CUPRINS

NOIUNI GENERALE DESPRE CANALELE IONICE PENTRU Ca2+....................................2

FAMILIA CANALELOR IONICE VOLTAJ-DEPENDENTE PENTRU Ca2+..............................2
STRUCTUR I FUNCII........................................................................................ 2
CANALOPATII....................................................................................................... 4
Ataxia episodic tip 2............................................................................................. 5
Ataxia cerebelar progresiv..................................................................................... 6
Paralizia periodic hipokaliemic tip 1........................................................................7
Sindromul miasteniform Lambert-Eaton......................................................................7
Sindroamele hipertermice maligne tip 3 i tip 5 (MHS3 i MHS5)......................................8
Migrena hemiplegic familial tip 1........................................................................... 8
Epilepsia mioclonic juvenil (JME)..........................................................................9
Epilepsia generalizat idiopatic.............................................................................. 10
FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+, DEPENDENTE DE RECEPTORII
RYANODINICI I DE RECEPTORII INOZITOL 1,4,5-TRIFOSFAT (RIR-CaC).......................10
STRUCTUR I FUNCII...................................................................................... 10
CANALOPATII..................................................................................................... 12
Sindromul hipertermic malign tip 1 (MHS1)...............................................................12
Boala miezului central.......................................................................................... 13
FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+ N RELAIE CU DEPOZITELE DE Ca2+ (TRPCC sau SOC)............................................................................................................ 13
FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+ MECANO-ACTIVATE FORMATE DIN
PROTEINA Mid1 (Mid1)............................................................................................ 15
BIBLIOGRAFIE....................................................................................................... 17

NOIUNI GENERALE DESPRE CANALELE IONICE PENTRU Ca2+

Canalele ionice pot fi definite ca structuri membranare proteice (sau glicoproteice) canaliculare,
hidrofile, prezente n structura tuturor membranelor organismelor vii, care conin cel puin un segment
1

transmembranar (TMS) n alfa-helix ce perforeaz membrana, i a cror principal funcie const n

realizarea pasajului liber sau condiionat (poart) al unor ioni i/sau molecule cu structur
simpl/complex fr a necesita pentru acesta consum energetic. (6)
Canalele ionice de Ca2+ voltaj-dependente sunt proteine transmembranare care se deschid ca
rspuns la depolarizarea membranei i permit ionilor de Ca2+ s intre n celul, permind astfel
cuplarea activitii electrice cu transmiterea intracelular a semnalului. Multe dintre procesele care au
loc n celulele excitabile (de exemplu: eliberarea neurotransmitorilor, transcripia unor gene sau
procese metabolice neuronale) sunt controlate prin influxul de Ca2+ produs simultan n regiuni celulare
diferite. Caracteristicile spaiale i temporale ale semnalelor de Ca2+ pot fi variate i pot fi explicate
prin existena unor canale de Ca2+ voltaj-dependente cu proprieti biofizice diferite. Diversitatea
canalelor ionice de Ca2+ a devenit evident prin examinarea proprietilor fiziologice i farmacologice
ale curenilor de Ca2+ n diferite tipuri de celule. (3)
n ceea ce privete expresia tisular a canalelor de Ca 2+, aceasta se schimb odat cu vrsta. De
exemplu n neuronii din hipotalamus exprimarea canalelor tip L crete cu vrsta. Aceast cretere este
corelat cu o scdere accentuat a potenialelor postsinaptice excitatorii i un risc crescut de moarte
celular. La toate animalele de experien aceste schimbri sunt corelate cu lipsa orientrii n spaiu.
Fenomenul de up-regulation a exprimrii subunitii 1D pare a fi fundamentul exprimrii crescute a
canalelor de tip L n neuronii hipocampici odat cu vrsta. Aceast schimbare poate face sistemul
nervos mai susceptibil la lezri patologice i toxicologice. (5)
FAMILIA CANALELOR IONICE VOLTAJ-DEPENDENTE PENTRU Ca2+
STRUCTUR I FUNCII
Canalele voltaj-dependente pentru Ca2+ au o structur foarte apropiat de cea a canalelor pentru
sodiu. Ele sunt formate din 4 sau 5 subuniti distincte (heterotetrameri sau heteropentameri), din care
nu lipsete niciodat subunitatea 1. Celelalte subuniti din componena canalului care se ataeaz
subunitii alfa1 pot fi de tip 2, 1-4, 1-8, 1-4.
Subunitatea 1 a
canalelor pentru Ca2+ este
de aproximativ patru ori
mai
mare
dect
subunitatea a canalului
pentru K+. Subunitile de
tip alfa1 au o greutate
molecular cuprins ntre
160-273 kDa i conin
fiecare
cte
patru
domenii identice (I-IV).
Fiecare domeniu este
format, la rndul su, din
cte ase TMS-uri helicoidale (segmentele
S1-S6). Segmentul S4
este ncrcat electropozitiv i curent al canalului
(voltage-sensor). Dou
Fig. 1. situate
Canalulntre
ionicsegmentele
voltaj-dependent
domenii adiionale
S5 i S6 formeaz porul canalului. Cele ase segmente
transmembranare sunt legate ntre ele prin bucle.
n afara subunitilor 1, care nu lipsesc niciodat i care formeaz canalul propriu-zis, n
componena canalelor pentru calciu voltaj-dependente se gsesc i alte tipuri de subuniti. Ele intervin
n modularea activitii canalului. Pentru denumirea canalelor calcice ce conin astfel de subuniti s-a
convenit ca la denumirea canalului propriu-zis CACNA s se adauge i denumirile subunitilor ce
le compun:
2

Complexul 2 (CACNA1D1) cuprinde pe lng subunitatea 1 i dou subuniti 1 (delta1).

