Extração e Purificação de Corantes de Urucum PDF

Universidade Federal de Santa Catarina
Centro Tecnolgico
Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de
Alimentos
EXTRAO E PURIFICAO DE CORANTES DE

URUCUM
Dissertao submetida ao Programa de Ps-Graduao em Engenharia

Qumica do Centro Tecnolgico da Universidade Federal de Santa
Catarina para obteno do grau de Mestre em Engenharia Qumica
Ricardo Wissmann Alves
Florianpolis, fevereiro de 2001
Extrao e Purificao de Corantes de Uruciim

Por
Ricardo Wissmann Alves
Dissertao julgada para obteno do ttulo de Mestre em Engenharia Qumica, rea de

concentrao Desenvolvimento de Processos Qumicos e Biotecnolgicos e aprovada em
sua forma final pelo JPrograma de Ps-Graduao em Engenharia Qumica da Universidade
Federal de Santa CataSrina.
Banca Examinadora:
GueffiJJlson de Souza
rof/Dr. Hugo Moreira Soares
Prof. Dr2. Edna Regina Amante
Florianpolis, 19 de Fevereiro de 2001
" melhor acender uma pequena

vela do que blasfemar contra a
escurido"
Confcio
iv
AGRADECIMENTOS
Ao meu orientador, Prof. Dr. Antnio Augusto Ulson de Souza, pela sua
pacincia, incentivo, orientao e dedicao, e por acreditar que eu poderia realizar o
nosso trabalho. Tambm por sua amizade e pela oportunidade de crescimento atravs
dos conhecimentos mim passados.
Agradeo tambm minha co-orientadora, Prof Dra Selene Maria de Arruda

Guelli Ulson de Souza pelo auxlio, incentivo, fora e amizade e, pela preocupao com
meu bem-estar.
Aos professores Dra Edna Regina Amante e Dr. Hugo Soares pela participao
na banca examinadora, contribuindo para este trabalho.
Aos meus colegas do laboratrio - LABMASSA, Jaime Humberto Palacio

Revelo, Janaina Lisi Leite, Dbora Faria, Antnio Pedro Gomes Cardoso e Michael
Bechtold, pela amizade e auxlio e, por terem conseguido me aguentar por tanto tempo.
A minha amiga do LABSIN, Heloisa de Lima Brando pelo seu carinho e ateno.
Um agradecimento especial a Michael Bechtold que teve uma participao

especial na realizao deste trabalho.
Aos meus colegas de mestrado, Alexandra Fchter, Audrei Gimnez Baranano,

Cludia Terezinha Kniess, Cristiana Gomes de Oliveira, Jean Koepsel, Mrcio Jos
Rossi, Marcos Rabelo e Mires Pelisser, por terem me apoiado e auxiliado nas muitas
vezes que precisei e por sempre terem sido amigos.
s minhas grandes amigas, Cntia Marangoni, Cludia Terezinha Kniess,

Cristiana Gomes de Oliveira e Vivian Krauss, que sempre estiveram por perto para me
alegrar, dar carinho e me socorrer. Vocs fazem parte da minha famlia!
Em especial minha grande amiga Cristiana Gomes de Oliveira, que sempre

esteve presente em todos os momentos da minha vida nestes dois anos, com seu carinho,
alegria e conhecimento. E tambm pelo seu apoio, em tantos momentos difceis por que
passei. Tu s uma pessoa especial!
Ao meu grande amigo Valrio de Souza Michels, pela sua amizade, apoio e
incentivo.
Ao Departamento de Engenharia Qumica, em especial a coordenadoria de psgraduao pelo suporte e oportunidades do curso.
Aos professores do Departamento de Engenharia Qumica que contriburam para

o meu aprendizado e crescimento.
Ao secretrio da coordenadoria do CPGENQ, o amigo Edvilson da Silva, pela

sua amizade, ateno, preocupao e auxlio nos mais diversos problemas.
A Agncia FINEP/PADCT, que atravs do financiamento do projeto Purificao

do Corante de Urucum (Bixina) - Escala Laboratorial e Piloto - chamada 03-AMPE01/98-02/01-2, viabilizou os principais equipamentos utilizados no desenvolvimento
deste trabalho.
A CAPES, instituio oficial que outorgou a bolsa que permitiu o

desenvolvimento deste trabalho.
A todas as pessoas que de alguma maneira contriburam para a realizao deste

trabalho.
Aos meus pais, Jos Valdemar e Vanda, por terem sempre me incentivado a
estudar e ser uma pessoa ntegra, e, pelo apoio incondicional. Devo muito vocs. Aos
meus irmos Ruth e Alencar, que sempre torceram por mim.
A Deus, por ter me dado uma nova chance.
NDICE
LISTA DE TABELAS...................................................................................
LISTA DE FIGURAS....................................................................................
xii
SEMBOLOGIA...............................................................................................
xvi
LETRAS GREGAS.......................................................................................
xvii
RESUMO........................................................................................................xviii
ABSTRACT...................................................................................................
xix
CAPTULO 1 - INTRODUO.................................................................
CAPTULO 2 - REVISO BIBLIOGRFICA.........................................
2.1 - O Urucum..................................................................................
2.1.1- Variedades......................................................................
2.2 - Usos e Utilidades.......................................................................
2.2.1 - Extrato de Urucum.........................................................
2.3 - Propriedades dos Pigmentos....................................................
11
2.3.1- Estereoqumica...............................................................
15
2.3.2 - Degradao....................................................................
17
2.4 - Processos de Obteno de Corante de Urucum....................
18
2.4.1- Processos de Extrao Mecnica..................................
18
2.4.1.1 - Extrao por Atrito........................................
19
2.4.2 - Processos de Extrao com Solventes..........................
20
2.5 - Procedimentos Analticos Utilizados na Anlise da

Bixina/Norbixina.....................................................................
26
2.5.1- Mtodos Espectrofotomtricos....................................
26
2.5.2 - Cromatografa Lquida de Alta Eficincia (HPLC).....
30
2.5.3 - Cromatografa em Camada Delgada............................
31
viii
2.5.4 - Cromatografia em Papel...............................................
32
3 - MATERIAL E MTODOS...................................................................
33
3.1 - Sementes de Urucum...............................................................
33
3.2 - Padro de Bixina......................................................................
33
3.3 - Reagentes e Materiais Diversos..............................................
34
3.4 - Equipamentos...........................................................................
34
3.5 - Procedimento Experimental....................................................
35
3.5.1 - Extrao do Corante do Ariolo da Semente do

Urucum..........................................................................
35
3.5.1.1 - Extrao por Moinho de Bolas.......................
35
3.5.1.2 - Classificao Granulomtrica.........................
37
3.5.1.3 - Extrao por Agitao Mecnica....................
38
3.5.1.4 - Sedimentao do Concentrado de Urucum.....
40
3.5.2 - Projeto do Sedimentador................................................
41
3.5.3- Purificao da Bixina.....................................................
43
3.5.4- Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC).......
45
3.5.5 - Teor de Bixina nos Extratos...........................................
46
3.5.6 - Caracterizao do leo quanto aos cidos Graxos.......
47
3.5.7- Determinao de Bixina na Semente..............................
47
3.5.8 - Determinao de Norbixina na Semente........................
48
3.5.9 - Determinao de Umidade.............................................
49
3.5.10- Determinao de Cinzas...............................................
49
4 - RESULTADOS E DISCUSSO..............................................................
51
4.1 - Extrao Mecnica por Moinho de Bolas................................
51
4.2 - Extrao por Agitao Mecnica..............................................
63
4.2.1- Extrao Utilizando Agua...............................................
63
4.2.1.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum......
67
4 .2.2- Extrao Utilizando Etanol........... ..................................
70
4.2.2.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum......
74
4.2.3 - Anlise Comparativa dos Rendimentos Obtidos nos

Processos de Extrao Investigados................................
76
4.3 - Sedimentador Utilizando Etanol como Solvente....................
78
ix
4.4 - Sedimentador Utilizando gua como Solvente......................
79
4.5 - Anlise Espectrofotomtrica e Cromatogrfica - HPLC......
80
4.6 - Purificao da Bixina................................................................. 89

4.7 - Extrao do leo das Sementes................................................ 98
4.7.1 - Caracterizao do leo das Sementes............................. 100
5 - CONCLUSO E SUGESTES..............................................................102
- REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS...................................................107
ANEXOS
114
LISTA DE TABELAS
Tabela 1
- Resultados das Anlises Espectroscpicas UV/Visvel...................
Tabela 2
- Estrutura e Peso Molecular dos Pigmentos das Sementes do

Urucum..............................................................................................
Tabela 3
- Desenvolvimento Cronolgico........................................................
Tabela 4
- Valores de Rf e R Relativos ao Oil Yellow AB para a Bixina e
13
15
16
Compostos Relacionados.................................................................
32
Tabela 5
- Massa Obtida em Cada Frao Granulo mtrica..............................
53
Tabela 6
- Distribuio Percentual Mdia Mssica das Fraes Obtidas no

Peneiramento das Sementes A ..........................................................
Tabela 7
- Distribuio Percentual Mdia Mssica das Fraes Obtidas no

Peneiramento das Sementes B ..........................................................
Tabela
54
- Rendimento e Condies de Operao da Extrao de Corantes

de Urucum com gua......................................................................
Tabela 9
53
64
- Classificao Granulomtrica do Extrato de Urucum Extrado

com Agitao Mecnica Usando gua como Fase Lquida Sementes C.......................................................................................
Tabela 10
- Efeito do Tempo de Agitao das Sementes C na Extrao com

gua......................................................................................:...........
Tabela 11
68
- Rendimento e Condies de Operao da Extrao de Corantes

de Urucum com Etanol.....................................................................
Tabela 15
66
- Altura do Espessado em Funo do Tempo para Sedimentao

do Extrato de Urucum em gua......................................................
Tabela 14
66
- Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com

gua e Tempo de Agitao de 2 horas............................................
Tabela 13
66
- Efeito do Tempo de Infuso das Sementes C na Extrao com

gua e Tempo de Agitao de 2 horas............................................
Tabela 12
65
71
- Efeito do Tempo de Agitao das Sementes D na Extrao com

Etanol................................................................................................
72
Tabela 16-A - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes C na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 0,5 horas.......................................
73
xi
Tabela 16-B - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 0,5 horas.......................................
73
Tabela 16-C - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 2 horas..........................................
Tabela 17
73
- Altura do Espessado em Funo do Tempo para Sedimentao

do Extrato de Urucum em Etanol....................................................
74
Tabela 18
- Absorbncias Mximas dos Espectros das Figuras 34 a 38............
84
Tabela 19
- Comparativo dos Percentuais de Norbixina das Anlises

Cromatogrfcas e Espectrofotomtricas.........................................
Tabela 20
Tabela 21
89
- Parmetros do Processo de Extrao do leo das Sementes de

Urucum - Sementes A ......................................................................
99
- Composio em cidos Graxos do leo das Sementes..................
100
xii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1
- O Urucuzeiro com suas Cpsulas..................................................
Figura 2
- Cpsulas e Flores do Urucuzeiro...................................................
Figura 3a
- Corte Longitudinal de uma Cpsula de Urucum...........................
Figura 3b
- Cachopa de Cpsulas Secas de Urucum........................................
Figura 4
- Estrutura Molecular da Bixina......................................................
10
Figura 5
- Estrutura Molecular da Norbixina................................................
10
Figura
-Estrutura Qumica dos Pigmentos do Urucum, FRANCIS (1987)
14
Figura 7
- Estrutura Molecular da c/5 -bixina.................................................
16
Figura
- Estrutura do Pigmento Amarelo C 17 (C17H20 O4 )..........................
27
Figura 9a
- Representao da Vista Interna de um Moinho de Bolas

Carregado com Sementes de Urucum............................................
36
Figura 9b
- Vista Frontal do Moinho Fechado.................................................
36
Figura 10
- Classificador por Srie de Peneiras...............................................
37
Figura 11
- Agitador Mecnico........................................................................
39
Figura 12
- Ensaio de Sedimentao da Suspenso de Concentrado de

Urucum............................................. ;............................................
41
Figura 13
- Determinao Grfica dt C e u pelo Mtodo de Kynch................
43
Figura 14
- Equipamento Utilizado no Processo de Purificao do

Concentrado de Urucum.................................................................
Figura 15
- Concentrao de Norbixina nos Extratos de Urucum Obtidos

Mecanicamente..............................................................................
Figura 16
56
- Relao entre Tempo de Residncia das Sementes no Moinho de

Bolas e Distribuio Granulomtrica Mssica das Sementes B ....
Figura 18
55
- Relao entre Tempo de Residncia das Sementes no Moinho de

Bolas e Distribuio Granulomtrica Mssica das Sementes A ....
Figura 17
44
57
-Percentual de Norbixina em Relao Massa de Sementes em

Funo do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas (Sementes
A).....................................................................................................
Figura 19
58
- Percentual de Norbixina em Relao ao Percentual Mssico das

Fraes Granulomtricas em Funo do Tempo de Residncia no
Moinho de Bolas (Sementes A)......................................................
59
xiii
Figura 20
- Percentual de Norbixina em Relao Massa de Sementes em

Funo do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas (Sementes
B ) ...................................................................................................
Figura 21
59
- Percentual de Norbixina em Relao Massa de Sementes em

Funo do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas para cada
Faixa Granulomtrica (Sementes B) .............................................
Figura 22
60
- Distribuio Granulomtrica Percentual em Funo do

Percentual de Norbixina dos Extratos Obtidos por Extrao
Mecnica (Sementes A) por Tempo de Extrao...........................
Figura 23
61
- Distribuio Granulomtrica Percentual em Funo do

Percentual de Norbixina dos Extratos Obtidos por Extrao
Mecnica (Sementes B) por Tempo de Extrao...........................
Figura 24
- Concentrao de Norbixina nos Extratos de Urucum Extrados

com Agua - Sementes C................................................................
Figura 25
69
- Altura do Espessado de Concentrado de Urucum versus Tempo

do Ensaio - Infuso Prvia de 4 horas em Agua...........................
Figura 28a
69

do Ensaio 2.....................................................................................
Figura 27
65

do Ensaio 1.............................................................................. ......
Figura 26
62
70

do Ensaio 1....................................................................................
75
Figura 28b - Altura do Espessado de Concentrado de Urucum versus Tempo

do Ensaio 2....................................................................................
75
Figura 29
- Comparativo dos Percentuais de Norbixina nos Extratos.............
77
Figura 30
- Comparativo dos Percentuais de Rendimento de Extrao...........
77
Figura 31
- Espectro de Absoro do Padro de Bixina em Soluo de

