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MICROBIOLOGIA Y BACTERIOLOGA
La microbiologa es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeos
(de mikros "pequeo", bios, "vida" y logos, "estudio"), tambin conocidos como microbios. Es la
rama de la biologa dedicada a estudiar los organismos que son solo visibles a travs del
microscopio como las bacterias (reino monera), virus, hongos (reino fungi) y parsitos (reinos
protoctista y animalia). Dentro de estos microorganismos en el presente manual se har un estudio
de las bacterias.
1. DIVISIONES DE LA MICROBIOLOGA
Segn el campo especfico dentro del estudio de los microorganismos se puede clasificar en:
Fisiologa microbiana: estudio a nivel bioqumico del funcionamiento de las clulas
microbianas. Incluye el estudio del crecimiento, el metabolismo y de su estructura.
Gentica microbiana: estudio de la organizacin y regulacin de los genes y como stos
afectan el funcionamiento de las clulas microbianas. Est muy relacionada con la biologa
molecular.
Microbiologa mdica: estudio del papel de los microbios en las enfermedades humanas.
Incluye el estudio de la patogenia microbiana y la epidemiologa y est relacionada con el
estudio de la patologa de la enfermedad y con la inmunologa.
Microbiologa veterinaria: estudio del papel de los microorganismos en la medicina
veterinaria.
Microbiologa ambiental: estudio de la funcin y diversidad de los microorganismos en su
medio natural. Incluye la ecologa microbiana, la geomicrobiologa, la diversidad microbiana
y la biorremediacin.
Microbiologa industrial: estudia el uso o empleo de los microorganismos en procesos
industriales. Ejemplos son la fermentacin industrial y el tratamiento de aguas residuales.
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BACTERIOLOGIA
Microbiologa de los alimentos: estudio de los microorganismos presentes y que
estropean los alimentos.
2. RAMAS DE LA MICROBIOLOGA
Entre las ramas de la microbiologa podemos mencionar los siguientes:
Bacteriologa:
Virologa:
Micologa:
Parasitologa:
Ficologa:
Protozoologa:
INVESTIGADOR
1590
Hermanos Jansem
1665
Robert Hooke
IMPORTANCIA / DESCUBRIMIENTO
1676
1828
1890
Ferdinand Cohn
1890
Louis Pasteur
1900
Robert Koch
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BACTERIOLOGIA
1925
Martinus Beijerinck
1940
Sergei Winogradsky
Clulas eucariticas (eu = verdadero, carion = ncleo, teca = envoltura); son clulas con
verdadera envoltura nuclear. Sus caractersticas estructurales generales son:
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BACTERIOLOGIA
5. ENFERMEDADES BACTERIAS EN HUMANOS
Slo una pequea parte de los miles de especies de bacterias causan enfermedades humanas
conocidas. Las infecciones bacterianas se evitan destruyendo las bacterias con calor, como se hace
en las tcnicas de esterilizacin y pasteurizacin. Cuando se producen, las enfermedades
bacterianas se tratan con antibiticos. Pero el abuso de estos compuestos en los ltimos aos ha
favorecido el desarrollo de cepas de bacterias resistentes a su accin, como Mycobacterium
tuberculosis, que causa la tuberculosis.
FORMA MICROBIANA
Bacilos
Clamidia
Cocobacilos
Cocos
BACTERIAS-ENFERMEDADES
NOMBRE CIENTIFICO
ENFERMEDAD
Bacillus anthracis
Bacillus cereus
Clostridium botulinum
Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Corynebacterium
diphtheriae
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Legionella pneumophila
Mycobacterium leprae
Mycobacterium tuberculosis
Salmonella sp.
Salmonella typhi
Salmonella typhimurium
Shigella dysenteriae
Shigella sp.
Yersinia enterocolitica
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis
Chlamydia trachomatis
ntrax
Intoxicacin alimentaria por Bacillus cereus
Botulismo
Mionecrosis clostridial (gangrena gaseosa)
Ttanos
Bordetella pertussis
Brucella sp.
Haemophilus influenzae
Haemophilus pertussis
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Staphylococcus aureus
Tos ferina
Brucelosis
Meningitis, neumona bacteriana
Tos ferina
Gonorrea, enfermedad inflamatoria plvica
Meningitis
Neumona, sndrome de shock txico,
infecciones de la piel, meningitis
Neumona, infecciones del odo, meningitis
Infecciones de garganta, fiebre reumtica
Escarlatina, fiebre puerperal
Listeriosis, septicemia perinatal, meningitis,
encefalitis, infecciones intrauterinas
Neumona
Listeria
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Streptococcus sp.
Listeria monocytogenes
Micoplasma
Mycoplasma pneumoniae
Difteria
Diarrea
Bronconeumona
Enfermedad del legionario
Lepra
Tuberculosis
Salmonelosis
Fiebres tifoideas
Gastroenteritis por Salmonella
Disentera bacilar
Sigelosis
Yersiniosis, gastroenteritis
Peste
Linfadenitis mesentrica
Tracoma, uretritis, cervicitis, conjuntivitis
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BACTERIOLOGIA
Rickettsia prowazekii
Rickettsias
Rickettsia rickettsii
Rickettsia typhi
ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un micoplasma?
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Qu es una ricketsia?
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Por qu Anton Van Leeuwenhoek es considerado padre de la microbiologia?
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Qu es un microorganismo patgeno?
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Qu es un virion?
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Cul son los microorganismos ms empleados en la industria alimentaria?
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Qu es un micoplasma?
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BACTERIOLOGIA
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Qu es una enfermedad bacteriana?
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Cul es ubicacin taxonmica de las bacterias?
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Qu estudia la microbiologa clnica?
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Qu son las ETAs?
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ADN: bicatenario, lineal y desnudo por no estar asociado a histonas, tiene un peso
molecular aproximado de 3 x 109, por tanto considerado como un cromosoma haploide
simple, de casi 1mm de largo en estado congelado. Como se seal, la clula procariota a
diferencia de la eucariota carece de una membrana nuclear, tampoco posee nuclolo, ni
aparato mittico, y nunca configura una masa cromosmica definida. El material gentico
est compuesto de una estructura fibrilar, constituida por un ADN circular de doble cadena,
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BACTERIOLOGIA
enrollado sobre s mismo. Si bien se asocia a protenas bsicas, estas no son verdaderas
histonas.
Citoplasma: tambin conocido como matriz citoplasmatica, de aspecto granular fino, sin
citoesqueleto y sin presencia de organelos citoplasmticos.
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BACTERIOLOGIA
Los mesosomas que son organelos que se asocian a la membrana. Se observan al ME
como sacos citoplasmticos que contienen estructuras verticiladas, laminares, tubulares o
vesiculares, y a menudo se asocian con tabiques de septacin. Se ha demostrado que los
mesosomas fijan el ADN cromosmico a la membrana citoplasmtica.
Pared celular: Estructura rgida presente como ya se dijo en la mayora de las bacterias, se
sita por fuera de la membrana citoplasmtica. Es una estructura vital para las bacterias
que las poseen. Si sta se destruye o se impide su formacin, la clula pierde su viabilidad.
El peptidoglicano, principal constituyente de la pared, es un polmero constituido por
unidades repetidas del monmero formado por: dos derivados de carbohidratos, N-acetil
Glucosamina y N-acetil Murmico (N-Ac.G, N Ac. M), unidas por enlaces beta 1-4 y
asociados a cortas cadenas peptdicas a travs del N-acetil Murmico.
El espesor de la pared en los diferentes microorganismos, oscila entre 0,150 m y 0,500 m
de (m=micra). Podemos imaginar entonces la pared celular, como una macromolcula
gigante constituida por peptidoglicano, que en forma de bolsa rodea toda la clula,
representando del 10 al 40 % del peso de la bacteria. Unido al N-acetil murmico se
encuentra un tetrapptido como se aprecia en la figura 4. Los tetrapptidos de una cadena
de peptidoglicano se unen con los de la otra a travs de puentes peptdicos. Los
aminocidos que forman los tetrapptidos son los siguientes: L-Alanina, Acido DGlutmico,
Acido mesodiaminopimlico (o L-Lisina) y D Alanina.
La Penicilina y sus derivados, los antibiticos ms usados en Medicina, actan
precisamente inhibiendo la sntesis de la pared celular, llevando a la lisis de la bacteria. La
unin de los puentes peptdicos se pueden hacer como ocurre en la mayora de las
bacterias por uniones directas transpetdicas entre la D-Alanina de un puente peptdico y el
cido diaminopimlico (DAP) de otro tetrapptido adyacente.
Existen diferencias en el espesor de esta estructura bsica, el peptidoglicano de las
bacterias Gram positivas tienen una capa gruesa de 0,02 a 0,06 m en forma de multicapas,
mientras que las bacterias Gram negativas y las bacterias alcohol cido resistentes la tienen
ms fina, de 0,01 m. Al peptidoglicano se le unen otros componentes que son, por lo tanto,
tambin integrantes de la pared. Son diferentes en las bacterias Gram positivas, negativas y
cido alcohol resistentes. Revisaremos algunos aspectos de la composicin de los tres tipos
de paredes.
Estructura de las envolturas de Bacterias Gram (+) y Gram (-)
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BACTERIOLOGIA
La membrana citoplasmtica.
El espacio periplasmtico, ubicado entre la membrana citoplasmtica y el peptidoglicano.
Una fina capa de peptidoglicano.
Membrana externa que contiene fosfolpidos, el lipopolisacrido (LPS) caracterstico de
estas bacterias y protenas (protenas de membrana externa). Esta capa est
estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de la pared
celular de las bacterias Gram negativas.
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BACTERIOLOGIA
(fenmeno de Shwartzman-Sanarelli). Efectos similares ocurren cuando por destruccin
bacteriana hay endotoxinas en sangre. La gravedad del cuadro clnico se sabe hoy que
depende en parte de la cantidad de endotoxinas circulantes, pudiendo determinar desde un
simple cuadro infeccioso con fiebre, a sepsis, shock sptico o la muerte.
La toxicidad del lpido A radica primariamente en su habilidad para activar el complemento y
estimular la liberacin de citoquinas por parte de las clulas del husped (leucocitos,
macrfagos, etc.). El complemento y las citoquinas en condiciones normales son parte de
los mecanismos de defensa del husped, pero si estn en altas concentraciones
desencadenan un proceso perjudicial. Desencadenan localmente un proceso inflamatorio y
una respuesta sistemtica que constituye el shock sptico. Entendemos por shock la serie
de eventos que determinan el colapso del sistema circulatorio que lleva a la falla de
mltiples rganos vitales y, finalmente a la muerte (multiple organ sistem faillure, MOSF).
An hoy no es posible decir exactamente como se desencadena este fenmeno.
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BACTERIOLOGIA
mezcla de alcohol cido. Esta gran cantidad de lpidos de la pared, 10% del total del peso
de la clula de micobacterias, protege a la bacteria de la accin deletrea de los
componentes del fagolisosoma y, probablemente, sea esta la razn por la que las
micobacterias pueden sobrevivir dentro de los macrfagos. Los componentes de la pared
de las micobacterias tambin tienen la capacidad de estimular al sistema inmune, tanto es
as que se utiliza para aumentar la produccin de anticuerpos cuando se inyecta antgenos
proteicos, o sea, se utiliza como adyuvante. El adyuvante de Freund tiene como
componente bsico, la pared micobacteriana.
Despus de analizar las diferencias entre la composicin de las paredes de las bacterias Gram
positivas, negativas y cido alcohol resistentes se puede ir comprendiendo la importancia que esto
tiene en el momento de estudiar mecanismos de agresin, sensibilidad a antibiticos, taxonoma,
clasificacin bacteriana, identificacin, etc. Tambin es necesario sealar que el tipo de pared
celular podra determinar el hecho de que unas bacterias se tian con la coloracin de Gram y otras
no, y por qu las que no lo hacen sean Gram positivas y otras negativas.
Recientemente se ha demostrado que en las bacterias Gram positivas es la gruesa capa de
peptidoglicano con numerosos cidos teicoicos unidos a ella, la que determina que estas bacterias
retengan al colorante cristal violeta utilizado en el primer paso de la coloracin, y resistan la
decoloracin con alcohol acetona. Por el contrario, las que lo pierden al ser descoloradas, las Gram
negativas, tienen una fina capa de peptidoglicano y la membrana externa rica en lpidos, que
podran ser solubilizados con alcohol acetona y facilitar as la prdida del cristal violeta, quedando
finalmente coloreadas de rojo con safranina, colorante de contraste usado al final de la tcnica.
Podramos decir que la pared bacteriana es un gran mosaico de antgenos que son utilizados en la
clasificacin bacteriana y en la identificacin, como en el caso del antgeno O en enterobacterias, el
polisacrido C para la serotipificacin de estreptococos, etc. Tambin antgenos de la pared han
sido ensayados como inmungenos en la produccin de vacunas, como protenas de membrana
externa en la vacuna antimeningocccica para el grupo B. La porcin central del LPS, que es
invariable entre las diferentes bacterias y no es txica, se ha ensayado tambin como inmungeno.
Tambin es importante sealar la funcin que cumple la pared celular como barrera osmtica.
Cpsula: Es una envoltura externa, ubicada por fuera de la pared celular, mucosa, que
forma un gel que se adhiere a la clula. No es una estructura vital para la clula, su prdida
no se relaciona con la prdida de viabilidad de la clula, pero s se relaciona con cambios
en la morfologa colonial y en la prdida de la virulencia bacteriana.
