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1

ENZIMAS
Nombres
Gabriel Fernando Ordoez
Jhon James Samboni

E-mail
gabrielord@unicauca.edu.co
jhons@unicauca.edu.co

Biorgnica, Ingeniera Agropecuaria, Facultad de ciencias agrarias, Universidad del


Cauca
Grupo No: 3
Fecha de realizacin de la prctica:

07/08/2015

Fecha de entrega de informe:

30/10/2015

ENZIMAS

RESUMEN:
Los

enzimas

especializadas

son

en

contribuyen

la

actividad

reacciones qumicas que tienen lugar en la

muestra de saliva diluida se sometieron

clula.

como

diferentes muestras bajo condiciones de

catalizadores ya que son capaces de

temperature variada lo cual nos arroj

aumentar la velocidad de las reacciones

coloraciones

qumicas

dependiendo del medio de temperatura en

mucho

de

enzimtica en la amilasa, al obtener la

muy

catlisis

afectan

las

Son

la

biomolculas

eficaces

ms

que

cualquier

catalizador artificial conocido, y adems son

que

altamente especficos ya que cada uno de

sometidas a muestras de diferente pH,

ellos induce la transformacin de un slo

donde se conoce que el pH juega un papel

tipo de sustancia y no de otras que se

muy importante en la function de las

puedan encontrar en el medio de reaccin.1

enzimas, donde se comprob debido al

por otro lado La amilasa, denominada

variable coloracin (azul, caf, violeta),

tambin sacarasa o ptialina, es un enzima

luego se procedi con la especificad de

hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la

cada enzima donde se analiz la el

reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del

complejo

componente

el

variables resultados, y para terminar se

formar

analizaron los diferentes activadores he

produce

inhividores para este tipo de enzima los

principalmente en las glndulas salivales y

cuales a su vez cumplen la funcin de

en el pancreas. Para esta prueba se analiz

activar o inhibir la actividad enzimtica.

glucgeno
azcares

-Amilosa
y

el

al

almidn

simples,

digerir
para

se

fueron

distintas para cada muestra


espuestas,luego

enzima

sustrato,

el efecto de cuatro particularidades que

DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS


Tabla 1 labilidad trmica de las enzimas
tubo de

Enzima

Condiciones

Sustrato

incubacin

Coloracin

ensayo
1

Amilas

del experimento
Enzima

Almidn

10min

con yodo
Azul

a
Amilas

desnaturalizada
Enzima nativa

Almidn

gr
10min 37gr

Amarillo

a
Amilas

Enzima nativa

Almidn

10min 0gr

No

ENZIMAS

37

hubo

fueron

indicando

3
a

resultado

Fuente: laboratorio de enzimas bioqumica

Tabla 2 influencia del pH sobre la actividad de las enzimas


tubo de
ensayo
1
2
3

Enzima

pH

del

Amilasa
Amilasa
Amilasa

medio
5,0
6.8
8.0

sustrato

incubacin

Cloracin

Almidn
Almidn
Almidn

10min 37C
10min 37C
10min37C

yodo
Azul oscuro
Caf claro
rosado

con

Fuente: laboratorio de enzimas bioqumica

Tabla 3 especificad de las enzimas


tubo de

sustrato

Enzima

incubacin

Coloracin con yodo

ensayo
1
2
3

Almidn
Almidn
Sacaros

Amilasa
Invertasa
Amilasa

10min 37C
10min 37C
10min 37C

Azul oscuro
Morado
Azul oscuro

a
Sacaros

Invertasa

10min 37C

Amarillo

a
Fuente: laboratorio de enzimas bioqumica

Influencia de los activadores e inhibidores


tubo de

Sustrato

Enzima

Sustancia

incubacin

Coloracin

ensayo
1

Almidn

Amilas

aadida
Cloruro

10min 37C

con yodo
Morado claro

Almidn

a
Amilas

sdico 1%
Sulfato

10min 37C

Azul claro

cprico 1%

Fuente: laboratorio de enzimas bioqumica

Discusin de resultados:

enzima,

Las enzimas son protenas que aceleran las

tambin es importante resaltar que la

reacciones

la

temperatura optima a la que debe estar una

velocidad para la canalizacin, por otro lado

enzima son 36C y 41 C., y adems

tenemos que uno de los factores fsicos que

tenemos que el aumento de temperatura en

afectan e influyen en la enzima es la

que se encuentra la enzima en un medio

temperatura en que se encuentra dicha

moderado, acelera la velocidad de reaccin

qumicas,

disminuyendo

ENZIMAS

en

nuestro

caso

la

amilasa.

