 %, la reparacin no se
lleva a cabo y hay debilitamiento de la pared celular y lisis de la bacteria (lisis desde
fuera) y no se forman fagos infectivos porque no hay replicacin.
El fago T7 inyecta siempre el genoma con la misma polaridad (polaridad constante). El
fago T5 inyecta primero una serie de genes que se traducen en el interior de la bacteria y
permiten la entrada del resto del genoma. La unin del fago produce cambios en la
membrana plasmtica y cambios en el metabolismo de la clula (se detiene el
metabolismo celular).
3. MULTIPLICACIN DEL CIDO NUCLEICO: FASE DE ECLIPSE.
La fase de eclipse es aquella en la que no podemos recuperar viriones infectantes,
despus de lisar la clula. En el momento de la inyeccin del AN hay inhibicin de la
sntesis y del metabolismo bacteriano. El DNA pasa al citoplasma y hay induccin de
enzimas que van a dirigir la sntesis fgica. Comienza la transcripcin en varias fases:
a) RNAm inicial: son protenas que van a intervenir en la sntesis del RNAm tardo y en la
sntesis de DNA vrico. Hay sntesis de "novo" protenas como la dCTPasa (el fago G4 porta
su RNA poli); tambin se aprovecha de la maquinaria celular (DNA poli, RNA poli, enzimas
metilantes y glicosilantes, DNAasa, timidinkinasa):
Protenas fgicas que detienen la sntesis de RNA bacteriano, que conducen al
desplegamiento del DNA y su posterior degradacin.
Protenas que regulan la transcripcin vrica.
RNA polimerasa que necesaria para la transcripcin de los genes tardos (fago T7).
Enzimas glicosilantes: unen un resto de glucosa a citosina.

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Enzimas metilantes que van a metilar las bases del DNA vrico en las dianas de
restriccin presentes en el genoma (mecanismo de proteccin del DNA vrico). Esta seal
sirve para evitar a las enzimas de restriccin de la bacteria. En algunos virus est
atrofiado y a estos virus se los llama virus confinados.
Estos virus pueden infectar a bacterias como Salmonella y Shigella que no tienen este
sistema de restriccin y s el sistema de metilacin. El virus, cuando infecta , va a generar
virus que pueden infectar a otras bacterias porque tienen el DNA metilado, pero no van a
poder generar viriones de nuevo porque no tienen sistemas de metilacin (virus
desconfinados).
dCTPasa: hidrolizan el dCTP y dCDP, con lo que la citosina no puede incorporarse al DNA
vrico y s se incorpora la citosina glicosilada.
DNAasa que interviene en la rotura del DNA celular: cesa la replicacin , transcripcin y
sntesis bacteriana. Los fragmentos de DNA celular que se forman se utilizan para
sintetizar el DNA vrico y los RNAm. Adems, la maquinaria vrica cuenta el ARNr y ARNt
de la bacteria.
Timidinkinasas
b) RNAm de genes medios: sus productos son requeridos para la duplicacin del DNA y la
recombinacin.
c) RNAm tardo (codifica dos tipos de protenas):
Protenas capsidales.
Protenas enzimticas del virus: lisozima que realiza la lisis celular y las polimerasas.
La sntesis de DNA vrico se realiza en el momento en el que se sintetizan las protenas
iniciales.
4. MADURACIN.
Comienza con una condensacin de las protenas capsidales para formar la procabeza. En
esta procabeza entra el AN para formar la cabeza, y a continuacin van a fijarse la cola
que se ha sintetizado por separado. Pueden formar partculas vacas, colas, cabezas, etc.
Todo el proceso est controlado por un sistema regulador del ADN fgico.
5. LIBERACIN.
La pared bacteriana es atacada por una lisozima fgica de fase tarda que rompe la pared
bacteriana y libera partculas vricas completas e incompletas.
B. FAGOS DNA monocatenario de banda POSITIVA.

