Enzimologia

ENZIMOLOGA
ENZIMAS: FUNCIN
Catalizadores
Las clulas poseen

compuestos qumicos que
controlan las reacciones
que ocurren en su interior.
La sustancia que controla la
velocidad a la que ocurre
una reaccin qumica sin
que la clula sufra dao
alguno ni se destruya se
conoce como un
catalizador.
Las enzimas son protenas
que actan como
catalizadores en las clulas.
ENZIMAS: FUNCIN
ENZIMAS: CARACTERSTICAS
Qu son las enzimas?
Respecto a su funcin:
Son catalizadores
Aceleran la velocidad de las reacciones ms de 10 6 veces
No se alteran
Respecto a su naturaleza qumica:

Son principalmente protenas
Los procesos catalticos los llevan a cabo los grupos qumicos de los
aminocidos y algunos cofactores
Cuando el coenzima se encuentra unido
Parte proteica = Apoenzima

ntimamente al enzima recibe
Cofactores: Coenzimas (naturaleza orgnica)
de GRUPO PROSTTICO
Iones metlicos (naturaleza inorgnica
el nombre
Holoenzima = Apoenzima + Cofactores

Ribozimas: molculas de RNA que poseen tambin actividad cataltica
ENZIMAS: CLASIFICACIN
Cuando el oxgeno
es el aceptor de
electrones
Lactato
deshidrogenasa
Grupos que se transfieren:

Metilo
Hidroximetilo
Formilo
Amido
Fosfato
Etc
2 GLUCOSAS
Ej: Peptidasas, glicosidasas y esterasas
Causan la ruptura de los enlaces: C-C, C-N, C-O y otros enlaces por eliminacin, produciendo dobles
enlaces o anillos. Actan tambin en sentido contrario, aadiendo grupos a los dobles enlaces
Catalizan cambios estructurales o geomtricos dentro de la misma molcula. De acuerdo con el tipo
de isomerizacin, reciben el nombre de; epimerasas, racemasas, cis-trans isomerasas, isomerasas,
tautomerasas, mutasas o cicloisomerasas
ENZIMAS: NOMENCLATURA
Un ejemplo:
Lactato + NAD+ Piruvato + NADH + H+
Nombre sistemtico: L-lactato: NAD+ oxidorreductasa
Nombre comn: lactato deshidrogenasa
Cdigo: EC 1.1.1.27
EC es COMISIN de ENZIMAS
El primer 1 hace referencia a la CLASE de enzima (oxidorreductasa)
El segundo 1 hace referencia a la SUBCLASE que un grupo alcohol (del lactato) es el
que cede electrones
El tercer 1 hace referencia a la SUB-SUBCLASE que el NAD+ es el aceptor de los
electrones.
El cuarto dgito, 27, indica que es la vigesimosptima enzima de esas caractersticas que
se ha clasificado.
ENZIMAS
Evolucion de la enzimologia
Si bien algunos qumicos consideraron esos procesos como metamorfosis de sustancias que
provocaban excitaciones en otras que estaban cerca de ellas, esta cuestin fue, como ya se ha
dicho, definitivamente resuelta por Buchner hacia finales del siglo XIX; exprimiendo masas
celulares de Saccharomyces cerevisie obtuvo un liquido sin clulas, capaz de producir la
mismas reacciones qumicas que se obtenan utilizando la suspensin de clulas, es decir, la
transformacin del azcar en alcohol y anhdrido carbnico. Por tanto, de la levadura se poda
extraer una sustancia capaz de regular un proceso qumico concreto.
Esto obligo a replantear las investigaciones contrarias a la teora de que el proceso digestivo
fuese debido a la trituracin de la s sustancias digeridas hasta el punto de reducirlas a
partculas lo suficientemente finas para poder ser asimiladas. En efecto, en el siglo XVIII R.A de
Reaumur (1683- 1757) haciendo ingerir a un halcn una cpsula de hierro agujereada, que
contena alimento, observ que este qued completamente disuelto por los jugos gstricos y
que, por tanto, no era, molturado de modo mecnico por la robusta musculatura del robusto
animal, pues la cpsula quedo intacta.
Mas adelante se constato que el almidn era degradado a monosacrido y disacrido por la
accin del jugo salival (ptialina) y se describi la presencia de la pepsina en el jugo gstrico.
Posteriormente, fueron aisladas sustancias de carcter fermentativo a partir de numerosas
especies vegetales. Se observo que el extracto de algunas races tenan capacidad para
modificar el color azul de determinadas sustancias y que el extracto de trigo era capaz de
transformar el almidn en disacridos y dextrina.
La va para el estudio de esas sustancias estaba ya abierta. Jons Jacob Berzelius (1779 1848)
interpreto su accin como si se tratase de unos catalizadores que favorecan determinada
reaccin qumica sin ser destruidos y sin aparecer en los productos finales. Richard Kuhne
(1900-1967) fue el primero en dar a tales sustancias el nombre enzimas, tomado del griego, que
significa literalmente "en la levadura".
ENZIMAS: ESPECIFICIDAD
Enzimas y sustratos

La sustancia sobre la cual acta una enzima se conoce como

sustrato.
El sustrato se convierte en uno o ms productos nuevos.
Las enzimas son reutilizables y cada una puede catalizar de 100 a
30,000,000 de reacciones por min.
Pero, una enzima particular acta solo sobre un sustrato especfico.
Cada enzima particular puede controlar solo un tipo de reaccin.
1.- Especificidad de accin: Son

especficas del tipo de reaccin que
catalizan. Ej: amidasas, esterasas,
proteasas, etc
2.- Especificidad de sustrato: Las

enzimas son especficas de los
sustratos de la reaccin que
catalizan
CATLISIS ENZIMTICA
1.- ENZIMAS SOLUBLES: Aquellas que catalizan las reacciones en solucin
1.1.- Fluidos fisiolgicos
1.2.- citosol celular
1.3.- Lisosomas
1.4.- Vacuolas
2.- ENZIMAS PARTICULADAS: Aquellas que estn asociadas a distintas
membranas
2.1.- Membrana plasmtica
2.2.- Membrana mitocondrial
2.3.- Otros orgnulos celulares
MECANISMO DE ACCIN
CENTROS ACTIVOS DE LAS ENZIMAS
Es la regin que une a los sustratos y contiene los residuos que participan directamente en la
produccin y ruptura de enlaces. Estos residuos se denominan grupos catalticos. La interaccin del
enzima y el sustrato en el centro activo hace posible la formacin del estado de transicin.
1.- El centro activo es una hendidura tridimensional formada por grupos que provienen de diferentes
partes de la secuencia de aminocidos
2.- El centro activo supone una porcin relativamente pequea del volumen total del enzima
3.- Los centros activos son microentornos nicos. El microentorno no polar de esta hendidura
favorece la unin con el sustrato, as como su catlisis. Adems tambin contiene residuos polares.
4.- Los sustratos se unen a los enzimas a travs de numerosas fuerzas dbiles. Estas interacciones
reversibles dbiles se realizan por enlaces electrostticos, puentes de hidrgeno, fuerzas de Van der
Waals e interacciones hidrofbicas.
5.- La especificidad del enlace depende de la disposicin exactamente definida de los tomos del
centro activo. Un sustrato debe tener una forma adecuada para introducirse en dicho centro ya que
el enzima y el sustrato interaccionan por fuerzas de corto alcance que necesitan un contacto cercano
MECANISMO DE ACCIN
CENTROS ACTIVOS DE LAS ENZIMAS
Aspectos generales
Los enzimas son catalizadores especficos: cada enzima cataliza un solo tipo
de reaccin, y casi siempre acta sobre un nico sustrato o sobre un grupo
muy reducido de ellos.
En una reaccin catalizada por un enzima:

La sustancia sobre la que acta el enzima (sustrato).

El sustrato se une a una regin concreta del enzima (centro activo).

Un sitio de unin formado por los aminocidos que estn en contacto directo con el
sustrato.
Un sitio cataltico, formado por los aminocidos directamente implicados en el
mecanismo de la reaccin.
Formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de reaccin
1.- El enzima y su sustrato
2.- Unin al centro activo
3.- Formacin de productos
MECANISMO DE ACCIN
Principio de complemetariedad o hiptesis de la llave
y la cerradura
Emil Fischer, 1894
Supone una rigidez de ambas estructuras no compatible con la naturaleza

elastoplstil de las molculas de los sustratos y las enzimas en solucin
MECANISMO DE ACCIN
Teora del ajuste inducido
Daniel Kohsland, 1958
La protena adquiere su conformacin espacial, definitiva para la catlisis,

inducida por la presencia del sustrato. Este modelo supone que la protena
flexible de alguna manera envuelve al sustrato para la formacin del
complejo enzima-sustrato
MECANISMO DE ACCIN
Teora del ajuste inducido
Daniel Kohsland, 1958
MECANISMO DE ACCIN
Cmo actan las enzimas como catalizadores?

Hiptesis del Ajuste Inducido (Daniel Koshland,

1958)
1.
2.
3.
4.
5.
E Induce al S a configuracin aproximada al Edo.