La virulencia de algunos patgenos se correlaciona con la presencia de cpsula, como por
ejemplo: Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae tipo b. La cpsula
protege a la bacteria de la fagocitosis, principal mecanismo de defensa que pone en juego
el husped ante la presencia de bacterias capsuladas. Una respuesta efectiva para
defenderse de este tipo de bacterias implica la produccin de anticuerpos que se unan
especficamente a la cpsula facilitando as la opsonizacin y la fagocitosis. De su
capacidad antignica se desprende el uso de la cpsula para la produccin de diferentes
vacunas que estimulan la formacin de anticuerpos especficos, y han demostrado ser
efectivas (vacuna anti-neumocccica, anti-Haemophilus influenzae tipo b, antimeningocccica A y C, etc).
Las bacterias que producen cpsula forman en los medios slidos colonias acuosas,
mucoides (M) o lisas (S), en cambio, las cepas rugosas (R) no producen cpsula. La
prdida de la capacidad de formar cpsula por mutacin S a R se correlaciona con la
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BACTERIOLOGIA
prdida de la virulencia y aumento de la facilidad de destruccin por los fagocitos, pero no
afecta la viabilidad.
Los antgenos capsulares son muy tiles en la clasificacin e identificacin de diferentes
bacterias; Streptococcus sp. ,S. pneumoniae, Haemophilus sp. , Neisseria
meningitidis sp, etc.
Frimbias o pilis: Las fimbrias son estructuras filamentosas proteicas similares a los flagelos
en su composicin y morfologa, pero no participan en la motilidad y son menos abundantes
y ms cortas.
Es una estructura variable que la poseen algunas bacterias. Las fimbrias o pilis comunes se
relacionan con la adherencia de las bacterias a superficies inertes o vivas. De gran
importancia en este sentido es la adherencia especfica que presentan muchas bacterias a
determinados epitelios, jugando un papel fundamental en la colonizacin. Esto se debe a
que las fimbrias encuentran en las clulas epiteliales receptores especficos para ellas.
A modo de ejemplo, las cepas de Neisseria gonorrohoeae patgenas son
aquellas que poseen fimbrias que se adhieren especficamente al epitelio
uretral del hombre o al crvix uterino en la mujer.
Las cepas de E. coli capaces de causar infeccin urinaria tienen fimbrias que
Flagelos: los flagelos son filamentos largos, delgados, helicoidales, de longitud y dimetro
uniforme. Son responsables de la motilidad de las bacterias. Presentan flagelos
fundamentalmente: bacilos Gram positivos y Gram negativos. El flagelo est compuesto de
3 partes, el filamento, el gancho y el cuerpo basal.
El filamento es externo con respecto a la clula y se une al gancho en la superficie celular.
El gancho est fijado al cuerpo basal, que a su vez est anclado en la membrana
plasmtica. El cuerpo basal est compuesto de un cilindro y dos o ms juegos de anillos
contiguos a la membrana plasmtica, el peptidoglicano y, en el caso de las bacterias Gram
negativas, a la membrana externa.
Los flagelos pueden variar en nmero desde uno, unos pocos o varios cientos como en
algunas cepas de E. coli. Segn el nmero de flagelos y su topografa en la clula podemos
hablar de monotricas cuando tienen un flagelo nico, lofotricas cuando presentan un
penacho de varios flagelos polares, anfitricas si los flagelos se encuentran en ambos polos
y peritricas cuando los flagelos estn distribuidos sobre toda la superficie celular.
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BACTERIOLOGIA
Anfitrico
Monotrico
Peritrico
Lofotrico
Una
espora
puede
permanecer en ese estado
durante muchos aos pero
puede convertirse de nuevo
en una clula vegetativa y
volver
a
multiplicarse,
fenmeno
denominado
germinacin de la espora. El
conocimiento de que existen estas formas altamente termoresistentes fue esencial para el
desarrollo de mtodos adecuados de esterilizacin de medicamentos, alimentos, medios de
cultivo microbiolgicos, etc.
Las esporas son ricas en cido dipicolnico e iones calcio y hay evidencias que esta
asociacin cumple una funcin importante para conferir la excepcional resistencia al calor
de los esporos.
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
algunas especies pueden llegar a alcanzar los 0,5 mm, lo cual las hace visibles al ojo humano. En el
otro extremo se encuentran las bacterias ms pequeas pertenecientes al gnero Mycoplasma, las
cuales llegan a medir solo 0,3 m, similares a los virus ms grandes.
FORMAS y AGRUPAMIENTO
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos
morfolgicos, lo que se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos
fundamentales de bacterias:
a) Coco (del griego kkkos, grano): de forma esfrica.
- Diplococo: cocos en grupos de dos.
- Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.
- Estreptococo: cocos en cadenas.
- Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en
racimo.
b) Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de
bastoncillo.
Formas helicoidales:
c) Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma,
juda o cacahuete.
d) Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de
tirabuzn.
e) Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal
flexible).
El agrupamiento celular en las bacterias se debe a la unin temporal despus de la divisin, dando
lugar a ciertos grupos caractersticos. Dependiendo al plano de divisin y cantidad de divisiones a
travs de de las cuales las clulas permanecen fijas, puede producirse lo representado en la figura
anterior.
ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son las funciones de la membrana plasmtica en las bacterias?
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Cul es la funcin de la pared celular en bacterias?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es la funcin de los plsmidos?
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Qu colorantes bacterianos conoce usted?
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Cul es la diferencia entre fimbrias y flagelo?
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Qu es una bacteria BAAR?
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Cul es la diferencia entre un estafilococo y un estreptococo?
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BACTERIOLOGIA
Las bacterias se pueden clasificar desde el punto de vista nutricional:
Segn la fuente de obtencin de energa.
Gentica bacteriana.
El intercambio gentico entre clulas procariotas es generalizado y conforma una de las principales
caractersticas de diversidad gentica de las bacterias. Los mecanismos mejor conocidos son:
Transformacin. Captacin directa de ADN procedente de la bacteria donante (muerta).
Conjugacin. La bacteria donante construye una porcin de ADN (plsmido) que cede a una
bacteria receptora por medio de pilis.
Transduccin. Transferencia de ADN de una clula donante a una receptora por medio de
un bacterifago.
CLASIFICACIN BACTERIANA:
Atendiendo a la estructura de su pared bacteriana se clasifican en:
Bacterias Gram negativas: no se tien con esta tincin pues su pared es menos compleja
y no retiene los colorantes.
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BACTERIOLOGIA
Es complicado establecer una relacin jerrquica al uso tradicional que refleje relaciones evolutivas.
De manera general se establecen dos grandes grupos:
Hoy da, gracias a nuevas tcnicas de investigacin, se piensa que las arqueobacterias son
organismos bastante ms evolucionados de lo que se crea.
A la hora de clasificar a las bacterias verdaderas o Eubacterias es complicado establecer una
relacin jerrquica al uso tradicional que refleje relaciones evolutivas. El Bergey`s Manual of
Determinative Bacteriology (que es el catecismo de los microbilogos) las agrupa en 19 grupos
en funcin de criterios fcilmente reconocibles, tanto morfolgicos como fisiolgicos, entre los que
podramos destacar los siguientes:
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BACTERIOLOGIA
Cocos
grampositivos.
Son
quimioorganotrofos, muy abundantes en
la naturaleza. Dependiendo de la especie
se presentan aislados, en pares,
cadenas, racimos o paquetes. Algunas
son patgenas, otras saprfitas. Gen.
Streptococcus,
Lactobacillus
(fermentacin lctica), Staphylococcus,
Micrococcus...
Actinomicetos
y
organismos
relacionados. Es un grupo heterogneo
que incluye a los actinomicetes,
propionibacterias
(fermentacin
propinica),
artrobacterias
y
corinebacterias. Algunas actinobacterias
forman
actinosporas
como
Mycobacterium o Streptomyces, de la
que se obtiene la streptomicina y otros
antibiticos.
Micoplasmas (Mollicutes). Sus colonias tienen forma de huevo frito, aunque las clulas de
micoplasma son muy pleomrficas (bacilar, bulbosas, filamentosas). Son estructuralmente
muy sencillas, apenas una membrana, ribosomas y nucleoide, por lo que se trata de las
formas de vida ms sencillas capaces de desarrollar un metabolismo independiente.
Mycoplasma pneumoniae produce la pleuroneumona del ganado.
Esta clasificacin ha sido revisada hace unos aos, por lo que ha cambiado a la luz de los nuevos
descubrimientos en gentica molecular.
Clasificacin de microorganismos por tincin de Gram.
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BACTERIOLOGIA
COCOS GRAMPOSITIVOS.
Aerobios o Facultativos:
Catalasa +: estafilococos.
Coagulasa +:
S. aureus.
Coagulasa -:
Manitol +: S. saprophyticus.
Manitol -: S. epidermidis.
Catalasa : estreptococos.
Alfa-hemolticos.
Sensible a optoquina: neumococo.
Resistente a optoquina: S. viridans.
Beta-hemolticos.
Sensible a bacitracina, PYR+: S. pyogenes.
Resistente a bacitracina, hipurato+, CAMP+: S. agalactiae.
Gamma-hemolticos.
Resiste bilis, crece en medio con ClNa: enterococo.
Resiste bilis, no crece en medio con ClNa: no enterococo.
Anaerobios:
PEPTOCOCCUS.
PEPTOSTREPTOCOCCUS.
BACILOS GRAMPOSITIVOS.
Aerobios o facultativos:
CORYNEBACTERIUM.
LISTERIA MONOCYTOGENES (MIR 02-03, 155).
BACILLUS.
ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE.
Anaerobios:
CLOSTRIDIUM.
PROPIONIBACTERIUM.
LACTOBACILLUS.
COCOS GRAMNEGATIVOS.
Aerobios o facultativos:
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BACTERIOLOGIA
NEISSERIACEAE.
NEISSERIA.
MORAXELLA.
ACINETOBACTER.
KINGELLA.
Anaerobios:
VEILLONELLA.
BACILOS GRAMNEGATIVOS.
Aerobios o facultativos:
ENTEROBACTERIACEAE: E. coli, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus,
Morganella, Providencia, Salmonella, Shigella, Yersinia.
PSEUDOMONAS.
BRUCELLA.
LEGIONELLA.
BORDETELLA.
FRANCISELLA.
ACINETOBACTER.
VIBRIO.
HAEMOPHILUS.
GRUPO HACEK.
PASTEURELLA.
HELICOBACTER.
BARTONELLA, CAPNOCYTOPHAGA.
Anaerobios:
BACTEROIDES.
PREVOTELLA.
PORPHYROMONAS.
ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es y en qu consiste la prueba de la coagulasa?
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Qu es y en qu consiste la prueba de la catalasa?
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BACTERIOLOGIA
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Cules son las caractersticas de la hemolisis?
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Qu es y en qu consiste la prueba del manitol?
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Qu es y en qu consiste la prueba de PYR?
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Qu es y en qu consiste la prueba de CAMP?
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Qu es una enterobacteria? Cite ejemplos
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Cul es la diferencia entre bacterias Gram (+) y Gram (-)?
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
Ingestin
Inhalacin
Traumatismo
Venopuncin
Picadura de artrpodos
Transmisin sexual
Piel
Epitelio ciliado
Mucosidad
Secreciones
FACTORES DE VIRULENCIA:
Los mecanismos por los cuales las bacterias producen enfermedad se pueden dividir en dos
categoras en dos categoras:
a) Factores que promueven la colonizacin e invasin al hospedero:
Fimbrias
Pili
Adhesinas no fimbriales
Unin internalizacin a la clula M
Movilidad y quimiotaxis
sIgA proteasa
Sideroforos
Capsula
Variacin en antgeno de superficie
Exotoxinas
Endotoxinas
Componentes txicos de la pared celular
Enzimas hidroliticas
Productos bacterianos que provocan respuesta inmune
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BACTERIOLOGIA
Factores que promueven la colonizacin e invasin al hospedero:
a) Pilis o fimbrias
Las fimbrias son apndices que consisten en subunidades de protenas que estn anclados ya sea
en la membrana externa de las bacterias Gram negativas, o en la membrana citoplasmtica, o en la
pared celular de las bacterias Gram positivas. Las fimbrias pueden ser rgidas o flexibles. Las
fimbrias no flexibles miden de 6 a 10 nm y portan adhesinas en su punta y en algunos casos
tambin en sus partes laterales. Las fimbrias flexibles son delgadas de 5 nm de dimetro y
generalmente portan adhesinas a lo largo de su longitud. La distincin principal de los pilis y
adhesinas es la adherencia, la cual puede ser adherencia especfica es decir, la unin
estereoqumica medible entre la bacteria y el substrato y por tanto se requiere energa para separar
a ambos. Adherencia no especfica es la asociacin entre una bacteria y su substrato sin unin
estereoqumica. La adherencia est determinada por adhesinas (o ligandos) que se definen como
molculas de superficie bacteriana capaces de unirse a un receptor en la superficie celular o a un
substrato. La mayora de las espacies expresan ms de un tipo de adhesina. La adhesina es la
molcula que interacta en unin estreo-especifica con su receptor. En algunos casos, la fimbria
posee dos o ms adhesinas distintas para dos o ms receptores diferentes.
