PRACTICA DE LABORATORIO TRANSPORTE DE MEMBRANA

HORARIO
(16:00 18:00)

Realizado por:
Cesar Andrs Lesmes Seplveda 313521
Carlos Alberto Bravo Reyes 314017

Supervisado por:
SEBASTIN PINEDA PINEDA
spinedap@unal.edu.co

Manizales Caldas
2016
1

RESUMEN
El tema de transporte de sustancias a travs de membranas es de vital importancia ya
que sin estas entraranobjetos desconocidos a la clula provocando daos que puedan
ser irreparables o incluso matndola es por esto que estas paredes celulares poseen
mecanismos que facilitan el transporte de sustancias de un medio a otro, en esta prctica
para representar cmo funciona el transporte de sustancias de un medio a otro se utilizara
como manera de ejemplo una parte de tripa de cerdo(extrada del intestino delgado de
l)la cual la llamaremos a partir de ac membrana celular. Este ejercicio se realiza con el
fin de demostrar la osmosis, en el cual se podr descartar si se considera un medio
hipotnico, hipertnico o isotnico por medio de determinacin cualitativa. Tambin se
usara como experimento un trozo pequeo de una hoja de alga para analizarlo en el
microscopio con unas cuantas gotas de agua destilada esto se realiza con el fin de
demostrar un medio hipotnico de la pared celular vegetal.
.

INTRODUCCIN

Hablamos de la importancia que tienen las membranas celulares al actuar como

barrera que divide dos medios uni del otro, con una bicapa fosfolipidica y con
cabezas hidrofilicas que se encuentran interactuando directamente con el medio y
con lolas hidrofobicas que estn internamente, se debe hablar de la importancia
que tiene para el transporte de sustancias de un medio a otro que la clula puede
requerir o que necesite desechar sustancias al exterior. [1]
Cabe destacar que la membrana celular para que cumpla su correcto
funcionamiento y pueda servir como medio protector y transportador debe poseer
ciertas protenas que con anfipaticas, es decir, son tanto hidrofilicas como
hidrofobicas y estn incrustadas dentro de la membrana celular a estas protenas
de transporte se les da el nombre de protenas integradas, sin estas la membrana
solo dejara pasar agua o gases por la bicapa fosfolipidicacomo se muestra en la
(figura 1). [1]
Figura 1 Diferencia entre bicapa fosfolipidoca sin protenas y bicapa con protenas
integrales en la pared celular

Pero antes expliquemos que son estas protenas transportadoras y cules son sus
funciones: las protenas transportadoras son aquellas que permiten el transporte
de pequeas molculas que no pueden atravesar la capa de lpidos, estas
3

protenas fueron diseadas para transportar un tipo de molcula en especifico que

sea necesaria para que la clula pueda realizar los procesos y funciones que le
correspondan. Existen 2 formas que permiten el transporte de sustancias una es el
transporte activo y la otra se llama transporte pasivo tambin conocida como
(difusin facilitada) se hablara de manera muy explcita estos dos transportes: [1]
(B, y otros, 1999)

Transporte pasivo (difusin facilitada): este transporte es fcil de entender

para que las ciertas sustancias puedan llegar a l interior de la clula solo
requieren de una protena de canal que les permita entrar sin ningn
problema en este trasporte las protenas no requieren de ningn tipo de
energa para realizar esta funcin, es decir no hay gasto de energa que se
necesite para absorber o expulsar sustancias de la clula. [1]
Transporte activo: en este mtodo de transporte de sustancias al interior de
la clula existen unas protenas especializadas que requieren un gasto de
energa para permitir el ingreso de las sustancias, estas protenas trabajan
con el gradiente de concentracin en donde expulsan Na + para poder
absorber como una bomba el K+ que est en el medio externo de la clula
[1] (B, y otros, 1999)

En la (Figura 2) se pueden apreciar los distintos tipos de protenas trasportadoras

que existen alrededor de la pared celular y ayudan al desplazamiento de
sustancias a la clula y viceversa
Figura 2 explicacin visual del transporte activo y pasivo a travs de la clula

Materiales

Microscopio
Laminillas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Placa de calentamiento
Termmetros
Goteros
Pinzas
3 Beaker 150 mL
Pipeta 10 y 5 ml
Gradilla
Tapn de corcho con tubo capilar
6 Tubos de ensayo
Cronmetro
Cubos de hielo

Reactivos

CaCl2 al 10% (gotero)