NaOH 0, IN.....................................................................................
Figura 32
81
- Espectro de Absoro de Extrato Concentrado Proveniente da

Extrao das Sementes D com Etanol com Agitao de 30
Minutos...........................................................................................
81
xiv
Figura 33

Extrao das Sementes D com Agua com Infuso de 1 hora e
Agitao de 2 horas......................................................................
Figura 34
82

Extrao das Sementes C com Etanol com Infuso de 30 minutos
e Agitao de 30 minutos..............................................................
Figura 35
82

Extrao das Sementes C com gua com Infuso de 4 horas e
Agitao de 2 horas.......................................................................
Figura 36
- Espectro de Absoro das Sementes D em soluo de KOH

0,5%........... ;...................................................................................
Figura 37
83
- Cromatograma do Padro de Bixina em Metanol:gua:cido

Actico (87:12:1) a 300 ppm.........................................................
Figura 38
83
85
- Cromatograma de Extrato de Urucum com Granulometria entre

100 e 250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes C
em Metanol:gua:cido Actico (87:12:1) a 300 ppm................
Figura 39
85

100 e 250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes A
em Metanol:gua:cido Actico (87:12:1) a 2000 ppm..............
Figura 40
- Cromatograma de um Concentrado de Extrato de Urucum em

Metanol:gua:cido Actico (87:12:1) a 300 ppm......................
Figura 41
86
- Cromatograma do Padro de Bixina em Tetrahidrofurano:gua

(58:42) a 40 ppm.............................................................................
Figura 42
86
87

100 e 250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes C
em Tetrahidrofurano:gua (58:42) a 100 ppm..............................
88
Figura 43
- Padro de Bixina................................... ........................................
91
Figura 44
- Amostra Purificada de Extrato de Sementes A e B entre 100 e

250 Mesh........................................................................................
Figura 45
- Micrografia tica da Amostra de Extrato de Sementes A e B

entre 100 e 250 Mesh......................................................................
Figura 46
92
92
- Micrografia tica da Amostra Purificada de Extrato de Sementes

A e B entre 100 e 250 Mesh...........................................................
93
XV
Figura 47
- Micrografia Eletrnica de Varredura do Extrato de Urucum........
Figura 48
- Micrografia Eletrnica de Varredura da Amostra Purificada do

Extrato de Urucum.........................................................................
Figura 49
95
- Rendimento da Extrao do leo das Sementes de Urucum Sementes .4.....................................................................................
Figura 50
93
99
- Composio em cidos Graxos da Amostra de leo de

Sementes de Urucum.....................................................................
100
xvi
SIMBOLOGIA
pl%
--'lcm
coeficiente de extino molar
absorbncia lida pelo espectrofotmetro
massa da amostra para clculo de cinzas (g)
concentrao da suspenso na zona limite (Kg/m3)
Co
Concentrao de alimentao (kg/m3)
CA
Concentrao de slidos na suspenso alimentada no sedimentador (Kg/m3)
CE
Concentrao da lama espessada (Kg/m3)
dc
dimetro da clula de medida (cm)
d;
volume da alquota para a diluio (mL)
comprimento do tanque de agitao (cm)
massa da amostra (g)
massa de cinzas (g)
Mias
massa de sementes (g)
rotao do moinho de bolas (rpm)
massa de umidade (g)
massa da amostra para clculo de umidade (g)
Qa
vazo volumtrica da suspenso alimentada no sedimentador (m3 /h)
raio do moinho de bolas (cm)
raio do tanque de agitao (cm)
Ri
rendimento da extrao por faixa granulomtrica (%)
Rt
rendimento total da extrao (%)
rea de sedimentao, seo transversal do sedimentador (m2)
velocidade de sedimentao na zona limite (m/h)
volume inicial de extrao (mL)
Vi
volume de diluio (mL)
Vx
- volume total (mL)
X
z
percentual de norbixina em massa
altura da lama espessada na zona limite (m)
Zo
altura inicial da suspenso (m)
Zi
altura da suspenso no tempo
(m)
LETRAS GREGAS
tempo de sedimentao (min)
RESUMO
A restrio ao uso de corantes sintticos na indstria alimentcia uma tendncia

mundial demonstrada hoje em dia pelo mercado globalizado e pelas restries impostas
pela Organizao Mundial de Sade, levando ao interesse de se substituir estes corantes
pelos naturais. O urucum um dos principais corantes naturais para alimentos utilizado
mundialmente, e o seu principal pigmento o carotenide bixina, que representa mais
de 80% dos carotenides totais contidos no ariolo da semente. A norbixina um cido
dicarboxlico, produto da hidrlise da bixina, sendo hidrosolvel. Os objetivos deste
trabalho foram a extrao e purificao dos corantes de urucum. Para a extrao foram
investigados o processo de extrao mecnica utilizando moinho com bolas de alumina
e o processo de extrao por agitao mecnica, utilizando gua e etanol como fases
lquidas. Vrios parmetros destes processos de extrao foram investigados, como o
rendimento total, concentrao dos extratos expressos em teor de norbixina, tempo de
processo, faixa granulomtrica, efeito do tempo de infuso das sementes e sedimentao
nos processos de agitao mecnica. Para a purificao dos extratos obtidos nos
processos de extrao, foi utilizado um processo de solubilizao do extrato em soluo
de NaOH e precipitao com soluo de HC1, e outro processo que envolveu a
solubilizao a quente do extrato em cido actico glacial e posterior cristalizao.
Pelos resultados obtidos, o processo de extrao por agitao mecnica utilizando etanol
como fase lquida foi o que apresentou o melhor desempenho para aplicao em
processo industrial. Nos processos de purificao dos extratos de urucum, o emprego
do processo utilizando cido actico glacial mostrou-se a melhor rota para a obteno
do produto com elevados teores de bixina.
xix
ABSTRACT
Restrictions to the utilization of synthetic dyes in the food industry is nowadays, a

worldwide tendency demonstrated for the globalized market and, for the imposed
restrictions of the World Health Organization, leading to the interest in replacing these
dyes for the natural ones. Annatto is one of the main natural dyes used in food
worldwide, and its main pigment is the carotenoid bixin which represents more than
80% of the total carotenoids found in the outer coat of the seed. Norbixin is a
dicarboxylic acid resultant of bixin hidrolysis, being hydro-soluble. The goals of this
work were the extraction and purification of annatto dyes. The extraction processes
were investigated using both a mechanical process utilizing an alumina balls mill and
mechanical shaking extraction utilizing water and ethanol as liquid phases. Several
parameters of these extraction processes were investigated, such as, total yield, extracts
concentration expressed in norbixin content, process time, granular range, effect of the
seeds infusion time and effect of the sedimentation in mechanical shaking processes. To
purify the extracts obtained in the extraction processes, it utilized a process which
consists in solubilizing the extract in a NaOH solution and further precipitation with a
HC1 solution, and another process where the extract is solubilized in boiling glacial
acetic acid and further crystallization. According to the obtained results, the mechanical
shaking process utilizing ethanol as liquid phase, presented the best performance for
industrial application. In purification processes of annatto extracts, the process utilizing
glacial acetic acid, has shown to be the best route to obtain a product with high content
of bixin.
INTRODUO
1 - INTRODUO
O urucum um dos principais corantes naturais para alimentos utilizado

mundialmente, tendo sua aplicao em queijos, manteigas, margarinas, salsichas,
sorvetes, refrigerantes, carnes, etc. Alm desta aplicabilidade na indstria alimentcia,
vrios outros segmentos utilizam este corante, como no tingimento de tecidos, para dar
cores aos vernizes, em raes para aves, na medicina e em cosmticos. O leo
produzido dos gros tambm utilizado no revestimento de frutos para conferir uma
melhor apresentao e conservao.
O principal pigmento do urucum o carotenide bixina, e representa mais de

80% dos carotenides totais. encontrado na camada externa da semente. A norbixina
um cido dicarboxlico, produto da hidrlise da bixina. Estes compostos so muito
polares e so teis em produtos base de gua. Sua tonalidade varia entre o amarelo e o
vermelho.
A bixina apresenta instabilidade, sofrendo degradao quando exposta a certas

condies de temperatura, luz e ar. Em determinados processos de secagem pode
ocorrer oxidao e reaes de isomerizao levando a degradao. A temperatura do
INTRODUO
processo de extrao dos pigmentos a principal responsvel pelo balano

vermelho/amarelo da colorao.
A tendncia demonstrada hoje em dia pelo mercado globalizado, em restringir o

uso de corantes sintticos em alimentos e as restries impostas pela Organizao
Mundial de Sade, tem levado a indstria e pesquisadores ao interesse por materiais
naturais, em particular os vegetais, que so usados como corantes. O Brasil
considerado o terceiro mais importante exportador mundial de sementes de urucum,
depois do Peru e Kenia, contudo a qualidade do produto brasileiro no mercado
internacional considerada baixa.
Os corantes de urucum so obtidos por processos mecnicos atravs de atrio e

raspagem das sementes ou por extrao com solventes. Em todos os processos, deve-se
evitar a degradao dos corantes para que se preserve as caractersticas naturais.
Os objetivos do presente trabalho foram a extrao dos corantes de urucum

utilizando um processo mecnico, que envolveu a atrio das sementes em um moinho
de bolas de alumina, a extrao por agitao mecnica utilizando duas fases lquidas
separadamente (etanol e gua), a variao destes processos, o projeto de um
sedimentador para os processos de extrao por agitao mecnica e a purificao dos
extratos obtidos.
Nos processos de extrao mecnica, os seguintes parmetros foram

investigados:
rendimento total da extrao, classificao granulomtrica do extrato
obtido, rendimento da extrao por faixa granulomtrica, concentrao de bixina nas
INTRODUO
diversas fraes granulomtricas obtidas, rendimento expresso em percentual de

norbixina por frao granulomtrica, tempo de operao do moinho de bolas e tempo de
estocagem das sementes.
Nos processos de extrao com agitao mecnica e uso de solventes, os

seguintes parmetros foram investigados: rendimento total da extrao, classificao
granulomtrica do extrato obtido, rendimento da extrao por faixa granulomtrica,
concentrao de norbixina nas faixas granulomtricas, tempo de agitao, tempo de
sedimentao e concentrao do espessado e o efeito do tempo de infuso das sementes
na fase lquida.
Na etapa de purificao do concentrado de urucum obtido no processo de

extrao, diversos procedimentos foram empregados, sendo obtido um produto
cristalizado com teor de norbixina equivalente ao teor do padro de bixina utilizado
como referncia nas anlises realizadas. Os teores de bixina/norbixina foram avaliados
atravs de mtodos espectrofotomtricos e cromatogrficos.
REVISO BIBLIOGRFICA
2 - REVISO BIBLIOGRFICA
2.1 - O Urucum
O urucum (Bixa orellana L.) uma planta da famlia das Bixceas. O arbusto
originrio da Amrica Tropical, podendo atingir alturas entre 2 e
metros. Tem folhas
codiformes, pontudas e dentadas. Suas grandes flores so hermafroditas de cor azul

rseo, com cinco ptalas nas extremidades dos galhos, formando fascculos; deles
nascem cpsulas ovides (cachopas) com dois ou trs carpelos cobertos de espinhos
flexveis, contendo cada uma em mdia 54 sementes rodeadas de polpa mole, tenaz,
vermelha, que constitui o pigmento propriamente dito. As cpsulas so bi ou trivalvares
e cada uma traz uma placenta linear no centro.
As folhas so caducas, caindo anualmente aps a grande colheita (setembro outubro). As Figuras 1, 2 e 3 mostram o urucuzeiro, suas cpsulas e flores, o corte de
uma cpsula e cpsulas secas, respectivamente (BALIANE, 1982).
REVISO BIBLIOGRFICA
Figura 2 - Cpsulas e Flores do Urucuzeiro
REVISO BIBLIOGRFICA
a)
Figura 3 - a) Corte Longitudinal de uma Cpsula de Urucum; b) Cachopa de
Cpsulas Secas de Urucum
A frutificao se inicia a partir do segundo ano; no terceiro, a produo j

considerada comercializvel.
A colheita feita manualmente, quando as cachopas se encontram secas no

prprio p. Existem dois perodos de colheita: um em maro (safrinha) e outro em
agosto/setembro (quando se d a maior fora da produo).
Na colheita, so usadas tesouras de podas ou podes, que cortando os galhos,

retiram a inflorescncia, contendo entre 15 e 20 cachopas. Estas, aps colhidas, so
levadas em balaios para terreiros ou depsitos, onde depois da secagem so
imediatamente beneficiadas em mquinas fabricadas para tal fim. Essas mquinas
separam as cachopas das sementes e as classificam para posteriormente serem
embaladas em sacos de polietileno ou de estopa, onde se conservam por mais de cinco
anos em perfeitas condies, sem nenhum tratamento fitossanitrio. A mquina
REVISO BIBLIOGRFICA
descachopadeira, movida a motor de 5 Hp, por exemplo, pode beneficiar at 200 sacos
por dia.
O urucuzeiro pode viver at 50 anos, sendo de 30 a sua vida til econmica

(BALIANE, 1982).
O cultivo do urucum vem sendo desenvolvido de forma emprica, quase sempre

prevalescendo a experincia adquirida do produtor rural. Existem, no entanto,
plantaes organizadas no pas, mas que no se fundamentam em resultados de pesquisa
(FALESI, 1987).
A planta, devido sua ampla distribuio geogrfica, responsvel por mais de

