BIOINDICATORI I BIOMONITORI

Note de curs
Master EMSE an I

Lect. dr. Voichita Gheoca

Notiuni introductive

Un indicator este un semn sau un semnal care nglobeaz un mesaj complex, potenial de la
mai multe surse ntr-o manier simplificat.
Un indicator ecologic este definit ca fiind o variabil, un index de variabile, sau un model
care caracterizeaz un ecosistem sau una dintre componentele sale critice.
Un indicator poate reflecta atributele biologice, chimice sau fizice ale condiiei ecologice.
Utilitatea primar a unui indicator este aceea de a caracteriza starea curent i de a depista i
prevedea modificrile semnificative.
Termenul de bioindicator este utilizat pentru organisme sau asociaii de organisme care
rspund la prezena poluantului prin modificri ale funciilor vitale, sau care acumuleaz
poluani.
Motivaia utilizrii bioindicatorilor:
Determinarea direct a efectelor biologice
Determinarea efectelor sinergice sau antagoniste a unor poluani multipli
asupra unui organism
Recunoaterea rapid a efectului pe care poluantul l are asupra organismelor,
inclusiv omul
Cost relativ redus comparativ cu metodele de msurtori
Marele potenial al bioindicatorilor pentru monitoringul mediului este adesea confruntat cu
probleme dificile de metodologie rezultate din utilizarea instrumentelor vii de msur.
Efectul ncrcturii poluantului n mediu nu poate fi ntotdeauna clar difereniat de factorii
de stres natural. Lipsa experienei practice cu anumii bioindicatori fece dificil uneori o
interpretare corect a datelor n special dac nu sunt disponibili termeni de comparaie.
Cercetrile intensive din ultimele decenii au furnizat numeroi bioindicatori care satisfac
necesitile de convenien, standardizare, cost i capacitate de evaluare.
Bioindicatorii sunt n mod obinuit grupai n dou categorii, bioindicatori de acumulare i
de rspuns.
Bioindicatorii de acumulare stocheaz poluanii fr a manifesta modificri metabolice
Bioindicatorii de rspuns reacioneaz prin modificri celulare sau simptome vizibile chiar
i la cantiti mici de substan
Biomonitoringul este grupat n:
Biomonitoring pasiv reprezentat de utilizarea organismelor, asociaiilor de organisme sau
prilor din organisme care sunt un component natural al ecosistemului investigat i care
apar spontan n acesta
Biomonitoring activ include toate metodele prin care organismele sunt introduse n
condiii controlate n habitatul care urmeaz a fi monitorizat.
Definiia termenului de bioindicator

Definiia extensiv a termenului de bioindicator, dat de Blandin (1) acoper trei niveluri de
organizarea a materiei vii: nivelul celular i tisular, nivelul organismic (specie) i nivelul
populaional (care constituie comunitile).

La nivel celular i tisular au fost identificai biomarkeri. Contaminanii pot penetra celulele
organismelor expuse i modific funcionarea celular. Modificrile de compoziie, de
concentraie sau de activitate a unor substane reprezint markeri biochimici care pot fi
detectai prin dozri specifice. Markerii biologici sunt aadar indicatori ai expunerii la o
substan toxic aplicabili att pe teren ct i n laborator.
Principalele metode de detectare a toxicitii prin utilizarea biomarkerilor sunt:
Inducerea de ctre poluanii organici a mono-oxigenazelor legate la cytocrom P 450
Inducerea metalotioneinelor de ctre metale
Inducerea enzimelor de conjugare de faz
Inducerea enzimelor de stres oxidativ
Inducerea proteinelor de stres
Inhibarea acetilcolinesterazei
Activitatea ATP-azei Na/K dependent
Disfuncionaliti n sinteza hemului i a porfirinelor (hemoglobina)
Detectarea modificrilor lanivelul ADN (genotoxicitate)
BIOTESTELE
Sunt practicate pe organisme test. Puse la punct ntr-un context experimental n funcie de
procedurile standardizate, biotestele msoar rspunsul fiziologic sau comportamentul
indus de un poluant toxic asupra unui eantion de organisme selecionate n funcie de
sensibilitatea lor la substana chimic i de reproductibilitatea rspunsului. Variabilele
msurate la organismele teste sunt rata mortalitii, creterea, rata reproductiv, activitatea
respiratorie, producerea luminii de ctre bacterii, mobilitatea la nevertebrate i peti,
micarea valvelor sau activitatea de filtrare la bivalve.
Anumite specii prezint o mare capacitate de acumulare de substane toxice sau potenial
toxice, ele fiind astfel utilizate ca i indicatori a nivelului de contaminare chimic i
radioactiv n diverse medii. Aceti indicatori pot servi la evaluri de risc sanitar n msura
n care ei sunt reprezentativi n ceea ce privete transferul contaminanilor spre om prin
lanurile trofice.
Generalitati privind potentialii bioindicatori in utilizati monitoringul ecosistemelor
Aceste prime dou categorii de indicatori biologici fac obiectul ecotoxicologiei, care poate
fi definit ca fiind disciplina care studiaz cantitativ i calitativ efectele nefaste ale
poluanilor chimici asupra ecosistemelor inclusiv impactul asupra omului sau mai concis
toxicologia mediului.
La nivelul comunitilor, indicatorii biocenotici sunt bazai pe structura populaiilor: Ei se
nscriu ntr-un cadru conceptual diferit de cel al ecotoxicologiei n msura n care sistemul
natural este obiectul central al ecologiei. Structura biologic este caracterizat prin bogia
de specii i prin proporia relativ sau prezena anumitor taxoni.
Pe lng metodele clasice de descriere i interpretare a compoziiei populaiilor (diversitatea
taxonomic, frecven, abunden), indicatorilor biocenotici permind diagnosticarea
contaminrilor sau ale altor modificri ale habitatului fizic.
n apele continentale calitatea este msurat fie prin absena taxonilor reprezentativi pentru
structura biocenotic, fie prin prezena speciilor al cror profil ecologic este cunoscut.
Indicatorii biocenotici sunt utili n diagnoz, n general puin specifici, ei prezentnd ns
avantajul de a reflecta starea de ansamblu a sistemului ecologic.

Indicii saprobiotici care se bazeaz pe cunoaterea profilului ecologic al bacteriilor, algelor

protozoarelor. Ei caracterizeaz gradul de poluare organic a apelor dulci. Este vorba de un
sistem de evaluare din ce n ce mai puin utilizat.
Indicii diatomici: reprezint o serie de indici de calitate biologic, doi dintre ei au dat
dovad de capacitatea de a rspunde la poluarea organic salin i la eutrofizare.
Indicii de calitate biologic fondat pe variabilitatea taxonomic a macronevertebratelor
bentonice i prezena taxonilor indicatori (n special larve de insecte), sunt din ce n ce mai
folosii actual.
n mediile n care prelevrile directe de organisme sunt dificile sau chiar imposibile se
recurge la substrat artificial imersat timp de cteva sptmni care permite studiul faunei
care l colonizeaz i eventual determinarea unui indice de calitate biologic potenial. n
lacuri au fost elaborai indici cu semnificaie trofic bazai pe oligochete i molute. Marea
diversitate taxonomic a oligochetelor din sedimentele fine permite utilizarea de indici care
caracterizeaz alte tipuri de poluare cum este cazul contaminrii sedimentelor cu metale
grele.
n ceea ce privete petii, biomasa i structura populaiilor (compoziie specific, frecven
relativ) sunt evaluate plecnd de al inventarii adesea parcticate prin pescuit electric. Pe
lng compoziia specific, este admis faptul c abundena principalelor specii i/sau
prezena /absena speciilor caracteristice unui habitat sunt informaii pertinente care
trebuiesc luate n calcul.
Indicele de integritate biotic a fost dezvoltat pornind de la trei niveluri structurale,
individual, populaional i comunitilor
Plantele acvatice constituie de asemenea un ansamblu biologic sensibil la calitatea apei, la
caracteristicile hidrodinamice i sedimentologice. Au fost definii mai muli indici pornind
de la comunitile de macrofite, corelai cu nivelul trofic sau cu tipul poluarii chimice, dar
necesit n general teste complementare.
Experimentele realizate pe mesocosmos, ecosisteme simplificate, care reprezint un
intermediar ntre bioteste i indicatorii ecologici. Ele permit efectuarea de experimente n
situri bine adaptate cuantificrii procesului de toxicitate i transferului biologic al
poluanilor.
Bioindicatorii nu au aceeai pertinen ecologic, acelai timp de rspuns,aceeai
specificitate sau acelai caracter predictiv. Dup Adams (1990), bioindicatorii pot fi
clasificai n funcie de pertinena toxicologic sau ecologic i n funcie de timpul lor de
rspuns.
Din punct de vedere toxicologic, biomarkerii sunt n general extrem de eficieni,
determinarea lor este rapid i sunt specifici unui anumit tip de poluant. Faptul c
modificrile sunt msurate la nivel subletal face din aceti indicatori, sisteme de alert
precoce. Analiza lor poate fi de asemenea automatizat, ns sunt insuficieni ca i
modalitate, (mijloace) de predicie a impactului.
Biotestele prin marea lor diversitate ocup o poziie central pe axa reprezentativitate timp
de rspuns.
Indicatorii biocenotici care se bazeaz pe structura edificiului biologic au o deosebit
semnificaie ecologic, dar sunt n general puin specifici pentru un anumit tip de impact. Ei
sunt ns excelente instrumente n evaluare a consecinelor modificrilor fizice ale
habitatului.
Nevertebratele ca bioindicatori
Studiul nevertebratelor furnizeaz o serie de avantaje pentru evaluarea strii ecosistemelor,
inclusiv funcionarea acestora, datorit faptului c sunt uor de monitorizat.

Neveretbratele sunt utile n acest tip de studii din mai mute motive:
Majoritatea biodiversitii globale este dat de nevertebrate. Insectele i alte nevertebrate
constituie cea mai mare parte a biomasei date de faun
Sunt importante n producerea de energie i materiale eseniale i n ciclurile
biogeochimice
Sunt ideale pentru studii deoarece au cicluri de via scurte, rat reproductiv crescut,
cretere populaional rapid
Au un rol deosebit de important n dezvoltarea, polenizarea i fructificaia unui numr
mare de plante cultivate i spontane, ca i dumani naturali ai unor duntori, ca surse de
hran importante, ca i duntori.
Servesc ca vectori i rezervoare pentru o serie de boli i au un impact major n sntatea
populaiei umane.
Sunt componeni critici ai numeroase ecosisteme i ai funcionrii acestora i pot
reprezenta un excelent bioindicator ai strii solului i vegetaiei. Sunt indicatori sensibili la
modificri i pot fi utilizai pentru a monitoriza schimbrile survenite n mediu pe termen
scurt i pe suprafee mici.
Reeaua trofic terestr a fost sugerat ca fiind principal indicator al strii ecosistemelor.
Scderea activitii bacteriene i fungice, modificarea raportului dintre biomasa fungic i
bacterian, diminuarea numrului sau diversitii protozoarelor, alterarea numrului
nematodelor, structura comunitilor de nematode, sau indicelul de maturitate toate acestea
pot indica probleme serioase nainte ca vegetaia s fie afectat.
Lepidopterele sunt un exemplu de fitofage forestiere care reprezint un bun indicator al
diversitii totale a ecosistemelor. Ele sunt relativ uor de observat n teren iar rolul lor
funcional este bine cunoscut. Abundena i diversitatea lor este corelat direct cu prezena
plantelor gazd, datorit faptului c ele sunt n general monofage. Fluturii n schimb au o
gam foarte variat de prdtori, inclusiv artropode prdtoare i parazite, paseriforme,
chiroptere, roztoare i alte mamifere mici. Alte grupe de insecte fitofage pot oferi
oportuniti similare i pot constitui monitori ai funcionrii ecosistemelor sau ai diversitii.
Utilizarea vertebratelor ca bioindicator
Numeroase specii de vertebrate au ca surs de hran nevertebrate sau alte vertebrate, unele
indic starea ecosistemelor iar unele prin prezena absena lor sunt indicatori ai unui mediu
degradat.
Disitribuia i starea populaiilor de carnivore mari este unul dintre exemplele de indicatori
ai habitatelor modificate: aceste specii sunt sensibile la modificrile antropice.
Utilizarea plantelor ca bioindicatori
Plantele indicatoare servesc ca bioindicatori de stare i ai polurii. Conceptul nu este nou,
ncepnd cu Clemments (1920) care sugereaz utilizarea plantelor ca indicatori ai
comunitilor vegetale. Ali autori au extins conceptul n diverse direcii. De ex. Nygaard
(1949) clasific starea trofic i gradul de eutrofizare a apei prin calcului raportului dintre
numrul de specii algale din diverse grupe taxonomice. Westveld (1954) utilizeaz plantele
pentru a descrie calitatea sitului, iar Anderson (1986) i muli alii identific indicatori
vegetali de stare.
Au fost identificate o serie de grupe de licheni, briofite, plante vasculare i specii de plante
vasculare, care pot servi pentru caracterizarea i clasificarea diverselor condiii de mediu.
Aceste

condiii includ: calitatea aerului, nivelul de carbonai, nivelul cursului de ap (ridicat,

sczut),
nivelul azotului, prezena metalelor, temperatura solului, textura solului
(granular, fin).
Un numr mare de specii de licheni i specii de briofite, pot fi utilizate pentru a caracteriza
calitatea aerului, sarcin util n managementul unei largi categorii de pduri i alte arii.
Plantele vasculare i plantele vasculare rare i potenial rare pot fi utilizate ca bioindicatori
ai solului alcalin (bogat n carbonai), punatului intensiv, prezenei metalelor, temperaturii
sczute , texturii granulare i alte condiii.
Talofitele sunt indicatori valoroi pentru pdurile mature, astfel au fost identificate specii de
licheni crustoi indicatori ai continuitii temporale n vechile pduri boreale de conifere.
Termenul de continuitate temporal se refer la gradul n care tipuri specifice de habitat n
acest caz pdurile boreale btrne ocup continuu o regiunea geografic de-a lungul
timpului. Studii au artat c ntreruperea continuitii temporale a pdurilor btrne este
legat de o dispariie a speciilor sensibile strns asociate cu acest tip de habitat, deoarece nu
au avut destul timp pentru recolonizare sau au lipsit sursele pentru recolonizare.
Bioindicatori ai strii ecosistemelor terestre
Lichenii pot fi utilizai de asemenea ca i bioindicatori ai unor variate probleme de mediu
cum ar fi calitatea aerului, acumularea metalelor grele n sol, aciditatea sau alcalinitatea
solului, regim de punat, incendiere i alte condiii. Dup cum am menionat nevertebratele
pot servi de asemenea ca i un excelent sistem de avertizare asupra modificrilor din mediu,
existente sau iminente. Prelevarea unei mici pri a faunei de nevertebrate poate de
asemenea servi la clasificarea diversitii ntregii faune de nevertebrate. de ex, Oliver and
Beattie (1996) au descoperit faptul c monitorizarea i evaluarea biodiversitii
neverebratelor terestre n pdurile australiene poate fi realizat prin analiza atent a

morfospeciilor de nevertebrate ( specii cu aceeai morfologie) n principal furnici,

coleoptere i araneide. Rezultatele lor au evideniat cele mai relevante grupe de nevertebrate
n realizarea acestor studii, precum i cele mai bune metode i perioade de prelevare, pentru
realizarea unui monitoring elocvent.
Utilizarea amfibienilor
Amfibienii acvatici sunt organismele cele mai sensibile i implicit cei mai buni bioindicatori
ai precipitatiilor acide i degradrii calitii apei. Declinul i dispariia populaiilor de
amfibieni a putut fi legat de o serie de alte modificri la nivelul mediului, printre care
poluarea chimic, precipitatiile acide, radiaiile UV n exces, introducerea specilor exotice,
patogeni, exploatare de ctre om, i fluctuaii naturale ca i diminuarea umiditii,
diminuarea ozonului atmosferic. Astfel amfibienii trebuie considerai ca un grup indicator
crucial i s fie analizat ca atare.

