Megazym

e
ALMIDONES RESISTENTES
Ensayo y procedimiento
(100 ensayos por cada kit)
AOACC Mtodo 2002. 02
AACC Mtodo32-40.01

Conformado por: David Villaseor.

Introduccin:
Por definicin, almidn resistente (AR) o (RS) en ingls es esa porcin del
almidn que no se descompone por las enzimas humanas en el intestino
delgado. Entra en el intestino grueso donde se es enteramente o
parcialmente fermentado. AR es generalemente considerada como uno de
los componentes que conforman la fibra diettica total (TDF) sus siglas en
ingls.
La presencia de una fraccin resistente a la hidrlisis enzimtica de almidn
fue reconocida por Englyst et al. En 1982 durante su investigacin en la
medicin de polysaccharides sin almidn. Este trabajo fue ampliado por
Berry que desarroll un procedimiento para la medicin de RS incorporando
el tratamiento de la -amilasa/pululanasa
tratamiento empleado por
Englyst et al, pero omitiendo el paso inicial de calentamiento a 100 C, con
el fin de imitar ms de cerca las condiciones fisiolgicas. En estas
condiciones, el contenido de almidn resistente a medida de las muestras
era mucho ms alto. Este hallazgo fue confirmado posteriormente por
Englyst et al. A travs de estudios con sujetos sanos de la ileostoma.
Por principios de los 90 fue realizado completamente el significado
fisiolgico de la RS. Se desarrollaron varios mtodos nuevos/modificados
durante la investigacin Europea programa EURESTA. El mtodo Champ se
basaba en modificaciones en el mtodo de Berry2y le dio una medida

directa de RS. Bsicamente, se increment el tamao de muestra de 10 mg

a 100 mg, la muestra fue digerida nicamente con -amilasa pancretica
(no -amilasa pancretica ms pululanasa, usada por Englyst y Berry) y
realizaron incubaciones a pH 6.9 (pH 5.2 fueron utilizadas por Englyst y
Berry). Se realizaron determinaciones RS directamente en el sedimento.
Muir y O'Dea desarrollado un procedimiento en el que las muestras fueron
masticadas, tratados con pepsina y luego con una mezcla de -amilasa
pancretica y amiloglucosidasa en un bao de agua sacudiendo a pH 5,0,
37 C durante 15 horas. El residuo (contiene RS) se recuper por
centrifugacin, lavado con tampn de acetato por centrifugacin y la RS fue
digerido por una combinacin de calor, DMSO y tratamientos de -Amilasa
termoestable.
Actualmente, estos mtodos han sido modificados por Fausant et al, Goni et
al, Akerberg et al. y Champ et al. Estos cambios incluidas modificaciones en
las concentraciones de la enzima empleadas, tipos de enzimas utilizadas
(todos utilizaron -amilasa pancretica, pero pululanasa fue quitado y en
algunos casos, reemplazado por amiloglucosidasa), el tratamiento previo de
las muestras (masticacin), pH de incubacin y la adicin (o no) de etanol
despues de la incubacin con -amilasa. Todas estas modificaciones
tendrn algn efecto en el nivel determinado de RS.

En el desarrollo del actual mtodo modificado para la medicin de la RS,

nuestro objetivo es proporcionar un mtodo robusto y fiable (un poco mas
factible) refleja las condiciones reales, y que produjo cambios
fisiolgicamente significativos (ver tabla 1). Para hacer esto, nosotros
estudiamos el efecto de la concentracin de -amilasa pancretica, el pH de
la incubacin, la importancia de la inhibicin de la maltosa de la -amilasa y
la necesidad del uso o no de amiloglucosidasa, el efecto de la agitacin y la
agitacin en los valores determinados, y problemas en la recuperacin y
anlisis que contiene el residuo de almidn resistente.
El mtodo que hemos desarrollado, como se describe en este manual,
permite la medicin de almidn resistente, almidn soluble y contenido de
almidn total de muestras. Veinticuatro muestras pueden analizarse dentro
de un perodo de 24 horas. El procedimiento ha sido sometido a evaluacin
interlaboratorios (vase tabla 2) bajo los auspicios de la AOAC internacional
y AACC International y aceptado por ambas asociaciones (AOAC mtodo
oficial 2002.02; Mtodo AACC 32-40).
PRINCIPIO DEL MTODO ACTUAL:
Las muestras se incuban en bao de agua sacudiendo con -amilasa
pancretica y amiloglucosidasa (AMG) por 16 horas a 37 C, durante el cual
el almidn no resistente es solubilizado e hidrolizado a D-glucosa por la
accin combinada de las dos enzimas. La reaccin es terminada por la
adicin de un volumen igual de etanol o alcohol industrial (IMS, etanol
desnaturalizado) y el RS se recupera como en el residido de centrifugacin.
Despus esto se lava dos veces por suspensin acuosa IMS o etanol (50%
v/v), seguido de centrifugacin. Se extrae lquido libre por decantacin. RS
en el residuo precipitado se disuelven en 2 M KOH agitando vigorosamente

