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Investigador principal:

CARLOS A. IREGUI CASTRO


DMV DVM.

Investigadores:
EDUARDO HERNNDEZ, M.V.
NGELA JIMNEZ, M.V.
ANDRS PULIDO, M.V.
ALBA LUC~AREY, M.V. MSC
JAlR COMAS, M.V
LUIS CARLOS PENA, M.V
MIGUEL RODR~GUEZ,M.V

UNIVERSIDAD

NACIONAL
DE COLOMBIA

liberto& Orden

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA


Y DE ZOOTECNIA
GRUPO DE FISIOPATOLOG~A
VETERINARIA

MINISTERIO DE
AGRICULTURA
Y DESARROLLO RURAL

lndice general
PRESENTACI~N
1. CALIDAD DE AGUAS
1.1 PARMETROSF~SICOS
1.2. PARMETROSQU~MICOS

1.3. CONTAMINACI~N
1.4. CORRECTIVOS A LA CALIDAD DEL AGUA
1.5. CANTIDAD DEL AGUA
2. NUTRICIN Y ALIMENTACIN
DE PECES
2.1. Exigencias nutricionales y niveles en dietas para
crecimiento

2.2. PARMETROSUTILIZADOSPARAMEDIRLOS
EFECTOS DE LAS DIETAS EN LOS PECES

2.3. ALIMENTACI~N
3. DISENOY CONSTRUCCIN DE ESTANQUES
3.1. S E L E C C I ~ DEL
N SITIO
3.2. DISENO
3.3. CONSTRUCCI~N
4. CONCEPTOS BSICOS DE SANIDAD PISC~COLA
5. PRINCIPIOSPARA LA TOMA Y ENVIO
DE MUESTRAS
PARAEL DIAGN~STICO
ICTIOPATOL~GICO
5.1. RECOMENDACIONES GENERALES
5.2. ENV~ODE MUESTRAS
6. CARACTER~STICAS
DEL MANEJO SANITARIO Y
PRODUCTIVO DE LA GRANJA MODELO DE TlLAPlA

CARACTER~STICAS
GENERALES
MANEJO DE REPRODUCTORES
COSECHA DE LARVAS
AMBIENTE ACUTICO
REVERSI~NSEXUAL
PRELEVANTE
ALIMENTO EN LA SANIDAD
EVALUACI~N
CL~NICA
MANEJO DE MORTALIDAD
CONCLUSIONES
7. OTRASTCNICAS EMPLEADASEN EL
DIAGN~STICOICTIOPATOL~GICO: CULTIVOS
CELULARES Y PCR
7.1 CULTIVOS CELULARES C O M O TCNICA DE
DIAGN~STICODE ENFERMEDADES
VIRALES
EN PECES.
7.2 TCNICA DE PCR (Reaccin en Cadena de
la Polimerasa)
BIBLIOGRAF~A

Este Manual de Sanidad Acucola es complementario al "Primer mapa


epidemiolgico de las lesiones y enfermedades de los peces en Colombia" publicados como resultado del proyecto de investigacin "Construccin de un mapa epidemiolgico de las principales entidades patolgicas presentes en diferentes regiones del pas y en las principales especies pisccolas productivas e inicio de las bases para su prevencin y
control" financiado por el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural.
Se trata de una recopilacin de gran parte de la informacin contenida
en cinco boletines publicados por nuestro grupo en el marco del proyecto "Sistematizacin y Caracterizacin Productiva y Sanitaria de Explotaciones Pisccolas de Pequeos Campesinos en los Departamentos de
Meta, Casanare, Cundinamarca, Huila y Tolima", financiado por
PRONATA, pero tambin es una ampliacin que recoge los resultados
posteriores a dicho proyecto, en la que se incluyen temas como: la forma
como se elaboraron los cultivos celulares primarios a partir de tejidos de
trucha arco iris, con el fin de establecer una tcnica de diagnstico para
enfermedades virales de peces en el pas.

Adicionalmente se ilustran los resultados de Biologa Molecular que hacen parte del estudio financiado por el Ministerio de Agricultura: se estableci la tcnica para diagnstico e investigacin de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para dos gneros de bacterias frecuentes en
casos de enfermedad en las distintas especies cultivadas en el pas, son
ellas: la Aeromonas hydrophila y el Flexibacter psycrophilum. Tambin
con los mismos fines, se estableci la tcnica de PCR para el Streptococcus
sp. hasta ahora aislado en el pas; pero adems, se complement tal

hecho con la identificacin de la especie hasta ahora actuante en nuestro medio, se trata del Streptococcus agolactiae.
Tambin se describen las caractersticas de maneio sanitario y productivo de una de las granjas modelo escogida dentro del marco del estudio.
Reiteramos nuestro principio de percepcin integral de la enfermedad,
para ello tenemos en cuenta desde la rentabilidad de las empresas
pisccolas, pasando por el debido cuidado ambiental hasta la entrega
final de protena de alta calidad, inocua para el consumidor final. En
consecuencia, la medicina que pretendemos practicar es eminentemente de poblaciones, con una aproximacin al diagnstico, la prevencin,
el control y el tratamiento de las patologas. Como se desprende del
contenido de este Manual y de las recomendaciones del "Primer Mapa",
el manejo de los problemas sanitarios acuticos lo hacemos poniendo
especial nfasis en el anlisis del entorno de los peces.

1 . CALlDAD DE AGUAS
La calidad del agua est dada por el conjunto de propiedades fsicas,
qumicas y su interaccin con los organismos vivos: microscpicos y
macroscpicos, estos ltimos pueden ser los peces pero tambin los camarones, etc.
Aunque parece obvio, un estanque con agua de buena calidad producir
ms que un estanque con mala calidad, sin embargo, es poco lo que hace
la mayora de piscicultores por mantener una buena calidad del agua.
En este documento se analizarn los ms importantes factores ambientales que afectan a la comunidad de un estanque y la forma de controlarlos para obtener los mejores rendimientos.
Existen tres grupos de componentes (elementos) que se pueden encontrar en cualquier agua, aunque en diferentes cantidades cada uno de
ellos segn el tipo de aguas: fsicos, qumicos y biolgicos (micro y
macroorganisrnos). Ellos no son completamente independientes el uno
del otro; por ejemplo: la cantidad de oxgeno (que es un componente
qumico), se considera el elemento ms importante de la calidad de un
agua, depende de la intensidad de la luz (variable fsica) y de la cantidad
y calidad de las plantas macro y microscpicas que hay en el agua. Otro
ejemplo es la cantidad de desechos (residuos) que resultan despus de
que los alimentos han sido utilizados por el pez: materia fecal, orina y
respiracin, estn relacionados con la densidad de los animales y el
manejo de la alimentacin.

Temperatura

(TO)

Los peces son ectotermos, esto quiere decir que no controlan su temperatura, su temperatura vara con la del agua, y la temperatura de sta va
a influir de manera notoria en su metabolismo, si el pez es cultivado en
aguas muy fras su metabolismo va a descender y su desarrollo ser ms
lento. Cada especie de pez requiere de una temperatura ptima para su
adecuado desarrollo, crecimiento y reproduccin, las especies de aguas
clidas se cran mejor a temperaturas superiores a 25C.

Luz

En el agua hay algas microscpicas, ellas son las productoras primarias


de materia orgnica por medio de la fotosntesis cuando reciben luz
solar, de ah el gran papel que juega el sol en los procesos biolgicos
dentro del agua.

Evaporacin
La evaporacin es un proceso que acta como regulador de la temperatura del agua, adems, iunto con la filtracin, son los causantes de la
disminucin del volumen del agua de un estanque.
La prdida de agua por evaporacin vara considerablemente de una regin a otra, con la poca del ao y con la presin atmosfrica (vara con la
altura sobre el nivel del mar). El viento ejerce un importante papel al causar
turbulencia del agua y aumenta de esta manera el rea de evaporacin.

Turbidez
La turbidez del agua est dada por el material en suspensin bien sea
mineral u orgnico; el grado de turbidez vara dependiendo de la naturaleza, tamao y cantidad del material que se encuentre flotando en el agua.
En acuicultura la turbidez originada por los microorganismos es necesaria. Entre ms microorganismos y minerales mayor la turbidez, ste
parmetro (variable) se puede medir mediante el denominado ((disco
secchin, el cual consiste en un disco de aproximadamente 30 cms. de
dimetro dividido en cuadrantes pintados en blanco y negro, est amarrado a una cuerda calibrada y tiene un peso, de tal manera que le
permite hundirse fcilmente en el agua. La visibilidad del disco secchi
rara vez excede de un metro en sistemas productivos para peces; para
determinar la visibilidad del disco secchi hay que permitir que descienda
hasta que desaparezca y anotar esta profundidad.
Contrario a la turbidez causada por los microorganismos, la cual es
benfica para los peces de un estanque, existe la turbidez causada por
partculas de arcilla en suspensin que actan como filtro de los rayos
solares y disminuyen la productividad primaria del estanque y por consiguiente disminuye la actividad fotosinttica del fitoplancton y la produccin de oxgeno.
Cuando el agua es reutilizada hay que tener especial cuidado con

la

materia en suspensin, que es originada en su mayor parte por los excrementos de los peces o por el alimento no consumido.

Color

El color del agua est dado por la interaccin entre la incidencia de la


luz y la impureza del agua; aguas incoloras en das soleados aparecen
azules.

El color del agua es alterado por los factores fsicos, qumicos y biolgicos, por ejemplo, la mayora de los florecimientos del fitoplancton tienden a dar una coloracin verde. Aguas con alto contenido de hierro,
tienden a ser rojizas. El color ms comn del agua est dado por el
material vegetal en descomposicin, el cual produce un color t o caf
claro muy caracterstico del agua con alto contenido de humus. Adems,
estas aguas por lo general son cidas.
El color en s no afecta a los peces, pero s restringe la penetracin de los
rayos solares y disminuye de esta manera la productividad del estanque.

Oxgeno disuelto
La funcin ms urgente que debe cumplir todo organismo vivo es la
respiracin. A travs de ella, tal organismo toma oxgeno y elimina dixido
de carbono. En piscicultura las aguas deben tener cantidades adecuadas de oxgeno. La cantidad aproximada de oxgeno disuelto para el
cultivo de peces debe ser mayor de 7ppm (7mg/L). Aunque los peces
pueden resistir cantidades de oxgeno disuelto de 5 ppm, es conveniente
no dejar que los niveles en el agua de salida sean inferiores de 6,5ppm.