Cele dou subuniti 1 sunt legate ntre ele prin puni disulfidice i ataate de subunitatea 1, fiind
situate att n grosimea membranei ct mai ales n afara acesteia. Complexul format din subunit ile
2 determin o cretere a influxurilor calcice i au fost identificate n membranele fibrelor
musculare scheletice, ale miocardului, neuronilor cerebrali i poriunea ileal a intestinului subire.
Pe acest cuplu de subuniti se afl un site specific la care se leag Gabapentinul, un redutabil
agentfarmacologic anticomiial i antimaniacal. Exist mai multe variante definite de subuniti :
1, 2, 3, 4. Ele desemneaz canalele CACNA1D1, CACNA1D2, CACNA1D3 i CACNA1D4.
Subunitatea (CACNB) este o subunitate de 57-68 kDa, localizat numai n citoplasm i care
modific sensibilitatea senzorului voltaic. Ea posed i un site de fosforilare pentru proteinkinaza
AMPc-dependent. Se descriu 4 variante de subuniti care corespund canalelor: CACNB1
(muchii scheletici, creier, inim, splin), CACNB2 (creier, inim, plmn, aort), CACNB3 (mai
multe esuturi), CACNB4 (creier, rinichi).
Subunitatea (CACNG) este situat n grosimea membranei. Ea are 32 kDa i poate exista n 8
variante notate CACNG1-8. Funcional, ea produce o cretere a influxului calcic. Subunitatea
CACNG1 este prezent n componena canalelor ionice din membranele neuronilor cerebrali, a
fibrelor musculare scheletice i n unele celule de la nivelul plmnilor. (8)
Canalele ionice de calciu voltaj-dependente (Cavs) sunt mari (n jur de 0.5 MDa),
multisubunitare, mecanisme macromoleculare ce controleaz intrarea calciului n celule ca rspuns la
schimbrile de potenial membranar. Aceste schimbri moleculare joac rolul de pivot n potenialele
de aciune cardiace, eliberarea neurotransmitorilor, contracia muscular, transcripia genelor calciudependente i transmiterea sinaptic. Cavs posed mecanism de autoreglare ce le permite s-i schimbe
comportamentul ca rspuns la activitatea, incluznd inactivarea voltaj-dependent, inactivrii calciudependente i facilitarea calciu-dependent. Aceste procese decurg din aciunea concentrat a
diferitelor domenii ale canalelor cu subuniti CaV i senzorul calmodulin pentru calciu solubil. Pn
de curnd nimic nu se tia despre structura Ca v la rezoluie nalt. Recentele lucrri cristalografice au
evideniat primele imagini cu privire la cadrul molecular Ca v i au stabilit o nou direcie spre un
mecanism detaliat de nelegere a funciei Cav.
Canalele ionice de calciu voltaj-dependente (Cavs) joac un rol unic n interaciunea dintre
semnalele electrice i chimice n sistemele biologice. Ca vs rspund de depolarizarea membranar prin
deschiderea porilor selectivi de calciu. Ptrunderea ionilor de calciu determin o continu schimbare
potenial i deoarece ionii de calciu acioneaz precum mesageri chimici, pot determina cascade de
semnalizare intracelular. Ca una dintre principalele surse de calciu n celulele excitabile, Ca vs sunt
sub o presiune intens pentru a controla influxul de calciu i a detecta i rspunde la schimbrile n
concentraia intracelular de calciu.
Trei procese intrinseci bine caracterizate ce regleaz Cavs: VDI (inactivarea voltaj-dependent),
CDI (inactivarea calciu-dependent) i CDF (facilitarea calciu-dependent). VDI i CDI ajut n
terminarea influxului de calciu. CDI i CDF acioneaz amndou ntr-o modalitate ce poate fi
considerat ca memoria de scurt durat molecular, ca i canale ce au fost deja deschise ceea ce le
schimb proprietile inactivatorii sau sunt mai uor de deschis pentru stimulrile ulterioare. n ciuda
amplei caracterizri funcionale, doar n ultimii trei ani structura molecular ce st la baza VDI, CDI i
CDF a nceput s fie cunoscut. n timp ce Ca vs sunt inte majore pentru medicamente ce trateaz
hipertensiunea, aritmia i durerea, nelegerea arhitecturii canalelor n detaliu atomic are implicaii ce
continu mult dincolo de tiina de baz. (10)
n funcie de valoarea prag a potenialului de aciune ce le deschide, canalele ionice pentru calciu
voltaj-dependente se clasific n urmtoarele subtipuri:
Tip L (Long lasting) sunt canale de calciu care se deschid la valori mari ale potenialului
de depolarizare i conin n structura lor subunitile: 1C, 1D, 1F sau 1S, 2, 3a.
Aceste canale sunt blocate de verapamil i diltiazem. Activarea acestor canale determin o
depolarizare puternic. Ele sunt situate n muchiul scheletic ( 1S), n creier (1D), n miocard
(1C), esutul neuroendocrin (1D), retin (1F). Datorit sensibilitii lor specifice la
dihidropiridin (compus organic sintetic), canale calcice de tip L mai sunt denumite i canale
sau receptori dihidropiridin-sensibile (DHP-sensibile). Ele sunt formate dintr-o subunitate 1
3

(pe care se afl i site-ul pentru DHP), o subunitate 2, una i alta . Prin cuplarea lor cu
receptorii- canal ryanodinici (RyR), canalele DHP-sensibile realizeaz la nivelul muchilor
cuplarea excitaiei cu contracia;
Tip N sunt canale de calciu a cror deschidere se realizeaz la parametri ai potenialului de
aciune situai undeva intermediar, ntre tipurile T i L. Sunt formate din subunitile 1B,
2, 1b, iar activarea lor determin o depolarizare puternic. Au rol n transmiterea
influxului nervos i sunt blocate de -conotoxina;
Tip P sunt canale de calciu formate din subunitile 1A, 2, 4a. Activarea lor determin o
depolarizare puternic. Concentraii crescute se ntlnesc n membranele celulelor Purkinje
din cerebel, n jonciunile neuromusculare i n membrana presinaptic neuronal, unde
intervin direct n eliberarea neurotransmitorilor;
Tip Q sunt canale de calciu voltaj-dependente alctuite din subunitile 1A, 2, 4a, iar
activarea lor determin o depolarizare puternic. Canalele de tip Q se gsesc n membranele
celulelor granulare din cerebel i membranele neuronilor piramidali din hipocamp. Ele
intervin n eliberarea neurotransmitorilor;
Tip R sunt canale de calciu formate din subunitile 1E, 2, 1b i intervin n eliberarea
neurotransmitorilor;
Tip T (transient) sunt canale de calciu care se deschid la depolarizri de valoare redus (65 mV) i sunt formate din subunitile 1G, 1H, 1I. Ele genereaz descrcri rapide ritmice
i sincrone, lor atribuindu-li-se complexul vrf-und cu origine n neuronii talamici din
absenele epileptice. Activitatea acestor canale este blocat de etosuximid, ionii de nichel i
veninul unui scorpion african (kurtoxin). (8)

CANALOPATII
Ataxiile
n ciuda progresului nregistrat la baza geneticii pentru Ataxia episodic tip 2, multe ntrebri
rmn fr rspuns. Din punctul de vedere al mecanismului, natura paroxismal a simptomelor
neurologice ce survin n urma mutaiilor la CACNA1A rmn un mister. n plus, dac baza fiziologic
a modului n care atacurile sunt precipitate de stres i sunt ntradevr uurate de acetazolamide rmn
fr rspuns. Aceasta permite studiul asupra modului n care variaia genetic a genelor canalelor
ionice de calciu afecteaz proprietile biofizice ale Cav2 n mediul fiziologic, mai ales n transmiterea
sinaptic i depolarizarea dendritic. O recent introspecie n aceast abordare a venit de la Heeroma
i colegii, care au demonstrat c mutaia Kv1 n Ataxia episodic tip 1 exercit diferite efecte n escitare
(reobaz) i transmiterea sinaptic cnd se exprim la nivel neuronal. Dei lanul poliglutaminic n
Ataxia spinocerebeloas tip 6 e considerat un ctig toxic al funciei, rolurile exacte ale alternan ei de
mbinri lungi i scurte ale CACNA1A n celulele Purkinje necesit o definire. Aceasta poate duce la o
mai bun nelegere asupra modului n care CAG-ul mrit se repet n rezultatele asupra Ataxiei
spinocerebeloas tip 6. nelegerea modului n care acest fenotip se asociaz cu diferite roluri ale
canalelor Cav2 poate fi un pas important n descifrarea patologiei moleculare a convulsiilor i ataxiilor.
Secvena direct a CACNA1A la un numr de pacieni cu Ataxie episodic tip 2 de cele mai
multe ori d gre n identificarea cauzalitii mutaiei. Cu toate acestea, n anul trecut s-a asistat la un
pas nainte n nelegerea acestei afeciuni. Veneziano i colegii au identificat noi 5 i 3 regiuni n
gena CACNA1A, incluznd regiunea promotoare a genei i un nou exon 48 final, ambele mutaii
caracteristice n Ataxiile episodice.

