LAS PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES (ANLISIS)
HOSPITAL JUREZ DE MXICO
AGOSTO-2016

QFB JAVIER BAUTISTA JUREZ

REACCIN AG-AC
AGLUTINACIN
PRECIPITACIN
HEMLISIS
INHIBICIN DE LA AGLUTINACIN
INMUNOFLORESCENCIA
RADIO INMUNOENSAYO
ELISA
SERODIA
CITOMETRA DE FLUJO

PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES

EN 1875 EL DR LANDOIS, MEZCLA HEMATES DE CORDERO

CON SUERO DE PERRO Y LOS INCUBA A 37, EL DESCRIBE
LA LISIS EN UN TIEMPO DE DOS MINUTOS COMO
OBSERVACIN DE INCOMPATIBILIDAD.

PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES

EL DR. LANDSTAINER (1900-1901), REALIZA EL MISMO

PROCEDIMIENTO DEL DR. LANDOIS PERO EN INDIVIDUOS
DE LA MISMA ESPECIE, DESCUBRIENDO AS EL SISTEMA
SANGUNEO HUMANO MAS IMPORTANTE (ABO).

PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
EN 1908 EL DR OTTENBERG INTRODUCE UN PROCEDIMIENTO
DE RUTINA PARA LA REALIZACIN DE LAS PRUEBAS
CRUZADAS, EN EL CUAL SE TRATO DE EVIDENCIAR LA
REACCIN ANTGENO-ANTICUERPO.

INMUNOHEMATOLOGA

ENTRE 1944 Y 1945 EL DR COOMBS DESCUBRE EL SUERO

ANTI-IGG + ANTI-C. HASTA ANTES DE SU
DESCUBRIMIENTO SOLO EXISTAN 10 GRUPOS
SANGUNEOS.

ANTICUERPOS
IGM.- NATURALES (COMPLETOS)(REACCIN DESDE 22C)
FIJAN COMPLEMENTO
ANTICUERPO PENTAMRICO
900 KD
NO ATRAVIESAN PLACENTA
IGG.- INMUNES (INCOMPLETOS) (REACCIN A 37C)
PUEDEN FIJAR COMPLEMENTO
ANTICUERPO MONOMRICO
150KD
ATRAVIESA PLACENTA
EXISTEN CUATRO SUBCLASES (1, 2, 3 Y 4)

ANTICUERPOS EN SUERO
SE HA ENCONTRADO ENTRE 25-38% DE INDIVIDUOS NO ESTIMULADOS
CON ANTICUERPOS NATURALES IRREGULARES EN DIFERENTES
POBLACIONES.
EN INDIVIDUOS CON ALGN ESTIMULO, INTERNACIONALMENTE SE HA
VISTO QUE EXISTEN ENTRE EL 2-3% CON ANTICUERPOS INMUNES EN
CUALQUIER POBLACIN.

CLASIFICACIN DE ANTICUERPOS
ANTIERITROCITARIOS
Regulares

IgM 04-45C ICT Sistema ABO

Naturales

Irregulares IgM 18-22C NICT

H, Ii, Le(a,b), P, MN, A1 nat, E nat.
Inmunes

IgG 37C ICT, todos los antgenos eritrocitarios

Anticuerpos
Auto-Inmunes

Anti-Sistema Rh-Hr, auto-Anti-I, Auto-anti-P, etc

Medicamentos

Tipo penicilina, alfa metildopa,

REACCIONES HEMOLTICAS TARDAS

REACCIN SEVERA (TARDA)

REACCIN PRESENTE EN PACIENTES ALOINMUNIZADOS
PREVIAMENTE, QUE GENERAN REACCIN SECUNDARIA A LOS
ANTGENOS TRANSFUNDIDOS. LOS CUALES NO SE DETECTAN
POR VARIOS FACTORES EN LAS PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES. UN EJEMPLO TPICO SON LOS
ANTGENOS DEL SISTEMA KIDD. SU APARICIN ES DESPUS DE
3-7 DAS DE HECHA LA TRANSFUSIN

HEMOLISIS INTRAVASCULAR
ES CAUSADA POR ANTICUERPOS QUE ACTIVAN LA VA CLSICA DEL
C Y SE ENCUENTRAN IMPLICADOS LA IGM Y LA IGG1/IGG3.
NORMALMENTE CAUSADA POR SISTEMA ABO.
SE ACTIVA TAMBIN EL SISTEMA DE LA COAGULACIN Y LA
LIBERACIN DE AMINAS VASOACTIVAS. TODO ESTO PUEDE
DESARROLLAR CID, TRASTORNOS VASOMOTORES Y FALLA RENAL.