BIOMARKERI-BIOTESTE-INDICATORI BIOCENOTICI
TEHNICI MOLECULARE
Ultimul deceniu a inregistrat o explozie n ceea ce privete numrul i varietatea de analize
moleculare legate de expunerea i toxicitatea precum i bioaccesibilitatea incluznd sisteme
raportoare moleculare i biomarkeri moleculari
SISTEME RAPORTOARE MOLECULARE BACTERIENE
Bioraportorii celulari msoar rspunsul intracelular al unui microorganism (bacterii) la un
semnal extracelular chimic sau fizic, putnd astfel realiza o msurare indirect a
concentraiei contaminantului i a gradului su de solubilitate (bioaccesibilitate). Utilitatea
acestor sisteme bioraportoare deriv din facilitatea cu care este msurat semnalul (n general
bioluminescen). Mai mult, datorit faptului c rspunsul pentru numeroi bioraportori cu
specificitate chimic se refer la contaminantul care traverseaz membrana celular, aceste
teste pot fi relevante i pentru ali receptori ecologici.
Majoritatea bioraportorilor se bazeaz pe o construcie diferit a ADN care este inserat n
cromozomul bacterian, care apoi va fi pus n contact cu o prob contaminat. ADN -ul
modificat leag genele care rspund la prezena contaminantului de gene raportoare al
cror rspuns poate fi uor detectat. Frecvent utilizate sunt grupurile luxCDAB sau luxAB,
seturi de gene provenite din bacteria marin Vibrio fisheri responsabile de fenomenul de
bioluminescen
Alte gene raportoare frecvent utilizate sunt luc responsabil de sinteza luferazei la licurici,
lac-Z care sintetizeaz beta galactozidaza
Dup o perioad de incubaie corespunztoare n care organismul este n contact cu proba,
semnalul este citit cu un luminometu sau alt aparat (Reid et al.,1998; McGrath et
al.,1999;Shaw et al.,2000). Recent este tot mai frecvent utilizat gena pentru proteina verde
fluorescent izolat de la meduza Aequorea victoria (Tsien, 1998;Cha et al.,1999; Hansen
and S rensen,2000;Joyner and Lindow,2000;Stiner and Halvorson,2002), datorit usoarei
detecii i costului metabolic minim necesar celulor gazd.
n funcie de ADN ul modificat bioraportorii pot avea specificitatea ngust sau intenionat
larg. n primul caz, raportorul este destinat s rspund la un singur produs chimic organic
7

sau anorganic, astfel nct rspunsul la un alt compus este considerat indezirabil.
Majoritatea raportorilor sunt bazai pe raportori i proteine reglatoare ale transcripiei care
rspund la un anumit compus (e.g.,Hg(II),arsen, zinc, cupru, cadmiu, plumb, toluen,
naftalen) (Selifonova et al.,1993;Heitzer et al.,1992,1994;Taurianen et al.,1998;Stiner and
Halverson,2002). De ex anumii bioraportori au fost creai astfel nct bioluminescena s
fie declanat n prezena contaminantului imt i s poate fi cuantificat.
Dac se dorete o specificitate mai larg, raportorul este constituit s capteze rspunsul
fiziologic fa de o gam larg de contaminani. Acest tip de AND este totodat bazat pe
utilizarea elementelor promotoare constitutive, caz n care bioluminescena este nregistrat
ca o msur a activitii celulare i elemente promotoare care exprim un rspuns simetric la
stresul celular (ex. promotorul recN) i elemente promotoare ale proteinelor de stres tip oc
termic.
Bioraportorii au potenialul s furnizeze n timp real date referitoare la accesibilitatea
compusului, ns durata scurt de via a bacteriilor nu este ntotdeauna optim pentru
dezvoltarea biosenzorilor capabili s monitorizeze pe termen lung contaminanii apoi sau
gazoi. O alt problem limitativ a biosenzorilor este sensibilitatea lor limitat care se
nscrie n limita de 1nM pentru anumite metale, toluen, naftalen, dar poate fi cu cteva
ordine de magnitudine mai mare pentru alii. De asemenea, bioraportorii pot avea stabilitate
genetic limitat, rezultatele lor pot fi confundate datorit nespecificitii (numeroi senzori
metalo-specifici se confrunt cu aceast problem), poate exista un rspuns substanial de
background i pot fi de asemenea efecte matrix sau rspunsuri semnal.
n general aceast tehnic este utilizat att pentru metale, ct i pentru compui organici.
Majoritatea sistemelor de tip bioraportor se bazeaz pe contactul intim dintre raportor i
matricea de mediu, astfel testul utilizeaz extracte de sol sau sedimente, soluia n care este
suspendat bioraportorul coninnd ct mai puin ap, pentru a se pstra ct mai fidele
condiiile din mediu.

Biomarkeri

Biomarkeri reprezint rspunsuri ale organismelor vii care pot indica expunerea la
contaminani, s prognozeze efecte nocive, sau s prezinte efecte nocive (Timbrell, 1998).
Un biomarker este un rspuns biochimic, fiziologic sau morfologic (cel mai frecvent la nivel
molecular), dar nu un indicator populaional sau ecosistemic. Rspunsul unui biomarker
arat dac un contaminant
este prezent n mediu
este accesibil organismelor
este prezent n concentraii suficient de mari i timp suficient de ndelungat n esuturile
i organele urmrite, pentu a determina un rspuns
Biomarkerii se clasific n biomarkeri de expunere i biomarkeri de efect. Un biomarker de
expunere indic prezena unui xenobiotic sau produii lui metabolici sunt rezultatul
interaciunii dintre un xenobiotic i anumite molecule sau celule int (de ex formarea unui
produs macromolecular). Aceti biomarkeri sunt utili n primul rnd, att n studii ecologice
ct i medicale, n stabilirea dozei contaminanilor, furnizand informaii asupra expoziiei pe
termen lung i a carcinogenezei. n general aceti biomarkeri reflect expunere recent,
dac nu, trebuie luat n considerare perioada de njumtire. Biomarkerii de expunere sunt
mult mai convenabil de determinat. De ex un contaminant sau metaboliii lui pot fi frecvent
pui n eviden n probe de snge, urin, lapte, fecale, ca i esuturi prelevate prin biopsie
sau necropsie. n timp ce produii macromoleculari furnizeaz un anumit grad de
specificitate i senzitivitate, ei sunt costisitor de evaluat i nu ntotdeauna corelai cantitativ
cu expunerea.
8

Biomarkerii de eefct indic n mod indirect expunerea i sunt definii ca orice alterare
biochimic, fiziologic, sau de alt tip, msurabil la nivelul unui organism, (care poate fi
recunoscut ca fiind o stare de depresie sau boal). Aceasta include inducerea unor proteine
(ex metalotioneine, i proteine de oc termic). Markerii care sunt rezultatul unui efect
patologic pot fi considerai separat de cei care reflect leziuni metabolice. Observaiile
clinice sau comportamentale pot de asemenea fi considerate ca un tip special de biomarkeri.
Biomarkerii de efect variaz mult n ceea ce privete specificitatea, senzitivitatea, utilitatea
i fezabilitatea. Utilizarea biomarkerilor este uneori ngrdit de faptul c acetia indic
efectul cumulativ al interaciunii dintre diferitele substane i reflect integrarea spaial i
temporal a expoziiei. n mod ideal diferii biomarkeri ar trebui utilizai pentru diverse
categorii de compui. Biomarkerii pot fi utilizai ca semnale imediate ale expunerii la o
substan nociv. Utilizarea lor pe perioade lungi de timp poate fi greu de interpretat dac
nu exist informaii suficiente asupra efectului.
Specificitatea biomarkerilor scade odat cu creterea nivelului de organizare, astfel markerii
moleculari sunt mai specifici dect cei de organe sau organismici.
Este relativ greu de corelat rezultatele din laborator cu cele din teren datorit diferenelor
interspecifice i impactului ecologic.
Cele mai comune metode de determinare a modificrilor aprute la nivelul ADN sunt:
msurtori directe ale modificrilor ADN; evaluarea procesului reparator al ADN;
determinarea mutaiilor prezente. Metalotioneinele reprezint o clas de molecule proteice
mici, bogate n cistein, care sunt capabile s lege ioni metalici, inductibile de ctre ionii de
Cd, Cu, Hg, Zn, Co, Bi,Ni, Ag. Citocromii P450 sunt o clas de hemoproteine prezente la
un numr mare de organisme i n toate esuturile mamiferelor, n special n ficat. Ele sunt
inductibile de ctre o serie de substane organice.
Unul dintre cei mai studiai biomarkerii este producerea proteinelor de stres. O larg
varietate de organisme de la bacterii la om produc proteine care ofer o anumit rezisten la
efectul nociv manifestat la nivel celular. Aceste proteine au fost iniial descrise n celule la
Drosophyla n timpul expunerii la temperaturi ridicate i au fost denumite proteine de oc
termic. Ulterior s-a descoperit faptul c o serie de factori de stres pot induce sinteza unor
proteine fiind intodus ulterior termenul de proteine de stres. Sinteza proteinelor de stres
poate fi indus att de metale ct i de compui organici. Se cunosc cteva familii de
proteine de oc clasificate dup greutatea lor molecular : Hsp90, Hsp70, chaperonina i
cele cu greutate molecular mic. S-a demonstrat c Hsp 70 poate fi utilizat pentru a
monitoriza expunerea lumbricidului Lumbricus terrestris la diferii contaminani din sol.
Analiza esutuli tubului digestiv de la Lumbricus terrestris relev prezena proteinelor din
familia Hsp70 att n urma expunerii la oc termic (control pozitiv) ct i n urma expunerii
la diferite substane toxice din sol: chloroacetamida i pentachlorofenol ca i metal gerele
(Pb +2, Cu +2, Hg +2)
Animale necontaminate transbordate n medii contaminate pot fi utilizate pentru studii de
disponibilitate.
Tehnici de expresie genic
Tehnicile de expresie genic, ca i ali biomarkeri cuantific un rspuns molecular la
prezena unui contaminant. n acest caz rspunsul este o alterare a expresiei genice la nivelul
trascripiei detectat prin msurtori ale diferitelor tipuri de ARNm. Principiul acestei tehnici
const n faptul c expunerea unui organism la o substan contaminant duce la formarea
unui tip particular de ARNm care va determina sinteza unei proteine i un rspuns celular
corespunztor. Asemenea biomarkeri genomici, pot funciona cu specificitate variat.
Tehnici la nivel organismic

O serie de bioteste la nivel organismic pot fi utilizate att pentru testarea biodisponibilitii
contaminanilor dar i pentru validarea testelor fizice i chimice. Biotestele pot fi mprite
n general, n dou categorii.
Teste de concentraie, care arat direct ceare este coninutul de contaminant din
esuturi. Asemenea teste sunt comun realizate pe plante, nevertebrate, peti, anumite psri
i mamifere cnd speciile n cauz reprezint receptori de interes. Aceste bioteste nu sunt
realizabile la nivelul microorganismelor. Cea mai comun analiz este aceea a concentraiei
compusului n esutul de interes iar cnd aceasta este msurat dup o expunere prelungit,
este vorba despre un test de bioacumulare.
Al doilea tip de test este testul de toxicitate care determin concentraia compusului la
care se obine un efect toxic, de exemplu supresarea creterii sau moartea.
Bioteste pe plante
Biotestele pe plante pot fi utilizate pentru a msura accesibilitatea unei game largi de
compui organici i anorganici. Pot fi generate dou tipuri de rezultate. n primul rnd
esuturile plantei pot fi analizate pentru a determina dac contaminanii de interes sunt
prezeni la nivele cu potenial toxic ridicat. A doua abordare este de a msura vitalitatea i
viabilitatea plantei. Dac planta poate crete n prezena contaminantului atunci se poate
trage concluzia c acesta nu este prezent n concentraie fitotoxic. Pentru ambele tipuri de
teste rezultatele pot fi utilizate att pentru determinarea accesibilitii compusului pentru
plante i organismele fitofage, dar i pentru a estima accesibilitatea contaminanilor pentru
alte organisme (realizndu-se o curelaie ntre concentraia plante animale). Aceste tipuri
de teste au fost utilizate n agricultur de decenii, i de asemenea pentru validarea testelor
realizate cu microorganisme. De exemplu, testele de cretere sunt n mod obinuit utilizate
pentru o mai bun nelegere a accesibilitii ierbicidelor. O serie de teste s-au concentrat pe
identificarea deficienelor n elemente particulare, dar sunt uor de adaptat pentru evaluarea
toxinelor. Concentraia compuilor toxici n plante a fost utilizat pentru a evalua efectul
contaminrii solului, ca i accesibilitatea tratamentelor in situ pentru reducerea acestor
efecte.
Studiile n teren au o durat de cel puin dou sezoane de cretere, n timp ce studiile n
medii controlate ntmpin adesea dificulti n mimarea modificrilor survenite n timp. n
funcie de scop rspunsurile urmrite sunt: simptome vizibile ale toxicitii, ntrziere a
cretere, sau simpla diminuare a biomasei, analiza esuturilor plantelor. Studiile n teren sau
n medii controlate sunt mai de durat i mai costisitoare dect dozarea direct a
substanelor, dar sunt necesare pentru estimarea efectelor poluanilor.
Alegerea testelor trebuie s ia n calcul, pe lng scopul urmrit i specia vegetal analizat,
condiiile experimentale, rolul contaminantului de interes n nutriia plantei i felul n care
acesta interacioneaz cu diveri nutrieni. De exemplu, metalele prezente n sol, sub form
de sruri, sunt mult mai accesibile plantelor dect concentraii comparabile prezente n situri
cu contaminare istoric. Este de asemenea important de neles mecanismul prin care
contaminantul este cel mai susceptibil de a cauza efect negativ asupra sntii. n anumite
cazuri contaminanii pot s nu fie fitotoxici, dar se pot acumula n esuturile plantelor i pot
determina efecte adverse la consumatori.
Metalele
Utilitatea testelor pe plante pentru a estima bioaccesibilitatea metalelor este dependent de
metalul investigat, traseul i compuii intermediari, precum i potenialul toxic al acestuia.
De ex. Zn, Ni, Cu i Mn sunt cunoscute ca fiind toxice pentru plante n condiii de teren.
Pentru aceste elemente, n cazul evalurii accesibilitii, trebuie luat n considerare

10

toxicitatea potenial. Pentru alte elemente, concentraia n esuturile plantelor, nu variaz

mult nici n condiiile creterii concentraiei n sol de cteva ori.
n general, Cd, Pb, As, Cr Co nu sunt fitotoxice chiar n cazul unei contaminri severe a
solului. Mai mult, Pb, As Cr i Co nu sunt absorbite n general de ctre plante n cantiti
msurabile. n cazul n care aceste patru metale au fost raportate ca fiind fitotoxice aceasta
se datora concentraiei la nivelul rdcinilor, nu n prile aeriene (consumabile) ale plantei.
Pentru aceste metale, plantele nu sunt cele mai sensitive i consumul plantelor nu este
relevant pentru procesele de bioacumulare la organismele superioare. Pentru alte metale,
consumul de plante cu concentraii crescute de metale poate fi o cale important de
contaminaree, chiar dac metalul nu este toxic pentru planta propriu-zis. Se cunosc de
exemplu cazuri de decese la om rezultate n urma ingestiei de plante cu concentraii crescute
de Cd (Kobayashi, 1978). Cu toate c simpla concentraie a Cd n plante nu este suficient
pentru a determina efectul asupra consumatorilor, aceasta este un important bioindicator al
gradului de accesibilitate a compusului. De asemenea, diferitele specii animale se pot hrni
cu diverse pri ale plantelor, care acumuleaz diferit elementele toxice.
Plantele sunt considerabil mai sensibile dect alte organisme la Mn i n special la Zn.
Fitotoxicitatea Zn este una dintre principalele probleme ale excesului de Zn n sol, datorit
faptului c Zn determin moartea plantelor la concentraii mai mici dect cele care
determin efecte negative asupra animalelor, fitotoxicitatea mpiedic astfel transmiterea
metalului la consumatori. Concentraiile Zn n plante sunt utilizate de asemenea pentru a
estima accesibilitatea metalului n funcie de tratamente cu diferite amendamente. Este
important de luat n considerare faptul c nu concentraia unui singur metal este asociat cu
toxicitatea la toate speciile vegetale. Douzeci de varieti de Glycine maxima crescute pe
soluri cu aceeai concentraie n Zn au acumulat diferit metalul i impicit au dezvoltat reacii
diferite la prezena lui. Patru varieti de Hordeum vulgare crescute n aceleai condiii au
prezentat concentraii de Zn cuprinse ntre 52 - 127mg/kg. Concentaiile toxice depesc
200 mg/kg (500-1500). n unele cazuri toxicitatea anumitor elemente este asociat cu
deficiena altora. De ex. toxicitatea Zn, Cu i Ni poate fi asociat cu cu deficitul de Fe.
Compuii organici
Utilizarea biotestelor pe plante pentru a testa accesibilitatea compuilor organici pentru
plante i animale nu este foarte bine documentat, testele de germinaie i cretere a
plantelor sunt n general utilizate pentru evaluarea eficienei ierbicidelor, dar aceste
substane organice sunt concepute astfel nct s ie accesibile doar pentru anumite categorii
de plante. n general acumularea acestor compui n plante pare s fie minim, probabil
datorit faptului c ei nu sunt eseniali creterii. Compuii hidrofili nu trec uor de poriunea
lipidic a membranei plasmatice la nivel radicular, n timp de compuii hidrofobi pot
penetra membrana dar nu pot ptrunde n xilem pentru a fi transportai n celelalte esuturi.
Msurarea compuilor organici n esuturile plantelor este de asemenea dificil. n general
este necesar marcarea radioactiv. Studiile au artat c anumite specii vegetale
metabolizeaz compuii organici dup absorbia lor (probabil cu contribuia rizosferei i a
microorganismelor endofite.
Aceasta este cauza pentru care biotestele pe plante nu sunt viabile n cazul compuilor
organici.
Bioteste care utilizeaz nevertebratele
O serie de teste sunt utilizate pentru a determina gradul de acumulare a compuilor organici
i a metalelor n nevertebrate. Aceste teste pot utiliza substrate specifice sau pot fi studii
experimentale care sunt utilizate pentru predicia acumulrii poteniale a contaminantului.
Variabilele urmrite sunt, acumularea n diverse esuturi, alterarea creterii i reproducerii,
mortalitatea. Astfel, asemenea studii pot reprezenta o msur direct sau indirect a
accesibilitii.

