UNIVERSIDAD SAN PEDRO

BACILLUS
ANTHRACIS
BACILLUS ANTHRACIS

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GENERO BACILLUS

[BACILLUS ANTHRACIS]

INDICE

PGINA

INTRODUCCION

1. ANTECEDENTES CIENTIFICOS
2. AGENTE ETIOLOGICO CLASIFICACION
TAXOLOGICA
3. DESCRIPCION DEL AGENTE ETIOLOGICO:
MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA
4. MECANISMOS DE TRANSMISION
5. PATOGENIA
6. MANIFESTACIONES CLINICAS
7. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
MICROBILOGICO
8. TRATAMIENTO Y ESTRATEGIAS DE PREVENSION
BIBLIOGRAFIA

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INTRODUCCION

GENERO BACILLUS

[BACILLUS ANTHRACIS]

La familia Bacillaceae comprende una coleccin variada de bacterias, que incluye

microorganismos

que

solo

crecen

en

condiciones

aerobias

anaerobias,

microorganismos que tienen forma cocacea o bacilar y grampositivos y gramnegativos.

La caracterstica compartida por todos ellos es la capacidad de formar endosporas. A
pesar de las docenas de gneros incluidos dentro de esta familia, los estudiantes solo
deben conocer dos importantes: Bacillus (microorganismos formadores de esporas
aerobios y anaerobios facultativos).
El gnero Bacillus incluye casi 200 especies. Por suerte, las especies con inters mdico
son relativamente limitadas. Bacillus anthracis, el microorganismo responsable del
carbunco, es el miembro ms importante de este gnero. Esta especie se considera una
de las ms temidas como agentes para la guerra biolgica. Desde la liberacin de esporas
de B. anthracis convertidas en armas en el sistema de correos de EE. UU. en 2001, se ha
puesto de relieve todava ms el posible peligro que representa este microorganismo.
Bacillus anthracis son bacilos Gram positivos, con un tamao de 1-3 x 3-10 micras,
aerobios o anaerobios facultativos, inmviles, encapsulados y formadores de esporas.
Debido a su elevado potencial infectivo, sus esporas pueden utilizarse como arma
biolgica en forma de aerosol, y estn incluidos en la lista de agentes potenciales de
bioterrorismo (categora A, agentes de alta prioridad).
El hombre adquiere la infeccin por contacto, ingestin o inhalacin de esporas,
normalmente procedentes de animales infectados o sus productos. En ms del 95% de
los casos la infeccin es cutnea, debida a inoculacin de esporas a travs de pequeas
abrasiones en la piel. La exposicin directa a secreciones de lesiones de carbunco
cutneo puede dar lugar a una infeccin secundaria cutnea pero no se conocen casos
transmisin persona a persona por inhalacin.

1. ANTECEDENTES CIENTIFICOS

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Pollender en 1849, fue el primero en revelar la presencia de cuerpos en forma de bastn

en la sangre de animales que padecan una enfermedad conocida desde la antigedad
como: fiebre esplnica, pstula maligna, enfermedad de los escaldadores de la lana,
carbunco o nthrax, sugiriendo una conexin causal con la enfermedad. Devaine en
1863, demostr que la presencia de las formas bacilares encontradas en la sangre de
animales con nthrax era una condicin esencial para producir la muerte en animales
inoculados. Afirm que se trataba de bacterias y propuso el nombre de Bacillus anthracis
para designarlas. Pero las ideas de Devaine no fueron universalmente aceptadas ni sus
experimentos concluyentes.

La polmica sobre la causalidad se extendi hasta 1876 cuando Roberto Koch, public
su trabajo sobre La etiologa del Anthrax basada en la historia de vida del Bacillus
anthracis. Koch realiz cuidadosas observaciones sobre la morfologa y divisin del
bacilo en la sangre y en tejidos de animales, y desarroll las tcnicas para la obtencin
de cultivos puros que le permitieron demostrar la produccin de esporas a partir del
bacilo y de bacilos a partir de esporas, confirmando en forma magistral los trabajos de
Ferdinand Cohn. Finalmente, logr reproducir los sntomas de la enfermedad mediante
la inoculacin de animales sanos con cultivos puros de B. anthracis, estableciendo una
correlacin inequvoca entre el agente infeccioso y la enfermedad. Naci la
Bacteriologa y rpidamente se transform en una ciencia experimental. En 1881 Koch
public los Mtodos para el estudio de organismos patgenos y un ao ms tarde, el
trabajo seminal sobre la etiologa de la tuberculosis. En los veinte aos siguientes, los
bacterilogos lograron establecer la etiologa de las principales enfermedades producidas
por bacterias. En 1881, Louis Pasteur desarroll la primera vacuna empleando cultivos
vivos de B. anthracis atenuados por calor (42- 43C). La efectividad de la vacuna en
vacas, ovejas y carneros fue demostrada en pblico en el campo de Pouilly-le-Fort,
dejando firmemente establecidos los principios de la inmunizacin. En Venezuela, se

