DETERMINACION DE ALCOHOL EN BEBIDAS POR CROMATOGRAFIA DE GASES

William Prez, Claudia Benavides, ngela Delgado, Liliana Moncayo

Departamento de qumica (Universidad de Nario)
Pasto (Nario-Colombia)
mailto:Quimilink@mail.udenar.edu.co

2002
Cromatografa, Gases, Etanol
Resumen: Se prepararon tres soluciones de etanol, a varias concentraciones en porcentaje vol/vol, adems de
una solucin problema compuesta por una bebida alcohlica, y se agrego un estndar interno de n-propanol
en un volumen constante de 1ml a cada una. Se tomaron los cromatogramas correspondientes a cada una, y se
realizo una curva de calibracin con la cual se determino el porcentaje de alcohol en una bebida que fue del
5.26%
Introduccin:
El uso de la cromatografa en anlisis cuantitativo,
se ha sido desplegando e implementando da a da,
gracias al avance de la tecnologa, es por ello que el
conocimiento de los principios fundamentales que
rigen este mtodo analtico, son la base para realizar
estudios de mezclas muy complejas que sean
susceptibles de separa por este mtodo, y mediante
tcnicas como las curvas de calibracin o de adicin
de estndar, lograr as una determinacin
cuantitativa de cada componente en la el analito.
La cromatografa de gases es una tcnica de gran
rapidez y sensibilidad; en esta tcnica, la fase mvil
es un gas no reactivo, como el helio o el nitrgeno y
la fase estacionaria puede ser, segn los casos, un
absorbente slido, como el gel de slice o los
llamados tamices moleculares o bien, mas
generalmente, un liquido de elevado punto de
ebullicin retenido en forma fina de pelcula sobre la
superficie de un soporte slido granular inerte, tal
como el polvo de ladrillo refractario. Es esta
segunda posibilidad la que da origen a la
denominacin de cromatografa gas-liquido, o CGL,
con que es conocida esta tcnica. Otra fase fija
tambin utilizada, que en realidad es un slido
poroso pero que acta como disolvente orgnico,
est constituida por un copolimero estirenodivinilbenceno como los que forman base de las
resinas de intercambio inico.
Una gran ventaja de la cromatografa de gases es su
gran rapidez. Los gases poseen una viscosidad
mucho menor que los lquidos, por lo que se pueden
desplazar mucho mas rpidamente a lo largo de una
columna rellena. Adems, la difusin en los gases es
miles de veces ms rpida que en el de los lquidos
y, en consecuencia, es correlativamente mayor la
velocidad de transferencia de materia, de la cual
depende el poder de resolucin de las columnas.

Una limitacin de la cromatografa de gases reside

en el hecho de exigir que las muestra sean gases o
lquidos voltiles que existan en estado gaseoso a
la temperatura de la columna; por tanto los iones
inorgnicos no se pueden analizar por
cromatografa de gases a menos que se conviertan
previamente en compuestos voltiles, antes de ser
susceptibles de anlisis por cromatografa de
gases.
La cromatografa de gases exige un cierto equipo
mnimo de instrumentos, entre ellos estn:

cilindro de gas de arrastre: que contiene el que

el gas inerte que se va a emplear como fase
mvil (Helio o Nitrgeno), este cilindro debe
estar provisto de un mano-reductor y de un
manmetro, es muy importante regular con
exactitud la presin y el flujo del gas de arrastre,
por lo cual los cromatgrafos de gases
incorporan en general una segunda vlvula de
regulacin y un segundo manmetro.
Fluximetro: se usa para medir la velocidad de
flujo de gas de arrastre, est constituido por un
tubo de vidrio dispuesto verticalmente, de
seccin en forma de V, mas amplia hacia la parte
superior que hacia la inferior, dentro de la cual
hay una pequea pieza metlica de forma
circular o cnica que es arrastrada por la
corriente gaseosa, la cual la eleva a lo largo del
tubo tanto mas cuanto mas rpida es dicha
corriente, resultando que el nivel al que flota
indica la velocidad del gas.
Bloque de inyeccin: es el lugar en el que la
muestra es introducida en la corriente del gas de
arrastre. Generalmente, las muestras son liquidas
a la temperatura ambiente, por lo cual se las

introduce inyectndolas con una jeringa especial.

