PRACTICA N 11

ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
Capacidades a Lograr:
1. Conoce los factores que influyen en la estabilidad de los principios activos
contenidos en un preparado farmacutico.
2. Conoce y aplica mtodos para predecir la estabilidad de medicamentos.
3. Conoce el tratamiento de los datos experimentales obtenidos en un estudio de
estabilidad acelerado usando como modelo cido acetil-saliclico (AAS).

Cintica en soluciones acuosas:

El trmino estabilidad de una forma farmacutica se refiere al periodo durante el cual se
mantienen las condiciones de idoneidad, potencia, calidad y pureza, determinadas en la
preparacin inicial de dicha forma farmacutica.
Se considera como vida til de un producto, el tiempo transcurrido desde la fecha de
manufactura de la formulacin hasta que su actividad qumica o biolgica no sea menor que un
nivel predeterminado de la potencia establecida originalmente (generalmente se acepta un
90%) y que sus caractersticas fsicas no hayan cambiado apreciablemente o en forma
perjudicial.
Para predecir la velocidad y el curso de las reacciones de degradacin de los principios activos,
el formulador debe recurrir a la informacin que le proporcionan las reacciones de la cintica
qumica.
Uno de los factores ms relevantes en la determinacin de la estabilidad de un frmaco en
solucin es el pH del medio y, en general, puede decirse que la velocidad de degradacin ser
mayor a ciertos valores de pH y menor a otros. Generalmente es posible determinar un valor de
pH donde la velocidad de degradacin es mnimo, lo que es lo mismo, donde la estabilidad es
mxima. Este valor de pH se conoce como pH de mxima estabilidad (pH ME).
El pH ME es uno de los parmetros que deben determinarse en la etapas preliminares de la
caracterizacin fsico-qumica de un nuevo principio activo. Pero a pesar de ser un parmetro
muy importante en la estabilidad de medicamentos, debe decirse que ste es slo uno de los
mltiples factores que entran en juego para decidir las caractersticas definitivas de las formas
farmacuticas que sern puestas en el mercado.
Experimentalmente el procedimiento consiste en realizar un estudio cintico de la degradacin
de frmacos a distintos valores de pH, mantenidos constantes por medio del uso de soluciones
tampones de capacidad adecuada. Como resultado de dicho estudio se obtiene una serie de

valores de constantes de velocidad de degradacin, para cada valor de pH, denominados,

constantes aparentes u observadas (Kobs). Al graficar los valores del logaritmo de Kobs
versus pH se obtiene una curva denominada perfil de pH (PpH) del frmaco o sustancia en
estudio. En este grfico es posible observar una zona donde la constante de degradacin es
mnima, esto es, donde el pH = pH ME.
El estudio de hidrlisis de steres (ejemplo: procana, nitrato de amilo) y amidas (ejemplo:
procainamida y cloramfenicol) puede seguirse mediante cintica qumica. La degradacin
penicilina y oxitetraciclina, la oxidacin de cido ascrbico y la prdida de actividad biolgica de
la 1-epinefrina son otros ejemplos de estudios de degradacin que pueden hacerse utilizando
cintica qumica. La cantidad de droga activa remanente a cualquier tiempo, puede ser
determinada por el farmacutico formulador despus del estudio experimental de la constante
de velocidad de una reaccin en particular.
Si la velocidad de reaccin es directamente proporcional a la concentracin de los reactantes
se trata de una reaccin de primer orden. La cantidad de Principio activo (p.a.) que reacciona
depende de la cantidad en la que est presente y puede ser expresada matemticamente
como:

dc
Kc
dt
donde dc es la diferencia de concentracin del p.a., K es la constante de degradacin, dt
es la diferencia de tiempo y -dc/dt es la velocidad a la cual la concentracin disminuye.

