Inmunoquimioluminicencia

Palabras clave: quimioluminiscencia, radioinmunoanlisis, anticuerpos

monoclonales, el RIA, inmunoradiometra, partculas superparamagnetica,
ensayo tipo sndwich, ensayo competitivo.

Keywords: chemiluminescence, radioimmunoassay, monoclonal antibodies,

the DIA, inmunoradiometra, superparamagnetic particles, sandwich assay,
competitive assay.

Resumen
Tcnica que permite analizar partculas en suspensin que se hacen fluir a
travs de un rayo de luz, las partculas interactan dispersando este haz de luz
y emitiendo fluorescencia, estas seales pticas son detectadas, transformadas
y almacenadas electrnicamente. Se define como la radiacin
electromagntica producida gracias a una reaccin qumica. Cuando esta
emisin proviene de organismos vivos o sistemas derivados de ellos, se
denomina bioluminiscencia. Ambos fenmenos son procesos luminiscentes que
se han identificado tradicionalmente mediante un prefijo que identifica la
fuente de energa responsable del inicio de la emisin de radiacin
electromagntica. Como la intensidad de emisin es funcin de la
concentracin de las especies qumicas implicadas en la reaccin QL, las
medidas de la intensidad de emisin pueden emplearse con fines analticos.
Uno de los equipos ms utilizados para esta tcnica es el luminometro Lumat
LB 9507 que es capaz de leer una longitud de onda que va desde 380 a 630
nm (siendo de 400 a 600 nm el rango ideal), este aparato contiene un software
que permite la obtencin directa de unidades relativas de luminiscencia, para
la fabricacin de sus estndares y controles utilizan un pptido de 47
aminocidos calibrado respecto una molcula intacta de procalcitonina. La
medida de la luz emitida por una reaccin qumica o bioqumica est
relacionada con la concentracin de las especies participantes: la produccin
total de luz est directamente relacionada con la cantidad de luz emitida y,
consecuentemente, es proporcional a la concentracin de la especie concreta.
Por esta razn, la medida de luz emitida es un indicador de la cantidad de
analito presente y al instrumento bsico que es capaz de realizar estas
medidas se le llama luminmetro. Una de las ventajas ms importantes de la
QL como tcnica analtica es la simplicidad de la instrumentacin, que incluye
como componentes principales: una clula de reaccin, un compartimento
cerrado a la luz, un dispositivo de inyeccin y mezcla de reactivos y/o de
muestra.

Abstract
The inmunochemiluminescence are techniques which can permit analyze
suspension of particles that are running across of a light ray, the particles are
having an interaction which makes dispersion in the light ray and emit
fluorescents, these optic signal are detecting, changing and storing
electronically. The inmunochemiluminescence is defining like electromagnetic
radiation making by a chemical reaction. When this emission comes from living
beings is naming biochemiluminescence. Both phenomenons are luminescent
process which is identifying by a prefix which identify the responsible energy
fountain of the beginning of the electromagnetic radiation emission, as the
intensity of the emission is a function of the concentration of the chemical
species are implicating in the QL reaction, so the measuring of the emission
could be used for analytics fines.
One of the equipment more useful for this technique is the Lumat luminometer
LB 9507 which can read a wave length from 380 to 630 nm, these instrument
have software, that software permit the direct obtaining of luminescence
relative unites, the standard is being made by a polypeptide of 47 amino acids,
these polypeptide was being calibrated by a procalcitonine molecule, the
measure of the light emission for a chemistry or biochemistry reaction is a
relation of the concentration of the participant species: the total light
production is directly relating with the quantitate of light emission and in
consequence is proportional of the concentration of analyte existent and the
instrument which can do these things is naming luminometer. One of the most
important advantages of the QL is the simplicity of the instrumentation that
includes these principal components: a reaction cell, a closed light
compartment, an injection device and a reagent mixing or a clinic shows
mixing.