50 nomes diferentes, conforme CARVALHO et al. (1989). No Brasil, conhecida como
urucu, urucum, urucu-uva, urucu-bravo, aafroa e bixa, e por nomes indgenas como
ahit, nukir, bixe e bich. Na Amrica espanhola, a planta conhecida como achiote,
anoto, achote, onotto, onotillo, roekoe, schirabaeli, koessewee, koesowe, bija, cacicuto,
uruca, achiotillo, arnotto, arnolta, roucou, chancaguarica, kuxub, achihuiti, achiti,
shambu, huantura, atta, santo Domingo, analto e guajachote.
Na Espanha conhecido como bija, na Frana como rocouyer e o produto como

rocou. Na Alemanha como orlensbaum. Na Itlia, Inglaterra e Estados Unidos como
annatto; em Angola, como kisafu ou diteque e na ndia, como lathan ou kolssewil.
Neste trabalho a planta ser denominada como urucuzeiro e a semente por

urucum.
REVISO BIBLIOGRFICA
2.1.1 - Variedades
So conhecidas, hoje, diversas variedades, entretanto, as mais comuns so:

Focinho de rato, Cabea de moleque, Peruana e Wagner. Esta ltima apresenta
vantagens sobre as demais; alm de possurem suas cachopas indeiscentes (no se
abrem ao secar no p) so trivalvares, tendo em mdia 104 sementes por cachopa, ou
seja, o dobro das demais variedades nativas conhecidas (BALIANE, 1982).
2.2 - Usos e utilidades
O objetivo final da cultura do urucuzeiro a extrao dos corantes bixina e

norbixina. A bixina de colorao variando de vermelha castanho avermelhada
lipossolvel e a norbixina de colorao castanho-avermelhado a castanho,
hidrossolvel (FALESI, 1987).
A utilizao industrial dada sob a forma de:

Colorau - obtido atravs da mistura do p pigmentoso de urucum com fb,
este na proporo de 90%. usado como condimento caseiro.
leo - produzido dos gros, aps a extrao do pigmento e usado na
composio de vrios produtos industriais, um deles empregado no revestimento das
laranjas, para lhes conferir melhor apresentao e conservao.
Pasta, p solvel e oleosos - na indstria, so usados para tingir tecidos, nas
cores amarela, alaranjada e vermelha forte, e tambm para avivar e modificar certas
tintas. So usados, ainda, para dar cores aos vernizes, s graxas animais - especialmente
REVISO BIBLIOGRFICA
queijos, manteigas, margarinas e salsichas - aos sorvetes, picols e refrigerantes, bem

como s bebidas alcolicas e carnes em geral.
Raes para aves em postura - o gro triturado do urucum entra na proporo
de 0 , 8 % nas raes avcolas, pois o caroteno influencia a pigmentao da casca e da
gema dos ovos.
Medicina - como antidiarrico, antifebril. As sementes so reputadas como
estomticas e tonificantes do aparelho gastrointestinal. A massa do urucum usada
eficazmente nas queimaduras, evitando formao de bolhas.
Cosmticos - na fabricao de ps faciais, esmaltes, batons e creme bronzeador
da pele (BALIANE, 1982).
2.2.1 - Extrato de Urucum
O extrato de urucum conhecido como um dos mais antigos corantes, utilizado

desde a antiguidade para a colorao de alimentos, txteis e cosmticos. Tem sido
utilizado nos Estados Unidos e Europa por cerca de 100 anos como um aditivo de cor a
manteigas e queijos.
O principal princpio de corante encontrado nos extratos de leo ou gordura das

sementes de urucum o carotenide bixina, indexado com o nmero 75120 EEC No E
160b, que o monometilster do cido dicarboxlico norbixina (WHO/FAO, 1976). A
estrutura molecular destes compostos apresentada nas Figuras 4 e 5.
10
REVISO BIBLIOGRFICA
H
h 3c o o c
H3
H3
S ; ' c^ S ; "
H
c* c ' c ^
c^
c * c ' c^
CH3
c* chcooh
CH3
Figura 4 - Estrutura Molecular da Bixina: C2 5 H30 O4 (pm 394,51)
O maior corante em extratos aquosos alcalinos a norbixina:
H3 y
HOOC C<Sc ^
h
H3
c^
c XC%c ^
c^
c^
c^
c^
ch3
ch3
chcooh
Figura 5 - Estrutura Molecular da Norbixina: C2 4 H28 O4 (pm 380,48)
O extrato de urucum vendido em diversas formas fsicas, incluindo p seco,

emulses de propilenoglicol/monoglicerdos, solues e suspenses de leo e solues
aquosas alcalinas contendo de 0,1 a 30% de corante ativo calculado como bixina ou
norbixina, como apropriado. utilizado em produtos a nveis de 0,5 a
10
ppm como cor
pura, resultando em tonalidades que variam do amarelo manteiga ao pssego,

dependendo do tipo de preparao de cor empregado e a colorao do produto.
O comportamento qumico do extrato de urucum essencialmente o da bixina,

um material cristalino vermelho-marrom que se funde a 198 C. moderadamente
estvel luz e tem boa estabilidade frente oxidao, mudana de pH e ataque
microbiano. A bixina muito estvel at temperaturas de 100 C, sendo pouco estvel a
REVISO BIBLIOGRFICA
11
temperaturas de 100 a 125 C, onde tende a formar o cido 13-carbometoxi-4,8dimetiltridecahexano-oico (HANDBOOK OF U. S. COLORANTS, 1991).
2.3 - Propriedades dos Pigmentos
O teor de pigmentos presentes nas sementes do urucum varia de acordo com a

variedade da cultura, do solo, do clima e dos tratos culturais, podendo encontrar
sementes com menos de 1% e at com mais de 4% de bixina. A norbixina, tambm
proveniente das sementes do urucum, tem poder de colorao similar bixina e o
pigmento natural mais usado no Brasil, cerca de 80% do consumo. A converso da
bixina em norbixina feita pela diluio da bixina em meio alcalino, que aps a
separao e secagem comercializada na forma de p ou pasta (CARVALHO, 1989).
CASTRO (1992) e FARIA (1998) fizeram uma compilao das propriedades

dos extratos das sementes do urucum apresentadas por vrios autores, comits e
organismos internacionais de controle de aditivos em alimentos e sade. As
propriedades mais importantes so apresentadas a seguir.
Propriedades da bixina: lipossolvel, solvel em clorofrmio, acetona, ter

etlico, etanol etc. e insolvel em gua; absorbncia mxima a 439 nm, 470 nm e 501
nm em clorofrmio e a 526 nm, 491 nm e 457 nm em dissulfeto de carbono; o
coeficiente de extino
(470) = 2826 em CHCI3 /IO mg bixina pura; ponto de
fuso 198 C; colorao amarela em extrato diludo e vermelha escura em extrato

concentrado; instvel a luz e a temperaturas acima de 125 C.
REVISO BIBLIOGRFICA
12
Propriedades da norbixina: hidrossolvel, insolvel em lcool, propileno

glicol, leo e gordura; absorbncia mxima a 527 nm, 491 nm e 458 nm em dissulfeto
de carbono e ponto de fuso de 300 C. A norbixina instvel na presena de luz e em
soluo quando se muda o pH.
Propriedades do norbixato de sdio e potssio: solvel em gua, insolvel em

acetona, clorofrmio, ster, leos e gorduras e moderadamente solvel em lcool, e tem
absorbncia mxima a 454 e 482 nm para soluo de 0,01% deNaOH.
SCOTTER et al. (1994) fizeram anlise espectrofotomtrica e em cromatografia

lquida de alta eficincia em extrato para quantificar os pigmentos das sementes do
urucum (cis e trans bixina e norbixina) e obtiveram os comprimentos de onda mximos,
cujos valores encontrados esto de acordo com os propostos por REITH e GELEN
(1971) e so apresentados na Tabela 1. Segundo WILBERG e RODRIGUEZ-AMAYA
(1992) o mtodo de quantificao dos carotenides das sementes do urucum por
cromatografia lquida de alta eficincia menos preciso que por espectrofotometria. A
quantificao deve ser feita atravs de padres puros da bixina e da norbixina.
A c/s-bixina, cerca de 80% da bixina presente nas sementes do urucum,

apresenta uma cor laranja e insolvel em gua. A forma cis mais instvel e converte
parcialmente na forma trans e no produto amarelo resultante da degradao trmica
atravs de aquecimento no processamento (FRANCIS, 1987 e PRESTON e RICKARD,
1980), porm a forma cis pode passar totalmente para a forma trans mais estvel,
quando em soluo de clorofrmio na presena de iodo (CARVALHO e HEIN, 1989).
REVISO BIBLIOGRFICA
13
A forma trans tem cor vermelha, estvel e solvel em leo (PRESTON e

RICKARD, 1980).
Tabela 1 - Resultados das Anlises espectroscpicas UV/Visvel

Comprimento t
Onda mximo (nm)
Coeficiente de
,
1
Extino fE, 'm j
501 e 470
2880e 3230
m ch
501 e 470
2773 c 3os>2
trans-bixina
cH cis
507 e 476
2970e 3240
tr&n$4>Mn&
cm h
$06^474
2853 3134
ci$-norbixina
0,1 MNaOH
482 e 453
2550 e 2850
cs-aorbxin
0,1 MNaOH
4i e453
2503 c 28 IS
trans-norbixina
0 ,1
MNaOH
486e 457
ND
trans-nofbixiia
0 ,1
MNaOH
487 e 456
Nl)
Composto
Solvente
Autor
cis-bixina
CHCI3
cis-bixn
A = REITH e GIELEN (1971); B = SCOTTER et al. (1994); ND = no possvel de

determinar devido a baixa solubilidade.
A Tabela 2 mostra as frmulas moleculares e respectivos pesos moleculares da

bixina e da norbixina nas formas cis e trans e do produto amarelo de degradao e a
Figura
mostra as estruturas qumicas destes compostos e derivados. A bixina o
mono-metil ster de um cido dicarboxlico de um composto carotenide; a norbixina

o cido derivado da hidrlise deste ster e o produto de degradao possui estrutura C 17.
A instabilidade dos pigmentos do urucum pela luz, calor e pela oxidao na

presena de alguns solventes objeto de estudo de vrios pesquisadores (FARIA, 1998).
Estes estudos procuraram explicar o mecanismo da degradao e tambm tiveram como
objetivo estabelecer faixas operacionais para o processamento destes pigmentos.
REVISO BIBLIOGRFICA
14
C^H3
H3COOC- C^
CH
(jH3
CH
CH
CH
CH
hi
^h3
lCV
? s / HM0H
CH
CH
CH,
a)
C^H3
CH
(pH3
CH
CH
CH
CH
<j>H3
CH
CH
CH3
b)
C^H3
H3COOC CV
CH
(jJH3
CH
(ji
CH
CH
CH
H-,
C\ J k ^ CHC00CH*
CH
CH
CH3
c)
CH
CH
CH
CH
CH
CH C
CH3
d)
c^h3
CHCOOH
ch3
c^h3
H s C O O C - C .^ ^ ^ ^ H ^ ^ C H ^
CH
CH
CH
CH
CH
CH
CH3
e)
ch3
CH
CH
CHCOOCH3
CH3
<^h3
CH
CH
CH
C
ch3
CH
CHCOOH
ch3
Figura 6 - Estrutura Qumica dos Pigmentos do Urucum, FRANCIS (1987); a) cisbixina; b) c/s-norbixina; c) cs-metil-bixina; d) ra/ts-bixina; e) frans-norbixina; f)
frans-metil-bixina
REVISO BIBLIOGRFICA
15
O extrato de urucum tem uma estabilidade considervel oxidao pelo ar em

meio anidro mas uma resistncia mais baixa aos efeitos da luz, os quais so
proporcionais intensidade desta. Um modo para aumentar a persistncia da cor sob
forte iluminao parece ser a adio de palmitato de ascorbil. A presena de radicais
livres ou qualquer promotor dessas espcies em extratos de urucum deve ser evitada,
pois estudos indicam que pode ocorrer uma perda rpida de cor sempre que for
promovida a formao de radicais livres (NAJAR et al., 1988).
Tabela 2 - Estrutura e Peso Molecular dos Pigmentos das Sementes do Urucum
N<*me
Frmula rnoJecalar
Peso Moeciilar
a-bixina ou c/5-bixina
C25 H30 O4
394
P-bxraa ou
C2 5 H3 0 O4
394
a-norbixina ou cw-norbixma
C24 H2 8 O4
380
C3 3 H2 SQ4
380
C17H20O4
288
-nrbxn Ou
Produto amarelo de degradao
As diferenas nas propriedades corantes dos extratos de sementes de urucum

resultam dos processos de extrao, onde h, muitas vezes, a formao de produtos com
diferentes tonalidades e solubilidades (CARVALHO e HEIN, 1989).
2.3.1 - Estereoqumica
Desde que a bixina foi o primeiro cis polieno a ser reconhecido na natureza, sua
estereoqumica tem sido sujeita a muita investigao conforme cronologia dos
REVISO BIBLIOGRFICA
16
principais resultados obtidos apresentados na Tabela 3 (PRESTON & RICKARD,

1980).
Tabela 3 - Desenvolvimento Cronolgico

Bussiughault (1825)
Primeiro isolamento
Etti (1878)
Cristalizao
Hetdusctifca & Panzer (1917)
Frmula molecular
Herzig & Paltis (1923)
Isomerizao
K&rrer M al (1929}
ljimejos ci* - > irun\
Kuhn/Ehraann (1929); Kuhn/LOrsa (1931, 1932);
Constituio
Kuhn/Winterstein (1928, 1932); Kuhn et al. (1929)

