GENEROS: PSEUDOMONAS y BURKHOLDERIA.

ü CLASIFICACION RECIENTE (1994 Manual de

Bergey´s)
FAMILIA PSEUDOMONADACEAE
FAMILIA BURKHOLDERIACEAE (1993)

CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES DE PSEUDOMONAS SPP. Y BURKHOLDERIA SPP. :

1. Bacilos de tamaño mediano de 0.5 a 1.0 x 1.5- 5.0 m Gramnegativos rectos o ligeramente curvos
2. Son aerobios estrictos
3. Mayoría son catalasa y citocromo-oxidasa positivos
4. Pseudomonas especies y Burkholderia pseudomallei son MÓVILES
5. Burkholderia mallei es INMOVIL y requiere 1% de glicerol en el medio de cultivo para su óptimo
crecimiento
6. Utilización de aazúcares por vía oxidativa
7. La mayoría especies de Pseudomonas producen pigmentos solubles
8. No requieren de medios enriquecidos y crecen en MacConkey Agar
9. Usados biorremediación.
10. Pseudomonas producen pigmentos.
 ESPECIES DE PSEUDOMONAS DE INTERÉS
VETERINARIO
HOSPEDADORES ENFERMEDAD
"oportunista“
Genera Infecciones piogénicas
P. aeruginosa Animales domésticos

*P. mallei Equinos Muermo – granulomas purulentos

piel y TR (Asia, Australia y África.
Zoonosis.
MELIOIDOSIS (Falso Muermo)
Nódulos y abscesos en órganos
*P. pseudomallei Animales domésticos
Zoonosis

* P. mallei y P. pseudomallei están reclasificadas en el Género BURKHOLDERIA

Otras especies de Pseudomonas

saprofitas:

ü P. (Burkholderia) cepacia esta presente en infecciones humanas

con fibrosis quisticas
ü P. stutzeri : rara vez causa infecciones en animales
ü P. fluorescens puede causar lesiones en reptiles y peces
 HABIT
AT

ü Ampliamente distribuidos en la naturaleza y mundialmente

ü Son saprofitos de vida libre en suelo, agua y vegetación en
descomposición
ü P. aeruginosa también puede encontrarse en piel, membranas
mucosas y heces de animales
 RESISTEN
CIA
1. Presencia de pus los protege
2. Sobreviven en desinfectantes de amonio cuaternario,
compuestos yodados y fenólicos, el cloro es efectivo
3. Humedad adecuada puede sobrevivir por largos periodos
en llaves de agua, utensilios, pisos, instrumentos,
humidificadores y equipos para apoyo respiratorio
4. Son susceptibles al calor 550C por una hora y al oxido de
etileno
 CARACTERÍSTICAS
CULTURALES

1. Son aerobios obligados (O/F) (+/-)

2. P. aeruginosa puede utilizar el nitrato en lugar de oxigeno

molecular como aceptor final de electrones (RESPIRACIÓN
ANAEROBIA)