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reconoce a Rafael Rangel como el primero en realizar estudios experimentales sobre el

ntrax. En 1906 diagnostic con magistral precisin que el mal conocido como
atarrillamiento o tabardillo, que afectaba al ganado vacuno, o el vejigazo, ampolla del
ganado o vejiga de vaca que produca lesiones severas entre los criadores, y el grito de
las cabras eran todas producidas por el B. anthracis. Rangel, junto a Minguet Letteron
trabaj en la atenuacin del bacilo con miras a la elaboracin de una vacuna.

La mayora de las infecciones naturales (95%) se producen por el contacto entre la piel
del husped y los tejidos de animales que han muerto de la enfermedad, como pelo,
cuero, lana, etc., e incluso, por productos elaborados con estos tejidos. La infeccin
intestinal u orofarngea es ocasionada por la ingestin de carne contaminada, mientras
que la infeccin adquirida por va inhalatoria es poco frecuente como infeccin natural,
estando relacionada con ciertos procesos industriales como el curtido de cuero o el
procesamiento de lana, en los cuales es posible la diseminacin de esporas como
aerosoles. La enfermedad en el Per es endmica. En 1904 el doctor Ricardo Pazos
Varela present su tesis sobre la seroterapia del carbunco. De 1990 a 1992 se notificaron
460 casos de carbunco (ntrax); el mayor nmero de casos (223) se registr en 1992; en
1993 y 1994 no se notificaron casos; en 1995 se comunicaron 25 y en 1996, 12. Se han
continuado observando casos en los aos 1997 y 1998 en forma espordica,
particularmente en los departamentos de Lima e Ica, as como la provincia constitucional
del Callao. Bajas coberturas de vacunacin del ganado bovino, caprino y ovino estaran
relacionadas con el problema.
Una investigacin epidemiolgica retrospectiva de un brote epidmico de carbunco
ocurrido en enero de 1995 en una localidad ubicada en la Provincia Constitucional del
Callao revel que la fuente de infeccin por Bacillus anthracis fue el contacto directo
con animales (vacas, cerdos). Las manifestaciones clnicas ms comunes fueron fiebre,
cefalea y lesin cutnea caracterstica. En mayo de 1995 se realiz el estudio de otro
brote epidmico de carbunco, registrado en el Centro Poblado de Pampa Grande en

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Pachacmac producindose un total de ocho casos, cinco mujeres y tres varones. La

edad promedio fue de 31,25 aos con un rango de edad de 16-57 aos, con un tiempo de
enfermedad promedio de tres das, siendo el contagio en todos los casos, a travs de
manipulacin y consumo de carne; adems se present compromiso de piel,
caracterizado por lesiones papulares pruriginosas e indoloras, seguido de lesin
ulcerativa con necrosis central negruzca (75%), acompaado de leve edema local
periulcerativo (75%). Todos presentaron lesiones en miembros superiores y un caso en
miembros inferiores. El 25% de los pacientes mostr fiebre cuantificada en 38 C. Uno
de los casos fue un paciente VIH (+), quien present cuatro lesiones papulares
pruriginosas pequeas no ulcerativas, no tuvo fiebre pero si una buena respuesta al
tratamiento nico con oxitetraciclina por diez das.

2. AGENTE ETIOLGICO CLASIFICACION TAXOLOGICA

El Bacillus anthracis es una bacteria patgena. Su longitud es de 4 a 8 m y su espesor

de 1 a 1,25 m. La forma vegetativa se observa en el cultivo como cadenas largas de
extremos cncavos similar a una caa de bamb. Las esporas crecen rpidamente en
todos los medios de cultivo ordinarios de laboratorio a 37 C. el tamao de la espora es
aproximadamente 1 m. La cpsula es producida por cepas virulentas de Bacillus
anthracis cuando crecen en medios especiales incubados al 20% de CO 2. El material
capsular no es un polisacrido como en la mayora de las bacterias sino un polipptido.
El Bacillus anthracis forma esporas cuyo dimetro no excede al de la forma vegetativa,
se forman en mayor cantidad entre 32 a 35 C y slo en aerobiosis, no in vivo. Los
bacilos son grampositivos, inmviles, se tien fcilmente con colorantes de anilina. Las
colonias son irregulares, de estructura risada a las que se denomina cabeza de medusa
fcilmente visibles. En los medios de cultivo ricos en suero o en atmsfera con 20% de

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CO2, las colonias son de tipo liso, regulares. Las colonias de tipo rugoso estn formadas
por grmenes desprovistos de cpsula.

