BIOQUIMICA III

LABORATORIO
TEMA: DETERMINACION DE LA HCG POR CROMATOGRAFIA
DOCENTE: Dr. HERLESS MENDOZA CESPEDES
ALUMNO:

KATHERINE SANCHEZ LALANGUE

CICLO:

VIII

TURNO: TARDE

I.

INTRODUCCIN

La gonadotropina corionica humana, o hCG (del

ingls: human chorionicgonadotropin) es
una hormona glicoproteica producida durante el embarazo por
el embrin en desarrollo despus de la fecundacin y
posteriormente por el sincitiotrofoblasto (parte de la placenta). La
hCG tambin es producida en la hipfisis de los hombres y mujeres
de todas las edades.
Es una hormona que se sintetiza en el cerebro manifestando
diferentes funciones en la mujer y en el hombre. Se produce
por clulas Trofoblsticas en las mujeres embarazadas, estimula la
maduracin del vulo y en los hombres la produccin de
testosterona en los testculos.
Las clulas Trofoblsticas son las que darn origen a la placenta,
siendo stas las que se formarn inmediatamente despus de
la fecundacin o la formacin de ciertos procesos tumorales en el
hombre y en la mujer.
La Hormona Gonadotropina Corinica (subunidad Beta-HCG) es
sintetizada slo por las mujeres embarazadas desde que
el embrin empieza a evolucionar alrededor del dcimo da
de embarazo.

II.

OBJETIVO:

Validar la determinacin de HCG en muestras de

HCG en muestras de Orina por el m Orina por el
mtodo cromatografico.

III.

MARCO TERICO

Si bien la hormona comienza a ser producida desde el momento de la

implantacin del embrin en el tero materno, las cantidades son muy
pequeas, menor o igual a 5mUI/ml, y no pueden ser medidas ni en sangre ni
en orina materna mediante los tests de embarazo. Slo a partir de la fecha de
la implantacin la concentracin de hormona corinica comienza a crecer y se
puede detectar en sangre o en orina. Esta hormona duplica su valor cada dos
das.
Una funcin principal de la Gonadotropina Corinica Humana (GCH) es
administrar los factores nutricionales y estimular cantidades necesarias de
otras hormonas. Es una hormona que se sintetiza en el cerebro manifestando
diferentes funciones en la mujer y en el hombre. Se produce por clulas
Trofoblsticas en las mujeres embarazadas, estimula la maduracin del vulo y
en los hombres la produccin de testosterona en los testculos. Una de las
funciones ms importante es la de prevenir la involucin normal del cuerpo
lteo al final del ciclo sexual femenino, este cuerpo lteo aparte de secretar
esta hormona secreta tambin progesterona y estrgenos. Todos
los tratamientos con G.C.H. en hombres y mujeres deben de ser supervisados
por el mdico especialista para evitar posibles interacciones. Existen dos
formas de valorar la presencia de G.C.H. en el laboratorio: en sangre y en
orina.
1. QU ESL LA G.C.H.?
Es una hormona que se sintetiza en el cerebro manifestando diferentes
funciones en la mujer y en el hombre. Se produce por clulas Trofoblsticas en
las mujeres embarazadas, estimula la maduracin del vulo y en los hombres
la produccin de testosterona en los testculos.
Las clulas Trofoblsticas son las que darn origen a la placenta, siendo stas
las que se formarn inmediatamente despus de la fecundacin o la formacin
de ciertos procesos tumorales en el hombre y en la mujer.
2. CONFORMACIN QUMICA.
Es una glucoprotena, en su estructura contiene aproximadamente 30%
de carbohidratos; formada por dos cadenas alfa y beta con un peso molecular
de 36,700 daltons, su punto isoelctrico es de 4.5, vale la pena mencionar que
su subunidad o cadena alfa (14,500 daltons y 92 aminocidos) es igual a la de
otras hormonas del mismo gnero de origen glicoproteco como son la LH,
FSH, y TSH, de lo contrario su subunidad o cadena beta (22,200 daltons y 145
aminocidos) es especfica de esta hormona ya que contiene 30 aminocidos
adicionales en la secuencia de su carbono terminal, ricos en prolina.

