Universidad de Carabobo

Facultad de Ciencias de la Salud

Escuela de Ciencias Biomdicas y Biotecnolgicas
Departamento de Microbiologa

Control Microbiano:
Mtodos F
Fsicos y Qu
Qumicos
Germn Gonzlez M.
ggonzalm@uc.edu.ve

Condiciones que influyen en la

acci
accin antimicrobiana
Temperatura: a mayor temperatura
mayor accin.
Tipo de microorganismo: las clulas
vegetativas en desarrollo son mucho ms
susceptibles que las esporas.
Estado fisiolgico de las clulas: las
clulas jvenes son ms vulnerables que
las viejas.

Esterilizacin vs. Desinfeccin

Esterilizacin:
Proceso por el cual se
puede
lograr
la
destruccin total de los
microorganismos
viables presentes en
un
determinado
material.

Desinfeccin:
Proceso que elimina la
mayora o todos los
microorganismos
sobre
los
objetos
inanimados,
a
excepcin
de
las
esporas bacterianas a
travs de agentes
qumicos

Importancia del Control

Microbiano
Prevenir
la
infecciones.

transmisin

de

Prevenir
la
proliferacin
de
microorganismos perjudiciales o
patgenos

Ambiente:
1.El calor es ms eficaz en un medio cido
que en uno alcalino.
2.La consistencia del material, acuoso o
viscoso, influye marcadamente en la
penetracin del agente.
3.Las concentraciones altas de
carbohidratos aumentan la resistencia
trmica de los organismos.
4.La presencia de materia orgnica
extraa reduce notablemente la eficacia
antimicrobianos.

ANTISPTICO:
Sustancia aplicada
en la piel u otro
tejido que previene
o detiene el
crecimiento o la
accin de
microorganismos,
por inhibicin de su
actividad o por su
destruccin

DESINFECTANTE:
Sustancia que
destruye los
grmenes o
microorganismos
presentes, a
excepcin de las
esporas bacterianas.
Se utiliza este
trmino en sustancias
aplicadas sobre
objetos inanimados

Utilidad de los m
mtodos de
Esterilizaci
Esterilizacin y Desinfecci
Desinfeccin

Asepsia
Trmino que se aplica a los
procedimientos utilizados para
prevenir que los microorganismos
progresen
en
un
medio
determinado
(quirfano,
laboratorio)

Utilidad de los m
mtodos de
Esterilizaci
Esterilizacin y Desinfecci
Desinfeccin
La preparacin de medios de cultivo que
sern empleados con diferentes propsitos
(cultivo de microorganismos, control de
ambiente, equipos o personal, anlisis
microbiolgico
de
medicamentos,
cosmticos, alimentos)
La descontaminacin de material utilizado.

Esterilizacin de equipos quirrgicos y otros

materiales de uso mdico con el propsito de
reducir el riesgo de infecciones en pacientes.
Acondicionamiento del material (pipetas,
tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a
ser utilizado en los laboratorios de
Microbiologa.

El control microbiano se realiza

a trav
travs de:
Mtodos fsicos

Mtodos qumicos

Procedimientos fsicos.

CALOR HMEDO

CONTROL
MICROBIANO
POR
AGENTES FSICOS

CALOR SECO

CALOR HMEDO

Calor h
hmedo:
medo:

1. Vapor a presin:
1. Vapor a presin
2. Tindalizacin

Efecto

coagulacin de
protenas

(esterilizacin

Ventajas:

fraccionada)

Calentamiento

3. Agua hirviendo
4. Pasteurizacin

rpido
Penetracin
Humedad

La esterilizacin en autoclave es el
mtodo de esterilizacin por excelencia
al presentar una elevada eficacia:

Por su capacidad de penetracin

Fiabilidad
Facilidad de monitorizacin
Seguridad (ausencia de residuos txicos)
Es el ms econmico de los sistemas
tradicionales dentro de la esterilizacin
hospitalaria

Tipos de materiales
sujetos a
esterilizacin en
autoclave:
Metlico: instrumental
de
ciruga,
contenedores
Textil: gasas, vendas,
ropa
Vidrio: jeringas, pipetas
Plsticos
y
gomas
termo
resistentes
(caucho, silicona).