Se debe tener presente que la cantidad de oxgeno disuelto en el agua


que entra en el estanque es mayor que la cantidad de oxgeno disuelto
en el agua de salida, pues parte de este oxgeno es consumido en la
respiracin de los peces, y parte en los procesos de descomposicin de
la materia orgnica y en la respiracin de los vegetales.

Fuentes de oxgeno. El oxgeno es disuelto en el agua por difusin


desde la atmsfera y por la fotosntesis. La difusin desde la atmsfera
se produce cuando se presentan vientos o por medios artificiales como
los aireadores. La creacin de turbulencia por medios artificiales
incremento el contacto entre el agua y el aire lo cual permite la captacin de oxgeno por parte del agua.
Todos los acuicultorestienen en cuenta la respiracin de los organismos de su
inters, lo cual trae un significativo impacto sobre el nivel de oxgeno disuelto
en el estanque, pero a menudo no tienen en cuenta que los otros organismos
presentes en los estanques tambin respiran y consumen oxgeno.
Durante el da, con la fotosntesis se produce oxgeno que es utilizado
por la demanda respiratoria de los animales, mientras que durante la
noche, tanto plantas como animales continan respirando sin que haya
nuevos aportes de oxgeno al agua (Figura 1).
La solubilidad del oxgeno en el agua (capacidad de disolverse en el
agua), depende principalmente de la temperatura, la presin atmosfrica y la salinidad. Se debe tener en cuenta que a mayor temperatura,
altitud y salinidad, menor solubilidad del oxgeno. A veces puede haber
mucha cantidad de oxgeno en el agua (sobresaturacin), esta se puede
deber a una alta productividad primaria de plantas en el estanque o por

Algunos efectos de la disminucin de oxgeno sobre los organismos de


un estanque:
Los peces generalmente no
se alimentan con niveles bajos de oxgeno, en estos ca-

g ia!

...

rT'

sos la mayora de las especies suben a la superficie del


agua a tomar oxgeno y se

observan constantemente
boqueando. Las bajas en el
nivel de oxgeno generalmente suceden durante las
pocas de altas temperatu~or*dJbl.

ras (poca seca). As mismo, el metabolismo de los


organismos en el estanque
se incrementa en esta po-

Figura 1.

ca y demandan ms oxgeno. Paradjicamente tambin corresponde a la


poca de mayor iluminacin solar, cuando se incrementa la fotosntesis y la
produccin de oxgeno, pero los volmenes de agua son menores.
Se puede aumentar el oxgeno agregando agua con un buen nivel de oxgeno o por aireacin. En el primero, es necesario que el agua caiga al estanque
por un salto ancho, de esta manera se ampla el rea de contacto y as se
captar ms oxgeno del aire. Por aireacin, el agua se bombea fuera del
estanque y se devuelve al mismo por aspersin. Otro mtodo es introduciendo aire por bombeo dentro del agua. Se recomienda efectuar la aireacin
solo cuando sea necesaria o cuando se advierta una real deficiencia de
oxgeno.

pH o Potencial de Hidrgeno.
El valor del pH nos indica si el agua es neutra, cida o bsica, y se expresa en
una escala que vara entre O y 14. Si el pH es 7 indica que es neutra, o sea que
no es ni cida ni bsica, es la ideal para la produccin de peces. Un agua con
pH por debajo de 7 es cida, y por encima de 7 es bsica, se admiten pequeas desviaciones del pH 7: entre 6.0 y 7.2. El valor del pH durante el da vara
mucho. Hacia las horas del medio da tiende a llegar al ptimo de 7, porque
hay bastante oxgeno producido por las plantas por la alta fotosntesis durante toda la maana, adems el CO, es bajo; a medida que transcurre la tarde
el pH se estabiliza pero apenas oscurece, las plantas y los peces continan
respirando pero no hay luz para la fotosntesis, entonces disminuye el oxgeno
y aumenta el CO,, el cual vuelve el agua cida (pH menos de 7). Los menores
valores se alcanzan a la madrugada, cuando vuelve a salir el sol.
Efecto del pH sobre los peces.
Cambios bruscos de pH como consecuencia del traslado de peces de un
estanque a otro con marcadas diferencias de pH pueden causar la muerte.
Las aguas cidas irritan las branquias de los peces, las cuales tienden
a cubrirse de moco llegando en algunos casos a su destruccin. En
aguas cidas ricas en hierro se produce un precipitado de hidrxido
frrico (un compuesto de hierro y agua) en las branquias de los peces,
stas adquieren un color marrn oscuro y pueden morir por asfixia.
Finalmente, el pH y la temperatura juegan un papel muy importante con
respecto al amonaco que es un producto muy txico, este ltimo en pH
cido se transforma en amonio forma ionizada, la cual no es txica. Lo

contrario ocurre en pH alcalinos y temperaturas altas, donde el amonio


se vuelve txico.
Compuestos nitrogenados.
Los compuestos nitrogenados tales como el amonaco y los nitritos tienen
carcter txico. Estos compuestos se originan como producto del metabolismo (la digestin, la respiracin, etc.) de los peces y dems organismos
acuticos y son liberados durante la descomposicin que hacen las bacterias sobre la materia orgnica animal o vegetal producto
de su metabolismo. Los dese-

Arnoniaco

Nitrito

Figura 2

chos nitrogenados son transformados de amonaco a nitratos (Figura 2).

El amonaco en el agua se presenta de dos formas: amonaco no ionizado


(NH,), que es txico, y el in amonio (NH;) que no es txico, a menos
que su concentracin sea demasiado alta.
Los niveles txicos del amonaco no ionizado para exposiciones de corta
duracin por lo general estn entre 0.6 y 2 mg/L. Los efectos subletales se
manifiestan en valores entre 0.1 y 0.3 mg/L. El pH y la temperatura regulan la proporcin de amonaco total que existe en la forma no ionizada.
Dixido de carbono (CO,)
El dixido de carbono es el gas que resulta de la respiracin de los
animales y de las plantas en su proceso de fotosntesis en ausencia de
energa radiante (luz solar).

El CO, tiene importancia en acuicultura debido a que tambin es esencial para la fotosntesis en presencia de la energa radiante e influye en
el pH del agua, porque cuando el dixido de carbono aumenta va a
formar cidos y esto hace que el pH disminuya, es decir, que el agua se
vuelva cida. Puede llegar a ser txico, aunque los peces pueden tolerar
concentraciones altas, siempre y cuando el nivel de oxgeno disuelto sea
alto. El dixido de carbono afecta a los distintos organismos disminuyendo la capacidad de la sangre para captar el oxgeno. En los peces, la
intoxicacin por CO, se reconoce porque primero presentan problemas
de equilibrio, luego signos de adormecimiento y disminucin de la frecuencia respiratoria, adems, los peces permanecen en la superficie.
La concentracin de CO, en el agua esta determinada por la respiracin
de los peces y las plantas, la fotosntesis y la descomposicin de la materia orgnica. Durante el da, a travs del proceso de fotosntesis, hay
consumo de CO, pero a su vez hay produccin por respiracin de los
organismos animales. En los estanques ricos en fitoplancton, el consumo
de COZ puede ser tan alto que su concentracin puede llegar a cero.
Durante la noche cesa la fotosntesis, no se consume ms COZ, pero
contina la respiracin de las plantas y los peces, y por consiguiente la
liberacin de COZal agua de modo que vuelve a subir su concentracin,
alcanzando el mnimo en las primeras horas de la tarde (3:OOpm a
4:OOpm) y el mximo en la noche (1 2 de la noche).
Alcalinidad total y dureza total
La alcalinidad corresponde a la concentracin total de bases (sustancias
alcalinas) en el agua expresada como mg/Lde carbonato de calcio (CUCO,)
y est representada por iones de carbonato y bicarbonato. La capacidad

amortiguadora del pH en el agua (para que esta no sea cida) est dada

117j

por la presencia de estos dos iones, lo que quiere decir que si una gran
cantidad de carbonato y bicarbonato est presente en el agua, el pH se
mantendr estable.
La dureza total se define como la concentracin de iones bsicamente
calcio (Ca) y magnesio (Mg), y se expresa en mg/L de carbonato de
calcio equivalente. Otros iones divalentes contribuyen a la dureza, pero
son menos importantes.

El agua se clasifica segn su dureza de acuerdo con la siguiente tabla


Tabla 1

- -

75
-

- 150

1SO-: 300

30[) o ms

--

--

Moderadamente dura

--

--

Dura

Muy dura

Para el cultivo de organismos acuticos, las meiores aguas con respecto


a estos dos parmetros (alcalinidad y dureza), son las que tienen valores
muy similares entre si. Si se presentan valores diferentes, tales como
alcalinidad mas alta que la dureza, el pH puede incrementarse a niveles
muy altos durante ~erodosde alta fotosntesis, ya que en la fotosntesis
hay consumo de dixido de carbono y esto hace que incremente el pH.
Los mejores niveles de alcalinidad total y dureza total para acuicultura
estn entre 20 y 300 mg/L. Si los valores de estos dos parmetros son
baios se pueden incrementar mediante encalamiento, pero si es lo contrario, no existe un mtodo prctico para bajarlos.

Aunque no es un parmetro propio de la calidad del agua, es importante enunciarlo debido a las graves consecuencias que ocasiona la contaminacin bien sea de origen industrial, agrcola o por pesticidas. Estos
ltimos son los ms frecuentes y pueden alcanzar los estanques va
escorrenta o por el viento. Los niveles de toxicidad aguda para muchos
insecticidas de uso comn estn en el orden de los 5 a los 10 microgramos
por litro, concentraciones mucho ms baias pueden ser txicas luego de
una exposicin prolongada. Aun cuando los peces no mueran, se pueden producir daos irreversibles a largo plazo a las poblaciones de peces de medios contaminados con pesticidas. Adems, se puede afectar
la cadena trfica (alimenticia) del estanque y por consiguiente el crecimiento de los peces. Finalmente, estos txicos van a ingresar a la cadena
alimenticia del humano, con graves repercusiones para la salud y, evidentemente, para la buena imagen de la piscicultura.

Es importante cuando se va ha escoger el terreno para el establecimiento de un proyecto de acuicultura, verificar que la cuenca que va abastecer los estanques est libre de contaminacin.

