Los microARNs como biomarcadores de diagnstico y

pronstico en el cncer colorrectal

Abstracto
Los microARN (miRNA) son reguladores clave que participan en diversos tumores. Ellos
regulan el ciclo celular, la apoptosis y stemness cncer, metstasis y la quimio-resistencia
mediante el control de sus expresiones de genes diana. A continuacin, se discute
principalmente los usos potenciales de miRNAs en el diagnstico del cncer colorrectal
(CCR). Tambin arrojan luz sobre los importantes miARN objetivos correspondientes y en
los principales reguladores de miRNAs. Adems, se discute la actividad de los genes
miARN en la evaluacin del pronstico y la recurrencia de CRC, as como en la
modulacin de la capacidad de respuesta a la quimioterapia. Sobre la base de las diversas
funciones pro-oncognicos / anti-oncognicos de miRNAs, tambin se mencionan las
ventajas de una estrategia teraputica basada en la entrega de imita miARN. Juntos,
miARN parece ser una excelente herramienta para el seguimiento y la orientacin CRC
eficacia.
Palabras clave: microARN, diagnstico, pronstico, cncer colorrectal,
Biomarkers
Ncleo Consejo: Los microARN (miARN) regulan la oncognesis, la metstasis
y la quimioterapia controlando correspondientes expresiones de genes
diana. En este sentido, arrojar luz sobre el valor diagnstico y pronstico de
algunos miRNAs en el cncer colorrectal y el potencial de la terapia a base de
miARN tambin se discuti. Esperamos que este examen se ofrecer
informacin til para los investigadores que trabajan en un campo relacionado

INTRODUCCIN
MicroARNs (miRNAs) son endgenos ARNs cortos no codificantes que regulan
negativamente la expresin de genes diana mediante la unin a su 3'-UTR [ 1 ]. MiRNAs
funcionan como reguladores en un proceso biolgico amplio. La desregulacin de miRNAs
ejerce una fuerte influencia en la progresin de la enfermedad, cambiando la expresin de
genes diana en diversos tumores [ 2 , 3 ]. Cada vez son ms los datos han sugerido que los
miRNAs podran ser potenciales biomarcadores de cncer colorrectal en estadio temprano
(CRC) ya que no pueden ser degradados con facilidad y sus niveles de expresin de los
plipos colorrectales, sangre y heces pueden dar un indicio de la aparicin de la
enfermedad . CRC representa el 10% de los nuevos casos de cncer y es una de las
principales causas de muerte en todo el mundo (ms de 1,23 millones de muertes por ao)

[ 4 ]. Hasta la fecha, los mtodos comunes para el diagnstico precoz de CRC son la
tomografa computarizada (TC), prueba de sangre oculta en heces y la colonoscopia (SOH)
[ 5 ]. Sin embargo, la TC tiene una baja sensibilidad para el diagnstico de CCR precoz y
podra resultar en una gran exposicin a la radiacin [ 6 ]. La colonoscopia tambin es caro
y aumenta el riesgo de morbilidad o mortalidad debido a la perforacin del intestino [ 7 ],
aunque se puede detectar de manera efectiva ocurrencia neoplsica y permitir la extirpacin
de los plipos cuando se encuentran. FOBT se usa comnmente, pero otras enfermedades
del aparato digestivo como la colitis ulcerosa y las hemorroides tambin pueden causar
sangre en las heces [ 8 ] por lo que la deteccin de sangre oculta en heces no es una prueba
sensible para un diagnstico precoz. En conjunto, las metodologas actuales para la
deteccin temprana son ni sensibles ni especficos. La expresin diferencial de los genes
miARN en individuos CRC vs individuos normales es un evento comn y puede ser
fundamental para la aparicin y progresin tumoral. Lo que es ms, algunos miRNAs
desregulados estn asociados con la progresin y el grado de malignidad de CCR. Mltiples
estudios han identificado los valores de miRNAs en el diagnstico del CCR. Algunos
informes indican que el cambio de los niveles de expresin de miRNAs se correlacionan
estrechamente con la progresin del cncer y el pronstico [ 9 - 11 ]. A continuacin, se
revisa la literatura para resumir la asociacin de algunos miRNAs importantes con el
diagnstico en etapa temprana, el pronstico y la recurrencia de la CRC y discutir algunos
miRNAs que podran dar una pista para guiar las decisiones de tratamiento (tabla (Tabla
11 ).
Resumen de las funciones de los microRNAs en el cncer colorrectal

MIRNA

progresin de la enfermedad

biomarcador

Tratamiento

MiR-21

El aumento de miR-21 se

El aumento de miR-21 como

Disminucin de miR-

correlacion con la proliferacin

un indicador para la pobre OS

21 sensibiliza a las

CRC celular, invasin, metstasis en

y DFS en pacientes de Duke

clulas CRC a 5-FU-

los ganglios linfticos y la etapa

etapa [ 29 ] elevada miR-21

tratamiento [21 ]

clnica avanzada [ 11 , 23 , 24 ] miR-

como marcador para la

21 sigue aumentando durante el

metstasis linfticos en

proceso a partir de plipos

pacientes de estadio TNM

precancerosos de cncer temprano

[ 30 ] miR-21 en el suero [ 33 ]

[ 20 ] La expresin alta de miR-21

como un marcador no invasivo

MIRNA

progresin de la enfermedad

biomarcador

asociados con mal rendimiento en la

para detectar etapa temprana

fase II / III japoneses [ 11 , 21 ] y la

de CRC

Tratamiento

etapa II cohortes alemanes [ 21 ],

Hong Kong [ 25 ], Checa [ 26 ] y el
dans [ 27 , 28 ] cohortes de
pacientes con CRC

MiR-29

Elevada de miR-29a se correlaciona

MiR-29a como un

significativamente con la metstasis,

biomarcador para la deteccin

especialmente el hgado metstasis

precoz del CCR y la

[ 38 , 39 , 42 ] Regulacin al alza de

prediccin de la supervivencia

miR-29a asociado con un mejor

[ 38 , 43 , 44] miR-29b como

resultado a los 12 meses [ 43 , 44 ]

un biomarcador para DFS 5

La expresin de alto miR-29b

aos y OS (estadio III CRC)

asociado con un mayor de 5 aos

[ 48 ]

DFS y OS [ 48 ]

MiR-

Regulacin a la baja de miR-34a

MiR-34a como un

El aumento de miR-

34a

asociada con el desarrollo de CCR

biomarcador para predecir la

34a sensibiliza a las

[ 57 ] miR-34a predicados

recurrencia de fase II y III

clulas CRC a 5-FU-

recurrencia de pacientes con CRC

etapa de pacientes con CRC

tratamiento [ 58]

[ 59 ] El aumento de miR-34b / c

[59 ]

observada en los tumores ms

avanzados y se asocia con un mal
pronstico [ 60 ]

MIRNA

progresin de la enfermedad

biomarcador

MiR-

Alta frecuencia de metilacin de

El nivel de metilacin de miR-

124a

miR-124a en la inflamacin crnica

124a como un factor para

y el CRC [ 65 , 66 ] La metilacin de

evaluar el riesgo de

miR-124a est emergiendo durante la

carcinognesis en pacientes

oncognesis en pacientes con CU y

con CU [71 ]

podra ser utilizado para estimar el

riesgo individual de cncer [ 71 ]

MiR-

Alto nivel de miR-130b en etapas

El aumento de miR-130b en

130b

avanzadas del tumor (III-IV), eje de

etapas avanzadas del tumor

miR-130b-PPAR juega un papel en la [77 ]

novela avanzar hacia ms invasivo
CRC [ 77 ] miR-130b inhibe la
migracin de clulas CRC [ 75 ]

MIR-

Disminucin de miR-139-3p en los

MIR-139-3p como marcador

139-3p

tejidos de CRC [ 82 , 83 ] regulacin

para la supervivencia de los

a la baja de miR-139-3p que

pobres [ 82 ] miR-139-3p en el

disminuyen la supervivencia,

plasma utilizado para predecir

especialmente en pacientes con

la ocurrencia de CRC [ 84 ]

estadios TNM I y II [ 82 ]

MiR-

Alta expresin correlacionada con un

MiR-155 como un fabricante

155

estadio TNM avanzado y metstasis

de pronstico para la SG y

[ 85 ] El aumento de expresin de

SLE de pacientes con CRC

miR-155 postoperatoria

Tratamiento

MIRNA

progresin de la enfermedad

biomarcador

correlacionado con la recurrencia y

[ 11 , 86 ]

Tratamiento

metstasis de CCR [87 ]

MiR-

La expresin de miR-224 asociado

MiR-224 como un predictor de

Supresin de miR-224

224

aument con el crecimiento del

la recada de corta duracin

CRC sensibiliza a la

tumor [ 89 ] y la metstasis de CCR

ms corta y la supervivencia

quimiorradioterapia

[ 90 ] miR-224 inhibe la migracin

libre de metstasis [ el

[ 94 ]

de clulas CRC [ 95 ]

90 - 93 ]

MiR-

MiR-378 es hasta reguladas en

MiR-378 en el plasma

378

muestras de CRC [ 96 , 97 ] y

utilizado para predecir la

promueve la supervivencia celular, la

aparicin de CCR

invasin y la angiognesis [ 98 , 99 ]

[ 103 Reduccin] de miR-378

La expresin de miR-378 se

en los tejidos de CRC como un

incrementa en el plasma de pacientes

predictor para el sistema

de CRC, y rpidamente se cae dentro

operativo corta [ 104 ]

de 4-6 meses despus de la ciruga

[103 ] Disminucin de miR-378 en
tejidos y lneas celulares de CRC se
asocia con aumento del tamao del
tumor, metstasis y corta OS
[ 104 , 105 ]

UC: La colitis ulcerosa; CRC: El cncer colorrectal; OS: La supervivencia global; DFS: la
supervivencia libre de enfermedad.