Condiciones del
autoclave
Presin
(lb/pulg2)
0
5
10
15

Temp.
(C)
100
109
115
121

Tindalizaci
Tindalizacin
Desventajas del
vapor a presin
No puede utilizarse
para todo tipo de
sustancia. Ej: grasas
y
aceites,
medicamentos

AGUA HIRVIENTE

PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACIN
FRACCIONADA
CONSISTE EN EL CALENTAMIENTO EN
TRES PERODOS CONSECUTIVOS A
100 C.

Pasteurizaci
Pasteurizacin. Usos

Efectiva contra formas vegetativas.

No destruye esporas

Prevencin de las infecciones de origen

lcteo y retasar la descomposicin de la
leche.
Las bacterias de la leche no forman
esporas (Ej: Salmonella, Streptococcus
Brucella)

Pasteurizador

Temperatura

Tiempo

Tipo de Pasteurizacin

CALOR SECO

63C (145F)

30 min.

Pasteurizacin VAT

ESTERILIZACIN CON AIRE CALIENTE

72C (161F)

15 seg

Pasteurizacin "High temperature short

time Pasteurization" (HTST)

EFECTO: OXIDACIN DE PROTENAS

89C (191F)

1.0 seg

Ultra Pasteurizacin (UP)

90C (194F)

0.5 seg

Ultra Pasteurizacin (UP)

94C (201F)

0.1 seg

Ultra Pasteurizacin (UP)

96C (204F)

0.05 seg

Ultra Pasteurizacin (UP)

100C (212F) 0.01 seg

Ultra Pasteurizacin (UP)

138C (280F) 2.0 seg

Esterilizacin Ultra-high temperature

(UHT)

Ventajas del calor seco:

No

es corrosivo para metales e

instrumentos.
Permite la esterilizacin de sustancias
en polvo y no acuosas, y de sustancias
viscosas no voltiles.

Desventajas:
Requiere

mayor tiempo de
esterilizacin, respecto al calor
hmedo, debido a la baja penetracin
del calor.

USO: 160-180 C/2 horas

EQUIPO: HORNO PASTEUR
Materiales: instrumental quirrgico de metal,
vidrio, polvo de talco

Horno Pasteur

Esterilizacin por calor seco: Estufas

Sistema de esterilizacin ms antiguo.

Uso limitado en algunas clnicas pequeas,
normalmente odontolgicas.
El material no podr ser inflamable, ni termo
sensible.

RADIACIONES

IONIZANTES

Flameado: Consiste en
la exposicin directa
del instrumento a una
flama
en
forma
directa
por
poco
tiempo
con
el
mechero de Bunsen.

Incineracin: Consiste
en
someter
el
material contaminado
a altas temperaturas
en hornos especiales
para
reducirlo
prcticamente
a
cenizas. Su fin es
evitar el vertido de
material
de
alto
riesgo en la basura

Radiacin ionizante

RAYOS GAMMA, RAYOS X

MECANISMO DE ACCIN:
PENETRAN LA CLULA Y PRODUCEN
RADICALES LIBRES DEL TIPO: H+, OH-,
H2O2, QUE INDUCEN DAO CELULAR

Las radiaciones tienen gran poder

de penetracion y por lo que se
utilizan par esterilizar materiales
termolbiles (termosensibles)
como jeringas descartables, sondas,

Radiaciones con energa suficiente para

ionizar la materia, extrayendo los electrones
de sus estados ligados al tomo.
Las radiaciones ionizantes pueden provenir
de sustancias radiactivas, que emiten dichas
radiaciones de forma espontnea, de
generadores artificiales, tales como los
generadores de Rayos X y los aceleradores
de partculas

Luz UV
LUZ ULTRAVIOLETA (UV)
SON RADIACIONES NO IONIZANTES
MECANISMO DE ACCIN:
INDUCEN LA FORMACIN DE DIMEROS
DE TIMINA LO QUE CONDUCE A
ERRORES EN LA DUPLICACIN DEL
ADN.