1.4. CORRECTlVOS A LA CALlDAD DEL AGUA


Remocin de CO,

El CO, puede removerse del agua mediante la aplicacin de hidrxido


de calcio Ca (OH),, el cual se aplica a razn de 1.68 mg/L por cada mg/

L de CO, a eliminar. Su aplicacin debe efectuarse con cuidado debido a


que incrementa el pH del agua.

Alcalinidad
Las aguas con niveles bajos de alcalinidad son poco productivas debido
a la poca presencia de dixido de carbono y de bicarbonato. Adems,
aguas de alcalinidad baja generalmente son fuertemente cidas y no
presentan condiciones adecuadas para que vivan los organismos acuticos. De otro lado, el fondo de los estanques de baja alcalinidad es
cido y permite que el lodo absorba el fsforo de los fertilizantes y no
estara disponible para la productividad primaria.
Por consiguiente, la adicin de cal a estanques de baia alcalinidad
incrementa el pH del agua, facilita la solubilidad del fsforo hacindolo
disponible para la productividad primaria, e incrernenta el CO, disponible para la fotosntesis.
La cantidad de cal a suministrar a un estanque debe estar de acuerdo a la
alcalinidad total, si est por encima de 20 mg/L no es necesario encalar,

si est por debajo de este valor se recomienda utilizar cal agrcola a una
cantidad de 200 a 400 g por metro cuadrado. Adems es una prctica
que se hace cuando se va a abonar para facilitar la disolucin del fsforo.
En estanques donde los peces van a depender nicamente del alimento
concentrado no es necesario encalar, ya que stos no van a necesitar
aguas productivas que les suministren el alimento natural.
La aplicacin de cal es ms prctica hacerla cuando el estanque est
desocupado, pero se puede hacer con el estanque lleno.
La cal apagada Ca (OH), y la cal viva son meiores neutralizantes que la cal
agrcola; sin embargo, su aplicacin en grandes cantidades incrementa el
pH y se recomienda para eliminar peces despus de drenar los estanques.

Disminucin de la turbidez
Como ya se vio, el principal causante de la turbidez es la arcilla en
suspensin la cual limita la penetracin de los rayos solares y por consiguiente la fotosntesis y la productividad de un estanque.
La turbidez se puede controlar por varios mtodos. El ms usual es la
aplicacin de alumbre (sulfato de aluminio, Al, (S0,),.14H20),

el cual

hace que las partculas de arcilla floculen y se precipiten al fondo. Se


recomienda aplicar alumbre a razn de 35 - 40 mg/L.

Cuando se

aplica este compuesto hay que tener en cuenta que se produce una
reaccin cida que disminuye el pH y afecta la alcalinidad, por consiguiente en alcalinidades menores de 20 mg/L es necesario encalar.
Otro mtodo es aplicar paja seca a razn de 2.000

4.000 kg/Ha o

estircol de vacuno a razn de 2.000 kg/Ha. Este tratamiento se demora


en mostrar resultados y puede durar varias semanas.
Oxgeno disuelto
Por lo general, cuando el CO, es alto, el nivel de oxgeno es muy bajo. Los
mtodos ms efectivos son la aireacin mediante sistemas mecnicos bien sea
aireador de paleta o propela. Esto, sin embargo, demanda costos de energa.

1.5. CANTlDAD DEL AGUA


La cantidad del agua nos indica la proporcin de peces que podemos
sostener, sin dejar de pensar en su calidad. Se debe disponer de un
caudal mnimo, con base en el cual se ajustar la produccin, cantidad
de peces y tamao de los estanques.

Aforo: se debe realizar en pocas de poco caudal, para determinar la


mxima capacidad de carga durante esa poca.
Mtodo de aforo: se utiliza un flotador. En la quebrada o ro se elige un
tramo recto de seccin longitudinal aproximadamente constante y tan
regular como sea posible, se mide una longitud (L) de ms o menos 10
m., sealando los dos extremos con estacas.
Del primer extremo parte el flotador, se registra el tiempo por cronmetro del momento de paso por el segundo extremo
Conociendo la longitud y el tiempo en segundos, se tiene la velocidad
superficial.

Vs= velocidad superficial. L= longitud (10 mts). t= tiempo en segundos que dura el flotador en llegar de un extremo al otro

Velocidad media. Vm =

C x Vs

C = Coeficiente de correccin, el cual depende de la naturaleza de las


paredes del cauce y de la profundidad media de ste, es una constante
con un valor medio de 0.8
Entonces el caudal ser: Q = S x Vm. Donde S = altura del agua x
ancho del cauce y Q =caudal

El objetivo de acceder a un programa controlado de nutricin y alimentacin es conseguir un rpido aumento de peso de los animales en el menor
tiempo posible y con los menores costos, cubriendo las necesidades
metablicas de todos los animales, teniendo en cuenta los requerimientos
especficos de alimentos, el alimento natural disponible y el suministrado.
Existe variada gama de hbitos alimenticios entre las especies cticas
presentes en nuestro medio, lo cual reviste gran importancia al momento de elegir el o los alimentos a suministrar. De acuerdo a las preferencias alimenticias, se ha propuesto clasificar los peces segn sus hbitos
en los siguientes grupos:
m

Carnvoros: tienen predileccin por organismos vivos, variando desde


organismos planctnicos hasta pequeos mamferos. Requieren alto
porcentaje de protena en la dieta.

Herbvoros: prefieren alimentos vegetales ricos en fibra y baios en


protena y energa.

Omnvoros: hay predileccin alimenticia variable segn la disponibilidad de alimento, especialmente frutos y semillas.

Planctfagos o filtradores: consumen fito y zooplancton, filtrndolo


del agua y concentrndolo por medio de las branquiespinas.

Detrvoros: consumen detritus orgnicos del fondo del estanque.

2.1. EXlGENClAS NUTRlClONALES Y NlVELES EN DIETAS PARA CREClMlENTO


A medida que las explotaciones pisccolas crecen, se hace necesario
meiorar la rentabilidad de las mismas en cuanto a mayor productividad
a menores costos. Para que el desarrollo de los peces sea efectivo, debe

considerarse, de un lado, los requerimientos nutricionales de las especies


cultivadas en cuanto a energa, protenas, Ipidos, vitaminas y minerales, y
de otro, la disponibilidad de las materias primas, su costo y su digestibilidad.

Protena

Es el componente dietario de ms importancia, debido a que es el constituyente bsico de las clulas, es fuente de energa y es fundamental
para el crecimiento de los peces. Como ingrediente es el componente
ms costoso.
Adems de la cantidad de protena es importante su calidad, sta depende de su composicin de aminocidos, que son las subunidades constituyentes de la protena. Existen dos tipos de aminocidos, los esenciales, que el pez debe tomarlos en la dieta ya que no los puede producir, y
los no esenciales, que el pez los puede producir. De este modo, una
dieta rica en aminocidos esenciales es de meior calidad que una dieta
muy rica en protena pero deficiente en estos aminocidos.
Altos niveles de protena en la dieta, aun tratndose de protena rica en
aminocidos esenciales, superiores a los requerimientos para una especie en particular, son inconvenientes en razones de costos y por eficiencia
en el aprovechamiento, adems, los desechos resultantes del metabolismo de la protena causan problemas de contaminacin de las aguas.
Niveles de protena por encima del ptimo en la dieta de peces, disminuyen significativamente la conversin alimenticia en la dieta, posiblemente debido a un desvo de la protena en la produccin de energa
por excrecin de los aminocidos absorbidos en exceso.

La tilapia alcanza la tasa mxima de crecimiento cuando es alimentada


con dietas bajas en protena bruta (PB), que es la protena total contenida en la dieta (menos de 30%), mientras que un 31,6% es un nivel ptimo para el crecimiento de juveniles de cachama blanca.

Lpidos
Son necesarios como fuente de energa y de cidos grasos esenciales.
Existen cidos grasos que el pez no los sintetiza y por lo tanto se constituyen, al igual que la protena, en elementos vitales en la dieta.
La funcin principal de los cidos grasos es ser la mayor fuente de energa para el msculo de los peces, adems son importantes en la formacin de las membranas de todas las clulas del organismo.
Aunque los Ipidos son nutrientes de bajo costo en las dietas, los altos
niveles en las dietas causan problemas durante el proceso de peletizacin
de los concentrados y producen rancidez durante el almacenamiento,
con lo que inducen disminucin en el consumo de alimento, adems, los
lipidos producen efectos adversos sobre las canales, por exceso de deposicin de grasas.
Para tilapias se considera que un 12% de Ipidos en la dieta genera un
mximo crecimiento, mientras que para juveniles de cachama blanca
se estima que un 4% de grasas con una combinacin de carbohidratos
del 20 al 36%, genera un ptimo crecimiento.

Carbohidratos
No se conoce cules son sus requerimientos en la dieta de peces, pero si
no estn presentes, se catabolizan (destruyen)protenas, aminocidos o
cidos grasos esenciales para producir energa, por lo que se cree que
los carbohidratos se requieren para aumentar la eficiencia en el uso de
la protena, as como para disminuir la excrecin de nitrgeno del
catabolismo (destruccin) de los aminocidos y de este modo evitar la
contaminacin del agua.
Los carbohidratos por lo tanto son necesarios como una fuente energtica econmica y aumentan la palatabilidad de los alimentos. En general su nivel vara con las especies, su proporcin puede oscilar entre 3040% para omnvoros y entre 10-20% para carnvoros. En cachama blanca
se usan niveles hasta del 36%.
Los peces omnvoros asimilan mejor los carbohidratos que los carnvoros, en estos ltimos altos niveles de carbohidratos disminuyen el crecimiento y se acumulan en el hgado, pudiendo llegar a causar la muerte.
La celulosa no tiene valor energtico para los peces y por eso un exceso
en la dieta puede tener un efecto negativo.