b) Adhesinas no fimbriales (o afimbrial)
Las adhesinas afimbriales son protenas de superficie que median la adherencia de la bacteria a la
clula husped pero no estn organizadas en estructuras piliares y permiten la adherencia posterior
por fimbrias. Algunas de las adhesinas afimbriales reconocen tanto protenas como carbohidratos;
por ejemplo protenas de membrana externa de las bacterias Gram-negativas, cidos lipoproteicos
de bacterias Gram positivos, glucocalix.; protenas F y M de Streptococcus, y tienen como funcin
unirse en forma estrecha a la clula husped.
c) Unin a internalizacin en clulas M
Las clulas M son la puerta de entrada a los tejidos profundos y estn localizadas en el epitelio
intestinal intercaladas con los enterocitos, justo por arriba de los ndulos linfticos. Las clulas M
son endocticas por naturaleza, de modo que las bacterias que se unan a ellas son internalizadas y
transportadas al tejido linfoide. Algunas bacterias utilizan a las clulas M como puerta de entrada
para llegar a los tejidos profundos. Invasin se define como el proceso por medio del cual un
microorganismo penetra al citoplasma de clulas no fagocticas (clulas epiteliales o endoteliales),
se replica dentro de estas, se propaga a clulas adyacentes y finalmente destruye a las clulas. Un
patgeno intracelular es aquel microorganismo que se internaliza y se replica dentro de clulas
fagocticas (neutrofilos y macrfagos).
d) Movilidad y quimiotaxis
Movilidad bacteriana es la capacidad que tiene la bacteria de desplazarse de un lugar a otro por
medio del flagelo, en un sentido definido. Quimiotaxis se define come la capacidad que tienen las
bacterias de moverse hacia una fuente de nutrientes. Las superficies mucosas estn protegidas de
la colonizacin bacteriana debido a que son baadas constantemente con lquido y movimiento
rpido. En tales casos, la bacteria mvil se dirige hacia la membrana mucosa, teniendo mayor
posibilidad de contactar la superficie mucosa, a diferencia de las bacterias inmviles que carecen de
esta capacidad; apoyando esta idea se tiene que muchas de las bacterias que colonizan el intestino
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BACTERIOLOGIA
delgado y la vejiga son mviles. La movilidad es importante para el traslado a travs de la capa de
mucina. La capa de mucina no es una capa homognea, sino es un rea que consiste en zonas de
alta y baja viscosidad. El movimiento de reas de baja viscosidad es benfico para la bacteria que
busca la superficie mucosa. Tambin, la bacteria es atrada por la capa de mucina que sirve come
una fuente de nutrientes.
e) Proteasa anti IgA secretoria
La bacteria que intenta colonizar la superficie mucosa tiene mecanismos que le permiten no quedar
atrapada en la capas de mucina. La viscosidad de la mucina es causada en parte por las molecular
de inmunoglobulina secretoria A (sIgA) que se unen simultneamente a antgenos bacterianos, va
sus sitios de unin al antgeno y la interaccin con la mucina por medio de sus porciones Fc. Una
estrategia bacteriana que es designada para evitar ser atrapada en la capa de mucina es la
produccin de una enzima extracelular que rompe la IgA humana en bisagra. La importancia de que
ciertos gneros bacterianos produzcan esta proteasa de sIgA, radica, en que dichas bacterias
puedan colonizar las superficies mucosas con mayor facilidad que aquellas qua no producen la
proteasa de sIgA.
f) Mecanismos de captacin de hierro
El hierro es esencial pare el desarrollo bacteriano, pero la concentracin de hierro en la naturaleza
es muy baja. La concentracin de hierro libre en el cuerpo humano es particularmente baja debido a
qua la transferrina, lactoferrina, ferritina y hemina se unen la mayora del hierro disponible. Para
sobrevivir en el cuerpo humano, la bacteria debe de tener algunos mecanismos pare captar hierro.
El mejor mecanismo por medio del cual las bacterias captan hierro es el sideroforo. Los sideroforos
son compuestos de bajo peso molecular que quelan hierro con alta afinidad. Existen dos tipos
principales de sideroforos, catecoles e hidroxamatos, los dos tienen la misma propiedad, esto es,
forman compuestos quelantes con hierro. Los sideroforos son producidos por la bacteria y
excretados al medio en el cual se unen al hierro y el complejo sideroforo-hierro se une a receptores
para sidereforo en la superficie bacteriana, una vez que se ha internalizado el complejo sideroferohierro, este es roto para que libere el hierro en el interior de la bacteria. Algunas bacterias no solo
producen sus propios sideroforos sino tambin producen receptores capaces de unir sidesoforos
producidlos por otras bacterias.
g) Capsula
La capsula es una red de polmeros que cubre la superficie de una bacteria. La mayora de las
capsulas estn compuestas de polisacridos pero tambin se han descrito capsulas compuestas de
protenas o mezclas de protenas-carbohidratos. Si el polisacrido forma una capa homognea
uniforme alrededor del cuerpo bacteriano, se le llama capsula y si solo forma una red de trabeculas
a una malla alrededor de la bacteria, se le llama glucocalix. El papel de la capsula bacteriana es
proteger a la bacteria de la respuesta inflamatoria del husped, esto es la activacin del
complemento y muerte mediada per fagocitosis. La capsula por si misma es menos probable que
sea opsonizada por C3b y la bacteria puede no ser ingerida por los fagocitos. Menos formacin de
C3bBb significa que se producir menos C5b y por lo tanto menos probabilidad de que se forme el
complejo de ataque a la membrana (CAM) sobre la superficie de la bacteria, este fenmeno es muy
importante en bacterias Gram-negativas.
Una respuesta efectiva contra bacterias encapsuladas es la produccin de anticuerpos que se unen
a las capsulas, con la subsecuente opsonizacion de la bacteria. Las vacunas formadas con material
capsular han mostrado una alta efectividad en la prevencin de infecciones causadas per bacterias
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BACTERIOLOGIA
encapsuladas. Algunas bacterias evaden este tipo de proteccin del husped porque tienen
polisacridos que se parecen a los polisacridos del husped. Por ejemple existen capsulas las que
consisten en acido hialurnico (un polmero de matriz extracelular) come el de Streptococcus
pyogenes, o de Acido silico (un componente comn de las glicoprotenas de las clulas husped),
se encuentran en algunas cepas de Neisseria meningitidis. Este tipo de capsulas no son
immunogenicas y el husped no produce anticuerpos que opsonicen la superficie capsular.
h) Variacin de los antgenos de superficie
Una forma de evadir la accin de los anticuerpos del hospedero es cambiar de un tipo de fimbria a
otra, y as los anticuerpos preformados no se unen a la nueva fimbria formada. La bacteria tambin
cambia de protenas de superficie que puede servir como blanco para los anticuerpos. Algunas
bacterias capsuladas estn compuestas de polisacridos que no desencadenan la formacin de
anticuerpos porque dichos polisacridos se parecen mucho a los carbohidratos que son ubicuos en
los tejidos del husped (Acido silico y acido hialurnico). La bacteria tambin puede cubrirse por s
misma con protenas del husped, tales como fibronectina
Factores que causan dao al hospedero
a) Exotoxinas
Las exotoxinas son protenas bacterianas txicas. Muchas exotoxinas bacterianas se excretan al
medio donde se desarrolla la bacteria. Hay que diferenciar entre exotoxina (toxinas excretadas) de
endotoxinas (lipopolisacrido) que esta embebido en la membrana externa de las bacterias Gramnegativas. Las exotoxinas varan considerablemente en sus actividades y el tipo de clulas husped
que afectan. Los nombres dados a las diferentes exotoxinas refleja su diversidad y el nombre de
algunas toxinas indica el tipo de clulas que daan. Las exotoxinas que daan una gran variedad de
tipos celulares se llaman citotoxinas, mientras las exotoxinas que daan un tipo especifico de
clulas se designan de acuerdo al tipo de clula u rgano afectado, por ejemplo neurotoxina,
leucotoxina, hepatotoxina y cardiotoxina.
Tambin se les da nombre a las exotoxinas de acuerdo a las especies que las producen o a la
enfermedad que estn asociadas. Per ejemplo la toxina colrica producida por Vibrio cholerae. Una
confusin comn es el trmino "enteretoxina. Este es termino que denota toxinas de origen proteico
que causan diarrea o vomito (sntomas entricos).
Las exotoxinas se han dividido en tres grupos de acuerdo a su estructura y funcin. Un tipo son las
toxinas A-B (toxina diftrica, colrica, tetnica, etc.) que se les da el nombre porque la porcin B de
la toxina se une a su receptor en la clula husped y se separa de la porcin A, que media la
actividad enzimtica responsable de la toxicidad. El segundo tipo de exotoxinas no tienen las
proporciones separables A-B y actan por desorganizacin de la membrana de las clulas husped;
ejemplos de este tipo de toxinas son las hemolisinas y las fosfolipasas. El tercer tipo de toxina
denominado superantigeno que tambin carece de la estructura A-B y acta por estimulacin de las
clulas B para liberar citocinas por ejemplo la toxina del choque toxico producida por
Staphylococcus aureus.
b) Endotoxinas
La endotoxina es un Iipopolicarido (LPS) que es componente de la membrana externa de las
bacterias Gram-negativas la porcin lipdica (lpido A) esta embebido en la membrana externa con el
core, las porciones del antgeno O se extienden hacia afuera de la superficie de la bacteria. El
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BACTERIOLOGIA
lpido A es la porcin toxica de la molcula, debido a que esta embebida en la membrana externa de
la bacteria intacta, ejerce su efecto solamente cuando la bacteria se lisa. La lisis ocurre como
resultado del efecto del complejo de ataque a membrana o por el complemento, ingestin y
destruccin de fagocitos o la muerte por ciertos tipos de antibiticos. La toxicidad del lpido A reside
en la capacidad de activar el complemento y estimular la liberacin de las protenas bioactivas tales
como citocinas.
c) Otros componentes txicos de la pared
Las bacterias Gram-positivas no tienen endotoxinas, pero la presencia de esas bacterias en el tejido
provoca una respuesta inflamatoria que es idntica a la desencadenada por el lipopolisacarido de
las bacterias Gram-negativas. Aqu se sugiere que el pptido glucan y los cidos teicoicos son
responsables de esos efectos.
d) Enzimas hidroliticas
Muchas bacterias patgenas producen enzirnas hidroliticas, tales como hialuronidasa, que degrada
componentes de la matriz extracelular y de esta forma lesiona la estructura de los tejidos del
hospedero. Otras enzimas tales como DNAsa reduce la viscosidad de los residuos de clulas
muertas del hospedero (pus) y por lo tanto ayuda a la propagacin de la bacteria a un rea ms
extensa de dao en el hospedero. Las enzimas hidroliticas tambin proveen a la bacteria de fuentes
de carbono y energa rompiendo los polmeros del hospedero en azucares y aminocidos de bajo
peso molecular. Frecuentemente es difcil diferenciar entre el dao causado por las enzimas
hidroliticas de bacterias y el dao causado por los fagocitos, debido a que los fagocitos producen
algunos de los mismos tipos de enzimas hidroliticas.
La virulencia de algunos microorganismos es debida en parte a la produccin de enzimas u otros
factores metablicos. Entre las principales enzimas metabolicas relacionadas con la virulencia de
las bacterias se pueden mencionar:
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BACTERIOLOGIA
Lecitinas: conocidas tambin con el nombre de alfatoxina, destruye varios tipos celulares
en particular eritrocitos. Es conocida por Clostridium perfringens.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es una toxina bacteriana?
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Cules son las diferencias entre endotoxinas y exotoxinas?
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Cul es la diferencia entre los pilis y flagelos?
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BACTERIOLOGIA
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Qu es la mucina y en que fluidos se encuentran?
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Qu es una quimiotaxia?
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Cul es la diferencia entre infeccin y enfermedad?
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Cul es la funcin de las fimbrias y adhesinas?
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Qu es un quelante?
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Cul es el la diferencia entre capsula bacteriana y el glucocalix?
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Cul es la funcin de la proteasa sIgA?
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Cul es la diferencia de las bacterias Gram +/-, en relacin a las toxinas?
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Qu provoca un dao causado por clulas fagociticas?
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BACTERIOLOGIA
QUIMIOTERAPIA BACTERIANA
Los antibiticos son sustancias qumicas producidas por diferentes especies de microorganismos
(bacterias, hongos, actinomicetos) o sintetizados por mtodos de laboratorio, suprimen el
crecimiento de otros microorganismos y pueden eventualmente destruirlos. Estos compuestos
difieren marcadamente en sus propiedades fsicas, qumicas y farmacolgicas, as como en su
mecanismo de accin y espectro antimicrobiano.
Con frecuencia se han utilizado de manera indistinta los trminos antibitico, antimicrobiano y
quimioterpico para designar sustancias qumicas definidas con actividad contra microorganismos
especficos, como ya sealamos, el antibitico es una sustancia producida en la naturaleza por
microorganismos vivos o sintetizada en el laboratorio, por lo que se considera un producto de la
evolucin y puede conferir una ventaja selectiva a quienes los producen en un ecosistema
especfico.
Desde el punto de vista tcnico, los antibiticos difieren de los quimioterpicos en que estos ltimos
son productos de sntesis qumica, aunque algunos como las sulfonamidas tienen actividad
antibacteriana, por lo que se ha propuesto el trmino antimicrobiano para describir a todas las
sustancias con esta actividad, ya sean naturales o de origen sinttico.