4
ya que se active la velocidad de las

Para empezar, se ha de aclarar que las

molculas del sustrato, pero si la temperara

diluciones

esta por enzima de los 50C se produce

diferentes personas son distintas porque las

que la enzima se inactive de igual modo si

caractersticas y concentraciones de los

la

la

compuestos varan de una persona a otra.

inactivacin de la enzima.2partiendo de esto

Esto mismo ocurre con el pH salival y el

nuestra muestra fue La amilasa es un

tiempo de referencia, Un pH muy cido o

enzima que tiene la funcin de digerir el

muy alcalino, tambin puede inhibir el

glicgeno y el almidn para formar azcares

proceso.

simples, se produce principalmente en las

El rango de 2 a 10 minutos para el efecto

glndulas salivares y en el pncreas, la cual

acromtico elegido se debe a que los

fue sometida a una temperatura de 37 C

tiempos sean manejables en el trabajo

durante 10 minutos con un sustrato como lo

prctico. Si se buscase un tiempo de

es el almidn (el cual es un carbohidrato

referencia muy pequeo, los cambios no

que proporciona energa a los animales

hubiesen sido apreciados.5 partiendo de

para sus actividades locomotrices) para que

este punto se expuso la enzima aun pH de

esta reaccionara con lugol. Donde los

5.0 a 37 C lo cual nos arroj una coloracin

resultados fueron:, nuestra coloracin fuel

azul oscuro, donde nos indic una hidrolisis

un azul oscuro, lo cual nos indica que La

del almidn, para el segundo tubo de

amilasa romper los enlaces de almidn y

ensayo con un pH de 6.8 a una temperatura

dar

amilosa,

de 37 C, nos arroj un color caf claro los

amilopectina y finalmente glucosa3, y

cual nos indica que presento una mejor

adems comprobamos la presencia de al

actividad enzimtica con almidn ya que El

almidn en dos tubos de ensayo, por otro

pH ptimo de la actividad enzimtica es 7,

lado al someter la amilasa a 0 C la enzima

excepto las enzimas del estmago cuyo pH

no actu, lo cual nos indica que al disminuir

ptimo es cido.6 de este mismo modo se

demasiado la temperatura, los choques

realiz esta prueba con pH de 8.0 a 37 C

entre las molculas disminuyen tambin,

los cual nos arroj un color Rosado, donde

por lo que la actividad enzimtica baja hasta

se present una desnaturalizacin. Es de

el punto en el que no se puede ver en el

anotar que cada enzima tiene un pH ptimo,

experimento.4

lo cual nos indica que cualquier diferencia

Como segundo experimento se observ la

del pH sobre esta sup unto ptimo por

influencia del pH en la actividad enzimtica,

pequea que sea nos puede producer

temperatura

como

desciende

resultado

ocurre

la

ENZIMAS

ptimas

para

salivas

de

5
cambios

drsticos

en

la

actividad

enzimtica.

y otros polisacridos, por consiguiente se


realiz

la

misma

prueba

pero

con

Para el tercer anlisis se realizo aprueba

invertasa, de la cual sabemos que se

de

Ello

encarga de catalizar la hidrolisis de

significa que las enzimas pueden catalizar

sacarosa o de maltosa donde nos arroj

la transformacin de apenas un substrato

una coloraciones azul oscuro lo cual nos

o una familia de substratos relacionados

indic

estructuralmente, catalizando solo una de

polisacridos como lo es el almidn, por

las

esto En solucin acuosa, la amilosa forma

especificad

posibles

enzimtica.

reacciones

Por

que

ese

substrato puede experimentar.