Se aplica mediante lmparas de mercurio.

Actan a nivel del material gentico, sobre
unidades de timina juntas, lo que impide la
duplicacin del DNA.
Su
accin
es
superficial
y
microbiosttica.
Se utiliza en la reduccin del nivel de m.o
en zonas estriles.

PROCEDIMIENTOS F
FSICOS
FILTRACIN:
FILTRACIN DE LQUIDOS

FILTRACIN DE AIRE

La filtracin permite la
remocin de todos los
microorganismos presentes
en un lquido o un gas
retenindolos sobre la
superficie de un material.

Filtraci
Filtracin:
1.No destruyen las formas vitales, sino que las separa del
material filtrado. Los ms utilizados son:
* Filtros de Berkelfeld: Por tierra de diatomeas
* Filtros de Chamberland: Cilindros de porcelana
* Filtros de Seitz: Discos de amianto o asbesto
* Filtros de vidrio poroso
* Filtros de membrana: Membranas porosas de
steres de celulosa
* Ultrafiltros: Membranas de colodin (celofn)
2. La efectividad del filtro depende del tamao del poro y
de la carga (bacterias con carga - en pH neutro).

Filtros de membrana

Filtraci
Filtracin. Usos

Son discos de esteres de celulosa con poros

tan pequeos que previenen el paso de los
microorganismos.
Existen distintos tipos de filtro dependiendo
del tamao de poro (0,45 m, 0,2 m) y son
desechables.
Se utilizan en la esterilizacin de lquidos

La filtracin se utiliza para emulsiones

oleosas o soluciones termolbiles.
Su usa para esterilizar aceites, algunos
tipos de pomadas, soluciones oftlmicas,
soluciones
intravenosas,
drogas
diagnsticas, radiofrmacos, medios para
cultivos
celulares,
soluciones
de
antibiticos y vitaminas.

Filtros HEPA
Un filtro HEPA (High
Efficiency Particulate
Air), est compuesto
por pliegues de
acetato de celulosa
que retienen las
partculas (incluidos
los microorganismos)
del aire.

Bajas Temperaturas
El metabolismo de las bacterias est inhibido a
temperaturas por debajo de 0 C.
Estas temperaturas no destruyen a los
microorganismos sino que pueden conservarlos
durante largos perodos de tiempo.
Esto es aprovechado para conservar los
microorganismos.
Los cultivos de microorganismos se conservan
congelados a -70C o incluso en tanques de
nitrgeno lquido a -196C

AGENTES QUMICOS

Algunas sustancias qumicas

pueden ser usadas como
agentes esterilizantes porque
pueden promover reacciones
qumicas capaces de
daar los componentes celulares
de los microorganismos
(protenas, membranas)

Gaseosos
xido de etileno

Es un gas que acta en fro (32-57 C)

en el interior de las cmaras.

Se utiliza para la esterilizacin de

materiales termosensibles: plsticos.

Oxido de etileno
El xido de etileno es bactericida,
esporicida
Con gran poder de penetracin, efectivo a
bajas temperaturas y penetra sustancias
porosas
Para evitar su poder explosivo y su alto
potencial inflamable, se mezcla con CO2

No gaseosos

Oxido de etileno
Mtodo de elevada eficacia microbicida.
Necesita ciclos largos y posterior aireacin:
en total 16 horas.
Es toxico por inhalacin, irritante para piel y
mucosas, y potencialmente cancergeno.
Costoso.
Extremar precauciones en el secado.
Muy utilizado a nivel industrial para
materiales desechables y reutilizables.