Transicin
UNE S
REDUCE Ea
IMPULSA
Catalisis
LIBERA P
SE REGENERA
MECANISMOS DE ACCIN
MECANISMO DE ACCIN
LOS CAMBIOS DE ENERGA LIBRE PROPORCIONAN INFORMACIN
SOBRE LA ESPONTANEIDAD PERO NO SOBRE LA VELOCIDAD DE
REACCIN
1.- Una reaccin puede tener lugar espontneamente solo si G<0. Dichas reacciones son exotrmicas o
exergnicas
2.- Un sistema est en equilibrio si G=0
3.- Una reaccin no puede ocurrir espontneamente si G>0. Se requiere un aporte de energa libre para
permitir tal reaccin. Estas reacciones se llaman endotrmicas o endergnicas.
4.- El G de una reaccin slo depende de la energa libre de los productos menos la de los reactantes
5.- El G no proporciona informacin sobre la velocidad de la reaccin. Un G<0 indica que dicha
reaccin puede ocurrir espontneamente pero no significa que se pueda llevar a cabo a velocidad
apreciable. La velocidad de una reaccin slo depende de la ENERGA LIBRE DE ACTIVACIN (G=)
MECANISMO DE ACCIN
LOS CAMBIOS DE ENERGA LIBRE PROPORCIONAN INFORMACIN
SOBRE LA ESPONTANEIDAD PERO NO SOBRE LA VELOCIDAD DE
REACCIN
MECANISMO DE ACCIN
TEORA DEL ESTADO DE TRANSICIN O DEL COMPLEJO ACTIVADO (Supuestos)
1.- Para que la reaccin tenga lugar, el potencial qumico de los reactantes debe ser mayor que el de los
productos de la reaccin. Es decir debe haber un desprendimiento de energa libre de Gibbs al efectuarse la
reaccin
2.- Para que los reactantes acten entre s se ha de formar un complejo activado que est a una energa
potencial mayor que los reactantes en su estado elemental
3.- La diferencia energtica entre el estado elemental de los reactantes y del complejo activado es la llamada
energa libre de activacin de Gibbs, G=. Esta energa de activacin es siempre positiva, pues representa la
energa que debe comunicarse a las molculas para que pasen del estado elemental al estado de transicin
4.- Slo se consideran los reactantes en su estado estable elemental y el estado inestable comprendido dentro
del camino de la reaccin, conocido como estado de transicin
5.- Supone que todos los estados de transicin se descomponen con la misma constante de velocidad a una
temperatura determinada; esta constante de velocidad est representada por la frecuencia de vibracin de los
enlaces que se han de romper en el estado de transicin. Esta constante depende solamente de la temperatura
y es la misma para todas las reacciones qumicas
6.- La frecuencia de vibracin de los enlaces a una temperatura determinada es la causante de la ruptura de los
enlaces del complejo activado
Ev=h
Ep enlace= T Por lo tanto la frecuencia de vibracin de enlace se obtiene al
igualar ambas expresiones
h= T
= T/h
h=Constante de Planck (6,626x10-34 JxS)

= Constante de Boltzmann ( 1,381x10-23 J/K)
MECANISMO DE ACCIN
MECANISMO DE ACCIN:
ESTNDARD
EQUILIBRIO
ESTA
EL CAMBIO DE ENERGA LIBRE

RELACIONADO CON LA CONSTANTE DE
G= G0+RT Ln [C][D]
[A][B]
En el equilibrio G=
G0= - RT Ln [C][D]
[A][B]
G0= - RT Ln K eq
G0= - 2,303 RT Log10Keq
Keq=10- G
0/(2,303 RT)
Keq=10 - G0/5,69
Si Keq=10; Keq= - 5,69
R= 8,315x10-3 KJ/mol K
T=298 K (25C)
Cada vez que la constante de equilibrio cambia en

un factor de 10, la G0 vara en 5,69 KJ/mol
MECANISMO DE ACCIN:
LAS ENZIMAS ACELERAN

LAS REACCIONES FACILITANDO LA FORMACIN DEL ESTADO DE
TRANSICIN
(b)
(c)
MECANISMO DE ACCIN:
LAS ENZIMAS ACELERAN

LAS REACCIONES FACILITANDO LA FORMACIN DEL ESTADO DE
TRANSICIN
Comlpejo enzimasustrato activado
Gs= G0s+RT Ln [ES]

[E][S]
Energa libre de
transicin
Energa libre de
activacin de Gibbs
Gs<0
S<Ks
La enzima tiene mayor poder cataltico a
menores concentraciones de sustrato, pues la energa de
activacin desde el complejo enzima sustrato (ES) a
complejo enzima-sustrato activado (ES=) es menor
Gs>0
Cuando la afinidad de la enzima por el sustrato es muy alta
y los valores de sustrato son elevados entonces el complejo
enzima-sustrato cae en un pozo de potencial y se tiene que
invertir ms energa para alcanzar el estado activado, lo
que va en perjuicio del poder cataltico del enzima
ENZIMAS: MECANISMOS GENERAL DE ACCIN

ENZIMTICA
1.- EFECTOS ENERGTICOS: G= = H= -TS=. Una disminucin del primer factor o
un aumento del factor entrpico hara disminuir la energa libre de activacin de Gibbs. Se ha visto que las
enzimas estabilizan el estado de transicin de los sustratos de la reaccin por interacciones de sus centros
activos con los sustratos en el estado de transicin. Las interacciones electrostticas entre el enzima y el estado
en estado de transicin son bastante mayores porque existe menor fuerza dielctrica del medio.
2.- EFECTOS ENTRPICOS: Las enzimas producen una ganancia de la entropa del paso
complejo enzima-sustrato a complejo enzima-sustrato activado. Esta ganancia es explicada por el elevado
aumento de la concentracin efectiva de los sustratos, al ser la reaccin de formacin del complejo activado una
reaccin intramolecular. Se conoce que las reacciones intramoleculares tienen lugar a una velocidad mucho
mayor que las intermoleculares.
3.- EFECTOS DE PROXIMIDAD Y ORIENTACIN DE ORBITALES: Efectos

que se encuentran favorecidos al formarse el complejo enzima-sustrato y que influirn en la disminucin de la
energa de activacin y aumento de la velocidad en presencia de la enzima.
4.- EFECTO DEL ANCLAJE DE LOS SUSTRATOS SOBRE EL ENZIMA:

En los aos 70 Reuben propuso una teora alternativa para explicar el factor multiplicativo de la velocidad
enfocada en el tiempo de colisin de los sustratos que van a reaccionar. Dicho tiempo es mucho mayor en el
centro activo del enzima. El tiempo de colisin entre dos partculas en solucin acuosa es 10-11 a 10-12 s. En el
centro activo del enzima es del orden de 10-4 a 10-7. La probabilidad de choque entre molculas son
porporcionales a los tiempos de colisin. Por los efectos de proximidad, orientacin y tiempo de residencia que
afectan a la entropa de activacin de la reaccin en ltima instancia contribuyen a la estabilizacindel complejo
activado.
ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

1.- CATLISIS CIDO-BASE
2.- CATLISIS COVALENTE
3.- CATLISIS MEDIADA POR IONES METLICOS

Desde antiguo se conoce que muchas reacciones orgnicas son catalizadas
por la presencia de iones hidronio (H3O+) y oxhidrilo (OH-) en la solucin.
Adems es posible detectar estabilizacin del estado de transicin por
cidos y bases de Brnsted. Con frecuencia, la presencia simultnea de
cidos y bases es necesaria para la catlisis y se le denomina catlisis
cidobase concertada.
Muchas reacciones que ocurren en el interior de las enzimas suponen la

formacin de compuestos intermediarios inestables, con cargas elctricas
positivas y negativas, que son los estados de transicin. Estos compuestos
pueden formarse por donacin de protones desde restos cidos de
aminocidos de los centros activos y captacin de protones por restos
bsicos de aminocidos.


1.- CATLISIS CIDO-BASE: Lisozima
NAM: N-acetilmurmico
NAG: N-acetil-glucosamina
La lisozima hidroliza los enlaces glucosdicos (1-4)
entre el NAM y la NAG
1.- Cesin de un protn del glutmico en la posicin 35
2.- Se forma un intermediario inestable que es un in
carbonio, conocido como oxocarbonio, porque parte de
la carga positiva est compartida con el oxgeno del
anillo
3.- El intermediario, cargado positivamente, es
estabilizado por las cargas negativas del aspartato y
del glutamato. Dicha estabilizacin es en el interior de
la enzima, donde las interacciones son mayores
4.- Ataque nuclefilo del OH- proveniente del agua. El
glutamato de la enzima recupera su forma cida a partir
del ataque electrfilo del protn proveniente tambin
de la molcula del agua. As la molcula enzimtica
queda recuperada para empezar un nuevo ciclo
cataltico

2.- CATLISIS COVALENTE
Implica la estabilizacin del complejo activado por la formacin de un compuesto
intermediario covalentemente unido a la enzima. B es susceptible a un ataque por un
nuclefilo de la enzima. Pueden formar parte del centro activo de la enzima:
1.- Residuos de aminocidos que portan nuclefilos como OH de la Ser, Thr o
Tyr
2.- -SH de Cys
3.- y el grupo imidazol de la histidina en su forma bsica
4.- Grupos funcionales de cofactores enzimticos como el piridoxal fosfato
El esquema de la reaccin sin catalizar sera el siguiente:
Y+B-X
YBX
Y-B + X
En presencia de la enzima
E-N: + B-X
X + E-N-B + Y
Y-B + E-N:
Ej: sern-proteasas (trombina, plasmina) y cisten-proteasas (papana y ficina), y las

esterasas.