11

Au fost dezvoltate bioteste utiliznd reprezentani ai principalelor grupe de nevertebrate din

sol - protozoare, nematode (Coenorhabditis), anelide (lumbricide), Crustacee (izopode)
diverse insecte. Cele mai multe studii s-au concentrat ns pe lumbricide i pe colembole
(Folsomia candida). Oligochetele terestre ca i Lumbricus terrestris, Eisenia foetida,
Allolobophora chlorotica, Aporectodea caliginosa, triesc spnd galerii n sol n stratul
ssuperficial bogat n materie organic. Ele sunt bine studiate, uor de colectat, se reproduc
rapid i reprezint o parte important a majoritii ecosistemelor terestre, ceea ce le face un
obiect excelent pentru studiile toxicologice. Cercetrile n domeniu au inclus studii de
acumulare, supravieuire, reproducere, cretere ca i o serie de parametri imunologici i
fiziologici. n studiile care vizeaz creterea i reproducerea, indivizii aduli au fost cntrii
nainte de a fi incubai n sol cu supliment de diverse substane pe o perioad variabil (2156 zile). La terminarea studiului, acetia au fost recntrii, splai iar coconii colectai i
numrai.
Nematodele, n special Coenorhabditis elegans sunt buni biomonitori ai polurii solului.
cele mai frecvente studii sunt cele legate de mortalitate i mai puin de dezvoltare, dar n
ultima perioad s-au dezvoltat forme transgenice cu proteine de oc termic sau
metalotioneine legate la beta-galactozidaz, pornind de la izopodele terestre.
O serie de factori trebuiesc luai n considerare nainte de luarea unei decizii referitoare la
tipul de studiu in situ sau n laborator. Principalul avantaj oferit de experimentele de
laborator l constituie controlul asupra testului. Dezavantajele constau n gradul de
reprezentativitate, culturile de nevertebrate pot s difere de populaiile naturale, n ceea ce
privete capacitatea lor de a acumula poluani precum i tolerana lor fa de acetia. (exist
dovezi ale faptului c populaiile naturale dezvolt rezisten i pot acumula toxine n
cantiti mai mari dect indivizii din laborator. O alt problem o reprezint dac
experimentele de laborator sunt conduse pe o perioad sufficient de lung pentru a permite
formarea unei imagini corecte asupra fenomenului (se recomand cteva sptmni - o
lun). De asemenea se pune problema alegerii tipului de substrat, fie c este vorba despre
sol din teren sau sol de referin de laborator, n cazul n care se fac amestecuri de sol
trebuie s se in seama de gradul de omogenizare a particulelor cu coninut diferit de
poluant.
Teste utilizate pentru sedimente.
Att testele de laborator ct i cele de teren pentru analiza contaminrii sedimentelor, sunt
realizate pe nevertebrate bentonice. Aceast informaie poate fi n general obinut rapid i
aplicat n predicia gradului de contaminare precum i al acumulrii n cadrul reelelor
trofice. Se analizeaz similar nevertebratelor terestre concentraia substanei n esuturi,
precum i rspunsurile funcionale cum sunt alterarea creterii, reproducerii i mortalitatea.
Rate de accesibilitate n sol sau sedimente - Soil or Sediment Availability Ratios
(SARA)
Este o metod de utilizarea a organismelor pentru a estima accesibilitatea unui compus
organis sau anorganic vechi fa de unul recent present n sol sau sedimente. Aceasta se
realizeaz prin expunerea organismelor la substrate cu aport recent de substane (se adaug
substane n sol) i paralel expunerea la substrate cu poluani vechi n aceeai concentraie
(soluri sau sedimente poluate n urm cu perioad variabil de timp). Raportul obinut ntre
concentraiile la nivelul esuturilor d bioaccesibilitatea relativ. Cel mai frecvent pentru
aceste studii se utilizeaz lumbricide (Eisenia foetida).
Ulitiznd SARA, Belfroid et al. (1995) au msurat bioaccesibilitatea relativ a compuilor
hidrofobi, prezeni de peste 20 de ani ntr-u sol conatminat. Rezultatele arat c

12

accesibilitatea este cu 3% mai mic pentru compusul vechi fa de compusul nou introdus n
substrat. Aceast metod prezint un potenial sedeosebit pentru evaluarea indirecta
bioaccesibiliti substaanelor chimice prezente n sol sau sedimente pe o anumit durat i a
felului n care asocierea contaminanilor cu faza solid se schimb n timp.
Bioteste de concentratraie determin de asemenea fraciunea bioaccesibil a compuilor
asociai cu sedimentele, msurnd potenialul substanelor de partiionare n organismele
bentonice sau alte organisme acvatice. Aceste teste sunt adesea utilizate n calculul
factorului biotic de acumulare n sedimente BSAF (Biotic Sediment Accumulation Factors).
Asemenea bioteste sunt mai indicate atunci cnd contaminanii nu sunt toxici pentru
organismele acvatice dar pot suferi procese de bioacumulare i bioamplificare de-a lungul
lanurilor trofice putnd deveni puternic toxice la organisme superioare. Acesta este cazul
pentru o serie de compui organici cum sunt PCB i dioxina. Nevertebratele bentonice sunt
tolerante fa de expunerea la aceti compui datorit faptului c nevertebratele nu conin
receptori celulari pentru hidrocarburile aromatice care mediaz manifestarea efectului toxic.
Testele de concentraie pot fi realizate ca i n cazul solului, att pe teren ct i n laborator.
Studiile de teren care utilizeaz nevertebrate indigene cu o istorie cunoscut, sau studiile in
situ n care nevertebratele sunt plasate n cuti furnizeaz o imagine mult mai realist dect
studiile de laborator. Studiile in situ pe nevertebrate bentonice sunt adesea cele mai
dezirabile datorit faptului c nevertebratele bentonice se hrnesc adesea cu sedimente sau
meiofaun sau alge asociate cu sedimentele astfel nct n esuturile lor, contaminanii ating
mult mai rapid concentraii toxice dect la organismele superioare. Este important de
determinat dac nevertebratele au resurse trofice suficiente pentu ca rezultatul s fie
relevant.
Principala limitare a studiilor de laborator o reprezint felul n care se pot imita condiiile
naturale n laborator, din mai multe motive: substanele chimice pot avea nevoie de cteva
sptmni, luni sau chiar ani pentru a se lega de compui din sediment; felul n care
sedimentele colectate sunt manipulate pentru a fi utilizate la studiile de laborator poate
influena accesibilitatea anumitor compui; adugarea de substane chimice pentru
experimente poate deranja echilibrul altor compui i pot influena accesibilitatea acestora.
Cele mai frecvent utilizate nevertebrate bentonice sunt viermii, insectele, bivalvele.
n cazul habitatelor acvatice srace n sediment (apa interstiial), sunt utilizate teste de
durat scurt, altfel, contaminantul poate s dispar i testul va subestima bioacumularea i
toxicitatea.
Un alt tip de test este acela care testeaz bioaccesibilitatea potenial a contaminanilor prin
resuspensia sedimentului ntr-o coloan de ap. Este vorba despre o extracie urmat de un
test de biotoxicitate a lichidului extras. Sedimentele sunt amestecate cu ap n raport de 4:1
ceea ce determin o modificare a legturilor contaminant sediment i crete accesibilitatea.
Testul este important pentru contaminani care se acumuleaz via suprafee membranare
cum este cazul branhiilor.
Bioteste pe peti
Petii sunt utilizai n teste legate de contaminarea sedimentelor, att teste de teren ct i de
laborator. Acumularea biocontaminanilor din sedimente poate avea efect direct asupra
petilor i consumatorilor de peti, astfel, testele realizate pe peti pot fi folosite att pentru
determinarea efectului nociv al contaminanilor asupra petilor, dar i a felului n care
acetia se transmit la nivelele trofice superioare. Studiile in situ furnizeaz o imagine
integrat a expunerii la toate sursele (ingestie, contact dermal i absorbie la nivelul
branhiilor). Sunt posibile dou tipuri de studii de teren care utilizeaz petii ca bioindicatori:
pot fi colectai direct petii din zona de interes (se pune problema duratei expuneriil
apoluant, ncazul n care indivizii tranziteaz zona), sau amplasarea de cuti coninnd peti

13

n locaiiile afectate. Se urmrete bioacumularea, concentraia la nivelul diverselor esuturi

precum i mai multe rspunsuri fiziologice cum ar fi: supravieuirea i creterea.
n cazul petilor este relativ dificil s se fac distincia dintre diversele surse de contaminare
sediment, coloana de ap, hran. Petii sunt din aceast cauz exceleni integratori ai
contaminrii i nu pot estima accesibilitatea individual. O alt problem a studiilor in situ o
reprezint faptul c de cele mai multe ori datorit limitrii micrii petilor acetia nu au
hran suficient i trebuiesc hrnii alterndu-se n acest fel condiiile naturale.
n condiii de laborator au fost elaborate protocoale standard pentru determinarea acumulrii
i toxicitii metalelor grele i compuilor organici din ap i sedimente. Relevana
ecologic a testelor de laborator nu este ntotdeauna clar dar este util n elaborarea
modelelor de simulare a acumulrii de contaminant n peti.
Mamifere i psri
Ca parte a procesului de evaluarea a riscului ecologic att psrile ct i mamiferele au fost
utilizate pentru a monitoriza expunerea la contaminani. Cu toate c exist cteva diferene
ntre psri i mamifere, exist suficiente similariti pentru a putea fi considerate mpreun
atunci cnd facem referire la biotestele de toxicitate i acumulare. Vertebratele pot fi expuse
la reziduurile din sedimente, dar bioaccesibilitatea este mai relevant pentru contaminarea
solurilor. Acumularea la nivelul esuturilor i toxicitatea, ca i n cazul petilor este o
msur integrativ a expunerii. Pot fi utilizate animale santinel att n condiii de teren sau
n sisteme nchise n laborator n care solul este prelevat din siturile de interes. Exist o serie
de ci prin care vertebratele pot fi expuse contaminrii leagte de sol, incluznd consumul
direct al plantelor, przii i solului. Totui, exceptnd unele specii de anserifiorme, ingestia
direct a solului de ctre psri este rar. Astfel mai degrab testele se bazeaz pe
consumelde plante i prad, iar contaminanii sunt considerai a fi 100% accesibili (acest
lucru poate s nu fie chiar corect n cazul unor substane organice sau metale, dar este
adevrat pentru majoritatea reziduurilor organice neutre, cum este cazul PCB sau DDT).
Pentru calea consumului de hran, accesibilitatea contaminanilor n sol sau sedimente este
msurat determinnd fraciunea accesibil din prad mai degrab dect din prdtor,
utiliznd testele menionate anterior pentru nevertebarate i peti. De exemplu dac larvele
de diptere care triesc n sedimente contaminate cu PCB i definitiveaz metamorfoza, vor
deveni aduli,care vorfi nghiii de ctre psri insectivore. n cazul acesta fraciunea
bioaccesibil de PCB se calculeaz pornind de la insect i nu de la pasre. Este posibil
msurarea pornind direct de la prdtor, de ex. msurnd concentraia reziduului n dieta
psrii i fraciunea rmas n materiile fecale.
n anumite cazuri ingestia direct a solului poate fi o cale important de contaminare care
trebuie luat n calcul. De ex. psrile granivore care inger nisip i pietricele mici pentru a
le facilita triturarea. Determinarea fraciunii contaminantului n sol sau sediment care este
bioaccesibil la nivelul pipotei poate fi realizat prin experimente de hrnire artificial n
laborator. n cazul psrilor, esutul de interes pentru care se msoar nivelul
contaminantului este de obicei oul.
Alte studii sunt cele de teren care utilizeaz mamifere i psri slbatice sau domestice. Este
relativ dificil de estimat fraciunea de contaminant provenit din sol sau sedimente, datorit
varietii surselor de contaminare la care sunt expuse aceste animale. Totui n cazul n care
utilizarea sitului este bine cunoscut acestea pot fi utile pentru determinarea contaminrii
poteniale. n unele cazuri se pot introduce organisme santinel cu un regim alimentar foarte
bine cunoscut. Pentru galinacee, puii de gin sunt un bun surogat ca i animale santinel.
Psri santinel pot fi de asemenea plasate n cuti n zona de interes. O alt posibilitate este
amplasarea de cutii n care anumite specii vor nidifica, pentru a contrala contaminarea
potenial a unui grup cu un anumit regim trofic.

14

Un asemenea tip de monitoring nu poate clarifica procesele specificede bioaccesibilitate

deoarece contaminani regsii la psri sunt rezultatul integrrii unor multiple procese ce se
desfoar n vecintatea cuibului. Dac, concentraia contaminantului este msurat de
asemenea n sol, sedimente i n oferta trofic, atunci, se pot determina factorii de
bioconcentrare, care implicit include o msur a fraciunii bioaccesibile.
Teste la nivelul ecosistemelor
Comuniti microbiene
Nu exist teste care s ia n considerare ntreaga comunitate bacterian dintr-un sit afectat,
dar sau fcut o serie de ncercri bazate pe activitatea unor comuniti bacteriene ielepot fi
utilizate pentru estimarea bioaccesibilitii unui contaminant. Deoarece microoragnismele
reprezint peste 90% din biomasa din sol i contribuie n proporie mare la funciile
eseniale ale solului, cum sunt ciclul C i N, examinarea efectului contaminanilor la nivelul
comunitilor bacteriene este critic. i datorit faptului c bacteriile sunt n contact intim cu
solul i apa interstiial.
Comunitile microbiene pot fi investigate la dou niveluri fundamentale: cel al funcionrii
sistemului i al structurii comunitii. Funcionarea sistemului este cel mai adesea
investigat prin studiul ciclurilor eseniale (C, N). Mineralizarea carbonului poate fi dedus
din evoluia CO2 i msurat ca un nivel bazal sau ca rspuns la aportul unui substrat de
interes. O extensie a acestei metode se refer la estimarea utilizrii diferitelor surse de C.
Msurarea ciclului N este mai complicat i necesit o extracie selectiv a tipurilor de N
din matricea solului urmat de o analiz a acestora. O evaluare rapid i puin costisitoare a
funcionrii ntregului sistem poate fi fcut prin estimarea activitii unor enzime cheie
cum sunt dehidrogenazele, amilazele, fosfatazele, arilsulfatazele i celulazele (tehnica pune
problema separrii activitii microbiene de cea radicular).
Msurarea structurii comunitilor corelat cu activitatea microbian poate fi fcut prin
tehnici tehnici moleculare. Majoritatea tehnicilor analizeaz fraciunea lipidic sau acizii
nucleici. n ultimul caz, analiza se poate realiza cu sau fr amplificare.
Teste Mesocosm
Am discutat anterior despre teste realizate n teren prin plasarea de cuti cu diverse
organisme sau introducerea de aniamle santinel ntr-un anumit mediu. Cu toate c
realizarea unor asemenea studii n teren este de preferat, ea nu este ntotdeauna posibil.
Astfel imposibilitatea de a menine animale el n aceste condiii pe perioade lungi de timp
precum i imposibilitatea de a controla factorii exogeni, face ca rezultatele acestor teste s
fie uneori discutabile. Ca urmare au fost dezvoltate teste n condiii doar parial naturale, n
habitate controlate care mimeaz condiiile naturale, numite microcosm sau mesocosm, n
funcie de dimensiunea lor. Acestea permit un anumit grad de control asupra diverilor
factori. Mesocosmosul este o subdiviziune a ecosistemului (Giesy and Odum, 1980). Acesta
poate fi un sistem natural ngrdit sau un sistem complet artificial (gnotobiotic).
Mesocosmosul este n general utilizat n studiul proceselor populaionale, la nivelul
comunitilor sau la nivel ecosistemic, incluznd rspunsul la factori de stres sau substane
toxice. Aceste sisteme sunt de asemenea utile pentru validarea rezultatelor legate de
bioacumulare obinute prin diverse tehnici. Ele servesc ca i sisteme intermediare, att n
ceea ce privete dimensiuea ct i complexitatea i ca urmare trebuie s fie suficient de mari
pentru a avea anumite atribute, dar nu prea largi ca s mpiedice studierea i replicarea lor.
Mesocosmul poate include interaciuni complexe ntre diverse organisme i ntre ele i
mediul abiotic care mimeaz ct mai fidel relaiile din teren. Deoarece asemenea teste sunt
complexe ele sunt utile dar destul de costisitoare.

