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FACULTAD DE MEDICINA
INTERPERIODO 2016
MODELOS EXPERIMENTALES
PROTOCOLO DE INVESTIGACIN APLICADO A MODELOS
EXPERIMENTALES
EFECTIVIDAD DE LAS FOSFOLIPASAS D1 Y D2 CONTRA LA CONTRA LA
SUPRESIN DEL APETITO Y PROTECCIN AL SOBREPESO
REVISOR: DRA. MARA DEL CARMEN CABRERA MACIP
NDICE
Introduccin
.....3
Marco terico
Antecedentes generales
Antecedentes especficos4
Planteamiento del problema8
Objetivo General
Objetivos Especficos
Hiptesis
Justificacin ...9
Materiales y Mtodos..10
Resultados12
Conclusiones13
Propuestas... 14
Bibliografa15
1. INTRODUCCIN
Desde hace muchos siglos se han utilizado animales para experimentacin, con
fines de estudio de la anatoma y fisiologa, prueba de frmacos pero esto hasta
hace poco ms de cien aos.
Compartimos como seres vivos un noventa y cinco por ciento del genoma y solo
nos diferencia un cinco por ciento, por lo tanto aunque se han realizado
investigaciones neurobiolgicas en animales y cada especie tiene una percepcin
al dolor distinta entre otras diferencias, los animales tienen sentimientos, viven con
afecto hacia los otros de su especie, son afectos al ser humano en algunos casos
estas caractersticas pueden fallar, por su propio instinto, solo nos hace diferentes
el cinco por ciento del genoma es por esto que los animales merecen un trato
digno en su manejo, almacenaje, alimentacin y en todo caso en su posterior
sacrificio.
Hace muchos siglos cuando se conoci el concepto de tica en la antigua Grecia
pero pocos saban o ignoraban aplicarla en otro ser vivo que no fuese el ser
humano, se crea tambin en ese tiempo que los animales eran seres sin
sentimientos. Pero que tan cierto se debe estar a favor o en contra de su
utilizacin?
La tica juega un papel importante en la investigacin con animales que servirn
como modelo experimental, y aunque,
actualmente existen grandes avances en diferentes disciplinas de las
humanidades y ciencias sociales lamentablemente no siempre se tiene control en
la utilizacin de animales aunque existen leyes suficientes para el manejo, debe
ser manejado de manera que no entorpezca todo estudio, creo que deben existir
sanciones severas en el maltrato en animal en laboratorio y mal uso de ellos.
En Mxico y muchos pases del mundo, es completamente aceptable utilizar
animales como modelos experimentales ya que sin ellos el ser humano habra
disminuido su esperanza de vida.
Afortunadamente se cuentan otros modelos de estudio que complementa
investigaciones y evitan el uso de modelos experimentales, como modelos
matemticos, sistemas biolgicos in vitro, mtodos estadsticos que disminuyen en
gran parte procesos innecesarios y que son fcilmente comprobables mediante su
aplicacin.
Los animales deben sufrir el menor dao posible, tengamos en cuenta que
cualquier ser vivo debe tratarse con respeto apegado a las reglas.
Para aquellos que an estn en contra de la utilizacin de animales para
investigacin cientfica deben prestar un poco de atencin a las normas
establecidas por cada comit o institucin porque de no ser as tendremos
argumentos no fundamentados. En conclusin es una forma de agradecer al
animal un buen trato en los puntos mencionados anteriormente, sin ellos sera
imposible que nosotros y las generaciones prximas tengan un futuro mejor.
Nuestro deber tambin como seres con un coeficiente intelectual mayor es velar
por los derechos animales. No hay ciencia ni descubrimientos sin ellos, por ello,
deben ser valorados.
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2. MARCO TERICO
2.1 ANTECEDENTES GENERALES
Gracias a los descubrimientos que hicieron hombres como Robert Hook y
Leeuwenhoek, debido a algo desconocido llamaron a la clula de diferentes
formas, posteriormente Schleiden, Schwann y Virchow y su trabajo llamado teora
celular, que hasta hoy es cierto, nos dice que la clula es lo que forma a los seres
vivos, que otras clulas se forman gracias a otras y que es lo ms bsico que
forma a los organismos vivos. De esto podemos partir desde seres con una sola
clula y otros con mltiples pudiendo ser diferentes, llamamos entonces a los
seres con una sola clula; unicelulares y los que poseen ms de una,
pluricelulares.
Si bien las clulas pueden estar solas o estar en conjuntos dependiendo del ser
vivo del que formen parte estn en peligro si se aslan, es decir trabajan como un
todo aunque tengan una funcin especializada, son muy parecidas entre ellas pero
realizan funciones extraordinarias y que a partir de elementos orgnicos: su
composicin, no basta mucho para darse cuenta que la unidad bsica de los seres
vivos es algo nada ordinario y que cada organelo tiene una funcin indispensable
y por lo tanto vital al organismo siendo este un todo de infinidad de clulas.