Introduccin
La tcnica inmunolgica ocupa un
papel clave en el diagnstico, su
principal utilidad consiste en el
establecimiento
del
diagnstico
diferencial entre las anemias por
dficit de hierro y otras deficiencias
o padecimientos inmunolgicos.
Se han
hecho
varios
descubrimientos sobre las tcnicas
inmunolgicas, que son necesarias
para todos nosotros, la mayora de
estas van enfocadas a la luz, el tipo
de onda y la reaccin de las
hormonas y compuestos que estn

en nuestro cuerpo, ya que la

mayora tienen pigmentos que
reaccionan o generan algn tipo de
luminiscencia al contacto con la luz,
se enfocaron en estos mtodos, en
los cuales se encuentran:
Inmunoradiometria
Radioinmunoanalisis
Inmunoquimioluminicencia
Todos estos mtodos o al menos la
inmunoquimioluminicencia se han
incluido dentro de las laboratorios

clnicos, para los mismos anlisis

que se realizan ah.
La
marca
de
la
inmunoquimioluminicencia es una
sustancia quimioluminiscente. En
quimioluminiscencia, la emisin de
luz es causada por los productos de
una reaccin especfica qumica, en
la cual se involucran las siguientes
sustancias
segn
el
sistema
automatizado que sea utilizado:
ster de acridina, perxido-cido,
hidrxido
de
sodio,
fosfatasa
alcalina.
En el caso de esta reaccin el
agente quimioluminiscente es el
ster de acridina que es oxidado por
el perxido-cido y el hidrxido de
sodio.
La inmunoquimioluminicencia nos
sirve para la cuantificacin de
elementos encontrados en sangre y
otros lquidos corporales. Esta tiene
como trazador un ster de acridino
cuya
ruptura
produce
energa
lumnica cuantificable. EI objeto del
presente trabajo es la comparacin
de los resultados por el mtodo de
inmunoquimioluminiscencia, con los
obtenidos por otros dos mtodos
utilizados en el anlisis de los
mismo,
ya
mencionados
al
principio.
Todos estos mtodos se han
enfocado y realizado con el objetivo
de
hacer
ms
fciles
las
determinaciones en los laboratorios
clnicos.

Qu es Inmunologa?
La inmunologa es una rama amplia
de la biologa y de las ciencias
biomdicas que
se
ocupa
del
estudio del sistema inmunitario,
entendiendo como tal al conjunto
de rganos, tejidos y clulas que, en
los vertebrados,
tienen
como

funcin
reconocer
elementos
extraos o ajenos dando una
respuesta
(respuesta
inmunitaria).La ciencia trata, entre
otras cosas, el funcionamiento
fisiolgico del sistema inmunitario
tanto en estadios de salud como de
enfermedad; las alteraciones en las
funciones del sistema inmunitario
(enfermedades
auto
inmunitarias, hipersensibilidades, in
munodeficiencias, rechazo a los
trasplantes);
las
caractersticas
fsicas, qumicas y fisiolgicas de los
componentes
del
sistema
inmunitario in vitro, in situ, e in vivo.
La
inmunologa
tiene
varias
aplicaciones
en
numerosas
disciplinas cientficas,
El estudio de los componentes
celulares
y
moleculares
que
comprende el sistema inmunitario,
incluyendo
sus
funciones
e
interacciones, es el tema central de
la
inmunologa.
El
sistema
inmunitario ha sido dividido en un
ms primitivo sistema inmunitario
innato, y un sistema inmunitario
adaptativo o
adquirido
de
los
vertebrados; ste ltimo a su vez
est
dividido
en
sus
componentes humorales y celulares.
Inmunologa clnica
La inmunologa clnica es el estudio
de las enfermedades causadas por
los trastornos del sistema
inmunitario (fallo, accin anormal y
crecimiento maligno de los
elementos celulares del sistema).
Tambin involucra enfermedades de
otros sistemas, donde las reacciones
inmunitarias juegan un papel en los
rasgos clnicos y patolgicos.
Las enfermedades causadas por los

trastornos del sistema inmunitario

se dividen en dos amplias
categoras:

