Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Laboratorio de Biologa Celular

PRCTICA N7: ACTIVIDAD CITOSTTICA EN EL MERISTEMO RADICULAR DE

Allium cepa L

I.

Marco terico:
Las celulas meristematicas presentes en los pices radiculares de A. cepa L cebolla constituyen un
modelo ideal para el estudio de los fenmenos celulares debido a que ese encuentra en constante equilibrio
proliferativo; de esta manera es cmo el nmero de clulas que se encuentran en una fase determinada es
tambin constante y proporcional a la duracin de la misma pero cuando se lleva a cabo en presencia de
sustancias antimitticas, citotxicas o genotxicas altera su normal desarrollo e incluso ocasionan dao a
nivel cromosmico ocasionando que la divisin celular de los meristemos radiculares pueda inhibirse,
retardarse u ocasionar a apoptosis.
Actualmente el uso masivo de sustancias a base de extractos de origen natural con propiedades
antiinflamatorias, antihistamnicas y antispticas se ha incrementado, y en la mayora de casos este tipo de
sustancias se comercializan sin previos estudios de toxicidad, lo que pone en riesgo la salud de las personas
que las utilizan (Alfredo, Anaruma, Pio, Joo y Casarotto, 2009).
Los estudios de citotoxicidad y genotoxicidad constituyen un paso importante en la evaluacin
toxicolgica de los medicamentos de origen vegetal que son mezclas complejas con una o ms acciones
teraputicas, en las que tambin pueden estar presentes compuestos mutagnicos relacionados con el
desarrollo de procesos carcinognicos y teratognicos.
Las alteraciones cromosmicas se caracterizan por presentar cambios estructurales y numricos en los
cromosomas de clulas que han sido expuestas a agentes fsicos, qumicos y biolgicos.
Los bioensayos son considerados pruebas efectivas para evaluar efectos txicos de diferentes sustancias con
el empleo de plantas.
El bioensayo denominado Allium test aprobado por la OMS (1997) es de bajo costo y no requiere de
un equipo altamente sofisticado para el anlisis de resultados, por lo que es ampliamente usado por la
comunidad cientfica.
Cabe resaltar la pertinencia de los estudios experimentales en biologa celular que deben tener en
cuenta los programas de ciencias de la salud, especficamente fisioterapia, para brindar un abordaje ms
analtico a los procesos biolgicos relacionados directamente con el funcionamiento del cuerpo humano.

II. Objetivos:

Efectuar bioensayos con el meristemo radicular de Allium cepa para comprobar la accin
antiinflamatoria de la Ruta graveolens
Hacer que el alumno tome contacto con el ensayo experimental y la interpretacin de resultados

III. Materiales:
Del alumno:
- Bulbos de Allium cepa L cuyos extractos

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vegetales sern escogidos por el

profesor
- Lminas portaobjetos
- Lminas cubreobjetos
- Lpiz de carbn
Campo1
- Papel lente
- Hojas de afeitar
Campo2
- Pinzas de punta fina
Campo3
Del laboratorio:
- Mechero de alcohol
Campo4
- Lunas de reloj
- Orcena acetoclorhdrica
Total
al 2%
- Microscopio

Interfase

Mitosis
Profase

Metafase

Anafase

Telofase

60

40

100

30

45

42

80

35

147

16

14

268

IV. Procedimiento:
Preparacin del extracto de Ruta graveolens:
-

Trozar
Dejar secar
Macerar en al alcohol (etanol cido actico 3:1)
Filtrar
Dejar en bao maria hasta que se volatilice el alcohol
Queda el extracto crudo (semejante a la brea)
Se disuelve en agua (extracto acuoso al 1%). Tiempo: 5 horas
Se fija con Carnoy, se enjuaga, se coloca en la orcena acetoclorhdrica

V. Resultados y clculos:

186

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ndice mittico
5%

8%
9%
Profase

Metafase

Anafase

Telofase

79%

ndice mittico:

454 ------- 100%

186 -------

40.96%

ndice por fases:

- Profase: 186 ------ 100%
147 ------ x

79.03%

- Metafase: 186 ------ 100%

16 ------

- Anafase: 186 ------ 100%

14 ------ x

7.52%

- Telofase: 186 ------ 100%

8.6%

9 ------

4.83%

VI. Cuestionario:
1. Qu fase o fases del ciclo celular han sido afectados por la sustancia evaluada?
2. Se podran extrapolar los resultados obtenidos en clulas vegetales a una poblacin animal? Por
qu?
Desarrollo

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1. Las etapas de la mitosis tales como: Telofase, Anafase y Metafase fueron afectadas por el extracto de
Ruta graveolens, manifestndose en una disminucin de los ndices por fases; sin embargo, en la
Profase se obtuvo un mayor ndice con respecto al grupo control, esto podra deberse a que la sustancia
inactiva los complejos CDK1-ciclinas A y B, los cuales, adems de inducir la condensacin de la
cromatina, permiten la polimerizacin de microtbulos que forman el huso mittico, por lo cual las
clulas expuestas a dicho extracto no transitaran normalmente de Profase a Metafase.
2. No se podran extrapolar los resultados. Esto se debe a que las clulas vegetales presentan
diferencias con las clulas animales de diversa ndole, como por ejemplo la presencia de una pared
celular celulsica que le confiere de mayor proteccin y soporte.
Conclusiones y discusin:

Queda comprobado el efecto citotxico que posee la planta Ruta graveolens sobre las
clulas meristemticas del pice de Allium cepa L, el cual se manifiesta en una disminucin del
proceso de divisin celular.

Se reconoce la importancia de los bioensayos como procedimientos que permiten la

bsqueda de compuestos con actividad farmacolgica que no sean perjudiciales para la salud.

El Allium test es una herramienta de bajo costo que nos ayudar a establecer los efectos
que produzan ciertas sustancias sobre las clulas en desarrollo.

Es relevante tener informacin con respecto a las plantas medicinales que en la actualidad
se usan masivamente y que carecen de sustento cientfico , ya que su uso indebido podra tener
efectos nocivos en nuestro organismo.