Las clulas pueden clasificarse de diferentes maneras son auttrofas y
hetertrofas sintetizan o no sus propios alimentos, procariotas o eucariotas sin
ncleo y organelos o con ncleo y diferentes organelos. Estas clasificaciones
tienen un porqu y no estn sujetas a cambios ya que cada clula tiene funciones
diferentes pero son parecidas entre ellas.
A pesar de las mltiples funciones que puede realizar una clula cada una sin
importar su funcin tienen funciones para producir la energa necesaria que
coadyuve a vivir y llevar a cabo sus funciones bsicas como crecimiento,
reproduccin, alimentacin y degradacin de desechos. Pero esto no ocurre de
manera espontnea debe haber reacciones exergnicas y endergnicas que le
permitan a la clula activar mecanismos de activacin, sin las enzimas esto sera
imposible ya que estas molculas de naturaleza proteica son las que trabajan en
conjunto con las reacciones para agilizar los procesos y que estos no daen a la
clula, las enzimas son como llaves que entran en una cerradura, hay cientos de
cerraduras (sustratos) pero la enzima actuar como una llave que es para una
sola cerradura, esto sucede en el mayor de los casos aunque no siempre puede
suceder as, tambin pueden acomodarse de forma que encajen en el sitio para
desencadenar una reaccin. La clula ocupa como energa un compuesto (ATPadenosin trifosfato) formado por elementos: adenosina, ribosa y tres grupos
fosfato donde en estos ltimos es donde se obtiene el mayor provecho para
obtener energa, generalmente el ATP proviene de la oxidacin de la glucosa.
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los alimentos tenan una forma antes de entrar a su cuerpo y otra distinta al ser
desechados de este.
As mismo el hombre primitivo pas de ser nmada a ser sedentario,
establecindose en un lugar que consider ptimo para l y su familia con esto
surgi un nuevo problema: la alimentacin y entonces naci la agricultura como
forma de sembrar y cosechar parte de sus alimentos, claro esto no sera posible
sin el uso del empirismo. Con el paso del tiempo el hombre dio cuenta que la
comida tena distinto sabor si era sometida algo brillante, algo desconocido, el
fuego, algo trascendental para la humanidad, pero no fue suficiente hasta que el
hombre supo y desarroll sus propias tcnicas de conservacin de los alimentos.
Y claro descubri por error que algunos responsables de la putrefaccin de su
propia comida eran responsables de otros productos: la fermentacin.
Pero la nutricin no se detuvo all, ni los grandes investigadores se conformaron
sino nuevos paradigmas surgieron, aquello que se crea era cierto result ser
falso, la investigacin en humanos, en los propios humanos ese estigma que dur
siglos, el oscurantismo fren muchos avances, la nutricin actual nos ha enseado
casi todo lo que sabemos actualmente, desde un punto de vista fisiolgico,
bioqumico, biolgico, cada sistema tiene una funcin especfica y correlacionada
que sera imposible de cumplir de faltar los nutrimentos necesarios. El futuro de la
nutricin va encaminado a avances moleculares, bien sabido se sabe que la
unidad funcional de un organismo es la clula y ahora se sabe que todo empez
all, no se centra en lo general sino en lo particular.
La ingesta excesiva de caloras y / o insuficiente resulta en un aumento de la
utilizacin de nutrientes acumulacin de grasa en el tejido adiposo, los adipocitos
hipertrofia e hiperplasia y se asocian a menudo con la induccin de la inflamacin
de bajo grado del tejido adiposo. Esto conduce a un aumento de los niveles de
lpidos y mediadores de la inflamacin y promueve la resistencia perifrica a la
insulina que conduce finalmente a la DT2. La ingesta calrica y el consumo de
energa son estrictamente regulados por las hormonas y el sistema nervioso. Las
seales provocadas por las hormonas, nutrientes y las neuronas aferentes se
coordinan en el hipotlamo para controlar el balance energtico.
Las enzimas fosfolipasa D promueven la hidrlisis del enlace fosfodister de
fosfatidilcolina (PA), la generacin de cido fosfatdico y colina. PA es el mediador
intracelular de lpidos de las funciones biolgicas PLD . Sin embargo, PA est
estrechamente regulada y se puede convertir a otros lpidos potencialmente
bioactivos, incluyendo diacilglicerol, cido lisofosfatdico y cido fosfatidico cclico
(CPA). Las PLD se han descrito en varios organismos, incluyendo mamferos. Con
base en la homologa, se han identificado seis miembros de la familia PLD (PLD1
-PLD6). Sin embargo, slo se sabe que PLD1, PLD2 y PLD6 poseen actividad
enzimtica. PLD1 y PLD2 estn asociados con las membranas intracelulares y se
expresan en casi todos los tipos de clulas en el cuerpo.