CLASIFICACIN Y MECANISMO DE ACCIN
En la prctica diaria, las clasificaciones que ms se utilizan son las que se basan en la accin del
antibitico sobre la bacteria, las que los clasifica segn su mecanismo de accin, y al tener en
cuenta la coloracin de Gram y las que los agrupa segn su estructura qumica.
Clasificacin de los antibiticos segn su efecto bacteriano
a. Bacteriostticos: aqullos que inhiben la multiplicacin bacteriana, la cual se reanuda una
vez que se suspende el tratamiento.
b. Bactericidas: poseen la propiedad de destruir la bacteria, su accin es teraputica
irreversible.
Bactericidas
Penicilinas
Cefalosporinas
Bacteriostticos
Tetraciclinas
Eritromicina
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BACTERIOLOGIA
Aminoglucsidos
Rifampicina
Quinolonas
Monobactmicos
Polimixinas
Sulfonamida
Novobiocina
Cloranfenicol
Antibitico
penicilinas, glicopptidos, lincosamida, rifampicinas
aminoglucsidos, monobactmicos, aminociclitoles,
polipptidos
cefalosporinas, carbapenmicos, amfenicoles,
macrlidos, quinolonas, tetraciclinas.
Antibitico
Penicilinas
Cefalosporinas
Vancomicina
Fosfomicina
Tercoplanina
Bacitracina
Poliomixinas
Colistinas
Nistatina
Anfotericn B
Cloranfenicol
Tetraciclina
Aminoglucsidos
Lincomicinas
Eritromicina
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BACTERIOLOGIA
Quinolonas
Sulfonamidas
Rifampicina
Trimetropn
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BACTERIOLOGIA
Las fluoroquinolonas, sulfonamidas, rifampicn, novobiocn y los nitroimidazoles actan por este
mecanismo al inhibir de forma selectiva, la enzima RNA polimerasa dependiente del DNA, lo cual
cataliza la transcripcin de la informacin gentica contenida en el RNA mensajero y se convierte
as en un potente bactericida.
INTERACCIONES DE LOS ANTIBITICOS
Las interacciones de los antibiticos sobre los grmenes pueden producir: sinergismo, adicin,
competencia, antagonismo y el llamado efecto posantibitico.
El efecto posantibitico significa que aun cuando no se erradiquen los grmenes, stos no
proliferan nuevamente durante varias horas despus de exponerlos a una concentracin por
encima de la concentracin mnima inhibidora. Se ha demostrado adems que en la fase de
exposicin posantibitica, los microorganismos son ms sensibles a la destruccin por los
leucocitos.
MECANISMO DE RESISTENCIA A LOS ANTIBITICOS
La resistencia de las bacterias a los antibiticos es un problema que se ha ido complicando, sobre
todo en las ltimas dcadas, porque a medida que se han ido sintetizando nuevos antimicrobianos,
han ido surgiendo cepas resistentes a los mismos.
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BACTERIOLOGIA
Se entiende por resistencia, el mecanismo a travs del cual, la bacteria puede disminuir o inactivar
la accin de los agentes antimicrobianos.
Debe tenerse en cuenta que si bien la resistencia microbiana y resistencia clnica (fracaso
teraputico) estn ntimamente relacionados, no son la misma cosa: la primera se refiere a la
respuesta que desarrollan los patgenos susceptibles a las diferentes concentraciones de
antibiticos mientras que la segunda, se refiere a la ineficiencia teraputica, aun cuando las
concentraciones del antimicrobiano sean correctas: las mismas dependen de factores
extrabacterianos (seleccin inadecuada del antibitico) o del husped (neutropenia, cuerpos
extraos, etc.). La resistencia bacteriana puede ser:
a. Natural: cuando es una propiedad especfica de algunas bacterias.
b. Adquirida: cuando se produce una mutacin cromo smica o la bacteria adquiere un
plsmido de resistencia, es decir, un fragmento estracromosmico de DNA portador de
genes que modifican la resistencia al antibitico. La informacin gentica presente en
algunos plsmidos, es un factor importante en la patogenicidad o la invasividad de las
bacterias, en la velocidad de aparicin de cepas patgenas o invasivas resistentes a las
drogas antimicrobianas y en la evolucin del cuadro clnico.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un antibitico?
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Qu tipos de antibiticos conoce?
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Cul es la diferencia entre las generaciones de los farmacos?
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de protenas?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de cidos nucleicos?
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de la pared celular?
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Qu es una bacteria drogo resistente?
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Qu es una bacteria multidrogo resistente?
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Cules son los mecanismos de la resistencia a los frmacos por parte de las bacterias?
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Qu es un elemento bacteriosttico?
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Cules son las interacciones de los frmacos?
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
La flora humana normal desde diversos puntos de vista representa un importante
mecanismo de defensa del husped.
Contribuye al desarrollo de la respuesta inmunolgica, como ha sido demostrado en
modelos animales que nacen y son criados en condiciones de esterilidad (individuos
axnicos). Estos animales presentan un pobre desarrollo de los diversos componentes de
su sistema inmunitario.
La flora adems ayuda a evitar la colonizacin de la piel o las mucosas por bacterias que
pueden ser patgenas.
Los grmenes para iniciar la infeccin deben, en general, comenzar por colonizar los
epitelios. All seguramente compiten con los integrantes de la flora por factores tales como
receptores celulares y nutrientes.
IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL
Efectos directos
Produccin de bacteriocinas
Produccin de metabolitos txicos
Reduccin del potencial redox
Consumo de nutrientes esenciales
Competencia por receptores
Efectos indirectos
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BACTERIOLOGIA
Los cocos Gram positivos anaerobios pertenecen a los gneros Peptococcus,
Peptostreptococcus, Ruminococcus entre otros.
Pueden adems aislarse especies de Mycoplasma y levaduras del gnero Cndida.
Dado que se trata de un complejo ecosistema, existen tambin complejas interrelaciones entre los
distintos integrantes. A nivel de la placa dentaria, las bacterias se hallan en grandes
concentraciones, formando micro colonias y disponindose en estratos. La flora de la cavidad oral
est involucrada en la patogenia de enfermedades como la caries y periodontitis.
En el desarrollo da la caries dental intervienen no slo las bacterias sino tambin factores como el
pH cido resultante de la descomposicin de hidratos de carbono de la dieta, etc.
FLORA NORMAL DEL APARATO DIGESTIVO
El tubo digestivo alberga un gran nmero de bacterias. Tambin a este nivel se pueden reconocer
distintos nichos ecolgicos. La flora normal intestinal contribuye a la sntesis de vitaminas K y
vitaminas del complejo B y colabora con procesos digestivos. Adems compite con los
microorganismos patgenos por nutrientes y receptores y elabora bacteriocinas.
Estmago: En condiciones fisiolgicas y sin alimentos, el pH gstrico es extremadamente cido,
alrededor de 2; este pH aumenta aproximndose a la normalidad al ingerir alimentos. La densidad
de bacterias es relativamente baja y se compone de grmenes de la flora oro farngea que han sido
deglutidos como Streptococcus hemolticos, Lactobacillus sp., cocos anaerobios, Candida sp. Y
otros grmenes capaces de resistir el medio cido.
Intestino delgado: En el duodeno se mantiene el pH que limita el crecimiento de grmenes. El
peristaltismo representa un mecanismo importante que mantiene un nmero bajo de bacterias. La
bilis tiene propiedades antimicrobianas e inhibe de muchos grmenes. Otras sustancias, como la
lisozima e IgA secretoria, tambin contribuyen a mantener un nmero relativamente bajo de
microorganismos. El nmero de bacterias aumenta gradualmente hacia el leon. A nivel del leon
terminal se alcanzan concentraciones de 106 a 108 bacterias por ml de contenido intestinal, con
predominio de los anaerobios.
Intestino grueso: Las bacterias representan aproximadamente el 40% del peso seco de las
materias fecales. El aumento del contenido bacteriano probablemente se explica por:
Disminucin del peristaltismo,
Aumento del pH; cercano al fisiolgico,
Disminucin del contenido de agua.
Pasando la vlvula ileocecal los grmenes de la flora alcanzan concentraciones de 107 a 109
bacterias por ml, llegando al mximo en el recto con 10 11 bacterias por ml. Es, sin duda, el mayor y
ms complejo ecosistema microbiano del organismo y se estima que a nivel colnico conviven ms
de 500 especies diferentes de bacterias, con un predominio notorio de grmenes anaerobios. Estos
corresponden en su mayora a microorganismos de los gneros Bacteroides, y Fusobacterium,
entre los bacilos Gram negativos, y especies de Peptostreptococcus, Sarcina y Veillonella entre los
cocos.
Los bacilos Gram positivos estn representados por especies de Bifidobacterium, Actinomyces,
Bacillus, Lactobacillus y Clostridium. Entre los anaerobios facultativos predominan las
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BACTERIOLOGIA
enterobacterias, siendo E.coli la ms numerosa, seguida de especies de Klebsiella, Proteus,
Enterobacter y Citrobacter.
De los cocos Gram positivos pueden hallarse especies de Enterococcus, Streptococcus y
Staphylococcus.
La adquisicin de la flora normal se inicia en el momento del nacimiento; en el recin nacido los
grmenes que inicialmente colonizan el tubo digestivo provienen del perineo y de la vagina de la
madre. En general se trata de E.coli, Klebsiella spp. y especies de Enterococcus; ms raramente
especies de Clostridium.
Importancia de la flora digestiva
La presencia de la flora determina un correcto desarrollo de la mucosa intestinal.
Interviene en el metabolismo de sustancias como el cido flico, biotina, vitaminas B12, K y
E.
Favorece la produccin de IgA y contribuye a la inmunotolerancia. Es un importante
estmulo antignico.
Interviene en el ciclo enteroheptico de drogas como el Cloranfenicol.
Tiene efecto de barrera, al ocupar nichos ecolgicos, impide el establecimiento de otras
bacterias, potencialmente patgenas. Este fenmeno se conoce como interferencia
bacteriana.
Segrega bacteriocinas, sustancias que son txicas para bacterias de otros gneros.
La flora normal del tubo digestivo interviene en infecciones oportunistas o endgenas en
circunstancias tales como obstrucciones mecnicas, o perforacin del tubo digestivo. En
este caso, los grmenes pasan al peritoneo, causando una enfermedad grave.
FLORA NORMAL VAGINAL
El estmulo hormonal determina la proliferacin de las clulas epiteliales que aumentan su contenido
de glucgeno. Este es utilizado por Lactobacillus spp., siendo el cido lctico el producto final del
metabolismo que ocasiona un descenso importante del pH. La acidez resultante inhibe en muchas
bacterias. En la mujer en edad genital activa predominan distintas especies de Lactobacillus, otros
bacilos Gram positivos y menor nmero de cocos Gram positivos (Streptococcus spp.,
Enterococcus spp., etc.). Tambin pueden encontrarse en bajo nmero Actinomyces, bacilos Gram
negativos anaerobios como Bacteroides y distintas especies enterobacterias. Streptococcus
agalactiae (grupo B) se asla en un porcentaje variable a esta edad. Si bien no suele producir
enfermedad en la mujer, su presencia implica riesgo para el recin nacido, en el cual puede causar
enfermedad severa.
Durante la gestacin, a medida que el embarazo progresa, aumenta la densidad de LactoBacillus y
disminuyen los bacilos Gram negativos anaerobios y facultativos, el resultado es un mecanismo que
reduce el riesgo de bacteriemia grave durante el parto.
Tambin puede aumentar la cantidad de levaduras y, eventualmente, pueden causar sntomas. En la
etapa prepuberal predominan grmenes de origen cutneo y perineal: S. epidermidis,
Propionibacterium spp., pueden aislarse levaduras en escaso nmero, al igual que enterobacterias y
algunos bacilos Gram negativos anaerobios.
En la mujer postmenopusica, al cesar el estmulo hormonal, la flora retorna al patrn de la infancia.
A la flora vaginal se le reconocen importantes funciones:
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BACTERIOLOGIA
Proteger frente a la infeccin vaginal, en especial en el embarazo,
Suministrar la flora al recin nacido,
Disminuir los riesgos de la madre y del recin nacido en la fase bacterimica del parto.
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BACTERIOLOGIA
mecanismos de defensa: obstruccin a la circulacin de la orina (clculos, hipertrofia prosttica)
malformaciones de la va excretora, sondas vesicales, etc.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es la microflora normal del cuerpo humano?
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Qu ventajas nos dan las bacterias que forman la flora microbiana normal del cuerpo?
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BACTERIOLOGIA
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Qu y cules son las caractersticas de la flora microbiana residente?
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Qu y cules son las caractersticas de la flora microbiana transitoria?
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Cul es la flora microbiana normal de la piel?
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Cul es la flora microbiana normal de la boca?
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Cul es la flora microbiana normal de la vagina?
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Cul es la flora microbiana normal de los intestinos?
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Cul es la flora microbiana normal de la nariz?
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Cules son las desventajas de la flora microbiana normal del cuerpo?
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BACTERIOLOGIA
Bacillus subtilis: presente en el aire y polvo, es un contaminante del laboratorio pero puede
producir enfermedad en inmunodeprimidos. Se utiliza como control biolgico en el horno
Pasteur.
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BACTERIOLOGIA
Bacillus thuringiensis: es utilizado como pesticida por producir una toxina letal para ciertos
insectos.