Fig. 2. Mutaii ale CACNA1A

Ataxia episodic de tip 2 este o afeciune cu transmitere autosomal-dominant care datorit

deleiilor crescute n CACNA1A nu pot produce transcripii funcionale. Este posibil s poat reduce
densitatea canalelor n circuitele cerebrale (posibil n celulele Purkinje, unde aceste canale au dovedit a
juca un rol central) ceea ce este suficient pentru a provoca episoadele ataxice. n timp ce punctele ce
evideniaz Cav2 ca responsabil de mecanismul Ataxiei episodice tip2 cresc, disfuncia canalelor
ionice pentru calciu ar putea s nu fie la baza Ataxiei spinocerebeloase tip 6. Recent s-a sugerat c
disfuncia cerebral relaionat cu repetiia poliglutaminei n aceast afeciune ar putea avea la baz
activarea aberant a 1,4,5-trifosfat receptorilor din celulele Purkinje. Ataxia spinocerebeloas tip 6
poate rezulta din urma abundenei de canale P/Q n celulele Purkinje, dect datorit unei propriet i
specific a canalelor. (7)
Ataxia episodic tip 2
Este o afeciune ereditar cu transmitere autosomal-dominant, datorat anomaliilor genelor
CACNA1A (locus cromozomial 19p13) sau CACNB4 (locus 2q22-q23), ambele gene codnd
subuniti ale canalelor pentru calciu voltaj-dependente. Astfel, anomaliile genei CACNA1A determin
(dup Jen i colab., 2001) una din urmtoarele trei substituii aminoacidice din molecula subunit ii 1:
R1281X, E1406C, R1549X. Oricare din aceste modificri duc la formarea de subuniti 1 anormale i
deci, la asamblri de canale calcice nonfuncionale. Boala debuteaz n copilrie sau adolescen i se
caracterizeaz prin prezena crizelor paroxistice ataxice, vertije i greuri (uneori vrsturi) ce survin
ctre sfritul zilei i care dureaz cteva ore. Atacurile se pot nsoi de dizartrie, diplopie, tinitus,
distonie muscular, hemiplegie i cefalee. Aproape 50% din pacieni se plng de migrene. Tot acest
cortegiu semiologic apare o dat sau de dou ori pe an, ns atacurile pot surveni i de 3-4 ori pe
sptmn. Atacurile ataxice sunt declanate de stress, eforturi fizice sau/i intelectuale prelungite,
cafea, alcool, fenitoin. Ameliorarea se obine prin administrarea de acetazolamid (Ederen). ntre crize,
cel mai adesea, pacienii sunt asimptomatici, dar cu timpul pot prezenta fenomene neurologice de tipul
nistagmusului. Aspectele neuroimagistice de tipul rezonanei magnetice nucleare (MRI) relev o
atrofie a vermisului cerebelos, iar spectroscopia magnetic nuclear (MSI) evideniaz modificri ale
pH-ului neuronilor cerebeloi. Analiza secvenial a genelor CACNA1A i CACNB4 este astzi
posibil numai n centrele de cercetare. Deosebirea de ataxia episodic tip 1, care este dat de anomalii
ale canalelor pentru potasiu voltaj-dependente, este destul de dificil.

Ataxia cerebelar progresiv

Este numit i ataxia spino-cerebelar tip 6.Ea face parte dintr-un grup de boli care cuprinde
astzi 16 tipuri de astfel de ataxii. Tipul 6 de ataxie spinocerebelar este datorat anomaliilor subunit ii
1A a canalelor ionice pentru calciu voltaj-dependente. Boala apare n perioada adult a vieii i const
n instalarea lent i progresiv a unei ataxii cu dizartrie i nistagmus. Numeroase studii de neurohistopatologie (Subramony i colab., 1996; Gomez i colab., 1997; Sasaki i colab., 1998) au
demonstrat existena unei degenerri selective a celulelor Purkinje (uneori asociat cu cea a celulelor
granulare). Transmiterea ereditar a anomaliei genetice este de tip dominant-autosomal. n mod
normal, gena CACNA1A (ce conine 47 exoni) codific subunitatea 1A care servete la formarea
canalului voltaj-dependent tip P/Q pentru calciu. Acest canal mai conine i subuniti de tip beta i
gamma. Subunitatea 1A este format din 2400 aminoacizi organizai n 4 domenii care centreaz
lumenul canalului. Fiecare domeniu este format din 6 TMS-uri. Canalele calcice tip P/Q sunt canale
care se activeaz numai la valori crescute ale voltajului potenialelor de aciune i au fost identificate n
neuroni, n special n cei granulari i celule Purkinje din cortexul cerebelar (Snutch i Reiner, 1992;
Hofmann i colab., 1994; Greenberg, 1997). Rolul principal al acestor canale const n facilitarea
transmiterii sinaptice. n ataxia cerebelar progresiv, Zhuchenko i colab. (1997), iar mai apoi
Matsuyama i colab, (1997) gsesc la nivelul genei CACNA1A de pe locusul 19p13 o repetare
exagerat (de 20-33 ori) a codonului CAG (normal exist 18 repetri ale codonului Citozin-AdeninGuanin). Aceast repetare se datoreaz faptului c la sfritul exonului 46 sunt anormal inserai un
grup de 5 nucleotide care elimin tripletul normal de stop codon de pe catena 3 a AND-ului i
introduce un numr de 237 noi nucleotide (inclusiv repetiia CAG). Tripletul (codonul) CAG codeaz
glutamina care, atunci cnd este n exces, perturb ntreaga activitate a canalului ionic pentru calciu
voltaj-dependent. Prelungirea anormal a deschiderii canalelor calcice determin la nivelul acestor
neuroni un influx calcic prelungit, fapt care epuizeaz n timp capacitile adaptative ale neuronilor
interesai i, n consecin, sunt activate fenomenele specifice apoptozei neuronale.
Debutul este plasat cu cca. 12 ani anterior instalrii tabloului clinic complet al bolii i const n
mers instabil, nesigur, cu frecvente mpleticiri (mpiedicri). Dizartria este frust i episodic la
nceput, fiind adesea confundat cu ceea din etilismul cronic. Ataxia cerebeloas progresiv poate
debuta ca o ataxie episodic tip 2. n perioada de stare, tabloul clinic al bolii este reprezentat de ataxie
cerebeloas cu tremor intenional, incoordonarea membrelor superioare i inferioare, dizartrie.
Diplopia i dificultile de fixare a obiectelor aflate n micare sunt prezente la 50% din cazuri, iar
nistagmusul la 30% dintre ei. Un procent de 25% din bolnavi prezint blefarospasm i distonie
muscular, ca semne ale afectrii ganglionilor bazali. Demena se instaleaz progresiv la 10% din
pacienii cu acest tip de canalopatie i reprezint un nou argument n favoarea existenei
psihocanalopatiilor. Bolnavii nu prezint tulburri de sensibilitate, nu au atrofii musculare, nu prezint
migrene i nici sindromul picioarelor nelinitite. Nu este afectat durata de via, ci doar calitatea
vieii acestor bolnavi. Tratamentul bolii este, deocamdat, doar unul suportiv i se rezum la asigurarea
unor condiii speciale de ngrijire igieno-dietetic, reeducarea i exersarea vorbirii, combaterea
obezitii, ncurajarea micrilor .a. Este foarte posibil ca ntr-un viitor foarte apropiat aceti bolnavi
s poat beneficia de terapiile cu proteine antisens, care sunt structuri capabile s interacioneze i
chiar s corecteze anomaliile genetice de la nivelul ADN-ului. (8)
Canalele ionice de Ca2+ de tip P/Q cu subunitatea 1 (CACN1A4) pe cromozomul 19p13 este un
locus cu o predispoziie promitoare pentru schizofrenie. Mutaiile n CACN1A4 cauzeaz Migrena
hemiplegic i Ataxia episodic. Expansiunea n repetarea codonului 3' CAG cauzeaz Ataxia
spinocerebeloas tip 6. Instabilitatea oarecelui cu fenotip mutant relev o form uoar de epilepsie.
Acestea sunt condiiile neurologice care sunt n comun cu schizofrenia. Zona 19p13 este apropiat de
alte regiuni genomice de interes n genetica schizofreniei. Din aceast cauz s-a realizat un studiu de
asociere a repetrii CAG-ului i schizofrenia utiliznd 225 scoieni schizofrenici i 198 mostre scoiene
de control. Repetarea nu a fost asociat cu afeciunea (P=0.72) i nici schizofrenicii nu avea alele cu
mult mai lungi dect cele de control (P=0.45). Astfel s-a demonstrat c Ataxia spinocerebeloas tip 6
nu este asociat cu schizofrenia. (2)

