UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Escuela Acadmico Profesional de Microbiologa y Parasitologa

LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA
ESTUDIO DE MYCOBACTERIUM
Profesor

Mg Tito Sanchez

Alumno

Asencios, Juan Gustavo

Gonzalez Dahua, Jean Patrick
Llanos Rosales, Carlos Daniel
Lizarraga Olivares, Wendy
Urbano Len, Eduardo Jesus

Ciudad Universitaria, Setiembre del 2015

INTRODUCCIN
Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis), agente causal de la tuberculosis, es un bacilo aerobio,
no mvil, de lento crecimiento, de 0.2-0.6 m de ancho por 1.0-10 m de largo. Es un
microorganismo resistente a los detergentes y sensible al calor y a la luz ultravioleta (Coll, 2003). Se
caracteriza por poseer alto contenido de guaninas unidas a citosinas en el DNA genmico, sin
embargo, es la presencia de los cidos miclicos en la pared celular lo que la hace sobresaliente. La
pared celular de M. tuberculosis adems de proteger el contenido celular, le confiere soporte
mecnico y es responsable de las propiedades y la estructura de la bacteria. El pptidoglucano, uno
de los constituyentes de la pared celular, se encuentra unido covalentemente a un polisacrido, el
arabinogalactano, el cual en su parte externa se encuentra esterificado con cidos grasos de gran
peso molecular llamados cidos miclicos, caracterizados por poseer de 75 a 90 tomos de carbono
en su estructura. Algunos glicolpidos atraviesan la pared celular, tales como fosfatidil mioinositol
mansido, lipomanano (LM) y lipoarabinomanano (LAM)

OBSERVACIONES:
1. Se vio una muestra negativa que se caracteriza por no encontrarse BARR en 100 campos
observados.

2. Se vio tambin un positivo (+) y se caracteriza por observarse entre 10 a 99 BARR en 100 campos
observados.

3.

Se vio un positivo
(++) y se
caracteriza por presentar entre 1 a 10 BARR por cada 50 campos observados.

4. Aqu se vio un positivo (+++) se caracteriza por presentar ms de 10 BARR por cada 20 campos
observados.

5. Finalmente vimos el medio Medio Lowenstein Jensen en cual se aisla el BARR.

ANLISIS DE OBSERVACIONES:
La baciloscopia es uno de los mtodos ms usados para el diagnstico de tuberculosis debido a que
es de fcil desarrollo y bajo costo. Para el diagnostico positivo de Mycobacterium es necesario
realizar observaciones de como mnimo 100 campos en el microscopio de luz, a partir de los cuales

se obtendr un promedio que ser usado para diagnosticar el grado de la enfermedad. Se puede
clasificar en negativo u positivo +, ++ y +++ dependiendo de la cantidad de bacilos que se encuentre
por campo. El positivo + es cuando se observa entre 10 y 99BAAR en 100 campos observados;
positivo ++ es cuando se observan de 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos observados y positivo
+++ es cuando se observan ms de 10 BAAR por campo en 20 campos observados; adems el
resultado es negativo cuando no se encuentra BAAR en los 100 campos observados.
Dentro de las muestras observadas; una muestra fue negativa pues solo haba cocos en cadenas
teidos con el colorante de contraste (azul de metileno) que posiblemente era Streptococcus. Otra
muestra era positivo +, positivo ++ y positivo +++ pues cumpla con los rangos establecidos para
considerar tales resultados. Para realizar cada frotis es necesario que los tcnicos sean evaluados
por organismos fiscalizadores del estado; dicha evaluacin consiste en la reparticin de lminas para
su evaluacin, de la cual ya se conoce el resultado. Adems de dicha evaluacin tambin se deben
realizar controles de calidad de los equipos y de los medios de cultivo cada cierto tiempo con la
finalidad de evitar un diagnstico errneo.

sd

Conclusiones

Bacilos gram + , aerobios , BAAR. Con crecimiento lento. Son cosmopolitas, siendo aislados
de agua natural, polvo, animales, alimentos, etc.

Los cidos micolicos presentes en su pared celular se encuentran covalentemente unidos

con el Peptidoglicano y le confieren la impermeabilidad, evitando el flujo de sustancias
hidrofilicas.

La fucsina fenificada penetra en los cidos micolicos, por la accin del fenol, con la cual las
micobacterias se tien de color rojo.

La fucsina forma un complejo con los acidos micolicos: complejo fucsina-micolato que evita
la salida de la fucsina

El calor acta como mordiente, ablandando la constitucin de la pared, permitiendo la

impregnacin del colorante en la pared micobacteriana

la solucin decolorante acido-alcohol (etanol + Hcl), permite que todas las bacterias pierdan
la fucsina excepto las micobacterias

El resto de bacterias, al no presentar los acidos micolicos se decoloran.

Posteriormente, se utiliza un colorante de contraste, el azul de metileno, que tie las no

BAAR, mientras que las BAAR se ven rojos.

Recomendaciones

Evitar la sobreexposicin de la muestra de esputo, al mechero, debido a que podemos

quemar la muestra, en vez de fijarla.

Evitar que el colorante hierva o se seque, para asegurarnos que la fucsina penetre las
BAAR.

Al finalizar las observaciones limpiar cuidadosamente los objetivos con papel lente
embebido en alcohol isopropilico para evitar que estos se daen
Poseen la capacidad de agruparse formando cordones muy resistentes (factor cuerda)

Metablicamente exigentes, no crecen en cualquier medio enriquecido, requieren de la

presencia del aminocido asparragina, utilizando comnmente para su cultivo el medio de
Midlebrook.

Presentan un crecimiento retardado, comparado con otras bacterias.

Pueden desarrollar resistencia al ser expuestas a algunos antibiticos.

BIBLIOGRAFIA
Delfina, M. Barrera, L. Manual para el diagnostico bacteriolgico de la tuberculosis. Organizacin Panamericana de
la salud.2008.
Asencios, L. Quispe, N. Vasquez.L. Procedimientos para el control de calidad externo e baciloscopia para el
diagnostico bacteriolgico de la tuberculosis. Instituto Nacional de Salud. Per, Lima.2012.

Palomino, J. C.; et al. Tuberculosis from Basic Science for patient care. 687p.