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Introduccin
La identificacin de enterobacterias se realiza mediante sus
atributos fisiolgicos que definen a la bacteria y la diferencian de las
dems. Entre los mtodos utilizados para la diferenciacin se tiene los
siguientes; Catalasa, oxidacin, rojo de metilo, citrato de Simmons,
Indol, caldo de urea y agar hierro triple azcar, estas pruebas
bioqumicas nos permiten identificar la familia y en especial el gnero,
ya que tienen reacciones diferentes al ser sometidas a estas pruebas.
Esta prctica consisti en el anlisis de los resultados anteriores
principalmente las que no manifiestan pruebas al instante al ser
sometidas a las pruebas bioqumicas, sino que, con la incubacin se
manifestaron horas despus, y estas se determinan positivas o por el
contrario negativas.
Marco Terico
Voges-Proskauer
Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un
microorganismo de fermentar la glucosa con produccin de cido por la
va cido mixta o con produccin de un producto final neutro (acetona)
por la va butanodilica.
Rojo de metilo
Es un indicador de pH acta entre pH 4,2 y 6,3 variando desde rojo
(pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Por lo tanto, permite determinar la
formacin de cidos que se producen durante la fermentacin El rojo de
metilo se prepara con 0,1 g de este reactivo en 1500 ml de metanol. Una
reaccin positiva indica que el microorganismo realiza una fermentacin
acidolctica de la glucosa por la va cido-mixta.
Citrato de Simons
Determina la capacidad de un microorganismo de utilizar el citrato como
nica fuente de carbono si hay un crecimiento en color azul intenso en la
pendiente la prueba es positiva, es decir, las bacterias si utilizan el citrato como
fuente de carbono y si permanece verde es negativa.
Indol
Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de las bacterias
para producir indol a partir del triptfano la produccin de indol es una
Medio SIM
Es un medio semislido destinado a verificar la movilidad,
produccin de indol y de sulfuro de hidrgeno en un mismo tubo. Es til
para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae
Ureasa
Medio utilizado para la identificacin de microorganismos en base
a la actividad uresica. Es particularmente til para diferenciar Proteus
spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae. Presenta bajo
contenido de nutrientes y alta capacidad buffer. Aquellas bacterias que
poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno proveniente de la
urea, la hidrolizan, liberando amonaco y dixido de carbono.
Materiales y reactivos
2 pipetas de 1 ML.
1 perilla o propipeta
Procedimiento
Primera Parte
Primero se hizo la prueba en el caldo Voges-Proskauer aplicamos .6
mililitros de la solucin etlica de naftol al 5%, agitamos el tubo y lo
dejamos en reposo durante 15 minutos, en lo que esperbamos el
resultado realizamos la prueba de rojo metilo, en la cual aplicamos dos
gotas de indicador rojo de metilo al otro tubo que contena el caldo
Voges-Proskauer lo agitamos y observamos la reaccin (vase tabla de
resultados), y en seguida realizamos la observacin en el citrato de
Simmons en el cual pudimos observar el cambio de color en referencia a
la prueba control, en cuanto a la prueba Indol agregamos las 2 gotas del
reactivo Kovac esperamos un tiempo y obtuvimos el resultado. Tambin
observamos las pruebas de cido sulfrico en el cual vimos que no ava
ningn
cambio en respecto a la prueba control, este mismo
procedimiento lo realizamos el medio SIM solo observamos el resultado
de la incubacin de la bacteria en el cual pudimos ver que el medio SIM
estaba turbio, determinando as, que la prueba sala positiva. En cuanto
a la ureasa no se observ ningn cambio por lo que se determin como
negativa, y para culminar con esta parte se observ el Hierro Triple
Azcar una vez obtenido todos los resultados de las pruebas bioqumicas
se procedi a compararlas con la enterobacterias ya identificadas.
Recogimos la basura
Resultados
No.
TSI
Cultiv
GA
H2S
RM
VP
IND
CIT
URE
MOV
o
Roja
A/A
Blanca
Alc/Alc
Control
TSI
GAS
H2S
RM
VP
IND
CIT
A/A
URE MOV
ia
P. Neumoniae