Karrer & Soimsscn (1937)
Estrutura 11-c/.s
Zechmeister & Escue (1944)
Estrutura 9-cis
Karrer & Jucker l^Su)
Esl rutura 9-tv.s
Lunde & Zechmeister (1955)
7-cis para Me-bixina (IR)
Barbcr ct al ()9ol)
Pr Me-bixin estrutura 9'-<vv
Weedon (1967)
Sntese da Me-c/.v-(natural) bixina
Patt enden ei al (1970)
Sntese da Me-r/,v-(natural) bi\ina
Contudo, 136 anos aps a bixina ter sido relatada pela primeira vez, a estrutura
da cw-bixina foi mostrada ser o metil hidrognio 9-c-6,6-diapocaroteno-6,6-dioato
ilustrado na Figura 7.
ho 2c
9'
%
c o 2c h 3
Figura 7 - Estrutura molecular da c/s-bixina,
C25H30O4.
REVISO BIBLIOGRFICA
17
2.3.2 - Degradao
IVERSEN & LAM (1953) mostraram que a bixina dissolvida em leo vegetal ou
outros solventes se submete a sries complexas de isomerizaes e degradaes quando
aquecida a temperaturas de extrao. Um pigmento amarelo foi isolado de uma
preparao comercial de extrato de urucum. Utilizando o mtodo de cromatografia em
papel (McKEOWN, 1961), foi separada uma srie de pigmentos a partir do extrato de
urucum comercial. Os efeitos do tratamento trmico de um extrato comercial podem ser
observados em comparao com o extrato da semente Bixa Orellana L.
NAJAR et al. (1988), mostraram que o extrato de urucum tem uma estabilidade
considervel oxidao pelo ar em meio anidro mas uma resistncia mais baixa aos
efeitos da luz, os quais so proporcionais a intensidade da luz.
CARVALHO et al. (1993) estudaram a degradao de um corante slido obtido

por extrao alcolica dos pigmentos das sementes de urucum, em embalagens com
diferentes taxas de permeabilidade ao oxignio, a temperatura de 30 C, por um perodo
de 368 dias, concluindo que materiais de embalagens com taxas de permeabilidade ao
oxignio de at 42 cm3 (CNTP)/m2/dia a 25 C conferiram adequada proteo ao
produto durante um ano de estocagem a 30 C e 90% UR na ausncia de luz. Tal
barreira ao oxignio pode ser obtida com estruturas co-extrusadas ou laminadas de
nylon e polietileno de baixa densidade.
REVISO BIBLIOGRFICA
18
2.4 - Processos de Obteno de Corante de Urucum
Os pigmentos das sementes do urucum podem ser extrados por processos

mecnicos atravs de atrio e raspagem das sementes e fsico-qumicos atravs de
solventes, ou ainda, pode ser realizado utilizando enzimas. A extrao por solventes
pode ser feita por trs mtodos bsicos, extrao alcalina (soluo de NaOH ou KOH)
em que resulta na converso da bixina em norbixina, extrao com leo (soja, milho) e
extrao atravs de solventes orgnicos (clorofrmio, etanol, acetona, propilenoglicol)
em que resulta na forma mais pura dos pigmentos. Todas as tcnicas devem levar em
considerao a degradao destes pigmentos pela luz e calor excessivos.
Os pigmentos do urucum esto localizados no pericarpo da semente, os quais

ficam aderidos superfcie por meio de uma resina. Esta caracterstica facilita a
extrao, pois no necessrio triturar as sementes (SILVA, 1999).
2.4.1 - Processos de Extrao Mecnica
GUIMARES et al. (1989), MASSARANI et al. (1992), BARRETO et al.

(1989) estudaram a produo de um concentrado de bixina atravs da atrio em leito de
jorro e compararam com outros produtos obtidos em processos no aerados, como a
betoneira em que obtiveram um concentrado com mais de 20% em bixina. PINHEIRO
et al. (1990) e SILVA (1991) analisaram a degradao da bixina durante o
processamento das sementes do urucum em leito de jorro e compararam com o
colorfico produzido com a semente natural e a semente processada.
REVISO BIBLIOGRFICA
19
PASSOS et al. (1997) avaliaram a degradao trmica da bixina durante a

secagem do extrato de urucum em leitos de jorro, por cromatografa lquida de alta
eficincia, constatando que no h uma degradao trmica significante a temperatura
de 50 C, quando comparada a uma secagem intensiva a temperaturas de 105 C.
2.4.1.1 - Extrao por Atrito
A extrao da bixina pode ser realizada com solventes ou por atrito (extrao
mecnica). Dentro do grupo de metodologias de extrao sem o uso de solventes,
encontram-se: extrao em leito de jorro e extrao com moinho de bolas. Na extrao
em leito de jorro, a simples movimentao das sementes de urucum faz com que os
choques entre as mesmas liberem a bixina no fluxo de ar. J na extrao com moinho de
bolas, alm do atrito entre as sementes, ocorre o atrito entre as bolas e as sementes,
fazendo com que o extrato seja liberado. importante ressaltar que o fraturamento das
sementes deve ser evitado uma vez que o corante de interesse est presente no ariolo da
semente, pelcula localizada na superfcie da mesma, e no no seu interior.
Estudos realizados demonstram que a bixina facilmente extrada das sementes

pelo atrito e impacto das partculas. Esta tcnica mecnica pode requerer um tratamento
prvio das sementes, no qual estas so secas uma temperatura baixa preservando a
qualidade do pigmento.
REVISO BIBLIOGRFICA
20
MASSARANI et al. (1992) e PASSOS et al. (1997) desenvolveram um leito de

jorro cnico no convencional, onde o processo de secagem das sementes efetuado
juntamente com a extrao da bixina. A degradao trmica da bixina no processo de
secagem estudada por BARONCELLI et al. (1997). GUIMARAES et al. (1989)
tambm desenvolveram estudos utilizando um leito de jorro cnico, operando com ar
temperatura ambiente e a coleta do p (concentrado de bixina) efetuada com o auxlio
de um ciclone. FARIA e ROCHA (2000) otimizaram a secagem das sementes de
urucum em leito de jorro fixo, obtendo um contedo de umidade final no intervalo de 5
a
10
% em base seca e uma concentrao de bixina mais alta que 2 ,8 6 % em base seca.
Estes valores de umidade so recomendados para que se possa manter a qualidade do

pigmento.
Um mtodo para a produo de concentrado de urucum a partir de extratos

alcalinos aquosos utilizando leito de jorro foi estudado por FREITAS et al. (2000). Eles
obtiveram um rendimento de 4% na obteno do extrato concentrado de urucum com
concentrao menor que 13,3% de bixina, mas com tamanhos de partculas ultra-finas
onde o efeito de maior importncia no processo foi o decrscimo no contedo do
pigmento em temperaturas acima de 80 C.
2.4.2 - Processos de Extrao com Solventes
A bixina presente no ariolo da semente de urucum pode ser extrada por meio de
solventes orgnicos ou solues alcalinas. Na literatura so encontrados vrios
processos de extrao de corantes de urucum utilizando diferentes solventes orgnicos
REVISO BIBLIOGRFICA
21
como etanol, acetona, cloreto de etila e outros ((PRENTICE-HERNANDEZ e RUSIG,

1992; SIMPSON et al., 1993; CARVALHO, 1990; PRESTON e RICKARD, 1980).
Vrios autores estudaram a extrao dos pigmentos das sementes do urucum

com solventes. INGRAN e FRANCIS (1969) aplicaram dois mtodos para a extrao
dos pigmentos das sementes do urucum. O primeiro consiste na produo de uma massa
atravs da extrao por solvente orgnico seguida de purificao, precipitao e
cristalizao para obteno da bixina pura; o segundo refere-se produo de um
concentrado em bixina atravs da
extrao com leo vegetal ou propilenoglicol a
125 C.
CARVALHO (1990) apresenta dois processos para extrao dos pigmentos das
sementes do urucum. O primeiro utiliza solventes orgnicos que tenham propriedade de
solubilizar a bixina. O segundo utiliza solventes alcalinos para obteno da norbixina;
estes processos permitiram obter um produto concentrado em at 50% em pigmentos do
urucum.
PIMENTEL (1995) aplicou a precipitao cida para purificar os extratos das

sementes do urucum obtidos atravs de hidrxido de potssio 0,1 N e hidrxido de
amnia 0,52 N em etanol a 58%. Os produtos purificados apresentaram maiores teores
para a extrao com hidrxido de amnia e etanol os quais foram obtidos na forma
lquida, pasta ou p.
SILVA et al. (1994) estudaram a extrao dos pigmentos das sementes do

urucum em leito fixo com solventes nos estados lquido e vapor, sendo que o
REVISO BIBLIOGRFICA
22
rendimento da extrao foi maior usando solvente com temperatura acima do ponto de
ebulio. Testaram vrios solventes, sendo que os mais eficientes foram o clorofrmio,
a acetona, o ter etlico e o etanol. Nesse trabalho, constataram que abaixo de 80 C a
degradao da bixina pelo calor desprezvel. Verificaram tambm que na extrao dos
pigmentos com as sementes trituradas o rendimento no aumentou, alm do
inconveniente do arraste de impurezas pelo solvente.
PASSOS et al, (1997) desenvolveram um mtodo para a produo de extrato de

urucum em p pela secagem de extratos alcalinos aquosos em um leito de jorro. Os
resultados mostraram um alto contedo de pigmentos encontrados no urucum,
comparveis com aqueles encontrados em produtos comerciais e aqueles obtidos pela
atrio em leitos de jorro, conforme MASSARANI et al. (1992).
PRENTICE-HERNANDEZ e RUSIG (1992) estudaram a obteno do extrato de

urucum utilizando etanol como solvente e duas fontes de sementes, uma contendo
1,88% de bixina e outra contendo 2,35%, num mtodo simples e de baixo custo,
considerando o equipamento e solvente utilizados. Aps o processamento, o produto
final seco foi obtido com 65,47% de bixina e um rendimento de extrao de 4,33% em
relao s sementes de mais alta concentrao de bixina.
BHALKAR e DUBASH (1983) examinaram vrios mtodos de extrao

utilizando gua, lcali e solventes orgnicos para verificar as taxas de extrao mais
altas. Para a extrao dos pigmentos na superfcie da semente, o uso do carbonato de
sdio foi eficiente. A concentrao tima de carbonato de sdio foi de 0,4% e a extrao
REVISO BIBLIOGRFICA
23
mxima dos pigmentos foi atingida em cerca de 5 horas de agitao. O hidrxido de

sdio deu uma extrao de pigmentos totais de 73,9%.
Uma mistura tima de solvente encontrada foi de 25% de clorofrmio em etanol

(v/v) e foi utilizada para extrair os pigmentos das sementes de urucum a vrias
propores de sementes versus solvente, para diferentes intervalos de tempo. Tomando
os pigmentos totais como 760 mg/l00 g de sementes, o percentual de extrao dos
pigmentos pelo solvente sob diferentes condies mostrou que usando a proporo
semente:solvente de 1:1 ou 1:2, somente 45 a 50% dos pigmentos totais foram extrados
em 1 a 3 horas em um agitador giratrio. Na proporo semente:solvente de 1:4, 57%
dos pigmentos totais foram extrados na primeira hora e 60% em 2 e 3 horas de
agitao. Contudo, se o solvente retirado aps cada hora e substitudo pela proporo
solvente:sementes de 4:1 com solvente novo, at 76,5% dos pigmentos totais do urucum
podem ser obtidos em 3 horas.
Quando 20 g de sementes de urucum foram agitadas com 100 mL de gua por 3

horas, 715 mg de pigmentos brutos foram separados. O efeito de abraso nas camadas
superficiais das sementes com 16 a
20
esferas de vidro durante a agitao mostrou-se
benfica. Um aumento de 33% nos pigmentos brutos foi encontrado na proporo de 1:1
no sistema sementes:material abrasivo. Aps a decantao das sementes e material
abrasivo, o pigmento bruto foi obtido por centrifugao. Contudo, ainda foram
encontradas no sobrenadante, quantidades considerveis de pigmento. Em outro
experimento,
20
g de sementes foram colocadas junto com 2 0 g de material abrasivo de
nmero 16 a 20 e agitadas com 40 mL de gua por 3 e 6 horas. O pigmento foi extrado

do abrasivo centrifugado e do lquido aquoso sobrenadante com clorofrmio e foi
REVISO BIBLIOGRFICA
24
calculada a concentrao do pigmento em mg/100 g de sementes. Nas primeiras 3 horas

de abraso, 14% do pigmento foi perdido na fase aquosa, enquanto que aps
horas de
abraso, 21% dos pigmentos totais permaneceram na fase aquosa. Dessa forma, este
mtodo de extrao dos pigmentos do urucum por abraso tem um inconveniente devido
dificuldade de recuperao dos pigmentos da fase aquosa.
Comparando-se os mtodos, BHALKAR e DUBASH (1983) verificaram que

pelo mtodo de extrao utilizando gua, este deu uma extrao de cerca de 61% dos
pigmentos totais aps
horas de agitao. Desta forma, este mtodo necessita de
bastante tempo e requer muitas operaes unitrias. No caso do mtodo utilizando

hidrxido de sdio, 74% dos pigmentos so extrados em 1 hora, mas ainda grandes
volumes devem ser manipulados e no final o pigmento tem que ser dissolvido no
solvente. O mtodo de extrao por solvente d um mximo de 76% de extrao. Este
simples e, portanto, o melhor.
PRESTON e RICKARD (1980) descreveram alguns mtodos para extrao dos

corantes de urucum, descritos a seguir.
Bixina solvel em leo:
As sementes de urucum, imersas em leo vegetal a uma temperatura no

excedente a 70 C, so mecanicamente raspadas para remover o pericarpo do resduo da
semente por um processo conhecido como raspagem. O espessado do pigmento em leo
aquecido sob vcuo a uma temperatura que no exceda 130 C. A soluo filtrada
25
REVISO BIBLIOGRFICA
para remover os materiais insolveis. Os maiores carotenides incluem a trans-bixina,

um produto amarelo de degradao trmica e a czs-bixina.
Suspenso em leo:
Existem trs mtodos importantes, os quais so descritos a seguir:
a) O extrato do pericarpo em leo comestvel aps a raspagem centrifugado e
as partculas mais finas so misturadas com leo para formar uma suspenso.
Quando o tratamento trmico no usado, o produto amarelo de degradao
no observado, estando presentes neste caso, a cis- e ram-bixina.
b) Extrao com solvente: O pigmento do urucum extrado por um solvente
adequado, como a acetona por exemplo. O extrato lavado com hexano ou
outro solvente no qual o pigmento virtualmente insolvel, para remover as
impurezas e odores indesejados. Moendo em leo comestvel para um
tamanho de partcula de cerca de
10
microns ento levada a produo de
uma suspenso microcristalina em leo. Os solventes incluem a acetona,

diclorometano, etanol, petrleo leve e propan-2 -ol. Os maiores carotenides
presentes so a cis- e trans-bixina.
c) Extrao com mono- e di-glicerdeos, etc: A extrao utilizando produtos de
nvel alimentcio tais como os mono- e di-glicerdeos, cidos graxos livres ou
propilenoglicol tambm praticada.
Urucum solvel em gua:

a) A partir da semente: O pericarpo da semente do urucum extrado por
agitao em lcali aquoso a temperaturas que no excedam 70 C para dar
REVISO BIBLIOGRFICA
26
uma soluo aquosa de sais de sdio ou potssio de norbixina,

provavelmente na forma cis e trans.
b) A partir da bixina extrada por solvente: A bixina, derivada da extrao do
pericarpo por um ou mais estgios, seguida pela remoo do solvente,
hidrolisada com lcali aquoso para produzir os sais de sdio ou potssio de
norbixina.
2.5 - Procedimentos Analticos Utilizados na Anlise da Bixina/Norbixina
A anlise dos extratos, conforme PRESTON e RICKARD (1980), a partir de

vrios processos comerciais mostra os seguintes maiores carotenides:
C 17 - Produto da degradao trmica
Bixina solvel em leo
trans-bixina
c/s-bixina
Suspenso de bixina em leo { czs-bixina + alguma trans-bixina