La aguja se introduce atravesando un disco de
caucho de silicona, el cual se vuelve a cerrar por si
mismo al retirar la aguja. Es importante que la
muestra se vaporice completamente as que es
inyectada; por lo tanto, la cmara de inyeccin esta
en el interior de un bloque metlico que puede
calentarse elctricamente a la temperatura que
convenga, la cual viene indicada en un medidor
situado en el panel frontal del aparato. El bloque
de inyeccin debe estar a una temperatura superior
a la de la columna.
Columna: Constituye el centro del cromatgrafo.
Consiste en un tubo de cobre o de acero inoxidable
de una longitud mnima de 1 m y muchas veces de
2 m o ms y de un dimetro interior que depende
del tipo de detector empleado. Cuando se usan
detectores de conductividad trmica, el dimetro es
de unos 4 mm; con detectores de ionizacion de
llama el dimetro puede ser la mitad del anterior.
La columna se monta en el interior de una estufa y
para ahorrar espacio estn en forma de U o
arrolladas en espiral. La temperatura de la estufa se
regula por termostatos; se consigue que en el
espacio interior de la estufa sea uniforme haciendo
circular el aire por medio de un ventilador. Las
columnas estn rellenas de grnulos de un slido
recubiertos de una pelcula de lquido no voltil
que constituye la verdadera fase estacionaria.
detector: Cuando el gas de arrastre sale de la
columna lleva consigo los diversos componentes
de la muestra, los cuales emergen separadamente
a tiempos diferentes, que dependen de la
magnitud de las fuerzas con que dichos
componentes son retenidos por la fase fija. Entre
los detectores mas usados estn los basados en la
conductividad trmica y en la ionizacion de llama.
Este ltimo es mucho ms sensible y permite
emplear nitrgeno como gas de arrastre.
Registrador:
Este
permite
obtener
automticamente curvas, haciendo posible ver los
resultados del anlisis. El registrador se halla
conectado al detector, recibiendo de este una seal
en forma de corriente elctrica muy dbil que
aumenta o que disminuye cuando un sustrato pasa
por el detector
Materiales y Mtodos
En cuatro balones aforados de 50ml se prepararon 3
soluciones, para la curva de calibracin. Para ello se
aadieron 0.2 - 0.6 - 1 mililitros de etanol anhidro a
tres de ellos junto con 1 mililitro de n-propanol,

despus se aforaron con agua destilada,

paralelamente al cuarto baln a 15 mililitros de una
cerveza se le aadi 1 mililitro de n-propanol y se
aforo hasta la lnea del baln con agua destilada.
Posteriormente con 0.5 microlitos de las
soluciones patrn se analizaron en un
cromatgrafo de gases de las siguientes
caractersticas. El cromatgrafo de gases utilizo
una columna de 15 metros y una fase mvil el
nitrgeno molecular N2, una fase estacionaria no
polar 2B-5 compuesta por 5% fenil 95%
dimetilpolisiloxano, que sirve tambin para
identificar: alcaloides, drogas farmaceuticas,
Fames, Halohidrocarbonos, Fenoles, Pesticidazas,
Hervicidas, Aceites esenciales y solventes
residuales. Todo este conjunto se puede regular de
60 a 360C, la temperatura usada para los
cromatogramas fue de 55 C. Con los cuales de
determino el porcentaje de etanol en la muestra.
Una misma cantidad de la solucin problema, se
analizo en el cromatgrafo de gases.
Resultados y discusin
Mediante el uso de los espectros anexados a este
informe se determino el porcentaje de alcohol en
una bebida. En la tabla 1 se consignan los datos
usados para esta determinacin:
(AE)
10028
25786
86048
75572

(AP)
35009
26919
55915

[E]% [P]% [E]/[P]

0,4
1
0,4
1,2
1
1,2
2
1
2
Muestra Problema
61693
?
1
?