en un bao de agua helada sobre un agitador magntico. Esta solucin se

neutraliza con tampn de acetato y el almidn se hidroliza
cuantitativamente a glucosa con AMG. D-glucosa se mide con el reactivo de
glucosa oxidasa/peroxidasa (GOPOD), y esta es una medida de contenido de
RS en la muestra. El almidn no-resistente (almidn solubilizado) se
determina por juntar el sobrenadante original y los lavados, ajustar el
volumen a 100 mL y medir el contenido de D-glucosa con GOPOD.

APLICABILIDAD Y PRECISIN:
El mtodo es aplicable a muestras que contengan ms de 2% m/m de RS.
Con dichas muestras, se obtienen rutinariamente los errores estndar de
5%. Se obtienen mayores errores para muestras con RS contenidos < 2%
m/m.

KITS:
Kits adecuados para llevar a cabo 100 determinaciones de almidn
resistente contctese con Megazyme. Los kits contienen el ensayo completo
mtodo plus:

Botella 1:

Amiloglucosidasa [12 mL, 3300 U/mL de almidn soluble

(200 U/ml en p-nitrofenil -maltoside *)] a pH 4.5 y 40 C. AMG
solucin debe ser esencialmente libre de niveles detectables de
D-glucosa libre.
Caducidad > 3 aos a 4 C.

* Procedimiento del ensayo completo est disponible en

"www.megazyme.com".

Botella 2: -amilasa

pancretica

(pancreatina,

10

g,

Ceralpha

unidades/mg).
Durabilidad > 3 aos a-20 C.

Botella 3:

GOPOD reactivo tampn. Tampn (48 mL, pH 7.4), cido phidroxibenzoico y azida de sodio (0.4% w/v).
Durabilidad > 4 aos a 4 C.

Botella 4:

GOPOD reactivo enzimas. Glucosa oxidasa y peroxidasa y 4aminoantipirina. Polvo liofilizado.

Durabilidad > 5 aos a-20 C.

Botella 5: D-glucosa

solucin estndar (1,0 mg/mL, 5 mL) de cido

benzoico 0.2% (w/v).

Durabilidad > 5 aos a temperatura ambiente.

Botella 6: Control

de almidn resistente. Contenido de almidn resistente

indicada en la etiqueta.
Durabilidad > 5 aos a temperatura ambiente.

PREPARACIN DEL REACTIVO SOLUCIONES/SUSPENSIONES:

1.

Usar el contenido de la botella 1 (AMG; Solucin 1) segn lo provedo.

Esta solucin es viscosa y por lo tanto debe eliminarse con un
dispensador de desplazamiento positivo, por ejemplo, Eppendorf
Multipette con 5,0 mL Combitip (para dispensar alcuotas de 0,1
mL).
Durabilidad > 3 aos a 4 C.
Diluir AMG (300 U/mL). Diluir 2 mL de solucin concentrada de AMG
(1 botella) a 22 mL con el tampn de maleato de sodio de 0.1 M (0.1
M, pH 6.0; Reactivo 1; No se suministra). Se dividen en alcuotas de 5
mL y congelado en envases de polipropileno entre el uso de la tienda.
Estable a los ciclos repetidos de congelacin/descongelacin y
durante 5 aos a-20 C.

2.