as

estructuras

mismo

la

helicoidales

eficacia

lineales

de

la

amilopectina ramificadas, gracias a la


Cuando la enzima solo puede actuar sobre

formacin de puentes de H entre los

un tipo de substrato, se dice que la enzima

grupos OH de la glucosa y las molculas

muestra especificidad absoluta para el

de H2O8, luego de eso se tom la tercera

substrato. Si la enzima puede actuar sobre

muestra,

substratos con estructuras muy similares,

sacarosa, donde tuvimos una coloracion

se

enzima

azul oscuro, que al igual que las anteriores

muestra especificidad relativa para el

nos indic la eficacia de los polisacridos

substrato,

las

como lo es la sacarosa, mostrando una

enzimas depende de las caractersticas

especificad relative para este sustrato. Por

del sitio o centro activo. Esta es la region

consiguiente se analiz la cuarta muestra,

de la enzima donde esta se une al

pero ya con la enzima invertasa, donde

substrato

nos arroj una coloracin amarillenta

dice

que
La

antes

la

especificidad

de

que

de

ocurran

las

pero

con

el

sustrato

de

transformaciones del substrato7.

donde nos indic que las molculas de

Para comenzar se realiz la prueba con un

yodo son incapaces de juntarse y por lo

sustrato de almidn a una temperatura de

tanto no hubo presencia de polisacridos y

a 37 C durante 10 minutos la cual nos

por ello no hubo catlisis.

arroj una coloracin azul oscuro lo cual

Para terminar se determin la influencia de

nos indica la presencia del almidn es esta

los activadores e inhibidores para cada

reaccin y adems una buena especificad

enzima. Para esto Existen una serie de

enzimtica, ya que la prueba de lugol se

sustancias,

utiliza para determinar la presencia de este

inhiben o anulan la accin de los enzimas

ENZIMAS

llamadas

inhibidores,

que

sin

ser

transformados

La

cloruro sdico acta como un activador, y

inhibicin enzimtica puede ser irreversible

por tanto la velocidad de la actividad

o reversible, esta ltima comprende a su

enzimtica

vez tres tipos: inhibicin competitiva, y no

muestra

competitiva. Son sustancias a menudo

procedimiento

iones metlicos que se necesitan para que

cprico, la cual nos arroj un color azul

ciertas

como

oscuro lo cual nos indic que tambin

catalizadores. Dado esto para esta prueba

acta como un activador en la actividad

se realiz con la enzima amilasa y el

enzimtica. En fin El reactivo de Fehling,

sustrato almidn con una concentracin de

es una reaccin disuelta propensa a

cloruro de sdico a una temperatura de 37

disolverse con la accin de la disolucin

C durante 10 minutos, donde obtuvimos

solucin

una coloracin de azul o morado claro lo

alemn Hermann von Fehling y que se

cual nos indic que la presencia del cloruro

utiliza como reactivo para la determinacin

sdico no afecto la actividad enzimtica, y

de azcares reductores.

enzimas

sean

por

ellos.

activas

aumenta.
se

En

realiz
pero

la

segunda

el

mismo

agregando

sulfato

descubierta

por

el

qumico

por lo tanto podemos deducir que el


Respuesta a las preguntas.

violeta. Este complejo es sensible a la


temperatura, ya que si se calienta el tubo, el

1. Qu se espera con la tincin de Lugol

color desaparece. Esto se debe a que las

cul es el fundamento de la reaccin?

espiras del almidn se "desarman", por as

La reaccin del Lugol es un mtodo que se

decirlo, y el yodo se libera. Una vez fro, las

usa para identificar polisacridos. el almidn

espiras se reorganizan y se vuelve a ver el

en contacto con el reactivo de Lugol

color.9

(disolucin de yodo y yoduro potsico) toma


un color azul-violeta caracterstico. Esa

Cul es la finalidad del empleo de la

coloracin producida por el Lugol se debe a

reaccin de fehling?

que el yodo se introduce entre las espiras

El reactivo de Fehling, es una reaccin

de la molcula de almidn. Por lo tanto, no

disuelta propensa a disolverse con la accin

es una verdadera reaccin qumica, sino

de la disolucin solucin descubierta por el

que se forma un compuesto de inclusin

qumico alemn Hermann von Fehling y que

que modifica las propiedades fsicas de esta

se

molcula, apareciendo la coloracin azul

determinacin de azcares reductores.

ENZIMAS

utiliza

como

reactivo

para

la

7
El

licor

de

Fehling

consiste

en

dos

Comisin de Enzimas) inicia la digestin de

soluciones acuosas:

los polisacridos en la boca (el proceso lo

Sulfato cprico cristalizado, 35 g; agua

completar la amilasa pancretica en el

destilada, hasta 1.000 ml.

intestino delgado). La amilasa es una

Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y

glicoprotena monomrica que une calcio y

sodio), 173 g; solucin de hidrxido de

que hidroliza aleatoriamente los enlaces

aluminio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.

glicosdicos (1,4) del almidn (ver figura).


