Universidad Santo Toms. Departamento de Ciencias Bsicas.

Bioqumica I-2016

ENZIMAS REGULADORAS
En el metabolismo celular hay grupos de enzimas que funcionan conjuntamente en rutas secuenciales para llevar a cabo
un proceso metablico determinado, tal como la conversin, en varias reacciones, de la glucosa en lactato o la sntesis
a travs de diversas reacciones de un aminocido a partir de precursores sencillos.
En tales sistemas enzimticos, el producto de la reaccin del primer enzima se convierte en el sustrato del siguiente. La
mayor parte de los enzimas de cada ruta metablica siguen los comportamientos cinticos ya descritos. Sin embargo,
en cada ruta hay uno o ms enzimas que tienen un mayor efecto sobre la velocidad global de la secuencia de reacciones.
Estos enzimas reguladores muestran una actividad cataltica mayor o menor en respuesta a ciertas seales. Los
ajustes en la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas reguladores y, por tanto, en la velocidad de la secuencia
entera de reacciones, permiten que la clula se adapte a las necesidades cambiantes de energa y biomolculas
requeridas para su crecimiento y la reparacin de sus componentes.
En la mayora de sistemas multienzimticos, el primer enzima de la secuencia es un enzima regulador. Este es un lugar
excelente para regular una ruta metablica, puesto que la catlisis de tan solo las primeras reacciones de una ruta que
conduce a un producto innecesario despilfarra energa y metabolitos requeridos en procesos ms importantes.
La actividad de los enzimas reguladores se modula mediante diversos caminos. Los enzimas alostricos funcionan a
travs de la unin reversible, no covalente, de compuestos reguladores denominados moduladores alostricos o
efectores alostricos, los cuales son generalmente metabolitos pequeos o cofactores. Otros enzimas estn regulados
por modificacin covalente reversible. Ambas clases de enzimas reguladores tienden a tener varias subunidades y,
en algunos casos, el sitio o sitios reguladores y el sitio activo se encuentran en subunidades separadas. En los sistemas
metablicos existen al menos otros dos mecanismos mediante los que se regula la actividad de los enzimas. Algunos
enzimas son estimulados o inhibidos por protenas de control a las que se fijan. Otros se activan cuando se eliminan
segmentos peptdicos mediante escisin
Proteoltica la cual, a diferencia de la regulacin mediada por efectores, es irreversible. En procesos fisiolgicos tales
como la digestin, la coagulacin de la sangre, la accin hormonal y la visin se encuentran ejemplos importantes de
estos dos tipos de mecanismos.

LOS ENZIMAS ALOSTERICOS

Son enzimas reguladores aquellas que sufren cambios de conformacin inducidos por uno o ms moduladores.
Interconvirtindose en formas ms o menos activas del enzima. Los moduladores de enzimas alostricos pueden ser
inhibidores o estimuladores. El mismo sustrato es a menudo el modulador; los enzimas reguladores en los que el
sustrato y el modulador son idnticos se denominan homotrpicos. Origina cambios de conformacin que afectan la
actividad de otros sitios en la protena.
Cuando el modulador es una molcula diferente del sustrato, se dice que el enzima es heterotrpico. Obsrvese que
los moduladores alostricos no se deben confundir con los inhibidores acompetitivos y mixtos. Aunque estos ltimos se
unen en un segundo sitio del enzima, no inducen necesariamente cambios de conformacin entre las formas activas e
inactivas, y los efectos cinticos son distintos.
Las propiedades de los enzimas alostricos son significativamente diferentes de las de los enzimas no reguladores
sencillos. Algunas de las diferencias son estructurales. Adems de sitios activos, los enzimas alostricos tienen
generalmente uno o ms sitios reguladores o alostricos para la unin del modulador. Generalmente los enzimas
alostricos tienen masas moleculares mayores y ms complejos que los enzimas no alostricos. La mayora tienen dos
o ms subunidades.
Figura 1. Interacciones entre subunidades en un enzima
alostricos e interacciones con inhibidores y activadores.
En muchos enzimas alostricos el sitio de fijacin del sustrato y
el sitio, o sitios, de fijacin del modulador se encuentran en
subunidades diferentes, las subunidades catalticas (Q y las
reguladoras (R), respectivamente. La fijacin del modulador (M)
positivo (estimulador) a su sitio especifico en la subunidad
reguladora se comunica a la subunidad cataltica mediante un
cambio de conformacin. Este cambio hace que la subunidad
cataltica sea activa y capaz de fijar el sustrato (S) con mayor
afinidad. Al separarse el modulador de la subunidad reguladora,
el enzima revierte a su forma inactiva, o menos activa.