Aldehidos (Glutaraldehido)

Perxido de Hidrgeno

Aldehdos
Son agentes alquilantes que actan
sobre las protenas, provocando una
modificacin irreversible en enzimas
e inhiben la actividad enzimtica.
Estos compuestos destruyen las
esporas.

Plasma gas.
gas
Proceso de esterilizacin a baja
temperatura que consiste en la
difusin
de
perxido
de
hidrgeno en fase plasma (entre
lquido y gas).

Almacenamiento postesterilizacin

Glutaraldehdo
Consiste en preparar una solucin alcalina
al 2% y sumergir el material a esterilizar
de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague
de 10 minutos.
Este mtodo tiene la ventaja de ser rpido
y ser el nico esterilizante efectivo fro.
Puede esterilizar plstico, goma, vidrio,
metal

Utilizado para materiales

termosensibles (plsticos).
Menor espectro biocida que el
Oxido de Etileno.
No traspasa envolturas de
celulosa lo que limita su
capacidad de penetracin.
Eliminar la humedad al
mximo.
Es un sistema muy caro
reservado a uso industrial y
centrales de esterilizacin
grandes.

DESINFECCI
DESINFECCIN Y ANTISEPSIA
La desinfeccin es la destruccin de
microorganismos patgenos
presentes en la superficie de
objetos, utilizando sustancias
qumicas (desinfectantes). No
implica esterilizacin.

Alcoholes
Iodo
Antispticos

Agentes catinicos, aninicos y anfteros

Metales pesados

Alcoholes
Actan desnaturalizando las protenas,
disolviendo las capas lipdicas y como
agentes deshidratantes

Colorantes
Cloro y Compuestos clorados
Desinfectantes

Aldehdos

y/o
Esterilizantes

Compuestos Fenlicos

El etanol al 96% se usa como antisptico

de la piel y como desinfectante en los
termmetros clnicos orales y algunos
instrumentos quirrgicos.

Acidos y Alcalis

HALGENOS:
Cloro:
La muerte de los microorganismos por accin del
cloro se debe a la combinacin directa del cloro con
las protenas de las membranas celulares y las
enzimas.
En presencia de agua desprende oxgeno naciente
(O) que oxida la materia orgnica:

1. El gas cloro licuificado se utiliza

en la desinfeccin del agua de
bebida y piscinas.
2. El hipoclorito sdico (leja) al
1% se puede utilizar como
desinfectante domstico

Cl2 + H2O --------> HCl + HClO (cido hipocloroso)

HClO

------------> HCl + O (oxgeno naciente)

Iodo:
El mecanismo mediante el cual el
iodo ejerce su accin antimicrobiana
es debido a su accin oxidante.
Adems de la habilidad que tiene el
iodo para combinarse con el
aminocido tirosina, resulta en la
inactivacin de enzimas y otras
protenas.

El iodo se puede utilizar como antisptico

bajo dos formas:
Tintura de iodo, es una solucin alcohlica
(tintura) de iodo ms ioduro potsico (KI) o
ioduro sdico (NaI).
Iodforos, son mezclas de iodo con
compuestos que actan como agentes
transportadores y solubilizadores del iodo.
Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine)

Detergentes catinicos:
Los jabones reducen la tensin superficial, el
agua jabonosa tiene la propiedad de emulsionar y
dispensar aceites y polvo, los microorganismos
son atrapados por el jabn y arrastrados por el
agua para la desinfeccin de manos.
El cloruro de benzalconio: antisepsia de la piel
Su uso ms corriente es para la limpieza y
desinfeccin de paredes, suelos, ropa y objetos
en general.