15

ELEMENTE DE FIZIOLOGIE TOXICOLOGICA

CONTACT I INTRARE
Termenii de contact i intrare sunt frecvent utilizai pentru a desemna modul n care
contaminanii interacioneaz cu i traverseaz membrana celular.
O serie de receptori micoorg. plante, animale, om i o serie de ci stau la dispoziia
contaminanilor i sunt implicate n procesele de bioaccesibilitate.

Ptrunderea prin membrana celular

Organizarea sistemelor biologice depinde n parte de prezena membranelor care servesc la
separarea compartimentelor biologice n interiorul unui organism dar i pentru separarea
organismului de mediul extern.
Capacitatea membranelor de a funciona ca i bariere selective este o funcie a structurii lor.
Membranele biologice sunt alctuite din fosfolipide care formeaz un dublu strat cu partea
hidrofob a moleculelor orientate spre centrul membranei i partea hidrofil spre exterior. n
aceast ptur exist molecule proteice mari, unele cu rol n transportul transmembranar al
substanelor fie prin crearea de pori prin care ptrund substanele, fie servind ele nsele ca
molecule transportoare.
Exist patru modaliti prin care substanele pot traversa membranele biologice.
Difuziune pasiv
n cursul difuziunii pasive, substanele chimice traverseaz membrana n sensul gradientului
de concentraie. Porii membranei ofer posibilitatea de micare a moleculelor, dar
dimensiunea lor este n general sczut (sub 4 nm), fiind accesibile doar substanelor cu
molecule mici, de cteva sute de Daltoni, sau mai mici. Porii sunt o cale important de
ptrundere pentru moleculele hidrofile mici. Difuziunea pasiv pentru celelalte molecule
necesit transport transmembranar. Rata de transport a acestor substane prin difuziune este
determinat de solubilitatea lor lipidic i greutatea lor molecular. Rata de trecere crete
odat cu gradientul de concentraie. Contaminanii neionici (organici) n general difuzeaz
prin membrana celular, astfel nct acumularea microbian a multor solveni hidrofobi (ex
hidrocarburile aromatice mono i polinucleate) sunt rezultatul unei difuziuni simple.
Elementele ionizate pot mpiedica difuziunea simpl. De aceea difuziunea transmembranar
a metalelor grele este limitat. Pentru acizii i bazele slabe, gradul de ionizare este controlat

16

de pH, ca urmare pH-ul este un factor determinant n gradul de absorbie al acestor

substane.
Difuziunea facilitat
n acest caz, substanele chimice se mic n direcia gradientului de concentraie, ca i n
difuziunea pasiv, dar micarea lor transmembranar este asistat de proteine transportoare.
Procesul nu necesit energie celular. Datorit specificitii proteinelor, acest proces
caracterizeaz doar anumite substane chimice, de ex. unele metale eseniale. De asemenea
se pare c unele substane cu proprieti fizico-chimice similare au aceleai molecule
transportoare (ex Cu i Mn la fitoplancton).
Difuziunea pasiv sau facilitat. nu exclude acumularea celular a contaminanilor (sau altor
substane chimice). Dac substana este rapid transformat prin complexare (cum este cazul
multor metale), conjugare sau conversie la un compus stabil (ex. Se).
Transportul activ
Transportul activ utilizeaz transportori proteine pentru a deplasa substanele chimice
mpotriva gradientului de concentraie, proces care necesit consum energetic sub forma
ATP. Ca i n cazul difuziei facilitate, exist o specificitate n legarea substanelor chimice
la proteina transportoare. Secreia activ la nivelul rinichilor a acizilor organici i bazelor se
bazeaz pe acest proces. Distincia major ntre transportul activ i difuzia faciliat, const
n dependena energetic a primului proces. n general majoritatea contaminanilor ajung n
celul prin difuziune pasiv sau facilitat. La microorganisme poate ns exista un export
activ al unor contaminani.
Fagocitoza i pinocitoza
Particulele de talie mare pot ajunge n celul prin fagocitoz, n cursul creia membrana
citoplasmatic nconjoar i nglobeaz o particul aflat la exteriorul celulei. Membrana
din jurul particulei formeaz o vezicul care apoi se detaeaz n interiorul celulei.
Macrofagele utilizeaz fagocitoza pentru a ndeprta componenii celulari afectai, a
distruge microoragnisme i a produce atigene. Celulele sistemului reticuloendotelial
folosesc fagocitoza pentru a nltura particulele din lichidul circulant. Pinocitoza este un
proces similar prin care sunt nglobare picturi de lichid. Fagocitoza i pinocitoza sunt
procese importante la mamifere. La Mytilus edulis a fost pus n eviden un proces de
fagocitoz a particulelor de fier, dar importana acestui proces este dificil de demonstrat
Accesul contaminantului n organismul animal
Exist trei ci de intrare legate de expunerea direct: ingestia, contactul dermic, inhalaia.
Absorbia la nivelul tractului gastrointestinal
Tractul gastrointestinal este principala care de acces a nutrienilor este de asemenea i
principala cale de acces a contaminanilor: Un contaminant coloidal sau particulat poate s
rmn n tractul digestiv de la cteva ore la cteva zile, suficient pentru ca acetia s fie
modificai.
n funcie de clasa de organisme luat n considerare procesele de absorbie pot fi diferite n
funcie de tipul de enzime prezente i concentraia lor, prezena fluidelor organice, pH,
potenial redox.
Nevertebrate
Digestia la nevertebrate este complex i relativ puin studiat. Este cunoscut totui faptul c
nevertebratele (cum este i cazul bivalvelor) prezint o digestie intraintestinal, urmat de o
digestie intracelular. Digestia intracelular este mai dezvoltat la animalele care pot
acumula metale care n condiii normale sunt cunoscute ca nefiind acumulabile. De ex
bivalvele marine cu capacitate deosebit de digestie intracelular pot asimila americiu
insolubil cu o eficien de 30%, de asemenea asimileaz Cr (III) din bacterii cu o eficien

17

de 90%, precum i metale care nu sunt n soluie, din celulele algale. n fluidele tubului
digestiv se pare c exist cantiti mari de aminoacizi i surfactani care sunt foarte eficieni
n solubilizarea contaminanilor metalici sau organici asociai cu sedimentele.
Relaia dintre aminoacizi i metale n tubul digestiv al nevertebratelor este n mod particular
intrigant. 35 de specii ne nevertebrate care se hrnesc cu suspensii au fost gsite ca avnd
concentraii exterm de variabile de metale i aminoacizi, dar puternic corelate.
Pentru nevertebratele din sol, importana relativ a ingestiei contaminanilor raportat la apa
din pori ca surs de expunere depinde de caracteristicile fizice ale animalului (corp moale
sau tare) i fiziologia tubului digestiv. Animalele cu corpul moale cum sunt lumbricidele i
unele larve de insecte sunt mai degrab expuse la contaminarea prin contact, n timp ce
nevertebratele cu cuticul sunt expuse primordial prin ingestie. Fiziologia nevertebratelor
terestre influeneaz procesul de accesibilitate la nivelul tubului digestiv. Mecanismul
digestiei nu este nici aici pe deplin cunoscut, un model a ncercat s fie elaborat pe baza
concentraiei de Cd, Cu, Pb i Zn din esuturile sp. Eisenia andrei, n funcie de pH, metal i
carbonul organic solubil. Modelul elaborat asum faptul c metalele solubile la pH ul
solului sunt absorbite transcutan n timp ce cele solubile la pH neutru sunt absorbite la
nivelul tubului digestiv.
Mamifere
Absorbia gastrointestinal la vertebarte i n special la mamifere este mult mai cunoscut.
Cavitatea bucal i stomacul pot reprezenta situri de absorbie dar majoritatea substanelor
se absorb la nivelul intestinului. Coninutul intestinal este permanent amestecat, dar n
vecintatea peretelui exist un strat apos numit ptura apoas fix de aprox. 30-100nm, iar
substanele chimice trebuie s difuzeze la nivelul ei pentru a fi absorbite. ntre aceasta i
membrana extern a enterocitelor (celule epiteliale ale lumenului intestinal) exist o alt
ptur care formeaz un mediu microacid. Aceast ptur este esenial pentru absorbia
acizilor i bazelor slabe deoarece pH-ul de aici determin gradul lor de ionizare i implicit
facilitatea cu care vor trece prin difuziune pasiv prin membrana enterocitelor. n general,
substanele chimice pot fi absorbite din intestin fie prin fie pe lng enterocite. Pentru a
trece prin enterocite, ele trebuie nti s traverseze membrana apical (difuziune pasiv,
difuziune facilitat, transport activ sau pinocitoz). Substana chimic trece prin membrana
bazolateral a enterocitului, prin membrana bazal ntr-un spaiu subepitelial al vilozitii
intestinale numit lamina propria. Enterocitele sunt conectate prin jonciuni strnse dar
acestea formeaz o etanare imperfect care permite trecerea apei i a moleculelor mici prin
canalele dintre celule i pot ajunge la nivelul laminei.

18

Structura vilozitatilor intestinale

Persorbtia particulelor la nivelul vilozitatilor intestinale

O alt modalitate de micare a moleculelor prin enterocite poart numele de persorbie.
Enterocitele sunt produse rapid i continuu i migreaz de la baza vilozitilor unde sunt
formate spre vrful lor. Odat ce ajung la vrf ele se desprind i sunt eliminate. n cursul
procesului de eliminare are lor o rupere temporar a jonciunilor dintre enterocite, iar
particulele de dimnsiuni mari pot ptrunde prin aceste bree. Odat ce substana ajunge la
nivelul laminei intr n circulaie traversnd membrana capilarelor sangvine sau limfatice.
Ex PCB intr n circuitul limfatic.
Majoritatea contaminanilor se absorb prin difuziune pasiv dar exist i excepii. O serie de
nutrieni anorganici au un transport facilitat (Fe, Zn, Mn, etc), Cu se transport activ.
Transportul Pb se desfoar n competiie cu ali ioni (Fe, Zn, Ca, P, Mg).

19

Cu toate c se consider c o substan trebuie s fie n soluie pentru a fi absorbit,

exist dovezi de absorbie a unor particule inclusiv coloizi.
Absorbia la nivelul pielii
n contrast cu absorbia la nivelul tubului digestiv i la nivel pulmonar, nu exist mecanism
de absorbie a substanelor chimice ataate la particule de sol sau sediment prin pielea
intact. Ca urmare, transferul transcutan necesit disocierea prealabil de matricea solului
sau sediment. Tegumentul mamiferelor are trei pturi epiderm, derm i hipoderm.
Epiderma este cornificat

Structura pielii la mamifere

la suprafa. Corneocitele sunt legate ntre ele prin structuri numite corneosesmozomi.
Coninutul de ap al corneocitelor este n general redus, mai ales n celulele de al suprafa.
Care conine doar 15% ap. Spaiile dintre corneocite sunt pline cu lipide intercelulare.
Structura i compoziia stratului cornos face din acesta o adevrat barier nu doar
mpotriva pierderilor de ap, dar i mpotriva microbilor i substanelor chimice. Durata
vieii unui corneocit este de aprox. 2-3 sptmni dup care este nlocuit prin exfoliere. Sub
epiderm se gsesc alte dou starturi derma i hipoderma, stratul profund. Stratul cornos
reprezint cea mai important barier mpotriva absorbiei tegumentare a substanelor.
Substanele pot traversa stratul cornos prin corneocite i spaiile interstiiale, sau traversnd
lipidele interstiiale (substanele liposolubile). Substanele hidrosolubile traverseaz
corneocitele. Straturile subadiacente nu reprezint bariere reale pentru nici o categorie de
substane. Foliculii piloi i glandele sebacee i sudoripare ofer de asemenea posibilitate de
ptrundere n derm i hipoderm a substanelor chimice. n jurul foliculilor piloi exista
sebum prin care pot trece substanele lipofile, n timp ce glandele sudoripare ofer
posibilitate de ptrundere substanelor hidrofile. n pofida suprafeei relative sczute a
acestor formaiuni, se pare c, contribuia lor la absorbia cutanat este semnificativ.
Factori care influeneaz absobia transcutanat:
Vrsta individului
Localizarea anatomic (permeabilitatea scade n ordinea genital > cap > trunchi >
membre)
Hidratarea stratului cornos poate reduce rolul su de barier
Boli ale pielii (psoriazis, ichtioz, inflamaii, arsuri)

20

Absorbia prin tractul respirator

Substanele chimice pot ptrunde n tractul respirator sub form de gaze, vapori sau
particule. Aerul inhalat traverseaz cavitile nazale si cile respiratorii extrapulmonare.
Absorbia contaminanior la acest nivel nu este foarte bine cunoscut, dar se pare c
absorbia la nivelul mucoasei nazale este cauza carcinogenezei n inhalarea vaporilor de
formaldehid la roztoare. Complexitatea organizrii cavitilor nazale la unele mamifere
face ca rezidena aerului contaminat la acest nivel s fie relativ mare, permind o
important absorbie i depunerea substanelor particulate. Mucoasa care cptuete cile
respiratorii extrapulmonare este prevzut cu un epiteliu ciliat. Particulele care intr n
contact cu mucoasa, ader la mucus i sunt eliminate prin micarea cililor (eventual
nghiite). Cea mai important parte a absorbiei aer loc ns la nivel pulmonar prin pereii
alveolelor pulmonare. Suprafaa alveolelor este cptuit n proporie de 90% cu celule
epiteliale aplatizate numite celule TipI, restul fiind cptuit cu celule cuboidale Tip II care
secret un lichid surfactant. Lichidul surfactant reduce tensiunea n alveole.

Pentru a facilita schimbul de gaze pereii alveolari sunt foarte apropiai de cei ai capilarelor,
n multe cazuri cele dou epitelii fiind chiar fuzionate formnd o membran bazal. n
lumenul alevolelor exist macrofage care nltur particulele i microorganismele prin
fagocitoz.
Absorbia contaminanilor depinde de gradul lor de solubilitate. Asfel contaminanii
hidrosolubili sunt absorbii, n mare parte, la nivelul mucoaselor cilor respiratorii
extrapulmonare. Contaminanii cu solubilitate mai redus cum este ozonul, ajung la nivel
pulmonar, unde datorit structurii alveolare sunt absorbite. Absorbia lor depinde de
concentraia n aer i de solubilitatea n snge.
Localizarea absorbiei aerosolilor i particulelor depinde de dimensiunea particulelor. Cele
mici vor putea ptrunde pn la nivelul alveolelor n timp ce particulele de dimensiuni mari
rmn de obicei la nivel nasofaringian. Cele din partea anterioar a poriunii nasoafringiene
pot fi eliminate prin strnut, iar cele din partea posterioar sunt nghiite. Particulele cu
dimensiuni cuprinse ntre 2-5 ajung n regiunea bronhiilor unde fluxul de aer ncetinete,
permind acestor particule se adere la mucusul ce cptuete lumenul bronhiilor. Vor fi
transportate napoi prin micarea cililor i eventual nghiite. Particulele de dimensiuni mai
mici de 1 ajung la nivelul alveolelor. Aici pot fi fagocitate de macrofage sau pot mtrunde

21

n circulaia limfatic deoarece celulele endoteliale din vecintatea capilarelor limfatice sunt
poroase. n unele cazuri particulele pot fi solubilizate parial sau total la nivelul alveolelor.
Absorbia poluantilor de catre plante
La nivelul plantelor cea mai important cale de absorbie este absorbia radicular. Ionii i
moleculele organice intr n contact cu rdcinile prin transpiraie, transport difuziv i
transport facilitat de microorganisme. Ajuni la suprafaa rdcinilor, contaminanii solubili
au capacitatea de a ptrunde n esuturile radiculare prin vaporii de transpiraie sau printr-o
serie de mecanisme care faciliteaz absorbia nutrienilor. n general este acceptat faptul c
la nivelul rdcinilor se absorb ioni liberi, necomplexai, dar se pare c exist excepii, fiind
identificate i complexe organo-metalice. Absorbia macronutrienilor este mult mai bine
cunoscut dect cea a contaminanilor. Au fost identificate o serie de mecanisme de control
al absorbieii macronutrienilor de ctre plante. Aceste mecanisme pot reprezenta modaliti
de ptrundere a contaminanilor n plante. Unul dintre mecanisme este alterarea pH-ului prin
efluxul de de ioni de H care genereaz un gradient elecrochimic ce faciliteaz transportul
cationilor i anionilor.
Asemenea pompe protonice necesit adesea energie furnizat de ATP. Exist de asemenea
canale ionice i el pot reprezenta o modalitate de intrare pentru unii ioni, dar funcuionarea
lor nu este foarte bine cunoscut.

n ceea ce privete micronutrienii, la nivelul membranei plasmatice au loc reacii de

reducere care faciliteaz transportul Fe i probabil sunt implicate i n absorbia altor
cationi. n general selectivitatea acestor mecanisme este limitat.
Mai puin cunoscute sunt mecanismele legate de absorbia substanelor organice. Multe
ierbicide acioneaz direct pe cale foliar, altele ptrund prin respiraie i dar puine au acces
prin sistemul radicular.