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ADN muy pequeo (5-7 Kb). No inhiben la sntesis de macromolculas del husped (a
mayor carga gnica del virus, mayor inhibicin de la sntesis celular y menor uso de las
enzimas del husped).
a) La adsorcin y penetracin es a travs de la pared por un mecanismo todava no
conocido (fago X174). Los fagos filamentosos tipo fd y M13 se fijan a los pilis sexuales e
inyectan el ADN por l.
Estos fagos tienen una protena PILOTO con funciones en:
Adsorcin del virin al Rc celular.
La protena cambia de conformacin y transporta al ADN vrico al interior de la clula.
Inicia la replicacin del ADN vrico al acoplar el ADN a las enzimas.
Participa en la morfognesis del virus.
Al inyectar el ADN, la protena capsidal queda insertada en la membrana celular y ms
tarde se reutiliza.
b) La multiplicacin del virus no afecta a la sntesis bacteriana.
c) REPLICACIN: despus de la penetracin del DNA dentro de la bacteria, se sintetiza la
banda de DNA negativa dando una forma replicativa (FR) formada por DNA duplex (por
medio de una DNA poli bacteriana). Despus acta una replicasa vrica para formar la
banda de DNA positivo vrico para los nuevos viriones y RNAm para protenas iniciales y
tardas, a partir de un molde negativo. Es una replicacin ASIMTRICA.
d) La liberacin se produce a travs de la membrana en el momento de la divisin
bacteriana. En cada generacin celular son excretados unos 1000 viriones (crecimiento
estacionario). No obstante, el virus puede afectar a la clula y destruirla.
C. FAGOS RNA monocatenario de banda POSITIVA.
Penetra slo por los pilis sexuales de bacterias macho, con ayuda de la protena A fgica,
utilizandolos como canales para inyectar su ARN (MS2, f1, R17). El ARN tiene una extensa
complementariedad (forman estructuras secundarias y terciarias) y tienen la organizacin
gnica ms simple que se conoce de todos los virus autnomos. Todas sus funciones estn
expresadas en tres genes que codifican:
Protena A (funcin similar a la protena piloto de los fagos DNA monocatenarios).
Protena de la cpsida.
Replicasa vrica.
El RNA penetra en el citoplasma y se fija a los ribosomas para sintetizar una replicasa, que
utilizando el RNA+, sintetiza otro hebra RNA- y genera una FR de RNA duplex. A partir de
la banda negativa de la FR se sintetiza RNA+ que sirve de mensajero y RNA vrico para

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formar los viriones. Este RNA+ se ha empleado para el estudiado de la sntesis proteica "in
vitro"
La bacteria se lisa y libera los fagos.
CICLO LISOGNICO

A. DEFINICIN.
En ciertos casos la infeccin no trae consigo la lisis celular, sino que hay una insercin del
DNA vrico en el genoma de la bacteria, y una replicacin conjunta. A este fenmeno se le
llama ciclo lisognico y al DNA vrico insertado PROFAGO.
Slo lo pueden realizar los fagos que son capaces de generar en el citoplasma bacterianos
DNA duplex CCC. En algunos casos se producen mutaciones de los fagos, generando:
Virus defectivos: son virus incapaces de completar el ciclo por si solos, pero la bacteria
no es infectada por otro fago del mismo tipo.
Virus altamente defectivo: no proporcionan inmunidad a la bacteria.
1. FAGO LAMBDA.