MiR-21

MiR-21 es uno de los miRNAs oncognicas ms ampliamente investigados cuya expresin

se upregulated frecuencia en CRC [ 12 - 14 ]. La sobreexpresin de miR-21 se correlaciona
estrechamente con la proliferacin CRC celular, invasin, metstasis en los ganglios
linfticos y la etapa clnica avanzada, todos los cuales son los principales factores
pronsticos de la CRC. MiR-21 se puede regular a la baja varios genes supresores de
tumores, incluyendo PTEN y RECK. La protena supresora de tumores PTEN acta como
una fosfatasa de lpidos para desfosforilar fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato (PIP3),
antagonizar el PI3K / Akt va [ 15 ]. Esta va tiene un efecto importante en numerosas
funciones biolgicas, como la proliferacin celular, la adhesin, la angiognesis, la
migracin, invasin, el metabolismo y la anti-apoptosis [ 16 ]. Adems, la accin clave de
RECK (protena rica en cistena reversin inductor con motivos Kazal) es la de suprimir la
metstasis de las clulas mediante la inhibicin de metaloproteinasas de la matriz (MMPs)
implicadas en la degradacin de la matriz extracelular (ECM) [ 17 ]. Todo esto sugiere el
papel oncognico de miR-21 en el CCR.
CRC tejido se ha informado ampliamente sobre, como se discuti en la cabeza y el
carcinoma de clulas escamosas del cuello (CECC), el cncer no microctico de pulmn de
clulas (NSCLC) y carcinomas del sistema de digestin [ 18 , 19 ]. Por otra parte, algunos
pero no todos los plipos terminan como los tumores malignos a travs de una cadena de
aumento de los eventos genticos. Por lo tanto, es importante para el diagnstico precoz
para determinar qu plipo tiene el potencial de convertirse en carcinoma invasivo y a
continuacin, para eliminar a tiempo. Estudios de acumulacin muestran que miR-21 se
correlaciona con la progresin maligna de los plipos y es altamente expresado en CRC
[ 20 - 22 ]. Yamamichi et al [ 23 ] evaluaron la expresin de miR-21 durante el progreso de
CRC en 39 tumores colorrectales extirpados quirrgicamente y 34 CRC plipos
colorrectales por va endoscpica resecados utilizando cido nucleico in situ hibridacin y
se encontr que el miR-21 se mantenga en crecimiento a partir de plipos precancerosos
que el cncer temprano, aumentando an ms desde la temprana a la etapa avanzada de la
CRC. MiR-21 a partir de tejidos de CRC tambin se puede usar para identificar el
pronstico. Oue et al [ 12 ] utilizaron fijado en formalina, embebidas en parafina (FFPE)
los tejidos tumorales de 301 pacientes con CCR en las diferentes etapas TNM para discutir
la relacin entre el miR-21 y el pronstico y encontraron que la alta expresin de miR-21 se
asocia significativamente con un mal supervivencia. Adems, un meta-anlisis de miR-21
nivel de expresin en tejidos CRC 1174 sugiri que el aumento de miR-21 puede ser
predictivo de supervivencia de los pobres; Sin embargo, el nivel de CEA muestra ninguna
correlacin con la expresin de miR-21 [ 24 ]. La relacin entre Pdcd4 (muerte celular
programada 4) y miR-21 es de gran inters, as porque miR-21 posttranscriptionally regula

Pdcd4 y Pdcd4 suprime la invasin y intravasacin por la supresin de la expresin del

receptor de uroquinasa relacionados invasin ( u-PARgen) a travs de los factores de
transcripcin Sp1 / Sp3 [ 25 ]. Ms importante an, Pdcd4 fue revelado por Asangani et al
[ 26 ] para ser una novela y el factor pronstico independiente en el CCR. Todos ellos
sugirieron que el miR-21 puede ser un biomarcador de mal pronstico. Consistentemente,
la expresin de miR-21 en una cohorte japonesa ( n = 156) y una cohorte de Alemania ( n =
145) se midi y se analizaron por el grupo de Harris. Elevada expresin de miR-21 se
correlaciona con mal pronstico en ambos II / III II cohortes alemanes y japoneses Etapa
[ 12 ]. Resultados similares se observaron tambin en otra cohorte japonesa [ 11 ],
Americana [ 13 ], Hong Kong [ 13 ], Checa [ 27 ] y Dinamarca [ 28 , 29 ] cohortes de
pacientes con CRC.
Adems, el significado pronstico del nivel de miR-21 se investig en 306 pacientes con
CCR en la etapa cada uno de Dukes. Sin embargo, un impacto pronstico significativo no
se demuestra en el anlisis de pacientes en estadio de Dukes, que puede ser debido a la baja
tasa de recurrencia y muerte.Este estudio mostr que la alta expresin de miR-21 indica una
baja supervivencia global (SG) y la supervivencia libre de enfermedad (DFS) en pacientes
de Duke en fase B, C y D [ 30 ]. El valor pronstico de miR-21 tambin se evalu para el
estadio TNM. El sistema TNM describe un grado en el que el tumor ha invadido la pared
intestinal y diseminado a los ganglios linfticos regionales, as como los rganos
distantes. En comparacin con los casos T1, T2 y T3, el grupo de Harris encontr que miR21 nivel de expresin es significativamente elevado en los casos de T4. Un resultado
similar tambin se observ en la comparacin de N1 a N0 [ 12 ]. Adems, los pacientes con
un alto nivel de expresin de miR-21 son insensibles a la terapia con 5-FU, mientras que la
disminucin de miR-21 permite a los pacientes para lograr una mejor respuesta a 5FU. Recientemente, las terapias basadas anti-miARN han logrado un progreso primordial
en el tratamiento de los pacientes con infeccin por hepatitis C crnica [31 ]. Por lo tanto,
las terapias basadas anti-miR-21 parecen ser prometedores para el futuro.
Ms importante an, el valor pronstico de miR-21 en el suero y heces de pacientes con
CRC tambin ha sido ampliamente investigado. Debido a la ineficacia de un mtodo de
amplificacin directa, la importancia de la circulacin de miR-21 era vago
[ 32 ]. Recientemente, ensayos TaqMan como un enfoque efectivo fue utilizado por Kanaan
et al [ 33 ] y se encontraron upregulated dramticamente el plasma de miR-21 en pacientes
con CCR. Toiyama et al [ 14 ] investigado sistemticamente la expresin de miR-21 en
medio recogido de 2 lneas CRC celulares y el suero de 12 pacientes con CCR y 12
voluntarios sanos y concluy que el miR-21 es un secretora miARN. Se ampli an ms la
verificacin de hacer circular la expresin de miR-21 en 246 casos de CCR, 53 controles y
43 pacientes con plipos. Tambin probaron si el suero de miR-21 refleja la de los tejidos

de CRC en 166 muestras de CRC emparejados. MiR-21 aumenta de manera significativa en

el suero de pacientes con plipos precancerosos y CRC. En particular, su expresin
disminuye en el suero de los pacientes despus de la ciruga. Por otra parte, el suero de
miR-21 expresin muestra una aparente diferencia entre los pacientes con plipos
precancerosos y controles. Acumulado nivel de miR-21 se correlaciona con el tamao del
tumor, la metstasis y la supervivencia de los pobres. Por lo tanto, el miR-21 en el suero
podra ser un biomarcador no invasivo ideal para detectar CRC temprano y evaluar el
pronstico. Adems, la expresin de miR-21 en muestras de heces es diferente en
individuos sanos en comparacin con individuos CRC. Link et al [ 34 ] encontraron una
mayor expresin de miR-21 en las heces de 29 pacientes con CCR en comparacin con los
8 individuos sanos. Un resultado similar tambin fue revelado por Wu et al [ 35 ] de 88
pacientes con CCR y 101 controles sanos. Adems, se inform de miR-21 en etapas de
carcinoma ms tarde TNM para exhibir una expresin ms pronunciada [ 36 ]. En resumen,
la expresin de miR-21 podra ser un prometedor biomarcador para predecir el resultado de
los pacientes con CCR.
familia miR-29