Si esta ecuacin es integrada entre los lmites de concentracin c1 a tiempo t1 y c2 a tiempo t2,
toma la siguiente forma:

2
.302 c
1
K
log
t2
t1
c
2
La constante K, es la constante especfica de la reaccin o constante de velocidad. Para una
reaccin de primer orden se expresa en unidades de tiempo reciproco.
El decaimiento radioactivo, la inversin de la sacarosa y la hidrlisis cida de la procana son
reacciones da primer orden. La velocidad de reaccin puede ser descrita en trminos de vida
media tanto como referida a la constante de velocidad. La vida media t1/2, es el tiempo en el
cual se degrada la mitad de la concentracin inicial de p.a. Para una reaccin de primer orden
Se llama reaccin de segundo orden a aquella en que la velocidad de reaccin es proporcional
a la concent
cual la concentracin disminuye es:


dcA

dcB

K
c
A
c
B
dt dt
el valor de K depende de las unidades en la cual est expresada la concentracin. Si por
convencin la concentracin es expresada en moles/litro, K tiene la dimensin de litro/mol
tiempo.
Algunas reacciones no son afectadas por la concentracin, por ejemplo las reacciones
fotoqumicas dependen de la cantidad de luz o del nmero de fotones absorbidos y son
independientes de la cantidad de p.a. presente.

Influencia de la Temperatura.
Muchos productos farmacuticos son almacenados en el refrigerador ya que se reconoce
generalmente que un incremento en la temperatura aumenta la velocidad de degradacin del
p.a.. Para estudiar la estabilidad de un producto determinado debe considerarse de manera
importante la ecuacin de Arrhenius que en su forma integrada se expresa como:

k
Ea
(
T
T
)
2
2
1
log

K
.303
R
T
T
1 2
1
2
en la cual K2 y K1 son las constantes de velocidad a las temperaturas absolutas T 2 y T1
respectivamente, R es la constante de los gases (1.987 cal /K mol), y Ea es la energa de
activacin. Esta energa de activacin es la cantidad de energa requerida para poner una
molcula del reactivo inicial en un estado activado capaz de reaccionar para llegar a un
producto final. La energa requerida para lograr el estado activado es el factor determinante en
la velocidad de reaccin. Cuando la energa de activacin es alta, la velocidad de reaccin a
una temperatura dada disminuye, ya que las molculas capaces de reaccionar son pocas.
Aunque la forma integrada de la ecuacin de Arrhenius es la ms utilizada, tambin puede
emplearse la forma exponencial

Ea
LogK

Constante
2
.
303
R
es decir graficando log. de K en la ordenada versus 1/T en la abscisa se obtiene una lnea recta
con una pendiente
Ea.

Ea
Ea
, es decir
, permitiendo calcular la energa de activacin
4.58
2.303R

Cuando se desarrolla un nuevo producto, puede estudiarse la estabilidad a temperatura

ambiente por meses o aos, sin embargo ms importante es estudiar la estabilidad en
condiciones aceleradas utilizando la ecuacin de Arrhenius, usando temperaturas superiores a
la temperatura ambiente y si son favorables la produccin es iniciada continuando con estudios
de estabilidad a temperaturas o a temperatura ambiente por periodos prolongados.

EXPERIENCIA PRCTICA
ESTABILIDAD DEL ACIDO ACETIL SALICILICO (AAS) EN SOLUCION ACUOSA
Este trabajo prctico est diseado con fines didcticos. Para ello se ha elegido el AAS
(PM180.16), muy inestable en las condiciones experimentales que aqu se plantean, de forma
tal que se pueda evaluar su degradacin dentro del tiempo establecido para la prctica.
Se trabajar primero con los pH 1, 2, 3 y 4, y luego con los pH 6, 7, 8 y 9.
A. Determinacin del producto de degradacin
El AAS se degrada hidrolticamente a cido-saliclico (AS) y cido actico. El cido saliclico
puede ser medido colorimtricamente como un complejo frrico a 525 nm.
1. El reactivo para el anlisis se prepara disolviendo 4 g de nitrato frrico con 9 moles de
agua en 100 mL. de HCl 0.12 N.
2. El complejo formado se cuantifica utilizando un espectrofotmetro a 525 nm.