Bixina extrada com solvente { cw-bixina + alguma trans-bixina
Extratos solveis em gua:
a) Extrato da semente aquoso de lcali
b) Hidrlise em lcali aquoso da bixina
-<
cis- e Zram-norbixina (sais de Na ou K)
Extrada com solvente
2.5.1 - Mtodos Espectrofotomtricos
A bixina e seus ismeros tem uma absorbncia mxima a cerca de 500 nm e 470
nm em clorofrmio, enquanto que os pigmentos de degradao amarelos apresentam
REVISO BIBLIOGRFICA
27
uma absorbncia mxima a cerca de 404 nm e 428 nm (em clorofrmio) e no absorvem

a 500 nm (McKEOWN e MARK, 1962).
Anlises do espectro a 500 nm e 404 nm podem determinar ambos o contedo

total de pigmentos e o contedo de bixina do extrato (McKEOWN e MARK, 1962;
REITH e GIELEN, 1971).
McKEOWN (1965) determinou a estrutura do pigmento amarelo C 17 produzido

pela degradao trmica da bixina C 2 5 , como mostrado na Figura 8 .
CH3 OOC
COOH
Figura 8. Estrutura do Pigmento Amarelo
C17 (C17H20O4).
De acordo com CARVALHO e HEIN (1989), a bixina apresenta picos mximos

de absoro em clorofrmio a 469-470 e 501-503 nm.
YABIKU e TAKAHASHI (1992) descreveram mtodos para a determinao de

bixina e norbixina. Para a determinao de bixina, utilizaram clorofrmio como
solvente, leitura a 470 nm e para o clculo da concentrao utilizaram o coeficiente de
extino Ej^ = 2826. Para a determinao de norbixina, utilizaram solues de
28
REVISO BIBLIOGRFICA
hidrxido de potssio a 5% e 0,5%, leitura a 423 nm e para o clculo da concentrao

Efcm = 3473. O percentual encontrado de norbixina pode ser expresso como bixina
multiplicando-se pelo fator de 1,037.
KATO
et al.
(1992)
utilizaram um
mtodo
para
determinao
de
bixina/norbixina nas sementes que consiste na extrao da norbixina em meio alcalino,

utilizando uma soluo 0,1 N de hidrxido de sdio. Aps a extrao, filtrao e
centrifugao, foi feita uma diluio apropriada para leitura em espectrofotmetro no
comprimento de onda correspondente a 480 nm e um coeficiente de extino de 2870,
para obteno do percentual de norbixina. A este percentual foi multiplicado o fator de
converso igual a 1,037 para obteno do percentual de bixina, o mesmo utilizado por
YABDCU e TAKAHASHI (1992).
SCOTTERea/. (1998) utilizaram os seguintes mtodos:

Para determinao de bixina em extrato leo-solvel, dissolveram e diluiram
aproximadamente
0 ,1
g da amostra com uma soluo de cido actico ( 1 0 % v/v) em
clorofrmio em um frasco de 200 mL. Retiraram uma alquota de 1 mL e diluiu para 10

mL usando uma soluo de cido actico (3% v/v) em clorofrmio para dar uma
soluo de amostra em cido actico (3,7% v/v) em clorofrmio. A absorbncia da
soluo diluda foi medida a 505 nm e 474 nm em uma cubeta de quartzo de 1 cm
contra uma soluo de referncia de cido actico (3% v/v) em clorofrmio. O contedo
de bixina foi determinado pela referncia aos coeficientes de extino Ej^ = 2790 a
505 nm e Ej* = 3130 a 474 nm.
REVISO BIBLIOGRFICA
29
Para determinao da norbixina em extrato solvel em gua, dissolveram e

diluiram aproximadamente 0,1 g da amostra com uma soluo de cido actico (5% v/v)
em clorofrmio em um frasco de 200 mL. Retiraram uma alquota de 1 mL e diluiu para
10 mL com clorofrmio para dar uma soluo de amostra de cido actico (0,5% v/v)
em clorofrmio. A absorbncia da soluo diluda foi medida a 503 e 473 nm em uma
cubeta de quartzo de
cm contra uma soluo de referncia de cido actico (0,5% v/v)
em clorofrmio. O contedo de norbixina foi determinado pela referncia aos

coeficientes de extino
= 2290 a 503 nm e Ej^ = 2620 a 473 nm.
Para determinao do total de pigmentos solveis do extrato, aproximadamente

0,1 g de amostra foi dissolvida e diluda em 100 mL de clorofrmio. A absorbncia da
soluo foi varrida na faixa de comprimento de onda de 400 a 600 nm em uma cubeta
de quartzo de
cm contra a referncia de clorofrmio. O comprimento de onda de
absoro mxima na regio de 500 nm foi determinada e a absorbncia medida neste

comprimento de onda e em 404 nm. O contedo total de pigmento expresso como
bixina foi calculado usando a seguinte frmula:
Pigmento Total (%) = ^Afflx + A
H ,2 5 6 .A mx)] ^ 100 x VD_

282,6
PA 1000
404
Amx = absorbncia mxima medida

A4 0 4 = absorbncia medida a 404 nm
0,256 = fator relativo s absorbncias 404 e 501 nm para a bixina em
clorofrmio
282,6 = absortividade da bixina a 501 nm em clorofrmio
REVISO BIBLIOGRFICA
30
DEGNAN et al. (1991) calcularam o contedo de pigmento das sementes,

expresso em percentual de bixina, aps repetidas extraes com
CHCI3,
absorbncia a 501 nm e coeficiente de extino Ej^ = 2826 (litros de
com leitura de
CHCI3/IO
g de
bixina).
2.5.2 - Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC)
ROUSEFF (1988) apresentou um mtodo de separao por FIPLC para

determinao de pigmentos em corantes para alimentos, urucum e turmeric. O tempo de
anlise para o sistema isocrtico foi de
10
minutos e para o sistema de gradiente,
22
minutos. A separao isocrtica empregou uma coluna 25 cm X 4,6 cm i.d. Zorbax ODS
com uma mistura 58:42 (v/v) de gua:tetrahidrofurano (THF), a 1 mL/min.
A preparao das amostras consiste na diluio e filtrao dos extratos. Os trs

maiores pigmentos no turmeric, identificados do fluxo do espectro visvel e fluorescente
foram a curcumina, dimetxicurcumina e disdimetxicurcumina. A absorbncia,
excitao e emisso mxima para os trs curcuminides mais os carotenides bixina e
norbixina, foram determinadas.
De acordo com ROUSEFF (1988), os pigmentos no urucum e turmeric so

razoavelmente hidrofbicos pois so fortemente retidos numa fase estacionria no
polar tal como Ci8 . Experimentos utilizando colunas Cis com os solventes mais comuns
de fase reversa tais como gua-metanol e gua-acetonitrila no foram satisfatrios.
Mesmo que a fora de eluio da fase mvel possa ser ajustada para alcanar um fator
REVISO BIBLIOGRFICA
31
de capacidade (k) satisfatrio, a forma do pico (tailing) foi um problema. Felizmente,

os sistemas de solvente gua-tetrahidrofurano produziram excelentes resoluo e forma
do pico.
2.5.3 - Cromatografia em Camada Delgada
Diversos mtodos de cromatografia em camada delgada tm sido desenvolvidos.

O mtodo utilizado no Laboratrio Unilever Research Colworth Laboratory foi
desenvolvido para isolar e identificar os principais componentes nas preparaes
comerciais de extrato de urucum e ajudar em estudos do destino metablico dos
pigmentos de urucum no rato e no homem (PRESTON e RICKARD, 1980).
SILVA (1999) realizou a anlise utilizando placas cobertas por uma camada de
slica gel G60 MERCK. Na fase mvel foi utilizada uma mistura de clorofrmioacetona-cido actico (50:50:1) colocada numa cuba de vidro, onde as placas contendo
os corantes foram mergulhadas por 30 minutos a temperatura ambiente.
Nas placas foram aplicadas amostras da bixina pura, da norbixina pura, extrato
das sementes do urucum em clorofrmio e os extratos dos experimentos para vrias
condies estudadas, para a verificao da faixa que se extrai mais bixina na forma cis
ou trans, e outros componentes.
REVISO BIBLIOGRFICA
32
2.5.4 - Cromatografia em Papel
McKEOWN (1961) descreveu um mtodo para a separao da bixina e

compostos relacionados, utilizando a cromatografia em papel por partio.
Foram estudados a bixina lbil (forma cis), a norbixina lbil, a metilbixina lbil e
seus correspondentes ismeros estveis (forma trans).
O mtodo consiste na preparao de uma tira de papel impregnada com uma

soluo 50% (v/v) de N,N-dimetilformamida (DMF) em acetona e deixada secar ao ar
por 10 minutos com o papel suspenso na posio vertical. Aps a secagem, pingar
rapidamente na linha de incio previamente marcada, 2 microlitros de uma soluo 0,2%
de Oil Yellow AB (l-fenil-azo-2-naftilamina) em DMF para referncia, e 2 microlitros
de solues de bixina as quais se quer analisar. Desenvolve-se o cromatograma por
fluxo
descendente,
utilizando
ciclohexano-clorofrmio-DMF-cido
actico
na
proporo 85:10:3:2 por trs horas, ou at que uma separao satisfatria seja obtida.
Determina-se os valores deR dos pigmentos desconhecidos com respeito ao Oil Yellow
AB e compara-se com os valores dados na Tabela 4.
Tabela 4 - Valores de Rf e R Relativos ao Oil Yellow AB para a Bixina e
Compostos Relacionados
Composto
Norbixina estvel
Norbixina labil
Bixina estvel
Ut(mdia)
R ap
0,009
0,037
0,014
0.09
0,058
0,37
0,58
0.14
0.24
Bixina lbil
Oil Yellow AB
Mculbixma estvel
0,38
1,00
1,58
Metilbixina lbil
0,56
2,33
MA TERIAL E MTODOS
33
3 - MATERIAL E MTODOS
3.1 - Sementes de Urucum
Visando a determinao da influncia do tempo de armazenamento das sementes

de urucum na extrao e purificao do corante do urucum, foram selecionados quatro
lotes de sementes; com cinco anos de estocagem, um ano de estocagem e duas
recentemente adquiridas no mercado. O acondicionamento das sementes durante o
armazenamento foi realizado em sacos de polietileno preto em condies ambientais.
As sementes de urucum mais recentes foram fornecidas pela empresa Chr.

Hansen Indstria e Comrcio Ltda, localizada em Valinhos/SP, sendo uma mistura das
variedades Peruana Paulista e Piave Vermelha e, as sementes com cinco e um ano de
estocagem, foram provenientes do estado da Bahia.
3.2 - Padro de Bixina
padro de bixina foi fornecido pela empresa Chr Hansen A/S localizada em
H 0 rsholm/Dinamarca, lote n2 BX-124-99.
MA TERIAL E MTODOS
34
3.3 - Reagentes e Materiais Diversos
Os seguintes solventes foram utilizados entre outros: lcool etlico absoluto P. A.