3.- IONES METLICOS
Muchas enzimas requieren metales para la catlisis. Los metales son capaces de
estabilizar los complejos de transicin en la catlisis mediada por ellos. Se basa en que
hay iones metlicos que funcionan como cidos de Lewis de la misma manera que lo
hacen los protones
Los iones metlicos participan de diferentes formas en la catlisis

Orientacin del sustrato para que reaccione
Estabilizando estados de transicin de compuestos cargados
Intervienen en reacciones redox cambiando su propio estado de oxidacin

3.- IONES METLICOS: Anhidrasa carbnica
CO2 + H2O
(VOET)
HCO3- + H+

3.- IONES METLICOS: Anhidrasa carbnica
ATAQUE
NUCLEOFLICO
E-Zn2+OH- + CO2
E-Zn2++ HCO3-
La enzima tiene en su centro activo un

tomo de Zn2+ coordinado con 3
residuos de Histidina de la protena. El
cuarto ligando es una molcula de agua
que se ioniza con un pKa=7
CINTICA ENZIMTICA
Conceptos bsicos de cintica qumica

Las reacciones qumicas se clasifican en:
Monomoleculares, bimoleculares y trimoleculares segn el nmero de
reaccionantes sea uno, dos o tres.
A
P
Monomoleculares
A+B P
Bimoleculares
A+B+C P
Trimoleculares
Las reacciones qumicas tambin se clasifican en:
1.- Reacciones de orden cero,
2.- Reacciones de primer orden,
3.- Reacciones de segundo orden
Dependiendo de cmo la velocidad de reaccin es influenciada por la
concentracin de los reaccionantes. V= -d[S] =d[P]
dt
dt
CINTICA ENZIMTICA
En una reaccin de orden cero, la velocidad de formacin
del producto es independiente de la concentracin de
sustrato: v = k
En una reaccin de primer orden la velocidad de
formacin de los productos es directamente proporcional a
la concentracin del sustrato: v = k [A]
Una reaccin de segundo orden es aquella en la que la
velocidad de formacin del producto depende
de la concentracin de dos sustratos (como en
una reaccin de condensacin): v = k [A1] [A2]
del cuadrado de la concentracin de un nico
sustrato (reaccin de dimerizacin): v = k [A]2
CINTICA ENZIMTICA
Factores que afectan la velocidad de

una reaccin enzimtica
1.
2.
3.
4.
5.
Concentracin de Enzima
Concentracin de sustrato
pH
Temperatura
Presencia de Inhibidores
CINTICA ENZIMTICA
1. Concentracin de Enzima
CINTICA ENZIMTICA
2. Concentracin de sustrato
CINTICA ENZIMTICA
[S0]
CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CONCENTRACIN DE SUSTRATO VARIABLE Y ENZIMA CONSTANTE

SUPUESTOS DE MICHAELIS-MENTEN
1.- La formacin de un equilibrio rpido entre la enzima libre y el
sustrato inicial
2.- La concentracin inicial de sustrato es muy superior a la de la
enzima
3.- Las velocidades usadas son siempre velocidades iniciales
4.- La velocidad inicial es proporcional a la constante de catlisis y
[ES]
5.- El paso limitante de la reaccin total es el valor de la constante de
catlisis y , por lo tanto se cumple siempre Kcat<<K2





CINTICA ENZIMTICA
CINTICA ENZIMTICA

CINTICA ENZIMTICA
Significado de KM, Kcat, Kcat/KM

KM
Cuando k2 << k-1 Entonces KM k-1/k1 = K
Afinidad de la enzima por el sustrato
KM = [S] cuando V = V max
Es una medida de la [S] necesaria para catlisis
eficaz
CINTICA ENZIMTICA

Kcat [segundos-1]
Medida directa de la produccin cataltica en
condiciones ptimas (enzima saturada)
Tiempo necesario para cambiar S en P
Nmero de recambio (Nmolc de S recamb por
seg)
CINTICA ENZIMTICA

Kcat/ KM
Cuando [S] << KM Entonces [E]t << [E]
Medida directa de eficiencia y especifidad
de la enzima
Permite comparar eficiencia de una
enzima con diferentes sustratos
Valor mximo entre 108 y 109 (mol/L)-1 s-1

CINTICA ENZIMTICA: PROCEDIMIENTOS DE LINEARIZACIN

1.- LINEARIZACIN DE LINEWEAVER-BURK

1.- LINEARIZACIN DE LINEWEAVER-BURK

1.- LINEARIZACIN DE EADIE-HOFSTEE
REACCIONES BISUSTRATO
SIMBOLOGA DE CLELAND:
En el caso de dos sustratos y dos productos de la reaccin pueden
distinguirse:
1.- La formacin de un complejo ternario, formado por la enzima y los
dos sustratos, complejo al que se denomina [EAB]. Este complejo, a su vez,
puede formarse:
a.- Al azar
b.- De manera ordenada (Bi-Bi ordenado). En este caso,
el segundo sustrato slo se puede unir una vez que se ha formado complejo
con el primer sustrato
2.- Es posible que la entrada del primer sustrato modifique la enzima,
formando enzimas modificadas (ej: acil-enzimas, fosforil-enzimas, etc) y
saliendo uno de los productos de la reaccin. La entrada de un segundo
sustrato completa la reaccin recuperndose la enzima. Mecanismo PingPong
ECUACIONES CON DOS SUSTRATOS:
1.- Se supone la formacin de un equilibrio rpido entre la enzima y los

sustratos
2.- La cantidad de enzima total [E0] es igual al sumatorio de todas las

especies qumicas en las que pueda encontrarse la enzima; [E0]=[Ej]
3.- Se supone la condicin de estado estacionario
Reacciones enzimticas bisustrato: A + B
P+Q
Si se forma un complejo ternario E-A-B

2. Mecanismo secuencial al azar
1. Mecanismo secuencial ordenado
A
B
A
EA
EAB=EPQ
SIMBOLOGA DE CLELAND
v=
E
E
EQ
EA
EAB
EQ
EB
EPQ
EP
v max [A][B]
K M, A K M, B + K M, B[A] + K M, A [B] + [A][B]
Reacciones enzimticas bisustrato: A + B
P+Q
Si NO se forma un complejo ternario E-A-B

SIMBOLOGA DE CLELAND
3. Mecanismo ping-pong
B
Q
v=
EA=FP
EN LA PRCTICA:
FB=EQ
v max [A][B]
K M , B[A] + K M , A [B] + [A ][B]
Reduccin a la ecuacin de Michaelis-Menten

trabajando en condiciones experimentales
adecuadas
Se trabaja con concentracin saturante de todos los sustratos

v [A]
excepto uno, por ejemplo si B es saturante v = max
K A + [A ]
CINTICA ENZIMTICA: FACTORES QUE AFECTAN A LA

VELOCIDAD
Efecto de la variacin de la concentracin de la

enzima
En
condiciones
de
concentracin de S hasta
la saturacin, pH y
temperatura constante se
observa que

VELOCIDAD
Efecto de la variacin de la concentracin del

sustrato
En condiciones de
concentracin de E,
pH y temperatura
constante se observa
que

VELOCIDAD
Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica

En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones

qumicas: por cada 10C de incremento, la velocidad de reaccin se
duplica, Q10.

VELOCIDAD
1. Para la reaccin enzimtica se cumple la relacin emprica:
E
k = A exp a
RT
Ecuacin de Arrhenius
El coeficiente de temperatura, Q10 se define por:

k (T + 10 ) E a 1
1
ln Q10 = ln
=
k
(
T
)
R
T
+
10
T
Valores tpicos
Ea 10 Kcal.mol-1
1,7 Q10 2,5
2. Las enzimas sufren adems desnaturalizacin trmica

y por tanto desactivacin.

VELOCIDAD

VELOCIDAD
Efecto final
Cada enzima posee una

temperatura ptima
50
Fraccin de
enzima
activa
Reaccin no
enzimtica
Ejemplos
v (u.a.)
T ptima para
Tptimaenzimas
1,0
termoflicas
T ptima para
enzimas humanas
Velocidad de
reaccin
25
Enzima
activa
0,5
Reaccin
enzimtica
10
20
30
Temperatura (C)
40
0,0
T (C)

VELOCIDAD
Efecto del pH sobre la actividad enzimtica

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables
(carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol,
etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos

Velocidad de reaccin
VELOCIDAD
pH ptimo
para la pepsina
pH ptimo
para la tripsina
pH y medio inico afectan a la conformacin tridimensional de la protena
La actividad de la enzima depende de la extensin de la reaccin de

disociacin de ciertos aminocidos en la estructura proteica.
Si el sustrato tiene propiedades cido-base es probable que la enzima

slo pueda catalizar la transformacin de su forma disociada o de su
forma no disociada.