Familia miR-29 se compone de tres miembros: miR-29a, 29b MIR-MIR-29c y. Los

miembros de esta familia han demostrado ser dysregulated en muchos tipos diferentes de
cnceres. MiR-29 miembros de la familia ejercen la funcin de orientacin por genes
implicados en la proliferacin celular, la senescencia y la metstasis en los niveles
genticos y epigenticos, lo que les hace reguladores eficaces de la tumorignesis y la
progresin del cncer [ 37 ].
MiR-29a: Huang et al [ 38 ] analizaron 100 muestras de CRC y 59 controles y se encontr
que los niveles de expresin de miR-29a en el plasma son significativamente
upregulated. Los autores investigaron an ms la importancia diagnstica de plasma miR29a en 37 lesiones tempranas de CRC y encontraron un aumento evidente en la expresin
de miR-29a en comparacin con la del control, lo que sugiere el plasma miR-29a parece ser
un nuevo biomarcador para la deteccin temprana de CRC [38 ]. Adems de servir como
una herramienta no invasiva para detectar el CRC antes, el valor pronstico de miR-29a
tambin se puede aplicar a la deteccin precoz del CRC metstasis. Tang et al [39 ]
analizaron los niveles de expresin de miR-29a y ARNm KLF4 en 85 casos utilizando la
reaccin en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativa (QRT-PCR). Debido KLF4
ha sido identificado como una nueva diana de miR-29a, KLF4 inhibe la metstasis a travs
de la inhibicin de la MMP-2 y la regulacin positiva de la E-cadherina [ 40 , 41 ]. Tang et
al [ 39 ] encontr que la baja expresin KLF4 ARNm se correlaciona con la
metstasis. Ms importante an, se observ una correlacin entre la expresin de miR-29a

y la metstasis en este estudio, con elevada miR-29a que indica metstasis y peor
supervivencia de pacientes con CRC. Wang et al [ 42 ] reclut a un total de 114
participantes, incluyendo 58 pacientes con metstasis hepticas y 56 pacientes con CCR no
metastsico, en su estudio, ya que la metstasis heptica colorrectal es ms
comn. Descubrieron que la expresin de miR-29a en el suero es significativamente
elevada en pacientes con metstasis hepticas de cncer colorrectal. Adems, la expresin
significativamente elevado de miR-29a se encontr en pacientes con CCR avanzado estadio
tumoral T, mientras que el miR-29a muestra un alzado no significativa en los pacientes con
estadio tumoral avanzado N. En consecuencia, descubrieron que miR-29a puede servir
como una herramienta de cribado no invasivo prometedor econmica para la deteccin
temprana de metstasis hepticas colorrectal [ 42 ]. En conclusin, la alta expresin de
miR-29a se asocia con un mal pronstico y la metstasis.
En cuanto a la prediccin de la recurrencia temprana de CRC, Kuo et al [ 43 ] encontr que
tanto el miR-29a y miR-29c muestran disminucin de los niveles de expresin de manera
significativa en 43 pacientes con recurrencia temprana en comparacin con 35 pacientes de
recurrencia no temprano. El aumento de miR-29a o el aumento de miR-29c sugiere un
mejor resultado a los 12 meses. Sin embargo, slo miR-29a se puede utilizar como un
factor de prediccin de la recurrencia temprana. Que el miR-29c no pueda predecir la
recurrencia temprana puede ser debido a un seguimiento corto o un pequeo tamao de la
muestra [ 43 ]. Por otra parte, tambin se encontr el valor pronstico de miR-29a en la
etapa II CRC. Weissmann-Brenner et al [ 44 ] examinaron el perfil de expresin de
microARN matriz en 51 etapas I y II etapa de 59 muestras de CRC y luego 903 expresiones
miARN se verificaron mediante qRT-PCR. Los autores definieron mal pronstico como
recurrencia dentro de los 3 aos de la ciruga. Sus datos revelaron que en la etapa II, el
miR-29a muestra nicamente una diferencia obvia entre los pacientes con buen pronstico
y los que tienen mal pronstico. Sin embargo, en la etapa I, no hay miRNA con diferentes
expresiones entre los dos grupos. El resultado mostr el valor pronstico de miR-29a en la
recurrencia en pacientes con estadio II. Tambin concluyeron que el aumento de la
expresin de miR-29a se asocia con un DFS ya [ 44 ].
MiR-29b: Como miembro de la familia de miR-29, miR-29b es el ms altamente
expresado en la familia miR-29 y se encuentra en dos loci genmico [ 45 ]. MiR-29b puede
inhibir la proliferacin e inducir la apoptosis en clulas de CRC y mediar en la inhibicin
de la transicin epitelio-mesenquimal (EMT), que est estrechamente relacionado con el
pronstico de la CRC. Por otra parte, Yuan et al [ 46] realiz QRT-PCR para probar el miR29b en 41 muestras de CRC emparejado emparejados-e inform que el miR-29b se reduce
significativamente en el CCR, lo que sugiere que el miR-29b est asociada con el tamao
del tumor, estadio clnico avanzado y los ganglios linfticos metstasis de CCR

[ 46 , 47]. Por otra parte, Inoue et al [ 48 ] analizaron la expresin de miR-29b en 245

pacientes con CCR. Los pacientes fueron divididos en dos grupos: los que debajo de la
mediana (bajo) y aquellos por encima de la media (alta) de la expresin de miR-29b. Su
anlisis revel que la expresin de miR-29b alta se asocia significativamente con un mayor
de 5 aos DFS y OS. En sub-anlisis de cada etapa, se encontr que la expresin de miR29b tiene un impacto pronstico de 5 aos DFS exclusivamente en pacientes con estadio III
CRC, que mostr que la baja expresin de miR-29b es un predictor independiente de un
menor de 5 aos DFS. Adems, la baja expresin de miR-29b es predictivo de metstasis
en los ganglios linfticos y una clasificacin T patolgica, lo que indica el valor pronstico
de miR-29b en la etapa III CRC [ 48 ]. Por lo tanto, la desregulacin de miR-29a y miR29b puede servir como un biomarcador para predecir la recurrencia temprana y DFS ms
cortos en CRC.
MiR-34

La familia de los genes miARN-34 (miR-34a, 34b MIR-MIR-34c y) se ha notificado a ser

un supresor tumoral regulada por el TP53 y la hipermetilacin del ADN. La familia de
miR-34 influye en una serie de actividades celulares de cncer, tales como stemness,
metstasis y la quimio-resistencia [ 49 ]. Es bien sabido que el miR-34 se regula
directamente por p53 a nivel transcripcional y miR-34 ejerce efectos aguas abajo de p53 a
travs de la orientacin c-MET, CDK6 y c-MYC para regular detener la proliferacin e
inducir la apoptosis [ 50 ]. Los resultados del tratamiento miR-34a en la regulacin
negativa de NOTCH1 y la induccin de la apoptosis [ 51 ]. El nivel de expresin de miR34a es crucial para las clulas CRC de auto-renovacin o dividir. Adems, la sealizacin
de Notch regula la divisin asimtrica de las clulas madre. Los altos niveles de miR-34a
regulan negativamente la sealizacin de Notch y suprimen la divisin simtrica, lo que
reduce la produccin de clulas madre del cncer de colon (CCSC) [ 52 , 53 ].
Proteinasa activados por los receptores 2 (PAR2) est positivamente correlacionado con la
progresin tumoral en el CCR. Ma et al [ 54 ] describe que miR-34a es inhibida por PAR2,
resultando en la regulacin positiva de la ciclina D1 y TGF- en las clulas de CRC. MiR34a promotor de la metilacin en los tejidos de CRC se asocia con
metstasis. Consistentemente, en 101 de 111 CRC tejidos y en 9 de 9 lneas celulares, la
familia miR-34 es silenciado epigentico; por lo tanto, los autores sealaron que la
metilacin de miR-34a promueve la motilidad y la metstasis [ 55 , 56 ]. En otro estudio, la
regulacin a la baja de miR-34a se not en algunos pacientes con CRC, lo que indica el
papel de miR-34a en la Convencin de desarrollo [ 57 ].
El valor potencial tratamiento de miR-34a tambin fue probado. En las clulas 5-FUresistentes CRC DLD-1, se observaron niveles bajos de miR-34a. La restauracin de miR-

34a sensibiliza las clulas de manera significativa al tratamiento con 5-FU y inhibe el
crecimiento celular [ 58 ]. Adems, miR-34a como un biomarcador recurrencia se ha
investigado. En dos cohortes independientes de 268 pacientes con CRC, la expresin de
miR-34a se asocia positivamente con la supervivencia de DFS y puede servir como un
factor pronstico de recidiva del CCR. Adems, en comparacin con los pacientes con
expresin de p53-negativos, miR-34a es mucho mayor en aquellos con la expresin de p53positivo.Los autores concluyeron que miR-34a inhibe el crecimiento celular y la invasin
de CRC de una manera dependiente de p53 y predice recurrencia en la etapa II y III
pacientes con CRC [ 59 ].
Ms recientemente, los efectos de la familia miR-34 en el pronstico tambin se estudiaron
de manera sistemtica en el CCR y un aumento de miR-34b / c predominantemente
expresados en tejidos estromales se revel que se asocia con un mal pronstico en el CCR
[ 60 ]. La relacin entre miR-34b / c y el desarrollo de la enfermedad se investig en
muestras de CRC de 159 americano y 113 chino de QRT-PCR. Encontraron que el miR-34b
/ c se acumula en tumores avanzados y asociada con un mal mortalidad especfica por
cncer en dos cohortes independientes. TP53 regula la expresin de miR-34b / c en el nivel
transcripcional. Por otra parte, en comparacin con el tejido epitelial, miR-34b / c es mucho
mayor en el estroma del cncer. En conjunto, el miR-34 b / c puede contribuir a la
interaccin con el cncer estromal asociado con la progresin del CCR. Todos los datos
presentados anteriormente revelaron que la familia miR-34 podra ser una herramienta ideal
para predecir el pronstico y la recurrencia en el CCR.
MiR-124a