B. Curva de calibracin
Se prepara una solucin madre de 0.005 M de AS. Para favorecer la disolucin del AS, se
debe agregar en primer trmino 5 mL de etanol absoluto y luego enrasar con agua
destilada hasta 100 mL. Se preparan las disoluciones sealadas en la siguiente tabla:

Alcuota de solucin

Volumen final (mL)

Factor de dilucin

Molaridad

1.0

10.0

10.00

0.0005

2.0

10.0

5.00

0.0010

3.0

10.0

3.33

0.0015

4.0

10.0

2.50

0.0020

5.0

10.0

2.00

0.0025

madre

De cada solucin se toma 01 mL, se agrega sobre 5 mL de nitrato frrico y al cabo de 5

minutos se determina la absorbancia a 525 nm.

C. PROCEDIMIENTO:
1. Con el objeto de obtener las Kobs a diferentes pH se trabaja a los siguientes valores de
pH: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9.

2. Para cada uno de los pH se procede de la siguiente manera: se pesan 200 mg de AAS
y se transfieren cuantitativamente a un baln aforado de 100 mL y se agrega 5 mL de
etanol absoluto.
3. Agregar aproximadamente 60 mL de la solucin tampn asignada (pH 1,2,3)
PRECALENTADA a 55C y luego enrasar a 100 mL con solucin tampn agitando
hasta disolucin completa. Preparar en forma rpida la solucin. NO OLVIDAR QUE LA
DEGRADACION ESTA OCURRIENDO MIENTRAS SE MANIPULA LA SOLUCION.

4. Del matraz que corresponde al tiempo "cero" retirar inmediatamente 01 mL y aadirlo

en un tubo de ensayo que contiene 5mL de Fe(NO3)3 S.R. Los otros matraces se
colocan inmediatamente en el bao termo-regulado a 50 C, hasta alcanzar los tiempos
establecidos, luego se procede en idntica forma que para el tiempo "cero".

5. Agitar en vrtex y despus de 5 minutos determinar la absorbancia a 525 nm. Corregir

con un blanco compuesto de 5 mL de FeNO3 S.R y de un mL del tampn
correspondiente.

Tabla de datos.
pH

Tiempo

Absorbancia

(min.) de
muestreo

Cantidad de

Cantidad de

Cantidad

A.S.

A.A.S.

remanente

Kobs

Log
Kobs

de A.A.S.

0
1.0

15
30
0

2.0

30
60
0

3.0

60
120
0

4.0

30
60
0

5.0

30
60
0

6.0

30
60
0

7.0

30
60
0

8.0

30
60
0

9.0

15
30

D. Tratamiento de los datos

1. Graficar el porcentaje de AAS remanente versus tiempo en coordenadas cartesianas
para cada uno de los pH en estudio. Identificar el orden de la cintica supuesta.

2. De la pendiente del grfico anterior, determinar la constante de velocidad de

degradacin (Kobs). Precisar las unidades de las constantes observadas (Kobs).

3. Graficar las Kobs obtenidas v/s pH en papel semi-logartmico o alternativamente en

coordenadas cartesianas.

4. Sealar en el grfico anterior el pH de mxima estabilidad del medicamento en estudio.

5. Calcular la vida til que tendra la solucin de AAS al pH de mxima estabilidad.

Lo que se determina en la lectura de datos no es directamente la cantidad de AAS, si no que

este es hidrolizado hasta AS y es de esta forma que forma el complejo coloreado violeta con el
+++

Fe

. Por lo que es necesario hacer la conversin de AS a AAS que es materia de anlisis.

Tenemos que el peso molecular de los compuestos y a la vez es la equivalencia:

AAS es 180.16 g y el del AS es 138,12 g

+H

ACIDO ACETIL
ACIDO SALICILICO
SALICILICO
Datos experimentales simulados, proporcionados para el desarrollo de la prctica.

Curva de Calibracin

Abs

Cc.(mg/mL)
0,0966

0,069

0,1868

0,138

0,2857

0,207

0,4199

0,276

0,4556

0,345

+ CH3COOH

Datos experimentales obtenidos (tericos) para realizar los clculos respectivos.