Paralizia periodic hipokaliemic tip 1

Este o afeciune cu transmitere ereditar. Cel mai frecvvent mecanism al bolii are la baz lezarea
structurii i funciilor canalelor pentru calciu voltaj-dependente. Mai rar, boala poate apare i ca urmare
a afectrii canalelor pentru sodiu voltaj-dependente (gena SCN4A), a celor pentru potasiu (gena
KCNE3), dar i n situaia unor non-canalopatii precum tireotoxicoza i acidoza renal prin disfunc ii
ale tubilor distali.
n cazul afectrii canalelor pentru calciu, acestea sunt de tip L i sunt formate din complexul
CACNA1S. Aa cum am specificat deja, gena CACNA1S se afl pe bra ul lung al cromozomului 1
(1q31). Transmiterea bolii este dominant-autosomal, iar mutaiile genetice pot fi localizate la mai
multe nivele, toate ns substituind arginina de la nivelul senzorului voltaic (S4): Arg1086Cys;
Arg1239His; Arg1239Gly. Afectarea structurii canalului determin o ntrziere a nchiderii canalelor
pentru calciu i, deci, influx calcic crescut urmat de depolarizare membranar prelungit. Clinic,
simptomatologia este declanat de eforturile fizice mari, frigul sau mesele bogate n carbohidrai,
evenimente de obicei petrecute n ziua precedent atacurilor. Atacurile de flaciditate muscular cu
mialgii sunt localizate la nivelul centurilor pelvin i scapular, survenind cu precdere matinal i
avnd durat variabil de la cteva ore la cteva zile. Potasiul seric scade la valori sub 2 mEq/l, iar
creatinkinaza (CK) crete datorit proceselor rabdomiolitice. Testul de provocare (glucoz + insulin)
este pozitiv. Acetazolamida amelioreaz boala doar la 60% din cazuri. (8)
n urma unei cercetri vaste n legtur cu linkage-ul paraliziei periodic hipokaliemic tip 1
(HypoPP), o boal ce afecteaz musculatura cu o motenire autosomal dominant a cromozomului
1q31-32 i a segregrii cu gena ce codific canalul de calciu de tip L/ receptorul DHP al subunitii 1
a fost raportat. (Fontaine i colab., 1994). Aici v vom arta haplotipuri extinse a familiei mare
HypoPP care a facut posibil detecia genei. Succesiunea de ADNc sintetizat din ARN-ul izolat din
probele de muchi a doi membri ai familiei afectate, au evideniat o tranziie a nucleotidei 3716 de la G
la A. Aceast schimbare de baz prevede o substituie a argininei 1239, localizat n segmentul IV S4
(senzor voltaic) al canalului de proteine, cu histidina. Restricionnd analiza fragmentar, mutaia a
fost detectat n ADN-ul genomic al tuturor membrilor afectai din familie. Culturile de miofilamente
recoltate din muchii afectai au dezvluit de asemenea mutaia ce sugera exprimarea unui canal ionic
pentru calciu de tip L mutant/receptori DHP. nregistrrile celulare efectuate pe 20 de astfel de
miofilamente au artat o reducere a receptorilor DHP sensibili, uor activnd i inactivnd densitatea
componentei actuale de tip L cu 30% fa de valorile normale. O activare i inactivare rapid a
componentei curente (de tip trei), care difer de tipul T curent, a sporit. Concluzionm c HypoPP este
o boal a muchilor scheletici cu receptori DHP. Mutaia n repetate rnduri a structurii IV a proteinei
poate avea un efect similar cu medicamentele care regleaz activitatea canalului prin legarea de acesta.
(4)

Sindromul miasteniform Lambert-Eaton

Este o afeciune autoimun, descris nc din 1965, care se asociaz foarte frecvent cu
neoplasmul bronhopulmonar sau cu diabetul zaharat de tip I. Studii recente au artat c n aceast
maladie, anticorpii, reprezentai de imunoglobulinele G (IgG), seleag de domeniile II i IV ale
subunitii alfa1, iniiind o ntreag cascad de evenimente imunologice. Astfel, sunt eliminate de la
nivelul membranelor presinaptice colinergice majoritatea canalelor de calciu voltaj-dependente, fapt ce
atrage dup sine scderea considerabil a cantitilor de acetilcolin din fanta sinaptic joncional
neuro-muscular (fenomen cunoscut sub numele de bloc presinaptic). Simptomul dominant este
reprezentat de astenia musculaturii proximale a membrelor, n absena interesrii nervilor motori
bulbari. Testul serologic (ce utilizeaz 125-lodina i conotoxina) relev prezena auto-anticorpilor
pentru canalele ionice calcice voltaj-dependente. (8)
Sindromul miasteniform Lambert-Eaton ( SMLE ) este o afeciune neuromuscular n care
anticorpii inhib eliberarea acetilcolinei n fanta presinaptic. Anticorpii pentru canalele ionice de
calciu voltaj-dependente ( VGCC) de tip P/Q sunt detectai n 85% din cazuri de bolnavi cu SMLE. n
plus, anticorpii pentru synaptotagmin, un receptor acetilcolinic muscarinic de tip M1 i SOX1 sunt de
7

asemenea gsii n serul pacienilor suferinzi de SMLE. Sindromul miasteniform Lambert-Eaton este
strns legat de cancerul pulmonar al celulelor mici (SCLC) la 50-60% din pacieni. n cazul pacien ilor
care sufer de SCLC, cu anticorpi pentru canalele ionice de calciu voltaj-dependente, s-au raportat
pronosticuri favorabile. n contrast cu Sindromul miasteniform Lambert-Eaton paraneoplatic, alte
forme ale Sindromului miasteniform Lambert-Eaton ar putea avea aspectul imunitar deoarece n urma
asocierilor stabilite ntre antigena uman leucocitar i istoricul altor familii de tulburri imunitare n
aceste condiii. Trsturile clinice ale sindromului miasteniform Lambert-Eaton includ slbiciune
proximal, areflexie, ptoza, ataxie cerebeloas i disfuncie autonom. Descoperirile n urma examinrii
electrofiziologice arat c aceast afeciune autoimun e caracterizat de poteniale de aciune
musculare compuse, cu o amplitudine sczut i creterea repetitiv a stimulrii nervoase la o rat
ridicat. nlturarea tumorii este tratamentul primar pentru aceast afeciune. Eficacitatea tratamentului
cu 3,4-diaminopiridin a fost de asemenea stabilit. Pacienii care sufer de Sindromul miasteniform
Lambert-Eaton necesit un tratament imunoterapeutic cu schimbarea plasmei i administrarea unor
doze crescute de imunoglobuline i prednisolon. (9)

Sindroamele hipertermice maligne tip 3 i tip 5 (MHS3 i MHS5)

Sunt dou afeciuni datorate anomaliilor genelor amplasate la nivelul genobandei 7q21 i
respectiv 1q23, care codific informaia pentru canalele ionice CACNL2A i respectiv CACNA1S.
Ca i n celelalte tipuri de MHS, tabloul clinic al bolii este dominat de triada: afectare muscular,
hiperactivitate simpatic, febr. Muchii scheletici devin rapid rigizi, hipertoni, dureroi, alteori flasci.
Hiperactivitatea simpatic se exprim prin hiperventilaie, tahicardie, instabilitate hemodinamic.
Febra depete 39-40 C, iar cianoza tegumentelor este prezent la majoritatea bolnavilor.
Simptomele sunt declanate de o serie de factori precum: anestezicele generale (inhalanii tip halotan
.a.), succinilcolina, eforturi fizice mari n medii supranclzite, neuroleptice, alcool, infecii. Biopsia
muscular evideniaz leziuni de rhabdomioliz. Analizele de laborator confirm fenomenele de
hipercatabolism prin accelerarea metabolismului bazal, creterea CO2 plasmatic i acidoza lactic.
Rhabdomioliza este semnalat de creterea creatinkinazei (CK) i potasemiei, mioglobinuriei i
alterarea probelor renale (insuficien renal acut).
Tratamentul trebuie s fie deosebit de prompt i energic nc din primele momente ale
confirmrii diagnosticului i const n meninerea debitului urinar la 2 ml/kg corp/h cu ajutorul
soluiilor perfuzabile alcaline, antialgice, oxigenoterapie. Se vor evita: preparatele calcice, antagonitii
calciului, beta blocantele.