22

Acumulare i efectele acumulrii

Pe lng faptul c substanele chimice cum este cazul substanelor caustice pot afecta
organismele prin simplul contact, dar majoritatea contaminanolor i exercit efectul toxic
dup ptrunderea n organism. Dup ptrundere, substanele chimice interacioneaz cu unul
sau mai muli constitueni celulari determinnd alterri ale funcionalitii acestora. Soarta
contaminanilor ptruni n organism poate fi variat i complex. Aciunea diferitelor

enzime i eficiena mecanismelor de excreie pot influena profund concentraia i forma

substanei chimice care atinge inta sa biologic. Deoarece, magnitudinea i natura efectului
va fi determinat n parte de forma i concentraia contaminantului la situl su de aciune
consideraia acestor factori este esenial n nelegerea consecinelor contaminrii. Dac
concentraia este prea mic, sau este prezent sub o form care nu poate interaciona cu inta,
nu se obine un rspuns biologic. Pe de alt parte, n unele cazuri contaminantul poate atinge
concentraii letale pentru organism. ntre aceste dou extreme efectul contaminantului este
detrimental dar neletal de ex.
reducerea activitii metabolice
afectarea reproducerii
creterea sensibilitii la stresul fizic i chimic
Soarta contaminanilor care ptrund n organism
Distribuie, acumulare, sechestrare
Capacitatea unei substane chimice de a se mica ntr-un organism va depinde ntr-o
oarecare msur de aceeai factori care nflueneaz absorbia. Substanele chimice care pot
difuza uor prin membrane vor tinde s fie rspndite n organism n timp ce, cele care au
abilitate limitat de difuziune vor fi localizate, mai puin n cazul n care exist transportori
care faciliteaz transportul lor. O substan chimic poate s migreze liber n organism sau
legat de alte substane. n general o substan va petrece mai mult timp legat la ali
compui n organism. Pentru a trece printr-un mediu apos cum este sngele sau limfa,
moleculele puternic lipofile trebuie s se lege la un compus hidrosolubil. De ex. PCB i
pesticidele organoclorurate se gsesc n snge asociate la lipoproteine. Ionii metalici sunt de
asemenea legai la proteine, iar anumite proteine (metalotioneinele, transefrina,
ceruplasmina) se pare c funcioneaz n primul rnd ca transportori ai unor ioni metalici.
Chiar i substane chimice relativ hidrofile pot fi legate la proteine plasmatice cum este
albumina. Aceast legtur este aproape ntotdeauna reversibil, dar ea afecteaz unde, cu
ce vitez i ce cantitate de contaminant se distribuie n organism.
Unele substane tind s se acumuleze n organele int dnd natere la depozite. Dac
afinitatea organismului pentru un sit de acumulare este mare, cum este cazul substanelor

23

liposolubile pentru esutul adipos, aceasta poate determina acumulri masive ale
contaminantului. De ex este bine documentat prezena la esutului adipos n concentraii
mari comparabile a substanelor liposolubile (PCB, pesticide organoclorurate, cum este
DDT-ul). Datorit faptului c Pb poate nlocui Ca n esutul osos, acesta servete ca sit de
acumulare pentru Pb, cca 95% din metal avnd acest localizare. Aceste situri ed acumulare
por aciona ca detoxifiani, prin ndeprtarea contaminantului din siturile int, i reducerea
toxicitii lui. Pe de alt parte contaminanii acumulai n aceste situri nu sunt supui
mecanismelor normale de eliminare cum este cazul metabolismului i excreiei i rmn n
organism. O eliberare lent a contaminanilor din aceste depozite poate avea ca urmare
eliminarea lor.
Aceast acumulare poart numele de bioacumulare i este exprimat n termeni de
concentraie tisular (mg/kg). Aceasta este rezultatul expunerii directe din mediul abiotic
(sol, sedimente, ap, aer) sau indirecte din hran.
Bioconcentrarea se refer la acumularea legat de expunerea direct. La organismele la
care raportul mas/suprafa este mic, expunerea direct la contaminantul din mediu este
principala surs de contaminare putnd duce la bioconcentrarea acestura. Pentru
organismele aflate pe nivele trofice superioare bioconcentrarea prin contact direct este mai
puin important, crescnd importana bioacumulrii pe cale alimentar.
Termenul de sechestrare este utilizat atunci cnd compusul este acumulat din mediu dar
este inactivat n esuturile animale sau vegetale. Aceti contaminani pot fi accesibili ntr-o
oarecare msur animalelor care consum organismul n cauz. Plantele adesea stocheaz
substane n vacuole, sau contaminantul poate fi legat covalent de lignin. Similar animalele
pot lega att compuii anorganici ct i organici astfel nct compusul nu mai este disponibil
pentru a interaciona cu biomolecule structurale sau funcionale.
Metabolism i biotransformare
Procesele de biotransformare sunt comune la toate organismele vii. Termenul de
metabolism este adesea utilizat pentru totalitatea acestor procese. Totui metabolismul se
refer n general la tranformarea substanelor naturale necesare vieii dect la transformarea
contaminanilor. Ca urmare, pentru a sublinia deosebirea se utilizeaz termenul de
metabolism xenobiotic. n termeni tehnici, metabolismul xenobiotic elimin contaminanii
din organism prin transformarea lor n substane netoxice. Din perspectiv toxicocinetic,
contaminantul este eliminat odat cu tansformarea sa n primul metabolit. n cele mai multe
cazuri efectul toxic al contaminantului este invers proporional cu intensitatea procesului de
detoxifiere metabolic i eliminare.
n linii mari, metabolismul xenobiotic const n transformri enzimatice care confer o
hidrosolubilitate crescut, facilitnd eliminarea prin urin sau bil la animale sau
translocarea prin esuturile foliare la plante. De asemenea poate fi schimbat configuraia
substanei, i n consecin toxicitatea sa este diminuat.
Pe de alt parte este posibil i trasformarea xenobioticului ntr-un produs mai toxic. De
exemplu, majoritatea contaminanilor considerai carcinogeni produc cancer prin
transformarea lor n metabolii toxici.
n linii mari metabolismul xenobiotic se caracterizeaz prin dou faze:
faza I cuprinde reacii de oxidare, reducere, hidroliz
faza II sinteza conjugarea legarea de zaharuri, aminoacizi i ali compui

Excreia
Excreia const n eliminarea contaminantului din snge i rentoarcerea sa n mediul
nconjurtor. Spre deosebire de metabolism, excreia este un mecanism fizic. Calea i viteza
excreiei depinde n mare parte de proprietile fizico-chimice ale contaminantului.

24

Principala cale de excreie este cea renal. Substanele hidrosolubile din plasm, nelegate la
proteine pot s treac n urin ca urmare a ultrafiltrrii glomerurale. Teoretic poate avea loc
i un proces de difuziune pasiv la nivelul tubulilor, dar acesta este cel mai probabil
nesemnificativ cantitativ, gradientul de concentraie favoriznd reabsorbia la nivelul tubilor
i nu excreia. Anumite substane pot fi substrat transportor pentru anioni i cationi organici
la nivelul tubulilor proximali care secret activ acizi i baze organice n urin. Unele
substane (ex unele proteine mici) pot fi reabsorbite la nivelul tubulilor. O substan chimic
poate evita excreia dac este reabsorbit odat cu aceste proteine. Un asemenea exemplu
este cel al metalotioneinei cu Cd.
Excreia se poate produce i prin materiile fecale, procesul fiind ns de importan
secunadr, mai complex i mai puin cunoscut dect excreia renal. Unii contaminani
traverseaz tubul digestive fr a fi absorbii, n special unele metale. Alte substane sunt
transportate de la nivelul ficatului prin bil (excreie biliar) i eliminate prin materiile
fecale.
Alte ci de excreie: pulmonar (pentru substanele volatile), transpiraie, saliv, pr, unghii,
lapte
Excreia prin lapte este important ca mijloc de contaminare pentru nou-nscui. Aici se
regsesc n special substanele liposolubile (PCB, DDT, dioxina), dar i metale ca Pb,
percum i pesticide.
Eliminarea contaminanilor la plante se realizeaz prin stomate (compuii volatili) sau odat
cu pierderea frunzelor.

EFECTUL CONTAMINANILOR
Modificarea activitii celulare
Contaminanii afecteaz negativ celulele prin producerea de disfuncionaliti celulare,
modificri ale capacitii de mentena sau afecteaz capacitatea reparatorie. Acestea pot
determina alterarea funciilor celulare, mutaii i chiar moartea celular.
Disfuncionaliti celulare
Tipul disfuncionalitii celulare induse de contaminani depinde de rolul moleculei int.
Dac molecula int este implicat n procese de reglare celular, atunci afectarea ei poate
duce la dereglri ale expresiei genice i/sau ale activitii celulare. Dac molecula este
implicat n special n procese de mentena intracelular, atunci aciunea contaminantului
asupra ei poate afecta capacitatea de supravieuire a celulei. Interaciunea contaminantului
cu molecule int implicate n funciile extracelulare influeneaz activitatea altor celule,
organe sau sisteme de organe. Aadar, contaminanii pot induce o serie de disfuncionaliti
dintre cele mai importante fiind alterarea expresiei genice. Aceasta se poate produce prin
afectarea elementelor direct responsabile de transcripie, a mecanismului translatiei, a
sintezei, stocrii i eliberrii moleculelor semnal. De ex transcripia este controlat de o
serie de factori proteici de transcripie i reglatori ai promotorului. O serie de compui
naturali (hormoni, vitamine) influeneaz expresia genic, anumii compui pot mima
aceste substane naturale. Un exemplu interesant este alterarea activitii estrogenice. O
serie de contaminani sunt cunoscui estrogenici (inclusiv metaboliii hidroxilai al PCB)
avnd ca rezultat o diviziune celular anormal, apoptoz i alterarea sintezei proteice.
Modificri ale mentenanei celulare
Toate celulele sintetizeaz substane endogene: compleci macromolecualri, membrane,
organite celulare, menin mediul intracelular i produc energie. Contaminanii care afecteaz
aceste funcii afecteaz capacitatea de supravieuire. Datorit faptului c att alterarea

25

fosforilrii oxidative, ct i creterea Ca citoplasmatic afecteaz supravieuirea celular,

aceste procese sunt considerare ca mecanisme finale ale toxicitii celulare letale.
Sinteza ATP este un proces complex care are mai multe etape, inclusiv fosforilarea ADP.
Alterarea oricrei etape afecteaz sinteza ATP. Dintre cei mai cunoscui contaminani care
acioneaz pe aceast cale sunt fenolii. La eucariote acetia acioneaz la nivelul membranei
mitocondriale inhibnd reaciile de fosforilare oxidativ. Unii contaminani pot crete
nivelul Ca intracelular, prin creterea influxului sau blocarea efluxului. Acest fapt are ca
urmare o pierdere a rezervelor energetice, disfuncionaliti la nivelul microfilamentelor i
activarea enzimelor hidrolitice. Alte mecanisme celulare care cauzeaz moartea sunt,
distrugerea membranelor celulare, a citoscheletului i a sintezei proteice.
Contaminanii pot afecta de asemeena celule care sunt specializate n suportul altor celule i
esuturi. Este cazul contaminanilor care acioneaz la nivelul ficatului
Alterarea proceselor reparatorii
Procesele reparatorii au loc la nivel molecular, celular sau tisular, moleculele implicate n
procesele reparatorii fiind proteinele, lipidele sau AND ul. Un exemplu de contaminani
care afecteaz procesele reparatorii sunt cei care transform gruprile tiol din proteine n
grupri disulfid. Gruprile tiolice sunt eseniale pentru funcioanrea multor proteine.
Disfuncionaliti
Dac este afectat funcionarea celulei ea este n continuare viabil dau nu mai este capabil
s menin fiziologia normal a organismului. Consecinele sunt dependente de tipul de
celul afectat. De ex. alterarea funciilor imunocitelor poate compromite sistemul imunitar
i poate crete susceptibilitatea contactrii de boli infecioase, sau dimpotriv poate
determina o hipersensibilitate a sistemului imunitar. De obicei funcia este restabilit dup
ndeprtarea substanei. Celulele care au suferit mutaii pot avea un nou fenotip. Cea mai
pregnant problem n acest context este cea legat de creterea i multiplicarea celular
necontrolat. Rezult neoplasme benigne i maligne care pot determina morbiditate i
mortalitate, n general n corelaie cu funciile altor celule. n anumite situaii, transformarea
celulei normale n celul malign este determinat de prezena continu a contaminantului.
Cu toate acestea, ndeprtarea contaminantului nu poate transforma o celul malign n
celul normal.
Consecinele morii celulare depind de numrul de celule moarte i de tipul acestora. Dac
moartea celular survine n condiiile n care procesele reparatorii sunt neafectate i
funcioneaz rapid, recuperarea poate fi complet. Dac nlocuirea celulelor moarte este
nceat sau incomplet, esutul poate suferi modificri n arhitectura sa i implicit n
funciile sale. Distrugerea celulelor hepatice ca urmare a ingerrii unor cantiti mari de
medicamente este compensat printr-o nlocuire rapid. Afeciunile hepatice cronice cauzare
de alcool sau alte substane pot determina adesea nlocuirea celulelor moarte cu esut fibros,
diminund numrul de celule viabile.
La nivel organismic alterarea activitii celulare poate avea efecte acute sau cronice.
Efectele acute sunt relativ severe, cel mai sever fiind letalitatea. Alte efecte acute: pierderea
n greutate, letargia, modificrile comportamentale, morbiditate general. Efectele cronice
pot fi letale sau subletale i adesea pot altera creterea, reproducerea, comportamentul.
Procese la nivele superioare
Procesul de evaluare a riscului implic pe lng analiza efectului contaminanilor asupra
organismelor individuale dar i a efectului lor asupra modului n care acestea
interacioneaz cu mediul i alte organisme, cum se hrnesc, i structura reelelor trofice.
Transferul de-a lungul lanurilor trofice este cea lai important cale de expunere la

26

contaminani n numeroase ecosisteme frecvent avnd loc procese de biomagnificare i

totodat fiind responsabil de diseminarea contaminrii.

BIOINDICATORI UTILIZAI N MONITORINGUL POLURII AERULUI

Metodele fizice i chimice utlizate n investigarea poluarii aerului nu furnizeaz informaii
suficiente asupra riscului asociat expunerii. Spre deosebire de acestea, metodele biologice
permit evaluarea direct a riscului. Datele biologice pot fi utilizate pentru a estima impactul
efectiv i potenial asupra altor organisme, inclusiv omul. Adesea, datele biologice nu
trebuiesc colectate de manier continu ci doar periodic. Biomonitoringul este n general
mai puin costisitor i poate fi utilizat pentru studii me termen lung i pe suprafee mari fr
a necesita echipamente sofisticate.
Cel mai frecvent n monitorizarea polurii aerului sunt utilizate plantele.