Urgente antes del uso, suspender 1 gramo del contenido de la

botella 2 (-amilasa pancretica) en 100 mL de tampn de maleato
de sodio (100 mM, pH 6.0; Reactivo 1; No se suministra) y revuelve
durante 5 minutos aadir 1,0 mL de AMG (300 U/mL) diluir y mezcle
bien. Centrifugue a > 1.500 g por 10 min y decantar con cuidado la
solucin sobrenadante. Utilice esta solucin (solucin 2) en el da de
preparacin.

3.

diluir el contenido de la botella 3 (GOPOD reactivo tampn) a 1 L con

agua destilada (esto es solucin 3). Use inmediatamente.

Nota:
1.

si la solucin concentrada se almacena a-20 C, se formar cristales

de sal que deben disolverse completamente cuando este buffer se
diluye a 1 L con agua destilada.

2.

esta solucin concentrada contiene azida de sodio 0.4% (w/v). Esto es

un qumico venenoso y debe ser tratado como tal.

4.

Disolver el contenido de la botella 4 en 20 mL de solucin 3 y esto

Transferir cuantitativamente a la botella que contiene el resto de la
solucin 3. Cubrir la botella con papel de aluminio para proteger el
reactivo adjunto de luz. Esto es reactivo para la determinacin de
glucosa (GOPOD reactivo). Estable para ~ 3 meses a 2-5 C o > 12
meses a-20 C.
Si este reactivo debe almacenarse en estado congelado,
preferiblemente se deben dividir en partes alcuotas. No
congelar/descongelar ms de una vez.
Cuando el reactivo recin preparado puede ser rosa de color amarillo
o ligero. Se desarrollar un color rosa ms fuerte durante 2-3 meses a
4 C. La absorbancia de la solucin debe ser menos de 0.05 cuando
ley frente agua destilada.

5 & 6.
Utilice
suministradas.

el

contenido

de

las

botellas

como

las

Durabilidad > 5 aos a temperatura ambiente.

REACTIVOS (no suministrados en el kit):

Los reactivos deben ser grado de pureza analtica.
1.

Tampn de maleato sodio (100 mM, pH 6.0) mas cloruro de

clorhidrato de calcio y sodio azida de 5 mM (0.02% w/v).
Disolver 23,2 g de cido maleico (Sigma cat no. M-0375) en 1600 mL
de agua destilada y ajustar el pH a 6.0 con hidrxido de sodio de 4 M
(160 g/litro). Aadir 0,74 g de cloruro de calcio dihidratado
(CaCl2.2H2O) y 0,4 g de azida de sodio y disolver. Ajustar el volumen
a 2 L. estable durante 12 meses a 4 C.

2.

Tampn de acetato sodio (1,2 M, pH 3.8).

Aadir 69,6 mL de cido actico glacial (1,05 g/mL) a 800 mL de agua
destilada y ajustar a pH 3.8 uso de 4 M de hidrxido de sodio. Ajustar
el volumen a 1 L con agua destilada. Estable durante 12 meses a
temperatura ambiente.

3.

Tampn de acetato de sodio (100 mM, pH 4.5).

Aadir 5,8 mL de cido actico glacial a 900 mL de agua destilada y
ajustar a pH 4.5 con 4 M de hidrxido de sodio. Ajustar el volumen a 1
L
con
agua
destilada.
Durabilidad 2 meses a 4 C.

4.

Hidrxido de potasio en solucin (2 M).

Aadir 112,2 g KOH a 900 mL de agua desionizada y disolver por
agitacin. Ajustar el volumen a 1 tienda L. en un recipiente cerrado
hermticamente.
Durabilidad > 2 aos a temperatura ambiente.

5. Etanol en estado lquido (o IMS) (aprox. 50% v/v).

Agregar 500 mL de etanol (95% v/v o 99% v/v) o industrial
desnaturalizado que comprende (IMS; etanol desnaturalizado; ~
etanol 95% v/v ms metanol 5% v/v) en 500 mL de H2O. Guarde en
un frasco bien sellado. Estable por > 2 aos a temperatura ambiente.
Nota: Un conjunto de muestras de control que contiene los niveles RS desde
0,6 hasta 78% w/w est disponible desde Megazyme internacional Irlanda
(cat no. K-RSTCL).

EQUIPO (recomendado):

1.

pulido molino - centrfuga, equipado con 12 dientes rotor y un tamiz

de 1,0 mm o dispositivo similar. Alternativamente, puede utilizarse un
molino cicln para pequeas muestras.