Sobrevida de eritrocitos
incompatibles para Jka
100
90
80

% sobrevida

70
60
50
40
30
20
10

Lneas 3D 1

0
0

10

15

20

minutos

25

30

35

40

HEMOLISIS EXTRAVASCULAR
SE ACTIVA EL C3B Y EL SISTEMA FAGOCTICO
MONONUCLEAR POR ANTICUERPOS DE LOS
SISTEMAS RH, MNSS, LU Y EN MENOR PROPORCIN
LOS SISTEMAS KELL, FY, DI, ETC.

FACTORES QUE FAVORECEN

LA REACCIN

PH.
TEMPERATURA.
FUERZA INICA.
CONCENTRACIN.
TIEMPO DE INCUBACIN.

REACCIN AG-AC
LA CONCENTRACIN DE LAS
CLULAS (ANTGENOS) Y LA
CANTIDAD DE SUERO
(ANTICUERPOS) PARA LA
REACCIN, DEBEN DE
PREPARARSE Y AGREGARSE
EN CANTIDADES YA
ESTABLECIDAS.

Prezona

Zona de equivalencia

Ag- Ac

Antgeno

Postzona

FUERZA IONICA

Los potenciadores ms comnmente

usados son:
Albmina
Baja fuerza Inica
Enzimas
Polibreno
Elisa, Citometra de Flujo.

HISTORIA CLNICA
NOMBRE COMPLETO E IDENTIFICACIN
HOSPITAL Y SERVICIO DE PROCEDENCIA
DIAGNSTICO
EDAD Y SEXO
ANTECEDENTES G.O.
ANTECEDENTES TRANSFUSIONALES
TRATAMIENTO

PROCEDIMIENTO
AT= SUERO DE RECEPTOR Y ERITROCITOS DE RECEPTOR

MENOR (R)= SUERO DE DONADOR Y ERITROCITOS DE RECEPTOR

MAYOR (D)= SUERO DE RECEPTOR Y ERITROCITOS DE DONADOR

RESULTADOS
Autotestigo

menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

ANLISIS DE RESULTADOS

FASE DE LA REACCIN
MEDIO DE REACCIN
FUERZA DE LA AGLUTINACIN
TCNICA UTILIZADA
DIAGNOSTICO
ANTECEDENTES TRANSFUSIONALES
Y G-O
TRATAMIENTO
EDAD DEL PACIENTE

RESULTADOS
Autotestigo

Menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

4+
+
4+
+
-

4+
+
4+
+
-

GRUPO SANGUINEO ABO

DIRECTO

INVERSO

RESULTADO

ANTI A

ANTI B

ANTI AB

AT

A1

A2

4+

NEG

4+

NEG

NEG

NEG

4+

NEG

NEG

4+

4+

NEG

4+

4+

NEG

NEG

4+

4+

4+

NEG

NEG

NEG

NEG

NEG

NEG

NEG

NEG

NEG

4+

4+

4+

NEG

A
B
AB
O

CLASIFICACIN DE ANTICUERPOS
ANTIERITROCITARIOS
Regulares

IgM 04-45C ICT Sistema ABO

Naturales

Irregulares IgM 18-22C NICT

H, Ii, Le(a,b), P, MN, A1 nat, E nat.
Inmunes

IgG 37C ICT, todos los antgenos eritrocitarios

Anticuerpos
Auto-Inmunes

Anti-Sistema Rh-Hr, auto-Anti-I, Auto-anti-P, etc

Medicamentos

Adsorcin, Complejo Inmune y autoanticuerpos,

RESULTADOS
Autotestigo

Menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

2+
+
2+
+
-

2+
+
2+
+
-

ANTICUERPOS INCOMPLETOS
SON AQUELLOS QUE NO AGLUTINAN HEMATES
SUSPENDIDOS EN MEDIOS SALINOS, TAMBIN
CONOCIDOS COMO ANTICUERPOS CALIENTES,
BLOQUEADORES, IGG, SENSIBILIZANTES, ETC.

