Yessica Lorena Miranda Martinez- 1031152612

Facultad de ciencias Departamento de qumica

Laboratorio de principios de bioqumica
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Informe 2: fraccionamiento de tejidos en sus principales constituyentes:

lpidos y protenas

RESULTADOS:

Tabla 1. Pruebas Yema de huevo

caractersticas

CAMBIOS FSICOS Y

pruebas

PATRON

COLORACION

SAPONIFICABLE
SAPONIFICACIO
N

INSAPONIFICABLE

YEM
A
M2
FOSFATOS

La fraccin saponificable al
tocarla tena una
consistencia jabonosa por
lo que la prueba es
positiva
Despus de agregar agua
a la fraccin
insaponificable fue posible
observar dos fases, una en
la parte de arriba de color
amarillo y otra de color
blancuzco en la parte de
abajo
Al agregar los reactivos la
coloracin azul no fue
evidente de inmediato, sin
embargo al poner el tubo
en bao de mara por 5
min este se torn de un
color azul claro. Prueba
positiva

RESULTADO

SALKOWSKI

SAPONIFICACION

Para esta prueba se

presenta una reaccin
exotrmica de
calentamiento del tubo al
agregar el cido sulfrico
concentrado tanto en el
patrn como en la muestra.
El patrn presento un color
verde oliva fuerte y la
muestra un color verde
oliva tenue. Prueba
positiva

Se observaron las fases

formadas despus de estar
por 20min en agua tibia y
al filtrar por gaza se sinti
la consistencia jabonosa
del filtrado, por lo que la
prueba es positiva.

M3

FOSFATOS

El color azul caracterstico

de la prueba positiva de
fosfatos no fue evidente de
inmediato, sin embargo al
calentar por 5 min se
observ un precipitado de
color azul y la solucin
tambin tena un tono azul
claro. La prueba es
positiva

Tabla 2. Pruebas Clara de huevo.

CARACTERISTICAS
CAMBIOS FSICOS
Y
COLORACION

PRUEBAS

NINHIDRINA

CLARA

No se obtuvieron
resultados ya que al
parecer unos de los
reactivos no serva
por lo que el control
no presentaba la
coloracin esperada

MILLN

La muestra luego
de 2 min al bao de
mara presento un
precipitado de color
rojo. Prueba
positiva

BIURET

Despus de los 10
min la muestra tomo
un color violeta
claro. Lo que indica
una prueba
positiva

M4

XANTOPROTEICA

PATRON

REACCIONES:

La muestra se torn
de un color amarillo
oscuro. Prueba
positiva

RESULTADO

1. Saponificacin

2. Fosfatos

(NH4) Mo7O24 + PO43- (NH4) [PO4 (Mo12O36)] + Agente reductor

Azul de molibdeno

3. Millon

4. Ninhidrina

5. Biuret

6. Xantopro
teica

DISCUSION:

Para poder obtener los lpidos y protenas tanto de la clara como la yema de huevo, fueron
necesarias una serie de estrategias qumicas y mecnicas que permitiran su extraccin.
En primer lugar la centrifugacin de la Yema nos permiti obtener dos fracciones, la liquida
que contena compuestos solubles en agua como protenas, vitaminas hidrosolubles y
carbohidratos, y la slida en donde se encontraban los lpidos de inters. Sin embargo,

estos generalmente se encuentran enlazados a protenas y polisacridos, formando

complejos con diferente grado de estabilidad, fue por esto que para poder purificar estos
lpidos fue necesario usar un mtodo de extraccin que permitiera desnaturalizar o romper
estos complejos, en este caso se us una mezcla etanol-ter que permiti la liberacin de
los lpidos. Adems el uso posterior de la acetona ayudo a separar las lecitinas de esta
solucin ya que estas junto con las cefalinas y esfingolipidos son insolubles en acetona por
lo que quedaron como precipitado en la posterior centrifugacin.
Por otro lado para poder identificar la presencia de las protenas que se encuentran en la
albumina de la clara del huevo, era necesario desnaturalizar las mismas y para esto fue
necesario adicionar el cido actico que al disminuir el pH permiti junto con la baja
temperatura del bao de hielo desnaturalizar las protenas para su posterior estudio.
Ahora bien al tener aisladas las protenas y lpidos de inters, se realizaron las respectivas
pruebas y a pesar de que todas fueron positivas, los resultados a las pruebas de las
muestras en comparacin con los patrones en general eran ms tenues o vagos, es decir
los colores eran menos fuertes por lo que era posible confundirlos con pruebas negativas.
En primer lugar las pruebas para la identificacin de la presencia de lpidos (Tabla 1),
fueron todas positivas. La prueba de saponificacin fue una prueba de fcil comprobacin
ya que la consistencia jabonosa del residuo del filtrado permiti la confirmacin de la
presencia de lpidos que facilitaran la reaccin. Para el caso de la prueba de fosfatos, fue
posible ver el contraste del contenido lipdico tanto del sobrenadante (M2) como del
precipitado (M3) ya que la presencia de fosfolpidos en la muestra determina el resultado
de la prueba. Es as como se puede observar en la tabla que el contenido de fosfolpidos
del sobrenadante fue menor al contenido de fosfolpidos del precipitado, dando como
resultado una coloracin azul ms tenue. Por otro lado la prueba de colesterol, arrojo
resultados muy contrastantes entre el patrn y la muestra (patrn de color oscuro y
muestra color tenue) sin embargo esto se atribuye al hecho de que el patrn fuera una
concentracin pura de colesterol y la muestra presentara concentraciones mucho menores
de del mismo.
Por ltimo las pruebas para el reconocimiento de protenas en la albumina de huevo
tambin fueron todas positivas a excepcin de la prueba de Ninhidrina en la que
probablemente un reactivo no estaba cumpliendo su papel en la reaccin por lo que el
patrn no mostro la coloracin esperada. Sin embargo el resto de pruebas confirmaron la
presencia de las protenas en la muestra.

Conclusiones:

Los mtodos de extraccin de las protenas y lpidos de los tejidos son esenciales
para poder estudiar los mismos ya que estos se encuentran en complejos que no
permitiran su estudio. Tener en cuenta las diferentes solubilidades permitir elegir
los mejores mtodos de extraccin.

Las pruebas de anlisis cualitativo de protenas y lpidos permiten comprobar la

presencia o ausencia de estos dentro de un tejido determinado.