Inmunodeficiencia, en la cual
partes del sistema inmunitario fallan
en proveer una respuesta adecuada
(p. ej. en el sida).
Autoinmunidad, en la cual el
sistema inmunitario ataca las
clulas del propio organismo (p.
ej. lupus eritematoso
sistmico, artritis
reumatoide, enfermedad de
Hashimoto y miastenia gravis).
Otros desrdenes del sistema
inmunitario incluyen diferentes
grados dehipersensibilidad, en los
que el sistema responde
inapropiadamente a componentes
inofensivos (asma y otras alergias) o
responde con excesiva intensidad.
Inmunoterapia
El uso de los componentes del
sistema inmunitario en el
tratamiento a una enfermedad o
trastornos conocido como
inmunoterapia. La inmunoterapia se
usa en el contexto del tratamiento
de los cnceres junto con
la quimioterapia (drogas) y
la radioterapia (radiacin). Sin
embargo, la inmunoterapia se usa
frecuentemente en los pacientes
inmunosuprimidos (como los
enfermos de sida) y las personas
que sufren otras deficiencias
inmunitarias y enfermedades
autoinmunitarias.

Qu es
quimioluminiscencia?
La luminiscencia es definida como la
emisin de luz asociada con la
disipacin de energa con una

sustancia electrnicamente
excitada.
En quimioluminiscencia, la emisin
de luz es causada por
los productos de una reaccin
especfica qumica, en la cual se
involucran las siguientes sustancias
segn el sistema automatizado que
sea utilizado: ster de acridina,
perxido-cido, hidrxido de sodio,
fosfatasa alcalina. En el caso de
esta reaccin el agente
quimioluminiscente es el ster de
acridina que es oxidado por el
perxido-cido y el hidrxido de
sodio.
QUIMIOLUMINISCENCIA
(DIRECTA)
Emplea como fase slida, micro
partculas paramagnticas
recubiertas de anticuerpos
especficos contra la sustancia a
analizar y como marca el ster de
acridina, adems el sustrato es
oxidante utiliza catalizadores y es
necesaria la existencia de
cofactores.
QUIMIOLUMISCENCIA
AMPLIFICADA (INDIRECTA)
Esta quimioluminiscencia indirecta
reacciona por enzimas (fosfatasa
alcalina) o iones utiliza tambin
catalizadores y puede necesitar o no
cofactores y el sustrato es el ster
de fosfato.
VENTAJAS DE LA
QUIMIOLUMINISCENCIA
Alta sensibilidad (femtogramos
10"15g).
No emplea radiactividad.

No genera riesgo contaminante ni

ruido de fondo a la hora de efectuar
el proceso del anlisis de una
muestra, control o estndar.
Los resultados son rpidos
(generalmente a los 15 min).
Equipos automatizados de fcil
manejo.
APLICACIONES
Medicin de niveles de hormonas:
por ejemplo la medicin de niveles
de hormonas tiroideas o de
estrgenos Medicin de metabolitos
en suero cuya cantidad o presencia
son indicios de dao celular: Por
ejemplo la medicin de marcadores
biolgicos miocrdicos como las
troponinas Deteccin de virus: por
ejemplo de los causantes de
hepatitis y su individualizacin
Deteccin del cncer o de clulas
tumorales: a travs de sus protenas
o marcadores tumorales, liberados
en el suero de los pacientes.
Detectar exposicin a agentes
infecciosos: por ejemplo de rubola
o toxoplasmosis en mujeres
embarazadas o en personas
inmunosuprimidas. Deteccin de
metabolitos indicadores de
problemas fisiolgicos, por su
presencia o cantidad excesiva, en la
sangre: por ejemplo en caso de
anemia se mide niveles de ferritina.
Medir niveles de medicamentos,
drogas objeto de abuso y toxinas en
sangre.

Reaccin de la
luminiscencia
La obtencin de luz a partir de una
reaccin qumica (exotrmica, es
decir, que desprende energa) es lo
que denominamos
quimioluminiscencia, y se produce
cuando los electrones de las capas
ms externas del tomo saltan a las
ms internas.
Dos compuestos qumicos
reaccionan para formar un
intermediario en estado excitado
(alta energa), que se desexcita
liberando parte de su energa como
fotones de luz.