Energa
Los peces deben recibir raciones que satisfagan sus necesidades energticas adecuadamente, las cuales son encaminadas a mantener el
metabolismo bsico, crecimiento, reproduccin, etc. Desde el punto
de vista energtico, los peces son ms eficientes que los organismos de
sangre caliente, ya que no gastan energa para termorregulacin (man-

tener la temperatura corporal alrededor de 37C en mamferos),excretan


los residuos nitrogenados en forma de amonio por difusin bronquial,
sin gastar energa convirtindolos en cido rico o rea, para ser eliminados por va renal como los animales terrestres, adems, el desplazamiento por nado de los animales en el agua hace que el gasto de
energa sea menor que en organismos terrestres.
La energa debe tener un nivel ptimo para el pez, un exceso causa
disminucin en la ingesta de alimento y acmulo de grasa corporal,
mientras que un defecto hace que se utilice la protena como fuente de
energa y se desaproveche para el crecimiento.
La energa digestible (ED) corresponde a la parte de la energa, del total
contenida en el alimento (energa bruta, EB), que es absorbida por el
organismo. La ED de una racin generalmente es mayor cuando la
partcula del alimento es ms fina despus de la molienda, y un alimento estrudizado causa una mayor desintegracin de las partculas que un
alimento peletizado, por lo tanto en este ltimo la ED es menor.
Se deben tener en cuenta los siguientes factores en el requerimiento
energtico:

A temperaturas altas del agua, los requerimientos energticos son


mayores, puesto que el metabolismo de los peces es ms alto.
Animales ms pequeos requieren proporcionalmente ms energa

que los de mayor tamao.


Los requerimientos energticos aumentan durante la reproduccin.

La mala calidad de agua y factores estresantes aumentan los re-

querimientos energticos para el mantenimiento.

Relacin protena/energa en las dietas


Para que un pez alcance su mximo crecimiento, el ritmo de deposicin
de protena en la musculatura debe ser alto, esto se logra cuando las
dietas tienen energa y protena de alta digestibilidad, en niveles y proporciones adecuadas.
En general, se sabe que una relacin protena/energa (mg PB/kCal)
para tilapia niltica es de 103, para tilapia roja es de 93,8, carpa comn
es de 108 y trucha arco iris es de 105.
Minera les
Cumplen funciones en el pez como la formacin de huesos y dientes,
metabolismo energtico, y otra serie de funciones vitales para los animales como: la formacin de sangre, funcionamiento del sistema nervioso, etc.
Se subdividen en dos: los macrominerales, que se necesitan en cantidades altas y son el calcio, magnesio, potasio, cloro y sodio y los
microminerales, que son exigidos en bajas cantidades como el hierro,
manganeso, zinc, cobre, yodo y selenio.
En general, las dietas poseen una adecuada concentracin de estos
nutrientes que permiten el buen funcionamiento orgnico de los peces.
Vitaminas

Se requieren las mismas vitaminas que en mamferos, y actan como


componentes en muchas reacciones qumicas en el metabolismo de los

peces y son importantes para el crecimiento, la reproduccin y la salud de


los peces. Normalmente las raciones comerciales al momento de ser
preparadas deben ser suplementadas con vitaminas para que contengan
las concentraciones adecuadas para una buena nutricin de los peces.

2.2. PARAMETROSUTILIZADOSPARA MEDIR LOS EFECTOS DE LAS

DIETAS EN LOS PECES


Tasa de conversin de alimento TCA: Se obtiene determinando el
alimento consumido en gramos (g), el cual se divide aritmticamente
por la ganancia de peso vivo en gramos (g). Este valor indica cunto alimento se ha suministrado para cada unidad de peso ganado.

Tasa especfica de crecimiento TEC: Se calcula restndole el logaritmo


natural del peso inicial del pez al logaritmo natural del peso final en
un determinado periodo de tiempo dado en das, el logaritmo natural se determina en una calculadora de funciones con la tecla "ln". El
resultado de la resta se divide por el nmero de das evaluados, es
decir, desde el da en que se tom el peso inicial hasta el da que se
calcul el peso final del pez y el resultado de esta divisin se rnultiplica por 100. Este valor estima la tasa de crecimiento diario o ganancia media de peso por da.

Eficiencia de utilizacin de protena EUP: Se determina dividiendo


aritmticamente la ganancia de peso vivo del pez (g) por los gramos
de protena total consumida por el pez para ganar dicho peso, los
gramos de protena se obtienen calculando el total de la comida consumida por el pez y se multiplica por el porcentaje de protena de la
dieta, as por ejemplo, si se suministra un concentrado de 45% de
protena, y el pez ha consumido 300 g de concentrado durante el

tiempo calculado, entonces 300 g x 0.45= 135 g, que indica la protena total consumida por el pez. La EUP indica cunto se ha ganado
en peso vivo por unidad de protena consumida.

En los ambientes naturales los peces suplen sus necesidades alimenticias


de las fuentes presentes en el medio, por ejemplo: fitoplancton,
zooplancton, etc., fuentes que les proporcionan los niveles de energa,
protena, vitaminas y minerales necesarios para sus exigencias
nutricionales.
Los tipos de alimentos que consume un pez pueden cambiar a medida
que crece; es especialmente notorio el consumo de alimentos de tipo
natural como zooplancton y fitoplandon por la mayora de especies de
peces durante las primeras semanas de vida, razn por la cual reviste
especial importancia la prctica de abonar los estanques antes y/o durante las primeras semanas del cultivo. A medida que aumenta la biomasa
(el peso vivo de los animales) del estanque, la disponibilidad de este tipo
de alimento disminuye y se hace necesario suministrar alimento exgeno
(concentrado o suplemento) para satisfacer las necesidades nutricionales.
Mtodos de alimentacin
Alimento natural. Los individuos sometidos a este rgimen alimenticio,
basan su crecimiento en el consumo de organismos vivos y/o plantas
habitantes normales del agua. En este tipo de alimentacin es importante tener en cuenta que el crecimiento de los animales va a depender de
la productividad de la fuente de agua y de la densidad de siembra, a

mayor densidad disminuye proporcionalmente la cantidad de alimento


disponible y por consiguiente el crecimiento. Si se desea incrementar la
cantidad de alimento natural disponible en la fuente de agua, se pueden
utilizar compuestos orgnicos y/o inorgnicos denominados fertilizantes, los cuales al actuar como fuente de nutrientes para las poblaciones
animales y vegetales microscpicos, contribuirn a aumentar el alimento disponible para los peces.
En acuicultura se utiliza principalmente el fertilizante inorgnico NPK (nitrgeno, fsforo, potasio) en sus distintas presentaciones; cumple la funcin de estimular el crecimiento de los organismos autotrofos (organismos que son capaces de elaborar su propio alimento, como las plantas)
presentes en el medio, tambin se emplean los fertilizantes orgnicos
como los excrementos animales, desechos vegetales, humus, etc, stos
estimulan el crecimiento de organismos heterotrofos (bacterias y
protozoarios).
Alimento suplementario. Usualmente se recurre a este tipo de alimentacin cuando aun con fertilizacin, el alimento natural no es suficiente
para un adecuado crecimiento de los animales. En este tipo de alimentacin, los requerimientos alimenticios son suplidos por la combinacin de
alimento natural y subproductos animales o vegetales dispuestos en grnulos o pellets.
Alimentacin completa. A diferencia de las anteriores estrategias, se
basa en el suministro externo de alimento de alta calidad nutricional y
con una composicin balanceada, este alimento se suministra seco,
extrudizado o en forma de pellet (estas dos ltimas formas se refieren a
presentaciones del alimento concentrado, las cuales les permiten mayores tiempos de flotacin). Esta forma de alimentacin permite un correc-

to desempeo de los animales en condiciones de altas densidades de siembra y aunque no se prescinde del alimento natural, se asume que el aporte
de ste al crecimiento de los animales es casi nulo. Se presume que este tipo
de alimento balanceado contiene los nutrientes apropiados para cada especie.
Al establecer un plan de alimentacin, se deben tener en cuenta los siguientes criterios con el objeto de obtener un correcto aprovechamiento del alimento suministrado:
Comportamiento alimenticio y capacidad digestiva de las especies de
peces cultivadas: es importante conocer los hbitos alimenticios y dietas
de origen natural, rapidez y lugar (superficie, zona media de la columna de agua "pelgico" o fondo) con que consumen el alimento.
Los anteriores factores sumados al tipo de unidad productiva que se
est manejando (estanque en tierra, cemento o jaula), determinarn

si el alimento a utilizar deba ser flotante, tener poca flotacin o irse al


fondo rpidamente.
Exigencias nutricionales: cada especie tiene diversas exigencias
nutricionales, por lo cual es importante conocer los requerimientos
especficos de elementos como protena bruta, aminocidos esenciales (AAE), cidos grasos esenciales (AGE),vitaminas, minerales y energa para la(s) especie(s) de trabajo, estos generalmente se encuentran en tablas o trabaios cientficos hechos con las especies ms comerciales, en caso de no hallarse los datos para la especie con la
cual se esta laborando, pueden utilizarse los de la especie ms cercana filogenticamente.
Fase de desarrollo: cada fase tiene unas exigencias nutricionales diferentes: postlarvas, alevinos, peces en crecimiento, reproductores.

Disponibilidad de alimento natural y nivel de produccin que se desea: es importante observar esta variable al momento de planear la
cosecha pues una buena evaluacin del sistema productivo permite
establecer un indicativo de la necesidad de formular raciones completas o suplementarias.

Es importante tambin tener en cuenta un especial cuidado en cuanto al


manejo del alimento, para lo cual es aconsejable prestar atencin a los
siguientes tpicos:
Evaluacin inicial de la calidad de los concentrados: se debe observar la fecha de fabricacin y periodo de validez; aspectos fsicos de la
racin (compactacin, tamao grnulos que componen el pellet, uniformidad de los grnulos o pellets, dimetro de los mismos, etc.).
Almacenamiento de los concentrados: es ideal almacenarlos sobre
estibas de madera, en sitios secos, ventilados, protegidos del sol directo, insectos y roedores. No debe almacenarse por ms de 3 meses, lo ideal es consumirlo antes de 30 das.
Ajuste del tamao de grano: este debe estar de acuerdo a la especie
y el tamao de los peces y debe examinarse con cierta frecuencia.

Niveles y frecuencia de alimentacin. Existen mltiples factores que


determinan el nivel y frecuencia de alimentacin: especie cultivada,
tamao y edad, temperatura del agua, oxgeno disuelto, etc. En condiciones ideales de temperatura y parmetros del agua, se han establecido las siguientes frecuencias y proporciones de alimentacin segn el tamao de los peces: (Tabla 2)

Tabla 2.
Nmero suministro
alimento / dia

Proporcin alimento a
suministrar segn % peso vivo
determinado al muestre0
(biomasa)
-

Fase desarrollo

15

20

Alevinos recrla

Es importante tomar muestras del estanque por lo menos una vez al


mes para recalcular su biomasa; brevemente: se toma aproximadamente el 5% de la poblacin y se establece el peso total, luego se
divide entre el nmero de animales tomados y este es el peso individual, cuando se multiplica este dato por el nmero estimado de animales sembrados, obtenemos la biomasa total.
Horario y sitio de alimentacin: se recomienda que los peces sean
alimentados en horarios en que la temperatura del agua sea aceptable (se encuentre entre los rangos de supervivencia) para la especie
seleccionada y exista una concentracin de oxgeno alta (> 5 mg/L).
Se debe suministrar en sitios de fcil acceso para los peces, libres de
objetos que impidan su movimiento.