Bacillus Anthracis es una

bacteria patgena. Longitud
de 4-8 m y un espesor de 1
1.25 m.

La forma vegetativa se
observa como cadenas
largas de extremos cncavos
similar a una caa de Banb.

Las colonias son irregulares, de

estructura risada, lo que se
denomina cabeza de medusa
fcilmente visible.

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3. DESCRIPCION DEL AGENTE ETIOLOGICO: MORFOLOGIA Y

ESTRUCTURA

B. anthracis es un microorganismo grande (1 a 8 m) que se dispone de forma aislada o

en parejas de bacilos, o bien como cadenas largas en forma de serpentina. Aunque las
esporas se observan con facilidad en los cultivos de 2 o 3 das, no se pueden apreciar en
las muestras clnicas.
Es una bacteria Gram positiva, en forma de bastn de 2 a 11 mm, con lados paralelos y
extremos rectos o ligeramente cncavos, recubierta por una cpsula formada un
polmero del cido D-glutmico. Las clulas se asocian, protegidas por una envoltura
capsular de apariencia uniforme, formando diplobacilos, o en largas cadenas cuando
provienen de cultivos, y en parejas o cadenas de tres a cuatro cuando si se aslan a partir
de organismos infectados. Forman esporas de aspecto elipsoidal de 1 a 1.5 mm, ubicadas
en el centro sin producir deformaciones del cuerpo bacteria.

Imagen que muestra la

estructura del Bacillus
Anthracis que tiene forma
de serpentina o forma de
bastn. Tamao de 1 -

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4. MECANISMOS DE TRANSMISION

Los principales factores responsables de la virulencia de B. anthracis son la capsula, la

toxina de edema y la toxina letal. La capsula inhibe la fagocitosis de las clulas en fase
de replicacin. La actividad adenilciclasa de la toxina de edema origina la acumulacin
de lquidos caracterstica del carbunco.
La actividad de la metaloproteasa de cinc de la toxina letal estimula la liberacin de
factor de necrosis tumoral-(TNF-) e interleucina 1 (IL-1), as como otras citosinas
proinflamatorias, por parte de los m acrofagos. Esta toxina interviene, igualmente, en la
lisis de macrfagos en ciertos cultivos celulares. PA es la protena dotada de una mayor
inmunogenicidad (de donde proviene su nombre) de las principales protenas de B.
anthracis. Tanto LF como EF inhiben el sistema inmunitario del organismo anfitrin.

Una vez que las esporas han entrado al organismo por cualquiera de las vas ya descritas
(cutneas, orales o respiratorias), se depositan en la placa subcutnea, mucosa
gastrointestinal o espacios alveolares.
En la localizacin cutnea y gastrointestinal se produce germinacin de la bacteria en
pocas cantidades, pero que produce edema y necrosis local. Luego las esporas son
fagocitadas por los macrfagos y llevadas a los ganglios linfticos regionales. Dentro del
macrfago las esporas germinan y toman la forma vegetativa, produciendo una
linfadenitis hemorrgica regional.
Al ser liberadas empiezan a multiplicarse e invaden el torrente sanguneo. Cuando llegan
a una concentracin de 107 a 108 organismos por mL de sangre causan septicemia
masiva.

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En unos pocos casos, el ntrax sistmico lleva a una complicacin menngea por medio
de diseminacin linftica o hematgena. La linfadenitis hemorrgica peribronquial
puede bloquear el drenaje linftico y causar edema pulmonar. La muerte resulta de
septicemia, toxemia o complicaciones pulmonares y puede ocurrir de uno a siete das
despus de la exposicin.
Los principales factores de virulencia del Bacillus anthracis son:

El polipptido capsular
La toxina de ntrax.

La cpsula est compuesta por cido poli-D-glutmico que le confiere resistencia para la
fagocitosis. La toxina del ntrax est conformada por tres factores:

Factor edema
Factor letal
Antgeno protector.

ste ltimo es una protena de 83-kd y el papel que cumple este ltimo es el de adherirse
a la superficie de la clula y facilitar la entrada de los otros dos factores. Es as que, el
antgeno protector cuando se combina con el factor edema forma la toxina edema y
cuando se combina con el factor letal forma la toxina letal. Este es el principal factor de
virulencia del Bacillus anthracis y es la causa de muerte en los animales infectados.
Los factores de virulencia mencionados se encuentran codificados en dos plsmidos, el
pXO1 y el pXO2.