Migrena hemiplegic familial tip 1

Este o boal n care este afectat gena CACNA1A. Aceast gen este situat pe locus-ul 19p13 i
codific sinteza subunitii 1A a canalului ionic pentru calciu voltaj-dependent (de tip P/Q). Boala are
transmitere ereditar, dar se descriu i cazuri sporadice (cca. 20%). Clinic, se caracterizeaz prin crize
de cefalee precedate de aur. Aura este de tipul hemiparezei, dar se poate manifesta i ca
hemianestezie, ca tulburri vizuale (hemianopsie, scotoame, diplopie) sau chiar sub forma unei disfazii
pasagere. Nu de puine ori manifestrile aurale sunt greit etichetate ca manifestri histrionice. Crizele
cefalagice care urmeaz aurei sunt de intensitate medie sau sever i nu depesc 24 ore. Sunt autori
care descriu intracritic fenomene ce afecteaz n grade variabile cmpul contiinei i care pot merge
pn la com (Terwindt i colab., 1996). Intercritic se pot decela simptome de tipul nistagmusului
sau/i ataxiei cerebeloase. Identic cu aceast afeciune este migrena hemiplegic familial tip 2 n care
leziunea intereseaz gena ATP1A2 (care codific o parte din structura pompei Na +/K+ ATPdependent). Faptul c aceast veritabil canalopatie poate afecta n grade variabile unul din sectoarele
eseniale ale psihismului uman, respectiv starea de contien a individului, reprezint n opinia noastr
un puternic argument al implicrii canalelor ionice pentru calciu voltaj-dependente n determinismul
psihopatologic. (8)
8

Fig. 3. Mutaii ale

secvenei 1A de tip P/Q

Migrena hemiplegic familial tip 1 (FHM1) provine din mutaia survenit n codarea 1A,
subunitatea formatoare de pori a canalelor ionice de calciu de tip P/Q. Natura disfunciunii canalului
este fundamental n relaie cu boala, dei nu este nc neleas. Am studiat modul n care mutaia
predominant a Migrenei hemiplegice familial tip 1, o substituie a treoninei n poziia metioninei
666, afecteaz att curentul ionic ct i cel voltaj-dependent n relaie cu activarea canalului, o trstur
neexplorat n trecut a canalelor de tip P/Q. Curentul din ntreaga celul a fost msurat n HEK293,
celulele exprimnd fie canale ce conineau wild-type (WT), fie TM 1A. Fluxul de calciu a fost
semnificant mai redus n celulele ce emit canale TM, dovedind o consecven a raportului anterior. n
contrast, suprafaa emisiei canalelor TM, msurat prin imunocolorare mpotriva unui epitop
extracelular, nu a sczut i petele vestice au demonstrat c subunitile TM 1A au fost exprimate la
lungimea total a proteinelor. Separarea curenilor WT i TM a fost izolat prin nlocuirea Ca2+ cu La3+,
un cation impermeabil. Separarea curenilor generat de canalele mutante a fost doar o treime din WT,
o deficien suficient pentru a fi luat n calcul pentru atenuarea observat n fluxul calciului; restul
curentului separat nu a fost diferit de cel cinetic sau voltaj-dependent. Astfel scderea influxului de
calciu vzut la canalele TM poate fi atribuit unui numr redus de canale disponibile s fie supuse
schimbrilor conformaionale voltaj-dependente survenite n schimbri conformaionale necesare
pentru deschiderea canalului, nu a mai puinor proteine exprimate la suprafaa celular a canalului.
Aceast identificare a unui defect intrinsec n canalele mutante ale Migrenei hemiplegice familial tip
1 ajut la explicarea impactului acestora asupra transmisiei neuronale n momentul n care ocup
sloturile specifice pentru canalele P/Q la terminaiile nervoase centrale. (1)

Epilepsia mioclonic juvenil (JME)

Este o form particular de epilepsie. JME este o afeciune neuropsihic ce poate avea ca
substrat fiziopatologic anomaliile mai multor gene responsabile de sinteza unor subuniti canaliculare
precum: CACNB4 (gena pentru canale ionice pentru calciu), GABRA1 (gena pentru canalele-receptori
GABA-A permeabile ionilor de clor) i gena CLCN2 (gena pentru canalele de clor). n cazul
anomaliilor canalelor pentru calciu voltaj-dependente defectul este situat la nivelul subunitii 4.
Canalul CACNB4 este format prin asocierea a 4 subuniti diferite: 1, 2, 3 i 4. Subunitatea 4 este
format din 520 aminoacizi i este codificat de gena CACNB4 situat pe braul lung al cromozomului
2q22-q31. Canalele de acest tip se afl localizate n creier i rinichi.
nlocuirea argininei din poziia 482 a subunitii beta4 determin modificarea proprietilor
canalului calcic, acesta nchizndu-se cu ntrziere. n felul acesta, influxul crescut de calciu determin
zdrruncinarea ntregului echilibru electrostatic al membranelor neuronale, fenomen ce st la baza
declanrii crizelor mioclonice.
9

Boala debuteaz n adolescen (mai rar n copilrie) i se manifest prin crize afebrile de
mioclonii repetitive bilaterale, asemntoare unor smucituri ale umerilor i membrelor superioare, fr
pierderea cunotinei. Electroencefalograma poate surprinde intercritic crize electrice de descrcri
de unde generalizate i sincrone cu frecvena de 3c/sec., n afara oricror crize clinice de epilepsie
generalizat (Escayg i colab., 2000).
Epilepsia generalizat idiopatic
Este o boal genetic n care este afectat gena CACNB4, care este responsabil de sinteza
subunitii beta4 a canalelor pentru calciu. Mutaia determin nlocuirea cisteinei din poziia 104 a
moleculei cu fenilalanina (Escayg i colab., 2000). Noua subunitate beta4, anormal, determin
modificri ale selectivitii i permeabilitii canalului pentru calciu, care au drept consecin creterea
excitabilitii membranelor neuronale. Crizele epileptice generalizate pot mbrca aspect tonico-clonic
sau cel ale absenelor petit mal, se nsoesc de fenomene ataxice i vertiginoase, iar interictal pot fi
surprinse scurte secuse de nistagmus sau episoade dizartrice. Interesant este remarca fcut de Inoue
i colab. (1992) care leag declanarea crizelor de efortul intelectual. Acetazolamida poate preveni i
rri frecvena crizelor. (8)
FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+, DEPENDENTE DE RECEPTORII
RYANODINICI I DE RECEPTORII INOZITOL 1,4,5-TRIFOSFAT (RIR-CaC)
STRUCTUR I FUNCII
Aceast familie de canale este format din dou subfamilii de canale ce sunt legate, fiecare, de
receptori diferii:
- subfamilia canalelor ionice legate de receptorii ryanodinici (RyR)
- subfamilia canalelor ionice legate de receptorii pentru IP3.
Ambele subfamilii de canale, ryanodinic-senzitive (RyR) i inositol 1,4,5-trifosfat-senzitive
(IP3), intervin n eliberarea ionilor de Ca2+ din depozitele de stocaj intracelulare.
RECEPTORII RYANODINICI
La mamifere, receptorii ryanodinici sunt expresia a trei gene diferite:

Fig. 4. Receptorul RyR

neuronilor din creier

gena
RyR-1,
care
codific receptorii RyR
n
special
din
membranele interne a
celulelor din muchii
striai, dar i neuronilor
cerebrali;
gena
RyR-2,
care
codific receptorii RyR
n
special
din
membranele interne a
fibrelor miocardice, dar
i
stomac,
celulele
epiteliale i neuronii
cerebrali;
gena
RyR-3,
care
codific receptorii RyR
din membranele interne a
muchilor netezi i a
10