METALES PESADOS
Actan
desnaturalizando
componentes esenciales al unirse a
los grupos sulfhidrilo.
Los mas efectivos son el mercurio
(mercuriocromo y mertiolate), plata
(nitrato de plata,sulfadiazina de plata) y
cobre (sales)

FENOL Y SUS DERIVADOS:

cresoles , hexaclorofeno
Es completamente El cresol (metilfenol)
toxico para los
ingrediente activo
tejidos, es corrosivo
del Lysol
y de olor
desagradable.
Mecanismo de
accin: dao a la
membrana celular y
desnaturalizacin de
protenas

El Hexaclorofeno, se
mezclar con jabones, no es
irritante para la piel y deja
una pelcula protectora en la
piel despus de su
aplicacin. Se emplean
ampliamente en hospitales y
clnicas. Por los posibles
daos al cerebro
(neurotxico) su uso se ha
restringido un poco.

COLORANTES
1. Dos clases de compuestos
colorantes como agentes
antimicrobianos:
Los colorantes del
trifenilmetano (la violeta
de genciana o cristal
violeta)
Derivados de la acridina.
2. Estn casi en desuso

Acidos y alcalis
Actan alterando la permeabilidad y
coagulando las protenas.
Ej.: Dentro de estos compuestos se
encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico
(HNO3), hidrxido sdico (NaOH) e
hidrxido potsico (KOH).
Tienen aplicacin limitada debido a su
naturaleza custica y corrosiva.

Infecci
Infeccin intrahospitalaria o
nosocomial
Cualquier

tipo de infeccin
que se desarrolle en un
paciente mientras est
hospitalizado, puede
considerarse como una
infeccin hospitalaria. Las
mismas infecciones que uno
ve a nivel de los pacientes
en la comunidad pueden
ocurrir en los pacientes
hospitalizados.

Las infecciones intrahospitalarias (IIH)

constituyen un importante problema de
salud, no slo para pacientes, sino tambin
para la comunidad y el estado.

Se estima que de un 5 a 10 % de los

pacientes que ingresan en un hospital,
adquieren una infeccin que no estaba
presente o incubndose, en el momento de
su llegada al centro.

Elevada frecuencia, consecuencias fatales y

altos costos de tratamiento.

Microorganismos m
ms frecuentes
aislados en IIH
Agente

Fuente

Staphylococcus aureus
Escherichia coli
Enterobacter spp

Soluciones Glucosadas

Pseudomonas aeruginosa

Agua destilada

Klebsiella Pneumoniae

Soluciones Glucosadas

Candida spp

Soluciones parenterales

IIH. V
Vas de transmisi
transmisin
Va directa o indirecta, a travs de las manos y
de materiales contaminados
Son endmicas en ciertos grupos de de
pacientes con caractersticas individuales: edad
alteraciones en su mecanismo de defensa, (por
su enfermedad de base o por tratamientos con
inmunosupresores),
Por procedimientos invasivos, diagnsticos o
teraputicos

Tipos de infecciones
Cuando pasan a la sangre
Bacteriemia
Infecciones asociadas al empleo de catteres
Las respiratorias y asociadas a ventilacin
mecnica, se llaman neumonas asociadas a
neumonas
ventilacin
mecnica
o
nosocomiales.
Por heridas operatorias (o quirrgicas)
Urinarias asociadas a sondas urinarias e
intraabdominales

Medidas generales de control

Medidas generales de control

Chequeo minucioso de las salas de la

institucin, estudiando su poblacin de
patgenos mas frecuentes.

Capacitacin y control del personal mdico y de

enfermera en el manejo de las medidas de
bioseguridad, esterilizacin, respeto del tiempo
mximo de permanencia de sondas.

Anlisis de los patgenos para saber si

han desarrollado resistencias y definiendo
los antibiticos efectivos, y reservndolos
slo para esas infecciones y no otras
menos complejas

Reforzar las medidas de higiene, como el lavado de

manos y limpieza de salas; eliminar superficies que
puedan retener grmenes, como cortinas,
alfombras, tapizados.
Aislamiento de los pacientes
infecciones multiresistentes.

afectados

por