Prctica 2.

Espectroscopa
de Absorcin
Atmica
Juan Francisco Ayala Cabrera
Anlisis instrumental
Lunes 2 de Diciembre de 2013

PRCTICA 2. ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN

ATMICA

Introduccin: NO SE PEDIA EN EL INFORME

La espectroscopa de absorcin atmica es una tcnica cuya finalidad
principal consiste en la cuantificacin de metales en las muestras de
inters. Se ha hecho uso de un espectrofotmetro de absorcin atmica
con llama utilizando la tcnica de fotometra de emisin o de llama
simplemente a nivel cualitativo para observar las diferencias en las
llamas de los distintos metales y absorcin atmica tanto con llama de
aire/acetileno como con llama de acetileno/protxido de nitrgeno.
Por tanto, los principales objetivos de esta prctica son:
Conocer de manera general el funcionamiento de un
espectrmetro de absorcin atmica de llama as como las
diferentes partes de la que consta el que est presente en el
laboratorio.
Estudiar cmo influyen sobre la seal de la muestra de calcio,
diversas variables como puede ser la adicin de interferentes
qumicos, inhibidores de interferencias, supresores inicos e
interferentes de efecto fsico de las disoluciones.
Cuantificar el calcio presente en una muestra de agua potable
usando para ello el mtodo de adiciones estndar.
Tcnicas e instrumentacin empleada:
En este caso, como se coment anteriormente se hizo uso de un
espectrofotmetro de absorcin atmica de llama (tanto de aire/acetileno
como de acetileno/protxido de nitrgeno) y se emple la tcnica de
fotometra de llama a nivel cualitativo y absorcin atmica para la
cuantificacin de Ca2+ en una muestra de agua potable.
RESPUESTA CORRECTA
Procedimiento experimental: NO SE PEDIA EN EL INFORME
En primer lugar se prepararon las disoluciones para el estudio de las
variables qumicas, fsicas e instrumentales que afectan a la seal,
haciendo uso de disoluciones madres de una determinada concentracin
en el in correspondiente, para lo cual se hizo uso de pipetas de 10mL y
una micropipeta con un rango de trabajo comprendido entre 100-1000L.
Los volmenes empleados para la preparacin de cada una de stas
disoluciones se muestran en la Tabla 1. Se debe tener en cuenta que
todas las disoluciones se enrasaron con agua destilada, salvo las
disoluciones formadas por mezclas de agua y etanol y glicerina
respectivamente.
Por otro lado, en los casos en los que se requiere menos de 1 mL de la
disolucin madre, se hizo uso de una micropipeta del rango comentado
anteriormente previamente ambientada con la misma y desechando la
punta de la misma tras su uso.

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ATMICA

Disolucin
(50mL)

V(mL)
Ca (100
ppm)

V(mL)
Al (100
ppm)

V(mL)
PO43(10000
ppm)

V(mL) La V(mL) K
(10000
(10000
ppm)
ppm)

5 ppm Ca
2,5
5 ppm Ca y 5
2,5
2,5
ppm Al
5 ppm Ca, 5 ppm
2,5
2,5
5,0
Al y 1000 ppm La
5 ppm Ca y 100
2,5
0,5
ppm fosfato
5 ppm Ca, 100
ppm fosfato y
2,5
0,5
5,0
1000 ppm La
5 ppm Ca y 1000
2,5
5,0
ppm K
5 ppm Ca con
agua:etanol
2,5
(60:40)
5 ppm Ca con
agua:glicerina
2,5
(60:40)
2 ppm Ca
1,0
10 ppm Ca
5,0
Tabla 1. Volmenes de las disoluciones madre empleados en la
preparacin de las muestras
A continuacin se realiz un pre-calibrado con tres puntos y se
determin la absorbancia y la respectiva concentracin de cada una de
las muestras.
Por otro lado, se tomaron muestras de las disoluciones madres y se
aspiraron en el espectrofotmetro de absorcin atmica observando
como cada elemento emita un color diferente en la llama y, por tanto, se
realiz un estudio cualitativo de fotometra de llama (posteriormente se
comentarn los resultados obtenidos).
Finalmente, se prepararon patrones de Ca empleando el mtodo de
adiciones estndar, por lo que se aadieron 20mL de la muestra de agua
potable correspondiente al laboratorio 11 del departamento de Qumica
Analtica, Nutricin y Bromatologa de la Universidad de la Laguna, y
diferentes concentraciones de Ca tal y como se puede observar en la
Tabla 2
Patrn/Muestr
a
1
2