Bacillus anthracis
Es agente productor del carbunco o ntrax, que fue una de las primeras infecciones bacterianas
para las cuales se estableci definitivamente la causa. Dio lugar al desarrollo de la primera vacuna
bacteriana que fue desarrollada por Louis Pasteur. Es una enfermedad que afecta sobre todo a
animales herbvoros, en particular ovinos y bovinos. El hombre la adquiere de forma accidental: en
el contexto agrcola como una infeccin cutnea local, en el contexto industrial (manipuladores de
cuero y pelo de animal) como una neumona (poco frecuente). Es entonces, una zoonosis y una
enfermedad laboral.
Por producir endosporas altamente resistentes y ser capaz de producir infecciones respiratorias
graves, es un arma biolgica potencial.
Morfologa y fisiologa de B. anthracis
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BACTERIOLOGIA
Estructura antignica
Poseen tres antgenos principales:
Polipptido capsular de gran peso molecular formado casi exclusivamente por cido
D-glutmico. Esta es la nica especie bacteriana de importancia mdica que posee cpsula
peptdica en lugar de polisacrida. Por razones no muy bien conocidas los anticuerpos
anticpsulares no son protectores. Los genes que codifican esta estructura se encuentran
en un gran plsmido.
Toxinas: Produce dos toxinas modelo A-B, que poseen idntica subunidad B. La subunidad
B se conoce como antgeno protector. Es la porcin de la toxina que se fija al sitio blanco y
permite el ingreso a la clula.
Toxina edema: su subunidad A es el componente enzimticamente activo; se denomina
factor edema. Es una adenilato-ciclasa calmodulina-dependiente. Es responsable del
importante edema en los sitios de infeccin, la inhibicin de la funcin de los neutrfilos
y obstaculiza la produccin de factor de necrosis tumoral (TNF) e interleuquina 6 (IL-6)
por parte de los monocitos.
Toxina letal: su porcin A, llamada factor letal, es una metaloproteasa que inhibe la
sealizacin transduccional intracelular. Estimula la liberacin de TNF e IL-1 por parte
de los macrfagos; este mecanismo parece contribuir a la muerte por bacteriemia.
Cpsula: Al igual que sucede con otras bacterias la cpsula es un importante factor de
virulencia al inhibir la fagocitosis.
Patogenia
El carbunco cutneo se produce por contacto de la piel con material infectado. Las esporas ingresan
a travs de una lesin de la piel. Al ser ingeridos por los macrfagos en el sitio de entrada, los
esporas germinan y las clulas se multiplican produciendo cpsula y toxinas.
El carbunco pulmonar ocurre cuando las esporas ingresan a la va area y se depositan en los
espacios alveolares, donde son fagocitadas por los macrfagos alveolares. En el interior de los
mismos germinan y producen las toxinas, para ser luego transportadas por la circulacin linftica a
los ganglios mediastinales. Alcanzan el torrente sanguneo pudiendo causar shock sptico. La
germinacin puede ocurrir hasta 60 das despus del ingreso de las esporas a la va respiratoria.
15
BACTERIOLOGIA
Manifestaciones clnicas
La infeccin cutnea, que comprende el 95% de los casos humanos, se manifiesta por una ppula
indolora de centro color negro-azulado con un gran borde edematoso. Sin tratamiento tiene un 20%
de mortalidad.
La infeccin pulmonar es una severa infeccin respiratoria que evoluciona a la insuficiencia
respiratoria aguda y tiene una muy alta tasa de mortalidad (100% sin tratamiento).
CLOSTRIDIUM
Caractersticas generales
Son bacilos anaerobios grandes, grampositivos, mviles. Descomponedores de protenas y/o
formadores de toxinas. Son saprofitos (suelo, tracto instestinal). Algunos patgenos causan
botulismo, ttanos, gangrena gaseosa y colitis seudomembranosa. Los Clostridium producen
enfermedades importantes mediadas por toxinas tales como ttanos, gangrena gaseosa, botulismo
y colitis seudomembranosa.
Especies del gnero Clostridium:
Morfologa e Identificacin
Microorganismos tpicos
Las esporas habitualmente son ms anchas que el dimetro del bacilo; esta puede ser
central, subterminal o terminal. La mayor parte de los clostridium son mviles y tienen
flagelos pertricos.
Cultivo: Crecen solo en condiciones anerobias. En placas de agar o tubos de cultivo a los
cuales se les ha retirado el aire y se sustituye por nitrgeno con 10% de CO 2. En medio
lquido en tubo largo en el cual contiene muestra de tejido o 0,1% de agar y agente reductor,
como tioglicolato. Crecen desde el fondo hasta 15 mm antes de la superficie.
Forma de las colonias: Algunos, colonias grandes prominentes con bordes regulares (C.
perfringens); otros colonias ms pequeas extendidas en forma de red de finos filamentos
(C. tetani). En agar sangre muchos de ellos producen hemlisis. Perfringens produce
mltiples zonas de hemlisis alrededor de sus colonias.
15
BACTERIOLOGIA
Clostridium botulinum
Causa el botulismo y se encuentra en el suelo y en heces de animales. Los tipos de C. botulinum se
distinguen por el tipo antignico de la toxina producida. Sus esporas son muy resistentes, resisten
100C 3 a 5 horas.
Pruebas diagnsticas de
laboratorio:
Se
puede
demostrar la existencia de
antitoxina en el suero del
paciente y en residuos de
alimentos. En el botulismo del
lactante se puede demostrar la
existencia de C. botulinum y
toxina en el contenido intestinal
pero no en el suero.
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BACTERIOLOGIA
Clostridium tetani
Causa el ttanos, se distribuye en el suelo y heces de caballos y otros animales. Se distinguen
varios tipos mediante antgenos flagelares. Todos comparten un mismo tipo de antgeno O comn
(somtico) y todos producen el mismo tipo de neurotoxina, la tetanospasmina.
Clostridium perfringens
Diferentes Clostridium txicos pueden producir infeccin invasora (incluso mionecrosis y gangrena
gaseosa), pero el ms comn es el C. perfringens. Una toxina del C. perfringens produce
envenenamiento alimentario.
15
BACTERIOLOGIA
celulares, transformndola en forforilcolina y diglicridos. La toxina theta es hemoltica y
necrosante, pero no es lecitinasa, es colagenasa de tejido subcutneo y msculo.
Algunas cepas de C. perfringens producen enterotoxina. Produce hipersecrecin del yeyuno
e leon, con diarrea y prdida de lquido y electrolitos (se cree por estimulacin de
adenilciclasa o guanilciclasa). Al ingerir los organismos, estos esporulan en el intestino y
forman enterotoxina, que es una protena idntica a un componente de la capa de la
espora. Produce diarrea intensa en 6 a 18 horas. Esta enfermedad es autolimitada.
Patogenia: Esporas alcanzan los tejidos por contaminacin de las zonas traumatizadas o
desde el intestino. Las clulas vegetativas fermentan carbohidratos y producen gas.
Distensin tisular e interferencia del riego sanguneo junto con la toxina necrosante y
hialuronidasa favorecen la propagacin de la infeccin. Necrosis se extiende, aumentan los
microorganismos, se produce anemia hemoltica y finalmente la muerte por toxemia grave.
La gangrena gaseosa (micronecrosis por Clostridium) es una enfermedad mixta, se pueden
observar tambin cocos y microorganismos gramnegativos. El C. perfringens de tipo C
producira enteritis necrosante. La inmunizacin con este toxoide parece tener valor
preventivo.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son las especies ms representativas del genero Bacillus?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Bacillus anthracis?
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BACTERIOLOGIA
Cul es la estructura antignica del Bacillus anthracis?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Bacillus anthracis?
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Cules son las especies ms representativas del genero Clostridium?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium botulinum?
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Cul es la estructura antignica del Clostridium botulinum?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Clostridium botulinum?
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Cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium tetani?
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Cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium perfringens?
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Cules son las diferencias entre el gnero Bacillus y Clostridium?
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BACTERIOLOGIA
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Macroscopa: colonias pequeas (0,5 1,5 cm.), translcidas. En agar sangre produce
colonias similares a Streptococcus spp. Las cepas patgenas producen un halo muy
estrecho de -hemlisis; frecuentemente es necesario remover las colonias para visualizar
la hemlisis.
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BACTERIOLOGIA
Son catalasa positivos (a diferencia de los Streptococcus spp), fermentan azcares como la
glucosa, manosa y ramnosa, pero no el manitol (a diferencia de otras especies no patgenas);
tambin hidrolizan la esculina. Tienen cuatro flagelos, los que se pierden cuando ingresan al ser
humano. Cuando se siembran en medios semislidos en tubo y se incuban a 25C, muestran una
movilidad caracterstica en aspecto de sombrilla, la cual no se observa cuando se incuba a 37C.
Estructura antignica: Los determinantes antignicos ms caracterizados son el antgeno O
(somtico) y antgeno H (flagelar) que permiten la clasificacin en diferentes serotipos. Hasta la
fecha se han descrito 13 serotipos. La mayora de las infecciones humanas son producidas por un
serotipo en particular (4b), mientras que en alimentos predominan otros serotipos diferentes. La
serotipificacin es til en estudios epidemiolgicos.
Determinantes de patogenicidad: Explicaran en parte la capacidad de L. monocytogenes de
proliferar dentro de las clulas ya que es un microorganismo intracelular facultativo (principalmente
en macrfagos y clulas epiteliales).
15
BACTERIOLOGIA
alcanzan el torrente circulatorio y de all alcanzan otros rganos, teniendo predileccin por el
sistema nervioso central y la placenta.
La infeccin connatal se trasmite de diferente manera. Las mujeres embarazadas infectadas pueden
transmitir la infeccin al feto por va transplacentaria. No se ha demostrado claramente la
transmisin en el canal de parto.
CORYNEBACTERIUM
Es un gnero con numerosas especies (ms de 46), algunas de ellas forman parte de la flora normal
de mucosas y piel del ser humano; excepcionalmente algunas de ellas causan enfermedad en
pacientes inmunodeprimidos. La especie patgena por excelencia es C. diphtheriae, responsable de
la enfermedad denominada como difteria.
Son bacilos pleomrficos, no esporulados y no cido-alcohol resistente. La mayora fermentan la
glucosa y son catalasa positivos. Su genoma contiene de 51 a 68 mol % de G + C, y mediante el
estudio del 16s rARN se lo encontr estrechamente relacionado con Mycobacterium, Nocardia y
Rhodococcus.
Es por excelencia la especie ms importante del gnero. Se describen cuatro biotipos: gravis, mitis,
belfanti e intermedius; su importancia es epidemiolgica.
Morfologa y fisiologa
Macroscopa: las colonias tpicas son pequeas, blanco grisceas brillantes. En medios
selectivos con telurito se ven grisceas a negras. La presencia y el tipo de hemlisis son
variables. Es un microorganismo anaerobio facultativo, pero crece mejor en medios
aerobios. Es exigente desde el punto de vista nutricional. Su pared celular est compuesta
por cido mesodiaminopimlicos (no L-lisina), polmeros de arabino galactano y cidos
miclicos de cadena corta (por ello su posicin taxonmica y su relacionamiento con
Nocardia, Mycobacterium y Rhodococcus).
Estructura antignica
Los ms caracterizados son:
Antgeno K: son protenas termolbiles localizadas sobre la superficie, son uno de los
principales factores de virulencia. Responsables de la especificidad de tipo.
15
BACTERIOLOGIA
Toxina
Determinantes de patogenicidad
Los ms importantes son:
Factor de cordn: contiene los cidos miclicos propios de C. diphtheriae, tiene actividad
similar al de Mycobacterium spp; en las clulas del ratn provoca rotura de las mitocondrias,
disminucin de la respiracin y la muerte.
Dicha toxina es producida por las cepas de C. diphtheriae infectadas por un bacterifago temperado
que transporta el gen estructural para la toxina; en general es un fago tox+. La expresin del gen
tox est sumamente regulada por factores genticos y fisiolgicos. La toxina slo se produce a
niveles mximos cuando declina el crecimiento bacteriano, cuando las concentraciones de hierro en
el medio disminuyen. Esto parece estar regulado de forma que cuando hay hierro en el medio se
forma un complejo represor-hierro que se une especficamente al operador tox del fago . En
condiciones de baja concentracin de hierro en el medio, el complejo se disocia y el gen tox, se
desreprime y se sintetiza la toxina. La toxina se sintetiza a nivel de los polisomas de la membrana
de C. diphtheriae y es secretada co-traduccionalmente como una cadena polipeptdica no txica.
Adquiere su toxicidad al actuar la tripsina que pone al descubierto sus sitios enzimticos activos. Es
un modelo A-B de toxina: la subunidad B (sitio de unin a la clula eucariota) unida a la subunidad A
(sitio enzimtico activo) por un puente disulfuro. Accin: la toxina ingresa a la clula y al llegar al
citoplasma altera la sntesis proteica. La subunidad A produce una ADP-ribosilacin del factor de
elongacin EF-2 de los ribosomas celulares, lo que produce su inhibicin. Los ribosomas al poseer
un solo EF-2 quedan inhibidos por una sola subunidad A. Se produce as la inhibicin de la sntesis
proteica lo que lleva rpidamente a la lisis celular, produciendo necrosis e inflamacin local de la
mucosa. Adems, esta toxina es la responsable de los efectos sistmicos de la enfermedad ya que
produce toxicidad cardaca, del sistema nervioso central y perifrico, y dao renal.