Causa tambin apoptosis y necrosis va protenas fosfatasas, produciendo la lisis del

macrfago en dos horas. Estimula al macrfago a liberar el factor de necrosis tumoral
alfa e interleukina-1, las cuales son parcialmente responsables de la muerte sbita en el
ntrax sistmico. Se cree que IL-1 y otros mediadores pro inflamatorios son
almacenados dentro del macrfago en los inicios de la infeccin por ntrax, cuando los
niveles de la toxina son menores que las concentraciones crticas requeridas para la lisis.

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Posteriormente, cuando la infeccin progresa y el nmero de bacterias se incrementa, el

umbral para lisis es alcanzado y grandes cantidades de mediadores preformados son
liberados a la circulacin. Esta rpida liberacin de mediadores inflamatorios puede
explicar la muerte sbita en los pacientes con ntrax.

Bacillus Anthracis: Mecanismo de Virulencia

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SINTESIS DE DESARROLLO ETIOPATOGENICO DEL

ANTRAX

5. PATOGENIA

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En las formas cutnea y digestiva, las esporas ingresan por algn epitelio (piel, mucosas)
y germinan en la sub mucosa dando origen en 2 a 5 das a la forma vegetativa, la cual
posee cpsula antifagocitaria y produce una exotoxina que es responsable de los
principales sntomas y signos del carbunco. Esta toxina est formada por tres
componentes, el antgeno protector (AP) que es responsable de la unin a los receptores
celulares, el factor edematgeno que posee actividad adenilciclasa y es responsable de la
reaccin edematosa y el factor letal llamado as por causar la muerte en animales de
experimentacin. La accin de esta toxina genera edema, hemorragia e incluso necrosis
tisular.
Desde la lesin inicial B. anthracis invade la va linftica y puede alcanzar la circulacin
general. En la forma pulmonar, las esporas inhaladas son ingeridas por los macrfagos
alveolares y transportadas por ellos a los ganglios linfticos mediastnicos o
traqueobronquiales donde pueden permanecer hasta 60 das antes de germinar. Con la
germinacin se producen localmente toxinas responsables de la hemorragia masiva, de
la mediastinitis y linfadenitis edematonecrtica caractersticas de esta presentacin. La
tpica bronconeumona no se produce.
Las manifestaciones de la enfermedad estn determinadas en primer lugar por el
compromiso local del rgano de entrada, que depende de la extensin de tejido afectado;
en segundo trmino el compromiso hemodinmico secundario a la liberacin de los
mediadores de la inflamacin y en tercer lugar la magnitud de la invasin de otros
rganos a travs de la va hematgena (pulmn, mediastino, meninges).

ntrax cutneo
El examen histolgico de la lesin cutnea muestra necrosis y edema masivo con
infiltrado linfocitario. No hay licuefaccin ni formacin de abscesos, indicando que las

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lesiones no son supurativas. Puntos focales de hemorragia son evidentes, con alguna
trombosis. La tincin de Gram revela bacilos en el tejido subcutneo.

ntrax inhalacional
Los hallazgos en monos Rhesus con esta forma de la enfermedad, en la microscopa de
luz consisten en edema, hemorragia y necrosis. La hemorragia fue vista en ganglios
mediastinales, mesentricos y traqueobronquiales, en las meninges, pulmones y serosa
del colon. La revisin de las 42 autopsias de los pacientes que fallecieron en el accidente
en la Unin Sovitica en 1979, confirman estas observaciones. Todos tuvieron
linfadenitis torcica hemorrgica y mediastinitis. El ntrax inhalacional no es
considerado usualmente causa de neumonitis o neumona; sin embargo, 11 de los casos
presentaron neumona necrotizante y hemorrgica focal. Tambin se encontr
leptomeningitis hemorrgica en 21 casos y lesiones gastrointestinales en 39 casos.
Edema es tambin un hallazgo significativo, incluyendo edema gelatinoso del
mediastino, derrame pleural, edema leptomenngeo y edema pulmonar.

ntrax gastrointestinal y orofarngeo

Los bacilos pueden ser observados microscpicamente en el tejido linftico de la
mucosa y submucosa y hay evidencia de linfadenitis mesentrica. Siempre es vista una
ulceracin, no estando claro si es por una infeccin bacteriana o es causada por la toxina
del ntrax. El examen microscpico de los tejidos afectados revela edema masivo y
necrosis de la mucosa en los sitios infectados. Se observa infiltrado inflamatorio que es
similar al observado en la forma cutnea. En el ntrax orofarngeo se observa edema

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cervical y linfadenopata local. Pueden ser vistas lesiones en la orofaringe y usualmente

tienen la apariencia de ulceraciones seudomembranosas.