2.
picadora - manual o elctrico, equipado con una pantalla de 4.5
milmetros.
3.

Banco de centrfuga - capaz de sostener 16 x 120 mm tubos de

ensayo de vidrio con calificacin de aproximadamente 1500 g (~
3.000 rpm).

4.

temblando bao de agua (Grant OLS 200) (Grant Instruments Ltd. de

Cambridge) (o similar) puso en marcha lineal a 100 revoluciones por
minuto en el dial (equivalente a una velocidad de batido de 200
golpes/min), un recorrido de 35 mm y 37 C.

5.

el agua del bao - capaz de mantener 50 + 0,1 C.

6.

agitador vrtex.

7.

agitador.

8.

barras de agitador magntico 5 x 15 milmetros.

9.

medidor de pH.

10.

stop-reloj/temporizador (digital).

11.

balanza analtica (correcto a 0,1 miligramos).

12.

espectrofotmetro - capaz de operar a 510 nm, preferiblemente

equipado con celda de flujo (10 mm de longitud de ruta).

13.

pipeta - capaz de entregar 100 L; con puntas desechables.

Alternativamente, puede utilizarse dispensador porttil motorizada.

14.

pipeta volumtricas - equipado con puntas 50 mL capaces de

entregar 2,0 mL, 3,0 y 4,0 mL.

15.

Corning tubos de cultivo - tapn de rosca, 16 x 125 mm [Fisher

Scientific gato no. TKV-173-030B (tubos); TKV-178-020V (caps)],
Fisher Scientific, interact@fisher.co.uk.

16.

vidrio tubos de ensayo - 16 x 100 mm, 14 mL de capacidad.

17.

plstico "lonchera", gran bao suficiente para sostener el estante del

prueba-tubo y servir como un agua helada (ver figura 1).

18.

termmetro - capaz de leer 37 + 0,1 C y 50 + 0,1 C.

19.
volumtricos matraces - 100 mL, 200 mL, 500 mL, 1 L y 2 L de
capacidad.

PREPARACIN DE LA MUESTRA:
Moler aproximadamente 50 g de muestra de grano o vegetal liofilizado o
producto alimenticio en el molino que pueda pasar un tamiz 1,0 mm.
Transferir todo el material a un tarro plstico de boca ancha y mezcle bien

por agitacin e inversin. Preparaciones de almidn industrial generalmente

se suministran como un polvo fino, as que no es necesaria la molienda.
Para muestras frescas (por ejemplo alubias, pltano, papas) pasar por una
peladora elctrica o a mano retirar su capa de 4.5 milmetros. Determinar el
contenido de humedad de muestras secas por AOAC mtodo 925.10 (15) y
de muestras frescas por liofilizacin seguido de horno secado segn AOAC
mtodo 925.10.

PROCEDIMIENTO del ensayo:

(a) Hidrlisis y solubilizacin del almidn no resistente.
i.

Pesar exactamente una muestra de mg 100 + 5 directamente en

cada tubo de tapn de rosca (tubo de cultivo Corning; 16 x 125 mm) y
golpee suavemente el tubo para asegurar que la muestra caiga a la
parte inferior.
NOTA: Para muestras hmedas tales como frijoles enlatados
picados o producto alimenticio, el tamao de la muestra debe ser
aproximadamente 0,5 g (pesado con precisin). Y el contenido de
humedad es generalmente 60-80%

II.

Aadir 4,0 mL de -amilasa pancretica (10 mg/mL) que contiene

AMG (3 U/mL) (solucin 2) a cada tubo.

III.

Tapar los tubos firmemente, mezclar en un vrtex y adjuntarlos

horizontalmente en un bao de agua con agitacin, alinear en la
direccin del movimiento (vea las figuras 2 y 3).

IV.

Incubar los tubos a 37 C con agitacin continua (200 golpes/min)

exactamente 16 hrs (Nota: para movimiento lineal, un ajuste de 100
en el bao de agua es equivalente a 200 golpes/min; 100 adelante y
reversa 100).

v.