Criterii pentru alegerea bioindicatorilor

S fie uor de msurat, i s descrie rspunsuri referitoare la ecosistemul n cauz
S aib un rspuns distinct, capabil s prezic felul n care speciile sau ecosistemul
vor rspunde la stres
S msoare rspunsul cu o acuraatee i precizie acceptabile
S se bazeze pe cunoaterea poluantului i a caracteristicilor sale
S ia n calcul utilizarea final a datelor
Indicatorii bioacumulativi sunt adesea considerai biomonitori. Plantele pot funciona i ca
indicatori bioacumulativi, prin acumularea poluanilor n esuturi, fr a manifesta un
rspuns evident
Vom prezenta n continuare o sintez a principalilor bioindicatori vegetali ai polurii
aerului, pe tipuri de poluare

27

METALELE GRELE
Briofitele
Muchii pot indica prezena metalelor grele precum i gradientul lor de concentraie.
Utilizarea briofitelor reprezint o metod efectiv n monitoringul polurii aerului din mai
multe motive:
Numeroase specii au distribuie larg i sunt prezente ntr-o gam larg de habitate
Sunt de dimensiuni reduse i uor de manipulat
Majoritatea pot fi gsite tot timpul anului
Nu prezint cuticul i sistem radicular i i obin substanele nutritive direct din
depunerile atmosferice. Au o capacitate mare de bioacumulare, n special a metalelor grele,
concentraia reflectnd depunerile fr adaosul unui aport prin sistemul radicular.
Compararea probelor proaspete cu cele din ierbare dau posibilitatea unei analize
retrospective a polurii
Acumularea de cantiti mari de metale grele faciliteaz detectarea acestora
Compararea parametrilor utilizai n diferite studii care au folofit muchii ca
bioindicatori
No.
de Tip
de
Scara
Speciile
Elementele
Autor
situri
investigaie

Multinational

Multinational

Multinational

Nationala
Suedia

National
(Norvegia)

Hylocomium
splendens
Pleurozium
schreberi

Hylocomium
splendens
Pleurozium
schreberi
Hylocomium
splendens
Pleurozium
schreberi
Hylocomium
splendens
Pleurozium
schreberi

Hylocomium
splendens

Denmark
185
Finland
As, Cd, Cr, Cu,
534
Fe, Ni, Pb, V,
Norway
Zn
522
Sweden
839

Spatial
- temporal

As, Cd, Cr, Cu,

Fe, Ni, Pb, V, As above
Zn

Spatial
temporal

Ruhling 1995

Standard
As, Cd, Cr, Cu,
reference
Fe, Ni, Pb, Zn
sites

Spatial
temporal

UN ECE 1993

Approx.
1000 forest Spatial
inventory temporal
plots

Bernes 1990

Ag, Al, As, Br,

Cd, Cl, Co, Cr,
Cs, Cu, Fe, I,
512
La, Mn, Mo,
Na, Ni, Pb, Rb,
Sb, Sc, Se, Sm,

i Rasmussen et
al. 1988

Spatial
temporal

i Schaug et al.
1990

28

National
(Norvegia)

Hylocomium
splendens

National
(Norvegia)

Hylocomium
splendens

National
(Norvegia)

Hylocomium
splendens

National
(Olanda)

Regional
(Nigeria)
Regional
(Polonia)

Urban
industrial
(India)
Urban
industrial
(Suedia)
Urban
industrial
(Canada)

Pleurozium
schreberi

Polytrichum
juniperinum
Pleurozium
schreberri
Hylocomium
splendens
Plagiothecium
i denticulatum,
Bryum
argenteum
Sphagnum sp.
i
Hypnum
cupressiformae
i

Th, V, Zn
Al, As, Br, Cd,
Co, Cr, Cu, Fe,
523
I, Ni, Pb, Sb,
Sc, Se, V, Zn
Al, As, B, Ba,
Be, Bi, Ca, Cd,
Co, Cr, Cs, Cu,
Fe, Ga, Hg, La,
Li, Mg, Mn, 495
Mo, Na, Ni,
Pb, Rb, Sb, Sr,
Te, Th, Ti, U,
V, Y, Zn
Hg

198

Al, As, Ba, Br,

Ca, Ce, Co, Cr,
Cs, Cu, Fe, Hg,
I, K, La, Mg,
66
Mn, Na, Ni,
Pb, Rb, Sb, Sc,
Se, Sm, Th, V,
Zn
Cd, Cu, Mn,
56
Pb, Zn

Spatial
temporal

i Steinnes et al.
1994

Spatial
temporal

i Berg
1995

Spatial
temporal

Steinnes and
Andersson
1991

Spatial
temporal

Kuik
and
Wolterbeek
1995

et

al.

Spatial

Kakulu 1993

Pb, Cd, Ni, Zn,

2
Cu

Spatial

Godzik
and
Grodzinska
1991

Cd, Cu, Fe,

9
Mn, Ni, Pb, Zn

Spatial

Gupta 1995

Cr

Spatial
temporal

Approx 30

Bernes 1990

Isothecium
stoloniferum

Cd, Cr, Mn,

62
Ni, Pb, Zn

Temporal

Pott
and
Turpin 1996

Transplantari
(Groenlanda)

Sphagnum
girgensohnii

Cd, Ce,
Nb, Nd,
Th, U, Zn

Spatial

Pilegaard
1993

Transplantari
(Quebec)

Pleurozium
schreberri

Hg

Spatial

Evans
and
Hutchinson

La,
Pb, 12
4

29

(1996)
Transplantari
(Scotia)

Sphagnum

Cd, Co, Cr, Cu,

Fe, Mn, Ni, Pb, 47
Zn

Spatial
temporal

i Gailey
and
Lloyd (1993)

MONITORING
Metoda de selectie
Una dintre problemele majore o constituie utilizarea speciilor indigene sau transplantate.
Aceasta va afecta tipul de specie selectat i ntr-o anumit msur i analizele chimice
efectuate.
Transplantrile
Sunt tehnici experimentale n care plantele sunt transplantate mpreun cu substratul lor
original din zone nepoluate de control n zone poluate. Este comparat rspunsul cu zonele de
control. Pleurozium schreberri a artat concentraii crescute de Hg n urma transplantului
din zona montan a Canadei n sudul Quebecului.
Tab. Elemente de luat n calcul n alegerea metodei pentru monitoringul depunerii de
metal egrele Gailey and Lloyd, 1993)
Prelevare in situ
Transplant
Este necesar o
perioadde
Rezultatele pot fi obnute n cteva zile
supraveghere de 1 an pentru a
surprinde
efectele
variaiilor
sezoniere
Rezultatele ilustreaz poluarea
Rezultatele demonstreaz poluarea n anii precedeni
numai pe perioada de investigare
Acumularea este de obicei peste nivelul detectabil Concentraiile
atinse
pot
fi
datorit expunerii ndelungate
nedetectabile dac perioada este
scurt
Supraveghere minim i risc minim de distrugere
Risc potenial de distrugere
Costuri legate de transport i analizele chimice

Vrsta potenial scurt a probelor indigene

Rate de depunere dificil de estimat

Costuri adiionale de materiale,

transport crescut i pregtirea altor
probe
Densitatea siturilor de analiz i
poziionarea lor sunt sub controlul
investigatorilor
Pot fi calculate rate de depunere
datorit controlului timpului de
expunere la poluant

Concentraiile metalice pot reflecta influene ale altor

Concentraiile de poluant pot si
factori cum sunt vrsta plantei, metalul din substrat i
mult mai direct legate de poluarea
contaminarea local
atmosferic
Plantele pot fi stresate i pot prezenta modificri Plantele provin din medii relativ

30

morfologice/fiziologice care afecteaz acumularea pe curate

termen lung a anumitor poluani
Ali factori: resurse materiale i financiare, gradul de acuratee solicitat, timpul disponibil,
suprafaa de investigat, gradul i tipul de poluare
Alegerea speciei
n biomonitoringul depunerii de metale criteriile pentru alegerea speciilor sunt: abundena
ei,
tolerana, caracteristicile bioacumulrii, facilitatea colectrii, elementul de monitorizat.
Speciile ectohidrice de muchi, care nu au un sistem de conducere a apei difereniat, absorb
direct substanele pe toat suprafaa i sunt mult mai utile dect speciile endohidrice la care
se difereniaz un asemenea sistem i o suprafa cuticular.
Utilizarea speciilor epigee sunt uneori recomandate n Scandinavia pentru estimarea
depunerii de metale grele la nivel regional.

Selecia sitului
Densitatea i localizarea staiilor de colectare depinde de tipul de studiu. La studiile pe scar
larg sunt necesare mai multe staii pentru a detecta modificrile graduale de-a lungul zonei
investigate. Dac sunt utilizate specii indigene. Locaia staiilor va depinde de distribuia
natural a speciilor. La specii transplantate alegera staiilor este la discreia investigatorului.
O atenie deosebit trebuie acordat de asemenea tipului de substrat care poate influena
compoziia specific, sigurana i accesibilitatea staiei.
Trebuiesc luate n considerare alte surse de metale grele dect depunerile atmosferice de
natur antropic:
Procesele naturale n special depuneri ale emisiilor din surse marine
Aportul prin rdcini din roc sau sedimente
Particule minerale transportate de vnt.
n studiile de monitoring al bioacumulrii este recomandat standardizarea prelevrii
probelor, pregtirii i tehnicilor analitice.
Lichenii
Lichenii sunt biomonitori efectivi ai depunerilor de metale ei presentnd o serie de
caracteristici comune cu briofitele. Cresc ncet i asimileaz metalele rapid dar le elibereaz
ncet. Concentraia metalelor n talul lichenilor a fost demonstrat ca fiind corelat cu
nivelul atmosferic al acestora. Lichenii au fost primii indicatori bioacumulativi utilizai n
cazul surselor punctiforme de poluare. Rolul lichenilor n programele de monitoring
multinaionale este n primul rnd corelat cu poluani gazoi.
Alegerea speciilor
Metalele se pot acumula n cantitate mare la nivelul talului lichenilor prin captarea de
particule insolubile, schimb ionic extracelular, absorbia i transport activ.
Natura i tipul metalului n studiu este determinant n alegerea speciilor. Speciile care au
capacitate de acumulare decantiti mari de metale sunt mai indicate pentru procesul de
biomonitoring.
Specii de licheni utile ca bioindicatori pentru metalele grele.( Kovcs, 1992)
Acarospora strigata
C. squamosa
P. polydactyla
Alectoria capillaris
C. uncialis
P. rudecta
A. nigricans
Cornicularia aculata
P. sulcata
A. ochroleuca
C. divergens
P. saxatilis
A. sarmentosa
C. muricata
P. taractica

31

A. tremonti
Dermatocarpon miniatum
Peltigera canina
Caloplaca aurantia
Evernia mesomorpha
P. rufescens
C. trachyphylla
E. prunastri
Pseudoevernia furfuracea
Cetraria cuoullata
Hypogymnia enteromorpha Ramalina duriaei
C. delisei
H. physodes
R. farinacea
C. islandica
Lasallia papulosa
R. stenospera
Cladonia alpestris
Lecanora alphoplaca
Rhiyoplaca melanopthalma
C. arbuscula
L. conizaeoides
Sphaerophorus fragilis
C. convoluta
L. frustulosa
Stereocaulon evolutum
C. chlorophaea
L. novomexicana
S. nanodes
C. cristatella
Letharia vulpina
S. pascale
C. deformis
Micarea trissepta
Umbilicaria grisea
C. furcata
Parmelia borrei
U. hirsuta
C. gonecha
P. caperata
U. mammulata
C. impexa
P. chlorochroa
U. polyphylla
C. mitis
P. conspersa
U. pustulata
C. rangiferina
P. fuliginosa
U. sporodochroa
C. stellaris
P. plittii
Varrucaria nigrescens
C. sylvatica
Colectarea probelor
Sunt folosite mai multe strategii de colectare. n studiul lichenilor epifiti se practic n
general colectarea la o nlime de 1,5 2 m deasupra solului. Unii autori susin c este
necesar colectarea de jur mprejurul trunchiului, alii consider c nu este important
Studii de distribuie a speciilor
Studiile de distribuie a speciilor de licheni sunt mai puine comparativ cu utilizarea lor n
monitoringul poluanilor gazoi.
Fungii
Utilizarea macrofungilor n monitorizarea depunerilor atmosferice este relativ rar. Kovcs
(1992) recomand urmtoarele categorii de fungi n studiile de acumulare a metalelor grele:
Descompuntori ai materiei organice (ex. Agaricus arvenis, Lycoperdon giganteum)
Fungii din micorize (ex Amanita rubescens, Boletus edulis)
Descompuntori ai lemnului (ex. Pleurotus ostreatus, Polyporus betulinus).
ntr-un studiu realizat n pdurile din Ungaria i care a urmrit aceste grupe s-a constatat c
descompuntorii lemnului conin concentraii mai mici de metale dect reprezentanii
celorlalte grupe. Anumite metale grele nu sunt absorbite de ctre fungi, sau sunt absorbite
n cantiti mici, n funcie de specie
Coninutul n metale la Coprinus comatus (g g-1 substatn uscat) ( Kovcs 1992)
Element
Red spoil
Coprinus comatus picior
Coprinus comatus plrie
Cd
16.1
0.3
0.8
Fe
92962
1646
918.1
Ni
87.7
1.4
1.4
Pb
48.1
0.0
0.0

32

Plante superioare
Plantele superioare sunt utilizate ca monitori ai polurii n zone puternic poluate unde
lichenii i muchii sunt abseni. O serie de plante superioare au capacitate de bioacumulare.
Aerosolii metalici polueaz solul i plantele. Metalele grele din aer sunt preluate de ctre
plante din sol prin sistemul radicular i translocate n celelalte organe. Depunerile
particulate la suprafaa frunzelor pot fi afectate de o serie de factori cum sunt, dimensiunea
particulelor, curenii de aer, orientarea frunzelor i caracteristicile suprafeelor. Metalele
depuse pot fi splate de apa din precipitaii, resuspendate sau reinute pe suprafaa frunzei.
Gradul de retenie este influenat de condiiile atmosferice, natura poluantului,
caracteristicile suprafeei plantei, dimensiunea particulelor.
Absorbia radicular depinde de caracteristicile solului cum sunt pH-ul, coninutul de
materie organic. Nivelul acumulrii depinde de asemenea de specia vegetal i de metalul
n cauz. ntr-o investigare a acumulrii Cd, Cu, Ni i Pb n esuturile speciei Achillea
millefolium i Hordeum vulgare n Danemarca s-a remarcat c Cu i Pb din esuturile
vegetale sunt corelate cu depunerile atmosferice i nu cu concentraiile din sol, n timp ce Ni
i Cd sunt corelate att cu depunerile atmosferice ct i coninutul metalului n sol.
Plantele au demonstrat rspunsuri morfologice i fiziologice la poluarea cu metale
grele, unele dintre acestea putnd fi utilizate ca biomarkeri.
Alegerea speciilor
n linii mari plantele bioindicatoare se pot grupa n plante ierboase i lemnoase
Speciile ierboase - Kovcs (1992) recomand utilizarea plantelor ruderale ca i
indicatori bioacumulativi datorit abilitii lor de a acumula cantiti mari din aceste
elemente, fr a fi afectate. Plantele ruderale au de asemenea o distribuie larg, permind
realizarea de comparaii ntre regiuni.
Unele specii pot fi mai eficiente n reinerea particulelor metalice atmosferice dect
altele. O msur a acestei eficiene o reprezint factorul de acumulare aerian (AAF),
reprezentat de urmtoarea ecuaie:
AAF (m3g-1) = PAc (mg g-1 mas uscat)/CA (mg m-3)
Unde
PAc - contribuia atmosferic a metalului n plant
CA concentraia metalului n atmosfer
Plantele lemnoase att decidue ct i conifere pot fi utilizate n monitoringul polurii
atmosferei cu metale grele. Coniferele pot indica poluarea pe termen lung. Inelele de
cretere pot reflecta variaii anuale ale concentraiei metalelor n mediu.
Dintre speciile arboricole sensibile la contaminarea metalic menionm: Betula
pendula, Fraxinus excelsior, Sorbus aucuparia, Tilia cordata and Malus domestica. Exist
de asemenea numeroi bioindicatori: Ailanthus glandulosa, Celtis occidentalis, Salix alba,
Tilia tomentosa, Sambucus nigra, Quercus robur , Fagus silvatica, Robinia pseudoacacia.
Populus nigra ssp italica a fost recomandat de o serie de studii ca fiind un bun bioindicator
al acestui tip de poluare, aceast specie fiind omogen din punct de vedere genetic, uor de
identificat i cu distribuie larg.
Organele investigate
Coninutul n metale variaz de la un organ la altul. De exemplu la plantele ierboase,
rdcinile i frunzele conin cantiti mai mari de metale dect ramurile i fructele. Aceast
acumulare, variaz cu specia vegetal vrsta plantei vrsta frunzelor i metalul analizat.