6. MANIFESTACIONES CLINICAS
Las tres formas de manifestaciones clnicas de ntrax en humanos son:

La cutnea

Pulmonar

Gastrointestinal.

De las tres formas, las dos ltimas, pueden ser fatales, si no son tratadas oportunamente.
Ms de 95% de los casos de ntrax tiene manifestaciones cutneas. Antes del uso de
antibiticos y de la vacuna, de 10 a 20% de las formas cutneas evolucionaban a formas
fatales. Las formas gastrointestinales y pulmonares son las ms letales, porque no son
reconocidas oportunamente, lo que retrasa el tratamiento; sin embargo, evidencias
epidemiolgicas y serolgicas sugieren que formas gastrointestinales y pulmonares
leves, no diagnosticadas, pueden ocurrir y no son infrecuentes entre los expuestos. El
desarrollo de las meningitis es un riesgo potencial de las tres formas de ntrax.
El curso de la infeccin depende del sitio por el cual Bacillus anthracis ingresa al
organismo. As existen las formas: cutnea, gastrointestinal y respiratoria.

La forma clnica ms frecuente es el ntrax cutneo que ocurre en 95% de los casos,
localizado habitualmente en zonas descubiertas (manos, cabeza y piernas). El perodo de

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incubacin es de 1 a 12 das. En el lugar de la inoculacin hay prurito inicialmente,

luego aparece una lesin papular que se hace vesicular en 2 a 6 das, en forma de anillo,
con un exudado claro muy rico en bacilos. Poco a poco en el centro de la lesin se
observa una escara necrtica muy tpica (ntrax, carbunco, pstula maligna, "picada")
rodeada de edema de 1 a 3 cm con un halo violceo; en general es indolora y no hay
compromiso del estado general.

ntrax Cutneo
El perodo de incubacin puede oscilar entre nueve horas a 14 das, en promedio es de
dos a siete das. La evolucin es la siguiente:

Da 0: Entrada de la infeccin por Bacillus anthracis (usualmente esporas) a

travs de una lesin superficial (corte, abrasin, picadura de insectos, etc.).

Das 2-3: Aparece un pequeo grano o ppula.

Das 3-4: Un anillo de vesculas rodea a la ppula. El fluido vesicular puede

tener un exudado. Empieza a desarrollar marcado edema. A menos que exista una
infeccin secundaria no hay pus en la lesin y no hay dolor, aunque puede haber
dolor en ndulos linfticos satlites a la lesin.

Das 5-7: La ppula original se ulcera. El edema se extiende a mayor distancia de

la lesin. Las manifestaciones clnicas pueden ser ms graves, si las lesiones
estn ubicadas en la cara, el cuello o el pulmn. En estas formas ms graves se
puede evidenciar fiebre alta, adenopata regional dolorosa, edema extenso,
toxemia, shock y puede devenir la muerte.

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Da 10: La lesin empieza su resolucin, toma casi seis semanas, y no se acelera

por el tratamiento. Un pequeo nmero de pacientes que no recibe tratamiento
puede desarrollar ntrax sistmico con sintomatologa hiperaguda.

ntrax gastrointestinal
Ocurre luego de la ingestin de Bacillus anthracis con agua o alimentos contaminados.
Se pueden dar las siguientes formas:

ntrax intestinal: Los sntomas incluyen nuseas, vmito, fiebre, dolor

abdominal, diarrea con sangre y ascitis masiva. Si no hay tratamiento temprano
conlleva al desarrollo de toxemia y shock. Hay evidencias que casos leves no

diagnosticados se recuperan satisfactoriamente de la enfermedad.

ntrax orofarngeo: Las manifestaciones clnicas incluyen dolor de garganta,
disfagia, fiebre, linfadenopata regional del cuello y toxemia. Inclusive con
tratamiento la mortalidad es alrededor de 50%.

ntrax pulmonar
Los sntomas no son especficos y requieren de la sospecha de ntrax en razn al
conocimiento de la historia del paciente. La enfermedad tiene un inicio insidioso, con