Universidad Santo Toms. Departamento de Ciencias Bsicas. Bioqumica I-2016

INHIBICIN POR RETROALIMENTACIN

En algunos sistemas multienzimticos los enzimas reguladores son inhibidos de
forma especfica por el producto final de la ruta siempre que el producto final se
acumule en exceso a las necesidades de la clula. Cuando la reaccin del enzima
regulador se hace ms lenta, todos los enzimas posteriores operan a velocidad
reducida ya que sus sustratos se encuentran en menor concentracin. De este
modo se equilibra la velocidad de formacin del producto final con las necesidades
de la clula. Este tipo de regulacin se denomina inhibicin por retroalimentacin
o retroinhibicin. La acumulacin del producto final de la ruta hace que, en ltimo
trmino, toda la ruta funcione ms lentamente.
Uno de los primeros ejemplos descubiertos de retroinhibicin alostrica fue el
sistema enzimtico bacteriano que cataliza la conversin de L-treonina en Lisoleucina. El primer enzima de este sistema, la treonina deshidratasa, es inhibido
por la isoleucina, que es el producto de la ltima reaccin de la serie. ste es im
ejemplo de inhibicin alostrica heterotrpica. La isoleucina es muy especfica como
inhibidor. Ningn otro intermediario de esta secuencia de reacciones inhibe la
treonina deshidratasa, ni ningn otro enzima de la secuencia es inhibido por la
isoleucina. La isoleucina no se fija al sitio activo, sino a otro sitio especfico de la
molcula enzimtica denominado sitio regulador. Esta fijacin es de tipo no
covalente por lo que es fcilmente reversible; si disminuye la concentracin de
isoleucina, aumenta la velocidad de la deshidratacin de la treonina. De este modo
la actividad de la treonina deshidratasa responde rpida y reversiblemente a las
fluctuaciones en la concentracin celular de isoleucina.
Figura 2. Inhibicin por retroalimentacin. La conversin de la L-treonina
en L-isoleucina esta catalizada por una secuencia de cinco enzimas (E1 a E5).
La treonina deshidratasa (E1) es inhibida alostricamente de manera especfica
por la L-isoleucina, producto final de la secuencia, pero no por ninguno de los
cuatro intermedios (A a D). La retroinhibicin se indica por la lnea X en la flecha
de la reaccin de la treonina deshidratasa

LAS PROPIEDADES CINETICAS DE LOS ENZIMAS ALOSTERICOS

DIVERGEN DEL COMPORTAMIENTO DE MICHAELIS-MENTEN
Los enzimas alostricos muestran una relacin entre V0 y [S] que difiere de la cintica de Michaelis-Menten. Aunque se
saturan con el sustrato cuando (S] es suficientemente elevada, la mayora de enzimas alostricos dan lugar a una curva
de saturacin sigmoidea cuando se representa V0 frente a [S] en lugar de la curva hiperblica tpica de los enzimas no
reguladores.
En la curva de saturacin sigmoidea podemos encontrar un valor de [S] a
la que Vq es mitad de la mxima, pero no nos podemos referir al mismo
con la designacin ya que el enzima no sigue la relacin hiperblica de
Michaelis- Menten. En su lugar se utilizan a menudo los smbolos [S]0,5 o
K0,5 para representar la concentracin de sustrato que da la mitad de la
velocidad mxima de la reaccin catalizada por un enzima alostrico.
El comportamiento cintico sigmoideo es generalmente el reflejo de
interacciones cooperativas entre subunidades proteicas.
Dicho de otro modo, los cambios en la estructura de una subunidad se
traducen en cambios estructurales de las subunidades adyacentes, efecto
que es facilitado por interacciones no covalentes en la interfase entre
subunidades.

Figura 3. (a) Curva sigmoidea producida por un enzima homotrpico

en el que el sustrato tambin acta como modulador positivo
(estimulador), o activador. (b) Efectos de un modulador positivo (+) y
un modulador negativo (-) sobre un enzima alostrico en la que K0,5 se
altera sin cambio en la Vmax. En la curva central muestra la relacin
sustrato-actividad sin modulador.