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH
pH 1
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,117224601
0,102746761
10,2746761 13,40201018
15
0,142408147
0,122770253 12,27702531 16,01382044
30
0,162302976
0,138588675 13,85886746 18,07713265
Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH
pH 2
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,10516009
0,093154242 9,315424177 12,15078786
30
0,111150454
0,097917193 9,791719295 12,77205436
60
0,162302976
0,138588675 13,85886746 18,07713265

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

186,5979898 5,228956516
183,9861796 5,214860644
181,9228674 5,203582791

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

187,8492121 5,235639578
187,2279456 5,232326835
181,9228674 5,203582791

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,228956516
15
5,214860644
30
5,203582791
Kobs=

0,0008 min-1

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,235639578
30
5,232326835
60
5,203582791
Kobs=

0.0005 min -1

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 3
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg) AAS res. (mg) Ln.AAS rem.
B
0
0,102662347
0,091168281 9,116828068 11,89174446 188,1082555 5,237017624
30
0,145214697
0,125001747 12,50017471
16,3048905 183,6951095 5,21327737
60
0,178383061
0,151373985 15,13739847 19,74481399 180,255186 5,194373547

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,237017624
60
5,21327737
120
5,194373547

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 4
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,111150454
0,097917193 9,791719295 12,77205436
30
0,176091261
0,14955177 14,95517695 19,50712916
60
0,252479606
0,210288309 21,02883091 27,42943945

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,232326835
30
5,19569128
60
5,150806199

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 6
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,110412488
0,097330435
9,73304347
12,6955192
15
0,158717167
0,13573759 13,57375903 17,70524491
30
0,227798086
0,190663979
19,0663979
24,8696948

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

187,2279456 5,232326835
180,4928708 5,19569128
172,5705605 5,150806199

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

187,3044808 5,232735532
182,2947551 5,205624911
175,1303052 5,165530298

Kobs=

Kobs=

0.0004 min -1

0.0014 min -1

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,232735532
30
5,205624911
60
5,165530298
Kobs=

0.0011 min-1

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 7
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg) AAS res. (mg) Ln.AAS rem.
B
0
0,082974238
0,075514223 7,551422256 9,849871371 190,1501286 5,247813911
15
0,200359836
0,168847767 16,88477669 22,02404698 177,975953 5,181648446
30
0,320335154
0,264240402 26,42404019 34,46680482 165,5331952 5,10917175

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,247813911
30
5,181648446
60
5,10917175

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 8
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,11303951
0,099419186 9,941918603 12,96797028
15
0,211419218
0,177641105 17,76411055 23,17102633
30
0,348802774
0,286875069 28,68750691 37,41920971

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,231279884
30
5,175183015
60
5,091175049

Determinacin de la Cantidad de A.A.S. remanente en el tiempo a pH

pH 9
Tubo(min) Absorvancia Cc. mg/mL A.S. A.S. (mg)
AAS degra(mg)
B
0
0,13717319
0,118607927 11,86079272 15,47089788
15
0,20411998
0,171837465 17,18374649 22,41401512
30
0,301029993
0,248890827 24,88908266 32,46464764

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

187,0320297 5,231279884
176,8289737 5,175183015
162,5807903 5,091175049

AAS res. (mg) Ln.AAS rem.

184,5291021 5,217807186
177,5859849 5,179454914
167,5353524 5,121194388

Kobs=

Kobs=

0.0022 min-1

0.002 min-1

Clculo de las Kobs.

Tiempo Ln AAS res.
0
5,217807186
15
5,179454914
30
5,121194388
Kobs=

0.0032 min-1

Obtener el valor de la constante K mnima, que corresponde al pH de mayor estabilidad y calcular el T 90:

REALIZAR SUS CALCULOS Y PRESENTAR SUS RESULTADOS apoyndose de grficos en

papel milimtrico.
Responda Segn las ecuaciones de cintica propuestas, qu otros mtodos existen
para determinar la estabilidad de un medicamento? Sustente sus respuestas.