3. DISENO Y CONSTRUCC~ONDE ESTANQUES


Jorge Enrique Crdoba Pea - Acuicultor.
Podramos definir un estanque como un cuerpo de agua generalmente de
pequeo tamao, construido por el ser humano, para fines acuiculturales.
Un estanque esta constituido por: la cubeta o espacio contenedor del
agua, los diques o muros que lo limitan en su contorno y el fondo. Esta
dotado adems de una o varias entradas controladas de agua, as como
de salidas que permiten su drenaje.

3.1. SELECCINDEL S1770


Para la construccin de un estanque debemos tener en cuenta varios
factores en el momento de elegir el sitio de construccin:
Agua.
Suelo.

= Topografa
Localizacin.
Agua.
Agua -cantidad.

Desde el punto de vista del agua para la construccin

de estanques, varios factores son determinantes. El suministro de agua


debe ser regular, es decir que haya disponibilidad del recurso durante
todo el ao. El volumen disponible deber permitir el llenado del estanque, el mantenimiento de los niveles y los recambios necesarios programados por manejo o en emergencia. Un caudal mnimo de 4 L/.seg/
Ha. es recomendado para el cultivo de peces de aguas clidas.

Un factor de creciente importancia son las normas que sobre el uso del
agua se han dictado, ellas regulan y condicionan el uso, el volumen, las
caractersticas de los vertimientos y en gran parte el costo del agua para
un cultivo de peces.

Agua -costo. Varios son los factores que determinan el costo del suministro de agua a los estanques. El tipo y diseo de la toma de agua, el
sistema de conduccin, pero en particular si el sistema utiliza aguas suministradas por gravedad o por el contrario si son bombeadas.
Otro aspecto dentro del costo a tener en cuenta son las tasas retributivas
por el uso del agua, las cuales son proporcionales al volumen utilizado.
Estas tasas estn controladas regionalmente por las Corporaciones Autnomas y por los Distritos de Riego en los sitios donde se les ha delegado esta responsabilidad.

Suelo
Los suelos se caracterizan por varias propiedades entre las cuales mencionaremos: Permeabilidad y Textura por su importancia para la retencin del agua adems de Plasticidad y Compactacin por su importancia desde el punto de vista constructivo.
La permeabilidad de un suelo la determina el contenido de arcillas del
mismo, suelos con contenidos menores al 20% de arcillas no son aconsejables para la construccin de estanques ya que deben ser tratados
para evitar las prdidas de agua, lo cual es costoso. Texturas de suelo
arcillosas o arcillo-limosas son las ms aconsejables para la cra de peces ya que minimizan las perdidas de agua por filtracin.

Son muy importantes los usos anteriores que se le hayan dado al suelo ya
que aplicaciones de pesticidas e insecticidas as como vertimientos de
parasiticidas, pueden generar concentraciones letales de sustancias qumicas que pondran en peligro nuestra inversin. Se recomienda la toma de
muestras de suelo para anlisis en laboratorio para determinar la residualidad
de sustancias txicas, particularmente DDT, organoclorados y fosforados.
Topografa
La topografa, que describe la forma del terreno, es un factor decisivo en
el diseo del estanque, actuando en muchas ocasiones como variable
limitante en el tamao y forma del mismo.

Es la topografa la que determina la cantidad de tierra a mover, siendo


este el factor de mayor costo en la construccin del estanque. La construccin en terrenos planos requiere de menos movimiento de tierra.
La seleccin de terrenos que no se inunden en los periodos de lluvia y que
sean drenables por gravedad son dos aspectos bsicos a evaluar desde el
punto de vista de la topografa del sitio. Idealmente el terreno debe ser
relativamente plano con una pendiente que permita el suministro de agua
por gravedad y el drenaje del estanque. Si el suministro de agua debe
realizarse por bombeo el cabezal hidrulico debe ser mnimo.
Localizacin
Algunos aspectos relacionados con la ubicacin del sitio pueden pesar a
favor o en contra de la seleccin del mismo para la construccin de
estanques, ya que pueden representar ventajas competitivas para el desarrollo de la actividad diaria. Entre stas tenemos:

Proximidad a Mercados
Proximidad a rutas de transporte
Proximidad a centros poblados
Disponibilidad de Energa
Acceso a personal capacitado.
Contacto con personas vinculadas al sector en el rea.

En el diseo de los estanques se deben abordar los siguientes aspectos:


Tamao
Forma
Profundidad
Ancho de muros
Borde Libre
Pendiente de Muros
Pendiente de Fondo
Drenajes
Orientacin
Las caractersticas citadas dependen de varios aspectos relacionados con
la biologa de la especie a cultivar, el estadio de desarrollo en que se
encuentre, el tamao de la explotacin y la topografa del terreno.
Regularmente la forma de estanque mas usada es la rectangular donde el
largo es 2 a 4 veces el ancho, esta forma permite normalmente un buen
flujo de agua a travs del estanque, cuando la medida del largo es mayor
a 5 veces el ancho, estamos hablando de canales, los cuales permiten un
buen fluio de agua, pero son ms exigentes en el movimiento de tierra.

La profundidad del estanque (P) para el engorde de especies de aguas


clidas no debe ser menor a setenta centmetros, para evitar la presencia de plantas acuticas y el crecimiento de malezas cerca de los orillales.
Profundidades entre 1-3 metros son aconsejables para la mayora de las
especies de aguas clidas.
La altura de los diques (H) esta complementada con lo que se denomina
Borde Libre (BL), que corresponde a la distancia vertical entre el nivel mximo
de llenado y la altura de la corona del dique, este valor no debe ser inferior a

0,3 m para prevenir el desborde de aguas en pocas de lluvias intensas o por


algn descuido en el control de aguas de ingreso al estanque.
El ancho de la corona del muro (A) depender del uso programado para la misma, el
ancho mnimo recomendado es de 2 metros
y 4 metros si se va a transitar sobre el muro.

P
La pendiente de los muros tanto interiores
como exteriores debern tener una rela2-3H
Fgiura 3.

cin 2- 4: 1 respecto a la altura para evitar


la erosin de 10s mismos.
El fondo de los estanques no debe ser plano, una pendiente del 2-10%es recomendada para facilitar el drenaje y las labores de mantenimiento de fondos.
Los drenajes de los estanques para el cultivo de peces deben ubicarse en
el punto mas bajo de tal manera que este pueda ser drenado totalmente. El tamao del drenaje depende del tamao del estanque y deber
permitir la evacuacin en el tiempo adecuado segn la labor programada, ya sea un traslado o una cosecha final de peces.

Un estanque de 1000 m3 con una tubera de 6 pulgadas de dimetro tarda


entre 6-8 horas para drenar, mientras que el mismo estanque con una
tubera de 3 pulgadas tardara de 25-30 horas para evacuar sus aguas.
De la misma manera, un adecuado drenaie es necesario para poder
evacuar aguas en las operaciones de recambio de emergencia en los
estanques.
La orientacin de los estanques en el terreno deber tener en cuenta la
direccin de los vientos predominantes en la regin. Estanques orientados en la direccin del viento permiten un patrn de circulacin de aguas
ms eficiente y cuerpos de agua de caractersticas ms homogneas, sin
embargo en estanques de mayor tamao puede presentarse erosin en
los muros por la accin del agua movida por el viento, a estos muros se
les debe procurar defensas que mitiguen la accin elica.

Por ultimo, al abordar la construccin del estanque debe asegurarse el


retiro de la primera capa del terreno para evitar el exceso de materia
orgnica en los diques del estanque, esta labor denominada descapote
se realiza sobre los primeros 10 cms. del terreno.
Sobre la base de los clculos del volumen de tierra necesario para la
armada de los diques se realiza el corte y acarreo del material y se
procede al armado de los muros. La compactacin del material es un
punto crtico en la construccin ya que de la eficiencia de esta operacin
depender la vida til del dique. Una compactacin inadecuada permitir la erosin mas rpida del los muros y su deterioro. Aunque normalmente se utiliza el peso de la maquinaria de corte y acarreo como herra-

mienta de compactacin de los muros, esta no es la ms adecuada. La


herramienta sealada para esta labor se conoce con el nombre de
rodillo pate-cabra el cual consiste en un rodillo metlico con protuberancias que ejercen presin a manera de puntos sobre el terreno.
Antes de emprender la construccin de su estanque, consulte con su
servicio de asistencia tcnica. Los tcnicos de las UMATAs podrn orientarlo en la planificacin y diseo de sus estanques pisccolas o contrate
los servicios de un experto en la materia cuya experiencia sea garanta
para no cometer costosos errores en la seleccin del sitio, diseo y construccin de sus estanques pisccolas.

4.CONCEPTOS BSICOSDE SANlDAD P~SC~COLA


ENFERMEDAD
Manifestaciones fsicas, y a veces en el comportamiento, que son anorrnales, visibles, y que son el producto de desarreglos en cualquier animal (hospedero), como consecuencia de la INTERACCINde l con agentes extraos (etiologa ="causau) o por desrdenes propios del mismo animal.
La enfermedad slo la sufre el hospedero (animal), MUY RARAVEZ es el
producto de una sola "causa". En consecuencia, encontrar un microorganismo, una sustancia daina o una deficiencia o exceso de un nutriente,
slo indica la presencia o ausencia de dicho microorganismo, sustancia
o nutriente, en ningn caso significa ENFERMEDAD.

Presencia de un microorganismo POTENCIALMENTE daino dentro del hospedero, es decir, no son visibles ni comportamientos anormales ni signos.

Daos (lesiones)en los rganos o tejidos del hospedero: inflamacin, hemorragias, muerte de clulas, aumento en el nmero o en el tamao de
las mismas.