Retirar los tubos del bao y quitar el exceso de agua superficial con
toalla de papel. Retire los tapones de tubo y tratar los contenidos con
4,0 mL de etanol (99% v/v) o IMS (99% v/v) con agitacin vigorosa en
un vrtex.

vi.
Centrifugar los tubos a 1.500 g (aprox. 3.000 rpm) durante 10
minutos (sin tapa).
VII.

Decantar cuidadosamente el sobrenadante y resuspender el pellet en

2 mL de etanol al 50% o el 50% IMS con agitacin vigorosa en un
vrtex. Aadir otros 6 mL de 50% IMS, mezclar los tubos y centrifugar
nuevamente a 1.500 g durante 10 minutos.

VIII. Decantar el sobrenadante y repetir una vez ms este paso suspensin

y centrifugacin.
IX.

Decantar el sobrenadante e invertir los tubos sobre un papel

absorbente para drenar el exceso de lquido.

(b) Medicin de almidn resistente.

i.

Aada un agitador magntico (5 x 15 mm) y 2 mL de 2M KOH a cada

tubo y resuspendidas pelotillas (y disolver la RS) removiendo durante
aprox. 20 min en un bao de hielo/agua sobre un agitador magntico
(Figura 1).

Nota:
1. no mezclar en un vrtex ya que puede causar el almidn
emulsionar.
Asegrese de que el contenido del tubo est agitando vigorosamente se
aade la solucin KOH. Esto evitar la formacin de un trozo de material del
almidn que luego sera difcil de disolver.
II.
Aada 8 mL de tampn de acetato de sodio de 1,2 M (pH 3.8) a cada
tubo con agitacin en el agitador magntico. Inmediatamente aadir
0,1 mL de AMG (solucin 1; 3300 U/mL), mezclar bien y colocar los
tubos en un bao de agua a 50 C.
III.
incubar los tubos durante 30 minutos con la mezcla intermitente en
un vrtex.
IV.

Para las muestras que contienen > 10% RS contenido;

Transferir el contenido del tubo cuantitativamente a un matraz
aforado de 100 mL (utilizando una botella de lavado de agua). Use un
imn externo para retener la barra agitadora en el tubo mientras la
solucin del tubo con el lavado de la botella de agua de lavado.
Ajustar a 100 mL con agua destilada y mezclar bien. Centrifugar una
parte alcuota de la solucin a 1.500 g durante 10 minutos.

v.

Para muestras que contienen < 10% RS contenido;

Directamente Centrifugar los tubos a 1.500 g durante 10 minutos (sin
dilucin). Para dichas muestras, el volumen final del tubo es
aproximadamente 10,3 mL (sin embargo, este volumen depender
sobre todo si se analizan las muestras hmedas, y espacio apropiado
para el volumen debe dejarse en los clculos).

vi.

transferir alcuotas de 0,1 mL (por duplicado) de la diluida (paso iv) o

los sobrenadantes sin diluir (paso v) en tubos de ensayo de vidrio (16
x 100 mm), aadir 3,0 mL de reactivo de GOPOD (solucin 4) e
incubar a 50 C durante 20 min.

VII.
medir la absorbancia de cada solucin a 510 nm contra el blanco del
reactivo.
Preparar soluciones en blanco reactivo mediante la mezcla de 0,1 mL
de tampn de acetato de sodio de 100 mM (pH 4.5) y 3.0 mL de
reactivo GOPOD.
Preparar normas D-glucosa (por cuadruplicado) mediante la mezcla
de 0,1 mL de D-glucosa (1 mg/mL) y 3.0 mL de reactivo GOPOD.

(c) medicin de almidn resistente-no (Solubilizado).

i.

combinar las soluciones sobrenadante obtenidas por centrifugacin

de la incubacin inicial (a) [vii] con los sobrenadantes obtenidos de

los siguientes dos lavados etanol de 50% [(a) viii y ix (a)] y ajuste el
volumen con tampn de acetato de sodio 100 mM (pH 4.5) en un
matraz aforado de 100 mL. Mezclar bien.
II.

III.
IV.

Incube alcuotas de 0,1 mL de esta solucin (por duplicado) con 10

L de la solucin diluida de AMG (300 U/mL) en 100 mM sodio
maleato de tampn (pH 6.0 por 20 min a 50 C.) Aadir 3,0 mL de
reactivo de GOPOD (solucin 4) e incubar los tubos por un adicional
20 min a 50 C.
medir la absorbancia a 510 nm contra un blanco del reactivo.
calcular el contenido de almidn no resistente (disolucin).
Contenido de almidn total es la suma de almidn resistente y el
almidn no resistente (disolucin).