VELOCIDAD

VELOCIDAD

VELOCIDAD
Inhibidores reversibles
Inhibidores irreversibles

La inhibicin aumenta con la [I]

y puede llegar a ser total
Unin enzima-inhibidor covalente
La inhibicin no revierte al
retirar el inhibidor de la mezcla
de reaccin
La velocidad de reaccin disminuye

linealmente con [I] a bajas [I]
La enzima recobra su actividad

cuando se elimina al inhibidor del
medio
Unin enzima-inhibidor y/o complejo
ES-inhibidor no covalente
La inhibicin puede ser revertida
por dilisis o simple dilucin
La inhibicin es altamente
especfica

VELOCIDAD
INHIBICIN COMPETITIVA
Cintica Enzimtica
Mecanismos de Inhibicin
Inhibidor competitivo
Inhibidor no competitivo

VELOCIDAD
Por unin del inhibidor al centro activo

S
1/v
[I]
Enzima
[I] = 0
I
S
Enzima no activa
1/[S]
Por modificacin del centro activo

S
[I] 1 + 1
1 KM
1 +
=
v v max K I [S] v max
vmax = v max
Enzima
S
Enzima no activa
[I]
KM = K M 1 +
KI

VELOCIDAD
cido succnico + FAD == cido

fumrico + FADH2
El inhibidor competitivo es el cido
malnico
Es un anlogo estructuralmente
parecido al cido succnico

VELOCIDAD
Inhibidor competitivo
su estructura es similar a la del sustrato
No se forma producto

VELOCIDAD
La sulfanilamida es un anlogo estructural

del cido p - aminobenzoico (PABA)
PABA es el punto de partida para la
sntesis de cido flico en las bacterias
El cido flico es una vitamina esencial
para la proliferacin (divisin) bacteriana
Sulfanilamida se usa en el tratamiento
algunas infecciones

VELOCIDAD

VELOCIDAD
El cido flico en sus formas de dihidro y

tetrahidrofolato es coenzima de la reaccin
catalizada por la dihidrofolato reductasa
Esta reaccin es parte del metabolismo de
los nucletidos para la sntesis de DNA
Metotrexato se usa en la terapia de
algunos cnceres, inhibiendo la sntesis de
DNA

VELOCIDAD

VELOCIDAD

VELOCIDAD
SIMPLE
INHIBICIN NO COMPETITIVA
1/v
[I]
[I] = 0
S
Enzima
1/[S]
vmax =
Enzima no activa
v max
[ I]
1 +
K
ESI
KM = K M

VELOCIDAD
INHIBICIN NO COMPETITIVA

VELOCIDAD

VELOCIDAD
1/v
[I]
INHIBICIN ACOMPETITIVA
[I] = 0
S
Enzima
I
1/[S]
[I]
1 KM 1
1
1 +
=
+
v v max [S] v max K I
Enzima no activa
vmax =
v max
[ I]
1 +
KM =
KM
[ I]
1 +

VELOCIDAD
RESUMEN
Tipo de
inhibicin
Unin del
inhibidor
Efecto
sobre vmax
Efecto
sobre KM
Efecto sobre la
representacin de inversos
Competitiva
Ninguno
Aumenta
1+([I]/KI)
Lneas convergentes sobre

el eje de ordenadas
ES
Disminuye
1+([I]/KI)
Disminuye
1+([I]/KI)
Lneas paralelas
Acompetitiva
No
competitiva
Simple
(KI=KESI)
Lneas convergentes en un
punto de abscisa negativa
E y ES
Disminuye
1+([I]/KESI)
Ninguno
Sobre el eje de abscisas
Aumenta
Mixta
(KI > KESI)
Disminuye
1+([I]/KESI)
1 + [I]
K ESI
[
I
]
1 +
KI
Por encima del eje de

abscisas
Disminuye
Mixta
(KI < KESI)
Disminuye
1+([I]/KESI)
1 + [I]
K ESI
1 + [ I]
KI
Por debajo del eje de

abscisas

VELOCIDAD
INHIBICIN POR SUSTRATO
Es un tipo de inhibicin reversible, bastante frecuente, en ,la que un exceso

de sustrato provoca una prdida de la actividad enzimtica

VELOCIDAD
INHIBICIN BISUSTRATO

VELOCIDAD
INHIBIDORES IRREVERSIBLES
- Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo

qumico de la enzima, modificndola covalentemente
- Su accin no se describe por una constante de equilibrio Ki,
sino por una constante de velocidad ki:
E+I
- A diferencia de la inhibicin reversible, el efecto de los

inhibidores irreversibles depende del tiempo de actuacin
del inhibidor.
- Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente
txicos.

VELOCIDAD
Producen inactivacin permanente de

la actividad enzimtica
Se interfiere con el normal desarrollo
de una reaccin o va metablica
Ejemplos:
p-cloromercuribenzoato,
yodoacetato, diisopropilfluorfosfato

VELOCIDAD
Algunos tipos de inhibidores irreversibles
1. Reactivos de grupos -SH

2. Organofosfricos
3. Ligandos de metales
4. Metales pesados

VELOCIDAD
INHIBIDORES IRREVERSIBLES 1. Reactivos de grupos -SH
(a) Agentes alquilantes

Yodoacetato
ICH2 COO-
SH
IH
S CH2 COOO
(b) Compuestos insaturados

E S
SH
N CH2 CH3
O
N CH2 CH3
N-Etil maleimida (NEM)

O

VELOCIDAD
INHIBIDORES IRREVERSIBLES 1. Reactivos de grupos -SH
(c) Formadores de mercptidos

HOHg
SH
p-Hidroximercuribenzoato
COO-
E S Hg
COO-
(d) Oxidantes
Promueven la oxidacin de dos tioles a un disulfuro

VELOCIDAD
INHIBIDORES IRREVERSIBLES 2. Organofosfricos
Ser CH CH2
H 3C
OH
Ser CH CH2
H3C
CH3
CH
P O
CH
H3C
CH3
DFP:
diisopropil
fluorofosfato
CH3
CH
O P O
CH
CH3
H 3C
- Actan sobre enzimas sernicas

- nicamente sobre la Ser activa
- Insecticidas: Parathion, Malathion
- Inhibidores de la Acetilcolinesterasa (Gas sarn)
- Neurogases
Gas sarn: Neurotxico

2-(Fluoro-metilfosforil)
oxipropano

VELOCIDAD
INHIBIDORES IRREVERSIBLES 3. Ligandos de coordinacin de metales
Es el caso del ion cianuro, CNSe fija con gran afinidad a la sexta posicin de coordinacin
del Fe hemnico, impidiendo toda modificacin posterior.
Por ello acta sobre sistemas de Fe hemnico con la sexta
posicin de coordinacin libre, como la citocromo oxidasa,
de lo que deriva su elevadsima toxicidad

VELOCIDAD
Mecanismos
de
Inhibicin Irreversibles

Anlogos del estado de

transicin
Marcadores de afinidad
Inhibidores suicidas

VELOCIDAD
INHIBIDORES SUICIDAS
1.- Los inhibidores suicidas deben ser qumicamente inactivos en presencia de la enzima
2- Las molculas de estos inhibidores se activan especficamente por la enzima a la que, a su

vez, van a inactivar
3.- Una vez activados por la enzima, reaccionan rpidamente con la protena uniendose
covalentemente a algn resto de aminocido e inactivando la enzima

VELOCIDAD
E+I
EI
EI*
E + I*
1. El inhibidor se fija a la enzima igual que el substrato o un

inhibidor competitivo convencional
2. La accin cataltica de la enzima convierte al inhibidor I
en una especie altamente reactiva I*
3. I* modifica covalentemente a la enzima, inactivndola
de forma definitiva al igual que un inhibidor irreversible.

VELOCIDAD
Ejemplos de inhibidores suicidas, 1

- Sistema de la -lactamasa bacteriana
La utilizacin masiva de antibiticos -lactmicos (penicilinas,
sus derivados semisintticos y cefalosporinas) ha conducido a
la aparicin de resistencias a los mismos.
Los microorganismos resistentes a estos antibiticos lo son por
producir una enzima, la -lactamasa, que inactiva a los antibiticos -lactmicos.

VELOCIDAD
R CO NH
CH3
CH3
N
O
-Lactamasa
COOPenicilina (activa)
c.peniciloico (inactivo)
R CO NH
O C HN
O-
CH3
CH3
COO-

VELOCIDAD
Muy a menudo los preparados de penicilinas o

penicilinas semisintticas se formulan aadiendo
un inhibidor suicida de la -lactamasa, el cido
clavulnico
CH2OH
C
-Lactamasa
C
-
HN
CH2OH
C
H
COO
COO-
c.clavulnico
C
CH CH2
Ser
HN
CH2OH
C
H
COO-
Esta molcula
reacciona con la
serina activa de la
-lactamasa,
produciendo su
inactivacin

VELOCIDAD
INHIBIDORES DEL ESTADO DE TRANSICIN
Un paso ms all en el desarrollo de inhibidores potentes

es el concepto de Anlogo de Estado de Transicin (AET)
- El inhibidor no es estrictamente anlogo del substrato,

sino del Estado de Transicin de la reaccin.
- La afinidad de las enzimas por los AET es enorme, del
orden nM o pM, con lo que la fijacin es tan fuerte que
puede considerarse irreversible

VELOCIDAD
Angiotensingeno
INHIBIDORES DEL ESTADO DE TRANSICIN

Hipotensin,
hipovolemia,
ortostatismo
Renina
Angiotensina I
DRVYIHPFHL
Enzima convertidora
de Angiotensina, ECA
HL
Angiotensina II
DRVYIHPF
Aumento de la presin arterial
Anlogos de Estado de Transicin: Captopril

R
HN
R'
CH COO-
CH COO-
C O
C H
C O
NH
HO C
C
O
Zn2+
Estado de transicin
de la ECA
H3C C H
H C
H
S
Zn2+
Captopril
CINTICA ENZIMTICA: ENZIMAS REGULADORAS

1. Control a nivel de sustrato
2. Inhibicin reversible por productos
(retroalimentacin)
3. Activacin/inhibicin alostrica (nivel celular)
4. Modificacin covalente (supracelular):
Reversible: fosforilacin, metilacin,

acetilacin, ADP-ribosilacin, etc.
Irreversible: activacin proteoltica

1.- A nivel de sustrato
1.- CONTROL A NIVEL DE SUSTRATO
Mediante interaccin de los sustratos y productos de cada

reaccin con la enzima
hexoquinasa
Glucosa + ATP -------> Glucosa-6-fosfato + ADP
El propio producto de la reaccin puede

inhibir competitivamente a la enzima

2.- Inhibicin reversible por productos
Un aumento de concentracin del producto final de una

ruta metablica inhibe una de las primeras reacciones de
la ruta (generalmente la primera)
A ---> B ---> C ---> D ---> E
E acta como inhibidor del primer enzima.