A + B -> AB* -> Productos + Luz

Una de las sustancias ms

empleadas para realizar reacciones
luminiscentes es el luminol
(descubierto por Albrecht en 1928).
El luminol (C8H7N3O2) (3aminoftalhidracida) para exhibir su
luminiscencia debe ser excitado
mediante un agente oxidante.
La liberacin de un fotn de luz de
una molcula de luminol es un
proceso con varias etapas bastante
complejo. En una solucin bsica
(alcalina), el luminol est en
equilibrio con su anin, que lleva
una carga -2. El anin puede estar
en dos formas (o tautmeros), con
las dos cargas negativas
deslocalizadas en cualquiera de los

oxgenos (forma enol) o en los

nitrgenos

Los tautmeros son molculas con

la misma frmula qumica, pero
diferentes posiciones de los tomos
o de los enlaces. Los dos
tautmeros pueden interconvertirse;
las flechas curvadas muestran el
movimiento de electrones que
provoca el cambio entre las dos
formas.

El oxgeno molecular (O2) se

combina con la forma enol del anin
del luminol, oxidndolo en un
perxido cclico. El oxgeno
necesario se produce en una
reaccin redox (es decir cuando
ocurre una reaccin de reduccin y
oxidacin) participando el perxido
de hidrgeno (H2O2), hidrxido
potsico y (por ejemplo)
hexacianoferrato potsico (III)
(K3[Fe(CN)6], tambin conocido
como ferrocianuro potsico). El
hexacianoferrato (III) in
([Fe(CN)6]3->) es reducido a in
hexacianoferrato (II) ([Fe(CN)6]4-,
dando ferrocianuro potsico,
K4[Fe(CN)6]), mientras que dos
tomos de oxgeno del perxido de
hidrgeno se oxidan del estado de
oxidacin -1 al 0.

El perxido cclico se descompone

para dar 3-aminoftalato (cido 3-

amino-1,2-benenodicarboxlico) en
estado excitado, junto con una
molcula de nitrgeno (N2) Esta
reaccin de descomposicin se ve
favorecida porque la molcula de
perxido cclico es altamente
inestable, y la reaccin consiste en
romper algunos enlaces dbiles.
Tambin se ve favorecida por el
aumento de la entropa (desorden),
debido a la liberacin de una
molcula de gas. Cuando el 3aminoftalato excitado cae hasta el
estado fundamental, un fotn de luz
azul es liberado.

Reaccin de la
bioluminiscencia.
La luciferasa es una enzima que
convierte la energa de la reaccin
enzimtica de oxidacin de la
luciferina en luz. Esta se encuentra
comnmente
en
Bacterias
(photobacter,
phosphoreum,
photobacter fischeri, etc.) y en
lucirnagas (familia Lampyridae).

microanlisis para diagnstico de la

contaminacin del medio ambiente,
para control de calidad en productos
de la industria alimenticia, para la
deteccin de la cantidad de los
microorganismos
durante
los
procesos de fermentacin y en las
muestras biolgicas de laboratorios
de investigacin o clnicos.

La Bioluminiscencia es una forma de

quimioluminiscencia, o emisin de
luz en el curso de una reaccin
qumica. La bioqumica del proceso
est constituida por las reacciones
luciferinas- luciferasa, en las que
una
substancia
luminiscente
(luciferina) es oxidada por la accin
catalizadora
de
una
enzima
(luciferasa).
La luciferasa bacteriana cataliza la
reaccin
de
oxidacin
de
flavinmononucletido
reducido
(FMN-H2) y aldehdo de cadena
larga. En la reaccin de oxidacin de
luciferina de las lucirnagas el
componente
indispensable
del
sistema
bioluminiscente
es
el
adenosintrifosfato (ATP).
En comparacin con los procesos
quimioluminiscentes, los procesos
bioquimioluminiscentes
se
caracterizan por un alto rendimiento
cuntico.
Actualmente
el
sistema
bioluminiscente de las lucirnagas
se
utiliza
ampliamente
en