V(mL)
muestra
20
20

V(mL) Ca (100
ppm)
0,5
1,0

[Ca] (ppm)
aadida
1,0
2,0

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ATMICA
3
20
1,5
3,0
4
20
2,5
5,0
Muestra
20
Tabla 2. Volmenes de disolucin de Ca (100 ppm) y muestra empleados
Una vez preparados los patrones y la muestra se determina su
absorbancia y se procede a la cuantificacin de Ca en la muestra de agua
potable.
Se debe tener en cuenta que antes de realizar las medidas en el
espectrofotmetro de absorcin atmica se tuvo que optimizar tanto la
lmpara como la propia seal de la llama, habindose ajustado
previamente los caudales de carburante y comburente. El calibrado de la
lmpara dio lugar a una ganancia del 22%.
Resultados experimentales:
En lo que respecta al estudio cualitativo de la fotometra de llama se
observ que para una disolucin de sodio la llama emita un color
amarillo anaranjado (589,0nm), para una disolucin de potasio el color de
la llama es rosa plido (766,5 nm), para el calcio es roja, para el bario es
verdosa (553,6nm) y para el litio rojo intenso (670,8nm). Estas diferencias
se deben a que los elementos emiten radiacin a diferentes longitudes de
onda y, como en este caso todos emiten en el visible, dan lugar a
distintos colores.
A continuacin veamos cmo afectan diferentes variables a la seal
analtica en la atomizacin. Para ello se emplearon dos llamas, en primer
lugar una llama de aire/acetileno y seguidamente una llama de
acetileno/protxido de nitrgeno.
En lo que respecta a la llama de aire/acetileno, para no emplear el
valor de la absorbancia de la disolucin de Ca2+ sola, se prepararon tres
disoluciones de diferentes concentraciones de este metal, lo cual permiti
realizar una curva de calibrado. Se debe tener en cuenta que el error
asociado a esta curva de calibrado es grande ya que el nmero de
patrones empleados es bajo. Para mejorar los resultados obtenidos se
debera haber empleado un calibrado mucho ms amplio incluyendo la
determinacin de sus parmetros de calidad as como la validacin del
mismo mediante el anlisis de los residuos (en el Excel adjunto se puede
ver como se ha aadido los valores obtenidos sin tener en cuenta ningn
tipo de calibrado aunque no han sido incluidos debido a la alta similitud
entre ambos). Por tanto, los valores obtenidos fueron:
Patrn
1
2
3

[Ca] (ppm)
Absorbancia Media
2
0,1179
5
0,2892
10
0,5225
Tabla 3. Valores del calibrado obtenidos para la llama de
aire/acetileno
Si se representa grficamente:

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ATMICA
0.6
0.5

f(x) = 0.05x + 0.03

R = 1

0.4
Absorbancia

0.3
0.2
0.1
0.0
1

10

11

[Ca2+] (ppm)

Grfico 1. Calibrado obtenido para la llama de aire/acetileno

En un primer acercamiento se puede visualizar que el resultado
obtenido es bastante adecuado aunque como se ha dicho anteriormente,
se hace necesario un la validacin del mtodo, la determinacin de sus
parmetros de calidad y el empleo de un mayor nmero de patrones.
Los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Disolucin (50mL)