Ello impide:
La utilizacin innecesaria del primer sustrato
La acumulacin del producto final
Se evita la acumulacin de intermedios
(al ser la mayora R. Reversibles)

3.- Por alosterismo
- Son protenas con mltiples subunidades (mltiples centros activos y

catalticos)
- Presentan una cintica sigmoidal, indicativa de efectos cooperativos
en la unin del sustrato.
- Su actividad est regulada por otras molculas efectoras.
- Pueden mantener las concentraciones de sus sustratos en valores

bastante constantes:
* Existe una concentracin crtica de sustrato ([S]c) por
debajo de la cul la enzima es prcticamente inactiva
* Un pequeo aumento de la concentracin de sustrato, por
encima de la ([S]c, da lugar a un notable aumento de la actividad
enzimtica

3.- Por alosterismo
Enzima
ineficaz
Enzima
muy
eficiente
Bioqumica Mathews, van Holde y Ahern. Addison Wesley 2002
ENZIMAS HOMOTRPICAS:
El sitio de unin es a la vez el
sitio activo y el sitio regulador.
El sustrato puede funcionar
como modulador.
ENZIMAS HETEROTRPICAS:
El modulador es un metabolito
diferente del sustrato. El sitio
regulador es distinto del sitio
regulador.

3.- Por alosterismo
+
La
unin
de
inhibidores
o
activadores
alostricos no afecta
a la Vmax, pero si
altera la Km

3.- Por alosterismo

3.- Por alosterismo

3.- Por alosterismo

3.- Por alosterismo
AMPK is a heterotrimeric protein composed of three different subunits
Catalytic subunit. Can be phosphorylated on the Threonine 172

unclear, but seems to be the assembly subunit.
Contains the binding sites for AMP and or ATP
When AMP binds to AMPK, it increases allosterically the kinases activity by

10 fold.
The phospharlyation of the Thr 172 site by an upstream kinase incrases the
enzymatc activity by 100 fold

4.- Por modificacin covalente
4.- MODIFICACIONES COVALENTES
Existen enzimas que estn inactivas hasta que se activan por unin covalente con
otras molculas y viceversa.
ADP-ribosilacin
- metilacin, acetilacin
Algunas modificaciones son reversibles y otras no.
CH2OH
CH2OH
O
H
HO
H
OH H
CH2OH
H
H
OH H
H
OH
A. FOSFORILACIN/DESFOSFORILACIN
(serina, treonina, tirosina e histidina)
H
O
OH
H
OH H
H
O ....
OH
Pi
CH2OH
O
H
HO
H
OH H
CH2OH
H
OH
H
OH H
OP O
O-
OH
H
OH
EJEMPLO: Glucgeno fosforilasa

Libera glucosa a partir de glucgeno
CH2OH
H
H
O
H
OH H
H
OH
H
O ....

Cadena
lateral
de Ser14
Cadena
lateral
de Ser14
Fosforilasa b
(menos activa)
Fosforilasa
fosfatasa
Fosforilasa
quinasa
Hablar de
fosforilacin AMPK
y de la GSK3-
Fosforilasa a
(ms activa)

Hormone (epinephrine or glucagon)
via G Protein (G-GTP)
Adenylate cyclase
(inactive)
Signal
cascade by
which
Glycogen
Phosphorylase
is activated.
Adenylate cyclase
(active)
catalysis
ATP
cyclic AMP + PPi

Activation
Phosphodiesterase
AMP
Protein kinase A
(inactive)
Protein kinase A
(active)
ATP
ADP
Phosphorylase kinase
(b-inactive)
Phosphatase
Phosphorylase kinase (P)

(a-active)
ATP
Pi
ADP
Phosphorylase
(b-allosteric)
Phosphorylase (P)
(a-active)
Phosphatase
Pi

5.- Por escisin proteoltica

PROCESO EN CASCADA
DE LA COAGULACIN DE
LA SANGRE

autoproteolisis

Vas
principales
de
apoptosis
en
mamferos
Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

6.- Por isoenzimas

6.- Por isoenzimas
ISOENZIMAS: Son formas diferentes (pero relacionadas) de una
enzima que catalizan la misma reaccin. A menudo difieren en unas pocas
sustituciones de aminocidos, afinidad por el sustrato, Vmx y/o
propiedades reguladoras.
Corazn
Rin
Hemate Cerebro Leucocito Msculo
COMPLEJOS MULTIENZIMTICOS: Son asociaciones de enzimas.
Hgado
COENZIMAS
Los cofactores enzimticos suelen ser molculas complejas,

que nuestro organismo no puede sintetizar, por lo general.
Por esa razn muchos cofactores enzimticos deben ser, en
todo en parte, ingresados con la dieta; muchos de ellos son, por
lo tanto, vitaminas.
Ni todos los cofactores son vitamnicos ni todas las vitaminas
son cofactores enzimticos
GRUPO
PROSTTICO
Propiedades de coenzimas
Molculas orgnicas de bajo peso molecular,

Termoestables,
Recuperable.
Una misma coenzima puede ser til para
varias enzimas distintas que cumplen la
misma funcin.
Gran parte provienen del complejo vitamnico
B y del fosfato de adenosina.
Propiedades de coenzimas
Las coenzimas se unen a la molcula de
protena por un sitio distinto al sitio de unin
del sustrato o sitio activo. La unin en este
otro sitio que puede o no ser vecino al sitio
activo, permite ubicar en mejor forma el
sustrato en el sitio activo de modo de facilitar
el inicio de la reaccin.
Ejemplo de reaccin de coenzimas

Piruvato
NADH + H +
Lactato
Deshidrogenasa
Lactato
1,2-difosfoglicerato
Gliceraldehdo-3-fosfato
Deshidrogenasa
NAD+
gliceraldehido-3-P
Vitaminas. Molculas orgnicas de

estructura diversa y no comn entre
ellas, que actan en diferentes formas y
en diferentes niveles dentro de la
fisiologa celular, que, en general, no
son sintetizadas por el organismo
humano, por lo tanto, deben se
ingeridas en cantidades mnimas a
travs de los alimentos.
GENERALIDADES
1912: F.G. Hopkins. Demostr experimentalmente que los animales necesitan algo ms que
protenas, grasa y glcidos en la dieta. Postul que que uno o ms factores accesorios presentes
en los alimentos eran necesarios para la nutricin animal.
1912: Casimir Funk. Obtuvo un concentrado de una amina a partir de la cascarilla del arroz que
aliviaba los sntomas del beriberi. Acu el trmino de VITAMINA, indicativo amina esencial para la
vida
Se sabe que los animales crecen a una mayor tasa cuando se les suplementa con factores de
crecimiento de fuentes naturales.
Son molculas orgnicas complejas, indispensables para el funcionamiento adecuado de los
seres vivos.
Se produjo un cambio profundo a mediados de la dcada de los aos 30, en que fueron aisladas
por primera vez algunas vitaminas y se establecieron sus estructuras moleculares. En unos aos
se identificaron; la tiamina (Vit B1), riboflavina (Vit B2) y el cido nicotnico (Vit B3), que es el factor
antipelagra.
Poco despus se descubri que estas vitaminas actan como componentes fundamentales de
algunos coenzimas. Por ej; la piruvato descarboxilasa, que cataliza la descarboxilacin del ac.
Pirvico a acetaldehdo y CO2, precisa de un cofactor orgnico termoestable denominado
cocarboxilasa. Poco despus observaron que la cocarboxilasa contiene una molcula de tiamina, o
vitamina B1
Necesarias en cantidades mnimas (R.D.R.).
NO cumplen funciones estructurales ni energticas.
NO son sintetizadas por los animales y, por tanto, deben proporcionarse en la dieta.
VITAMINA
COENZIMA
REACCIN o PROCESO
TIAMINA
(B1)
Pirofosfato
de tiamina
(TPP)
Descarboxilacin,
transferencia de grupos
aldehido
RIBOFLAVI FMN y FAD