'CAUSA " (ETIOLOG~A):


Escribimos causa entre comillas, porque es un trmino que se presta
para muchas confusiones, sin embrago, se continua utilizando comn-

mente. Creemos de todas formas que es necesario, as sea en forma


mnima, no dejar pasar la oportunidad de problematizarlo. En consecuencia tambin usamos una expresin mas correcta: etiologa. Entonces definimos etiologa como la sustancia, microorganismo, elemento,
etc. que es capaz de INDUCIR enfermedad. Ntese que tampoco usamos la expresin "producir" enfermedad.
An ms, la presencia de microorganismos por lo general se debe mirar
desde el punto de vista "CAUSA O EFECTO": esto es: los microorganismos
muchas veces estn en el hospedero y pueden no estar induciendo LESIN
o PATOLOG~A
o an ENFERMEDAD, sencillamente estn ah, porque ese es
su sitio habitual de estar, en ese caso se podran considerar como un efecto.
Tambin pueden estar INVOLUCRADOS tales microorganismos en la
y ENFERMEDAD pero no como CAUSA PRIinduccin de PATOLOG~A
MARIA sino como "OPORTUNISTAS"; esto es, hay otros factores
predisponentes que hacen ms susceptible al hospedero al ataque de
microorganismos oportunistas, son esos factores predisponentes los que
se deben corregir primero antes de hacer uso de la teraputica para
destruir el microorganismo.

GRUPOS DE ETIOLOGIS

('Causas"):

Vivos: virus, bacterias, parsitos, etc.


Fisicoqumicos: desrdenes en parmetros de la calidad del agua como
temperatura, pH, oxgeno disuelto, nitritos, nitratos, amonio, etc.
Qumicos extraos: pesticidas, herbicidas, colorantes (Verde de Malaquita), fijadores (formol), etc.
Nutricionales: exceso o defecto de nutrientes.
Genticos.

MORBlLlDAD
Porcentaje de enfermos en una poblacin

MORTALIDAD
Porcentaje de muertos en una poblacin

POBLAU~N
Existen varias posibilidades de definirla: una poblacin puede ser una
granja, regin, nacin, grupo de naciones geogrficamente asociadas y
mundial.

PATOGENlClDAD
Es la habilidad de un agente para inducir enfermedad, la medida de la
patogenicidad es la proporcin de animales que fueron infectados y que
al final resultan enfermos.

VIRULENCIA
Agresividad del agente, capacidad de producir casos graves o fatales en
proporcin al nmero total de casos enfermos, o meior, es el grado de
patogenicidad

ENFERMEDAD TRANSMISIBLE
Cualquier enfermedad causada por un agente infeccioso que se disemina por la transmisin de este agente, de un reservorio o un hospedero
infectado a otro hospedero susceptible. Esta transmisin se da directamente de un animal o persona infectada, o indirectamente a travs de
un hospedero intermediario que puede ser un vecfor (animales invertebrados) o de un objeto inanimado

FUENTE DE INFECCIN
Aquella que sirve como ambiente natural y sitio de multiplicacin de un
agente, y de la cual por una ruta u otra puede infectar a otro individuo
susceptible. La fuente de infeccin debe distinguirse claramente de la
fuente de contaminacin, un eiemplo de esta ltima es la que produce
un escape de un pozo sptico a un abastecimiento de agua.
Los animales actan como fuente de infeccin a partir de casos clnicos
agudos y a partir de portadores "sanos".

PORTADOR SANO O ASINTOMATICO


Un animal se puede infectar durante el curso de una infeccin o tambin
lo puede hacer en la fase de convalecencia o postconvalecencia en una
poblacin, sin embargo, dicho animal

no manifiesta la enfermedad

pero queda infectado temporal o permanentemente y acta como fuente de infeccin.

TRANSMISION DIRECTA
Transferencia directa del agente infeccioso de un portador sano o uno
enfermo a un animal susceptible por contacto directo.

T R A N S M I S I ~ INDIRECTA
N
Vehculos: objetos inanimados o materiales contaminados
Vector: invertebrado que propaga la enfermedad entre un hospedero
enfermo a otro susceptible. Estos se clasifican en:

1. Vedor Mecnico: es el simple traslado mecnico del agente infeccioso. Por medio de un insecto por contaminacin de sus patas o trompa
o por pasaje a travs de su tracto gastrointestinal, sin multiplicacin o
desarrollo del microorganismo.

2. Vector Biolgico: cuando es necesaria la multiplicacin, desarrollo


cclico o una combinacin de ambos en el invertebrado vector antes
de que pueda transmitir la forma infectante del agente o etiologa
que ha adquirido de un animal infectado o enfermo a otro. El
artrpodo se hace infectante despus de que el agente tiene un perodo de incubacin

Se trata de la recoleccin permanente y dinmica de informacin sobre


el estado de salud o enfermedad de una poblacin y de los factores
relacionados con ella; cuando se detecta enfermedad la vigilancia
epidemiolgica tambin se encarga de aplicar medidas de control y evaluar la eficacia de ellas.
Conceptos importantes en vigilancia epidemiolgica:
Endemia: Enfermedad clnicamente manifiesta o no, que se presenta en
forma regular en una zona y afecta a una determinada poblacin.
Epidemia/ Brote: Aparicin en una comunidad o regin de casos de una
enfermedad claramente excesivos con respecto a lo que cabe esperar en
condiciones normales

1. La enfermedad en animales de produccin casi nunca es un problema individual, por lo general es un asunto de poblacin, que puede
estar estratificada por edades.

2. No existe una sola "CAUSA", a lo sumo la enfermedad es de ORI-

GEN MULTICAUSAL. Esto es an mas cierto en animales acuticos.


3. En consecuencia, el DIAGNSTICO no puede seguir siendo
"UNICAUSAL", debe ser INTEGRAL. Esto es: se deben establecer procedimientos que abarquen la totalidad de los factores que intervie-

REGIN(deben exisEPIDEMIOLGICOS),
pasando por el CLIMA, manejo de

nen en todo el sistema de produccin, desde la


tir mapas

la granja, aguas y uso ADECUADO de LABORATORIOS. Mandar


una muestra de cualquier cosa, un animal, animales muertos, etc. es
una prdida de tiempo y dinero.

4. Enfermedad no es solo un BROTE Y MORTALIDAD GRAVE durante


dicho brote. El concepto de ENFERMEDAD debe ser una preocupacin permanente en explotaciones tal como lo es la RENTABILIDAD.
Hoy se habla mas de gestin de salud y prevencin antes que de
tratamiento de enfermedades.
Puede ser que algunas enfermedades nunca se presenten y otras sean
muy frecuentes. En todo caso debe existir un MONITOREO (vigilancia epidemiolgica) permanente desde el Pas hasta la granja a fin de
que las primeras en verdad nunca ingresen y las segundas puedan ir
siendo disminuidas y controladas en el tiempo: en esencia debe haber un cambio de actitud hacia el TIEMPO en que percibimos las
enfermedades.

5. La enfermedad en el menor de los casos es un asunto de GRANJA,


por lo general es un asunto de REGINy algunas veces de NACIN
o MULTINACIONAL: por consiguiente debe haber un cambio de actitud hacia el ESPACIO en que concebimos las enfermedades.

6. La enfermedad casi nunca es un problema personal, es un problema


COMUNITARIO: del productor, de las granjas, de las agremiaciones,
de los productores de insumos para animales, de importadores y
exportadores, de laboratorios privados, de las INSTITUCIONES del
Estado y de las UNIVERSIDADES. En definitiva: la enfermedad es un
ASUNTO NACIONAL, no exclusivamente PERSONAL ni ESTATAL.

7. Para las enfermedades infecciosas cada vez se alejan ms las posibilidades de soluciones MGICAS;
bien sean ellos

el desarrollo de nuevos productos,

ANTIBITICOSo VACUNAS vale millones de Dla-

res sin que su eficacia est asegurada.

8. La industria ACU~COLAes una de las que tiene mayores posibilidades de EXPORTAR; afuera en el extranjero no les gustan los alimentos
ni microorganismos potencialmente dainos.
con QU~MICOS

9. La salud social y econmica de Colombia en gran medida dependern de las exportaciones.

PRINCIPIOS PARA LA TOMA Y ENV~ODE MUESTRAS PARA EL


DIAGN~STICO
ICTIOPATOL~GICO
5.1. RECOMENDAClONES GENERALES
Los sistemas pisccolas deben ser cada vez mas productivos y eficientes,
esto implica tener un mayor conocimiento de todos los factores que intervienen en una explotacin; dentro de stos, la sanidad de los animales, toma especial importancia dada la intensificacin de los cultivos que
propicia la mayor aparicin de enfermedades. Como un intento parcial
para prevenir, disminuir o controlar los problemas sanitarios se hace
indispensable conocer la situacin real de la granja, lo cual se logra a
travs de las siguientes medidas:
Llevar constantemente registros completos de todos los parmetros
productivos y sanitarios de la granja, incluyendo la mortalidad diaria
en cada uno de los estanques, jaulas o divisiones de la explotacin.
Para esto cada productor puede idear sus propios formatos que se
ajusten a sus caractersticas especficas. Es esencial crear la conciencia en el personal de la empresa de la importancia de estos datos
para asegurar una toma constante y correcta de los mismos.
Monitorear peridicamente la situacin sanitaria de los peces, as
aparentemente no se este presentando ningn problema. Muchas
patologas pueden pasar inadvertidas en la explotacin, pero debido
a mltiples factores ocasionan brotes espordicos o incipientes de
signos clnicos o mortalidad; desafortunadamente el productor tiende a acostumbrarse a esta situacin y termina por reportar esto como
algo 'normal', sin darse cuenta que all puede radicar en gran medida parte de las prdidas detectadas al final de un ciclo de cultivo.

Dichos monitoreos consisten en el envo adecuado de animales a un


laboratorio calificado para su anlisis y diagnstico. Con estos resultados se puede intentar conocer los factores que afectan la presentacin de estas mortalidades crnicas y tomar a tiempo las medidas
apropiadas para su prevencin y control.
Recurrir pronto a ayuda calificada en caso de algn cambio en el
comportamiento normal de los peces o en brotes agudos y severos
de mortalidad. Es importante tomar conciencia de que gran parte de
las medidas a tomar en estos casos, especialmente las de tipo teraputico, deben partir de un diagnostico preciso y confiable. Toda decisin de este tipo que se adopte de forma apresurada y sin un fundamento claro solo trae consigo mayores perdidas econmicas, demora en el diagnostico preciso y en la toma de las medidas apropiadas y considerable impacto medio ambiental. De la premura y sensatez con la cual se actu en estos casos, depende en buena parte el
xito para enfrentar y salir del problema.
Llevar a cabo un monitoreo frecuente de los principales parmetros
fisco-qumicos del agua de la explotacin (temperatura, oxgeno,
amonio y nitritos). El productor debe procurar conocer el comportamiento del ciclo diario y estaciona1 de estas variables para detectar
cualquier cambio y prever la aparicin de alguna alteracin asociada
a ellas. En la actualidad existen muchos mtodos econmicos y de
aceptable confiabilidad para efectuar tales mediciones.