[Ca2+]media
(ppm)
5,26
2,62
5,56
4,50

Variacin
(%)
0,00
-50,11
5,72
-14,51

5 ppm Ca
5 ppm Ca y 5 ppm Al
5 ppm Ca, 5 ppm Al y 1000 ppm La
5 ppm Ca y 100 ppm fosfato
5 ppm Ca, 100 ppm fosfato y 1000
ppm La
5,54
5,32
5 ppm Ca y 1000 ppm K
5,26
-0,02
5 ppm Ca con agua:etanol (60:40)
4,50
-14,51
5 ppm Ca con agua:glicerina (60:40)
4,56
-13,25
Tabla 4. Valores obtenidos y variacin respecto a la disolucin de
Ca2+para la llama de aire/acetileno
Se puede observar como en el caso de Al y fosfato, cuando estn
presentes suponen una interferencia qumica provocando la disminucin
de la absorbancia de la muestra y, por tanto, de la concentracin de
calcio que se determina. En el caso del fosfato se debe a que compleja
(NO COMPLEJA, FORMA PIROFOSFATO) al calcio, lo que provoca que
disminuya el nmero de tomos en el estado excitado (FUNDAMENTAL)
mientras que en el caso del Al se trata de una interferencia de
volatilizacin (VOLATILIACION?), lo cual provoca una disminucin de la
absorbancia debido a que se forma un xido doble: CaAl 2O4. Sin embargo,
en ambos casos al aadir lantano el valor obtenido se asemeja mucho
ms al que cabra esperar ya que permite es un inhibidor de
interferencias qumicas. En el caso del potasio, no produce efecto
ninguno en el caso de la llama de aire/acetileno. Finalmente, al variar el

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ATMICA
medio de la disolucin se produce lo que se conoce como interferencia de
efecto fsico que interfieren actuando sobre la nebulizacin que depende
de la salinidad, viscosidad, tensin superficial, densidad, etc. de la
disolucin o actuando sobre la propia llama ya que el aerosol al ser
inyectado en ella modifica su temperatura, composicin, transparencia,
homogeneidad, etc. Para minimizar stas ltimas interferencias, se deben
preparar patrones de calibracin con propiedades fsicas anlogas a la
muestra.
En el caso de la llama de acetileno/protxido de nitrgeno hay que
tener en cuenta que es ms energtica y, por tanto, debera presentar
menos interferencias. Se realiz el mismo procedimiento que en el caso
anterior empleando las mismas muestras. Se debe tener en cuenta que
los valores son un poco ms bajos a lo esperado debido a que la llama
era ligeramente oxidante. Los valores obtenidos para el calibrado fueron:

Patrn
1
2
3

[Ca] (ppm)
Absorbancia Media
2
0,0968
5
0,3066
10
0,5416
Tabla 5. Valores del calibrado obtenidos para la llama de
acetileno/N2O

Si se representa grficamente:
0.6
f(x) = 0.05x + 0
R = 0.99

0.5
0.4
Absorbancia

0.3
0.2
0.1
0.0
1

10

11

[Ca2+] (ppm)

Grfico 2. Calibrado obtenido para la llama de acetileno/N 2O

Al igual que en el caso anterior, En un primer acercamiento se puede
visualizar que el resultado obtenido es bastante adecuado aunque como
se ha dicho anteriormente, se hace necesario un la validacin del
mtodo, la determinacin de sus parmetros de calidad y el empleo de
un mayor nmero de patrones. Aun as podemos comprobar como la
sensibilidad es mayor para esta llama debido a que es ms energtica, lo
cual se ve reflejado en un mayor valor de la pendiente.
Los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Disolucin (50mL)

[Ca2+]media

Variacin (%)

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ATMICA

5 ppm Ca
5 ppm Ca y 5 ppm Al
5 ppm Ca, 5 ppm Al y 1000
ppm La
5 ppm Ca y 100 ppm fosfato
5 ppm Ca, 100 ppm fosfato y
1000 ppm La
5 ppm Ca y 1000 ppm K
5 ppm Ca con agua:etanol
(60:40)
5 ppm Ca con agua:glicerina
(60:40)
Tabla 6. Valores obtenidos y variacin