NA (B2)
ACIDO
NAD y
NICOTNICO
NADP
, NIACINA
(B3)
ACIDO
Coenzima A
PANTOTNI
(CoA)
CO (B5)
Oxido- reducciones
Oxido-reducciones
Transferencia de grupos
acilos
VITAMIN
A
COENZIMA
REACCIN o PROCESO
B6
Fosfato de
piridoxal (PLP)
Transferencia de grupos
amino
BIOTINA
(B8)
Biocitina
Carboxilaciones
ACIDO
FLICO
(B9)
Tetrahidrofolato
(TH4)
Transferencia de grupos de
un solo carbono
B12
Metilcobalamina
Cobamida
Transferencia de grupos de
un solo carbono
Acido ascorbico
Hidroxilaciones
VITAMINA
CONSECUENCIA DE LA DEFICIENCIA
TIAMINA
Beriberi( Prdida de peso, cardiopatas,

neurolgicas)
Queilosis, estomatitis angular (lesiones en
boca) y glositis (Lengua color magenta)
Pelagra (Dermatitis, Demencia y Diarrea)
RIBOFLAVINA
NIACINA
ACIDO
PANTOTNICO
B6
Neuropata perifrica, depresin,

convulsiones y anemia sideroblstica.
Depresin, mialgias y fatiga muscular
Anemia megaloblstica, defectos en tubo
neural
Anemia perniciosa, acidosis metilmalnica
Escorbuto (Encas inflamadas y
sangrantes, hemorragias subdrmicas)
BIOTINA
ACIDO FLICO
B12
C
Clasificacin
Vitaminas Hidrosolubles
Complejo B: Tiamina (vitamina B1)

Riboflavina (vitamina B2)
Niacina (vitamina B3)
Piridoxina ( vitamina B6)
Acido flico
Acido pantotnico (vitamina B5)
Biotina
Cobalamina (vitamina B12)
Acido ascrbico
Clasificacin
Vitaminas liposolubles
Vitamina A
Vitamina D
Vitamina E
Vitamina K
Cofactores de naturaleza no vitamnica: ejemplos

Hemo
Complejos Fe-S
Quinonas
Glutatin
ATP
UTP
PAPS(
S-AM
Carnitina
cido lipoico
3- Fosfoadenil 5- Fosfosulfato
Hemoenzimas, citocromos
Ferredoxinas
Tr.electrnico mitocondrial y fotosinttico
Redox; transporte de aminocidos
Transf.de fosfato y/o de energa
Transf.de grupos glicosdicos
Transf.de grupos sulfato
Transf.de grupos metilo
Transportador de grupos acilTransportador electrones
COENZIMAS DE PROCESOS DE OXIDACIN-REDUCCIN

1.- RIBOFLAVINA (Vitamina B2) y flavn-nucletidos
Estructura Qumica: Ribitol + isoaloxacina. Es un derivado de la isoaloxacina
Es sintetizada por todas las plantas y muchos microorganismos, pero no por los animales
superiores
La teora de que los pigmentos flavnicos amarillos actan como coenzimas haba sido deducido
por Theorell y Warburg, quienes descubrieron que un enzima que participa en la oxidacin de los
nucletidos de piridina reducidos contiene un grupo prosttico amarillo, identificado posteriormente
como FMN (Flavn mono-nucletido)
Ms tarde, Warburg descubri una segunda forma coenzimtica de riboflavina, el flavn adenndinucletido (FAD).
El FMN no es un verdadero nucletido, ya que no contiene el resto de azcar pentosa, en su
lugar, presenta el azcar-alcohol (ribitol)
Los flavn-nucletidos actan como grupos prostticos de los enzimas de oxidacin-reduccin
conocidos como flavoenzimas o flavoprotenas
R.D.R: 0,5 mg en nios y 2 mg en adultos. Segn ingesta protenas
Fuentes: Leche, granos, leguminosas, huevo y carne magra.
Coenzima: FMN y FAD. Oxidorreduccin.
Deficiencia: Arriboflavinosis (Anemia, queilosis, lengua color magenta, dermatitis seborreica y
fotofobia).

Procesos en los que intervienen:
a.- Degradacin oxidativa del piruvato, cidos grasos y y de los aminocidos
b.- Proceso de transporte electrnico: Los organismos aerobios el ltimo aceptor de electrones es
el oxgeno. Sin embargo los electrones no se transfieren directamente a la molcula de oxgeno,
sino que las molculas transfieren electrones a transportadores especiales como las flavinas.
En muchos flavoenzimas, el flavnnucletido se halla fuertemente unido,

aunque la unin no es covalente a la
protena. Constituye una excepcin la
succinato-deshidrogenasa en la que el
nucletido FAD est covalentemente unido
a un resto de histidina de la cadena
polipeptdica.
Isoaloxacina
(Forma reducida)
RIBITOL
Vitamina B2

FMN
FAD

FAD y FADH22
+2e
Succinato deshidrogenasa:
Succinato + FAD Fumarato + FADH2
Las formas oxidadas de los diferentes flavoenzimas son intensamente coloreadas; poseen
coloraciones caractersticas, amarilla, roja o verde, debidas a fuertes bandas de absorcin en la
zona del espectro visible. Cuando se reducen, las flavoenzimas experimentan una decoloracin con
un cambio en el espectro de absorcin.

2.- cido nicotnico (Niacina) (Vitamina B3) y nucletidos de piridina
cido nicotinico, antipelagra.
Los vegetales y la mayor parte de los animales pueden sintetizar cido nicotnico a partir de
otros precursores, sobre todo del aminocido triptfano
Estructura Qumica: Piridina.
Se hallan unidos a la protena de la deshidrogenasa de un modo relativamente dbil durante el
ciclo cataltico, y por ello, funcionan ms como sustratos que como grupo prostticos
R.D.R: Nios: 5 - 8 mg. Adultos: 18 - 29 mg.
Cada 60 mg de triptfano generan 1 mg de niacina.
Fuentes: Maz, vegetales y animales.
Coenzimas: NAD, NADP. Oxidorreduccin. En general, las deshidrogenasas piridndependientes son especficas, bien del NAD+ o del NADP+, pero unas cuantas, como la
glutamato deshidrogenasa, actan con ambos.
Deficiencias: Pelagra (Diarrea, Demencia, Dermatitis) Ingesta isoniacida, enfermedad de
Hartnup y sndrome carcinoide maligno.
Toxicidad: Dao heptico ?.

Nicotinamida
NAD+/NADH > 1: +/- 1-3 mM

NADP+/NADPH < 1: 0,01-1 mM
NAD+ (Dinucletido de nicotinamida y de

adenina)
El NAD+ participa en reacciones catablicas,

interviniendo en su forma oxidada pasando a su forma
reducida. El NADPH se genera en la va de degradacin
de la glucosa (ruta de las pentosas fosfato). La
regeneracin de NAD+ se produce al entrar el NADH en
la cadena de transporte electrnico

CONH2
NAD+
+
N
O
CH2
OH
OH
O P O P O CH2
-
NH2
N
O
N
N
H
OH
OH
Nicotinamida - Ribosa - P - P - Ribosa - Adenina

CONH2
+
N
NADP+
O
CH2
OH
OH
O
O P O P O CH2
-
NH2
H
OH
O
-
O P O
O-

Reaccin
de
la
malatodeshidrogenasa, mostrando el camino
que siguen los tomos de hidrgeno
separados por el enzima. Uno de ellos
es transferido en forma de in hidruro
a la posicin 4 del anillos de piridina; el
otro aparece como in hidrgeno en el
medio

NAD y NADH+H

Las reacciones en que actan estas coenzimas se

pueden esquematizar como:
Durante la oxidacin de un sustrato, el anillo de nicotinamida del NAD+ acepta un in hidrgeno y
dos electrones, lo que es equivalente a un ion hidruro. En la deshidrogenacin producida por el
NAD+, un tomo de hidrgeno del sustrato se transfiere directamente al NAD+ , mientras que el otro
aparece en el disolvente, en forma de protn. Los dos electrones perdidos por el sustrato se
transfieren al anillo de nicotinamida
AH2 + NAD+
Forma
oxidada
A + NADH + H+
Forma
reducida
AH2 + NAPD+
Forma
oxidada
A + NADPH + H+
Forma
reducida

NADH+H = 340 nm

1.- En la mayor parte de las biosntesis reductoras, el dador de electrones

es el NADPH. El NADPH transporta electrones de la misma forma que el
NADH
2.- Sin embargo, el NADPH se utiliza casi exclusivamente para las

biosntesis reductoras, mientras que el NADH se utiliza principalmente
para le generacin de ATP.
3.- El grupo fosfato adicional del NADH es una seal de identificacin que
permite a los enzimas diferenciar los electrones de alto potencial que
sern utilizados en el anabolismo de los que se utilizarn en el
catabolismo

3.- cido lipoico (No derivado vitamnico)
1.- A veces llamado cido titico
2.- Existen dos formas que se interconvierten con facilidad a travs de
procesos de oxidacin-reduccin:
2.1.- Forma oxidada. Es el cido lipoico y es un disulfuro cclico
2.2.- Forma reducida. El cido dihidrolipoico, que posee dos
grupos sulfhidrilo en las posiciones 6 y 8.
3.- El cido lipoico acta como uno de los coenzimas de la
descarboxilacin oxidativa del piruvato
4.- El cido lipoico se halla unido covalentemente, mediante un enlace
amida, el grupo epsilon-amino de un resto de Lys de la dihidrolipoiltransacetilasa (segunda enzima del complejo de la piruvato
deshidrogenasa). El resto de lipoil-lisina se conoce tambin como
lipoamida