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fiebre, malestar, fatiga, dolor torcico de uno a ms das. Esta fase inicial es seguida por
el desarrollo sbito de disnea, cianosis, desorientacin y muerte. La muerte ocurre
dentro de las 24 horas de la fase hiperaguda.
Esporas aerosolisadas de ntrax mayores a 5mm de tamao son depositadas en las vas
respiratorias altas (faringe, laringe y trquea) y pueden ser atrapadas y eliminadas
efectivamente por el sistema mucociliar.
Esporas ente 2 y 5 mm de tamao pueden llegar a los ductos alveolares y a los alvolos.
Estas esporas son captadas por macrfagos pulmonares y transportados a los ganglios
linfticos mediastinales e hiliares. Luego de un perodo de germinacin, una gran
cantidad de toxina es producida. A partir de estos ganglios la toxina es diseminada por la
circulacin sistmica, dando como resultado edema, necrosis y shock sptico que
conlleva al fallecimiento. Aunque el microorganismo es inicialmente transportado a los
ganglios mediastinales, un mayor lugar para su desarrollo es el mediastino. El edema y
toxina letal causan una mediastinitis hemorrgica, que es tpica del ntrax inhalacional.
La dosis inhalatoria mnima necesaria para causar infeccin en el humano no est bien
determinada.

Meningitis por ntrax

La meningitis por ntrax es una seria manifestacin que se desarrolla a partir de las otras
tres manifestaciones clnicas descritas. La tasa de letalidad es cercana al 100%. Se
observan signos de meningitis, con intensa inflamacin de las meninges, marcada
elevacin de la presin del lquido cefalorraqudeo (LCR) y la aparicin de sangre en
ste, seguido de compromiso de conciencia y muerte. En muy pocos casos, en los que se
sospecha de ntrax y se instaura tratamiento tempranamente, puede haber recuperacin.
El diagnstico diferencial incluye a otras etiologas bacterianas. El diagnstico definitivo
es obtenido por la visualizacin del bacilo capsulado en el LCR o en el cultivo.

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Sepsis por ntrax

La sepsis en el ntrax se desarrolla despus de la diseminacin del Bacillus anthracis por
va linftica y hematgena, a partir de una lesin primaria (cutnea, gastrointestinal o
pulmonar). Las manifestaciones clnicas son fiebre alta, toxemia y shock con la
consiguiente muerte en un perodo relativamente corto. En el diagnstico diferencial
debe ser considerada la sepsis por otras bacterias. El diagnstico definitivo es hecho
mediante el aislamiento bacteriano de la lesin primaria y de los hemocultivos.

7. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO MICROBIOLOGICO

Los procedimientos descritos son exclusivos para la bsqueda de Bacillus anthracis y su

diagnstico diferencial con otras bacterias. Si se sospecha otro tipo de agentes, se deben
utilizar medios y procedimientos adecuados para cada uno de ellos:
Se deben tomar las precauciones de bioseguridad descritas en el captulo
correspondiente, teniendo en cuenta que es una bacteria que se puede transmitir por
aerosoles y que se debe manejar en una cabina de seguridad biolgica.
Una de las caractersticas ms importantes de esta bacteria es la presencia de esporas
resistentes.

ntrax cutneo

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Vesculas: Realizar la asepsia de la piel alrededor de las vesculas, usando

alcohol al 70%. Embeber dos hisopos estriles secos en el fluido de las vesculas
a partir de una que est intacta. Colocar en un tubo seco estril. Realizar dos

extensiones en lminas portaobjetos.

Escaras: Realizar la asepsia de la piel alrededor de la escara con alcohol al 70%.
Rotar dos hisopos debajo del borde de la escara negra sin removerla. Colocar en
un tubo seco estril. Realizar dos extensiones en lminas portaobjetos.

ntrax gastrointestinal
Obtener una muestra de heces en lo posible. En fases tardas de la enfermedad, los
hemocultivos pueden ser positivos, sobre todo si se han tomado antes de la
administracin de antibiticos. ntrax por inhalacin.
Si hay presencia de sntomas respiratorios y el paciente puede expectorar, se debe
obtener una muestra de esputo para Gram y cultivo. En fases tardas de la enfermedad
(dos a ocho das postexposicin), los hemocultivos pueden ser positivos, sobre todo si se
han tomado antes de la administracin de antibiticos.
Utilizando hisopos con punta de dacrn, rayn u otro material sinttico, se obtienen
muestras de ambas fosas nasales, de la cara y de las manos.
Existen diversos mtodos de diagnstico para B. anthracis:

Cultivo
Este puede ser tomado de pus, sangre, tejidos o lquidos corporales, los que deben ser
teidos con tcnica de Gram para observar el bacilo. La cpsula B. anthracis puede ser
demostrada despus de incubacin en agar nutritivo con 0,7% de bicarbonato incubado
en 3% de CO2. Las colonias se observan mucoides y la cpsula puede visualizarse en
frotis teidos con McFadyean (azul de metileno policrmico) o India Ink.