(Nuclear), clorofrmio P. A. (Biotec, Nuclear), tetrahidrourano P. A. (Nuclear), lcool
metlico HPLC/Espectro (Tedia), acetona P. A. (Biotec), hidrxido de sdio P. A.
Microprolas (Vetec), cido actico glacial P. A. (Biotec), hexano P. A. (Dinmica),
ter de petrleo P. A. (Biotec), gua destilada.
3.4 - Equipamentos
Os principais equipamentos utilizados neste trabalho foram:
Cromatgrafo lquido de alta eficincia (HPLC) da marca CG composto de uma

bomba modelo CG 480-E, detector UV modelo CG 437-B, integrador modelo CG-200,
coluna Nucleosil 120-5 C18 250 x 4 mm e pr-coluna Nucleosil 5 C18 30 x 4,6 mm;
espectrofotmetro UV/Visvel da marca Shimadzu modelo UV Mini 1240; pHmetro da
marca Quimis modelo 400M2; balana analtica da marca Mettler Toledo modelo
AB204-5 preciso 0,1 mg; estufa de secagem e esterilizao da marca Tecnal modelo
TE-393/1; agitador mecnico da marca Fisaton modelo 713A; ultrasom da marca
Thornton Unique modelo USC 1450; banho ultratermostatizado da marca Marconi
modelo MA184; centrfuga termostatizada marca Sigma modelo 2K15; centrfuga
marca Presvac modelo DCS-16RV; bomba de vcuo da marca Marconi modelo
MA057; microscpio tico da marca Cari Zeiss Jena modelo EPIVAL; microscpio
MATERIAL EMTODOS
35
tico da marca Olympus modelo BX40; classificador por srie de peneiras da marca
Singer; dessecador, Soxhlet, tacmetro, ferramentas e vidraria em geral.
3.5 - Procedimento Experimental
3.5.1 - Extrao do Corante do Ariolo da Semente do Urucum
No presente trabalho foram estudadas duas rotas de extrao dos corantes do

urucum: extrao via seco utilizando moinho de bolas e extrao via a mido,
utilizando agitao mecnica. Nesta ltima, duas fases lquidas foram utilizadas: gua e
etanol.
3.5.1.1 - Extrao por Moinho de Bolas
Um esquema do equipamento utilizado ilustrado na Figura 9, onde

apresentado um corte lateral do moinho de bolas podendo-se observar a representao
da mistura de bolas e sementes no seu interior. O moinho tem forma cilndrica com o
raio (R) igual a 8,75 cm e comprimento igual a 18,5 cm. O equipamento operado a
uma rotao (N) de 33 rpm, sendo selecionada uma relao da carga de sementes e bolas
de 1:1 em volume. O tamanho das bolas foi variado, sendo que 80% das mesmas tem
um dimetro de 5 cm e 20% um dimetro de 4 cm. A massa especfica das bolas
utilizadas de l,7g/mL e sua composio a alumina.
36
MATERIAL E MTODOS
S8meiYtee
de urucum
Esferas de
Alumina
(a)
Figura 9 - a) Representao da Vista Interna de um Moinho de Bolas Carregado

com Sementes de Urucum; b) Vista Frontal do Moinho Fechado
A umidade das sementes deve ser previamente determinada, por estufa a 105 C
durante 24 horas, resfriadas em dessecador e pesadas (NORMAS ANALTICAS DO
INSTITUTO ADOLFO LUTZ, 1985). O procedimento deve ser repetido at obter peso
constante. Os clculos do rendimento devem ser feitos em base seca.
Os seguintes parmetros foram investigados na extrao dos corantes do
urucum, utilizando-se moinho de bolas:
1 - Rendimento total da extrao, definido pela relao:
Massa Total de Extrato
x 100
Massa de Sementes
(3.5.1.1-1)
2 - Classificao granulomtrica do extrato obtido, atravs da utilizao de

peneiras vibratrias, nas seguintes faixas granulomtricas: inferior a 10, de 10 a 48, de
48 a 60, de 60 a 80, de 80 a 100 e de 100 a 250 Mesh.
3 - Rendimento da extrao por faixa granulomtrica definido pela relao:
Massa na Frao i x)QQ
Massa de Sementes
(3.5.1.1-2)
37
MATERIAL E MTODOS
4 - Concentrao de bixina nas diversas fraes granulomtricas obtidas.

5 - Rendimento expresso em percentual de norbixina por frao granulomtrica.
6 - Tempo de operao do moinho de bolas, sendo selecionados os seguintes
intervalos: 0,5; 1; 2; 3; 4; 8 e 12 horas.
7 - Tempo de estocagem das sementes. Sero utilizados lotes de sementes com 5
e 1 ano de estocagem e outras recentemente adquiridas no mercado, com 3 e 1 ms de
estocagem.
3.5.1.2 - Classificao Granulomtrica
A classificao granulomtrica foi realizada utilizando-se um classificador de

peneiras, com velocidade de vibrao na posio 60. Na Figura 10 apresentado um
desenho esquemtico do classificador por srie de peneiras usado no experimento.
Tampa do
peneirador
Peneiras
Controlador da
velocidade de
vibrao
Fundo do
peneirador
Figura 10 - Classificador por Srie de Peneiras
38
MA TERIAL E MTODOS
3.5.1.3 - Extrao por Agitao Mecnica
O procedimento experimental adotado descrito a seguir:
umidade
dos
extratos
concentrados
obtidos
deve
ser
determinada
posteriormente, sendo todos os clculos de percentual de norbixina efetuados em base

seca. pesado um volume equivalente a 300 mL de amostra de sementes em triplicata.
Esta massa foi dimensionada de modo a ocupar aproximadamente 1/6 do volume total,
do Becker para agitao. Adiciona-se ao volume de sementes duas vezes o seu volume
de lquido (gua ou etanol), iniciando-se o processo de agitao.
A suspenso separada das sementes atravs de uma peneira de 10 Mesh, e

transferida para uma proveta de 1000 mL, para sedimentao. Aps este processo, a fase
diluda separada por sifonao e o espessado seco em estufa a 60C.
principal corante extrado, quando se utiliza solventes orgnicos a bixina. Os
processos de extrao que utilizam solues alcalinas extraem como corante principal a
norbixina. Nestes processos so empregados solues de hidrxido de sdio, hidrxido
de potssio e carbonato de sdio.
A simples imerso das sementes numa fase lquida
como a gua, na qual a
bixina praticamente insolvel, seguida de uma agitao vigorosa, suficiente para

ocasionar o desprendimento dos corantes da semente e gerar uma suspenso na fase
lquida. Esta suspenso pode ser decantada e o concentrado de corante recuperado.
39
MATERIAL EMTODOS
Visando-se obter o concentrado de corante de urucum, isento de contaminantes

oriundos do processo de extrao por solventes, optou-se por investigar dois processos
de extrao a mido: utilizando gua e utilizando etanol absoluto.
Um esquema do equipamento utilizado (agitador mecnico) ilustrado na Figura

11. Nos experimentos realizados, a velocidade de rotao foi mantida constante, N
(nmero de rotaes) = 540 rpm, sendo que a relao volumtrica de sementes por
solvente utilizado foi respectivamente de 1:2. Os solventes usados nos experimentos
foram gua destilada e etanol absoluto. O tanque de agitao usado nos experimentos
possui um raio r = 7 cm e comprimento de L = 19 cm (volume de 2000 mL). A hlice
utilizada no agitador foi a do tipo naval. O tempo de agitao foi variado de 0,25 a 4
horas. A temperatura foi mantida constante em 25 C.
Figura 11 - Agitador Mecnico
MA TERIAL E MTODOS
40
Os seguintes parmetros foram analisados no processo de extrao por agitao

mecnica:
1 - Rendimento total da extrao.
2 - Classificao granulomtrica do extrato obtido.
3 - Rendimento da extrao por faixa granulomtrica.
4 - Concentrao de norbixina nas faixas granulomtricas.
5 - Tempo de agitao (2 e 4 horas para a gua e 0,25; 0,5 e 2 horas para o
etanol).
6 - Tempo de sedimentao e concentrao do espessado.
7 - Efeito do tempo de infuso das sementes na fase lquida (0; 1; e 4 horas para
a gua e 0; 0,5 e 4 horas para o etanol).
Com objetivo de aumentar o rendimento do processo, realizaram-se testes de

extrao de corantes de urucum com gua e etanol deixando as sementes em infuso
durante um tempo determinado. Depois deste tempo de infuso, as sementes foram
levadas agitao.
3.5.1.4- Sedimentao do Concentrado de Urucum
Utilizando uma proveta de 1000 mL, realizaram-se os ensaios de sedimentao

com a suspenso de concentrado de corante de urucum obtido na extrao com gua e
etanol. Colocou-se rapidamente a suspenso na proveta, determinando a altura de
espessado em relao a um referencial. Um esquema deste ensaio apresentado na
Figura 12.
41
MATERIAL EMTODOS
Aps a sedimentao completa do extrato, o sobrenadante foi removido e o

espessado foi seco em estufa temperatura constante de 60 C. O extrato seco foi
pulverizado em almofariz e armazenado sob refrigerao a 9 C.
Sobrenadante
!
i
Altura do
Espessado
Figura 12 - Ensaio de Sedimentao da Suspenso de Concentrado de Urucum
3.5.2 - Projeto do Sedimentador
Na literatura vrios mtodos para o projeto de sedimentadores so encontrados,

como o Mtodo de Coe e Clevenger, Talmadge e Fifch, Kynch e Roberts (GOMIDE,
1980 e FOUST, 1982).
O sedimentador projetado visa separar as partculas contendo alto teor de bixina,

do etanol utilizado como solvente do misturador.
O ensaio de sedimentao foi realizado com uma suspenso de partculas, obtida

no processo de extrao por agitao mecnica conforme descrita nas sees anteriores.
42
MA FERIAL E MTODOS
A suspenso foi transferida para uma proveta de 1000 mL, medindo-se a variao da
altura Z da superfcie de separao entre o lquido clarificado e a suspenso, em funo
do tempo. O resultado deste ensaio viabiliza o dimensionamento do sedimentador.
O mtodo utilizado para o projeto do sedimentador o de Kynch (GOMIDE,

1980), que utiliza a Equao (3.5.2-1).
S =
QAC a
c c
(3.5.2-1)
onde,
r
Area de sedimentao (m~), seo transversal do sedimentador;
Qa
Vazo volumtrica da suspenso alimentada no sedimentador ( m 3j h );
CA
Concentrao de slidos na suspenso alimentada no sedimentador ( K g /
Cg
Concentrao da lama espessada ( K g / m 3 );
Concentrao da suspenso na zona limite ( K g / m 3 );
ii
Velocidade de sedimentao na zona limite (m/ h) .
);
Com os valores correspondentes de C e u determinados experimentalmente,

diversos clculos de S so feitos com pares de valores dessas grandezas e o maior valor
encontrado ser a rea mnima requerida para a sedimentao.
Tanto a concentrao C como a velocidade de sedimentao u podem ser

tirados diretamente da curva de sedimentao Z versus 0 (tempo), obtida do ensaio
realizado, conforme as Equaes (3.5.2-2) e (3.5.2-3), respectivamente. Traam-se
43
MA TERIAL E MTODOS
tangentes em diversos pontos da curva e determinam-se os valores de 6 , Z e Z h como

ilustra a Figura 13. Para possibilitar o clculo da tangente de forma exata, os pontos da
curva de sedimentao foram linearizados de forma a obter uma equao polinomial de
sexto grau. Esta equao foi ento derivada, possibilitando um clculo mais preciso da
derivada nos pontos desejados.
_ *7-*0C 0
Zt
(3.5.2-2)
dZ
Z i-Z
dO
(3.5.2-3)
Figura 13 - Determinao grfica de C e u pelo mtodo de Kynch
3.5.3- Purificao da Bixina
O extrato obtido nos processos de extrao contm impurezas agregadas aos

corantes, como por exemplo celulose e pequenos fragmentos de sementes. O processo
44
MA TF.RIAL E MTODOS
de purificao consiste na solubilizao do concentrado em cido actico glacial,

aquecimento para facilitar a solubilizao e filtrao a quente da soluo para a remoo
das partculas insolveis. A soluo filtrada resfriada para ocasionar a cristalizao da
bixina. Os cristais so separados, lavados com gua destilada e secos.
A Figura 14 ilustra o equipamento utilizado no processo de purificao do

concentrado de urucum. O equipamento consiste em uma manta de aquecimento e um
balo de fundo redondo com um condensador acoplado. O balo possui uma sada
lateral na qual conectada um tubo de vidro que fica em contato com a soluo do
balo. Este tubo de vidro por sua vez conectado a um filtro sinterizado unido um
kitazato, que est conectado a uma bomba de vcuo atravs de um sistema de reteno
de cido actico, envolvido por um banho de gelo.
Figura 14 - Equipamento Utilizado no Processo de Purificao do

Concentrado de Urucum
Outro processo de purificao do concentrado de urucum consiste em se

dissolver o concentrado em uma soluo de NaOH 0,1N para a solubilizao da bixina e
MATERIAL EMTODOS
45
posterior precipitao desta com o auxlio de uma soluo de HC1. O precipitado ento
centrifugado, lavado com gua destilada e seco.
3.5.4 - Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC)
A cromatografia lquida de alta eficincia, permite algumas vantagens no que diz

respeito degradao da amostra durante a anlise, evitando alguns problemas como a
decomposio fotoqumica, oxidativa e trmica aos quais os pigmentos esto sujeitos na
cromatografia de camada delgada. A decomposio fotoqumica eliminada porque a
separao ocorre em uma coluna de ao inoxidvel. A decomposio oxidativa
minimizada porque a separao ocorre relativamente rpida e tambm porque o
oxignio removido da fase mvel durante o processo de desgaseificao (ROUSEFF,
1988). A degradao trmica evitada pois a separao pode ser realizada a baixas
temperaturas.
Seguindo a tcnica descrita por BARONCELLI et al. (1997), foi utilizado um

sistema isocrtico, coluna Nucleosil 120-5 C18 (250 X 4,6 mm) e pr-coluna Nucleosil
5 C18 120 (30 X 4,6 mm), deteco UV-Visvel a 405 nm, fase mvel:
metanol:gua:cido actico (87:12:1) a 1 mL/min.
Outra tcnica utilizada, descrita por ROUSEFF (1988), consiste na separao

isocrtica utilizando como fase mvel tetrahidrofurano:gua (58:42) a lmL/min, coluna
Nucleosil 120-5 C18 (250 X 4,6 mm) e pr-coluna Nucleosil 5 C18 120 (30 X 4,6 mm),
deteco UV-Visvel a 464 nm.
MA TERIAL E MTODOS
46
3.5.5 - Teor de Bixina nos Extratos
Para determinao do teor de bixina foi feita uma adaptao do mtodo descrito
porKATO etal. (1992).
Pesou-se uma amostra de 0,05 g e dissolveu-se em 500 mL de uma soluo de

NaOH 0,1 N. Trs alquotas no mnimo, foram transferidas para bales volumtricos de
100 mL, completando o volume com soluo de NaOH 0,1 N, fazendo-se a curva de
calibrao, com leitura em espectrofotmetro a 480 nm, utilizando-se um coeficiente de
extino de 2870 para a obteno do percentual de norbixina. Para a converso deste
percentual em bixina, o fator de converso igual a 1,037.
A Equao (3.5.5-1), originria da lei de Beer, pode ser escrita para X (% de

norbixina em massa), considerando as diluies efetuadas.
X= f
-IA
Ej xm dc d,
(3.5.5-1)
Onde:
m = massa da amostra (0,05 g)
V = volume inicial de extrao (500 mL)
Vi = o volume de diluio (100 mL)
di = volume da alquota para a diluio
A = absorbncia lida pelo espectrofotmetro no comprimento de onda de 480
nm
E|* = coeficiente de extino molar (2.870)
dc = dimetro da clula de medida (1,0 cm)
MATERIAL EMTODOS
47
3.5.6 - Caracterizao do leo quanto aos cidos Graxos
Para se caracterizar os triglicerdeos presentes nas amostras de leo, determinase inicialmente a composio em cidos graxos por cromatografia gasosa. As amostras
de leo so submetidas esterificao para sntese de steres metlicos, segundo SILVA
(1973).
No presente trabalho a anlise da composio dos cidos graxos foi realizada

pela empresa Perdigo, localizada no municpio de Videira/SC.
3.5.7 - Determinao de Bixina na Semente
descrito a seguir o mtodo de YABUCU e TAKAHASHI (1992).
Uma massa de 100 g de sementes foram modas em um moinho de facas ou

equivalente. Pesadas com preciso de mg, cerca de 2 gramas da semente moda foram
transferidas para um Erlenmeyer de 300 mL. Foram adicionados 100 mL de clorofrmio
com agitao vigorosa durante trs minutos. Filtrou-se atravs de l de vidro, recebendo
o filtrado em balo volumtrico de 250 mL. O resduo e a l foram retornados e
reextrados com 50 mL de clorofrmio. Filtrou-se em l de vidro, recebendo o filtrado
no mesmo balo volumtrico. O procedimento de extrao foi repetido com alquota de
50 e 30 mL de clorofrmio ou at a extrao completa dos pigmentos. O volume foi
completado com clorofrmio at 250 mL.
MA TERIAL E MTODOS
48
Uma alquota de 10 mL foi transferida para um balo volumtrico de 100 mL.