33

La speciile lemnoase concentraia metalelor n frunze este de cca trei ori mai mare
dect n restul organelor, acestea fiind cel mai frecvent analizate. Scoara este util pentru
monitorizarea polurii pe termen lung, fiind direct expus la poluani.
Metode de esantionare i analiz
Sunt preferai arborii i arbutii solitari de pe care sunt prelevate ramuri de 1 an cu
frunze, n general de la o nlime de 5-6 m, n timp ce plantele ierboase se colecteaz n
totalitate. Deoarece solul conine adesea concentraii mai mari de metale grele dect prile
aeriene ale plantelor, este recomandat analiza rdcinilor n procelul de monitoring.
Replicarea testelor este foarte important, deoarece concentraia poluanilor variaz i
intraspecific. (O variaie de sub 50% este considerat acceptabil).
Dozarea metalelor se realizeaz prin spectrofotometrie cu absorbie atomic (AAS),
activare neutronic (NAA) i spectrofotometrie cu mas plasmatica inductiv cuplat inductively coupled plasma mass spectrophotometers (ICP-MS)
Testele care utilizeaz plante transplantate nu sunt foarte comune spre deosebire de
licheni i muchi.
Concluzii
Plantele au capacitatea de a indica prezena elementelor i gradientul lor de
concentraie. Briofitele i lichenii sunt cei mai buni biomonitori ai polurii atmosferice cu
metale grele datorit capacitilor lor de bioacumulare. Acestea mai au avantajul distribuiei
largi, facilitii manipulrii, absenei cuticulei i a sistemului radicular, ceea ce le permite s
reflecte exclusiv acumularea atmosferic. Analiza briofitelor indigene este adesea utilizat
n programe naionale i internaionale de monitoring. Tehnicile sunt aplicate ca i metod
practic de stabilire i caracterizare a surselor de depunere. Asemenea monitoring pe termen
lung i la scar larg este necesar n elaborarea aciunilor transfrontaliere de restaurare. Att
lichenii ct i briofitele au fost utilizai n monitorizarea polurilor industriale i urbane n
termeni spaiali sau/i temporali. Utilizarea fungilor este limitat, dar anumite grupe sunt
mai buni acumulatori dect altele. Plantele superioare sunt preferate ca i bioindicatori ai
monitoringul polurii atmosferice n zone puternic poluate acolo unde lichenii i briofitele
sunt abseni. Una dintre cele mai comune tehnici este cea de analiz a frunzelor. Utilizarea
parametrilor biochimici i fiziologici n bioindicaia polurii atmosferice nu este practicat
n mod obinuit. Ar putea fi luate n calcul unele rspunsuri ale plantelor superioare. De
asemenea puin frecvent este cartarea speciilor.
Extrem de important este stabilirea concentraiilor de fond. Stabilirea programului de
monitoring va implica selecia speciilor corespunztoare, staiilor de prelevare (sau de
amplasare n cazul transplanturilor), modul de colectare, frecvena colectrilor, metalele de
analizat, tipul tehnicii de analiz chimic i de analiz a datelor.
POLUANII GAZOI
BRIOFITELE
Majoritatea datelor din literatur referitoare la poluanii gazoi i briofite fac referire la
efectul acestora asupra comunitilor de briofite n ansamblu.
(SO2)
Distribuia speciilor
Exist studii referitoare al efectul SO2 asupra distribuiei briofitelor. Analiza subfosilelor
cuaternare a demonstrat o reducere a pturii de Sphagnum n depuneri corespunztoare
perioadei revoluiei industriale n Anglia.

34

Specii de briofite care sunt cel mai puternic aefctate de poluarea atmosferic n Anglia,
UK (from Adams and Preston, 1992)
Epifite
Epilite
Specii care pot creste ca
epifite sau epilite
Cryphaea heteromalla
Frullania dilatata
Neckera pumila
Orthotrichum lyellii
O. obtusifolium
O. schimperi
O. speciosum
O. stramineum
O striatum
O. tenellum
Tortula laevipila
Ulota crispa var. Crispa
U. crispa var. Norvegica

Grimmia affinis
G. decipiens
G. laevigata
G. orbicularis
G. ovalis

Antitrichia curtipendula
Leucodon sciuroides

Diminuarea concentraiei SO2 atmosferic n ultima perioad a determinat o recolonizare a

briofitelor n siturile poluate, dar uneori recolonizarea nu are loc din mai multe motive:
Speciile puin evidente sunt greu de identificat
Pot manifesta un rspuns mai ncet la diminuarea cant de SO2
Unele specii pot coloniza zone n care nu au fost prezente anterior
Speciile pot s nu recolonizeze zonele n care au fost prezente datorit modificrilor
survenite la nivelul habitatelor.
Creterea nivelului altor poluani atmosferici (oxizii de azot, ozonul)
Recolonizarea depinde de mobilitatea speciilor i de proximitatea sursei de poluare
Azotul i compuii si (N, NOx i NH3)
Compararea concentraiei de azot n esuturile briofitelor din ierbare i cele colectate recent
ofer o imagine a evoluiei polurii de-a lungul timpului. Un asemenea studiu a fost realizat
n Marea Britanie. ntr-un studiu al depunerilor acide din Finlanda s-au tratat experimental
suprafee forestiere cu sulfat de amoniu timp de un an. Pleurozium schreberi i Dicranum
polysetumi au fost mai afectate la depunerile de S i N dect plantele vasculare. Biomasa
briofitelor a descrescut cu 60%, iar coninutul tisular de N a fost mai mare dect n zonele
de control.
Alte gaze
Briofitele par a fi sensibile de asemenea la creterea concentraiei de O3. (Sphagnum
recurvum i Polytrichum commune)
Lichenii
Comunitile de licheni corticoli i saxicoli arat modificri la prezena de poluani
atmosferici, n special (SO2), compui fluorurai (F), depunerea de compui cu azot i ozon.
Ei sunt n mod special utili pentru monitorizarea polurii pe perioade lungi. Cele mai
numeroase lucrri legate la bioindiactori ai polurii aerului se refer la licheni.

35

Alegerea metodei de monitoring

Monitoringul poate fi calitativ sau cantitativ i poate utiliza o singur specie sau
modificrile la nivelul comunitilor. Alegerea metodei depinde de scopul studiului, aria
zonei de interes, resursele disponibile, detaliile dorite. n acest sens pot fi dezvoltate
urmtoarele tipuri de studii:
care urmresc modelele de distribuie a diverselor specii de licheni;
studii ale rspunsului fiziologic sau biochimic
studii de transplantare a diverselor specii de licheni
Distribuia
Monitoringul distribuiei urmrete prezena sau absena unor specii n rspuns la prezena
unor poluani, reducerea distribuiei unor specii i recolonizarea speciilor asociate cu
creterea calitii aerului.
Pe baza comunitilor de licheni a fost descris un indice de puritate atmosferic (IAP) care
reprezint o imagine fitosociologic cantitativ care necesit colectarea unor date ca
frecvena i/sau procentul de acoperire, precum i un factor de toleran la toxicitate.
Valorile IAP cresc odat cu complexitatea comunitilor, respectiv cu ndeprtarea de sursa
de poluare. Aceste valori pot fi de asemenea proiectate pe hart pentru a da o imagine a
gradului de contaminare. Studiile fitosociologice sunt mai potrivite pentru monitoring
temporal dect spaial i prezint dezavantajul dea fi dificil de realizat.
O scal fitosociologic pentru estimarea polurii acide n Germania (dup Wirth, 1988), 1:
resisten sczut, 14: resisten mare
1
Lobarietum pulmonariae subass cu Lobaria amplissima
1
Nephrometum laevigati
2
Gyalectetum ulmi
3
Usneetum florido-neglectae
3-4
Ramalinetum fastigiatae
4
Parmelietum acetabuli cu Anaptychia ciliaris
5
Usneetum filipendulae
5-6
Physietum adscendentis cu Physconia distorta, Physica stellaris, Ph. aipolia
6
Bacidia rubella - Aleurodiscus-ass.
6
Leprarietum candelaris
7
Pertusarietum hemisphaericae
8
Parmelietum caperatae (Flavoparmelia caperata afectat dac este prezent)
8
Pyrenuletum nitidae
9
Opegraphetum vermicelliferae
9-10
Porinetum aeneae
10
Hypogymnia physodes-Parmelia sulcata-comm
11
Chaenothecetum ferrugineae
12
Bullietum punctatae
13
Lecanoretum conizaeoides
14
Pleurococcetum vulgaris
Informaii suplimentare pot fi obinute din observaiile modificrilor morfologice i ale strii
de sntate a lichenilor. Pot fi observate de asemenea modificri fiziologice cuantificabile ca

36

o msur a stresului cauzat de poluare. Dezvoltarea tehnicilor de laborator a permis

elaborarea unor asemenea proceduri.
Bioacumularea - O serie de studii au demonstrat corelaii pozitive ntre coninutul
elementelor nemetalice n esuturile lichenilor i concentraia lor atmosferic. Monitorizarea
acestor concentraii nu poate da o imagine real a gradului de poluare, dar poate indica
zonele cu depuneri mai mari sau mai mici. Avantajul const n faptul c, metoda poate
indica zonele cu impact naintea altor efecte detectabile.
Transplantarea unor specii de licheni este frecvent utilizat pentru a demonstra efectul
poluanilor atmosferici gazoi
Algele
n general utilizarea algelor ca biomonitori ai polurii aerului nu este foarte frecvent.
Dezvolatrea algelor epifite de obicei coincide cu reducerea sau dispariia lichenilor epifitici.
Algele verzi rspund pozitiv la creterea concentraiei de N, i exist studii care
demonstreaz c dispariia unor licheni ca urmare a polurii cu SO2 este urmat de
recolonizare epifit cu alge. Utilizarea algelor ca bioindicatori are avantajul metodei facile i
nedistructive de prelevare. O metod este fotografierea digital urmat de determinarea
densitii clorofiliene din ptura algal.
Plantele superioare
Literatura legat de plantele superioare i poluarea atmosferic este vast. Cea mai comun
metod utilizat n bioindicaie este cea a efectelor vizibile, care sunt n mod obinuit
nespecifice i pot indica diferite tipuri de stres. De asemenea efectele structurale, fiziologice
i biochimice pot fi urmrite. Acestea cel mai adesea apar naintea modificrilor
morfologice i reprezint detectori precoce i mult mai specifici.
Concentraia critic conceptul concentraiei critice sau nivelului critic este tot mai des
utilizat. Aceasta nu este legat direct de biomonitoring. Principiul conceptului const n
faptul odat cu determinarea sensibilitii unui ecosistem la depunerea acid sau la poluanii
gazoi se poate calcula o ncrctur critic a depunerii acide sau un nivel critic al gazelor.
Sub acest nivel, ecosistemul nu va fi afectat semnificativ. Aceste valori sunt comparate cu
valorile reale n diferitele situri afectate i poate fi iniiat reducerea emisiilor i controlul
acestora.
Alegerea speciilor
Plante ierboase semimature i mature sunt cele mai utilizate n studiile de monitoring.
Vrsta frunzelor pare s fie important, astfel frunzele tinere de Petunia sunt extrem de
eficiente ca bioindicatori ai polurii cu SO2. Gladiolus gandavensis este un excelent
bioindicatori al polurii cu floruri. n general la plantele anuale, plantele tinere sunt mai
sensibile (nu e valabil la plantele perene). Speciile lemnoase sunt utilizate de asemenea n
studii de monitoring, fie c este vorba de organe, indivizi grupuri de indivizi sau pduri
ntregi. Frunziul copacilor reflect modificrile legate de poluare pe timp relativ scurt (1-2
ani). Grupuri de arbori sunt utilizai ns pentru monitoringul pe termen lung. Este acceptat
faptul c coniferele sunt indicatori mai sensibili dect foioasele. Acest fapt poate fi atribuit
expunerii continue la poluarea atmosferic, lonegvitatea lor i rspunsului la cantiti mici
de contaminani.
Efectele vizibile constau n: necroz, descompunerea esutului din jurul stomatelor, cloroz,
pigmentaie rocat, modificarea parametrilor de cretere cum sunt greutatea, suprafaa
foliar, diametrul tulpinii. La conifere ca urmare a polurii cu SO2 apare necroza acelor
tinere, decolorarea celor de vrst medie.
Rspunsul biochimic /fiziologic la poluare este dependent nu doar de specie dar i de
stadiul de dezvoltare al plantei vrst i starea de nutriie a plantei. Studiile care urmresc

37

aceste modificri pot fi realizate n teren dar i n laborator prin fumigaii ale unor culturi
vegetale.
Variabilele urmrite sunt:
intensitatea fotosintezei i conductana stomatelor
cantitatea de clorofil
coninutul n metabolii (aminoacizi, polizaharide, raport ATP/ADP)
activitatea enzimatic
ultastructura
analiza inelelor de cretere (creterea inelelor anuale)
creterea i funcionarea radicular
metode multivariate care combin mai muli parametri
COMPUII ORGANICI
Compuii organici includ hidrocarburile aromatice policiclice (PAH), hidrocarburile
clorinate, bifenili policlorinai (PCB) i etilena. Biomonitoringul compuilor organici
utiliznd plantele nu este foarte comun. Avantajul acestui tip de monitoring este faptul c
ncrctura de baz este considerat nul, toi compuii organici persisteni fiind de origine
antropic. Majoritatea biomonitoringului compuilor organici mplic plante care au
capacitatea de bioacumulare a acestor substane. Putem vorbi de un monitoring pasiv, n
care este observat vegetaia natural i un monitoring activ care detecteaz prezena
poluanilor atmosferici prin amplaasrea de plante test (santinel) al cror rspuns la prezena
contaminantului este cunoscut. Se poate realiza de asemena o analiz a esuturilor.
Muchii i lichenii par s fie bioacumulatori ai compuilor organici i sunt astfel utilizai n
programe de biomonitoring
Plantele superioare sunt utilizate att ca bioindicatori de acumulare dar i ca indicatori de
efect prin manifestarea de modificri evidente.
O asemenea modificare o reprezint anomaliile de cretere n prezena etilenei. La conifere
apar ace nglbenite, necroz i cderea conurilor ca urmare a expunerii la etilen.

38

BIOACCESIBILITATEA CONTAMINANILOR N SOL I SEDIMENTE

Definiii ale bioaccesibilitii i termeni asociai
Definiie
Bioaccesibilitate
Un element chimic este bioaccesibil dac este prezent sub form sau poate fi
transformat n ioni liberi care pot fi absorbii de ctre plant ntr-un interval de
timp relevant pentru creterea i dezvoltarea ei, i odat absorbit afecteaz
ciclul de via al plantei
n general utilizat pentrua descriegradul i rata absorbiei unui xenobiotic care
intr n circulaia sistemic ntr-o form nealterat din situl de expunere
Accesibilitatea unei substane chimice pentru un animal, plant sau bacterie.
Poate fi determinat prin msurarea absorbei, toxicitii i biodegradabilitii

Sursa
Sposito,
1989

Hrudy et.
Al. 1996
Linz
i
Natale,
1997
Un concept care descrie abilitatea unei substane chimice de a interaciona cu NEPI 1997
organismele vii vii
Accesibilitatea contaminanilor pentru microorganisme, din punctul devedere al Sayler et.
metabolismului lor, abilitii lor de cretere pe aceste substane, de modificare a Al. 1998
fiziologiei celulare i probabild de modulare a rspunsului genetic
Cantitatea n care o substan poate fi absorbit de ctre un organism viu i Barttelle i
poate cauza un rspuns advers fiziologic i toxicologic
Exponent,
2000
Termen utilizat pentru a indica msura n care o doz atinge situl ei de aciune Wilkinson,
sau un fluid biologic din care substana are acces la situl de aciune
2001
Bioaccesibilitatea absolut
Fraciunea sau procentul unei doze extrene care atinge circulaia sistemic,
respectiv raportul dintre doza intern i doza aplicat. Acest raport mai este
denumit i factor de bioaccesibilitate (BE)
Battelle i
Bioaccesibilitatea relativ
O msur a gradului de absorbie ntre dou sau mai multe dorme ale aceleiai Exponent
substane (ex. carbonatul de plumb, vs. acetatul de plumb) diferite substrate 2000
(hran, sol, ap) sau diferite doze. n conetxtul estimrii riscului ecologic,,
bioaccesibilitatea relativ este raportul dintre fraciunea absorbit din mediul
natural i fraciunea absorbit din mediul de dozare utilizat n studiul
detoxicitate
ALTE DEFINIII
Bioacumularea - acumularea total a contaminantului n esuturile unui Schnorr
organism pe orice cale (hran, sau faz solubilizat)
1996
Bioconcentraia acumularea unei substane direct din faza dizolvat prin
branhiile i epiteliile unui organism acvatic
Biomagnificarea procesul prin care bioacumularea determin o cretere a
concentraiei contaminanilor n esuturi de la un nivel trofic la altul
Biostabilizarea se refer la biodegradarea compuilor organici hidrofili Luthyetal
(HOC) labili i transformarea lor ntr-un reziduu care este mult mai puin 1997
accesibil i mobil.