5.2. ENM'O DE MUESTRAS


Obtencin de la historia clnica.
Toda muestra a enviar al laboratorio debe ir acompaada de una historia
clnica del caso. Existen muchos tipos de forrnatos para remitir una historia y
aunque es importante mencionar todos los detalles posibles, existen algunos
datos que siempre deben estar prestantes, dicha informacin es la siguiente:
Informacingeneral de la explotacin:que permita ubicarla geogrficamente
y determinar el tipo de cultivo empleado, direccin, telfono, tipo de
explotacin, extensin, especie(s) cultivada(s), alimentacin, etc.
Poblacin afectada: determinar la

(S)

especie (S) que est (n) presen-

tando la signologa clnica o la mortalidad, su nmero aproximado,


su peso o tiempo de cultivo.
Mortalidad observada: establecer el numero total de animales muertos, asociados al problema, al momento de realizar la remisin de
muestras. Aclarar la fecha de inicio (y terminacin) de la mortalidad y
la hora del da en la cual es ms evidente.

Signos clnicos presentes: alteraciones en el comportamiento normal


del pez (disminucin en el apetito, depresin, boqueo, nado anormal,
etc), las caractersticas externas anormales (erosin o enrojecimiento
de las aletas, ulceraciones de la piel, palidez de las branquias, etc).
Tratamientos realizados: sealar todas las medidas teraputicas o de
manejo que se hayan utilizado para disminuir la presentacin de la
mortalidad o de los signos clnicos y enunciar los resultados obtenidos.

Caractersticas fisco-qumicas del agua: especificar si se llev a cabo


algn tipo de anlisis a los parmetros fsico-qumicos del agua. Es
importante sealar cualquier cambio en las caractersticas generales
del agua (color, olor, etc).
Cambios recientes: en las actividades rutinarias de cultivo (cambio de
alimento, siembra de eiemplares nuevos, etc) que eventualmente pudieran relacionarse con el inicio del problema.

Seleccin de la muestra.
Los animales a muestrear deben ser tomados del sitio donde la mortalidad o los signos clnicos sean predominantes. Las muestras enviadas en
la etapa terminal del problema, cuando solamente quedan unos pocos
animales sobrevivientes, tiene pocas posibilidades de xito para el diagnostico y reduce las posibilidades de brindar una ayuda efectiva.
El nmero de animales a enviar varia segn el tipo de anlisis, pero
generalmente es aceptable un mnimo de 5 y un ideal de 10 o mas
ejemplares. Siempre se deben incluir animales afectados y animales aparentemente normales (en una proporcin de 3 a 1, aprox.). Los animales
seleccionados como normales no deben tener ninguna afeccin aparente, tener buen apetito y buen reflejo de huida.
Debido a la posibilidad zoontica de algunas enfermedades, es decir, el
posible contagio de los humanos con organismos patgenos de los peces, debe acostumbrarse el uso de guantes adecuados para todas las
labores de manipulacin.

Tipo de muestra.
Animales vivos. Dado que con este tipo de muestra es posible realizar
todos los procedimientos necesarios para llegar al diagnostico, ES LA
MEJOR FORMA DE ENVIAR UNA MUESTRA AL LABORATORIO.
Aunque se tiene la conviccin errnea que realizar este tipo de envos es
algo complejo, se podr observar aqu que este procedimiento es muy
sencillo, econmico y de un gran valor diagnostico. Lo mas importante
es tener ciertas precauciones y actuar con rapidez y eficiencia; para ello
se recomienda que antes de empezar la manipulacin de los animales
se tengan listos todos los materiales necesarios como son, entre otros: la
historia clnica, el instrumental, los implementos para el envo (bolsas,
cajas, hielo, etc) a fin de disminuir al mximo el tiempo de manejo de los
peces.
La forma de remitir los ejemplares puede tener algunas variaciones, pero el
procedimiento indicado aqu es el comnmente aceptado. Se deben utilizar
bolsas de polietileno de grueso calibre (del mismo tipo que las usadas para
el envo de alevinos); es recomendable la utilizacin de doble bolsa y revisarlas previamente para prevenir cualquier alteraciny accidente en el transporte. Se llena un 1/3 de la bolso con agua de buena calidad, del mismo
tipo de la utilizada en el cultivo; esto es importante para evitar cambios
bruscos en el pH, la temperatura y la alcalinidad. Se introducen los peces, se
llena el espacio restante de la bolsa con oxgeno o aire en su defecto, y se
cierra de un modo estable y seguro. Se revisa la ausencia de fugas de aire o
agua, se introduce en una caja de cartn y se sella y rotula apropiadamente
(como un envo de correo). Para viajes prolongados es aconsejable rodear
la bolsa con hielo y aislar la caja trmicamente con icopor, con el obieto de
lograr la mayor sobrevivencia de los peces

El nmero de ejemplares por bolsa depende de muchos factores como la


especie y talla de los animales, la temperatura del agua, el tamao de la
bolsa, la duracin en el periodo de captura y en el transporte al laboratorio,
etc., sin embargo, una medida de referencia general puede ser el no exceder los 500g de biomasa por bolsa (1 0 animales de 50 g, por ejemplo).
Como se mencion previamente, siempre se deben enviar peces normales. Estos deben enviarse en una bolsa aparte o ser identificados apropiadamente dentro del grupo (un pequeo corte en el extremo de la aleta
caudal puede ayudar). Los animales afectados no deben seleccionarse
muy moribundos o agnicos ya que muy seguramente llegaran muertos a
su destino. Finalmente, es importante no olvidar introducir la historia en
una de las cajas, protegida apropiadamente contra la humedad.

Animales fijados. Cuando el envo de animales vivos no es posible por alguna


circunstancia, es posible remitir los peces en formalina preparada apropiadamente. Es importantetener en cuenta que de esta forma se limita el valor diagnstico de la muestra ya que sta solamente puede ser procesada para
histopatologa (ya que no es posible el aislamiento bacteriolgico, por ejemplo).
Idealmente se debe utilizar formalina bufferada al 3.7%, la cual puede
conseguirse en cualquier laboratorio de diagnstico. Si esto no es posible,
mezclar 9 partes de agua destilada por una parte de formalina
se ~ u e d e n
comercial (la cual viene usualmente al 37%). Se utilizan diversos tipos de
envase con tapa rosca y de un tamao proporcional a los peces a muestrear.
Normalmente se usan de vidrio pero los de plstico suelen ser ms econmicos, seguros y livianos .
La rapidez en todo el procedimiento es factor crucial para el xito. Los
animales seleccionados siempre deben estar vivos al momento de la

manipulacin, ya sea que estn prximos a su muerte pero aun con


movimientos respiratorios. Ejemplares muertos, as sea recientemente,
no sirven para el proceso.
Una vez los peces son capturados, se deben introducir en una solucin anestsica para su insensibilizacin. Los anestsicos mas comunes son la tricaina (finquel o M S - 2 2 2 ) y la quinaldina, dosis a
efecto. Si no se dispone de stos, se puede emplear un recipiente
con hielo para asegurar una pronta inconciencia y muerte del animal. Es aconsejable no realizar este procedimiento a todos los peces seleccionados al mismo tiempo, ya que mientras se procesan los
primeros, los ltimos empezaran a morir. Cuando los animales cesan la respiracin se procede a su sacrificio mediante un corte en la
medula espina1 en la parte posterior de la cabeza, un poco por delante de la aleta dorsal.
Los animales mas pequeos (1 -2 g o menos) deben ser introducidos
inmediatamente en la solucin de formol. A los peces un poco mas grandes (menores a 5 g) antes de introducirlos se les practica una incisin
leve en la parte ventral del abdomen, teniendo la precaucin de exponer
los rganos abdominales sin lesionarlos. Los ejemplares mayores de este
tamatio deben ser procesados de la siguiente forma: se colocan sobre
uno de sus costados, se les realiza una incisin ventral desde la mandbula hasta el ano, se continua el corte hasta arriba y adelante siguiendo
los limites dorsales de la cavidad abdominal y se comunica con el primer
corte justo antes del oprculo, sin lesionar ningn rgano; de esta forma
se retira todo el costado de la pared abdominal y se exponen todas las
vsceras. En tilapias es conveniente incidir adems la membrana que
divide la cavidad abdominal de la cavidad renal. Posteriormente, mediante una ieringa con una aguja muy fina (de insulina) se inyecta una

pequea cantidad de la misma solucin de formol en varias porciones


en el intestino y en el estmago. Finalmente, se retiran los oprculos y se
meten los peces en el frasco, asegurndose que todos los tejidos queden
inmersos en formol. Es aconsejable no efectuar ningn otro tipo de manipulacin a los tejidos. Los frascos deben ser rotulados apropiadamente anotando la fecha y lugar de toma y, similar a lo descrito anteriormente, acompaarse de una historia adecuada.

Animales congelados. Este tipo de muestra es de valor limitado ya que


eventualmente sirven solo para bacteriologa, virologa y toxicologa (no
para histopatologa). En los casos que se considere esta forma de envo,
las muestras deben ser remitidas adecuadamente congeladas y aisladas
trmicamente, evidentemente que no servirn para anlisis
histopatolgico.