IMAGEN
Figura 1.Arreglo del bao de agua helada sobre un agitador magntico para
el tratamiento de las muestras con 2 M KOH y disolucin de RS.

CLCULOS de almidn resistente a calcular, almidn no resistente

(disolucin) y contenido de almidn total (%, sobre una base de peso seco)
en muestras de ensayo de la siguiente manera: almidn resistente (g / 100g
de muestra) (las muestras que contienen > 10% RS): = E x F x 100/0.1 x
1/1000 x 100/W x 162/180 = E x F/W x 90.
Almidn resistente (g / 100g de muestra) (las muestras que contienen <
10% RS): = E x F x 10.3/0.1 x 1/1000 x 100/W x 162/180 = E x F/W x
9.27.
Almidn no-resistente (continuacin) (g / 100g de muestra): = E x F x
100/0.1 x 1/1000 x 100/W x 162/180 = E x F/W x 90.
Almidn total = almidn resistente + almidn no resistente.
donde: E = absorbancia (reaccin) leer contra el blanco del reactivo.
F = conversin de absorbancia a microgramos (la absorbancia obtenida por
100 g de d-glucosa en la reaccin de GOPOD est determinado y F = 100
(g de D-glucosa) dividido entre la absorbancia GOPOD para este 100 g de
D-glucosa. 100/0.1 = correccin de volumen (0,1 mL de 100 mL).
1/1000 = conversin de microgramos a miligramos.
W = peso seco de la muestra analizada "tal cual" peso x [(100-moisture
content)/100 =].
100/W = factor para presentar RS como un porcentaje del peso de la
muestra.
162/180 = factor de conversin de D-glucosa libre, segn lo determinado, a
anhydro-D-glucosa como ocurre en almidn.

10.3/0.1 = correccin de volumen (0,1 mL de 10,3 mL) para muestras que

contenan 0-10% RS donde no se diluye la solucin de incubacin y el
volumen final es ~ mL 10,3.
Cuando se analizan las muestras hmedas, este volumen ser mayor, y esto
debe permitir para que en los clculos.
Nota: Estos clculos pueden simplificarse utilizando Megazyme MegaCalcTM, descargable desde donde el producto aparece en el sitio web de
Megazyme (www.megazyme.com).
Referencias:
1. Englyst, H., Wiggins, H. L. & Cummins, J. H. (1982). Analyst, 107, 307-318.
2. Berry, C. S. (1986). J. Cereal Sci., 4, 301-314.
3. Englyst, H. N. & Cummins, J. H. (1985). Am. J. Clin. Nutr., 42, 778-787.
4. Englyst, H. N. & Cummins, J. H. (1986). Am. J. Clin. Nutr., 44, 42-50.
5. Englyst, H. N. & Cummins, J. H. (1987). Am. J. Clin. Nutr., 45, 423-431.
6. Englyst, H. N., Kingman, S. M. & Cummins, J. H. (1992). European J. Clin
Nutr., 46 (Suppl. 2), S33-S50.
7. Champ, M. (1992). Eur. J. Clin. Nutr., 46 (Suppl. 2), S51-S62.
8. Muir, J. G. & ODea, K. (1992). Am. J. Clin. Nutr., 56, 123-127.
9. Faisant, N., Planchot, V., Kozlowski, F., Pacouret, M. -P., Colonna, P. & Champ, M. (1995).
Sciences des Aliments, 15, 83-89.
10. Goni, I., Garcia-Diz, E., Manas, E. & Saura-Calixto, F. (1996). Fd. Chem.,
56, 445-449.
11. Akerberg, A. K. E., Liljberg, G. M., Granfeldt, Y. E., Drews, A. W. & Bjorck, M. E. (1998). Am.
Soc. Nutr. Sciences, 128, 651-660.
12. Champ, M., Martin, L., Noah, L. & Gratas, M. (1999). In Complex Carbohydrates in Foods
(S. S. Cho, L. Prosky & M. Dreher, Eds.),
pp. 169-187, Marcel Dekker, Inc., New York, USA.
13. McCleary, B. V. & Monaghan, D. A. (2002). J. AOAC International, 85, 665-675.
14. McCleary, B. V., McNally, M. & Rossiter, P. (2002). J. AOAC International, 85, 103-1111.
15. Official Methods of Analysis (2000). 17th Ed., AOAC INTERNATIONAL.
16. Champ, M., Kozlowski, F. & Lecannu, G. (2000). In Advanced Dietary Fibre Technology (B.
V. McCleary & L. Prosky, Eds.), pp 106-119. Blackwell Science Ltd., Oxford, UK.

