Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Materialele necesare
Antigene preparate i standardizate (n stare lichid sau liofilizate) care se dilueaz conform
intruciunilor productorului.
Ser de cercetat
Complement de cobai (alexin) liofilizat sau congelat la -400C
o Din cauza labilitii accentuate a complementului, acesta trebuie titrat la fiecare utilizare
n RFC.
Eritrocite de berbec diluate 2,5 % n tampon veronal
Ser hemolitic ser de iepure cu anticorpi anti-hematie de berbec (hemolizin)
o se dilueaz n funcie de titru
o n reacie se utilizeaz 2UH
Ser de control pozitiv omologat (cu titru cunoscut i etalonat)
Ser de control negativ omologat
Soluie fiziologic (diliuant) 0,85% clorur de sodiu, pH 7,0-7,2.
Materiale supuse examinrii - probe de ser sanguin fr urme de hemoliz sau de contaminare
bacterien sau fungic i fr eritrocite n suspensie, n volum de 100-500 l.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
n cazul n care n serul de cercetat nu exist anticorpii specifici suspectai (Reacie -), n
prima etap nu se formeaz complexe imune. Complementul, adugat tot n prima etap, va rmne liber
i se va fixa pe anticorpii sensibilizai sistemul hemolitic.
Fixarea complementului pe aceste complexele imune este urmat de liza hematiilor.
n concluzie, n reacia negativ, hemoliza este prezent.
Interpretarea rezultatelor:
Reacie pozitiv
4
lips complet a hemolizei
3
hemoliz (25%)
Reacie dubioas
2
hemoliz (50%)
1
hemoliz (75%)
Reacie negativ
hemoliz complet(100%)
Tuburi
Complement
1/100 (ml)
Tampon
veronal (ml)
Antigen diluat
(1 unitate) (ml)
Sistem
hemolitic
1
0,04
2
0,05
3
0,06
4
0,07
5
0,08
6
0,09
7
0,10
8
0,11
9
0,12
10
0,13
11
0,14
12
0,15
13
0,16
0,36
0,35
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,27
0,26
0,25
0,24
0,400
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
0,40
0,40
0,40
0,40
Timpul (min.)
30
60-75
30
30-45
30 (20)
Temperatura (C)
56
60
62
60
60-65
1/8
1/16
1/32
1/64
1/128
1/256
1/512
M
Ac
MC1
MC2
MC3
MC4
M
SH
M
Ag
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
75
25
50
50
50
50
50
50
1/8
1/16
1/32
1/64
1/128
1/256
25% (+)
8,3
16,6
33,3
66,6
133
266
532
1065
100% (++++)
13,3
26,6
53,3
107
213
426
852
1705