3. CUL ES SU FUNCIN?
Una de las funciones ms importante es la de prevenir la involucin normal del
cuerpo lteo al final del ciclo sexual femenino, este cuerpo lteo aparte de
secretar esta hormona secreta tambin progesterona y estrgenos. El aumento
de G.C.H., da lugar a que el endometrio continu su crecimiento y almacene
grandes cantidades de nutrientes adicionales en lugar de perderlos en forma de
liquido menstrual. Si desaparece el cuerpo lteo antes de la sptima a onceava
semana de embarazo se presenta un aborto espontneo, despus de
este tiempo la placenta secreta cantidades suficientes para mantener la
gestacin.
La importancia de conocer la cantidad de G.C.H. junto con los datos clnicos de
la paciente, nos permite valorar si el periodo de gestacin evoluciona normal o
anormalmente. A continuacin se mencionan las anormalidades relacionadas
con el periodo de gestacin:
a.
Embarazo ectpico.
b.
c.

Evaluacin de peligro de aborto.

coriocarcinoma)
d.
Evaluacin de los tumores trofoblsticos (mola hidatidiforme,
e.

Evaluacin de tumores testiculares.

f.

Produccin ectpica de G.C.H. en tumores no trofoblsticos.

Otra de las funciones de la G.C.H. es el efecto estimulante sobre las clulas

intersticiales en los testculos lo que trae como consecuencia que los fetos
masculinos produzcan testosterona; esta pequea cantidad de secrecin de
testosterona durante el embarazo es determinante para que el feto desarrolle
rganos sexuales masculinos. La testosterona que secretan los testculos
fetales ocasionan que desciendan hacia el escroto al final del periodo de
gestacin.
Otra funcin es su utilidad como marcador tumoral, nos permite monitorear
procesos neoplsicos antes y despus del tratamiento.
En la mola hidatidiforme y en el corio-carcinoma los valores de G.C.H. son
estratgicamente altos desde la primera semana de aparicin, por lo que no se
puede confundir con el embarazo.
En la mayora de las neoplasias testiculares tambin se presentan valores de
G.C.H. altos, los pacientes con tumores de clulas germinales tienen como
resultado la infertilidad. Estas neoplasias afectan a personas jvenes por lo que
es importante evaluar su fertilidad antes de cualquier tratamiento o
quimioterapia para eliminar el tumor.
Otra funcin es en el tratamiento de infertilidad en hombres y mujeres. Existen
formas comerciales de ampolletas inyectables de G.C.H., la dosis es diferente
para cada paciente, normalmente se administra en combinacin con otras
hormonas como la F.S.H. En la mujer en caso de que no haya respuesta del
ovario para producir ovulacin se administra este tratamiento hasta por varios
ciclos. Tambin se administra en el hombre para estimular la formacin de
espermatozoides.