MiR-124a es conocido como un gen supresor de tumor, que se ha demostrado que regular a
la baja oncognico quinasa dependiente de ciclina 6 (CDK6) que participan en la
carcinognesis, lo que resulta en la detencin del ciclo celular en la transicin G1-S puesto
de control [ 61 , 62 ]. Se inform de miR-124a que se expresa en niveles bajos en CRC
debido a la metilacin [ 63 ]. Por un lado, el miR-124a es el ms frecuentemente metilado
en el CCR en comparacin con otros tipos de tumores, lo que indica el estado de metilacin
de miR-124a puede ser un marcador especfico de la CRC. Como se ha mencionado por
Deng et al [ 64 ], la menor expresin de miR-124a est asociado con la metilacin de la
misma y el tratamiento con 5-aza-2 'desoxicitidina puede inducir la expresin de miR124a. Entre CRC, cncer del pncreas, estmago, hgado, pulmn, mama, rin y prstata y
melanoma, encontraron que CRC muestra la ms alta frecuencia de metilacin de miR124a y una alta frecuencia de metilacin de miR-124a tambin se observ en plipos
[ 65 , 66 ]. Juntos, la metilacin de miR-124a puede ser un evento temprano en todas las
vas de la carcinognesis colorrectal. Por otro lado, la transcripcin de miR-124a es

controlado por la metilacin del ADN de las regiones promotoras de tres isoformas miR124a (miR-124a-1, 2 y 3) en el CCR [ 61 , 62 , 67 , 68 ]. Se saba que la metilacin
aberrante de miR-124a se induce en la inflamacin crnica [ 69 ]. En la mucosa colorrectal
de pacientes peditricos con colitis ulcerosa (UC), se inform de miR-124a para regular
positivamente la expresin de transductor de seal y activador de la transcripcin 3
(STAT3), que es un factor importante en la respuesta inflamatoria [ 70 ], lo que indica que
silenciamiento de miR-124a est relacionada con la promocin de la inflamacin en la
mucosa colorrectal a travs de la va de sealizacin STAT3. Ueda et al [ 71 ] a prueba el
nivel de miR-124a en 40 pacientes con CU sin CRC, 4 pacientes con CCR o displasia, 8
pacientes con CCR espordicos y 12 controles normales. Encontraron que el miR-124a-1, 2
y 3 genes son todos CDK6 metilado y dependiente de ciclina, como el objetivo de miR124a, se eleva en muestras neoplsicas. El nivel de metilacin de miR-124a-3 es
significativamente mayor en la pancolitis que en AT y los niveles de metilacin en CU de
larga son ms altos que en el corto plazo la UC. Adems, en contraste con los pacientes sin
larga data UC y pancolitis, el nivel de metilacin de los pacientes con estos factores de
riesgo muestra un aumento 7,4 veces. En conjunto, la metilacin de miR-124a-3 est
emergiendo durante la oncognesis en pacientes con CU y podra ser utilizado para estimar
el riesgo individual de cncer.
MiR-130b

Estudios previos demostraron que el miR-130b se desregula significativamente en algunos

tumores, como el CRC, de clulas claras cncer de clulas renales (ccRCC), cncer de
hgado, cncer de pncreas y los osteosarcomas, y contribuir a la tumorignesis
[ 72 - 76 ]. En 52 pares de tejidos de cncer de pncreas, Zhao et al [ 72 ] mostr que el
miR-130b est regulada negativamente de manera significativa, lo que se correlaciona con
un peor pronstico, aumenta el tamao del tumor, el estadio TNM tarde, invasin linftica y
metstasis a distancia del cncer de pncreas. Wu et al [ 74 ] utiliza la tecnologa de
microarrays para el perfil de expresin de los genes miARN de 28 especmenes ccRCC
localizadas y metastsicos y 78 tejidos benignos y muestras de pacientes ccRCC que tenan
por lo menos 5 aos de seguimiento si hay metstasis desarrollado. Se especula que el miR130b est asociada con la metstasis ccRCC y pronstico. Sin embargo, en el CCR,
Colangelo et al [ 77 ] identific que el miR-130b se dirige directamente a los receptores
proliferador de peroxisoma activados (PPAR). Por otra parte, se proporcionaron datos que
el miR-130b ejerce funciones biolgicas principalmente a travs de la supresin de los
PPAR, que conduce a la desregulacin de la E-cadherina, Caracol, PTEN y VEGF. Como se
encontr el mayor miR-130b en estadios tumorales III-IV de la CRC, propusieron que el
eje de miR-130b-PPAR juega un papel en la novela avanzar hacia los tumores ms
invasivos. Por lo tanto, el miR-130b-PPAR puede ser un prometedor biomarcador para

predecir el pronstico. Por otra parte, se inform anteriormente la funcin inhibidora de

miR-130b en la migracin y la invasin de CRC, ya que regula a la baja la expresin de la
integrina 1 [ 75 ], que media la migracin de clulas en una amplia variedad de cnceres
humanos. El bloqueo de la integrina 1 puede inhibir la transformacin de clulas de cncer
de mama humanos [ 78 , 79 ]. Todo lo anterior nos dio un indicio de que el miR-130b
puede tener un valor potencial en el pronstico de la CRC.
MIR-139-3p

Anteriores estudios informaron la expresin anormal de miR-139-3p en algunos tipos de

cnceres humanos, tales como el cncer de la corteza suprarrenal, los clusters en el
carcinoma de vejiga y el CRC [ el 80 - 82 ]. La evidencia acumulada sugiere adems el
papel importante de miR-139-3p como un biomarcador molecular del CCR. Chen et al
[ 83 ] proyect la diferencia de expresin de miR-139-3p entre los tejidos de CRC,
muestras normales emparejados y HT-29 clulas CRC tratados con celecoxib a travs
miARN microarrays, a continuacin, se verifica la lectura de QRT-PCR. Encontraron que el
miR-139-3p est regulado por disminucin en los tejidos de CRC y que la expresin de
miR-139-3p es diferente de principios a la etapa avanzada. Datos similares tambin fueron
reportados por Kanaan et al [ 84 ] en que el miR-139-3p en el plasma puede ser usada para
distinguir a los pacientes de CRC y de los individuos normales mediante el examen de 12
controles sanos y 20 pacientes de CRC. Por lo tanto, el miR-139-3p puede tener un papel
potencial en el diagnstico precoz del CCR. Adems, el miR-139-3p puede estar
relacionado con un mal pronstico del CCR. Liu et al [ 82 ] examin el nivel de expresin
de miR-139-3p en 63 pares de CRC y los tejidos adyacentes. En comparacin con los
controles normales adyacentes, los niveles de expresin de miR-139-3p en los tejidos CRC
se redujeron notablemente y la disminucin de miR-139-3p se asocia significativamente
con un mal sistema operativo, especialmente en pacientes con estadios TNM I y II. En
conclusin, el miR-139-3p tiene potencial como un biomarcador de diagnstico y
pronstico precoz del CCR.
MiR-155

MiR-155 es codificada por el transcrito no codificante de la protena del gen clster

integracin de clulas B ( BIC gen). La expresin alterada de miR-155 se ha descrito en
varios tumores, lo que refleja la estadificacin, el progreso y los resultados del
tratamiento. Zhang et al [ 85 ] encontr un aumento significativo de miR-155 en tejidos de
cncer en comparacin con las muestras normales de la misma despus de analizar 76
muestras clnicas de pacientes con CRC. MiR-155 puede suprimir E-cadherina y regular al
alza ZEB-1 a travs de la promocin de la expresin de claudina-1, lo que lleva a un
aumento de la migracin celular y la metstasis. Adems, existe una correlacin entre la

expresin de miR-155 y la metstasis de los ganglios linfticos, el estadio TNM avanzado y

metstasis a distancia. En conjunto, todos estos resultados indicaron que miR-155 juega un
papel importante en el desarrollo y la metstasis CRC [ 85 ]. En otro estudio, Shibuya et al
[ 11 ] revel que los pacientes con aumento de miR-155 muestran OS ms pobre y DFS que
aquellos con disminucin de miR-155, lo que sugiere que miR-155 tiene valores
pronsticos independientes para OS y DFS de pacientes con CRC. El enlace de miR-155
con el mal pronstico en el CCR tambin fue probado por Lv et al [ 86 ] en el anlisis
multivariante. En consonancia con los datos anteriores, Hongliang et al [ 87 ] evaluaron los
niveles de antgeno carcinoembrionario (CEA) y miR-155 en 84 pares emparejados
muestras de pacientes con CCR antes y despus de la ciruga. Es bien sabido que el CEA se
utiliza principalmente para el pronstico, la observacin de efecto curativo y el seguimiento
de recurrencia y metstasis en CRC. Los autores encontraron que la expresin de miR-155
es significativamente mayor en los tejidos de CRC y est especialmente asociada con la
recada del tumor y la metstasis. Antes de la ciruga, miR-155 expresin en los pacientes
se correlaciona positivamente con los niveles de CEA en suero y el alto nivel de expresin
postoperatorio miR-155 se asocia con la corta duracin antes de que aumenta el nivel de
CEA en suero de nuevo [ 87 ]. Por otra parte, Lv et al [ 86 ] descubrieron que no hay
ningn cambio en el suero miR-155 nivel de expresin entre los controles y los pacientes
en estadio I CRC despus de medir el suero de 146 pacientes con CRC y 60 controles
sanos. Sin embargo, hay una gran elevacin de la expresin de miR-155 en estadios II-IV
pacientes. Por lo tanto, miR-155 en suero no se puede utilizar como un biomarcador para el
diagnstico precoz [ 86 ]. En su conjunto, el miR-155 en los tejidos combinados con suero
CEA podra proporcionar pistas concretas para el diagnstico de CCR y la prediccin de la
recurrencia.
MiR-224