KMnO4
Glucosa al 20%
NaCl al 10%
Almidn al 10%
Solucin de Yodo

Mtodos
La prctica consisti en determinar los medios existentes de la turgencia y el traspaso de
agua de un medio que tiene menos concentracin a un medio de mayor concentracin
para mantenerse en equilibrio determinando cualitativamente estos procesos.
Transporte de agua desde un medio con menor concentracin a uno con
mayor concentracin:
1. Este procedimiento se realiza para comprobar un medio hipotnico, la
disolucin se prepara 10 ml de H2O destilada, con 2 gotas de verde
metilo, se procede a agregar 5ml de NaCl AL 5% y por ltimo se adiciona
5ml de Fructosa al 10% esta disolucin se mezcla en un tubo de falcn
como se mostrara en la (imagen 1)
2. Se procede con el pedazo de tripa de cerdo para esto es necesario hablar
con el supervisor de la prctica para que haga la entrega de dicho material
el cual ya se encuentra cortado a la medida para cubrir la boquilla del tubo
de falcn se estira y se une de tal forma que no haya aberturas por mas
mnimas que sean el cual permitan la entrada o salida de la sustancia a
travs de los medios para asegurar membrana celular se amarra cuidadosa
mente con hilo alrededor de la boquilla para que permita que la membrana
celular permanezca esttica y no se pueda mover. Como se muestra en la
(imagen 2).
3. Se invierte el tubo de falcn y se prueba que no haya ninguna clase de
escape de sustancia, se procede a llevar el tubo de falcn a un beaker el
cual contiene 100ml de agua destilada como se muestra en la (imagen 3).
5

4. En un intervalo de 15 min despus de interactuar los dos medios se

observa el tubo de falcn y se anota el nivel interno que muestre este
proceso se realiza en 3 ocasiones, al final se observa cual fue la cantidad
de agua que entro al tubo de falcn por medio de la membrana celular, se
anotan todos los cambios que se pudieron observar.

Experimento que comprueba la definicin de medio hipotnico con las

clulas vegetales de un alga:
1. Se corta un trozo pequeo de la hoja de alga que se encuentra en el
acuario del laboratorio de microbiologa se debe recordar no meter las
manos sin tener los guantes puestos ya que este acuario est diseado
para la crianza de microorganismos para el estudio de ellos los cuales
pueden provocar algn dao en el organismo husped al momento de
estar en contacto.
2.

Despus de esto se lleva el trozo de muestra al microscopio, recordar que

esta muestra debe estar encima del porta objetos y encima de ella debe
estar el cubreobjetos para llevar a analizar, lo siguiente a realizar es
agregar 3 gotas de agua destilada encima de la muestra y volver a
observar cualitativamente que cambio puede provocar al aadirle el agua a
la muestra se observa de nuevo en el microscopio y se anotan los
cambios que han tenido las clulas.

Experimento con el nitrato de plata y mtodo de benedict para deteccin de

sales:

3. Se toma una muestra de aproximadamente 1.5 militros para 4 tubos de

ensayos 2 muestras sern del agua que est pasando por la membrana y
las otras 2 sern para el contenido que estn dentro del tubo Falcn
4. Posteriormente a 2 de estos se les agrega nitrato de plata que sera a uno
del agua en el medio y uno del tubo falcn.
5. Y 2 de estos se les determinan por mtodo de benedict agregando 5
gotas del reactivo benedict y ponindolos en calentamiento por 5 minutos
los tubos respectivamente sern uno del agua en el medio y uno del tubo
falcn.

Resultados y discusiones
Experimento 1. TRANSPORTE EN LA MEMBRANA.
Es posible ver que las membranas
tienen una gran importancia en el
transporte de sustancias de un medio a
otro. Esto lo evidenciamos despus de
preparar la solucin.
El tiempo en que era verificado la
cantidad de agua que haba pasado por
la membrana era de 15 minutos.
tiempo(minutos)
0
15
30
45

Aumento
del
volumen (ml)
20
20.5
20.6
21.5

Posteriormente
generaremos
una
grfica que representa el tiempo Vs
Volumen que ha pasado por la
membrana.