3. Crecen en agar sangre, tripticasa soya agar y/o agar

MacConkey a 37º C por 24 – 48 horas

4. Muchas especies crecen mejor 20 - 30ºC (P. fluorescens)

5. En agar sangre, colonias de P. aeruginosa son grandes,
grises, planas, de bordes irregulares de 3 a 5 mm

6. Producen  hemólisis alrededor de la colonia en AS

9. P. pseudomallei colonias redondas, convexas que al
envejecer son granulares de color pardo y no
produce pigmentos

CARACTERÍSTICAS
BIOQUÍMICAS
ü Oxidasa - positivas excepto B. mallei
ü Degradan Glucosa por vía oxidativa - Prueba
O/F.
ü Reducen Nitratos a Nitritos y nitrógeno
BUSCAR CUADRO PARA DIFERENCIAR P. aeruginosa de otras Pseudomonas saprofitas
molecular
 PSEUDOMONA
AERUGINOSA
1. Son bacilos Gramnegativos, anaerobios facultativos
2. Producen dos pigmentos hidrosolubles: Uno azul verdoso
soluble en cloroformo y agua denominado PIOCIANINA y otro verde
amarillento PIOVERDINA.
FLUORESCEÍNA o pioverdina no soluble en cloroformo.
3. En ocasiones, una cepa puede producir pigmento rojo
(piorrubina) o pigmento pardo negruzco (piomelanina)
4. Patógeno oportunista.
5. Resistente a los ANTIBIOTICOS comunes.
 FACTORES DE
VIRULENCIA
1. Pili y flagelos, que facilitan la adherencia a células epiteliales
susceptibles del tracto respiratorio (COLONIZACION)
2. Colonizan epitelio superficial y también tejido profundo (caso:
quemaduras y traumatismos graves)
3. Cápsula polisacáridica: antifagocitica
4. Endotoxina (LPS) y Lípido A: median los efectos biológicos
del síndrome séptico: fiebre, shock, leucopenia, coagulación intravascular
diseminada
5. Exotoxina A: producida por cepas patógenas que inhiben la
síntesis de proteínas en células eucarióticas, causando necrosis
6. Exotoxina S: no muy claro mecanismo de acción, pero inhibe
tambien la síntesis proteica
 7. Fosfolipasa C destruye la membrana citoplasmática (que
actua como surfactante pulmonar) , causando atelectasia
8. Proteasas: involucradas en invasión y destrucción de tejido
Leucocidinas: inhiben la función de neutrófilos y linfocitos
9. Produce una Enterotoxina que causa diarrea en infecciones
intestinal
|0. Hemolisinas que actúan en sinergismo con Fosfolipasa
C para descomponer lípidos y lecitina facilitando la destrucción tisular
||. Producen Piocianinas que suprimen el desarrollo de otras
bacterias, producen daños oxidativos en los tejidos
 PATOGENICID
AD

PATOGENO OPORTUNISTA

1. Contaminante frecuente en procesos patológicos con otras

bacterias
2. Patógeno oportunista en tejidos debilitados en caso de
quemaduras, heridas, pacientes con neoplasias, débiles e
inmunodeficientes y en animales jóvenes
3. Reemplaza a bacterias que han sido eliminadas de procesos
infecciosos por tratamiento antimicrobianos y puede causar
septicemias mortales
4. Rara vez infecta a individuos sanos.
 NATURALEZA
ANTIGENICA
ü Especie muy heterogénea, con 20 serotipos basados en
diferentes antígenos "O“

ü Pueden tipificarse por bacteriófagos y producción de

piocianinas (bacteriocinas)
 DIAGNÓSTICO
LABORATORIAL

MUESTRAS:
1. Orina, pus, tejidos infectados, hisopados con exudado o raspado
de superficie tisulares infectadas

2. Examen directo de la muestra con Tinción de Gram es de poca

utilidad
 AISLAMIENTO Y CULTIVO DE PSEUDOMONA
AERUGINOSA

1. Sembrar en medios simples: agar nutItivo

2. Crecen en agar sangre / MacConkey agar a 370C en aerobiosis x 24-
48 h
3. Colonias irregulares grandes, planas, translúcidas, de 3 a 5 mm, y
pueden mostrar un brillo
4. Azul metálico (Piocianina).
5. Olor a frutas (aminoacetofeno)
6. Hemólisis Beta en AS
7. Variación colonial: Forma S (lisa y brillante); Forma R ( rugosa y
seca); y Forma M (mucoide)
8. MacConkey agar forma colonias grandes pálidas ( lactosa negativo)
con pigmentación verde azulada
9. Frotis de colonias: bacilos gramnegativos, tamaño mediano
 RESUMEN DE LA IDENTIFICACION

5. Utiliza citrato fuente de

1. Producción de pigmentos
hidrosolubles: PIOCIANINA (azul),
PIOVERDINA llamada “fluoresceína”
(amarillo), piorrubina (rojo oscuro) y
piomelanina (marrón oscuro) según medio
de cultivo empleado
2. Movilidad por flagelos polares
3. Licuefacción de gelatina
carbono.
6. Indol negativo.
7. Oxidasa positiva.
8. Reduce Nitratos a Nitritos
y a nitrógeno Molecular.
9. Prueba O/F positiva para
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Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
Elaborado por: Profa . Zoraida M. Nava Lotuffo. M,V.
MSc.