(ppm)
5,24
4,83

0,00
-7,82

7,43
7,15

41,71
36,41

7,33
7,47

39,86
42,40

4,96

-5,47

2,00
-61,80
respecto a la disolucin de Ca 2+
para la llama de acetileno/N2O
Junto con las conclusiones sacadas para la llama de aire/acetileno, se
debe tener en cuenta que en este caso, el lantano no acta como
inhibidor de interferencias qumicas sino que acta como una
interferencia qumica ms. En lo que respecta al potasio, acta como una
interferencia de ionizacin debido a las altas temperaturas en el
atomizador. Adems, se observa que en lo que respecta a las
interferencias fsicas, la densidad y la viscosidad juegan un papel muy
importante al aumentar la energa de la llama provocando una gran
disminucin en la concentracin de calcio.
RESPUESTA ACEPTABLE
Finalmente, se procede a la cuantificacin de una muestra de agua
potable anteriormente descrita mediante el mtodo de adiciones
estndar para eliminar el posible efecto matriz debido a otras sustancias
presentes en la muestra que puedan actuar sobre la seal que se
determina. Tras calibrar la lmpara la ganancia era 22% y adems se
calibr la seal de la llama. Los valores de absorbancia obtenidos fueron
los siguientes:
Patrn/Mue Absorba Absorba Absorba Absorba Absorbancia
stra
ncia 1
ncia 2
ncia 3
ncia 4
Media
1
0,2658
0,2677
0,2596
0,2701
0,2658
2
0,2937
0,2878
0,2975
0,2959
0,2937
3
0,3439
0,3389
0,3487
0,3441
0,3439
4
0,4316
0,4390
0,4291
0,4265
0,4316
Muestra
0,2178
0,2143
0,2117
0,2214
0,2163
Tabla 7. Valores de absorbancia obtenidos para los diferentes
patrones
Sin embargo, se trabajar con los valores medios, por lo que, si se
representa:
Patrn/Muestra

[Ca] (ppm)

Absorbancia

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ATMICA
aadida
Media
Muestra
0
0,2163
1
1
0,2658
2
2
0,2937
3
3
0,3439
4
5
0,4316
Tabla 8. Valores medios de absorbancia vs. Concentracin de patrn
Ca2+ aadida

0.50
0.40

f(x) = 0.04x + 0.22

R = 1

0.30
Absorbancia

0.20
0.10
0.00
0

[Ca2+] (ppm)

Grfica 3. Curva de calibrado mediante el mtodo de adiciones

estndar para Ca2+ en agua potable
En primer lugar se procede a la validacin del mtodo mediante el
anlisis del grfico de residuales (Grfico 4). Tal y como se puede ver en
el grfico expuesto a continuacin, la distribucin de los residuos es
aleatoria, existen aproximadamente el mismo nmero de residuos
positivos y negativos y, aunque la magnitud de los mismos no sea del
todo parecida, s que se contrarrestan entre ellos, por lo que se determina
que el mtodo es vlido para la determinacin de Ca 2+ en esta muestra
de agua potable.

Grfico de los residuales

Residuos

[Ca2+] ppm

Grfico 4. Grfico de residuales de la curva de calibrado de Ca 2+ en agua

potable

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ATMICA
Una vez validado el mtodo se procede a la determinacin de los
parmetros de calidad de la recta de calibrado:
0,21
0,00
(U. de
Ordenada en el origen =
7

4
absorbancia)
0,04
0,00
Pendiente =
3

2
(U. de abs./ppm)

R =

0,99
6

Sy/x =

0,00
6

Intervalo de linealidad til =

1,44

LOD (ppm) =

0,43

LOQ (ppm) =

1,44

Sensibilidad (U. de rea/ ppm)

=

0,04
3

(ppm)

5,00

En lo que respecta al intervalo de linealidad til, se debe tener en

cuenta que en este caso no tiene ningn valor ya que para otra muestra
de agua potable sera necesario otro calibrado debido a que se est
empleando un mtodo de adiciones estndar. Por tanto, si se extrapola y
se determina la concentracin de calcio se obtiene que:
[Ca2+]25mL =

5,09

(ppm)

Pero, en nuestro caso, se han aadido 20mL de la disolucin

problema, por tanto, la concentracin de Ca2+ en la muestra problema es:
[Ca2+] (ppm)=

6,36

0,35

Se cree que la muestra presentaba un exceso de dureza (calcio y

magnesio principalmente) por lo que debera haberse empleado menos
cantidad en el mtodo de los estndares ya que puede que se haya
perdido la linealidad. Sin embargo, en nuestro caso, aunque la
sensibilidad no es muy alta, s que se observa una tendencia lineal por lo
que, en un principio, el valor aportado se toma como vlido y, adems se
muestra como un resultado coherente.
RESPUESTA ADECUADA A LOS DATOS EXPERIMENTALES OBTENIDOS Y
UTILIZADOS

PRCTICA 2. ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN

ATMICA
CALIFIACION: 9,5