2H+2e
Se regenera el FADH2

El cido lipoico acta como uno de los coenzimas de la descarboxilacin

oxidativa del piruvato (PIRUVATO DESCARBOXILASA) y de otros oxocidos, complejas reacciones en las que participan diversos coenzimas
CoA + S-acetildihidrolipoamida => Acetil-CoA + dihidrolipoamida

4.- Vitamina B12 (Cianocobalamina)
Estructura Qumica: Posee dos componentes caractersticos:
Sistema de anillos de CORRINA, que se parece al sistema de porfirina de la hemoglobina ( 4 anillos

del tipo pirrol, pero en el cual un par de estos anillos de 5 trminos se halla unido directamente por un
puente meteno. Existe un tomo de cobalto
Ribonucletido, presenta como base el 5,6 dimetilbenzimidazol
El cianuro ocupa una de las posiciones de coordinacin del tomo de cobalto; de ah el nombre de
cianocobalamina. Sin embargo, el cianuro est presente como artefacto de aislamiento. En el coenzima
B12, el ligando de cianuro est sustitudo por el grupo 5-desoxiadenosilo
En una primer tipo de reacciones: El coenzima B12 o 5`-DESOXIADENOSILCOBALAMINA es necesario para

la actuacin de diversos enzimas. Las reacciones enzimticas que precisan del coenzima B12 tienen como
denominador comn un desplazamiento 1,2 de un tomo de hidrgeno desde un tomo de carbono de la
molcula de sustrato al siguiente, acompaado, habitualmente, por un desplazamiento inverso 2,1 de algn
otro grupo como un hidroxilo, amino, alquilo o carboxilo (REORDENAMIENTOS INTRAMOLECULARES)
En un segundo tipo de reacciones: La vitamina B12 funciona como coenzima con la sexta posicin de
coordinacin del tomo de cobalto ocupada por un grupo metilo en lugar del grupo 5`-adenosilo siendo el
compuesto resultante la METILCOBALAMINA. En estas reacciones la metilcobalamina funciona como un
transportador de un grupo metilo procedente del N5-metiltetrahidrofolato.
R.D.R: Nios 0.3 -1.5 g. Adultos 2 g.
Fuentes: Ni los animales ni los vegetales pueden sintetizar la vitamina B12. Slo lo sintetizan algunas bacterias.
Factor intrnseco es una glucoprotena del jugo gstrico que une vitamina B12. Esta protena capta una molcula
de vitamina B12 y la transporta a las clulas intestinales , desde las que, en unin de otras protenas, llamadas
transcobalaminas, es transportada a los tejidos perifricos
Es esencial para la maduracin normal y el desarrollo de los eritrocitos
Deficiencia: Anemia perniciosa, es la falta de factor intrnseco (Megaloblastosis y sntomas neurolgicos. Glositis)

La hidroxicobalamina y la
cianocobalamina son formas
no fisiolgicas de la vitamina
B12

Las formas activas son: metilcobalamina y 5-deoxiadenosilcobalamina
La metilcobalamina acta en una reaccin que permite la reserva de metionina para sntesis de
purinas y pirimidinas
Homocistena + metilcobalamina
La cobalamina acta como mediadora en la reserva de tetrahidrofolato para la sntesis de bases para
los cidos nucleicos
Cobalamina + N5-metiltetrahidrofolato
metionina+cobalamina
metilcobalamina + tetrahidrofolato


5.- Quinonas (No derivado vitamnico)
Cofactores quinnicos
O
OH
Quinona
Hidroquinona
O
AH2
OH

Subunidad
isoprenoide(2
metil, 1,3
butadieno)
O
CH3
CH3
CH3
CH3
Ubiquinona (Coenzima Q)
N=10

La coenzima Q es un componente de la cadena de transporte de
electrones y participa en la respiracin celular aerbica, generando energa
en forma de ATP. El noventa y cinco por ciento de la energa del cuerpo
humano se genera de esta manera. Por lo tanto, los rganos con un
requerimiento ms alto de energa (como el corazn y el hgado) son los
que tienen concentraciones ms elevadas de coenzima Q10.

6.- cido ascrbico (Vitamina C)
1.- Es un potente reductor
2.- Es una de las vitaminas de estructura ms sencilla (lactona de un
azcar-cido)
3.- Slo se precisa en la dieta de unos pocos vertebrados (hombre,
monos, cobaya, el murcilago frugvoro de la India y algunos peces)
4.- Algunos insectos y otros invertebrados necesitan cido ascrbico pero
lo pueden sintetizar a partir de la glucosa y de otros precursores sencillos.
No est presente en los microorganismos
5.- Es un potente reductor, pierde con facilidad tomos de hidrgeno y se
transforma en el cido deshidroascrbico, que tambin posee actividad
vitamina C
6.- Su funcin fisiolgica no es conocida todava
7.- Participa como cofactor en la hidroxilacin enzimtica de la prolina e
hidroxiprolina y en otras reacciones de hidroxilacin

Son molculas activas
Cuando pierde el
anillo de lactona se
vuelve inactivo

OH H
H2C C
OH H
H2C C
O
O
HO
O
O
HO
HO
OH
Acido ascrbico
cido Ascrbico
(vit. C)
AH2
Acido deshidroascrbico

Acta en la maduracin del colgeno, como cofactor para la
hidroxilacin de la prolina permitiendo la formacin de los
entrecruzamientos de las molculas de ste. Mantiene as la
normalidad del tejido conectivo y permite la cicatrizacin normal
de las heridas.
Degradacin de tirosina
Sntesis de adrenalina a partir de tirosina
Sntesis de cidos biliares
Absorcin de hierro.
Accin antioxidante, especialmente proteccin del cido flico y
tocoferoles de la oxidacin en el intestino

7.- Glutation (No derivado vitamnico)
Glutatin: -Glu-Cys-Gly
(forma reducida, GSH)
-Glu-Cys-Gly
S
COO
+
COO
+
H3N C H
H3N C H
-Glu-Cys-Gly
CH2
CH2
CH2
CH2
CO NH CH CO NH CH2 COOH
CO NH CH CO NH CH2 COO-
CH2
CH2
SH
S
S
CH2
CO NH CH CO NH CH2 COO-
2GSH + A
GSSG + AH2
CH2
CH2
H3N C H
-
COO
Glutatin:
forma oxidada, GSSG

8.- Citocromos (No derivado vitamnico)
Son protenas de tamao pequeo, que operan como

transportadores monoelectrnicos debido a una transicin
Fe2+
Fe3+
Se distinguen tres tipos:

1. Citocromos A: Alto potencial redox (transportadores terminales)
2. Citocromos B: Bajo potencial redox
3. Citocromos C: Potencial redox intermedio
(Se distinguen por su espectro caracterstico de absorcin)
COENZIMAS DE PROCESOS DE TRANSFERENCIA DE GRUPO

1.- Vitamina B1 (Tiamina)
Polineuritis en las aves, anti-beriberi en humanos.
Estructura Qumica: Pirimidina sustituda unida mediante un puente metileno a un
tiazol sustitudo
R.D.R: Nios: 0.5 mg/da, Adultos: 1 - 1,5 mg. Segn ingesta carbohidratos.
Fuentes: Tejidos animales (Carne cerdo y vsceras, cereales y leguminosas).
Coenzima: TPP. Descarboxilacin y transcetolacin.
Deficiencia: Beriberi (Neuropata perifrica, anorexia, fatiga), Encefalopata Wernicke
Korsakow (Alcoholismo).

La tiamina aparece en las clulas en forma de coenzima activo, como

PIROFOSFATO DE TIAMINA

Absorbida en el intestino delgado por proceso activo saturable, no importa cuanto se ingiera, hay un mximo
absorbible. Pasado ese mximo hay difusin pasiva.
La vitamina B1 interviene en el metabolismo de hidratos de carbono bsicamente en dos tipos de

reacciones:
1.- Decarboxilaciones oxidativas, en las cuales son decarboxilados alfa-cetocidos tanto en la
glicolisis, como en el ciclo de Krebs y en el metabolismo de aminocidos.
TPP
Piruvato ============> acetil-Coa
TPP
-cetoglutarato =========> succinil-Coa
2.- Reacciones de transcetolasas. En estas reacciones se transporta un grupo acetilo de una cetosa a
una aldosa disminuyendo la cadena de la cetosa en dos carbonos y aumentando la de la aldosa en
dos carbonos.
En estas reacciones, el anillo de tiazol del pirofosfato de tiamina acta como transportador transitorio
de un grupo aldehdo unido covalentemente. Se necesita tambin Mg2+ como cofactor.

Decarboxilaciones oxidativas,
RCO-COOH + HS CoA + NAD+
RCO SCoA + NADH + H+ + CO2
Reacciones de transcetolasas.