La enzima luciferasa de las

diferentes especies de lucirnagas
varia un poco en la estructura
primaria, en la dependencia al pH
del proceso catlico y en algunos
parmetros cinticos.
Luciferina + O2 (Luciferasa)
Oxiluciferina + Luz

Aplicaciones clnicas
de Luminiscencia
La quimioluminiscencia se origina
cuando se produce una especie
excitada como consecuencia de una
reaccin qumica que emite
radiacin electromagntica en la
zona UV .
Inmunoamilisis quimioluminiscemes
La utilizacion de los compuestos

Quimioluminiscentes como
marcadores en los inmunoanilisis es,
con mucho, Que mayor desarrollo y
aplicacion ha alcanzado en los
ltimos arios. La introducci6n del
radioinmunoamilisis (RIA) por
Berson y Yalow con su, ya hist6rico,
mtodo para insulina, abri6 una
nueva era en el campo de las
determinaciones analticas. As, en
los ltimos 20 aos, el RIA ha sido,
sin duda, el mtodo de eleccin
para la medida de hormonas y otras
muchas sustancias de interes
biologico, presentes a muy bajas
concentraciones, contribuyendo de
forma importante al progreso del
diagnostico y control teraputico.
Marcadares quimialuminiscentes
EI xito de un marcador no
isotpico, en cuanto a su aplicacin
practica, viene determinado,
fundamentalmente, por cuatro
factores:
1) La instrumentacin de
medida debe poseer mxima
sencillez (bajo costo), elevado
cociente serial/ruido de
fondo, sin interferencias
externas a la muestra y
mximo grado de
automatizacin.
2) Su lmite de deteccin debe
igualar o superar al de los
isotopes radiactivos.
3) Las caractersticas de su
emisin luminiscente deben
permitir tiempos cortos de
medida, con el fin de eliminar
el 'cuello de botella' del
procedimiento que comporta

la lentitud del contaje

radiactivo.
4) La qumica del propio marcaje
es fundamental para
conseguir marcajes simples,
de alta actividad especfica,
sin daar el compuesto
marcado ni su
inmunorreactividad y para la
obtencin de antgenos o
anticuerpos marcados,
estables. Tambin hay que
tener en cuenta la posibilidad
de que el propio marcador
vari alguna de sus
caractersticas de emisin
durante el proceso de
marcaje o cuando el antgeno
marcado se une al
anticuerpo.
Otra aplicacin son:
Inmunoensayos basados en la
medida de molculas fluorescentes
Los inmunoensayos estan
basados en el empleo de
anticuerpos para la determinacin
de analitos
Los anticuerpos son obtenidos a
partir de un producto con estructura
similar llamado hapteno e inoculado
a un animal de experimentacin, se
separa y purifica
. A continuacin se efectua una
derivatizacin con un reactivo
fluorescente llamado marcador.
El antigeno es atrapado por el
anticuerpo al ponerse en contacto y
se mide la fluorescencia del par
antigenoanticuerpo

 Se relaciona la intensidad de
fluorescencia con la concentracin
del antigeno, puesto que la relacin
antigeno-anticuerpo suele ser 1:1

Prueba E.L.I.S.A
La prueba E.L.I.Z.A ( Enzime Linked
Immnuno Sorbent Assay) en 1960
Rosalyn Yalow y Salomon Berson
desarrollaron los radioensayos.

Definicin.
Es una tcnica de inmunoensayo en
la cual un antgeno inmovilizado se
detecta mediante un anticuerpo
enlazado a una enzima capaz de
generar un producto detectable,
como cambio de color o algn otro
tipo; en ocasiones, con el fin de
reducir los costos del ensayo, nos
encontramos con que existe un
anticuerpo primario que reconoce al
antgeno y que a su vez es
reconocido por un anticuerpo
secundario que lleva enlazado la
enzima anteriormente mencionada.
La aparicin de colorantes permite
medir indirectamente mediante
espectrofotometra el antgeno en la
muestra.
Tipos de ensayos en la prueba
ELISA