MiR-224 se informa constantemente de que se upregulated en el CCR y puede afectar a

muchos procesos celulares asociados con el cncer, incluyendo la proliferacin celular, el
crecimiento, la diferenciacin y muerte celular [ 88 ]. Se observ una alta expresin de
miR-224 en los tejidos de CRC.El significado clnico-patolgica de miR-224 en el CCR fue
recientemente evaluado en 110 pacientes con CCR por Liao et al [ 89 ], quienes
encontraron que el aumento de expresin de miR-224 se asoci significativamente con un
fenotipo agresivo y de mal pronstico del CCR. Tambin sealaron que el miR-224 acelera
el G 1 transicin de la fase S / travs de la activacin de la sealizacin / Akt FOXO3a por
la orientacin PHLPP1 y PHLPP2, antagonistas de PI3K / Akt. MiR-224 tambin regula a
la baja p21Cip1 y p27Kip1 y aumenta la expresin de ciclina D1. Por lo tanto, el miR-224
promueve el crecimiento tumoral CRC [ 89 ]. El estudio realizado por el grupo de Nicoloso
[ 90 ] admite que el miR-224 es un activador para CRC metstasis a travs de la

orientacin SMAD4 y miR-224, solo o combinado con SMAD4, puede ser un marcador
pronstico independiente para la supervivencia de los pacientes con CCR. Los resultados
clnicos correlacionados con el estado de miR-224 se analizaron en 6 conjuntos de 449
casos de CCR con el fin de evaluar la diferencia en la supervivencia entre los pacientes con
niveles bajos o altos de expresin de miR-224. Sus datos indicaron que la expresin de
miR-224 aumenta consistentemente con la carga tumoral y el estado de microsatlites
estabilidad y mejora la CRC metstasis a travs de la orientacin SMAD4. Los pacientes
con altos niveles de miR-224 muestran OS ms cortos en mltiples cohortes CRC y ms
corto de supervivencia libre de metstasis [ 90 , 91 ]. En consonancia con los datos de
laboratorio de Nicoloso, Zhang et al [ 92 ] tambin seal que SMAD4 est regulada por el
miR-224, lo que sugiere el miR-224 como un nuevo biomarcador para la recurrencia de la
CRC. Se recogieron un total de 108 en estadio I-II pacientes con cncer colorrectal que
recibieron reseccin radical y evaluar la informacin clnico-patolgico de 40 pacientes con
recidiva tumoral y 68 sin recada dentro de los 3 aos despus de la ciruga. Sus datos
sugirieron que el miR-224 se increment notablemente en los tejidos de CRC y de esta
regulacin al alza est asociada con la recurrencia y la mala DFS. Mediante el anlisis de
los plipos precancerosos, una conclusin similar se consigue mediante Adamopoulos et al
[ 93 ]. Adems, el miR-224 tambin tiene algunos vnculos con el tratamiento de la
CRC. Quimiorradioterapia preoperatoria (CRT) es el tratamiento estndar para el cncer de
recto localmente avanzado y miR-224 fue encontrado para dar lugar a un aumento de la
resistencia a la TRC en lneas celulares de CRC [ 94 ]. En otro estudio, cuando la expresin
de miR-224 se investig en 79 muestras de pacientes con CRC y 18 controles sanos, miR224 en los tejidos de CRC se downregulated en gran medida. Por otra parte, el miR-224
suprime la capacidad migratoria de la lnea celular CRC travs de la orientacin Cdc42. En
una palabra, esta investigacin indica la funcin vital de miR-224 en la supresin de la
migracin de clulas de CCR. Concluyeron que miR-224 se podra usar como un
biomarcador prometedor para predecir el desarrollo de CRC. La alta expresin de miR-224
predice la recada de corta duracin y la supervivencia libre de metstasis ms corto y,
adems, el miR-224 puede aumentar la resistencia a la TRC [ 95 ]. Colectivamente, miR224 puede ser un biomarcador pronstico para predecir el pronstico de supervivencia de
los pacientes.
MiR-378

Se espera que miR-378 para participar en el proceso de mltiples tumorigeneses y jugar un

papel importante en CRC. Estudios previos demostraron que el miR-378 est regulada
positivamente en muestras de CRC [ 96 , 97 ], se dirige a los genes supresores de tumores y
SuFu FUS-1 y regula la progresin del cncer mediante la promocin de la supervivencia
celular, la invasin y la angiognesis [98 , 99 ]. Se inform de la diferencia del nivel de

expresin de miR-378 entre los individuos con cncer e individuos sanos de sangre y en los
tejidos tumorales. Por ejemplo, Hauser et al [ 100 ] inform de que miR-378 en suero es
significativamente mayor en 25 pacientes ccRCC en comparacin con 25 individuos
sanos. Liu et al [ 101 ] mostr que el suero miR-378 podra servir como un nuevo
biomarcador no invasivo en la deteccin de cncer gstrico. Todo lo anterior sugiere que
miR-378 podra ser un posible biomarcador tumoral. Por otra parte, el miR-378 en el
plasma puede tener la capacidad de prediccin ms alta en el CCR [ 102 ]. Los autores
investigaron adicionalmente la expresin de los genes miARN en el plasma de 65 pacientes
de CRC y 70 individuos sanos y encontraron que miR-378 aumenta de manera significativa
en el plasma de pacientes con CRC una vez que el nivel de miR-378 se pone en particular
despus de la ciruga. Adems, tambin se encontr que la expresin de miR-378
disminuye en pacientes que no tienen ninguna recada dentro de los 4-6 meses despus de
la ciruga, lo que explica, adems, que los niveles plasmticos de miR-378 se pueden
utilizar para discriminar pacientes con CRC de individuos normales [ 102 ].
Sin embargo, en otro estudio, Zhang et al [ 103 ] seal la regulacin a la baja de miR-378
en 84 pares emparejados CRC muestras y lneas celulares. MiR-378 se consider un
inhibidor de tumor, ya que puede suprimir el crecimiento de clulas tumorales en un
modelo de ratones desnudos [ 103 , 104 ].Adems, existe una fuerte asociacin entre la
reduccin de miR-378 y un aumento de volumen del tumor, metstasis y OS corto de
pacientes con CRC. En consonancia, el miR-378 como un supresor de tumores tambin fue
observada por Wang et al [ 105 ] despus de analizar la expresin de miR-378 en 47 pares
de muestras de CRC. Todo lo anterior sugiere que el miR-378 juega un papel vital en la
carcinognesis y podra servir como un biomarcador para predecir el resultado de la CRC.
En una palabra, el miR-378 puede predecir la presencia de CRC y servir como un
biomarcador potencial y razonable para el diagnstico precoz del CCR.

CONCLUSIN
Mirna podra ser una herramienta poderosa en el diagnstico y tratamiento de la CRC a
travs de la modulacin de diversas crosstalks de vas de sealizacin
oncognicas. MiRNAs hemos discutido aqu son, hasta la fecha, el estudio ms exhaustivo
miRNAs supresores / potenciador de tumores en el CCR.A travs in vivo e in
vitro experimentos, los miRNAs relacionados han demostrado que estn alteradas en el
CCR y de ser posible, las herramientas de diagnstico, pronstico y teraputico ideal
(tabla (Tabla 1).1 ).Sin embargo, algunos obstculos en las terapias basadas en genes
miARN es necesario superar, tales como la degradacin por nucleasas, la ineficiencia de las

clulas, aclaramiento sanguneo rpido, toxicidad renal y toxicidad

hemodinmica. Actualmente, los sistemas de suministro intracelular mucho ms eficientes
se estn desarrollando en beneficio de los tratamientos clnicos basados en miARN, tales
como nanopartculas y la combinacin de los genes miARN en combinacin con otros
agentes contra el cncer. En nuestra opinin, se introducen resultados contradictorios con
respecto a algunos miRNAs ya que consideramos que el fenmeno podra explicarse por
los datos clnicos menos informativos, especialmente la falta de la definicin de los sujetos
"sanos" de control, que es muy probable que afecten la calidad de miRNA. En segundo
lugar, el origen tnico de la poblacin puede ser una variable de confusin potencial. Por
ltimo, esperamos que nuevos estudios relativos al diagnstico y la terapia sern realizadas
por varios grupos en el futuro con el fin de optimizar finalmente los usos de miRNAs para
su traduccin posterior en el entorno clnico.