6. CARACTER~STICASDEL MANEJO SANITARIO Y PRODUCTlVO

DE LA GRANJA MODELO DE TILAPlA


Carlos Mario Franco - Mdico Veterinario, Granja: Tilapez Cartago-Valle

CARACTER~STICAS
GENERALES
Aguas lluvias
Bajos recambios
Estanques en tierra
Inversin de sexo en hapas

MANEJO DE REPRODUCTORES
Aplicacin de larvicida y10 desinfeccin del lago.
Evaluacin de Insectos predadores,caracoles, etc.
Baja densidad:

2/m2

Temperatura estable
Evaluacin de condicin corporal

COSECHA DE 2.4 RVAS


Implementos de pesca desinfectados
Larvas en agua limpia y clida.
Bao control protozoos
Temperatura estable

AMBIENTE ACU TICO


Estabilidad de Temperatura y pH
Estimular cadena trfica (fertilizacin qumica)
Aprovechar indicadores biolgicos.
Evitar contaminacin con materia fecal de otras especies y/o lixiviados.
Aerobio

1571

REVERSION SEXUAL
Temperatura estable
Control de materia orgnica.
Fertilizacin qumica
Buena frecuencia de alimentacin.
Tamao de partcula
Evaluar registro diario
Protena mxima 35%
Anillos concentradores

PRELEVA NTE
Desinfeccin del lago y/o correctivos
Antes de cosechar, estabilizar el nuevo medio (temperatura)
Agua filtrada y fertilizada
Control de insectos predadores y plantas invasoras

ALlMENTO EN LA SANlDAD
Almacenamiento adecuado
Proteccin adecuada contra el calor y el sol
Composicin (aminocidos, grasas, relacin energa-protena)
Tipo (% protena)
Energa (dietas isocalricas)
Tamao de partcula (destruir alimento en relacin con el tamao de los peces).

EVALUACI~N
CL~NICA
Observacin y anlisis del registro diario
Observacin del lote (comportamiento)
Evaluacin del comportamiento del medio acutico (qu ha
predispuesto a un brote?)

Comparar con otros lotes existentes y en registro


Ubicacin de la hapa?
Densidad / ambiente
Cantidades y forma de alimento.

MANEJO DE MORTALlDAD
Recoleccin constante, conteo y registro.
Depositarla en agua con desinfectante (formol), proteger del sol
Adecuada disposicin de los cadveres.
Evitar contaminacin de aguas e implementos

CONCLUSlONES
Desinfeccin de suelos de lagos.
Evaluacin contenido del fondo (insedos-caracoles,etc). Y su correctivo.
Manejar adecuadamente el ambiente acutico (recordar que es un medio vivo)
Desinfeccin constante de implementos de pesca, botas trabaiadores,
hapas, jaulas.
No aplicar "tratamientos" de rutina sin necesidad.
Evaluar alteracin del ambiente del pez (factores predisponentes) y

CO-

rregirlo.
Buen diagnostico clnico y de laboratorio (correlacionarlos)
Tratamientos de acuerdo al ciclo biolgico del agente etiolgico.
Elegir el medicamento y dosis adecuada.
Frecuencia y duracin del tratamiento.
Baos funcionan mejor en: diagnstico precoz, menos costosos, menos
contaminantes, menor resistencia.

7.1 CULTIVOS CELULARES COMO TCNICA DE D I A G N ~ S T I C O


DE ENFER-

MEDADES VlRALES EN PECES.


Fransue Granados. Mdico Veterinario
En la actualidad, enfermedades como la necrosis pancretica infecciosa
(IPN), la necrosis hematopoytica infecciosa (IHNV), el linfocystis (LV), el
rabdovirus de alevinos (PFR), la viremia de verano de la carpa (SVCV) y
la septicemia hemorrgica viral (VHSV) encuentran en el desarrollo de
cultivos primarios y a partir de stos, las lneas celulares, la base de su
estudio. En nuestro laboratorio a partir de casos evaluados por
histopatologa de piscifactoras de trucha arco iris (Onchorynchus mykiss),
se ha sospechado de la presencia de IPNV en el pas, por lo cual se dio
inicio al desarrollo de un cultivo primario como primer paso para la
implementacin de esta tcnica en el diagnstico de enfermedades virales
en nuestro medio. La tcnica que se ha venido adelantando se basa en
la obtencin

de un grupo de clulas originarias de bazo y rin de

juveniles de trucha arcoiris (Onchorynchus mykiss) y su mantenimiento


en medios de cultivo como Leibovitz- 15, medio esencial mnimo (MEM) o
RPMl suplementados, para su posterior enfrentamiento a muestras sospechosas, una vez se finaliza el enfrentamiento las muestras deben ser
evaluadas por microscopia invertida y/o electrnica.
Rutinariamente se preparan muchos tipos de cultivos celulares en
vertebrados, y la informacin en peces era limitada o no exista, ahora
se sabe que el cultivo de tejidos de peces telesteos in vitro requiere
condiciones de cultivo especiales, como el manejo de la temperatura y

el pH al igual que la variacin de algunos componentes de los medios


para controlar la salinidad, lo que ha permitido que se desarrollen cultivos primarios a partir de branquias (Verbost et al.; 1994 Fernndez, et
al., 1995), aletas (Bejar, et al., 1997), bazo y tejido hematopoytico
(Verbost et al., 1994; Ganassin and Bols, 1996; FlaTio, et al., 1998;
Ganassin et al., 2000), leucocitos (Johansen and Sornmer, 1995;
Camacho, y Burbano, 1999),vsceras y cerebro (Isshiki, et al., 2001),
entre otros. Las tcnicas de cultivo al igual que sus condiciones son muy
variables por lo cual se hace necesario, de acuerdo al equipo de trabaio
y materiales con los que se cuenta, la estandarizacin de ellas.
En lo que tiene que ver con el diagnstico de IPNV, se han propuesto
algunos protocolos para el desarrollo de cultivos primarios a partir de
rganos hematopoyticostales como bazo y rin craneal (Ganassinand
Bols, 1996; Flao, et al., 1998; Ganassin, 2002), estos protocolos han
variado a lo largo de las investigaciones, pero la base terica de preparacin se mantiene. Es as como se obtuvieron clulas de bazo y su progenie
con estructura de teiido hematopoytico, caracterizadas por una adherencia parcial a la base de los frascos de cultivo y formacin de racimos,
alcanzando a cubrir un 75% de sta (confluencia incompleta).

En esta seccin queremos agradecer sinceramente la asesora del doctor


Jorge Almansa, como responsable del Laboratorio de Virologa de
CORPOfCA, CEISA.

7.2 T C N ~ C ADE PCR (Reaccin en Cadena de la Polimerasa)


La PCR es una tcnica para la sntesis ((invitron de secuencias especficas de ADN. Permite multiplicar el ADN presente en diferentes muestras
biolgicas, obtenindose millones de copias de una determinada secuencia de ADN.

En poco tiempo esta tcnica ha conseguido ser

ampliamante utilizada no slo en la gentica molecular, sino en otras


muchas ciencias (Mas et al., 2001). La tcnica ha llegado a convertirse
en una importante herramienta de diagnstico de enfermedades infecciosas tanto en humanos como en animales, varios autores han reportado la identificacin de microorganismos de importancia en sanidad
acucola por esta tcnica (Wakabayashiand Izumi, 1997; Cepeda y Santos, 2000; Gibello et al., 2001).

El procedimiento se basa en la amplificacin de una secuencia especfica


del ADN bacteriano por accin de una enzima termoestable: Taq polimerasa.
El ADN bacteriano es sometido a la repeticin de un ciclo de amplificacin
conformado por tres pasos: desnaturalizacin del ADN de doble cadena,
hibridacin de los primers o cebadores y extensin o elongacin del cebador
por accin de la polimerasa. Tras la serie de ciclos, el resultado que se
obtiene es la amplificacin exponencial del fragmento de ADN seleccionado. La deteccin del producto se hace por electroforesis en gel de agarosa
y tincin con bromuro de etidio.

En nuestro laboratorio se practica esta tcnica para confirmar el diagnstico de algunas bacterias de importancia en

sanidad acucola:

Flavobacteriurn psychrophilurn, Aeromonas hydrophila y para determinar


la especie de Streptococcus spp. hasta ahora aislado en brotes de morbimortalidad en Colombia.

Bejar, J., Borrego, J.J., lvarez, M.C.1997. A continuos cell line from the culture rnarine fish
gilt-head seabream (Sparus aurota L.). Aquaculture. 150: 143-153.
Camacho-Garzn, J. & Burbano C.1999. Tcnica para el cultivo In vitro de linfocitos de
peces. Dahlia.3:69-79.
Candan, A. 2002. First report on the diagnosis of infectious pancreatic necrosis (IPN) based
on reverse transcription polymerase chain reaction ( RT-PCR) in Turkey. Bull Eur Ass Fish
Patho1.22:45-47.
Cepeda C. y Santos Y. 2000. Rapid and low-level toxic PCR- based method for routine
identification of Flavobacteriurn psychrophilum. lnternatl Microbiol. 3: 235-238.
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Fernandes, M.N., Eddy F.B Penrice W.S.1995. Primary cell culture from gills explants of rainbow
trout. J Fish Biol. 47:641-651.
Flao, E., Lpez-Fierro, P, lvarez, F.,Rasquin, B., V.illeno, A. 1998. Splenic cultures from
rainbow trout, Onchorhynchus rnykiss: establishment and characterization. Fish &
Shellfish Immunology. 8:589-606
Ganassin, R. C., Bols, N. C.1996. development of long-term rainbow trout spleen cultures
that are haemopoietic and produce dendritic cells. Fish and Shellfish Immunology. 6: 1734.
Ganassin, R. C., Schirmer, K., Bols, N. C.2000 . Cell and tissue culture. In Experimental
Models. Copyright02000Academic press. Pp63 1-659.
Gibello A, Blanco MM, Dominguez L y Fernndez JF. Utilizacin de la PCR para el diagnstico en Ictiopatoioga. www.revisthaquatic.com. Nov 2001.
Isshiki, T., Nagano, T., Suzuki,S.2001 .Infectivity of aquabirnavirus strains to various marine
fish species. Dis Aquat Org.46:109-1 14.
Johansen, L.H.,Sommer, A.I. 1995. Multiplication of infedious pancreatic necrosis virus (IPNV)
in head kidney and blood leucocyfes isolated from Atlantic salmon, Salmo salar L. J
Fish Dis.18:147-156

Kennedy-Stoskopf, S. Chapter 11. Immunology. 1993. In STOSKOPF, M.K. Fish Medicine.


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Verbost, PM., Flik, G., Cook, H. lsolation of gills. In Biochemistry and Molecular Biology of
Fishes. Elsevier Science B.V .Machachta and Mommsen Eds. Vol 3.1 994, pp.239-245.
Wakabayashi H and lzumi S.1997. Use of PCR to detect Cytophaga psychrophila from
apparently healthy juvenile ayu and Coho Salmon Eggs. Fish Pathology 32:169-173.

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