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El medio de cultivo adecuado es agar sangre o nutritivo corriente. Las colonias son
blanco grisceas a blancas y no hemolticas. Las muestras de deposiciones deben ser
pre-tratadas con etanol al 95 o 100% durante 1 hora (igual volumen) o con calor a
62,5C por 15 minutos.

Identificacin del microorganismo en lquido vesicular, cultivos o biopsias:

Por inmunofluorescencia.

Tincin de Gram.

Frotis teido con McFadyean (azul de metileno policrmico) o India Ink.

Los cultivos positivos deben ser enviados al ISP para confirmacin. El envo debe
hacerse siguiendo las normas de bioseguridad nivel 2. En laboratorios en que se
desarrolla investigacin que involucra el trabajo con suspensiones de esporas o cultivos
a gran escala se recomienda bioseguridad nivel 3.
Serologa:
Se estudia la presencia de anticuerpos antitoxina mediante la tcnica de ELISA y/o
inmunoprecipitacin, requiriendo para confirmar la infeccin de dos muestras pareadas
lo que generalmente no es til para efectuar un diagnstico rpido. En Chile no existen
laboratorios que procesen muestras de suero para deteccin de anticuerpos en seres
humanos.
Deteccin de antgenos:
Deteccin de antgeno protectivo en sangre por inmunolec-trofresis de transblot
(EITB). Tambin se estn desarrollando pruebas para deteccin del factor letal y factor
de edema. Su utilidad sera en aquellos pacientes con sospecha de esta enfermedad, pero
con cultivos negativos.

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Productos animales o ambientales:

Se prepara una suspensin, se trata con etanol o calor y se siembra en agar sangre con
polimixina o agar PLET.
En el laboratorio las superficies deben decontaminarse con hipoclorito de sodio al 5% o
fenol al 5% (cido carblico); los equipos e instrumentos pueden ser esterilizados en
autoclave.

Bacillus Anthracis en la
sangre de un paciente
aquejado de carbunco por
inhalacin

Diagnstico de laboratorio

Aislamiento y confirmacin de B. anthracis de muestras recogidas de lugares

normalmente estriles (sangre, LCR) o de lesiones de tejidos afectados (piel, pulmn,
intestino). La recogida, procesado y transporte de muestras clnicas y ambientales se
detallan en los documentos anexos elaborados por el Centro Nacional de Microbiologa,
que a su vez funciona como Laboratorio de Referencia.

Pruebas serolgicas e inmunolgicas

Las principales protenas inmunognicas del Bacillus anthracis estn conformadas por
los antgenos capsulares y los componentes de las exotoxinas. La determinacin
mediante tcnicas de ELISA de un aumento de cuatro veces el valor de los anticuerpos
contra alguno de los componentes de los bacilos, es diagnstico de infeccin pasada o
vacunacin.
Los indicadores ms confiables para el diagnstico son los ttulos de anticuerpos contra
los antgenos protectores y a los componentes de la cpsula. En estudios realizados para

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GENERO BACILLUS

[BACILLUS ANTHRACIS]

determinar la sensibilidad diagnstica de la tcnica ELISA segn el antgeno de Bacillus

anthracis usado se encuentra una sensibilidad de 72% para los antgenos protectores, 95
a 100% para los antgenos de la cpsula, 42% para el factor letal y 26% para el factor de
edema. La hemaglutinacin indirecta brinda resultados similares a los obtenidos con
ELISA pero tiene ciertos lmites, incluyendo el tiempo de vida media de los antgenos
que son sensibilizados en preparaciones de glbulos rojos, limitada reproductibilidad de
la prueba y largos perodos requeridos para su preparacin.
Es posible realizar la deteccin inmunolgica de las exotoxinas en sangre durante
infeccin sistmica, cuando se dispone de anticuerpos para toxinas de ntrax, sin
embargo estas pruebas no son indicadas para realizar el diagnstico; aunque son de valor
epidemiolgico, stas tienen poco valor diagnstico en la enfermedad aguda. Durante
infecciones sistmicas, los anticuerpos dirigidos a las toxinas o los componentes
capsulares no pueden ser detectados hasta despus de iniciada la enfermedad, muchas
veces cuando es demasiado tarde para iniciar el tratamiento.
La prueba drmica-antraxina, desarrollada inicialmente por la Unin Sovitica, consiste
en la inyeccin subdrmica de un extracto qumico comercial de una cepa atenuada de
Bacillus anthracis el cual est disponible para el diagnstico de casos agudos y pasados.
En un estudio de pruebas drmicas se logr diagnosticar 82% de los casos entre uno y
tres das luego del inicio de los sntomas y en 99% de los casos hacia el final de la cuarta
semana. As esta prueba puede ser usada para el diagnstico de casos agudos y anlisis
retrospectivos de casos de ntrax.
8. TRATAMIENTO Y ESTRTEGIAS DE PREVENCIN