Patogenia: Se trata de una enfermedad toxignica. La bacteria no tiene gran capacidad de invasin
y en general persiste en la superficie de las mucosas y la piel, desde donde produce la toxina con
actividad sistmica.
La infeccin respiratoria se trasmite principalmente por las gotitas de reflujo y las lesiones cutneas
altamente infectantes son fuente de enfermedad farngea y cutnea. Dicha transmisin se ve
favorecida por el hacinamiento y el fro. Los microorganismos se establecen en la orofaringe y
15
BACTERIOLOGIA
amgdalas y se reproducen con rapidez. Luego comienzan a secretar la exotoxina que produce
necrosis local y gran respuesta inflamatoria con la produccin de exudados fibrinosos, que se van
organizando y forman una seudomembrana gruesa y muy adherente. Dicha pseudomembrana junto
con el edema y las importantes adenomegalias locales producen obstruccin respiratoria alta (crup).
Las manifestaciones sistmicas de la enfermedad se deben a la toxicidad cardaca y del sistema
nervioso perifrico que produce la toxina.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Listeria monocitogenes?
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Cul es la estructura antignica del Listeria monocitogenes?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Listeria monocitogenes?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Corinebacterium diphtheriae?
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Cul es la estructura antignica del Corinebacterium diphtheriae?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Corinebacterium diphtheriae?
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Cules son las diferencias entre el gnero Listeria y Corinebacterium?
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BACTERIOLOGIA
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Vibrios
VIBRIONACEAE
La Familia Vibrionaceae agrupa diferentes gneros de bacilos Gram negativos con un hbitat
primario acutico. Se los encuentra en el mar en aguas continentales y en relacin con animales
acuticos. Diversas especies son patgenas para el hombre, peces, as como otros vertebrados e
invertebrados.
Aunque la Familia fue definida inicialmente en un intento de agrupar especies oxidasa positivas y
mviles por flagelos polares para diferenciarlas de los integrantes de la Familia Enterobacteriaceae,
se vio que todos estos microorganismos comparten atributos distintivos que sugieren un origen
evolutivo comn.
Microscopia: Son bacilos Gram negativos, rectos o curvos. Mviles por flagelos polares. No forman
esporos. Quimioorganotrofos, desarrollan en medios simples, son anaerobios facultativos, capaces
de tener un metabolismo fermentativo o respiratorio. La mayora oxidasas positivo. La mayora de
las especies requiere 2-3% de ClNa o agua marina para desarrollar. El % G + C del ADN va de 38 a
63%.
Los gneros que forman esta familia son:
Vibrio
Photobacterium
Aeromonas
Plesiomonas
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BACTERIOLOGIA
Por muchos aos la nica especie que interes a los microbilogos fue V. cholerae, agente del
Clera epidmico. Otras especies tales como V. parahemolyticus pueden causar toxiinfecciones
alimentarias en el hombre luego de la ingestin de productos del mar, es la primera causa de diarrea
en el Japn, donde se consume pescado crudo. Otras especies de Vibrio y Plesiomonas
shigelloides tambin estn relacionadas con gastroenteritis. Por otra parte, Aeromonas hydrophila
es responsable de infecciones de heridas que han sido expuestas a aguas contaminadas, y
ocasionalmente, puede provocar infecciones sistmicas en enfermos inmunodeprimidos.
Vibrio cholerae
V. cholerae es un bacilo Gram negativo, curvo, con forma de coma. Desarrolla bien en medios
simples. Aunque su desarrollo est estimulado por la presencia de Na+, esta especie a diferencia de
las otras especies del gnero, desarrolla en medios sin el agregado de ClNa. V. cholerae tolera
condiciones de alcalinidad y es capaz de desarrollar a pH 10. Estas propiedades se utilizan para
aislar el germen de las muestras clnicas, de alimentos o del agua. Las cepas epidmicas de V.
cholerae se dividen en 2 biotipos: clsico y eltor.
Es el agente del Clera. Es una enfermedad epidmica grave que ha matado millones de personas
y contina siendo un importante problema de Salud en todo el mundo. La historia moderna del
Clera comienza en 1817 con la primera de las 7 pandemias. En 1950 slo haba Clera en Asia.
En 1961 V. cholerae O:1 biotipo El Tor se disemin fuera de Indonesia, primero a otros pases
asiticos y Medio Oriente luego en la dcada del 70 a Africa, Sureste europeo e islas del Pacfico.
En enero de 1991 se notificaron los primeros casos de Clera en Per. En unas semanas se
disemin rpidamente en el pas. La enfermedad afect todas las edades con una muy alta
incidencia y al principio alta mortalidad. El comportamiento es de oscilacin estacionaria,
apareciendo en los meses clidos el mayor nmero de casos. Luego de la diseminacin epidmica
inicial, es posible que el Clera persista en algunas reas por aos en un estado de endemia. Es
indiscutible que la mejor forma de controlar el Clera en las poblaciones es el poseer agua potable y
un adecuado saneamiento que junto a la educacin son los pilares fundamentales del control de
estas epidemias y adems contribuyen al desarrollo de estas poblaciones.
Estructura antignica
Se puede dividir en base a sus antgenos somticos. Se describen al menos 139 serogrupos
diferentes. Todos comparten un mismo antgeno flagelar. Las cepas pertenecientes al serogrupo O:1
hasta 1992 fueron las nicas asociadas con Clera epidmico. Desde 1992 un nuevo serogrupo
O:139 ha sido relacionado con Clera epidmico en India y Bangladesh. Los biotipos son aplicables
solamente a V. cholerae O:1. Las cepas pertenecientes a los otros serogrupos se asocian a casos
de diarrea ocasional o enfermedades extraintestinales. Las cepas del serogrupo O:1 se dividen
clsicamente en 3 serotipos: Ogawa, Inaba e Hirojima. Las cepas aisladas pueden sufrir
conversiones de Inaba a Ogawa, por lo que los serotipos son de escaso inters epidemiolgico.
Patogenia
V. cholerae causa enfermedad en el
hombre porque es capaz de colonizar el
intestino delgado luego de ingerido. Se
adhiere a la superficie mucosa y produce
una enterotoxina, la toxina colrica que
15
BACTERIOLOGIA
acta en las clulas mucosas intestinales. Esta accin est dirigida a alterar el balance
hidroelectroltico de estas clulas, disminuyendo la entrada de Sodio y aumentando la salida de
Cloro y agua hacia la luz intestinal, resultando en diarrea importante y disbalance electroltico, que
puede llevar al paciente a la muerte por shock hipovolmico. Con un buen soporte de lquido y
electrolitos el paciente sobrevive.
Factores de virulencia.
Hasta hace 5 aos se crea entender muy bien los mecanismos patognicos de V. cholerae. Estos
se explicaban por tres factores: flagelo, que permita a la bacteria nadar hasta la mucosa intestinal;
pili que mediaba la adherencia a las clulas de la mucosa, y la toxina colrica que produca diarrea
severa.
Colonizacin de la mucosa del intestino delgado. Adems de las evidencias descritas de que la
motilidad flagelar puede ayudar a V. cholerae a alcanzar la mucosa intestinal, la mayora de las
investigaciones han sido dirigidas a ver lo que sucede cuando V. cholerae alcanza la mucosa. Una
contribucin importante a la colonizacin es la presencia de largos filamentos formando un
agrupamiento en la superficie de la bacteria. Cepas que carecen de estos pili son avirulentas. Se los
ha llamado Tcp pili (pili coregulado con la toxina). A diferencia de lo que sucede en otras bacterias
estos pili estn localizados solamente en una porcin de la superficie celular.
La relevancia de esta toxina como factor de virulencia, que acta por ADPribosilacin tipo A-B.
Posee una subunidad A (enzimtica), y 5 idnticas subunidades B (unin). La subunidad A debe ser
clivada para ser enzimticamente activa en A1 y A2. La variedad de efectos que se producen
incluye la alteracin de las actividades de los transportadores de Sodio y Cloro. Esto lleva a un
disbalance inico que causa la prdida de agua asociada al clera. En clulas polarizadas como las
de la mucosa intestinal la adenil cyclasa se localiza en la membrana basolateral por lo que la toxina
unida a la superficie apical debe actuar al otro lado de la clula.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son los gneros representativos de la familia Vibronaceae?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Vibrio cholerae?
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Cul es la estructura antignica del Vibrio cholerae?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Vibrio cholerae?
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
Caracteres antignicos
Los microorganismos pertenecientes a la Familia Enterobacteriaceae poseen una estructura
antignica compleja.
Los antgenos O, antgenos somticos. Son la parte ms externa del LPS y estn formados por
unidades polisacardicas repetidas. Algunos contienen un nico azcar. Son termoestables y
alcoholestables detectndose por aglutinacin simple.
La naturaleza de los grupos terminales y el orden en que estos azucares estn dispuestos en las
unidades repetitivas determina la especificidad de los numerosos antgenos O. Un mismo
microorganismo puede poseer varios antgenos O. Cada gnero est asociado a grupos
antignicos especficos, por ejemplo la mayora de los serotipos de Shigella comparten uno o ms
antgenos O con E. coli (Shigella y E. coli pertenecen al mismo gnero). En E. coli algunos
antgenos somticos estn asociados con fenotipos virulentos especficos, por ejemplo E. coli O:111
y O:119 son frecuentemente agentes etiolgicos de diarrea aguda en los nios pequeos.
Los antgenos K son externos a los antgenos O. Algunos constituyen una verdadera cpsula
visible al microscopio como sucede con Klebsiella, mientras que en E. coli por ejemplo su estructura
no es visible al microscopio ptico y se los denomina antgenos de envoltura por comportarse como
si envolvieran la bacteria volviendo inaglutinable el antgeno O de la pared. Son de naturaleza
polisacardica. Otros antgenos de envoltura pero de naturaleza proteica se presentan como
fimbrias.
Los antgenos H, flagelares, son de naturaleza proteica. Esta protena que constituye los flagelos
es
llamada flagelina. Este antgeno es termolbil y destruido por el alcohol. El contenido de
aminocidos y el orden en que estos se encuentran en las flagelinas determina la especificidad de
los diversos antgenos. Como ya fue mencionado los flagelos bacterianos estn compuestos de un
solo tipo de protena. En Salmonella existe variacin de fase. Como resultado de ello, la protena
flagelar puede ser de dos tipos por medio de un mecanismo de regulacin gentica.
Caractersticas patognicas
Se ha asociado a cepas de Enterobacteriaceae con abscesos, neumonas, meningitis, septicemia,
infecciones de heridas, infecciones urinarias e intestinales. Son el componente mayor de la flora
normal intestinal, pero son relativamente poco frecuentes en otros sitios del organismo. Algunas
especies son importantes como causa de infecciones nosocomiales. Significan el 50% de todos los
aislamientos clnicos y el 80% de los bacilos Gram negativos. Representan el 50% de los casos de
septicemia y ms del 70% de las infecciones urinarias.
Hasta 1940 slo Salmonella y Shigella estaban relacionadas con gastroenteritis humana.
Actualmente es bien conocido algunas variantes patognicas de E. coli como causa significativa de
enfermedad diarreica y cepas invasivas de Yersinia enterocolitica como causa de diarrea y adenitis
mesentrica. Por otra parte salvo Shigella que raramente causa infecciones fuera del tracto
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BACTERIOLOGIA
gastrointestinal muchas especies de Enterobacteriaceae causan frecuentemente infecciones
extraintestinales.
Escherichia coli
Constituye la especie dominante de la flora aerobia del tubo digestivo, ms de 10 serotipos
coexisten normalmente en el mismo individuo. Son estas mismas bacterias integrantes de la flora
normal las que pueden causar en diversas circunstancias infecciones urinarias, septicemias,
meningitis etc. El poseer determinadas caractersticas antignicas, como el antgeno de envoltura
K1, muy parecido por su composicin en cido silico al antgeno capsular de Neisseria meningitidis
del grupo B, dara a este germen potencialidades invasivas. 80% de E. coli aisladas de meningitis
del recin nacido poseen este antgeno K1.
Por otra parte el poseer plsmidos que portan genes que codifican para la produccin de diferentes
adhesinas, enzimas o enterotoxinas otorga a E. coli caractersticas patognicas particulares y la
capacidad de desencadenar infecciones urinarias o gastrointestinales.
Los caracteres bioqumicos para la identificacin de esta especie se describen en la tabla
correspondiente. Desde el punto de vista antignico en E. coli se han descrito ms de 150 serotipos
O. Poseen antgenos de envoltura polisacardicos K, que como es habitual en el mundo bacteriano
permiten a la bacteria resistir ms fcilmente la fagocitosis que las bacterias no capsuladas.
Asimismo se describen ms de 56 antgenos H. De lo dicho se desprende que una tipificacin
antignica completa es resorte de laboratorios especializados y no forma parte del trabajo corriente
de los laboratorios.
Patogenia
E.coli integra la flora normal, causar diarrea, infeccin urinaria, meningitis, etc. Pero una cepa que
causa diarrea no causara infeccin urinaria ni meningitis. La versatilidad de este microorganismo
esta dado porque E.coli ha adquirido conjuntos diferentes de genes de virulencia. E.coli es un
excelente ejemplo de que el poseer un conjunto de genes en ella es lo que hace que una bacteria
sea patgena y no la designacin de gnero o especie.