Actividad de las PLDs est regulada por fosfatidilinositol-4,5-bifosfato, la protena
quinasa C, GTPasas de la familia ADP y la ribosilacin del factor de Rho. Mediante
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4. OBJETIVOS
4.1 OBJETIVO GENERAL
Comprobar si las fosfolipasas D1 y D2 son eficaces contra la supresin del apetito
y proteccin contra el sobrepeso.
4.2 OBJETIVOS ESPECFICOS
-Comprender la fisiopatologa del apetito y saciedad y su relacin con el
sobrepeso.
-Analizar el ciclo molecular de las Fosfolipasas D y aplicar un estudio en modelos
experimentales con el fin de establecer relacin.
-Comprobar mediante resultados obtenidos en modelos experimentales si existe
proteccin al sobrepeso y supresin del apetito.
5. HIPTESIS
Las fosfolipasas D1 y D2 son eficaces contra la supresin del apetito y proteccin
contra el sobrepeso.
Las fosfolipasas D1 y D2 no son eficaces contra la supresin del apetito y
proteccin contra el sobrepeso.
Las fosfolipasas D1 y D2 no tienen relacin contra la supresin del apetito y
proteccin contra el sobrepeso.
6. JUSTIFICACIN
El exceso de peso corporal (sobrepeso y obesidad) es reconocido actualmente
como uno de los retos ms importantes de salud pblica en el mundo, dada su
magnitud, la rapidez de su incremento y el efecto negativo que ejerce sobre la
salud de la poblacin que lo padece. El sobrepeso y la obesidad incrementan
significativamente el riesgo de padecer enfermedades crnicas no trasmisibles
(ECNT), mortalidad prematura y el costo social de la salud, adems de que
reducen la calidad de vida. Se estima que 90 % de los casos de diabetes mellitus
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7. MATERIALES Y MTODOS
Ratones
Los animales fueron alojados en jaulas (mx. 5 ratones por jaula) que contuvieron
una cama de aserrn y un nido hecho de pauelos de papel. Las jaulas se
mantuvieron a 23 C y se sometieron a una fase de luz de 12 horas seguido de
una fase de oscuridad de 12 horas. Los ratones fueron alimentados con una dieta
de control con croquetas ad libitum ( a libre demanda) y tuvieron acceso ilimitado
al agua durante todo el estudio. Los ratones fueron mantenidos siguiendo las
directrices para el cuidado y bienestar animal, de acuerdo con TierschutzVersuchstierverordnung con la aprobacin del gobierno del distrito de la Baja
Francfila (Control Animal de la Baja Francfila.). Se llev a cabo la eutanasia por
dislocacin cervical, en un rea separada lejos de otros animales y se hicieron
todos los esfuerzos para minimizar el sufrimiento. Ninguno de los animales
murieron o se enfermaron durante el desarrollo de esta investigacin. Todos los
estudios con animales fueron aprobados por el comit de bienestar de los
animales de gobierno del distrito de la Baja Francfila y los lineamientos de la
Unin Europea.
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8. RESULTADOS
Los ratones del grupo PLD1 y PLD2 presentan un mayor peso corporal y la grasa
corporal.
Se ha informado de ambas isoformas de la fosfolipasa D que se expresa de forma
ubicua en diferentes rganos y tejidos. Con el fin de corroborar estos resultados,
se analiz la expresin de ARNm de ambas isoformas de la PLD en los rganos
de los ratones de tipo salvaje por prueba qPCR. De acuerdo con observaciones
anteriores, la expresin de PLD1 y PLD2 se encontr en todos los rganos
analizados ( tejido blanco y tejido adiposo marrn, corazn, hipotlamo, rin,
pncreas hgado y el bazo). Es de destacar que se observ una alta expresin
hipotalmica de PLD2.
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10. PROPUESTAS
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13. BIBLIOGRAFA
Trujillo Viera J, El-Merahbi R, Nieswandt B, Stegner D, Sumara G (2016)
Phospholipases D1 and D2 Suppress Appetite and Protect against Overweight.
PLoS ONE 11(6): e0157607. doi:10.1371/journal.pone.015760
Qin W, Liang Y-Z, Qin B-Y, Zhang J-L, Xia N (2016) The Clinical Significance of
Glycoprotein Phospholipase D Levels in Distinguishing Early Stage Latent
Autoimmune Diabetes in Adults and Type 2 Diabetes. PLoS ONE 11(6): e0156959.
doi:10.1371/ journal.pone.0156959
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