La

amilasa

(1,4--D-glucano-

Cul es el sustrato especfico para la

maltohidrolasa;

invertasa y la amilasa?

hidrlisis de los enlaces glicosdicos (1,4)

A diferencia de un catalizador inorgnico

del

que interviene en numerosas reacciones las

maltosa sucesivas a partir de los extremos

enzimas producidas por los organismos

no reductores de las cadenas. Esta amilasa

vivos habitualmente solo catalizan un tipo

es una de las principales protenas del

de

reaccin

endospermo rico en almidn de los granos

de

las

de cebada (Hordeum vulgare) y es una

enzimas es tan marcadas que en general

enzima clave en la degradacin del almidn

actan exclusivamente sobre sustancias

durante la produccin de cerveza.

que tienen una configuracin precisa; por

Invertasa

ejemplo, si solo atacan a los aminocidos

La invertasa o sacarosa (sacarosa--D-

que tienen su carbono , asimtrico, con

glucohidrolasa; EC 3.2.1.48) cataliza la

estructura

hidrlisis de sacarosa y de maltosa. La

reaccin

determinada;

L-,

o
la

no

solo

una

especificidad

muestran

la

menor

almidn

EC 3.2.1.2)
eliminando

unidades

sacarosa,

aminocidos, pero que sean del tipo D-.9

azcar de caa, es un disacrido formado

Qu

por una molcula de -D-glucosa y por otra

cataliza

la

amilasa

conocida

de

actividad sobre formas idnticas de dichos


reaccin

comnmente

cataliza la

como

(salival) y la invertasa?

de -D-fructosa unidas por un enlace

Amilasas

glicosdico 1-2. Cuando se hidroliza este

Para utilizar los carbonos y la energa

enlace, se obtiene una mezcla equimolar de

almacenados en el almidn, el sistema

glucosa y fructosa (ver figura). En la

digestivo humano tiene que romper primero

levadura (Saccharomyces cerevisiae), la

este polmero en molculas ms pequeas.

invertasa tiene formas tanto intra- como

La amilasa salival (1,4--D-glucano-

extracelulares9

glucohidrolasa;

Conclusiones:

n.

EC

3.2.1.1

de

la

ENZIMAS

8
1. La amilasa es un enzima hidrolasa que

temperatura y dems aspectos importantes

tiene la funcin de digerir el glucgeno y el

en la actividad enzimtica.

almidn para formar azcares simples, se

4. gracias a las enzimas que estn en

produce principalmente en las glndulas

nuestro cuerpo se pueden desempear

salivares (sobre todo en las glndulas

diferentes

partidas) y en el pncreas.

nuestro organismo.

2. Las enzimas son estructuras moleculares

5. Sin enzimas, no sera posible la vida que

complejas altamente evolucionadas que

conocemos. Igual que la biocatlisis que

estn adaptados a realizar una funcin

regula la velocidad a la cual tienen lugar los

especfica con eficiencia y precisin

procesos fisiolgicos, las enzimas llevan a

3. se logr determinar el efecto que tienen

cabo funciones definitivas relacionadas con

diferentes

salud y la enfermedad.

factores,

como

el

pH,

la

funciones

importantes

para

Referencias y Bibliografa:
1. http://www.bionova.org.es/biocast/documentos/tema14.pdf
2. http://lls.ulat.ac.pa/archivos/allanes_E-8-102149/Archivos_de_Cursos/Materia_-_EMC-

013-BIOQUIMICA_HUMANA_
3. https://docs.google.com/document/d/1LdKVFCw2WUAaSfd4VxLAPoUmpS04ViBbxvhKh
fRMY5g/edit?pli=1
4. http://lls.ulat.ac.pa/archivos/allanes_E-8-102149/Archivos_de_Cursos/Materia_-_EMC013-BIOQUIMICA_HUMANA
5. http://www.monografias.com/trabajos916/actividad-enzimatica-amilasa/actividad6.
7.
8.
9.

enzimatica-amilasa2.shtml
http://amilasa.blogspot.com.co/
https://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/07/12/especificidad-enzimatica/
https://www.uam.es/personal_pdi/ciencias
http://www.scienceinschool.org/node/2887#sthash.oGC88EnE.dpuf

ENZIMAS

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