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[BACILLUS ANTHRACIS]

B. anthracis es susceptible a la penicilina, doxiciclina y ciprofloxacino, pero resistente a

sulfonamidas y cefalosporinas de amplio espectro. Dado que los genes que codifican la
resistencia frente a penicilina y doxiciclina se han transferido a B. Anthracis, las
recomendaciones actuales para el tratamiento de un paciente con sospecha de carbunco
por inhalacin es usar una combinacin de ciprofloxacino o doxiciclina con uno o dos
antibiticos adicionales (por ejemplo rifampicina, vancomicina, penicilina, imipenem,
clindamicina, claritromicina).
Las infecciones gastrointestinales se tratan de forma sintomtica. Las infecciones
oculares u otras enfermedades invasivas precisan la retirada de los cuerpos extraos y el
tratamiento con vancomicina, clindamicina, ciprofloxacino o gentamicina
La enfermedad gastrointestinal se previene mediante la preparacin adecuada de la
comida (por ejemplo los alimentos se deben consumir inmediatamente despus de su
preparacin o se deben refrigerar).

Tratamiento especfico
ntrax cutneo

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[BACILLUS ANTHRACIS]

El tratamiento de eleccin para el carbunco cutneo sigue siendo penicilina, la que

puede ser utilizada por va oral si la lesin no es severa. En este caso est indicada
penicilina V 200-500 mg (dosis peditricas: 20-25 mg/kg/da) 4 veces al da.
Frente a la presencia de sntomas sistmicos, edema extenso o lesiones ubicadas en
cabeza y cuello, el tratamiento debe ser endovenoso con penicilina G 8-12 millones de
unidades (dosis peditrica: 100.000-150.000 UI/kg/da,) durante 7 a 10 das.
Como alternativa en pacientes alrgicos se utilizan doxiciclina, eritromicina,
cloranfenicol o ciprofloxacina. El cultivo de lesiones cutneas se negativiza rpidamente
luego de iniciado el tratamiento. Aunque los tratamientos tempranos limitan el tamao
de la lesin, no alteran la evolucin caracterstica de sta.
La exresis de las lesiones est contraindicada. Las terapias tpicas no son efectivas. Se
han utilizado corticoides en casos de gran edema, pero su uso no est claramente
establecido. En caso de edema severo, especialmente en la regin de cabeza y cuello o
meningitis, se recomienda el uso de corticosteroides ya sea dexametasona, 0,75-0,90
mg/kg/da o prednisona 1-2 mg/kg/da.
La ropa y materiales en contacto con secreciones deben ser esterilizados en autoclave o
incinerados, los pacientes deben ser mantenidos en aislamiento de contacto debido a que
las lesiones cutneas son ricas en la forma vegetativa, aunque no se ha descrito el
contagio persona a persona.
Prevencin
El control de la enfermedad humana adquirida de forma natural exige el control de la
enfermedad animal, lo que implica la vacunacin del ganado en las regiones endmicas,
as como la incineracin o el enterramiento de los animales que hayan muerto por
carbunco. La erradicacin completa del carbunco es improbable puesto que las esporas
de los microorganismos pueden existir durante muchos aos en el suelo. Por otra parte,
tambin es improbable la eliminacin completa de las infecciones de carbunco debido a
la vigencia de la amenaza de infecciones de origen bioterrorista.

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Seguridad en laboratorio Nivel de contencin 3

Los principales riesgos son el contacto directo o indirecto de la piel con cultivos del
agente y superficies contaminadas, la inoculacin percutnea accidental y la inhalacin
de bioaerosoles infecciosos. Los especmenes o muestras ms peligrosas son: exudados
de heridas en la piel, sangre, orina y heces, pieles, pelo, lana, huesos, productos seos,
tejidos procedentes de animales infectados y muestras de suelo contaminado. Se
requieren las prcticas y la contencin de un nivel 3 de bioseguridad, incluidos los
laboratorios de experimentacin animal. Esto incluye el trabajo dentro de cabina de
seguridad biolgica, el uso de guantes impermeables y de ropa de trabajo, adems de la
gestin y eliminacin adecuada de residuos.

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