39

MODALITI DE ESTIMARE A BIOACCESIBILITII COMPUILOR DIN

SOL SAU SEDIMENTE PENTRU DIVERII RECEPTORI ECOLOGICI.
Calea de expunere la Teste actuale
contaminant
Sol/sediment - nevertebrate
Metoda AVS
Teste de toxicitate cu
nevertebrate
terestre
i
bentonice
Teste de teren i laborator cu
nevertebrate pentrua msura
acumularea n esuturi
Sol/sediment - plante
Metode de extracie
Teste de toxicitate la specii
caracteristice , ex urmrirea
efectului asupra germinrii
i creterii
Expunerea la sol contaminat
n teren sau laborator pentru
a msura acumularea subst.
n plante i utilizarea datelor
n elaborarea modelelor de
transmitere
Sol/sedimente- apa freatic- Teste de extracie
apa de suprafa
Msurtori directe
Sol/sedimente- animale

Teste n curs de elaborare

Utilizarea extractelor apoase de
sol/sediment pentru simularea
transferului i bioacumulrii
CBR Critical Bogy Residues n
neveretebrate
Extracte apoase i eluriate pentru
teste algale, de germinaie i
elongare a rdcinilor
Utilizarea
micronucleilor
Tradescantia pentru evaluarea
potenialului genotoxic

Teste de extracie care simueaz

lichidele
fiziologice
pentru

40

evaluarea accesibilitii n caz de

ingestie accidental
Studii pe termen lung de hrnire
Biomarkeri
specifici
pentru
diverse substane chimice
Sol/sediment- plante sau n funcie de regimul
nevertebrate - vertebrate
alimentar,
msurarea
acumulrii n sursa trofic,
combinat cu utilizarea
modelelor
Msurtori ale concentraiei
n vertebrate
Msurtori ale diferiilor
metabolii
Biomarkeri specifici
Sol vapori animale din Msurarea n teren a gazului
pentru estimarea expunerii
galerii

INDICATORI DE STARE AI AGROECOSISTEMELOR

Gsirea celei mai eficiente metode de monitorizare a calitii solului este extrem de
important att n ecosistemeel naturale, ct i n agroecositeme. Una dintre problemele
acute o reprezint alegerea indicatorilor. Compexitatea problemei este accentuat de

41

heterogenitatea solurilor i problemele legate de nelegerea proceselor necesare susinerii

diferitelor funcii i dinamica ecosistemelor. O problem o reprezint de asemenea
determinarea strii normale a ecosistemelor sau comunitilor.
Evaluarea strii ecosistemului
Conceptul de stare (sntate) a ecosistemului este o tiin integrativ actual care se ocup
cu starea sistemelor regionale.

n acest context starea de sntate a ecosistemului este legat de dou condiii principale :
Ecosistemul trebuie s nu prezinte EDS ecosystem distress syndrome
EDS grupeaz o serie de semne prin care se recunoate n general degradarea ecosistemului.
Pentru ecosistemele terstre aceste semne include scderea nivelului nutrienilor, reducerea
diversitii specifice, modificri n compoziia specific prin apariia de specii oportuniste,
reducerea productivitii, boli i duntori.
Ecosistemul trebuie s fie capabil de auto-sutenan
Ecosistemul nu trebuie s afecteze negativ sistemele nveciante ( de ex un agroecosistem
nu trebuie s polueze cu nutrieni sau pesticide prin drenaj ecosistemele nvecinate).
Exist o serie de metode pentru evaluarea acestor probleme, pornind de la abordri
paleoecologice la metode cantitative de estimare a modificrilor survenite n structura
comunitilor biotice.
Datorit gradului de complexitate a problemei, un singur indicator este insuficient

Agroecosisteme
Un sol sntos terbuie s susin dezvoltarea plantelor i activitatea organismelor din sol
caracteristice pentru un anumit tip de sol i climat. Aceasta implic un coninut de materie
organic, nutrieni i mentenana structurii solului.. Implic de asemena absena
constrngerilor fizice, chimice i biologice ale creterii plantelor cum este cazul aciditii,
bazicitii, compactrii, acumulrii de substane toxice i bolilor.
Se poate detalia astfel:
Prezena organismelor endogee care recicleaz nutrienii n forma coerct i n cantitate
corespunztoare
Prezena organismelor care controleaz duntorii
Prezena organismelor responsabile de structura solului
Prezena organismelor care degradeaz substanele toxice
Prezena organismelor care produc hormoni i substane chimice care stimuleaz
creterea plantelor
O compoziie chimic echilibrat a solului
Indicatorii i caracteristicile lor
Exist mai multe categorii de indicatori. Unii sunt utili pentru diagnoz (identificarea
cauzelor poteniale ale diferitelor disfuncionaliti) alii sunt utlizai pentru screening
general (evaluarea strii generale) i evaluarea riscului.

In general indicatorii luai n considerare sunt:

Fizici textur, adncimea solului, infiltraia, densitate, capacitatea deretenie a apei
Chimici materia organic (carbonul i azotul organic), pH-ul conductivitatea, ayotul,
fosforul i potasiul solubil

42

Biologici biomasa microbian, azotul petenial mineralizabil, respiraia solului,

coninutul de ap, temperatura
Bioindicatori care atest o stare bun a solului sunt:
Creterea normal a plantelor
Nivel sczut al bolilor
Populaii echilibrate ale organismelro importante n economia solului (lumbricide,
ciuperci care particip la formarea micorizelor, bacterii de biocontrol, protozoare i
nematode heterotrofe, artropode prdtoare)
Biodiversitate crescut
Coninut crescut de matere organic
Biomas microbial activ
Cantitate mare de carbon i azot potenial mineralizabil
Cantiti crescute de hidrolaze i oxidoreductaze
Bioindicatori ai polurii solului:
Biomas microbial sczut
Prezena sau absena numitor organisme
Prezena populaiilor microbiene rezistente la substane toxice
Creterea plantelor i prezena contaminanilor n esuturi
Bacteriile i fungii joac un rol deosebit de important n procesele ce au loc la nivelul
solului. Ele pot fi asociate att cu activiti pozitive c i detrimentale. Importana lor ca
bioindicatori se bazeaz pe impactul pe care l au asupra productivitii solului i creterii
plantelor. Bacteriile din sol recunoscute ca benefice sunt bacteriile fixatoare de azot, fie
libere, fie asociate rdcinilor, rizobacteriile i bacteriile care stimuleaz creterea plantelor
i bacteriile asociate cu biocontrolul patogenilor radiculari. Pe de alt parte, bacteriile
detrimentale sunt considerate bacteriile patogene.
De ex Cd are efect inhibitor asupra biomasei bacteriene sau activitii bacteriene, inclusiv
cantitatea de C, activitatea dehidrogenazei (DHA) respiraia bazal (BR)
Fungii sunt activi n descompunerea celulozei i ligninei, iar ciupercile din micorize sunt
benefice dezvoltrii plantelor. Exist ns specii patogene care evident sunt indezirabile.
Microfauna solului
Protozoarele i nematodele sunt elemente cheie ale lanurilor trofice detritivore, n
interaciune cu bacteriile i fungii. Mrimea acestor populaii reflect de altfel populaiile de
bacterii i fungi. Un sol nedisturbat cu o microflor fungic dominant, va avea populaii
mari de nematode fungivore, n timp ce un sol cultivat n care predomin microflora
bacterian va prezenta populaii mari de nematode bacterivore.
Mezofauna solului
Cei mai importani bioindicatori din aceast categorie sunt colembolele i acarienii.
Populaiile de colembole cersc odat cu degardarea solului, n timp ce unii acarieni sunt
legai de degradarea solului, iar alte specii sunt corelate cu starea de normalitate.
n fauna edafic, un rol important l au larvele dipterelor sptoare. Abundena lor n sol
variaz de la cte va sute la cteva mii de indivizi /m2. Contribuie la descompunerea
materiei organice i reciclarea nutrienilor.

43

Macrofauna solului
Cele mai studiate organisme din aceast categorie sunt lumbricidele, ele reprezentnd un
indicator sensibil al condiiei solului. Populaiile de lumbricide sunt influenate n primul
rnd de cantitatea de materie organic disponibil ca surs trofic. Diverse specii variaz ca
i toleran fa de pH, substane chimice, putnd fi utilizai ca insdicatori aui nivelului pHului sau ai prezenei anumitor pesticide. Cea mai important funcie pe care oau
lumcricidele este aceea de a asigura macroporozitatea solului, stimulnd procesul de
humificare imineralizare a materiei organice. Prezena lor n numr mare este un semn
pozitiv legat de starea solului.
Lumbricidele pot reprezenta o modalitate important de evaluare a diferitelor modificri ale
mediului att n agroecosisteme, ct i n ecosistemele urbane i industriale.
Parametri analizai sunt urmtorii: numrul de specii, abundena, biomasa, concentraia unor
substane.
O serie de alte nevertebrate pot servi ca bioindicatori araneide, insecte, larve ale acestora,
etc.
Adesea ele pot reflecta nu doar poluarea solului ct i cea a aerului.
Biodiversitatea
Diminuarea biodiversitii a putut fi corelat cu degradarea solului datorat eroziunii,
cultivrii intensive, fertilizare intensiv, monocultur.
Comunitile macrofaunistice au fost utilizate ntr-o serie de studii ca bioindicatori ai
calitii solului. O analiz relativ recent a nevertebratelor ca i indicatori ai calitii solului
arat c toate grupele protozoare, nematode, oribatide, carabide, larve de diptere,
lumbricide, himenoptere, au anumit valoare ca i indicator n msura n care rspunde cu
intensitate diferit la diversele perturbri ale mediului. Adesea ns rspunsul nregistrat la
nivel de specie este dificil de evaluat cu exactitate datorit identificrilor dificile, absenei
unor metode standardizate de colectare. Macrofauna terestr definit ca suma
nevertebratelor macroscopice poate reflecta orice modificare la nivelul mediului prin
modificri la nivelul uneia sau mai multor componente ale sale. Artropodele din litier
(diplopode, izopode) sunt sensibile la abundena i gradul de descompunere a litierei, n
timp ce lumbricidele sunt sensibile la regimul hidric, pH, metale grele; unele coleoptere sunt
sensibile de asemenea la metale grele.
Mamiferele mici
Studiile realizate utilizau mamiferele mici ca bioindicatori ai poluarii solului cu metale
grele fiind dozate metalele din rinichi, ficat i esut osos la trei specii Apodemus sylvaticus,
Clethrionomys glareolus, Sorex araneus, arat ca un sol acid favorizeaz trecerea plumbului
n organismul animal.

BIONDICATORI I BIOMONITORI ACVATICI

Specii indicatoare
Speciile utilizate ca bioindicatori n mediul acvatic sunt indicatori unici de mediu n msura
n care ofer un semnal asupra condiiei biologice n mediul acvatic. Utilizarea

44

bioindicatorilor ca o modalitate precoce de detectare a polurii sau a degradrii

ecosistemelor poate ajuta meninerea resurselor critice.
Cu toate c termenul de specii indicatoare este frecvent utilizat, el este oarecum impropriu,
indicatorii fiind de fapt grupe sau tipuri de resurse biologice care pot fi utilizate pentru
evaluarea strii mediului. n cadrul fiecrui grup, pot fi utilizate anumite specii pentru
calculul numeric, de exemplul precentul de Achnanthes minutissima (diatomee), grupe de
specii (diferii taxoni) sau ordine (larve de Trichoptere), pentru a obine o imagine ct mai
real a strii ecosistemului investigat.
Grupele majore sunt:
macrofitele,
perifitonul
nevertebratele,
petii
Macrofitele
Macrofitele utilizate sunt plante acvatice care cresc n sau lng ap i pot fi emergente,
submergente, sau flotante. Macrofitele sunt benefice lacurilor deoarece ele produc oxigen,
sunt surs de hran pentru anumite organisme, asigur substrat pentru nevertebratele
acvatice i camuflaj pentru peti. Un lac fr macrofite ntr-un ecosistem n care ar fi de
ateptat s existe, poate sugera o reducere a populaiilor de peti i waterfowl. Dar poate
indica de asemenea probleme legate de calitatea apei, ca rezultat al unei turbiditi
excessive, prezenei ierbicidelor sau salinisrii. O supraabunden de macrofite poate fi
rezultatul unei cantiti crescute de nutrieni.
Macrofitele sunt exceleni indicatori ai ecosistemelor acvatice deoarece:
reacioneaz la nutrieni, contaminani toxici, metale, ierbicide, turbiditate, nivelul
apei, salinitate
sunt uor de prelevat prin utilizarea transectelor sau de
inregistrat utiliznd fotografiile aeriene
nu necesit analize de laborator
sunt uor de utilizat n calculul abundenei
sunt integratori ai condiiilor de mediu

45

Perifitonul

Este reprezentat de alge bentonice, care se dezvolt pe diverse substraturi. Sunt productori
primari i indicatori sensibili ai modificrilor survenite n ecosistemele lotice. Datorit
faptului ceste ataat de substrat aceste comuniti este sensibil la modificarile fizice si
chimice ale cursului de apa.
Comunitile de perifiton sunt buni indicatori deoarece:
prezint un numr mare de specii
reacioneaz rapid att la deterioare ct i la remediere
se pot identifica diferitele specii de ctre specialiti
uor de prelevat
se cunosc o serie de informaii referitoare la tolerana i sensibilitatea anumitor
specii la modificri specifice ale mediului de exemplu diatomeele sunt indicatori utili ai
condiiilor biologice deoarece sunt ubiquiti, i se regsesc n toate sistemele lotice.
Utiliznd dalele furnizate de ctre indicatorii algali, n corelaie cu nevertebratele i petii se
informaiile pot fi mbuntite. Informaiile urmrite sunt biomasa, prezena absena unor
specii, asociaii.
NEVERTEBRATELE
Nevertebratele acvatice sunt n general bentonice macroneveretbratele bintonice i
reprezzint buni indicatori deoarece:
i petrec toat viaa sau o mare parte din aceasta n ap
se gsesc n zone n care condiiile permit supravieuirea lor
sunt uor de colectat
difer n ceea ce privete tolerana la cantitatea i tipul polurii
sunt uor de identificat n laborator
adesea triesc mai mult dect un an
au mobilitate redus
sunt integratori ai condiiilor de mediu

BENTOS SENSIBIL
Efemoroptera

Plecoptere

Efemeroptere

Diptere

46

Coleoptere
Dytiscidae

Bivalve
BENTOS MODERAT TOLERANT

Odonate Anisoptere

Diptere Simuliidae
Trichoptere
BENTOS TOLERANT

Diptere Chironomidae

Oligochete

Crustacee
Decapode

Amphipode

Izopode

Diptere Tipulidae

Hirudinee

Gastropoda Physidae

47

PETII
Petii sunt folosii de mult vreme pentru a indica starea ecosistemelor acvatice. Elementele
luate n calcul sunt prezena speciilor, abundena i starea lor fiziologic.
Petii sunt buni indicatori deoarece:
triesc n ap toat viaa
difer n ceea ce privete tolerana fa de intenssitatea i tipurile de poluare
sunt uor de colectat cu un ecchipament adecvat
triesc mai muli ani
sunt uor de identificat pe teren
Ei sunt utilizai de asemenea n programele de monitoring, datorit urmtoarelor
proprieti:
Indivizii i populaiile de peti rmn n general n aceeai zon n pe parcursul
sezonului estival
comunitile sunt persistente i se refac rapid dup perturbri
se pot atepta rspunsuri comparabile din situri neperturbate n momente diferite
au toleran mai mare dect organismele mici: aceasta i face exterm de utili n
decelarea diferenelor regionale i de macrohabitat
majoritatea speciilor de peti triesc 2-10+ ani i pot reflecta calitatea apei pe termen
lung
petii sunt n contact intim cu apa i integreaz storia chimic, fizic i biologic a
acesteia
petii reprezint un spectru foarte larg de toleran de la foarte sensibil la extrem de
tolerant i prezint[ rspunsuri specifice la degradarea chimic[, fizic i biologic a apei.
Vizibililtatea
Sunt uor de reperat i din punctual devedere al publicului reprezint un element
valoros al comunitilor acvatice
Uor de utilizat i interpretat
Frecvena prelevrilor pentru biomonitoring este mai mic dect pentru nevertebrate
Taxonomia petilor este bine pus la punct, permind specialitilor identificarea n
teren i eliminnd n cele mai multe cazuri etapa de laborator
Distribuia, istoricul i tolerana a numeroase specii sunt deja bine cunoscute.
Dreisena polymorpha bioindicator in apele continentale
Utilizarea scoicilor ca bioindicatori ai polurii apelor dateazde peste 20 de ani. Mytilus
edulis este frecvent utilizat n biomonitoringul ecosistemelor marine i estuare, iar mai
recent pentru monitoringul apelor continentale este utilizat Dreisena polymorpha.
Rezultatele obinute au artat c este necesar o expunere de cteva sptmni pentru a
detecta modificri de stare sau cretere. Cel mai sensibil indicator al fitnesului fiziologic
pare s fie raportul biomas umed/biomas uscat.

48