ELISA directo: (ensayo

ELISA simple de dos capas).
Las placas ELISA se preparan
recubriendo los pocillos con
las soluciones en las que se
sospecha se encuentra el
antgeno. Se incuban con
anticuerpos marcados.
Indican la presencia de
antgeno en la solucin

analizada. Es necesario incluir

controles negativos que sern
muestras del mismo tipo que
las analizadas (sangre,
orina...), pero en las que se
tenga la certeza de la
ausencia del antgeno
buscado. Asimismo se
incluyen controles positivos
(soluciones donde se
encuentra el antgeno
buscado).
ELISA indirecto: emplea dos
anticuerpos: uno primario
contra el antgeno y uno
secundario marcado contra el
primario. La deteccin tiene
mayor sensibilidad por
presentar una amplificacin
de seal debida a la unin de
dos o ms anticuerpos
secundarios por cada
primario. Es el ensayo ms
popular, como lo es la
inmunofluorescencia
indirecta, pues un mismo
secundario marcado y un
mismo sistema enzimtico
permiten cuantificar una gran
variedad de antgenos; por
eso es un mtodo ms
polivalente y barato, aunque
se pierda algo de precisin
por tener un eslabn ms con
respecto al mtodo directo.
La dilucin de la solucin que
contiene el anticuerpo
primario. ELISA indirecto es el
mtodo de eleccin para
detectar la presencia de
anticuerpos sricos contra el
virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH), agente
causante del sndrome de
inmunodeficiencia adquirida
(SIDA). Segn esta tcnica,
protenas recombinantes de

la envoltura y el ncleo del

VIH se absorben como
antgenos en fase slida a los
pocillos. Las personas
afectadas de VIH producen
anticuerpos sricos contra
eptopos en estas protenas
vricas. En general, el ELISA
indirecto permite detectar
anticuepos sricos contra VIH
desde las primeras seis
semanas de una infeccin.
Elisa Snadwich: Se trata de
un ensayo muy empleado en
el que se recubre el pocillo
con un primer anticuerpo
anti-antgeno. Despus de
lavar el exceso de anticuerpo,
se aplica la muestra problema
en la que se encuentra el
antgeno, que ser retenido
en el pocillo al ser reconocido
por el primer anticuerpo.
Despus de un segundo
lavado que elimina el
material no retenido, se
aplica una solucin con un
segundo anticuerpo antiantgeno marcado. As, pues,
cada molcula de antgeno
estar unida a un anticuerpo
en la base que lo retiene y un
segundo anticuerpo, al
menos, que lo marca. Este
ensayo tiene una gran
especificidad y sensibilidad
debido a la amplificacin de
seal que permite el segundo
anticuerpo.

Ventajas de la prueba
ELISA

Poca cantidad de suero

problema

Las enzimas son de menor

costo y seguras para el
operador

Automatizacin

Existe una automatizacin en

la hora de hacer el anlisis

Las aplicaciones en el rea mdica

para
la
identificacin
de
anticuerpos-antgenos son en:

Enfermedades producidas por

bacterias
Brucella
Mycobacterium
tuberculosis
Salmonelas
Enfermedades producidas por
virus
Rotavirus
Enfermedad
de
Newcstle
Artritis vrica
Peste porcina clsica
Enfermedades producidas por
parsitos
Toxoplasmosis
Toxocara canis
Hormonas
Progesterona
Hormonas tiroideas
Testosterona
Cuantificacin
de
inmunoglobulinas
Ig A
Ig G