(AE)/(AP)
0,2864406
0,9579108
1,5389073
1,2249688

Tabla 1 (resultados obtenidos de los espectros en la

cromatografa de gases)

(AE)
(AP)
[E]%
[P]%

rea Etanol
rea Propanol
Concentracin etanol en % Vol/Vol
Concentracin propanol en % Vol/Vol

Con los resultados de [E]/[P] Vs (AE)/(AP) Se

realizo una curva de calibracin (a) en la cual se
extrapolaron los resultados obtenidos en la muestra
problema, consignados en la tabla 1, obteniendo
una ecuacin de recta igual a:
AE
AP

m [[ EP ]] b

[a]
Con la ecuacin obtenida de la curva de
calibracin se obtuvo una concentracin de la

solucin diluida de la muestra problema de 1.579 %

de etanol usando la ecuacin [b] derivada de [a]

Para determinar la efectividad del mtodo se

realizaron los clculos de eficiencia del la
columna, determinando el numero de platos, la
altura de estos y la resolucin. Los datos usados en
estos clculos corresponden a la tabla 2.
Tabla 2 (Resultados obtenidos del cromatograma 3)
Tiempo
Retencin
Compuesto
Seg.

Curva de calibracin (a) (Esta

curva proporciona una

ecuacin lineal, con la cual se pueden predecir el contenido de
etanol en la muestra problema.)

Tratamiento estadstico:
Desviacin estndar
la regresin (Sr): 0.03671

de

Desviacin estndar
de la pendiente (Sm): 0.03244
Intervalo de confianza 95%: 0.03671

242

23,8

15000

1641,9

9,136

Propanol

285

22,4

15000

2601,7

5,765

Resolucin (Propanol _ Etanol)

1,884

Se debe destacar la importancia de las unidades de

W, ya que estas deben presentase en minutos o
segundo segn sea el caso. En los resultados de la
tabla dos, podemos observar que el numero de
platos tericos (ecuacin [c]) para la columna
polar de 15000mm o 15m es aceptable sin
embargo la altura de los platos (ecuacin de 9.1 y
de 5.7 mm es muy alta, pero en trminos generales
estos dos datos se compensan dando buenos
resultados. Adems, observando la resolucin de la
columna obtenida con la ecuacin [e]

16t R
N
W2

Como la solucin problema era una dilucin de la

muestra original se realizaron los clculos para
determinar el valor real de etanol, obteniendo un
resultado de 5.26%.

m [[ EP ]] b

[b]
El porcentaje de etanol en la muestra es un 31% ms
alto que el estipulado en la etiqueta del producto. El
coeficiente de correlacin R es muy bueno lo que
demuestra la precisin y la reproducibilidad del
mtodo. Se pueden analizar diferentes tipos de
errores en esta determinacin, pero los ms posibles
corresponden a la no realizacin de mayores anlisis
para obtener un dato estadstico del resultado, otra
posible causa del aumento en el contenido etanolico
se da por la fermentacin que sufre el producto
desde el momento de envase. El contenido de gas
puede causar un error en la cantidad de muestra
tomada.

Altura
Plato T
mm

Etanol

Desviacin estndar
del intercepto (Sb): 0.04431
Intervalo de confianza 95%: 0.05014

AE
AP

Long Numero
Colum Platos
mm
T

W
Seg.

[c]

LW 2
2
16t R

[d]

2[(t R ) P (t R ) E ]
WE WP

[e]

RS

Observando los tiempos de retencin en la tabla 2,

podemos apreciar la no polaridad de la columna,
retrasndola salida del n-propanol y permitiendo la
fcil elusin del etanol el cual es mas polar e
interacta menos con la fase estacionaria.
Conclusiones
Se logro determinar el contenido de alcohol de una
cerveza comercial que fue del 5.26% lo que es un
30 % mayor que el promedio del 4%, una posible
causa del error es la mala preparacin de la
muestra problema, generado
por un exceso
causado por la presencia de gas, lo que ocasiono

un mal registro del volumen a analizar. Adems la

cerveza por ser un producto orgnico es susceptible
a generar una mayor cantidad de compuestos, si es
almacenado en formas no convencionales.
Se aprendieron de manera prctica el manejo del
instrumental de cromatografa de gases. Se aplicaron
los conocimientos tericos, en la aplicacin del los
clculos de nmero de platos y su altura para la
columna usada en el laboratorio.
Se determino la resolucin de la columna en un
valor de 1.88 el cual es muy bueno y ofrece una gran
separacin de las bandas del etanol como del npropanol. Se deben tener en cuenta que para analizar
una determinada mezcla, se deben variar las
condiciones para obtener resultados ms favorables.
Bibliografa:
1.

Flaschka, H. A.
Qumica Analtica
Cuantitativa.
Compaa
Editorial
continental, S.A. Mxico, 1969.

2.

Fritz, J. Qumica Analtica Cuantitativa.

Editorial Limusa. Mxico, 1979.