Mecanismos de invasin mltiple y diferente intracelular Comportamientos:

una nueva visin de la interaccin de clulas de Salmonella en host
Abstracto
Salmonella es una bacteria intracelular facultativa se encuentra dentro de una variedad
de fagoctica y clulas no fagocticas in vitro e in vivo. Durante dcadas, tiene ha
aceptado que la Salmonella puede entrar en las clulas slo a travs de un mecanismo
de disparo mediada por un sistema de secrecin de tipo tres, llamada SST3-1. Sin
embargo, la reciente investigaciones han demostrado que esta bacteria puede usar
otras vas de invasin la mediacin de cualquiera de los procesos de entrada de
disparo o cremallera. Despus de clula eucariota invasin, Salmonella tiene que
asegurar su supervivencia y proliferacin dentro de acogida Clulas. Para ello, esta
bacteria reside ya sea dentro de una vacuola unida a la membrana o libremente en el
citosol de la clula husped. No est claro por qu la Salmonella ha desarrollado estos
mecanismos alternativos para la invasin y proliferacin celular, pero esto proporciona
una nueva visin de los mecanismos que conducen a enfermedades inducidas por
Salmonella. Por lo tanto, el objetivo de esta revisin es mostrar la evolucin de la clula
de Salmonella en host paradigmas de interaccin por resumir las diferentes estrategias
utilizadas por Salmonella serotipos de invadir y proliferan en clulas eucariotas.
Introduccin
Salmonella es una bacteria entrica reconocido como un importante un problema
econmico y de salud pblica en todo el mundo (Hoelzer et al., 2011). Dependiendo del
serovar y el anfitrin, Salmonella puede conducir a enfermedades que van desde la
gastroenteritis a una infeccin sistmica que amenaza la vida. Un esencial
caracterstica de patogenicidad de Salmonella es la entrada dentro de la fagocitosis y
clulas husped no fagocticas. Por lo tanto, la entrada y la supervivencia intracelular
de Salmonella se considera como crtica pasos para la proliferacin, la difusin y la
transmisin de otros anfitriones (Richter-Dahlfors et al., 1997; Salcedo et al,. 2001;

MEYERHOLZ et al., 2002; Geddes et al., 2007). En reciente aos, nuestra visin de la
interaccin clula de Salmonella-anfitrin tiene considerablemente evolucionado.
Siempre se ha supuesto que la Salmonella entra en la clula husped a travs de la
denominada mecanismo de disparo, que requiere un sistema de secrecin de tipo tres,
llamada SST3-1 y que era el centro de atencin desde hace ms de diez aos (y
Marlovits Stebbins, 2010). Sin embargo, estudios in vitro han demostrado que La
salmonela puede utilizar varias formas de invadir nonphagocytic la clula husped
(Rosselin et al., 2010). La caracterizacin de una de la va de invasin SST3-1independiente ha demostrado la capacidad de Salmonella para invadir las clulas a
travs de un mecanismo de cremallera mediada por una protena de membrana
externa invasina llamado Rck.
Por lo tanto , Salmonella es la primera bacteria demostrado ser capaz para invadir las clulas
hospedadoras por tanto los mecanismos de disparo y la cremallera ( Rosselin et al . , 2010) .
Despus de la invasin en eucariotas clulas , la mayora de las bacterias permanecen en un
fagosoma modificado llama la vacuola que contiene Salmonella - ( SCV ) . A pesar de que el SCV
ha sido considerado como el lugar principal para intracelular Salmonella, esta bacteria parece tener
un distinto estilo de vida bimodal replicarse en SCV , as como en el citosol de las clulas
epiteliales ( Steele - Mortimer , 2008; Malik - Kale et al , . 2012) ( Figura 1 ) . Sin embargo, poco se
sabe acerca de los mltiples mecanismos de entrada y la proliferacin en clulas husped y su
papel en la enfermedad de Salmonella y la especificidad del hospedador. Por lo tanto, esta revisin
se centra en cmo nuestra comprensin de Salmonella patogenicidad ha evolucionado con el
tiempo, mostrando cmo esta bacteria manipula la clula husped utilizando diferentes estrategias
para la invasin y el establecimiento de un nicho intracelular.
Diversidad de entrada I- Salmonella estrategias: la cremallera vs. Gatillo
Bacterias intracelulares han evolucionado dos estrategias diferentes para invadir las
clulas no fagocticas mediante la modulacin del citoesqueleto de actina: la
cremallera y los mecanismos de activacin. Las bacterias, tales como Shigella flexneri,
entran en las clulas husped a travs de una mecanismo de activacin y el uso de un
T3SS efectores bacterianos protenas (Schroeder y Hilbi , 2008) . Otras bacterias tales
como Listeria monocytogenes y Yersinia pseudotuberculosis utilizar el mecanismo de
cremallera para invadir anfitrin nonphagocytic Clulas. Estas bacterias expresan una
protena de superficie capaz de unirse receptores de la superficie eucariotas. Esta
interaccin conduce a la la activacin de vas de sealizacin clula husped que
inducen la actina polimerizacin y la captacin de bacteria ( Cossart y Sansonetti ,
2004 ) . Sin embargo, en contra de Salmonella, ninguno de estas bacterias se ha
demostrado que es capaz de invadir anfitrin clulas utilizando ambos mecanismos de
cierre y de disparo.
El estudio del mecanismo de Salmonella invasin de clulas husped ha sido iniciado
por Takeuchi en 1967 (Takeuchi, 1967). Hasta hace poco, se ha supuesto que la
Salmonella invade las clulas husped slo a travs de un mecanismo de entrada de
disparador, lo que requiere la T3SS-1, codificado por la isla de patogenicidad
Salmonella (SPI-1). El T3SS es una complejo de la aguja se encuentra en muchos
patgenos Gram-negativos, y un alto grado de homologa se ha encontrado entre la
aparatos SST3 de Salmonella y Shigella (Groisman y
Ochman, 1993; Galn & Wolf-Watz, 2006). Para muchos aos, la mayora de las
investigaciones se han centrado en la comprensin y la descripcin de este sistema
sofisticado invasin, tanto en los niveles bacterianos y moleculares (McGhie et al.,
2009; Moest y Meresse, 2013). Sin embargo, evidencias recientes han demostrado que
las estrategias de entrada de Salmonella serovares demostraron ser ms diversificada.
Contrario a lo que se ha pensado, la T3SS-1 no es el nico estrategia de entrada de
Salmonella (Coombes et al, 2005; Desin et al., 2009; Rosselin et al., 2010). De hecho,