Caso clnico # 5

RESULTADOS
Autotestigo

Menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

Tipo de Mecanismo.
Autoinmune.
Chaparral
Clorpromazina
Cianidanol
Diclofenaco
Ibuprofen
Levodopa
Acido Mefenamico
Alfa-Metildopa
Nomifensina
Fenacetina
Procainamida
Estreptomicina
Teniposido

AH X MEDICAMENTOS
TIPO AUTOINMUNE

ROULEAUX

AGLUTINACIN

Tipo de Mecanismo.
Adsorcin del medicamento.

AH X MEDICAMENTOS
TIPO ADSORCIN

Carbromal
Cefalosporinas 1,2 y 3 generacin
Cianidanol
Dipirona
Eritromicina
Insulina
Isoniazida
Penicilinas
Fenacitinas
Quinidinas
Estreptomicina
Tetraciclinas
Tolbutamida
Zomepirac

Tipo de Mecanismo.
Complejo Inmune.
Acetominofen
Aminopirina
Acido p-aminosalicilico
Antazolina
Metabolitos de butizida
Carbimazole
Cefalosporinas de 2 y 3 genaracin
Hidrocarbonos clorinatados
Clorproamidas
Cianidanol
Diclofenaco
Dipirona
Fluorouracil
Hidralazina
Hidroclorotiazida
Insulina
Isoniazida
Levadopa
Acido mefenamico
Metotrexato
Probenicid
Piramidon
Quinidina
Rifampicina
Petotal sodico
Sulfonamidas
Tetraciclinas
tiopental

AH X MEDICAMENTOS
TIPO COMPLEJO INMUNE

AUTOTESTIGO POSITIVO
A.H.A.I.
E.H.R.N.
REACCIN TRANSFUSIONAL
A.H. POR MEDICAMENTO
MAL CONTROL DE CALIDAD

AUTOTESTIGO POSITIVO
Prueba de Coombs
0

Moleculas
IgG/Eritrocito
25-120

(1+)

120-200

1+

200-300

2+

300-500

3+, 4+

Mas de 500

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA
DIRECTA (DAT).
EL DAT ES USADA PARA DETECTAR INMUNOGLOBULINAS
Y/O COMPLEMENTO UNIDOS AL ERITROCITO IN VIVO.
UN RESULTADO POSITIVO NOS INVITA A LA REALIZACIN
DE UN ELUIDO PARA LA POSTERIOR IDENTIFICACIN DEL
ANTICUERPO.

REACTIVOS ANTIGLOBULINICOS
LOS ANTISUEROS ANIMALES SON

POLICLONALES. LOS REACTIVOS

MONOCLONALES MONOESPECFICOS
TAMBIN PUEDEN OBTENERSE A PARTIR
DE HIBRIDOMAS.

LOS REACTIVOS PUEDEN SER

ANTICUERPOS POLICLONALES,
MONOCLONALES, MEZCLAS DE
MONOCLONALES O MEZCLAS DE MONO Y
POLICLONALES.

E.H.P.N. EN BASE A TTULO ANTI-D

TTULO

LEVE %

MODERADA%

SEVERA %

< 1:8

100

1:16-1:64

52

40

>1:64

21

58

21

Especificidad de los Acs identificados en 39

casos de EHRN (1988 1998)

SISTEMAS

SRh

Otros

BCSCMNSXXI
* 2 BCS

ANTI
Anti D
Anti E
Anti c
Anti e
Anti HrO
Anti Rh29
Anti Jka
Anti K
Anti Dia
Anti Dib

FRECUENCIA Y SUBTOTAL
%
20
50.00
33
4
10.00
3
7.50
1
1.25
4*
10.00
1
2.50
3
7.50
7
2
5.00
1
2.50
1
2.50
TOTAL
40
40 / 143 =
27.90%

82.50

17.50

PANEL AUXILIAR PARA AHAI Y

ANTICUERPOS NATURALES IRREGULARES
(FROS)
H

RESULTADOS
Autotestigo

Menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

No.

