Introduccin:

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas
SEPARACION DE FOSFOLPIDOS POR CROMATOGRAFIA DE
CAPA FINA Y DETERMINACION DE COLESTEROL
EN YEMA DE HUEVO
Casillas Ramos Guillermo Arturo, Orta Camargo Berenice
3FV2 SECCION 2
Tabla resultados

Los lpidos son un tipo de biomolcula que se distingue

por su solubilidad caracterstica, son insolubles en agua y
solubles en disolventes orgnicos no polares, y estos se
clasifican en dos grupos principales simples y
compuestos.
Los lpidos simples ms importantes son el colesterol y
los cidos grasos, dentro de los lpidos completos se
pueden mencionar los fosfolpidos y los triglicridos.
El colesterol es una grasa presente en todas las clulas
del organismo. Se presenta en altas concentraciones en
la medula espinal pncreas y cerebro, pero se sintetiza
principalmente en el hgado y en el intestino delgado. El
colesterol se puede encontrar tambin en una yema de
huevo en una cantidad alrededor de 250 mg.
En general los lpidos llevan a cabo tres funciones
biolgicas, las molculas de lpidos bajo la forma de
bicapas lipdicas son componentes esenciales de las
membranas biolgicas si estos contienen cadenas
hidrocarbonadas sirven como depsitos de energa y
muchos acontecimientos de sealizacin intracelular e
intercelular involucran molculas de lpidos.

Objetivos:
Determinar la concentracin de colesterol en la yema de
huevo, por el mtodo de Lieberman-Burchard
Aplicar la tcnica de cromatografa en capa fina para la
separacin de fosfolpidos de la yema de huevo.
Discutir las ventajas de la tcnica de separacin respecto
a la cromatografa en papel

Resultados:
Imagen 1. Cromatograma revelado

Tubo no

Absorbencia

1
2
3
4
5

0.084
0.162
0.237
0.301
0.364

Pb

0.211

g
de
colesterol en el
tubo
de
reaccin

Discusiones:
A una muestra de yema de huevo se le realiz una
cromatografa en capa fina, para identificar con un
reactivo especfico distintos tipos de fosfolpidos
presentes en la misma, la imagen 1 indica el tipo de
fosfolpido revelado por cada uno. Segn las manchas del
cromatograma, se esperara segn la literatura que el
reactivo de bismuto identificar a la fosfatidil colina y la
esfingomielina, el reactivo de ninhidrina identificara al
fosfatidil etanol-amina y fosfatidil serina mientras que el
yodo revelara a la esfingomielina y triolena.
Se determin la concentracin de colesterol en media
yema de huevo usando la reaccin de LiebermanBurchard, donde el anhdrido actico provoca la
condensacin del grupo OH del colesterol y en conjunto
con el cido sulfrico, genera un compuesto coloreado
verde azulado.
Para calcular la concentracin de colesterol en una
muestra de 5 L se interpolo la absorbencia de esta
muestra en la curva tipo trazada de absorbencia contra
diferentes concentraciones de colesterol. La absorbencia
de la muestra fue de 0.211, lo que corresponde a una
concentracin de colesterol de -------- lo que corresponde
a ------------ de colesterol en media yema de huevo.

Conclusiones:

Bibliografa:
Eric E. Conn, Paul K. Stumpf, George Bruening,
Roy H. Doi, 1998, Bioquimica fundamental
Ed. Limusa.

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas
McKeeT. Bioquimica la base molecular de la vida, 4
edicin, editorial McGraw Hill inter americana.
David L. Nelson, Michael M. Cox, Claud. M Cuchillo,
Principios de Bioquimica, Ediciones Omega, p.p. 131135

Donald Voet, Judith G. Voet, Charlotte W. Pratt, 2007

Fundamentos de Bioquimica 2 edicion, editorial Medica
Panamericana p.p. 101