varios estudios han demostrado que las cepas de Salmonella que carecen de SPI-1 son
capaces de invadir in vitro numerosas clulas e inducir en vivo patologas intestinales
tanto en seres humanos y diferente modelos animales (Hu et al, 2008;.. Aiastui et al,
2010). Por ejemplo los estudios in vitro han demostrado que la Salmonella no requera
su T3SS-1 para entrar en un 3 dimensiones epitelio intestinal.
Murray et al. Tambin han demostrado que en un modelo murino, S. Typhimurium ADSPI-1
mutante no fue afectada en la infeccin del bazo de los ratones infectados, lo que sugiere que
T3SS-1 de S. typhimurium no est involucrado en el paso a travs de la barrera intestinal y la
infeccin de rganos sistmicos (Murray y Lee, 2000). Adems, se ha observado que S.
Typhimurium con un no funcional T3SS-1 todava tiene la capacidad de infectar a los ratones
despus de la inoculacin intraperitoneal, sino tambin los pollitos despus de la inoculacin oral
(Galn y Curtiss, 1989;. Morgan et al, 2004). En general, estos datos sugieren que otra invasin
vas participan en la infeccin por Salmonella. Entre estos mecanismos, una investigacin reciente
ha demostrado que la Salmonella tambin puede invadir las clulas no fagocticas por una
cremallera mecanismo a travs del invasina Rck, una protena codificada por el gen rck situado en
el plsmido de virulencia grande (Rosselin et al., 2010). Esta protena no se expresa en todos los
serotipos de Salmonella. Est altamente conservada en nonhost serotipos especficos tales como
S. enteritidis y S. typhimurium, que podra ser encontrado en S. Dublin, pero nunca ha ha
detectado en los otros serotipos de Salmonella (Rychlik et al., 2006; Futagawa-Saito et al., 2010).
En Salmonella, la internalizacin bacteriana mediada por Gatillo o mecanismos de
cremallera implica la remodelacin de la actina probablemente a travs de la
estimulacin de los receptores vas de sealizacin celular. El mecanismo de disparo
invasin est mediada por la inyeccin de un cctel de protenas efectoras en clulas
husped inducir directa o indirectamente importantes reordenamientos del
citoesqueleto conocida como "membrana volantes '(Schlumberger Y Hardt, 2006).
Estos eventos estn mediados por un subconjunto de T3SS efectores-1 (SIPA, SIPC,
SopB, Sope, SopE2). Los protenas SIPA y SIPC se unen directamente actina impidiendo
su despolimerizacin (McGhie et al., 2001). El SopB, Sope, y protenas SopE2
indirectamente modulan la actividad de actina por estimulantes Rho GTPasas de la
familia (Rac1 y Cdc42) requerido para la iniciacin de la polimerizacin de actina del
citoesqueleto a travs del complejo Arp2 / 3, un factor eucaritico implicada en el
control de redes de actina (Zhou y Galn, 2001; Patel y Galn, 2006). Una vez dentro
de la clula husped, otra protena efectora de los espectculos SptP T3SS-1denominado una actividad contrarrestar los de SopE y SopE2. Este efector inactiva Rho
GTPasas que permiten la restauracin de la actina y el regreso de la clula husped a
la normal estado (Murli et al., 2001). Los otros efectores T3SS-1 contribuyen a una
variedad de procesos tales postinternalization como la supervivencia de la clula
husped y la modulacin de la inflamacin espuesta. A diferencia del mecanismo de
entrada de disparador, la entrada de la cremallera mecanismo est mediada por una
interaccin de una bacteriana ligando con un receptor de la clula husped, lo que
induce una sealizacin cascada y una acumulacin local de actina, que slo lleva a
reordenamientos del citoesqueleto de actina y menores membrana estanca
extensiones (COSSART, 2004;. Rosselin et al, 2010). Hasta ahora, no est claro por qu
esta diferencia de membrana se observa reordenamiento y la polimerizacin de actina
entre estos dos mecanismos.
En el caso de Rck, su receptor celular no ha sido identificado todava, pero como se observa para
el mecanismo de activacin, la entrada mediada por rck involucrado socios de la clula husped
similares al igual que la pequea Rho GTPasas Rac1 y Cdc42, que conducen a la activacin de la
3 complejo Arp2 / y la movilizacin de actina reordenamientos, conduciendo a la absorcin de
bacteria (Unsworth et al., 2004, Rosselin et al, 2010;. Mijouin et al., 2012). Sin embargo,
contrariamente al mecanismo de disparo, la activacin de los socios Rho GTPasas parece
especfico para el proceso de entrada mediada por Rck. Este proceso es especialmente
dependiente de la activacin de la tirosina quinasa y PI3 quinasa de clase I que activa Akt (Mijouin

et al, 2012.; Wiedemann et al., 2012). El papel de Rck en Salmonella invasin ha sido claramente
demostrado y se encontr que depender de las lneas celulares y tipos de clulas (Rosselin et al.,
2011). Adems, el Rck opern parece estar controlada por la protena SdiA, una regulador
transcripcional de la deteccin de qurum (Ahmer et al., 1998; Abed et al., 2014). Sin embargo, su
contribucin en la patognesis de Salmonella sigue sin estar claro como el mecanismo de
induccin de la expresin Rck in vivo no est bien entendido.
Adems de Rck y T3SS-1, es un pagn otro invasina identificado ampliamente conserva
en la Salmonella gnero (Lambert y Smith, 2008). Se ha demostrado que la unin de
pagn a proteoglicanos de sulfato de heparina extracelular induce la invasin de
Salmonella. Esta membrana externa protenas (OMP) proceso de entrada mediada
requiere polimerizacin de actina, pero sigue siendo poco caracteriza (Lambert y
Smith, 2008). HlyE una hemolisina de formacin de poros codificada por SPI-18
tambin fue identificado como nueva virulencia determinante que parece mejorar la
invasin de Salmonella algunos tipos de clulas, pero el mecanismo exacto de la
invasin sigue siendo desconocido (Fuentes et al., 2008). En Salmonella, otra invasin
desconocida y no identificada factores parecen estar involucrados durante la entrada
de la clula. En efecto, se ha demostrado que una cepa de Salmonella no expresando
Rck, pagn, y T3SS-1 todava tiene la capacidad de introducir diferentes tipos de clulas
(Rosselin et al., 2011). Microscpico observaciones dentro de los diferentes tipos de
clulas tienen tambin mostraron que estos factores desconocidos inducen
citoesqueleto y reordenamientos de membrana similares a las mediadas por cualquiera
de los mecanismos de activacin de la cremallera o (Rosselin et al., 2011). La cascada
de sealizacin inducida por estos desconocido factores parece especfico porque
Aiastui et al. (2010) tienen se muestra que la entrada de Salmonella en inmortalizada
humana fibroblastos de prepucio no se requiere ningn tipo de Rho GTPasas (Rac1,
Cdc42, RhoA, o RhoG) y participa en Rck vas SST3-1 invasin. Adems, para S.
typhimurium, una nueva va de invasin fruncido-independiente que pudiera operar
independientemente de Arp2 / 3 complejo tiene recientemente ha descrito. Este
mecanismo de entrada se basa en la formacin de miosina II estructuras ricas en fibra
como el estrs en la invasin sitios a travs de la activacin de la sealizacin de
quinasa RhoA / Rho va (Steffen et al, 2004;.. Hanisch y col, 2012). En general, estas
observaciones abren nuevas perspectivas para identificacin de nuevos factores de
invasin. Hasta ahora, no es serotipos de Salmonella claro por qu utilizan mltiples
estrategias para invadir clulas husped. Una posible explicacin es que el desarrollo
de mecanismos de entrada alternativos mediada por diferentes invasinas ha ampliado
el espectro de las clulas husped, que puede ser invadido por este patgeno
intracelular.
II- Salmonella estilo de vida intracelular: Citoslica frente a la replicacin vacuolar
En general, despus de la invasin de clulas eucariticas, las bacterias son
interiorizado dentro de un compartimiento unido a la membrana. Muchos patgenos
bacterianos se han desarrollado diferentes estrategias para contrarrestar la respuesta
inmune de la clula husped, ya sea por la prevencin de la fusin vacuola-lisosoma,
modificando su vacuola o por escapar en citosol. Por ejemplo, Escherichia coli modula
el proceso de maduracin de su vacuola a evitar la fusin con lisosomas (Kim et al.,
2003), mientras que Listeria onocytogenes, Shigella flexneri, Francisella tularensis, y
algunas especies de Mycobacterium tienen la capacidad de escapar pronto de la
vacuola naciente para entrar en el citoplasma y explotarla como hbitat para el
crecimiento y la replicacin (Ray et al., 2009). Histricamente, la Salmonella se ha
clasificado como un patgeno vacuolar. Tras la invasin de acogida clulas, esta
bacteria reside y se multiplica dentro de la SCV, una vacuola especializado que ha sido
considerado, para una mucho tiempo, como el nico nicho intracelular de Salmonella
(Bakowski et al., 2008). Sin embargo, la evidencia reciente tiene demostrado que una
proporcin de Salmonella intracelular puede escapar de la SCV y replica de manera

eficiente en el citosol de las clulas epiteliales, lo que indica que esta bacteria tiene un
estilo de vida intracelular bimodal (Malik-Kale et al., 2012). Este fenmeno es, sin
embargo, no se observa en algunos celular tipos, tales como macrfagos, donde las
bacterias son citoslicas incapaces de sobrevivir o crecer debido al ambiente letal del
citosol (Beuzon et al, 2002;. Kndler et al., 2010).
Despus de la internalizacin en las clulas epiteliales, el SCV se somete a diferentes
etapas de maduracin similar a la de macrfagos. El SCV recin formado se enriquece
en marcadores de endosoma temprano como Rab5, EEA1 (principios antgeno
endosoma 1), y TfR (receptor de transferrina), los cuales son sustituidos
posteriormente por el endosoma tardo y marcadores lisosomas, como Rab7, LAMP-1
(lysosomalassociated protena de membrana 1), y V-ATPasa que permite la acidificacin
de los VCS (pH 4-5). Algunos marcadores tales como manosa-6-fosfato Receptor
(M6PR) que participan en la entrega de hidrolasas lisosomales a la endosomal sistema
no se presentan por el VCS para evitar la fusin con lisosomas (Steele-Mortimer et al.,
1999. Bakowski et al, 2008). A medida que el SCV madura y est rodeado de actina, se
migra hacia una posicin perinuclear e inicia la formacin de filamentos de Salmonella
inducida (SIF), el cual asegurar la entrega de nutrientes al SCV, facilitando de esta
manera la replicacin bacteriana (KNDLER y Steele-Mortimer, 2003; Salcedo y Holden,
2003).
En las clulas epiteliales, un defecto en la maduracin vacuola conduce a veces a la
liberacin de Salmonella en la celda en nutrientes rica citosol que puede soportar una
alta replicacin bacteriana tasa (Brumell et al., 2002,. KNDLER et al, 2014). Ahora
est bien documentado que, la red intracelular el crecimiento de Salmonella es el
producto de ambos vacuolar y replicacin citoslicas y de la destruccin de bacterias
intracelulares. La cuantificacin de la contribucin Salmonella citoslica de la poblacin
total en diferentes clulas epiteliales lneas y en condiciones de alteracin de escape
tiene vacuolar muestra que la Salmonella citoslica replicar a mayor velocidad que las
bacterias vacuolar, que ha sido denominado hyperreplication (Se estima que 100
bacterias por clula) (KNDLER et al., 2014). Adems, se ha informado de que
citoslica
hiper-replicacin se produce en una minora (<20%) de las clulas epiteliales
infectadas (Malik-Kale et al., 2012). Sin embargo, dentro de las clulas de fibroblastos,
muy limitado proliferacin de Salmonella se ha descrito. Se ha demostrado que en s
Salmonella contribuye a atenuar la intracelular tasa de crecimiento como reguladores
de virulencia bacterianas, tales como sistema de PhoP / PhoQ, estn involucrados en la
prevencin bacteriana crecimiento excesivo en el entorno intracelular de primaria
fibroblastos (Cano et al., 2001). La fuga de Salmonella a partir de la VCS y su hiperreplicacin en el citosol de las clulas epiteliales se considera como un paso de
transicin que precede a la salida de las bacterias en el extracelular ambiente.
Salmonella citoslica es detectado por el anfitrin clulas epiteliales, lo que lleva a una
respuesta inflamatoria caracterizada por la activacin de la caspasa 1 y caspasas 3/7, y
la liberacin apical de IL-18, una citocina importante regulador de la inflamacin
intestinal (Monack et al., 2001). Las clulas muertas se, por lo tanto, se extruye fuera
de la monocapa, la liberacin de SPI-1 inducida y flagelado Salmonella (Invasin
cebado Salmonella) en el lumen intestinal de las vas, lo que facilita la infeccin de
Salmonella a la vecina las clulas y su difusin en el cuerpo del anfitrin o para un
nuevo husped (Cliffe et al, 2005;.. KNDLER et al, 2010).
Los estudios que evalan la funcin de la virulencia de Salmonella factores en el
establecimiento de la vacuola y citoslica poblaciones intracelulares han demostrado
que T3SS-1 efectores, Adems de su papel en la invasin, estn involucrados en
principios etapas de la biognesis SCV (Steele-Mortimer et al., 2002). Por el contrario,
los efectores inyectaron por otro SST3, codificada por el SPI-2 y llamado SST3-2,
contribuir a ms tarde SCV incluyendo la biognesis vacuolar maduracin, bacteriana