Es coenzima de estas enzimas enzimas:

1.- PIRUVATO DESHIDROGENASA: Metabolismo de carbohidratos
2.- -CETOGLUTARATO DESHIDROGENASA: Metabolismo de
carbohidratos
3.- TRANSCETOLASAS: Ruta de las pentosas fosfato
4.- DESHIDROGENASA DE CETOCIDOS DE CADENA
RAMIFICADA: Metabolismo de aminocidos

Se ha descubierto
que
se
forma
pirofosfato
de
hidroxietilamina,
cuando la piruvato
descarboxilasa
de
levadura acta sobre
el
piruvato
en
presencia
de
pirofosfato
de
tiamina

El enzima tiaminasa que est presente en los microorganismos intestinales,
inactiva a la tiamina escindindola entre los anillos. Esta enzima es el
responsable de la PARLISIS DE CHASTEK, enfermedad de los zorros en
cautividad y de los visones alimentados con vsceras de carpas o de truchas
crudas. Las vsceras de ciertos peces de agua dulce, en moluscos y ciertos
microorganismos (Bacillus Tiaminolyticus y Clostridium Tiaminolyticum). ste
factor (enzima) produce un desplazamiento en la molcula de tiamina


2.- Acido pantotnico y coenzima A
1.- Es sintetizado por las plantas y muchos microorganismos,pero es
necesario en la dieta de los vertebrados
2.- Poco despus de su descubrimiento, se observ que el cido pantotnico
se encontraba en los tejidos en una forma combinada de bajo peso
molecular, pero hasta 1948, no fue identificado el coenzima A
3.- la funcin del coenzima A es la de actuar como transportador de grupos
acilo en las reacciones enzimticas implicadas en la oxidacin de los cidos
grasos, en la sntesis de cidos grasos, en la oxidacin del piruvato y en las
acetilaciones biolgicas
4.- La forma de transportar los grupos acilo es mediante un tioster con el
grupo sulfhidrilo del coenzima A

cido pantoico
-alanina

El cido pantotnico y sus sales son absorbidas directamente

en el intestino. La forma activa del cido pantotnico es
como Coenzima A, para ello al cido se le suma una molcula
de cistena, convirtindose en pantotena, luego es fosforilado y
a continuacin adenilado generando entonces una molcula de
Coenzima A. Si la pantotena se una a una protena en vez de
una adenilato, la estructura se denomina protena
transportadora de acilos.

c. Pantoico
-Alanina
CH3
CH2OH C CHOH CO NH CH2 CH2 COOH
c. Pantotnico
CH3
CH3
c. Pantotnico
Cistena
CH2OH C CHOH CO NH CH2 CH2 CO NH CH2 CH2 SH

CH3
Pantotena

Pantetena
H
HS
C
O
ADP
H HO H
O
O
N
O P O P O CH2
C
OOO H3C CH3
H
H
NH2
N
O
OH
Coenzima A
N
N
H
H
OH

3.- Vitamina B6 y coenzima de piridoxina
1.- Fue identificada como esencial por primera vez en la nutricin de la rata para la prevencin
de la acrodinia
2.- En 1938 se aisl e identific una sustancia cristalizada que posea esta actividad, la
PIRIDOXINA
3.- Snell y colaboradores revel que la piridoxina se convierte biolgicamente en otros dos
compuestos: el PIRIDOXAL y la PIRIDOXAMINA
4.- Las forma coenzimticas activas de la vitamina B6 son el fosfato de piridoxal y el fosfato
de piridoxamina
5.- Actan en gran nmero de reacciones enzimticas en las que los aminocidos o los grupos
amino se transforman o se transfieren. El tipo ms corriente de reaccin que precisa del
fosfato de piridoxal es la transaminacin. Las enzimas que catalizan dichas reaccin son las
transaminasas o aminotransferasas.

Estructura Qumica: Pirimidina.

Piridoxal, piridoxina. y piridoxamina
R.D.R: Nios: 0.3 1 mg. Adultos: 2 mg. Segn
ingesta protenas.
Fuentes: Hgado, carnes, pescado, aguacates,
bananos, vegetales y huevos.
Coenzima: PLP. Metabolismo aminocidos
(transaminaciones).
Deficiencia: Neuropata perifrica, dermatitis,
glositis


TAUTOMERA


4.- Biotina y biocitina (Vitamina B8)
Estructura Qumica: derivado imidazlico.

R.D.R: Nios: 10 30 g. Adultos: 100 g. .
Fuentes: Bacterias intestinales
Coenzima: Biocitina. Carboxilacin.
Deficiencia: Avidina (Huevo). Depresin, dermatitis,
mialgias y alucinaciones. Inmunosupresin (Nios)

1.- La biotina contiene los anillos del imidazol y del tiofeno condensados
2.- Protege a los animales contra la toxicidad caracterstica producida al alimentarlos con
clara de huevo cruda.
3.- Al ser sintetizada por las bacterias intestinales, la deficiencia de biotina no puede
producirse fcilmente, slo mediante supresin de la vitamina en la dieta. Sin embargo,
la clara de huevo cruda induce una deficiencia en biotina por la presencia de una
protena, la AVIDINA, que se une de modo especfico a la biotina e impide su absorcin
en el intestino
4.- Su funcin es la trasnsferencia enzimtica o incorporacin del dixido de carbono
5.- Lynen y Lane descubrieron que la biotina est presente en el grupo prosttico
covalentemente unido de la propionil- CoA-carboxilasa. La molcula de biotina est
combinada, en forma de amida sustituda, con el grupo epsilon-amino de un resto de
lisina, formando el compuesto biotinil-lisina o biocitina
6.- La biotina unida desempea el papel de transportador intermediario de dixido de
carbono durante la accin de algunos enzimas carboxilantes (propionil-CoA-carboxilasa
o acetil-CoA-carboxilasa), en forma de un derivado muy lbil, la CARBOXIBIOTINA


5.- cido flico
1.- Se encontr por primera vez en las hojas de espinaca. Est ampliamente distribuido en las plantas.
2.- Su deficiencia en los mamferos produce una disminucin del crecimiento, y la aparicin de diversas
formas de anemia
3.- Contiene 3 sillares caractersticos:
3.1.- Una Pteridina sustituda. La pteridina es el compuesto nitrogenado bicclico originario de
las pterinas, que son derivados de la 2-amino-4-hidroxipteridina. Algunas pterinas, como la xantopterina,
actan como pigmentos en los ojos y en las las de los insectos. La que existe en el cido flico es la 6metilpterina
3.2.- cido p-aminobenzoico
3.3.- cido glutmico
4.- Al cido flico se le conoce por el nombre de cido pteroilglutmico o folacina.
5.- El sntoma bioqumico ms sobresaliente de la deficiencia de cido flico es el impedimento de la
biosntesis de las purinas y de la timina (pirimidina)
6.- Acta en la transferencia de ciertos fragmentos monocarbonados utilizados en la sntesis de la timina y en
otras rutas biosintticas.
7.- El cido flico se convierte, por reduccin en dos etapas, en su forma de coenzima, el cido
tetrahidroflico.. El tetrahidroflico acta como transportador intermediario de grupos:
7.1.- Hidroximetilo
7.2.- Formilo
7.3.- metilo

5.- cido flico

5.- cido flico
Derivados monocarbonados del tetrahidrofolato.

5.- cido flico

Enzimologia

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Enzimologia

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

ENZIMOLOGA

Las clulas poseen

Respecto a su naturaleza qumica:

Parte proteica = Apoenzima

Holoenzima = Apoenzima + Cofactores

Grupos que se transfieren:

La sustancia sobre la cual acta una enzima se conoce como

1.- Especificidad de accin: Son

2.- Especificidad de sustrato: Las

La sustancia sobre la que acta el enzima (sustrato).

Formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de reaccin

1.- El enzima y su sustrato

2.- Unin al centro activo

3.- Formacin de productos

Supone una rigidez de ambas estructuras no compatible con la naturaleza

La protena adquiere su conformacin espacial, definitiva para la catlisis,

Cmo actan las enzimas como catalizadores?

Hiptesis del Ajuste Inducido (Daniel Koshland,

E Induce al S a configuracin aproximada al Edo.

h=Constante de Planck (6,626x10-34 JxS)

EL CAMBIO DE ENERGA LIBRE

Cada vez que la constante de equilibrio cambia en

LAS ENZIMAS ACELERAN

LAS ENZIMAS ACELERAN

Gs= G0s+RT Ln [ES]

ENZIMAS: MECANISMOS GENERAL DE ACCIN

3.- EFECTOS DE PROXIMIDAD Y ORIENTACIN DE ORBITALES: Efectos

4.- EFECTO DEL ANCLAJE DE LOS SUSTRATOS SOBRE EL ENZIMA:

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

2.- CATLISIS COVALENTE

3.- CATLISIS MEDIADA POR IONES METLICOS

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

Muchas reacciones que ocurren en el interior de las enzimas suponen la

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

Ej: sern-proteasas (trombina, plasmina) y cisten-proteasas (papana y ficina), y las

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

Los iones metlicos participan de diferentes formas en la catlisis

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

ENZIMAS: TIPOS DE CATLISIS

La enzima tiene en su centro activo un

Conceptos bsicos de cintica qumica

Factores que afectan la velocidad de

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

Significado de KM, Kcat, Kcat/KM

Significado de KM, Kcat, Kcat/KM

Significado de KM, Kcat, Kcat/KM

CINTICA ENZIMTICA: ESTUDIO DE LA VELOCIDAD FRENTE A

CINTICA ENZIMTICA: PROCEDIMIENTOS DE LINEARIZACIN

CINTICA ENZIMTICA: PROCEDIMIENTOS DE LINEARIZACIN

CINTICA ENZIMTICA: PROCEDIMIENTOS DE LINEARIZACIN

1.- Se supone la formacin de un equilibrio rpido entre la enzima y los

2.- La cantidad de enzima total [E0] es igual al sumatorio de todas las

Si se forma un complejo ternario E-A-B

1. Mecanismo secuencial ordenado

Si NO se forma un complejo ternario E-A-B