Se ha propuesto para E. coli agente de diarrea una clasificacin de acuerdo a sus mecanismos de
virulencia, los llamados virotipos. Aunque arbitraria, esta clasificacin es muy til. Se describen 5
virotipos:
E. coli enterotoxignico
(ETEC) Se parece mucho a V. cholerae, adhiere a la mucosa del intestino delgado, no la invade,
elabora toxinas que causan diarrea. No hay cambios histolgicos en las clulas de la mucosa y muy
poca inflamacin. Clnicamente hay diarrea acuosa, vmitos y se puede acompaar de fiebre. Es la
llamada infeccin no inflamatoria del intestino delgado.
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BACTERIOLOGIA
E.coli enteroagregativo
(EAggEC) Son agentes de diarrea persistente en nios. Las cepas de EAggEC se parecen a ETEC
en que se unen a las clulas intestinales, no son invasivas y no causan modificaciones histolgicas
en las clulas de la mucosa. Difieren de ETEC en que no adhieren en forma uniforme sino que lo
hacen en pequeos agregados.
E.coli enteropatgeno (EPEC).
EPEC es causa de diarrea severa en nios pequeos, de gran trascendencia en pases
subdesarrollados. EPEC exhibe un patrn de adherencia en parches, pero no forma el mismo tipo
de agregados que EAggEC. A diferencia de las anteriores la adherencia de EPEC produce
alteraciones importantes en la ultraestructura de las clulas del husped. Las clulas a las que
EPEC est adherida alargan las microvellosidades donde EPEC no se encuentra y estas
desaparecen en el sitio donde la bacteria est adherida. Este fenmeno se refiere como de unin y
borramiento y es el resultado de un reordenamiento de actina en la vecindad de la bacteria
adherida. EPEC es ms invasora que las anteriores y se produce una reaccin inflamatoria.
E.coli enterohemorrgico
(EHEC). Se ha reconocido recientemente a EHEC como responsable de cuadros graves. Estas
cepas causan una enfermedad que clnicamente se parece a la disentera producida por Shigella,
aunque probablemente no invade las clulas de la mucosa. La enfermedad producida por EHEC
puede complicarse con sndrome urmico hemoltico (HUS) que puede llevar al paciente la muerte
por falla renal aguda. O157:H7 es el serotipo predominante en este grupo de EHEC.
E.coli enteroinvasor (EIEC)
EIEC produce una enfermedad indistinguible de la disentera producida por Shigella. Los pasos en
la
invasin y diseminacin clula a clula parecen ser idnticos a los de Shigella. A diferencia de
Shigella no produce toxina de Shiga. No se han descrito casos de HUS en relacin a estas cepas,
probablemente en relacin con la ausencia de toxina Shiga. Al igual que Shigella muchos de los
genes involucrados residen en un gran plsmido de virulencia.
E.coli uropatognico
Las infecciones del tracto urinario comienzan generalmente con la colonizacin de la uretra por
cepas originarias del colon previa colonizacin de la vagina. Una de las mayores defensas del
husped es la accin lavadora de la orina. Las bacterias que no se pueden adherir van a ser
lavadas ms rpidamente de la vejiga de lo que tardan en multiplicarse. Por otra parte las bacterias
que adhieren estn ms cerca de la mucosa y tienen mayores facilidades para provocar respuesta
inflamatoria. Numerosas adhesinas de E.coli uropatgeno han sido estudiadas.
Shigella
Son bacterias estrictamente humanas. Como sucede frecuentemente esta adaptacin se produce
con prdida de funciones. Shigella que por hibridacin se encuentran tan cercano a E.coli que
podran todos pertenecer a una misma especie, a diferencia de ste son auxotrofos, inmviles, poco
15
BACTERIOLOGIA
glucidolticos y prcticamente no producen gas en la fermentacin de glucosa. Los caracteres
bioqumicos se describen en la tabla correspondiente.
En base a los caracteres bioqumicos y antignicos se describen 4 especies:
Shigella dysenteriae,
Shigella flexneri,
Shigella boydii
Shigella sonnei.
15
BACTERIOLOGIA
y aumentan dramticamente los niveles de piruvato indicando una alteracin del metabolismo
energtico. Por otra parte Shigella puede inducir la muerte celular programada en los macrfagos,
un fenmeno llamada apoptosis lo que sugiere otra va de muerte celular y, por supuesto, de
inflamacin. LPS contribuira tambin al dao celular.
La toxina Shiga producida por S. dysenteriae es uno de los factores aun no del todo aclarados.
Experimentalmente acta como enterotoxina pero tambin como neurotoxina y como citotoxina
sistmica. No parece importante ni en la invasin ni en la muerte de las clulas de la mucosa. Su
papel ms importante parece estar en una de las complicaciones de las shigellosis.
Salmonella
Salmonella son bacterias que, para la mayora de los serotipos habitan el intestino del hombre y los
animales. Hay algunos serotipos que se encuentran adaptados a una sola especie animal, como por
ejemplo Salmonella typhi, responsable de la Fiebre Tifoidea que se encuentra solamente en el
hombre. Las caractersticas patognicas son tan variadas como su hbitat natural. Se pueden dividir
segn las presentaciones clnicas en:
La clasificacin de Salmonella es compleja. Dentro del gnero Salmonella prcticamente una nica
especie tiene importancia en patologa humana y animal y una nica subespecie llamada
Salmonella entrica subespecie enterica, pero se describen aproximadamente 2000 serotipos
dentro de esta subespecie, por lo que corrientemente se los llama por el nombre del serotipo, por
ejemplo Salmonella typhi ya mencionada o Salmonella enteritidis. Salmonella son mviles. Desde el
punto de vista antignico, poseen antgenos O somticos, antgenos de envoltura y antgenos
flagelares H con dos especificidades antignicas expresadas alternativamente como ya fue descrito.
Las caractersticas bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Presentaciones clnicas
Gastroenteritis. Los sntomas aparecen 6 a 24 horas luego de la ingestin del alimento o agua
contaminados y pueden durar hasta una semana o ms. Nuseas, vmitos, dolor abdominal y
diarrea, son los sntomas principales. La severidad vara de una persona a otra, pudiendo llegar a
presentar dolores que hagan pensar en apendicitis y diarreas severas inclusive con sangre.
La mayora de los casos ocurren en nios menores de 10 aos y los sntomas pueden ser ms
severos en este grupo. La infeccin puede volverse sistmica. La infeccin sistmica es ms
frecuente en lactantes o enfermos inmunocomprometidos (cncer, SIDA). En general se trata de una
enfermedad molesta pero poco peligrosa, aunque durante los grandes brotes se ven algunos
enfermos graves y pueden morir algunos pacientes. S. enteritidis y S. typhimurium son los serotipos
ms frecuentes aislados en toxiinfecciones alimentarias. Diversos alimentos estn involucrados.
Derivados crnicos y huevos son algunos de los ms frecuentes. Tcnicas modernas en la cra de
las aves, hacinamiento, dietas hiperproteicas llevan a altos niveles de portacin intestinal de
Salmonella. En los mataderos es frecuente la contaminacin de las carcasas y de las superficies de
15
BACTERIOLOGIA
los huevos. Se ha demostrado tambin la transmisin transovrica de Salmonella de las gallinas a
sus huevos. La idea de que huevos de cscara sana son seguros es por lo tanto falsa. La
enfermedad resulta del consumo de alimentos contaminados mal cocidos o de contaminacin
cruzada con alimentos crudos en las cocinas.
Otra forma de propagacin de la enfermedad, no desdeable, dejando de lado las toxiinfecciones
alimentarias es la transmisin interhumana, de persona a persona por medio de las manos
contaminadas. S. typhi es el serotipo especfico que causa la Fiebre Tifoidea. El hombre la adquiere
por consumir alimentos o agua contaminados por heces humanas. La contaminacin de los
alimentos puede tambin ocurrir durante su preparacin con manipuladores de alimentos portadores
de S. typhi y que eliminan gran nmero de bacterias en sus materias fecales. Infectados
asintomticos y portadores que han padecido la enfermedad previamente son los que mantienen la
fuente de infeccin.
Es sorprendente lo limitado del conocimiento en la patogenia de las infecciones causadas por
Salmonella. S. typhi atravesara la mucosa por medio de las clulas M, se multiplicara en la
submucosa y de all se diseminara. Las bacterias se multiplican en hgado y bazo y pasaran desde
all a la circulacin general. Se han visto, en otros serotipos, bacterias dentro de las clulas
mucosas absortivas y en macrfagos asociados a la mucosa. No es claro el mecanismo por el que
se produce la diarrea. Salmonella al igual que otros patgenos digestivos, induce a las clulas del
husped a englobarlos, pero parece algo diferente a la fagocitosis inducida de otros patgenos, ya
descrita. Luego de adherida la bacteria a la superficie celular, se produce un pliegue en la clula,
que la rodea y la introduce en una vescula de endocitosis. Hay intensa polimerizacin de actina en
la vecindad y luego de introducida, sta desaparece. La bacteria no escapa de la vescula ni entra
en el citoplasma, se multiplica en este fagosoma para ser posteriormente liberadas.
Klebsiella
La principal especie de este gnero es Klebsiella pneumoniae, muy expandida en la naturaleza. Se
la asla frecuentemente de materias fecales del hombre y los animales, pero tambin de aguas,
vegetales y alimentos. Son bacilos Gram negativos inmviles, a menudo capsulados. La cpsula es
de naturaleza polisacardica. Las propiedades bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Desde el punto de vista antignico, es til en epidemiologa la determinacin de los antgenos
capsulares. Existen ms de 70 tipos capsulares diferentes. Pueden existir reacciones cruzadas con
antgenos capsulares de otras especies bacterianas. El poseer cpsula otorga a estas bacterias un
aspecto colonial mucoide.
Se trata de patgenos oportunistas, pueden provocar diversos cuadros clnicos en el hombre:
infecciones urinarias, bacteriemias, neumonas, infecciones hepato-biliares, etc. Un porcentaje
elevado de aislamientos de Klebsiella, particularmente aquellos de infecciones nosocomiales,
contienen plsmidos de resistencia a los antibiticos. Puede ser resistencia a betalactmicos,
aminoglucsidos, etc.
Enterobacter Serratia
Estos dos gneros comprenden diversas especies presentes en general en el tubo digestivo del
hombre y los animales, en el suelo, vegetales y en aguas. Las caractersticas bioqumicas se
describen en la tabla correspondiente.
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BACTERIOLOGIA
Son patgenos oportunistas. Al igual que Klebsiella los aislamientos hospitalarios generalmente
presentan resistencias a mltiples antibiticos.
Proteus - Morganella Providencia
Estos tres gneros forman un grupo caracterizado por poseer la capacidad de desaminar
oxidativamente los aminocidos formando cidos cetnicos. Habitan el tubo digestivo del hombre y
los animales, encontrndose tambin en el suelo, vegetales y aguas.
Las especies ms frecuentemente aisladas en cada gnero son Proteus mirabilis, Morganella
morgagnii, Providencia rettgeri. Son bacilos Gram negativos muy polimorfos, mviles, Proteus spp.
poseen una movilidad extrema que les permite invadir los medios slidos.
Las propiedades bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Desde el punto de vista patognico, son agentes de infecciones urinarias, pudiendo causar
infecciones sistmicas en huspedes inmunocomprometidos. P. mirabilis ha sido ms estudiado,
encontrndose factores de virulencia para el aparato urinario, tales como adhesinas y una
hemolisina; se ha sostenido por aos el papel de la ureasa producida por Proteus y Morganella en
la patogenia de pielonefritis.
Yersinia
Este gnero comprende varias especies entre ellas Y. pestis, agente de la peste o plaga bubnica o
neumnica, comnmente llamada la muerte negra, enfermedad de los roedores, trasmitida
ocasionalmente al hombre por las pulgas, con pandemias histricas desde el siglo VI. Y. pestis es
endmica en algunas regiones tales como Irn y el oeste de Estados Unidos.
Otra especie Y. enterocolitica es muy ubiquitaria, se ingiere con agua o alimentos contaminados.
Algunos biotipos estn relacionados con enterocolitis en el hombre. Raramente presenta infecciones
sistmicas. Sin embargo, las bacterias atraviesan con frecuencia la mucosa y se multiplican en los
ndulos linfticos mesentricos. Debido a los intensos dolores abdominales el cuadro puede
confundirse con apendicitis.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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BACTERIOLOGIA
Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA
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Pseudomonas
BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES
Este gran grupo de bacilos Gram negativos incluye grmenes pertenecientes a diferentes familias y
otros gneros de incierta clasificacin. Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes, Acinetobacter,
son algunos de ellos, en general desprovistos de grandes atributos de virulencia demostrables, no
producen enfermedad en el individuo sano pero pueden comportarse como oportunistas en
enfermos inmunodeprimidos.
Pseudomonas
De las numerosas especies de Pseudomonas descritas slo unas pocas tienen importancia en
patologa humana. Pseudomonas mallei y P. pseudomallei causan enfermedad severa en el hombre
pero se aslan raramente en el Hemisferio Occidental. Por otra parte P. cepacia es un oportunista
poco frecuentemente asociado con enfermedad en el hombre.
La especie Pseudomonas aeruginosa por su frecuencia en patologa humana es mejor estudiada
que otros. Es un microorganismo verstil, ampliamente distribuido en el suelo, agua, plantas e
intestino de animales. Puede causar enfermedad en el hombre, ciertos animales, plantas e insectos.