la replicacin y la formacin de SIF (Kuhle y Hensel, 2004; Figueira y Holden, 2012). En

el SCV, cuando Salmonella se adapta al entorno intravacuolar, los dos sistema de
componentes PhoP / PhoQ (1) reprime la expresin de SPI-1 genes, que no son ya
necesarios, mediante la reduccin de Hila transcripcin; (2) aumenta SPI-2 expresin
SST3 travs de la unin al promotor SSRB y la regulacin postranscripcional de SmpB
(Bijlsma y Groisman, 2005;. Golubeva et al, 2012). Adems, se ha demostrado que
pagn, activado por PhoP, es mximamente expresado en el compartimiento
intravacuolar tener un pH cido y baja concentracin de Mg2 +. Por lo tanto, tiene Se
postula que pagn podra expresarse en ptima nivel al salir de la SCV, macrfagos, o
epitelial las clulas, lo que permite una interaccin posterior con la vecina clulas hasta
SST3-1 se expresa al mximo (Lambert y Smith, 2008). Para Salmonella de escape
vacuolar, se ha demostrado que slo el T3SS-1, pero ni el T3SS-2, ni flagelos son
necesario. Sin embargo, las bacterias citoslicas estn flagelados y expresar T3SS-1,
pero parecen no expresar la T3SS-2, lo que podra explicar el defecto de replicacin
tarda de inactiva SST3-2 bacterias en las clulas epiteliales (Malik-Kale et al, 2012.;
KNDLER et al., 2014).
La muerte de Salmonella intracelular podra estar relacionado con cualquiera a la
fusin SCV-lisosoma completa (Viboud y Bliska, 2001), o para la autofagia, un
mecanismo de captura de cualquiera de las bacterias adaptadas citosol o vacuolar que
les redireccionan a el compartimento lisosomal por matar. De hecho, en algunos casos,
Salmonella intervacuolar pueden daar el SCV membrana a travs de componentes
T3SS-1 (Roy et al., 2004). El SCV daado est dirigido, as como citoslicas Salmonella,
por el sistema de la autofagia, un mecanismo involucrado en la respuesta inmune
contra intracelular patgeno. Salmonella se liberadas de ese modo autosmico
compartimento que puede afectar a su replicacin o inducir su destruccin
(Birmingham et al., 2006). Cuantos sean estudios han demostrado que, en algunos
casos, Salmonella usando diferentes estrategias en diferentes momentos podran evitar
la clula husped respuesta (degradacin lisosomal y la autofagia) y asegurar su ciclo
infeccioso. En las clulas epiteliales, este autophagic sistema demostr ser no eficaz
contra Salmonella despus de escapar de la SCV. Esta subpoblacin de Salmonella ha,
de hecho, la capacidad de evitar el reconocimiento autophagic con el fin de hiperreplicarse en el citoplasma de la clula husped (KNDLER et al., 2014). Por otra parte,
un reciente informe tiene demostrado que los beneficios de Salmonella de la autofagia
por su la replicacin en el citosol de la clula husped. En las clulas HeLa, tiene ha
demostrado que la falta de Rab1, una Rho GTPasa requerido para la autofagia,
disminuye significativamente Salmonella replicacin y, a diferencia de las bacterias
intravacuolar, una proporcin de Salmonella citoslica asociado con la autofagia
componentes p62 y / o LC3 pueden replicarse rpidamente en el sede de clula (Yu et
al., 2014).
Adems, Salmonella, en momentos posteriores , tambin puede se beneficia de la
fusin SCV- lisosoma que proliferan en la clula husped sin ser destruido . De hecho,
Eswarappa et al. han demostrado que en algunos casos , muchas vacuolas con una
sola bacteria puede encontrarse dentro de una celda como una resultado de la divisin
SCV . El aumento del nmero SCV crea un desequilibrio en la relacin entre el nmero
de vacuolas con el nmero de lisosomas cidos. Por lo tanto, que tiene una celda con
lisosomas cidos suficientes para fundir con todo el SCVs es ventajoso para Salmonella
por favoreciendo su supervivencia y la proliferacin en la clula husped ( Eswarappa
et al, 2010).
Conclusin
La salmonela es una bacteria fascinante, que ha desarrollado una variedad de
estrategias para invadir y sobrevivir en el husped las clulas y por lo tanto se
convierten en un patgeno xito. Estos reciente aos, muchas interacciones

moleculares entre Salmonella y las clulas husped se han dilucidado, pero muchas
preguntas todava sin respuesta. Por qu alternativa Salmonella ha desarrollado
mecanismos de invasin celular? Cmo esta bacteria podra modificar el nicho SCV y
adaptarse a la vida citoslica estilo? Cul es el papel de este nuevo fenotipo en
Salmonella patogenicidad? Los mecanismos de entrada afectan a la intracelular indujo
estilo de vida de Salmonella y la respuesta del husped? Puede ser, de hecho, la
hiptesis de que la va de entrada utilizado por Salmonella cepas son diferentes de
acuerdo con el serovar y la clula husped, lo que podra modificar la gama de
huspedes y / o la patogenicidad de esta bacteria. Adems, el existencia de sinergia
entre las diferentes vas de invasin utilizado por Salmonella no deben ser excluidos.
Por lo tanto, ms estudios deben llevarse a cabo en T3SS-1 mecanismos
independientes para identificar los receptores de acogida las vas de sealizacin
implicadas y el inducido. Promover Tambin se requiere investigacin para identificar
los factores bacterianos involucrados en la determinacin de Salmonella localizacin
intracelular y el papel jugado por cualquiera citoslicos o vacuolar proliferacin en
Salmonella patognesis
Figura . 1. Diferentes estrategias utilizadas por Salmonella para la invasin y
proliferacin en eucariotas
Clulas. Salmonella es capaz de invadir la clula husped a travs tanto un disparador
y un mecanismo de cremallera. El proceso de entrada de disparo est mediada por el
T3SS- 1 protenas efectoras y es morfolgicamente caracterizado por importante
citoesqueleto reordenamientos. Tras la entrada mecanismo dependiente de la T3SS-1,
Salmonella reside y se multiplica en el SCV que se somete a diferentes etapas de
maduracin, que es en parte debido a los efectores SST3-1. Replicacin de Salmonella
se acompaa de la formacin de FIS, que se extiende desde la superficie de la SCV,
facilitar la entrega de nutrientes al SCV. En el caso de la SCV ao, las bacterias pueden
ser destruidas ya sea despus de la fusin SCV-lisosoma o la respuesta autofagia. Por
ltimo, una porcin de bacteria es capaz de escapar de la SCV y multiplicar de manera
eficiente en el citosol de las epitelial Clulas. El mecanismo de cremallera mediada por
Rck induce un citoesqueleto de actina menor reordenamiento, lo que lleva a la
internalizacin de las bacterias en una vacuola, cuyo biognesis en estas condiciones
no tiene ha estudiado bien. La entrada pagN-mediada proceso requiere la
polimerizacin de actina, pero sigue siendo mal caracterizado.