Volumen Vs Tiempo
45
40
f(x) = 23.73x - 471.19

35
30
25

Tiempo(minutos) 20
15
10
5
0
19

19.5

20

20.5

21

21.5

22

Volumen(ml)

Con esta grafica podemos entender que el aumento de agua dentro del tubo de Falcn o
clula de forma prctica comienza aumentar con respecto al tiempo.
Experimento 2. MEDIO HIPOTNICO.
El medio hipotnico se requiere mayor concentracin de H20, pues el medio extracelular
es un medio en donde la concentracin de solutos es menor que la concentracin dentro
de la clula, por lo que se requiere ingresar agua a esta misma y as poder llegar
posteriormente el equilibrio. Debemos saber que la pared celular de la hoja no colapsa
oestalla gracias a que las clulas vegetales tienen una gran rigidez que lo evita. Este se
comprueba agregndole una cantidad de agua a la hoja. Esta se da agregar tres gotas de
H20 destilada sobre la hoja. (Tortora, Funke, & Case, 2007)[2]

Experimento 3. MEDIO ISOTNICO.

En esta las concentraciones globales de solutos son iguales tanto en el interior de la
clula como del medio. En este caso la velocidad de paso del agua por la membrana es
la misma y por lo tanto el contenido de la clula est en equilibrio con la solucin fuera de
la membrana celular.Esta se da agregar tres gotas de H20 del mismo medio sobre la
hoja. (Tortora, Funke, & Case, 2007)[2]

Experimento 3. MEDIO HIPERTNICO.

En esta la mayor concentracin de solutos se encuentra en el interior de la clula y la
clula tiende a ingresar agua hasta sufrir el proceso de plasmlisis al egreso del agua
celular por osmosis. Esta se da agregar tres gotas de CaCl2 al 10% sobre la hoja.
(Tortora, Funke, & Case, 2007)[2]

Experimento 4. Difusin

Otro tema que es de mucha importancia recalcar en la difusin de sustancias a

travs de las membranas para que este suceso ocurra la membrana se
necesita que sea permeable al soluto para que permita el paso del medio
externo que posee mayo concentracin al medio interno que tiene bajas
concentraciones, existen dos formas para determinar que una membrana sea
permeable, la primera forma de determinar esto es si el soluto traspasa sin
dificultad la bicapa de los lpidos y la segunda forma es que el soluto pueda
interactuar con un medio poroso de la membrana evitando as el contacto
directo del soluto con la bicapa de los lpidos (Karp, 1996)[4]

Como podemos ver al aumento de volumen reduce el tiempo de difusin en una cantidad
de agua a una temperatura constante miramos que est casi en una forma lineal.
Tubo
1
2
3

Concentracin de KMnO4
2 gotas
3 gotas
5 gotas

Temperatura
Ambiente(22C)
Ambiente(22C)
Ambiente(22C)

Tiempo(Minutos)
2min
2 min 2,5 seg
3min

10

Tiempo Vs. Temperatura

1.4
1.2
1
0.8

Tiempo(segundos) 0.6
0.4
0.2
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Temperatura(c)

Tubo
1
2
3

Concentracin de KMnO4
2 gotas
2 gotas
2 gotas

Temperatura
Helada(3C)
Ambiente(22C)
Caliente(80C)

Tiempo(Minutos)
1 min 20 seg
1min 6 seg
25.3 seg

Considerando el factor como es la temperatura miramos que es un importante factor y que

que este hace variar de forma considerable los tiempos de difusin, esto se debe a que al
aumento de temperatura las molculas de H20 tienen mayor interaccin incrementando la
difusin.

Experimento 5. 2 prueba de nitrato de plata y Benedit para la presencia de sales.

Para este experimento se agregaron los reactivos para verificar que la membrana est
llegando al equilibrio, que es el traspaso de sales por la misma. Y hace que tanto dentro
del tubo falcn como del medio se estn moviendo las partculas. El AgNO3 da la
precipitacin de las sales y el mtodo de Benedict de igual forma aunque este no lo
alcanzamos hacer porque nos falt el tiempo para el calentamiento. Pero podemos
asumir que se presentara de forma positiva.

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Conclusiones.
El medio y la membrana siempre llegan al equilibro por el traspaso de solutos por medio de la
membrana esta se da por diferentes medios de transporte dentro de las clulas ya que este se encarga
de supervisar el paso de los nutrientes y protenas desde el medio externo al interno o inverso.
Es importante saber el comportamiento de membranas porque estn tiene gran
importancia en la vida del ingeniero qumico en diversos procesos qumicos. Y debemos
resaltar que tienden a llevar al equilibrio el medio y la clula.

Bibliografa
[1]B, A., D, B., A, J., J, L., M, R., K, R., y otros. (1999). Introduccin a la Biologa
Celular 1 edicin. OMEGA.
[2]Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Introduccion a la
microbiologia. Buenos Aires, Argentina: medica Panamericana.
[3]Karp, G. (1996). Biologia celular y molecular. mexico,D.F.: McGRAW.HILL
INTERAMERICANA.

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