System name

Systemof
symbol
Gene name(s)*
Table
blood group
systems

CD

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

ABO
MNS
P
Rh
Lutheran
Kell
Lewis
Duffy
Kidd
Diego
Yt
Xg

ABO
MNS
P1
RH
LU
KEL
LE
FY
JK
DI
YT
XG

ABO
GYPA, GYPB, GYPE
RHD, RHCE
LU
KEL
FUT3
DARC
SLC14A1
SLC4A1
ACHE
XG, MIC2

Chromosomal
location
9q34.2
4q31.21
22q11.2qter
1p36.11
19q13.32
7q34
19p13.3
1q23.2
18q12.3
17q21.31
7q22.1
Xp22.33

13
14

Scianna
Dombrock

SC
DO

ERMAP
ART4

1p34.2
12p12.3

15
16
17
18
19
20
21

Colton
Landsteiner-Wiener
Chido/Rodgers
H
Kx
Gerbich
Cromer

CO
LW
CH/RG
H
XK
GE
CROM

AQP1
ICAM4
C4A, C4B
FUT1
XK
GYPC
CD55

7p14.3
19p13.2
6p21.3
19q13.33
Xp21.1
2q14.3
1q32.2

CD236
CD55

22
23
24
25

Knops
Indian
Ok
Raph

KN
IN
OK
RAPH

CR1
CD44
BSG
CD151

1q32.2
11p13
19p13.3
11p15.5

CD35
CD44
CD147
CD151

26
27
28

John Milton Hagen

I
Globoside

JMH
I
GLOB

SEMA7A
GCNT2
B3GALT3

15q24.1
6p24.2
3q26.1

CD108

29
30

Gill
Rh-associated glycoprotein

GIL
RHAG

AQP3
RHAG

9p13.3
6p21-qter

numbers

CD235
CD240
CD239
CD238
CD234
CD233
CD99
CD297
CD242
CD173

CD241

Especificidad de Acs identificados en 10367 pacientes del Centro Mdico Nacional (1976-1981)

I ANTICUERPOS CON
SIGNIFICANCIA CLNICA
Anti
N
%
D
157
11.32
E
200
14.43
c
180
12.48
K
46
3.31
e
40
2.88
C
37
2.66
S
40
2.88
a
Jk
33
2.38
Jkb
29
2.09
a
Di
24
1.73
a
Fy
24
1.73
Fyb
16
1.15
Xga
10
0.32
S
6
0.43
Dib
2
0.14
Total
844
8.14

II ANTICUERPOS SIN APARENTE

SIGNIFICANCIA CLNICA
Anti
N
%
a
Le
199
14.35
ab
Le
134
9.66
b
Le
18
1.29
LeH
16
1.15
P1
146
10.53
M
16
1.15
N
13
0.93

542

5.2

RESULTADOS
Autotestigo

menor R

Mayor D

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

+
+
+
+
-

RESULTADOS
COMPATIBLE= SE ENVA SANGRE PARA SU TRANSFUSIN.
INCOMPATIBLE= ANALIZAR HISTORIA CLNICA Y RESULTADOS.
ESTUDIOS POST INCOMPATIBILIDAD= GRUPO SANGUNEO, COOMBS
DIRECTO, RASTREO DE ANTICUERPOS, ELUDO, ABSORCIN, FENOTIPO,
BSQUEDA DE SANGRE COMPATIBLE, OTROS

QUE HACER CUANDO LAS PRUEBAS

CRUZADAS SON SIEMPRE COMPATIBLES
CUIDAR Y ANALIZAR LOS FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA
REACCIN ANTIGENO-ANTICUERPO:

1.

PH

2. TEMPERATURA
3. CONCENTRACIN
4. FUERZA INICA
5. TIEMPO DE REACCIN

javier_bautista_juarez@hotmail.com
jbautistaj@abchospital.com
Centro Mdico ABC 5230 8000 ext 3771