Conclusin

PALABRAS CLAVE
QUIMIOLUMINISCENCIA: Es la produccin de luz a partir de una reaccin
qumica. Dos compuestos qumicos reaccionan para formar un intermediario en
estado excitado (alta energa), que se desexcita liberando parte de su energa
como fotones de luz.
RADIOINMUNOANALISIS: Es una tcnica inmunolgica propuesta en 1959
por Yallow y Berson, que tiene una gran aplicacin en clnica.
Permite la cuantificacin exacta de compuestos biolgicos presentes en el
organismo en concentraciones tan bajas como ng/ml (nanogramo= 10 -9 g) o
incluso de pg/ml (picogramo= 10 -12 g), incluso hacerlo en mezclas con enormes
cantidades y diversidad de materiales extraos, por lo que no es necesario
purificar previamente la muestra.
ANTICUERPOS MONOCLONALES: Los anticuerpos monoclonales (en
acrnimo mAB, de la frase en ingles con idntico significado que en espaol:
monoclonal antibody), son anticuerpos idnticos porque son producidos por un
solo tipo de clula del sistema inmune, es decir, todos los clones proceden de
una sola clula madre. Es posible producir anticuerpos monoclonales que se
unan especficamente con cualquier molcula con carcter antignico. Este
fenmeno es de gran utilidad en bioqumica, biologa molecular y medicina.
EL RIA: El RIA es una tcnica analtica de referencia cuya calidad, en general,
an no ha sido superada por ninguna otra. Se puede decir que cualquier otra
es comparada con los resultados obtenidos por el RIA. Posteriormente aquellas
solamente se introducen en el mercado cuando sus parmetros de calidad se
acercan a los determinados por RIA. El RIA es una tcnica tradicional en la
mayora de los hospitales, con una dotacin completa de recursos materiales y
humanos. Actualmente en general, los costos del RIA son inferiores a los de
otras tcnicas alternativas en las que hay que considerar, adems del precio
del reactivo propiamente dicho, otros costos adicionales por materiales
accesorios (calibradores, controles, cubetas, buffers, otros reactivos, etc.)
Inmunoradiometra: Ensayo para la determinacin cuantitativa in vitro de
hormonas.
Partculas superparamagnetica: Agentes de contraste en resonancia
magntica de imagen o como sistemas transportadores de frmacos, se
caracterizan por su paramagnetismo y su gran susceptibilidad magntica, con
una magnetizacin que carece de histresis, lo que las hace ideales para
aplicaciones biomdicas.

Ensayo tipo sandwich: El ELISA tipo sndwich doble anticuerpo es el ejemplo

clsico de mtodos para la deteccin de antgenos, el primer anticuerpo
captura el antgeno de la muestra que es detectado a travs del conjugado
anticuerpo-enzima o amplificado con un conjugado dirigido contra el segundo
anticuerpo (sndwich doble anticuerpo modificado) u otros procedimientos.
Los ensayos sndwich doble antgeno, son usados para la deteccin de
anticuerpos y son muy tiles para la evaluacin de la respuesta inmune
inducida por vacunas; en estos ensayos, al igual que en los indirectos,
los antgenos capturan los anticuerpos, pero en esta ocasin en lugar de
un conjugado anti-inmunoglobulina-enzima, usamos antgeno-enzima, de
esta forma se alcanza la mxima sensibilidad y detectabilidad al no ser
necesario diluir las muestras; sin embargo, detectamos todas las clases
de inmunoglobulinas, lo que en ocasiones no es conveniente.
Los ensayos sndwich son ms apropiados para la automatizacin de los
sistemas ELISA, ya que puede disminuirse un paso de reaccin
aadiendo simultneamente muestras y conjugado, aunque hay que
prever las posibles interferencias del conjugado a elevadas
concentraciones de antgenos o anticuerpos en la muestra.
Ensayo competitivo: los anticuerpos o los antgenos son inmovilizados sobre
la fase slida y su unin con el conjugado antgeno-enzima o anticuerpoenzima, es inhibida por la presencia de analito no marcado en la muestra. Las
incubaciones entre muestras y conjugados pueden ser simultneas o
secuenciales. Es recomendada cuando se quieren detectar

BIBLIOGRAFIA
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190.149.209.249.18.14.31.7.101.130.5.96.239.189.84.105.207.149.67.244.139.118.72.210.254.
62.219.67.117.212.93.216.44.202.154.49.70.7.125.112.234.91.171.153.157.227.119.52.252.156
.29.134.245.181.168.32.97.73.244.68.16.228.146.146.146.87.214

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