Receptorul ryanodinic este practic un canal ionic responsabil de eliberarea calciului din
depozitele celulare. Numele receptorului este dat de sensibilitatea sa crescut la ryanodin, un
insecticid natural izolat din arbustul Ryania speciosa, care este originar din zona canalului Panama.
Receptorii RyR sunt localizai, cu precdere, la nivelul membranei reticulului endoplasmatic al
celulelor, dar au fost identificai i la nivelul membranei mitocondriilor celulelor miocardice, unde
reprezint principala cale de mbogire a citosolului intramitocondrial cu ioni de Ca 2+ (Beutner i
colab., 2001).
Structural, receptorii RyR sunt complexe homotetramerice, fiecare subunitate (cu greutate
molecular de peste 500.000 Da i 5.000 reziduuri aminoacil) fiind format din 4-10 TMS-uri cu
structur -helicoidal. Ambele catene terminale hidrofilice sunt situate n citoplasm, cea N-terminal
fiind mai mare dect cea C-terminal.
Funcional, receptorii RyR se afl ntr-o comuniune funcional cu familia canalelor ionice
pentru Ca2+ voltaj-dependente de tip L. La nivelul fibrelor musculare pe de o parte i la nivelul
neuronilor i fibrelor miocardice pe de alta, aceast comuniune funcional prezint cteva
Fig. 4. Receptorul
RyR aparte, impuse de funciile diferite pe care le realizeaz fiecare din aceste celule n
caracteristici
organism.
Astfel, n cazul fibrelor musculare striate receptorul RyR din membrana reticulului
sarcoplasmatic realizeaz legturi, att structurale ct i funcionale, cu canalele pentru calciu voltajdependente (numite i receptori DHP-sensibili). Receptorii RyR se leag de canalele DHP-sensibile
din membrana tubilor T prin intermediul unei poriuni numit picior (foot region). Piciorul
receptorului RyR este, aadar, cel care realizeaz legtura structural (fizic) dintre canalul-receptor
RyR i canalul pentru calciu voltaj-dependent. Prin intermediul piciorului, receptorii RyR formeaz
cu canalele pentru calciu voltaj-dependente i un cuplu funcional. Astfel, potenialul de aciune odat
ajuns la canalele pentru calciu voltaj-dependente din membrana tubilor T, determin deschiderea
canalelor-receptor RyR. Deschiderea canalelor receptor RyR este urmat de eliberarea ionilor de calciu
din reticulul endoplasmatic. mbogirea citoplasmei n ioni de calciu constituie una din etapele
eseniale ale cuplrii excitaiei cu contracia. Aa cum este bine cunoscut, la nivelul fibrei musculare
ionii de calciu se cupleaz la actin, declannd scurtareasarcomerelor (fenomen echivalent contraciei
musculare). Datorit legturilor structural-funcionale cu canalele pentru calciu voltaj-dependente
(receptori DHP-sensibili), receptorii RyR de la nivelul fibrelor musculare striate se mai numesc i
receptori RyR-voltaj-sensibili (sau receptori RyR voltaj-dependeni).
Astfel stau lucrurile n cazul neuronilor i a fibrelor miocardice. n acest caz, receptorii RyR se
cupleaz la canalele calcice voltaj-dependente numai sub aspect funcional nu i structural. Astfel,
s-a observat c receptorii RyR nu mai realizeaz un contact fizic direct cu canalele calcice voltajdependente, aa cum se ntmpla la nivelul fibrelor musculare striate. Legtura dintre canalul VIC
pentru calciu i RyR este de ordin pur funcional nu i structural. Astfel, potenialul de aciune
odat ajuns la canalele VIC pentru calciu determin un puternic prim-influx calcic. n acest prim-stadiu
ionii de calciu care mbogesc citoplasma neuronal provin din mediul extracelular. n al doilea
stadiu, ionii de calciu provenii din primul influx calcic determin deschiderea canalelor-receptori RyR
situate pe membranele depozitelor calcice. Deschiderea canalelor-receptor RyR determin eliberarea
ionilor de calciu din reticulul endoplasmatic. Se realizeaz n felul acesta o a doua mbog ire calcic a
citoplasmei neuronale, de intensitate mult mai puternic. Cu alte cuvinte, la nivelul neuronilor i la
nivelul fibrelor miocardice cele dou familii de canale (canalele VIC pentru calciu i canalele-receptor
RyR) au ca efect mbogirea (n dou etape consecutive) citoplasmei n ioni de calciu. Eliberai din
depozite, ionii de calciu particip la declanarea unui ir de reacii intracitoplasmatice mediate de mai
multe sisteme enzimatice. Datorit faptului c receptorul-canal RyR de la nivel neuronal i miocardic
se deschide numai dup cuplarea acestora cu ionii de calciu provenii din deschiderea canalelor calcice
VIC, el a mai fost numit i receptor RyR-calciu-sensibil (sau receptor RyR calciu-dependent).
Restabilirea concentraiilor citoplasmatice a ionilor de calciu se realizeaz prin intrarea n funcie
a pompelor de calciu ATP-dependente situate, att n membranele reticulului endoplasmatic, ct i n
membrana extern a celulelor.

11

RECEPTORII-CANAL IP3
Receptorii-canal IP3 sunt localizai n special la nivelul membranelor reticulului endoplasmatic
aparinnd neuronilor cerebrali i extracerebrali, dar i la nivelul unor tipuri de celule non-neuronale
din creier. Sub aspect structural, se aseamn mult cu receptorii RyR:
- sunt complexe homotetramerice, fiecare subunitate prezentnd o greutate de peste 300.000 Da
(cca. 2.700 reziduuri aminoacil);
- ambele domenii terminale ale canalului (-N i -C) se scald n citoplasm i sunt omoloage cu
cele ale receptorilor RyR;
- fiecare subunitate ce compune canalul-receptor IP3 posed ase TMS-uri i o posibil regiune a
porului situat ntre S5 i S6;
n plus, receptorii IP3 posed trei zone sau domenii funcionale:
- domeniile N-terminale de legare a IP3,
- domeniile centrale de reglare (fosforilare) i
- domeniile C-terminale ale canalului.
Acest tip de canale sunt activate de legarea inozitol 1,4,5-trifosfatului (IP 3). n urma acestei
cuplri are loc fosforilarea domeniilor centrale ale receptorului, urmat de deschiderea porii canalului.
Eliberarea ionilor de calciu din depozitele reticulului endoplasmatic determin activarea unui ntreg
lan de procese intracitoplasmatice.
Reacia de transport catalizat de membrii familiei RIR-CaC este redat n urmtoarea formul
general:
Ca2+ (extern sau sechestrat n depozite)
Ca2+ (n citoplasm)
Afectarea canalelor-receptor RyR permeabile ionilor de calciu determin hipertermia malign tip
1 i boala miezului central.
CANALOPATII

Sindromul hipertermic malign tip 1 (MHS1)