Completou-se o volume com clorofrmio. Uma alquota de 10 mL foi diluda com
clorofrmio em balo volumtrico de 100 mL. A leitura foi feita em espectrofotmetro a
470 nm, usando clorofrmio como branco.
A concentrao da bixina foi encontrada usando-se o coeficiente de extino:
lcm
3.5.8 - Determinao de Norbixina na Semente
O mtodo utilizado para a determinao de norbixina foi desenvolvido por

YABIKU e TAKAHASHI (1992).
Cerca de 25 g de sementes foram pesadas com preciso de mg em um

Erlenmeyer de 500 mL. Foi adicionado 150 mL de soluo de KOH a 5%, fervente.
Aquecido ebulio por um minuto e resfriado em gua corrente. Filtrou-se atravs de
l de vidro para um balo volumtrico de 1000 mL e o resduo foi lavado com 100 mL
de gua destilada. O processo de lavagem foi repetido por mais sete vezes e completado
o volume com gua destilada. Uma alquota de 2 mL dessa soluo foi transferida para
um balo volumtrico de 1000 mL, completando-o com soluo de KOH a 0,5%. A
leitura foi feita em espectrofotmetro a 423 nm, em cubeta de 1 cm de percurso ptico,
usando como branco a soluo de KOH a 0,5%.
MATERIAL E MTODOS
49
A concentrao de norbixina foi encontrada usando-se o coeficiente de extino:

E = 3473.
lcm
A percentagem de norbixina encontrada multiplicada pelo fator 1,037 d o

percentual de bixina.
3.5.9 - Determinao de Umidade
Uma massa de 2 gramas da amostra foi pesada em placa de Petry, previamente

aquecida em estufa a 105 C por 24 horas, resfriada em dessecador at a temperatura
ambiente e pesada. Aqueceu-se durante 24 horas em estufa a 105 C e resfriou-se em
dessecador at a temperatura ambiente e foi pesado. As operaes de aquecimento em
estufa e resfriamento em dessecador foram repetidas at peso constante. O clculo foi
feito da seguinte forma: Umidade% = ^
X^ , onde N a massa em gramas de
umidade e P a massa em gramas da amostra.
3.5.10 - Determinao de Cinzas
Cinzas ou resduo por incinerao o nome dado ao resduo obtido por

aquecimento de um produto em temperatura prxima a 550-570 C. Nem sempre este
resduo representa toda a substncia inorgnica presente na amostra, pois alguns sais
podem sofrer reduo ou volatilizao nesse aquecimento.
MATERIAL EMTODOS
50
Geralmente, as cinzas so obtidas por ignio de quantidade conhecida da

amostra, entre 1 e 5 gramas, em cadinho ou cpsula de platina, porcelana ou outro
material resistente ao calor, mantida em mufla a 550 C, at eliminao completa do
carvo. As cinzas devero ficar brancas ou ligeiramente acinzentadas; em caso
contrrio, esfriar, adicionar 0,5 mL de gua, secar e incinerar novamente. Algumas
gotas de azeite comestvel, adicionadas inicialmente amostra, facilitam a
carbonizao.
Muitas vezes vantajoso combinar a determinao direta de umidade e a

determinao de cinzas, incinerando o resduo obtido na determinao de umidade.
Procedimento:
Uma massa de 5 gramas da amostra foi pesada em cpsula de porcelana,

previamente aquecida em mufla a 550 C, resfriou-se em dessecador temperatura
ambiente e pesou-se. Foi feita uma secagem em estufa, carbonizao em temperatura
baixa e incinerao em mufla a 550 C. Resfriada em dessecador at a temperatura
ambiente a amostra foi pesada. As operaes de aquecimento em mufla e resfriamento
em dessecador foram repetidas at a verificao de peso constante. O clculo foi feito
da seguinte forma: Cinzas % =
^ orK}e M a massa em gramas de cinzas e B a
massa em gramas da amostra.
A seguir sero apresentados e discutidos os principais resultados alcanados no

presente trabalho.
RESUL TADOS E DISCUSSO
51
4 - RESULTADOS E DISCUSSO
4.1 - Extrao Mecnica por Moinho de Bolas
As principais vantagens da extrao mecnica em relao extrao por

solvente so: a obteno do extrato de bixina sem a extrao de outras substncias como
os glicdios que agem como impurezas no concentrado de corante; a no utilizao de
solventes, evitando a combinao destes no extrato; a no necessidade de separar o
solvente do extrato; e tampouco efetuar o processo de secagem do mesmo aps a
extrao. A no necessidade de separar o solvente do extrato de especial interesse
pois, alm de reduzir o custo do processo, ainda preserva o extrato da degradao
trmica, ocasionada pela temperatura elevada do processo de recuperao do solvente.
Um parmetro bastante importante nessa operao a taxa de fratura das

sementes no moinho. Esta taxa deve ser a menor possvel, de tal forma que os
fragmentos da semente no venham a estar presente na massa de extrato, constituindose impurezas no concentrado do corante de urucum.
52
Na operao de extrao mecnica do corante de urucum utilizando o moinho de

bolas, obteve-se como produto um extrato com variada faixa granulomtrica. Com o
objetivo de determinar as faixas granulomtricas das partculas presentes no extrato
obtido, realizou-se a classificao das mesmas pelo processo de peneiramento.
As partculas obtidas foram classificadas em seis faixas granulomtricas

definidas que so: inferior a 10, de 10 a 48, de 48 a 60, de 60 a 80, de 80 a 100 e de 100
a 250 Mesh. Observou-se que no houve formao de partculas suficientemente
pequenas para passar pela peneira de 250 Mesh.
A diferena entre as sementes caracterizada pelo seu tempo de estocagem.

Nesta etapa so utilizadas sementes com cinco anos e um ano de estocagem, que so
denominadas de sementes A qB, respectivamente.
A relao de carga de sementes e carga de bolas utilizada no presente trabalho

foi de 1:1 (v/v).
A Tabela 5 apresenta os resultados dos experimentos com o moinho de bolas,

onde variou-se o tempo de processamento e os lotes das sementes, determinando-se
para cada caso a massa das partculas nas diversas faixas granulomtricas.
53
Tabela 5 - Massa Obtida em Cada Frao Granulomtrica

Massa em ramas
jeute
T{h) < 1 0 # i i l l l l l i 4860# 608 0 # m loo # 100250 #
0,5
795,71
9,22
4,50
1,90
2,20
1.60
in
762,31
17,60
4,90
2*6
2,20
2,10
2,0
741,11
30,37
11,05
4,37
1,65
0,88
1 1 1 1 2,0
A
3,0
757,91
30,94
9,77
|l l l l i l l
4,09
0,80
644,41
52,00
18,95
7,98
5,99
0.87
4,0
489,61
79,1?
21,26
7,47
10,27
4.39
8,0
520,41
152,69
13,89
24,54
13,57
40,84
12,0 432,21
212,03
40,03
42,20
55S5G
51,10
I I I ! ! 562,91
65,32
12,95
7,53
13,93
10,09
3*0
532,91
49,94
10,32
7,16
14J 3
14,86
3,0
607,81
56,70
9,40
7,00
12,20
10,10
4,0
532,71
73,00
16,45
9,63
17,23
11,07
5,0
506,41
77,68
29,41
7,89
23,76
19,65
#Mesh
Os valores mssicos das faixas granulomtricas da Tabela 5 foram

transformados em valores percentuais, sendo feitas mdias dos resultados dos
experimentos com o mesmo tempo de moagem, separando as sementes A e B. Estes
resultados so apresentados nas Tabelas 6 e 7, respectivamente.
Tabela 6 - Distribuio Percentual Mdia Mssica das Fraes Obtidas no

Peneiramento das Sementes A
T(h) < 1 0 # 104 8 # 4860 # 6080 # 80100# 100250#
0,5
97,62
1,13
1111 96,29 l l p l l i l
0,55
0,23
0,27
0.20
0,62
0,33
0,28
0,27
93,80
3,84
1,30
0,60
0,36
0.11
H l
&4*-80
10,34
2,74
1,09
0,89
0.14
RESULTADOS E DISCUSSO
54
Tabela 6 - Continuao
T(h> < n # O 4&0 4a6 0 # 60#0 # 80300 1002S0#
4
91,65
5,12
1,95
0,65
0,55
0.08
67,94
19,93
1.81
3,20
1,77
5.33
12
51,88
25,45
4.81
5,07
6,66
6,13
# Mesh
Tabela 7 - Distribuio Percentual Mdia Mssica das Fraes Obtidas no

Peneiramento das Sementes B
Th) < 1 0 # 1048# 486 0 # 6080 # 80100# 100250#
2,5
83,68
9,71
1,92
U12
2,07
1.50
85,61
8,00
1,48
1,06
1,98
1.87
80,70
11,06
2,49
1,46
2,61
1,68
76, i 7
11,68
4,42
1,19
3,57
2,96
# Mesh
Na Figura 15 apresentado o percentual mdio de norbixina por faixa

granulomtrica das sementes utilizadas, e podemos concluir que o percentual de
norbixina extrado das sementes no moinho de bolas est diretamente relacionado com o
tempo de estocagem das sementes.
Este comportamento observado devido instabilidade deste composto.

descrito em artigos da literatura que a bixina extremamente sensvel luz e calor,
sofrendo assim degradao quando submetida ao destes agentes. Para minimizar
este efeito, deve-se controlar as condies de estocagem das sementes, minimizando, o
55
mximo possvel a exposio das mesmas luz e temperaturas superiores a 60 C,

assim como a condio de umidade excessiva.
Figura 15 - Concentrao de Norbixina nos Extratos de Urucum Obtidos

Mecanicamente
Os estudos realizados por NAJAR et al. (1988) mostraram que o extrato de

urucum tem uma estabilidade considervel oxidao pelo ar em meio anidro, mas uma
resistncia mais baixa aos efeitos da luz os quais so proporcionais a intensidade da luz.
CARVALHO et al. (1993) estudaram a degradao de um corante slido obtido

por extrao alcolica das sementes de urucum, em embalagens com diferentes taxas de
permeabilidade ao oxignio, a temperatura de 30 C, por um perodo de 368 dias,
concluindo que materiais de embalagens com taxas de permeabilidade ao oxignio de
at 42 cm3 (CNTP)/m2/dia a 25 C conferiram adequada proteo ao produto durante um
ano de estocagem a 30 C e 90% UR na ausncia de luz. Tal barreira ao oxignio pode
56
ser obtida com estruturas co-extrusadas ou laminadas de nylon e polietileno de baixa

densidade.
A Figura 16 ilustra a relao entre o tempo de residncia das sementes A no

moinho de bolas e o percentual mssico de cada frao granulomtrica. Pode-se
observar que a medida que o tempo de residncia das sementes no moinho de bolas
aumenta, a frao mssica <10 Mesh cai de maneira acentuada, sendo que as massas das
fraes superiores a 10 Mesh, aumentam de maneira a manter a massa total constante. E
importante ressaltar que a frao mssica de granulometria <10 Mesh corresponde s
sementes, e as demais fraes correspondem massa de extrato obtida atravs do atrito
e massa de partculas resultantes da quebra das sementes. A quebra das sementes por
sua vez no um fator desejado pois a mesma acaba por gerar finas partculas de
material celulsico que funcionam como impurezas do extrato obtido.
100
26
24
<10 Mesh
- - 1 0 - 4 8 Mesh
22
20
- - 4 8 - 6 0 Mesh
60-80 Mesh
18
16 re
80-100 Mesh
14 jg H100-250 Mesh
to
S
Figura 16 - Relao entre Tempo de Residncia das Sementes no Moinho

de Bolas e Distribuio Granulomtrica Mssica das Sementes A
57
O mesmo tipo de tratamento grfico dos dados foi feito para as sementes B,
como apresentado na Figura 17.
Figura 17 - Relao entre Tempo de Residncia das Sementes no Moinho de

Bolas e Distribuio Granulomtrica Mssica das Sementes B
Com a finalidade de verificar a influncia do tempo de estocagem das sementes

com a distribuio granulomtrica durante o processo de extrao mecnica no moinho
de bolas, comparando-se os grficos da Figura 16 (sementes A - 5 anos de estocagem) e
da Figura 17 (sementes B - 1 ano de estocagem), podemos concluir que a distribuio
granulomtrica das partculas na extrao mecnica de sementes de urucum no
depende significativamente do tempo de estocagem. Esta afirmao vlida no
intervalo de tempo de estocagem das sementes estudado que de 1 a 5 anos.
Com o objetivo de analisar o processo em termos de percentual de norbixina

extrado em funo do tempo de residncia das sementes no moinho de bolas, so
58
apresentadas as Figuras 18 e 20. importante ressaltar que os percentuais de norbixina

apresentados neste grfico dizem respeito ao percentual total de norbixina extrado em
todas as fraes granulomtricas, em relao massa de sementes, na unidade de tempo.
Observa-se que a medida que o tempo de residncia das sementes no moinho de

bolas aumenta, tambm aumenta o percentual mssico de norbixina extrada. As Figuras
19 e 21
mostram
esse mesmo
comportamento
para cada uma das
fraes
granulomtricas.
Figura 18 - Percentual de Norbixina em Relao a Massa de Sementes em Funo

do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas (Sementes ,4)
59
- - 1 0 - 4 8 Mesh
0,25 -
48-60 Mesh
... x 60-80 Mesh
...X '" 80-100 Mesh
100-250 Mesh
Figura 19 - Percentual de Norbixina em Relao ao Percentual Mssico das