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Fago polidrico especfico de E. coli de 48.5 Kd que contiene una molcula de DNA duplex
lineal con extremos cohesivos o complementarios que van a permitir su circularizacin
cuando entra en el citoplasma de la bacteria. Una vez circularizado el DNA, se inserta en
el genoma bacteriano para dar un ciclo lisognico en la mayora de las ocasiones.
El ciclo ltico/lisognico esta regulado por las protenas CRO (factor esencial para el ciclo
ltico) y CI (factor esencial de lisogenia). La protena CI es un represor citoplasmtico que
evita la multiplicacin del DNA fgico.
Las reacciones de integracin/escisin del fago en el genoma bacteriano son realizadas
por los genes int (integracin) y xis (liberacin).
El modelo de replicacin del DNA es el del circulo rodante, y el producto es una molcula
de DNA con mltiples copias lambda (concatmero) que es procesado por unas enzimas
que reconocen los extremos COS (extremos cohesivos). Este proceso esta acoplado al
empaquetamiento del DNA dentro de la cpsida.
Las protenas que intervienen en el empaquetamiento son:
Protena E: forma la procabeza.
Protena D: produce empaquetamiento de DNA en cabeza.
Protena A: reconoce los sitios COS y corta.
Protena S: lisa la clula y salen los fagos.
2. FAGO Mu.
El fago Mu es un fago ADN duplex CCC de E. coli que puede insertarse en distintos sitios
del cromosoma bacteriano, provocando mutaciones en la bacteria (recombinacin
ilegtima). Se comporta como un transposon.
B. CARACTERSTICAS.
1. LISIS.
a) Lisis espontanea: el fago entra en ciclo ltico y destruye la bacteria portadora (1/100 a
1/100.000). Cuando E. coli se ve atacada en el DNA, destruye CI y aparece el cclo ltico.
b) Lisis inducida: provocada por agentes fsicos y qumicos sobre la bacteria inducible. Los
agentes son:
Fsicos: rayos ultravioletas, RX, rayos gamma.
Qumicos: sustancias reductoras (ac. ascrbico, glutmico) y mutgenos qumicos como
las mostazas nitrogenadas, mitomicina C.

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2. INMUNIDAD. La bacteria lisgena es inmune a la infeccin por un fago homlogo del

profago que ella transporta. Dos fagos son coinmunes cuando son sensibles al mismo
represor.
3. FENMENOS DE TRANSFORMACIN
presentar caractersticas distintas por:

GENTICA. Las

bacterias

lisgenas

pueden

Presencia de profago en el genoma (conversin) que inactiva el gen sobre el que se

inserta o aumenta la expresin de otros genes.
Presencia de genes de otra bacteria (transduccin generalizada o especializada).
4. HAY MODIFICACIN DEL GENOTIPO Y DEL FENOTIPO que afectan a las propiedades
bioqumicas, antignicas y toxignicas. Ej:
a) Fago beta y C. diphterae: cepas toxignicas lisogenizadas.
b) S. pyogenes lisogenizado produce la toxina eritrogena responsable de la escarlatina.
c) Salmonella varia los Ag de superficie con la lisogenacin y a veces cambia el serotipo.
5. LA INFECCIN DE LA BACTERIA SE PRODUCE EN FASE DE MULTIPLICACIN.
6. LA INSERCIN DEL VIRUS EN EL GENOMA BACTERIANO ES EN LUGAR ESPECFICO.
C. RELACIONES ENTRE FAGOS Y BACTERIOCINAS.
Las bacteriocinas son sustancias bactericidas especficas producidos por las bacterias y
activas sobre otras cepas de la misma especie o gneros distintos. Hay dos tipos de
bacteriocinas:
a) Grandes. Son termolbiles a 80 C y similares a fagos completos o a parte de ellos. Ej:
Colicina 15, partcula fgica completa, con ADN y cola contractil presente en E. coli.
Monocina, fago sin AN en L. monocytogenes.
Piocina 28, cola de un fago presente en P. aeruginosa.
b) Pequeas. Son termoestables a 100 C y parecen ser constituyentes de la pared de la
bacteria.
D. APLICACIONES PRACTICAS DE LOS FAGOS.
a) Fagoterapia, muy difcil.
b) Diagnostico por fagos. La tipificacin bacteriana se basa en la elevada especificidad de
la adsorcin viral. Casi todas las bacterias llevan fagos asociados, que se pueden aislar de
lquidos purulentos, heces, serosidades, agua, etc. Ej:

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Brucella y el fago Tb
V. cholerae y el fago IV de Mukerjee
c) Lisotipia y fagotipia: El Ag Vi de S. typhi es producido por el fago Vi que tiene 66
lisotipos.
d) Detectar portadores mudos. Ej: detectar fagos de Salmonella en haces de portadores
mudos.
e) ndice de contaminacin fecal de agua y alimentos.

BIBLIOGRAFIA
http://epidemiologiamolecular.com/bacteriofagos/
http://apuntesbioquimicageneral.blogspot.mx/2014/04/genomas-virales.html
https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/10/bacteric3b3fagos-y-la-terapiafc3a1gica.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/10VirusTransposones_19489.pdf