Face parte din grupul sindroamelor hipertermice maligne, afeciuni identice sub aspectul
exprimrii clinico-biologice, diferite ns ca mecanism fiziopatologic.
Toate cele 6 tipuri de sindroame hipertermice maligne sunt datorate unor anomalii genetice, cu
transmitere (obinuit) autosomal-dominant. Toate tipurile de MHS sunt declanate de o serie de
factori precum: anestezicele generale (inhalani, halotan .a.), succinilcolina, eforturi fizice mari n
medii supranclzite, neuroleptice, alcool, infecii. Tabloul lor clinic este dominat de triada: afectare
muscular, hiperactivitate simpatic, febr. Muchii scheletici devin rapid rigizi, hipertoni, dureroi,
altori flasci, biopsia evideniind leziuni de rhabdomioliz. Hiperactivitatea simpatic se exprim prin
hiperventilaie, tahicardie, instabilitate hemodinamic. Febra depete 39-40 C, iar cianoza
tegumentelor este prezent la majoritatea bolnavilor. Analizele de laborator confirm fenomenele de
hipercatabolism prin accelerarea metabolismului bazal, creterea CO2 plasmatic i acidoza lactic.
Rhabdomioliza este semnalat de creterea creatinkinazei (CK) i potasemiei, mioglobinuriei i
alterarea probelor renale (insuficien renal acut). Testul contraciei musculare dup administrarea de
halotan i cel la cofein sunt pozitive. Tratamentul trebuie s fie deosebit de prompt i energic nc din
primele momente ale confirmrii diagnosticului i const n meninerea debitului urinar la 2 ml/kg
corp/h cu ajutorul soluiilor perfuzabile alcaline, antialgice, oxigenoterapie. Se vor evita: preparatele
calcice, antagonitii calciului, beta blocantele.
Sindromul hipertermic malign tip 1 (MHS1) reprezint cca. 45% din totalitatea MHS. Este o
boal datorat anomaliilor structural-funcionale ale receptorului RyR. S-au identificat pn n prezent
peste 30 de anomalii punctiforme ale genelor ce codific receptorii RyR (n special deleii i mai pu in
mutaii). Deficiena receptorilor-canal RyR se manifest n plan funcional prin tendina lor crescut de
a elibera calciul din depozitele reticulului sarcoplasmatic. Acest lucru este posibil numai dac intervin
factorii declanatori deja enumerai. Odat ce condiiile declanatorii au fost mplinite, cascada
evenimentelor de la nivelul fibrelor musculare striate este urmtoarea:
12

1. eliberarea crescut de Ca2+ n citoplasm;

2. Ca2+ citosolic crescut determin contractilitate i hipermetabolism muscular;
3. epuizarea ATP-ului muscular (n procesul contraciei i n cele de rencrcare a
depozitelor de ctre pompele ionice pentru calciu) determin activarea cilor metabolismului
anaerob;
4. metabolismul anaerob este generator, printre altele, de acid lactic i CO2;
5. excesul de Ca2+ n citosoli n matricea mitocondrial, acidul lactic, CO2 i excesul termic
(rezultat al catabolismului accelerat) sunt principalii declanatori ai proceselor de
rhabdomioliz;
6. distrugerea fibrelor musculare determin creteri ale potasemiei i creatinkinazei serice,
apariia mioglobinuriei i blocajul funcional renal.
Aceast cascad de evenimente se realizeaz i n cazul celorlalte tipuri de sindroame
hipertermice maligne.
Boala miezului central
Numit i Central Core Disease (CCD) a fost descris n 1959 i poart aceast denumire datorit
aspectului histologic particular al preparatelor prelevate prin biopsie muscular. La bolnavii cu CCD,
zona central a unor fibre musculare striate prezint regiuni asemntoare unui pseudo-nucleu sau
miez lipsit de orice activitate metabolic. Fibrele musculare afectate au un numr redus de miofibrile
i mitocondrii, fapt ce explic deficitul energetic celular i randamentul mecanic redus al musculaturii
bolnavilor.
Scderea rapid a forei musculare intereseaz n special zona trunchiului, poriunile proximale
ale membrelor i mai rar faa i extremitile membrelor. Boala debuteaz nc din copilrie i const
n scderea forei musculare, care determin ntrzieri ale dezvoltrii motorii (statul n ezut, mersul
.a.), fr a afecta ns dezvoltarea psihic. Hiperlaxitatea articulaiilor oldurilor trebuie pus tot pe
seama tonusului sczut al musculaturii centurii pelviene. n acest stadiu CCD este uor confundat cu
distrofiile musculare. Interesant este faptul c 40% din cei atini de aceast boal nu prezint niciun
simptom clinic evident. Se descriu n literatur cazuri descoperite la vrste de peste 35 de ani, cnd
oboseala muscular la eforturi fizice minore i inabilitile lucrative simple, ce presupun participarea
sistemului muscular, apar n prim-planul manifestrilor clinice. Anomalia genetic este localizat la
nivelul genei RyR1, gen ce codific receptorul-canal RyR pentru fibrele musculare striate.

FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+ N RELAIE CU DEPOZITELE DE

Ca2+ (TRP-CC sau SOC)
Canalele ionice aparinnd familiei TRP-CC (Transient Receptor Potential Ca 2+ Channel) sunt
reprezentate de o multitudine de canale-senzori care rspund la temperatur, presiune, durere,
osmolaritate, stimuli gustativi, feromoni i ali stimuli (Clapham, 2003). Sunt amplasate n membrana
extern a celulelor i, spre deosebire de familiile anterior prezentate, sunt dotate cu proprieti
tranzitorii de receptori. Canalele acestei familii se deschid ca rspuns la invadarea citoplasmei de ctre
ionii de calciu provenii din depozitele reticulului endoplasmatic. Denumirea familiei de canale pentru
calciu n relaie cu depozitele calcice (Store-Operated Calcium Channel) sau SOC, provine tocmai de
la abilitatea acestor canale de a lucra
conjugat cu familia canalelor ionice
situate pe membranele depozitelor
intracelulare de calciu.

13

Fig. 5. Modelul molecular al

subunitii TRP

Proteinele din care sunt formate aceste canale au fost identificate pentru prima dat la nivelul
retinei musculiei Drosophila melanogaster i sunt reprezentate de TRP (Transient Receptor Potential)
i TRPL (Transient Receptor Potential-like). n afar de acestea dou i alte proteine pot forma canale
ionice de tip TRP-CC:
VR1 (vanilloid receptor subtype 1) sau TRPV1;
SIC (Stretch-inhibitable non-selective cation channel) i
EcaC (epithelial Ca2+ channel).
Dei s-au descris o multitudine de astfel de canale ionice, prototipurile acestor canale continu i
astzi s fie reprezentate de proteinele TRP i TRPL, (Montell and Rubin, 1989; Hardie and Minke,
1993).
Ca aciune fiziologic, toi membrii acestei familii de canale faciliteaz pasajul calciului din
spaiul extracelular n celul, ca rspuns la depleia calciului din depozitele intracelulare de calciu
(Claphman, 1996), mbogind astfel i mai mult citoplasma celular n ioni de calciu.
Cercetri recente au artat c prin facilitarea ptrunderea calciului n celul aceste canale au efect
agonist (stimulator) asupra produciei de inozitol-1,4,5 trifosfat (IP 3). n acest sens, s-a artat c un
membru al familiei TRP-CC, mai exact canalele ionice Htrp3 ale mamiferelor, formeaz complexe
foarte stabile cu receptorii pentru IP3. Aceast interaciune este imperios solicitat de receptorii IP3,
deoarece ei sunt cei care stimuleaz eliberarea calciului din depozitele reticulului endoplasmatic via
receptor Htrp3.
Doi dintre membrii canalelor TRP-CC, respectiv canalele VR1 i SIC, sunt permeabili nu numai
ionilor de calciu, ci i cationilor monovaleni (proteina VR1 este de cca. 10 ori mai permeabil ionilor
de calciu dect celor de sodiu sau potasiu).
Sub aspect structural, proteinele din structura familiei de canale ionice TRP-CC sunt dispuse n
aranjamente topologice oarecum asemntoare cu cele ntlnite la canalele aparinnd superfamiliei
VIC. Ele sunt formate din 700-800 (VR1, SIC, ECaC) sau 1300 (TRP) de reziduuri aminoaciclice.
Cele ase segmente transmembranare (TMS) ale fiecrei subuniti conin o bucl scurt hidrofobic
situat ntre segmentele S5 i S6 (regiunea H5). Aceast regiune, care reprezint zona porului, se
poate nfunda n membran, contribuind astfel la realizarea lumenului, necesar traversrii membranei
de ctre ionii de calciu (Hardie i Minke, 1993). Garcia-Martinez (2000) a observat c amplasarea unui
reziduu al acidului aspartic n regiunea P poate duce la formarea unui inel cu ncrctur negativ, inel
care modific tranzitor proprietile porului legate de selectivitate i permeabilitate.
Canalele formate din proteina VR1 formeaz homotetrameri ca i canalele VIC. Din aceast
cauz, o serie de cercetri au sugerat existena unei posibile origini comune ale membrilor familiei
TRP-CC cu cea a familiei VIC. ns, o similaritate a secvenialitii aminoacidice ntre membrii
familiei TRP-CC i cea VIC nu a putut fi dovedit pn la aceast or.
Aminoacizii catenei terminale ai proteinelor familiei TRP-CC conin o regiune foarte bogat n
prolin (prolin-rich region) i una sau mai multe domenii ankirinice, ns rolul acestora nu a putut fi
deocamdat descifrat.
Dup cum este cunoscut, excesul de calciu intracelular st la originea activrii mecanismelor
implicate n fenomenele de moarte celular programat (apoptoza). Excesul calcic determin activarea
capsaicinei, compus implicat n moartea celular. VR1 este receptorul pentru capsaicin. n ceea ce
privete proteina-canal VR1 trebuie subliniat faptul c nu toi cercettorii sunt de acord cu ncadrarea
acestor canale n familia TRP-CC, deoarece acestea prezint:
14