4. REACCINES ADVERSAS AL TRATAMIENTO CON G.C.H.

Todos los tratamientos con G.C.H. en hombres y mujeres deben de ser
supervisados por el mdico especialista para evitar posibles interacciones. Las
reacciones adversas a este medicamento son generalmente infrecuentes,
destacan las siguientes: irritabilidad, depresin, dolor de cabeza, retencin de
lquidos, desarrollo mamario en hombres, desarrollo sexual precoz en nios,
erupciones en la piel y otros efectos adversos. No se recomienda el uso de
este medicamento en mujeres embarazadas y en periodos de lactancia. Los
embarazos que se producen como consecuencia del tratamiento de G.C.H.
tienen mas riesgo de aborto y de ser embarazos mltiples.
5. IMPORTANCIA DE SU CUANTIFICACIN EN SANGRE
El monitoreo de G.C.H. se realiza en los siguientes padecimientos
Periodo de gestacin o embarazo: valora la etapa y si existe algn riesgo para
tratarlo oportunamente, como en el caso de los embarazos ectpicos.
En caso de eclampsia y pre-eclampsia: donde se a demostrado un incremento
importante en sus valores, lo que refleja el estado placentario.
En evaluacin de tumores como marcador tumoral: dnde al inicio del mismo y
durante la presencia de ste se observan valores muy altos, despus del
tratamiento o despus de la ciruga el mdico monitorea los valores dnde
deben de disminuir cmo indicativo del xito del mismo, como en el caso de la
mola hidatidiforme.
En la valoracin dentro del tamiz metablico en el recin nacido, cmo
marcador bioqumico, dnde su presencia y aumento
refleja enfermedades autosmicas fetales, dnde tambin implica la valoracin
de factores predisponentes cmo la edad, sexo, raza, antecedentes familiares y
obsttricos.
6. DETERMINACIN EN EL LABORATORIO.
Existen dos formas de valorar la presencia de G.C.H. en el laboratorio: en
sangre y en orina.
Las pruebas rpidas de embarazo en orina se basan en la identificacin de
G.C.H. pero no la cuantifican, adems pueden interferir la presencia de otras
hormonas glucoprotecas cmo la LH, F.S.H. y T.S.H. con las cules tiene un
gran parecido, especficamente con la L.H. Aunque la mayora de las pruebas
tienen gran sensibilidad su especificidad s vara, por lo que se recomienda que
la paciente se presente despus de 8 das de retraso de su periodo menstrual.
La orina puede ser, cualquiera emitida durante el da, pero de preferencia la
primera de la maana por su mayor concentracin.
Las pruebas de embarazo en suero son mucho ms confiables, se basan en la
identificacin de la porcin beta de la hormona la sensibilidad y especificidad
son muy altas en este tipo de prueba. Las tcnicas de laboratorio implican gran
variedad de metodologas basadas en, inmunoensayos, radioinmunoensayo
y radio-receptor.
Es importante saber que la efectividad de la prueba depende desde una buena
toma de muestra a analizar. La paciente se debe presentar en ayuno o con un
ayuno mnimo de 6 hrs, ya que la presencia de lipemia, hemlisis e ictericia
afectan en resultado final de la determinacin. Tambin es de gran importancia

mencionarle a la paciente que la toma de muestra no ser dolorosa y que la

cantidad y extraccin de la muestra de sangre ser la necesaria para su
estudio y que no le causar otras alteraciones.
Se necesita tomar mnimo 5 ml. de sangre sin anticoagulante para obtener
suero, una de las metodologas ms confiables en la actualidad, es el
inmunoensayo enzimtico por micropartculas (M.E.I.A.), donde
el control de calidad del procedimiento es muy especfico.
METODOLOGA M.E.I.A.
Este inmunoensayo por micropartculas, es una determinacin cualitativa y
cuantitativa de la subunidad beta de la G.C.H. en suero o plasma humano. Su
valoracin con esta metodologa es muy confiable para su monitoreo y la
deteccin temprana de embarazo, lo que le permite al mdico valorar
diagnsticos tempranos de malformaciones gestacionales o problemas propios
del embarazo o de la mujer. Esta metodologa establece controles estndar y
de calibracin de acuerdo al lote de reactivos con el que se va a trabajar
estableciendo un control de calidad ptimo para la realizacin de la prueba.
PRINCIPIOS BIOLGICOS DEL PROCEDIMIENTO:
Anti- beta-hCG conjugado con micropartculas marcadas con fosfatasa alcalina.
Muestra.
Micropartculas recubiertas de anticuerpos contra la sustancia a analizar.
Complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo.
Fosfato de 4-metilumbeliferona-p (M.U.P.)
Complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo.
Emisin de fluorescencia (se mide la taza de produccin de MUP ante la
presencia del complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo).
Para ver el grafico seleccione la opcin "Descargar" del men superior
Los valores esperados para este procedimiento en el periodo de gestacin son
los siguientes.
SEMANAS DE EMBARAZO
3 4
45
5 -6
67
7 12
12 16
16 29
29 41

PROCEDIMIENTO :

IV.

MATERIALES

V.

Orina
Test

PROCEDIMIENTO

1. Recoja la orina en un envase limpio (Recipiente de plstico p.ej.). La

mejor manera de recoger la muestra es colocando un recipiente (limpio
y seco) en el centro del proceso de miccin.

2. Saque la prueba del embarazo de su envoltorio justo en el momento que

usted est lista para utilizarla, no antes.
3. introduzca la tira hasta la seal de las flechas.
4. Esperar de 5 a 10 minutos.

5. Lugo retirar la tira.