Universidad Santo Toms. Departamento de Ciencias Bsicas. Bioqumica I-2016

Los enzimas alostricos homotrpicos suelen ser protenas con mltiples subunidades (por ende, con estructura
cuatrernaria) y, como se ha visto antes, el mismo sitio de fijacin de cada subunidad funciona a la vez como sitio activo
y como sitio regulador. Normalmente, el sustrato funciona como modulador positivo (activador) porque las subunidades
actan en forma cooperativa: la fijacin de una molcula de sustrato a un sitio de fijacin altera la conformacin del
enzima facilitando la fijacin de otras molculas de sustrato. Esto explica el incremento sigmoideo en lugar de hiperblico
de V0 al aumentar [S). Una caracterstica de la cintica sigmoidal es que pequeos cambios en la concentracin de un
modulador se pueden asociar con grandes cambios en la actividad. Como es evidente en la Figura 6-34a, un incremento
relativamente pequeo en [S] en la parte de mayor pendiente de la curva provoca un incremento comparativamente
grande en V0.
En el caso de los enzimas alostricos heterotrpicos, en los que el modulador es un metabolito diferente del sustrato
normal, es difcil generalizar acerca de la forma de la curva de saturacin con el sustrato. Un activador puede hacer que
la curva de saturacin con el sustrato sea ms prxima a la hiperblica, con un descenso de K0,5 pero sin cambios en la
Vmax, lo que se traduce en un incremento de velocidad de reaccin a una concentracin de sustrato fija
ALGUNOS ENZIMAS ESTN REGULADOS POR MODIFICACIN COVALENTE REVERSIBLE
En otra clase importante de enzimas reguladores la actividad se modula por modificacin covalente de uno o ms de
los residuos aminocidos de la molcula de enzima. Se han encontrado ms de 500 tipos diferentes de modificacin
covalente de protenas. Los grupos fosforilo, acetilo, adenililo, uridililo, metilo, amida, carboxilo, miristilo, palmitilo,
prenilo, hidroxilo, sulfato y adenosina difosfato ribosilo se cuentan entre los grupos modificadores ms comunes. Figura
4. Algunos ejemplos de reacciones de modificacin de enzimas.
Generalmente estos grupos se unen y son eliminados
del enzima regulador por la accin de otros enzimas.
La modificacin de un residuo aminocido de un enzima
es equivalente a la introduccin de un nuevo
aminocido con propiedades alteradas dentro del
enzima. La introduccin de una carga puede alterar las
propiedades locales del enzima e inducir un cambio de
conformacin. La introduccin de un grupo hidrofbico
puede inducir la asociacin con una membrana. Los
cambios son a menudo importantes y pueden ser
crticos para la funcin del enzima alterado.
La fosforilacin es probablemente la modificacin
reguladora ms importante. Se calcula que un tercio de
todas las protenas de la clula eucaritica estn
fosforiladas, y que prcticamente en todos los procesos
reguladores participan uno o (a menudo) muchos pasos
de fosforilacin. Algunas protenas tiene slo un residuo
fosforilado, otras presentan varios y algunas tienen
docenas de sitios fosforilables.

LOS GRUPOS FOSFORILO AFECTAN LA ESTRUCTURA Y LA ACTIVIDAD CATALTICA DE LOS ENZIMAS

Las protena quinasas catalizan la unin de grupos fosforilo a residuos aminocidos especficos de una protena; la
eliminacin de los grupos fosforilo est catalizada por las protena fosfatasas. La unin de un grupo fosforilo a un residuo
de Ser, Thr o Tyr introduce un grupo cargado y voluminoso en una regin que era slo moderadamente polar. Los
tomos de oxgeno de un grupo fosforilo pueden formar enlaces de hidrgeno con uno o varios grupos de la protena,
generalmente los grupos amida de la cadena peptdica al inicio de una hlice a o los grupos guanidinio cargados de la
cadena lateral de una Arg. Las dos cargas negativas de la cadena lateral fosforilada tambin pueden repeler los residuos
cargados negativamente (Asp o Glu). Cuando la cadena lateral modificada se sita en una regin del enzima critica para
su estructura tridimensional, se puede esperar que la fosforilacin tenga efectos muy importantes en la conformacin
de la protena y, por tanto, en la fijacin del sustrato y la catlisis.

Universidad Santo Toms. Departamento de Ciencias Bsicas. Bioqumica I-2016

Protenas quinasas transfieren el grupo fosforilo desde el ATP al grupo alcohol proveniente de un residuos Serina,
Treonina o Tirosina. Protenas fosfatasas eliminan el fosfato mediante hidrlisis del residuo fosforilado. Por lo general,
la fosforilacin activa a una enzima.
Figura 5. Fosforilacin de una protena

Figura 6. Eliminacin del grupo fosfato por accin de protena fosfatasa.

Un ejemplo importante de regulacin enzimtica por fosforilacin se encuentra en la glucgeno fosforilasa de

msculo e hgado, que cataliza la reaccin:

Bibliografa:
Lehninger, Principios de Bioqumica. Nelson y Cox (5 edicin). Captulo 6: Enzimas.
Bioqumica. Stryer. Captulo 10: Estrategias reguladoras de protenas y enzimas.