El agua contaminada puede ser una fuente de infeccin para el hombre. Es susceptible a la
desecacin, pero sus habilidades metablicas le permiten sobrevivir y multiplicarse en lquidos y
ambientes hmedos de los hospitales. Sus requerimientos nutricionales son variados, se ha aislado
P. aeruginosa de aguas termales, e incluso de soluciones desinfectantes en el hospital.
Las infecciones humanas estn la mayora restringidas a los pacientes hospitalizados que
adquieren el microorganismo de fuentes ambientales (infeccin exgena) por contacto con vectores
humanos o inanimados. P. aeruginosa desarrolla bien en medios simples, utilizndose para su
aislamiento los medios de cultivo de uso corriente en el laboratorio clnico.
La morfologa colonial y el olor frutado de aminoacetofenona son elementos de una identificacin
sencilla, y aunque existen caracteres de identificacin confirmatorios, son de uso poco corriente.
15
BACTERIOLOGIA
La identificacin de cepas de P. aeruginosa tpicamente productoras de pigmento no es difcil, pero
las cepas no pigmentadas pueden presentar un problema. La mayora se identifican por la
produccin de un pigmento, pyocyanina, soluble en agua, azul, no fluorescente. P. aeruginosa
produce adems otro pigmento, pyoverdina, soluble en agua, verdeamarillento, fluorescente; otras
especies del gnero Pseudomonas tambin producen pyoverdina. Otros pigmentos, menos
frecuentes pueden ser producidos por P. aeruginosa.
Son bacilos Gram negativos, rectos o ligeramente curvos, mviles, con un solo flagelo polar.
Oxidasa y catalasa positivos, aerobios estrictos, no fermentan glucosa, utilizan diversos azcares
oxidativamente con produccin de cido. Uno de los caracteres ms constantes es su capacidad de
desarrollar a 42C. Producen varias enzimas, proteasas, lipasas, lecitinasas.
Patogenia
Las defensas inespecficas del husped son en general suficientes para prevenir la infeccin por P.
aeruginosa, pero brechas en esta barrera permiten a P. aeruginosa invadir y causar infecciones de
diversa gravedad. Producen el 10% de las infecciones nosocomiales, infectan heridas y
quemaduras y causan infecciones pulmonares, sobre todo neumona nosocomial e infecciones
respiratorias en pacientes con fibrosis qustica. La fibrosis qustica es una enfermedad gentica
asociada a un defecto en la secrecin de Cloro, caracterizada por la produccin de mucina con una
alteracin de su composicin inica, inusualmente espesa. Esto lleva a una menor eficiencia de la
mucina para limpiar las bacterias del pulmn y las vas areas y puede impedir el movimiento de las
clulas fagocticas.
Estos hechos explican la susceptibilidad de los pacientes con fibrosis qustica a la colonizacin con
P. aeruginosa. Si los enfermos son tratados los sntomas pueden desaparecer pero las bacterias
permanecen, presentando infecciones recurrentes. Las condiciones del paciente se ven agravadas
con la infeccin a P. aeruginosa por las dificultades teraputicas que se plantean debido a su alta
resistencia a los antimicrobianos.
Factores de virulencia
P. aeruginosa posee los mismos tipos de factores de virulencia que otras bacterias capaces de
causar enfermedad en el hombre inmunocompetente. Pero algo interesante es por qu P.
aeruginosa no es un patgeno propiamente dicho y es slo capaz de producir infecciones
oportunistas?. Es probable que P. aeruginosa sea ineficiente en su habilidad para llevar a cabo los
primeros pasos de la infeccin; puede colonizar pero no invadir piel y mucosas sanas y tampoco dar
infecciones persistentes con produccin concomitante de factores txicos que daen los tejidos del
husped.
Adhesinas. Produce dos tipos de adhesinas proteicas, pili y adhesinas no pili. P. aeruginosa
produce una neuraminidasa que saca los residuos de cido silico de GM1, creando sitios de unin
para la pilina. Por otra parte, P. aeruginosa es capaz de unirse a la mucina y lo hace por medio de
las adhesinas no pili.
Exoenzima S. Es una enzima excretada que puede actuar como exotoxina. Tiene actividad de
ADPribosilacin como otras toxinas, pero aplicada en forma exgena no daa las clulas del
husped. Al igual que la toxina colrica intervienen protenas de las clulas del husped en la
activacin de la toxina para lograr su mxima actividad. Se sostiene que actuara dificultando la
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BACTERIOLOGIA
accin de los fagocitos lo que facilitara la sobrevida de P. aeruginosa en el torrente sanguneo y
rganos. En el pulmn actuara inhibiendo la muerte intrafagoctica de las bacterias y promoviendo
la infiltracin fagoctica en el rea. Tambin puede presentar efecto txico directo en los pulmones.
Exotoxina A. Esta exotoxina tiene el mismo mecanismo que la toxina diftrica. Es una toxina A-B con
tres unidades funcionales:
Dominio R (regin de unin al receptor celular),
Dominio T (regin que media la translocacin de la porcin enzimtica al interior de la
clula),
Dominio C (regin cataltica).
Los dominios R y T se localizan en la cadena B y el dominio C en la cadena A. La cadena A es
enzimticamente activa por ADPribosilacin del factor de elongacin su receptor es una
glicoprotena de las clulas del hospedero. La mayora de los aislamientos clnicos la producen, y
actuara produciendo dao en los tejidos y disminuyendo la actividad de los fagocitos.
Elastasas. Elastina es el 30% de las protenas del tejido pulmonar. Est tambin presente en la
pared de los vasos sanguneos. Es responsable de las propiedades elsticas de estos rganos que
se expanden y contraen. P. aeruginosa tiene actividad elastoltica.
Otras enzimas extracelulares. Produce varias enzimas adems de las mencionadas. Una lipasa
alcalina y dos fosfolipasas, no bien estudiadas.
Un atributo de virulencia muy interesante es la produccin de alginato. Es un polmero de cido
mannurnico y gulurnico que forma un gel viscoso alrededor de la bacteria. Las colonias que lo
producen tienen aspecto mucoide. Para las bacterias marinas esto es un atributo importante para su
supervivencia. P. aeruginosa ha adaptado esto a su supervivencia en el pulmn. En medios de
cultivo ricos pierde esta propiedad. Esta capa que rodea a la bacteria y a las colonias de bacterias
en el pulmn puede actuar como adhesina y probablemente previene la ingestin fagoctica de la
bacteria.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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BACTERIOLOGIA
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA
Vibrio
Photobacterium
Aeromonas
Plesiomonas
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BACTERIOLOGIA
alimentarias en el hombre luego de la ingestin de productos del mar, es la primera causa de diarrea
en el Japn, donde se consume pescado crudo. Otras especies de Vibrio y Plesiomonas
shigelloides tambin estn relacionadas con gastroenteritis. Por otra parte, Aeromonas hydrophila
es responsable de infecciones de heridas que han sido expuestas a aguas contaminadas, y
ocasionalmente, puede provocar infecciones sistmicas en enfermos inmunodeprimidos.
Vibrio cholerae
V. cholerae es un bacilo Gram negativo, curvo, con forma de coma. Desarrolla bien en medios
simples. Aunque su desarrollo est estimulado por la presencia de Na+, esta especie a diferencia de
las otras especies del gnero, desarrolla en medios sin el agregado de ClNa. V. cholerae tolera
condiciones de alcalinidad y es capaz de desarrollar a pH 10. Estas propiedades se utilizan para
aislar el germen de las muestras clnicas, de alimentos o del agua. Las cepas epidmicas de V.
cholerae se dividen en 2 biotipos: clsico y eltor.
Es el agente del Clera. Es una enfermedad epidmica grave que ha matado millones de personas
y
contina siendo un importante problema de Salud en todo el mundo. La historia moderna del Clera
comienza en 1817 con la primera de las 7 pandemias. En 1950 slo haba Clera en Asia. En 1961
V. cholerae O:1 biotipo El Tor se disemin fuera de Indonesia, primero a otros pases asiticos y
Medio Oriente luego en la dcada del 70 a Africa, Sureste europeo e islas del Pacfico.
En enero de 1991 se notificaron los primeros casos de Clera en Per. En unas semanas se
disemin rpidamente en el pas. La enfermedad afect todas las edades con una muy alta
incidencia y al principio alta mortalidad. El comportamiento es de oscilacin estacionaria,
apareciendo en los meses clidos el mayor nmero de casos. Luego de la diseminacin epidmica
inicial, es posible que el Clera persista en algunas reas por aos en un estado de endemia. Es
indiscutible que la mejor forma de controlar el Clera en las poblaciones es el poseer agua potable y
un adecuado saneamiento que junto a la educacin son los pilares fundamentales del control de
estas epidemias y adems contribuyen al desarrollo de estas poblaciones.
Estructura antignica
Se puede dividir en base a sus antgenos somticos. Se describen al menos 139 serogrupos
diferentes. Todos comparten un mismo antgeno flagelar. Las cepas pertenecientes al serogrupo O:1
hasta 1992 fueron las nicas asociadas con Clera epidmico. Desde 1992 un nuevo serogrupo
O:139 ha sido relacionado con Clera epidmico en India y Bangladesh. Los biotipos son aplicables
solamente a V. cholerae O:1. Las cepas pertenecientes a los otros serogrupos se asocian a casos
de diarrea ocasional o enfermedades extraintestinales. Las cepas del serogrupo O:1 se dividen
clsicamente en 3 serotipos: Ogawa, Inaba e Hirojima. Las cepas aisladas pueden sufrir
conversiones de Inaba a Ogawa, por lo que los serotipos son de escaso inters epidemiolgico.
Patogenia
V. cholerae causa enfermedad en el hombre porque es capaz de colonizar el intestino delgado luego
de ingerido. Se adhiere a la superficie mucosa y produce una enterotoxina, la toxina colrica que
acta en las clulas mucosas intestinales. Esta accin est dirigida a alterar el balance
hidroelectroltico de estas clulas, disminuyendo la entrada de Sodio y aumentando la salida de
Cloro y agua hacia la luz intestinal, resultando en diarrea importante y disbalance electroltico, que
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BACTERIOLOGIA
puede llevar al paciente a la muerte por shock hipovolmico. Con un buen soporte de lquido y
electrolitos el paciente sobrevive.
Factores de virulencia.
Hasta hace 5 aos se crea entender muy bien los mecanismos patognicos de V. cholerae. Estos
se explicaban por tres factores: flagelo, que permita a la bacteria nadar hasta la mucosa intestinal;
pili que mediaba la adherencia a las clulas de la mucosa, y la toxina colrica que produca diarrea
severa.
Investigaciones recientes demuestran una mayor complejidad en este modelo. Primero la regulacin
de los factores de virulencia ha demostrado ser mucho ms compleja de lo esperado, con muchos
cambios adaptativos al husped humano. Segundo, muchas cepas producen otras toxinas adems
de toxina colrica, aunque esta es indiscutiblemente la causa ms importante de los sntomas en el
clera. Tercero, las clulas del husped no son slo blancos pasivos de la accin de la toxina.
Colonizacin de la mucosa del intestino delgado. Adems de las evidencias descritas de que la
motilidad flagelar puede ayudar a V. cholerae a alcanzar la mucosa intestinal, la mayora de las
investigaciones han sido dirigidas a ver lo que sucede cuando V. cholerae alcanza la mucosa. Una
contribucin importante a la colonizacin es la presencia de largos filamentos formando un
agrupamiento en la superficie de la bacteria. Cepas que carecen de estos pili son avirulentas. Se los
ha llamado Tcp pili (pili coregulado con la toxina). A diferencia de lo que sucede en otras bacterias
estos pili estn localizados solamente en una porcin de la superficie celular.
Por otra parte, V. cholerae produce una hemaglutinina que podra contribuir a la adherencia adems
de otra posible adhesina codificada por unos genes llamados factores de colonizacin accesorios
(acf).
La relevancia de esta toxina como factor de virulencia, que acta por ADPribosilacin tipo A-B.
Posee una subunidad A (enzimtica), y 5 idnticas subunidades B (unin). La subunidad A debe ser
clivada para ser enzimticamente activa en A1 y A2. La variedad de efectos que se producen
incluye la alteracin de las actividades de los transportadores de Sodio y Cloro. Esto lleva a un
disbalance inico que causa la prdida de agua asociada al clera. En clulas polarizadas como las
de la mucosa intestinal la adenil cyclasa se localiza en la membrana basolateral por lo que la toxina
unida a la superficie apical debe actuar al otro lado de la clula.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA
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Micobacterias
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BACTERIOLOGIA
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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BACTERIOLOGIA
Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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DESCRIPCIN DE COLONIAS
Las colonias de microorganismos se pueden describir teniendo en cuenta el tamao, color,
superficie, etc.
Tamao:
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BACTERIOLOGIA
Grande
Mediana
Pequea
dimetro mayor a 1 mm
dimetro aproximadamente igual a 1 mm
dimetro menor a 1 mm
Color
Blanco, Crema, Amarillo limn, Negro, etc
Superficie
Brillante, Lisa, Granular, Rugosa
Consistencia
Viscosa, Mantecosa, Friable (se disgrega al tocarla)
Densidad (con luz a travs de la colonia)
Opaca, Transparente, Traslcida
Forma
Puntiforme
Circular
Filamentosa
Irregular
Rizoide
Lanceolada
Elevacin
Chata
Elevada
Convexa
Cpula
Umbonada
Umbilicada
Margen
Entero
Ondulado
Lobado
Ondeado
Filamentoso
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BACTERIOLOGIA
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