- sensibilitate la pH-ul acid;

- sensibilitate la temperaturi peste 42 C;
- servesc drept receptori pentru unii compui alcaloizi iritani (capsaicina) i pentru
resiniferatoxin;
- sunt reglai de bradikinin i prostaglandina E2.
Formula general a transportului realizat de familia canalelor TRP-CC este:
Ca2+ (extern)

Ca2+ (intern)
sau

2+

Cationi i Ca (extern)

Cationi+ i Ca2+ (intern)

Cu puin timp n urm, un membru al acestei familii de canale, denumit TRP-PLIK (1862
aminoacizi) a fost citat c ar putea fi implicat n reglarea diviziunii celulare (Runnels i colab., 2001).
Din punct de vedere fiziopatologic, membrii acestei familii de canale sunt implicate n
mecanismele intime ale unor boli. Melastatina, o protein ce formeaz canale ionice aparinnd TRPCC a fost de curnd asociat cu progresia tumorilor melanocitare, n timp ce o alt protein
canalicular, MTR1, a fost asociat cu sindromul Beckwith-Wiedemann (o predispoziie familial
pentru boli neoplazice).
O demonstraie edificatoare a importanei respectrii stricte a secvenialitii aminoacizilor din
structura proteinelor acestei familii de canale este cea oferit de canalele EcaC (Epithelial Ca 2+
Channel) de la nivelul rinichiului iepurelui. Normal, permeabilitatea acestor canale pentru ionii de Ca2+
sau Mg2+ este de 100 ori mai mare dect pentru ionii de Na 2+. Substituirea experimental a acidului
aspartic din poziia 542 a moleculei (D542A) determin formarea de canale EcaC non-funcionale i
apariia simptomelor de insuficien renal. Aadar, ca i n cazul altor canalopatii umane, i n cazul
animalelor substituirea unui singur reziduu aminoacidic poate bloca activitatea respectivului canal.

FAMILIA CANALELOR IONICE PENTRU Ca2+ MECANO-ACTIVATE FORMATE

DIN PROTEINA Mid1 (Mid1)
Proteina Mid1 codificat de gena MID1 a fost decelat la enzima de fermentaie Saccharomyces
cerevisiae. Localizarea canalului s-a fcut cu ajutorul tehnicilor imunohistochimice care au utilizat
anticorpi anti-Mid1, iar caracterizarea lor funcional s-a realizat graie tehnicii patch-clamp. Aceast
protein-canal din membrana fermentului mediaz influxul ionilor de Ca2+ dup stimularea sa
mecanic prin elongaie sau dilataie. Canalul este inhibat de gadolinium, un blocant al canalelor
cationice activate prin elongaie. Cafeina inhib, de asemenea, canalele Mid1 (William i colab.,
2003). Amiodarona faciliteaz ptrunderea calciului n celul. S-a observat c excesul calcic la S.
cerevisiae are un efect letal.
Ulterior, un homolog al proteinei Mid1 a fost izolat i din membranele celulelor eukariote,
respectiv din celulele ovariene ale hamsterului chinez. Astzi, se apreciaz c aceast familie de canale
reacioneaz la diveri stimuli mecanici i osmotici, cum ar fi:
- atingere (la animale canalele Mid1 intervine n realizarea funciei auditive);
- atingere, elongaie i gravitaie (la plante);
- osmolaritate (la microorganisme).
Numeroi factori exo-endogeni pot modula reactivitatea acestor canale. Astfel, la hamsterul
chinez influxul ionilor de Ca2+ prin canalele Mid1 este stimulat de prezena feromonilor (factori
externi) din timpul rutului. De asemenea, s-a constatat c o mutaie la nivelul genei MID1 determin
moartea microorganismului fermentativ S. cerevisiae, fapt explicat de lipsa total a ionilor de Ca 2+ din
citoplasma fermentului.
Din punct de vedere structural, configuraia primar a proteinei Mid1 este reprezentat de
nlnuirea celor 541 aminoacizi (61.574 Da), iar cea secundar de realizarea unui -helix dispus sub
forma unui singur TMS. Acesta din urm este format din reziduurile aminoacizilor de la poziia 7 la
15

poziia 23 (Paoletti i Chang, 2000). Catena terminal N- este mai scurt i se afl n citoplasm, iar
catena terminal C-, mult mai lung, se afl n spaiul pericelular. Aceasta din urm conine mai multe
site-uri pentru glicozilare. Un singur membru al acestei familii de canale ionice prezint o configuraie
mai aparte, i anume canalul de la nivelul membranei Saccharomyces pombe, format din 486
aminoacizi, care are dou TMS-uri n poziiile 12-32 i 405-485. (8)

BIBLIOGRAFIE
1. Barrett CF, Cao YQ, Tsien RW. Gating deficiency in a familial hemiplegic migraine type 1
mutant P/Q-type calcium channel. J Biol Chem. 2005 Jun 24; 280(25): 24064-71.

16

2. Breen G, Fox H, Glen I, Collier D, Shaw D, St Clair D. Association study of the CACN1A4
(SCA6) triplet repeat and schizophrenia. Psychiatr Genet. 1999 Jun; 9(2): 111-3.
3. Catterall WA. Structure and regulation of voltage-gated Ca 2+ channels. Annu Rev Cell Dev
Biol 2000; 16: 521-55.
4. Lehmann-Horn F, Sipos I, Jurkat-Rott K, Heine R, Brinkmeier H, Fontaine B, Kovacs L, Melzer
W. Altered calcium currents in human hypokalemic periodic paralysis myotubes expressing
mutant L-type calcium channels. Soc Gen Physiol Ser. 1995; 50: 101-13.
5. Mccarthy TV, Mackrill JJ. Unravelling calcium-release channel gating: clues from a hot
disease. Biochem. J. 2004; 380: e1-e3.
6. Putney Jr JW. The enigmatic TRPCs: multifunctional cation channels. TRENDS in Cell
Biology 2004; Vol. 14 No.6: 206-221.
7. Rajakulendran S, Schorge S, Kullmann DM, Hanna MG. Dysfunction of the Ca(V)2.1 calcium
channel in cerebellar ataxias. F1000 Biol Rep. 2010 Jan 18;2. pii: 4
8. Simionescu V, Simionescu R, Simionescu O. Canale ionice. Canalopatii. Psihocanalopatii.
Casa de editur Venus, 2005.
9. Suzuki S. Lambert-Eaton myasthenic syndrome (LEMS). Brain Nerve. 2010 Apr; 62(4): 41926.
10. Van Petegem F, Minor Jr DL. The structural biology of voltage-gated calcium channel
function and regulation. Biochemical Society Transactions 2006; 34: 887893.

17