IMAGEN
Bandas de goma alrededor de 4-6 tubos de cultivo evitar tubos resbalan
suelta
de
metales
muelles
resortes.
Figura 2. Accesorio de la cultura de Corning tubos a temblar bandeja en
Grant vista del bao (estrecha).
Direccin de movimiento de bandeja en bao de agua.
IMAGEN figura 3. Accesorio de la cultura de Corning tubos a temblar bandeja
en bao de agua sacudiendo Grant.
Tabla 1. Comparacin de los valores de RS obtenidos mediante varios
mtodos analticos in vitro a los resultados en vivo.
TABLA fuente RS (mtodo in vitro/resultados) una RS de almidn de patata
Englyst Faisant Champ McCleary Gonib (en vivio) almidn () 66,5 83.0 77.7
77.0-78,8 Amylomaize almidn 71,4 72,2 52,8 51.7-50.3 (nativo)
Amylomaize almidn nativo 30.5 36,4 29,6 42.0 37.8b 30,1 (retrogradado)
haba escamas 10,6 11,2 12,4 14,3 15,3 c 9-10.9 avenas 3.9 4,9 4.3 4,0 4,7
c 3.1-5.0 enlatados granos 17.1-17.1 16,5-16.5 ActiStard 63d - d 57 d 58,0
57 54 d a los valores se presentan como un porcentaje de la contenido de

almidn total de la muestra. Todos los datos excepto la de McCleary, Goni et

al (10) y los valores de ActiStarR, son de campen et al (16).
b de Goi et al (10).
c de Goi et al (10), clculo de RS como un porcentaje de almidn total,
asumiendo un contenido de almidn para copos de frijol del 40% y copos de
maz del 70% (basado en resultados en casa para materiales similares).
d. resultados amablemente proporcionados por Bernd Kettlitz, Cerestar,
Vilvoorde, Blgica, con excepcin de los valores por McCleary, que se
produjeron en la casa Los datos "Englyst" fue producidos por Englyst
servicios de hidratos de carbono; "Campen" de datos en los datos del INRA,
Nantes y "Goni" en Cerestar, Vilvoorde.
La tabla 2. Rendimiento de mtodo para la medicin de almidn resistente
por digestin enzimtica en muestras de almidn y materias vegetales
seleccionados (los resultados del estudio interlaboratorios AOAC/AACC).
Muestra es decir RSa, % no. de laboratorios b Sr SR RSDr, %, RSDR % rd Re
Horrat Hylon VII R (jamones) f 46,29 37(0) 1,91 3,87 4,12 8,37 5,34 10,84
pltano verde 3.72 43.56 36.1 1,39 3,69 3.18 2 35 8,47 3,88 10,34 3,74
papas nativas almidn 63.39 2,66 3.77 4,20 5,94 7,45 10,54 2.77
CrystaLeanR, 34 39,04 2.00 0,77 1,97 5.13 2,15 5,61 2.23 (jamones
retrogradado) ActiStarR, RS 48.28 36.1 1,12 2.81 2,32 5,83 3,14 7,87 2.61
rin frijoles (enlatados) 4.66 2 35 0,21 0,11 2,42 4,58 0.60 0,32 1,44
avenas 2.20 34 0.08 3.43 0,24 10,9 0.21 3.08 0,67 a calculado en "tal cual"
base ("tal cual" para el banano, frijoles y copos de maz medio en forma
liofilizada) b b = nmero de colaboradores labs (nmero de laboratorios de
valores atpicos) d r = 2,8 x e Sr. R = 2,8 x amilosa alta SR. f almidn de
maz.