Fraes Granulomtricas em Funo do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas
(Sementes A)

do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas (Sementes B)
60

do Tempo de Residncia no Moinho de Bolas para cada Faixa Granulomtrica
(Sementes B)
Na Figura 18 observa-se um baixo percentual de norbixina extrada na unidade

de tempo quando comparado Figura 20, onde os percentuais so maiores. O percentual
de norbixina extrada na unidade de tempo pode ser determinado pelo coeficiente
angular da reta ajustada pelos pontos experimentais nas Figuras 18 e 20, Logo, para as
sementes A (5 anos de estocagem), a taxa de extrao de norbixina de 0,052% em
relao a massa de sementes por hora de residncia no moinho de bolas e para as
sementes B (1 ano de estocagem), a taxa de extrao de norbixina de 0,189% em
relao massa de sementes por hora de residncia no moinho de bolas (considerando
um ajuste da curva nos tempos de 3, 4 e 5 horas de extrao). Assim, a taxa de extrao
de norbixina superior a 3 vezes nas sementes B onde o tempo de estocagem menor.
Portanto, quanto menor for o tempo de estocagem das sementes, maior ser
percentagem de norbixina nas mesmas, resultando em uma maior percentagem deste

composto no extrato obtido.
61
Uma importante observao que o maior percentual de norbixina encontrado

nas fraes de menor granulometria, ou seja, na faixa granulomtrica de 100-250 Mesh.
Este comportamento observado devido ao fato que nas fraes granulomtricas de
maior tamanho de partcula, h presena de muitas partculas provindas da quebra das
sementes. Como, nesta anlise, o percentual de norbixina calculado em relao
massa de cada frao obtida, pode-se afirmar que quanto maior o nmero de partculas
provindas da quebra das sementes, menor ser o percentual de norbixina na frao em
questo. Os resultados experimentais do exposto acima so apresentados nas Figuras 22
e 23. Atravs destes grficos, pode-se confrontar o percentual de norbixina nas fraes
em relao ao percentual mssico de extrato em cada frao, nos diferentes tempos de
extrao.
Sementes A
-0,5 horas
-1 hora
2 horas
- 3 horas
Figura 22 - Distribuio Granulomtrica Percentual em Funo do Percentual de

Norbixina dos Extratos Obtidos por Extrao Mecnica (Sementes A) por Tempo
de Extrao
62
Sementes B
-2,5 horas
-3 horas
horas
14
0
**
12
10 -
LU
...5 horas
tn
I
S
E
a>
5?
6
4
2 -
-v'/'/
881
abaixo de
48 Mesh
entre 48 e
60 Mesh
0,83%
3,37%
entre 60 e
80 Mesh
5,9
7
8
9
10
entre 80 e entre 100 e
100 Mesh 250 Mesh
8,59%
9,53%
Figura 23 - Distribuio Granulomtrica Percentual em Funo do Percentual de

Norbixina dos Extratos Obtidos por Extrao Mecnica (Sementes B ) por Tempo
de Extrao
Nas fraes de maior granulometria, tambm podemos encontrar quantidades

apreciveis de norbixina, porm estas quantidades no podem ser aproveitadas
diretamente, pois esto em combinao com uma massa relativamente grande de outros
materiais, como celulose e cinza mineral. Por exemplo, observando a Figura 23, em 5
horas de extrao mecnica, obtm-se uma massa de 12 % de extrato de granulometria
abaixo de 48 Mesh, porm somente cerca de 1% dessa massa norbixina, o restante
pode ser considerado impureza. Esta massa de norbixina para ser utilizada ter que ser
separada da massa de impurezas, dependendo da sua aplicao.
Pode-se ento afirmar que, quanto maior for o tempo de residncia das sementes
no moinho de bolas, maior ser a massa de extrato obtido. Aps o processo de
classificao das partculas, a frao de menor granulometria, entre 100 e 250 Mesh, a
que apresenta maior concentrao de bixina. Portanto, quando se requer alto teor do
63
corante, as outras faixas granulomtricas necessitaro passar por outro processo de

extrao, por apresentarem baixos teores de bixina, o que ocasiona uma elevao de
custo do processo.
4.2 - Extrao por Agitao Mecnica
4.2.1 - Extrao Utilizando gua
Conforme descrito no captulo de Material e Mtodos, primeiramente realizou-se

a extrao do concentrado de urucum com gua. As sementes utilizadas foram as com
tempo de estocagem de 3 meses e 1 ms, denominadas sementes C e D,
respectivamente. Na Tabela 8 so apresentadas as condies de operao das corridas
experimentais onde foi variado o tempo de agitao.
Para cada condio operacional os seguintes resultados foram avaliados: massa

de extrato concentrado, percentual de norbixina no extrato, umidade, rendimento
mssico e rendimento da extrao, dados pelas Equaes (4.2-1) e (4.2-2),
respectivamente. A velocidade de agitao foi de 540 rpm, a hlice utilizada foi a do
tipo naval e os volumes de 300 e 600 mL para carregamento de sementes e gua,
respectivamente.
n
/
.
Massa Extrato Concentrado
% Rendim.Massico = ----------------------------------x 100
Massa de Sementes
_ 1N
(4.2-1)
n /
^
Massa Norbixina do Extrato Concentrado . . .

% Rendim.da Extrao =-------------------------------------------------- x 100
Massa Norbixina das Sementes
(4.2-2)
64
Tabela 8 - Rendimento e Condies de Operao da Extrao de Corantes de

Urucum com gua
Sementes T(h)
MS( g)
M (g )
% m
%NS
WKl
llllilllllll 2 212,4
i p n lllfill 220,5
1,43
11,88
0,67
0,08
1,65
4,86
5*00
10,77
2,27
0,24
1,65
14.83
206,6
11,32
19,98
5,53
1,09
2J1
51,80
2
Onde:
T = Tempo de agitao
MS = Massa de sementes
MC = Massa do concentrado aps secagem
%NE = Percentual de norbixina no concentrado (em base seca)
%RM = Percentual do rendimento mssico calculado como a razo entre a
massa do concentrado e a massa de sementes
%RN = Percentual do rendimento de norbixina calculado como a razo entre a
massa de norbixina (base seca) e a massa de sementes
%NS = Percentual de norbixina nas sementes
%RE = Percentual do rendimento de extrao calculado como a razo entre a
massa de norbixina no concentrado (base seca)e a massa de norbixina nas sementes
%U = Percentual de umidade no extrato concentrado
Na secagem do concentrado, devido formao de grumos, faz-se necessria

uma etapa de reduo destes agregados para um p finamente dividido. Esta etapa na
escala de bancada foi realizada com o auxlio de um almofariz.
Os particulados obtidos, de amostras dos processos que envolveram 2 e 4 horas

de agitao provenientes das sementes C, foram analisados aps o processo de reduo
do concentrado de urucum na forma de p finamente dividido, classificando estes
atravs de processos de peneiramento e concluiu-se que a variao da composio de
bixina nas fraes menores que 60 Mesh, entre 60 e 80 Mesh e entre 80 e 100 Mesh,
65
no apresentaram uma variao significativa possuindo uma concentrao mdia de

11,88% para o tempo de agitao de 2 horas e 10,78% para o tempo de agitao de 4
horas, conforme pode ser visto na Tabela 9 e na Figura 24.
Tabela 9 - Classificao Granulomtrica do Extrato de Urucum Extrado com

Agitao Mecnica Usando gua como Fase Lquida - Sementes C
< 60 Mesb
60 - 89 Mfcsh
T(h)
llllllllli
I p llllll
M(g)
%N
0,894
10,31
1,875
11,81
80 - 100 Mesb
%iN
M<g)
%N
0,134
11,63
0,185
13.69
0,596
10,29
0,145
10,23
Onde:
T = Tempo de agitao
M = Massa da frao
%N = Percentual de norbixina
Concentrao de Norbixina nos Extratos de Urucum Extrados

com gua
A
13,69
B 11,81
A 10,31
Abaixo
A 11,63
B 10,29
A gitao por 2
horas
Ag&&O por 4
1023
Enre
I P I
6060
SC 100
Figura 24 - Concentrao de Norbixina nos Extratos de Urucum Extrados com

gua - Sementes C
66
Comparando-se o tempo de agitao de 2 e 4 horas, verifica-se que, para as

sementes C, a agitao de 4 horas aumenta o rendimento da extrao em 3 vezes e o
rendimento mssico aumenta 3,4 vezes. Estes efeitos so apresentados na Tabela 10.
Tabela 10 - Efeito do Tempo de Agitao das Sementes C na Extrao com Agua

Tempo Agitao (h)
Rendimento Mssico %
0,67
2,27
RndinierttO Extrao %
4,86
14,83
% Norbix.(BS)
11,88
10,77
Com o objetivo de aumentar o rendimento do processo, realizaram-se testes de

extrao de corantes de urucum com gua deixando as sementes em infuso durante um
tempo determinado. Depois deste tempo de infuso, as sementes foram levadas
agitao, utilizando-se os mesmos parmetros do processo de extrao sem etapa prvia
de infuso. Os resultados desta anlise so apresentados nas Tabelas 11 e 12.
Tabela 11 - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes C na Extrao com gua e

Tempo de Agitao de 2 horas
Tempo Infuso (h)
Rendimento Mssico %
0,67
1,84
2,37
Rendimento Extrao %
4?86
23,95
22,06
% Norbix.(BS)
11,88
21,42
15.34
Tabela 12 - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com gua e

Tempo de Agitao de 2 horas
Tempo infuso (h)
Rendimento Mssico %
$?48
2,99
6,31
Rendimento Extrao %
51,80
20,9?
49,85
%Norbix,(BS)
19,98
14,81
16,71
67
Como pode ser visto nas Tabelas 11 e 12, o processo pode ser bastante
melhorado em termos de rendimento adotando-se uma etapa prvia de infuso. O
aumento do rendimento da extrao para as sementes C, em termos comparativos, de
um processo de extrao sem infuso em relao a um processo de extrao com tempo
de infuso de 1 hora de 5 vezes e o aumento do rendimento mssico de quase 3
vezes.
Adotando-se um tempo de infuso no processo de 4 horas, verifica-se uma

estabilidade no rendimento da extrao, comparado ao processo de infuso de 1 hora,
porm o rendimento mssico aumenta em 1 vez. J para as sementes Z), a infuso de 4
horas ocasiona um aumento nos rendimentos da extrao e mssico de mais de 2 vezes
comparado infuso de 1 hora.
Neste trabalho, o maior rendimento da extrao obtido utilizando gua como

fase lquida em um processo de infuso de 4 horas e agitao de 2 horas foi de 49,85%.
Em um processo semelhante, porm com agitao de 6 horas, as sementes foram
colocadas em contato com gua e esferas de vidro, sendo que BHALKAR e DUBASH
(1983) obtiveram um rendimento da extrao de 60,65%. Uma desvantagem da etapa de
infuso seria o desenvolvimento de fungos para um tempo muito grande de processo.
4.2.1.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum
Os valores obtidos de altura do espessado em funo do tempo so ilustrados na

Tabela 13 e apresentados na forma grfica nas Figuras 25 e 26. A Figura 27 mostra o
68
ensaio de sedimentao de uma amostra que sofreu infuso prvia de 4 horas. Estes
grficos so necessrios para o projeto do sedimentador de extrato, que ser visto no
item 4.4.
Tabela 13 - Altura do Espessado em Funo do Tempo para Sedimentao

do Extrato de Urucum em gua
Tempo (min) Ensaio 1 (cm) Ensaio 2 (m)
34,0
33,0
23,0
24.0
10
16,5
16,0
15
13,5
13,5
20
12,0
12.3
jgpfli
25
HlIB lllIlllliil
11,2
30
10,9
10,0
35
10,0
10,0
40
9,9
9,8
45
50
55
1 Im M g g m
9,2
11lilillililllli
60
9,0
9.0
8.9
8,6
o5
!! IIIHIBIlitt!
8,5
70
!!!!!!!l!lll!!llli!
8,4
75
WWmM
s .:
80
|l |;!!!!!!!!l!!!li!!!!
8.1
85
JO
7,8
11llflllllpllllllltll
7,7
100
7.6
110
7-5
120
IIII1II1IIIIIII11I llBIBBI
140
1! I llllllllllllllll
7,2
7,0
180
7.0
250
IIIIIH IIII
6.5
69
Sedimentao com gua - Ensaio 1
Tempo (mm)
Figura 25 - Altura do Espessado de Concentrado de Urucum versus Tempo do

Ensaio 1
Sedimentao com gua - Ensaio 2
T&mpo {min)

Ensaio 2
70
Sedimentao com gua de

Amostra que sofreu Infuso Prvia
Tempo (mm)

Ensaio - Infuso Prvia de 4 horas em gua
4.2.2 - Extrao Utilizando Etanol
Utilizando-se um procedimento anlogo extrao com gua, realizou-se a

extrao do concentrado de urucum com etanol absoluto. As sementes utilizadas foram
as com tempo de estocagem de 3 meses e 1 ms, denominadas sementes C e D,
respectivamente.
Os resultados experimentais so apresentados na Tabela 14, utilizando-se as

seguintes condies: volume de sementes igual a 300 mL, volume de etanol igual a 600
mL e agitao a 540 rpm com hlice do tipo naval.
71
Tabela 14 - Rendimento e Condies de Operao da Extrao de Corantes de

Urucum com Etanol
! I
T(h)
201,3
iiiiiiii
0,5
204,$
f l lll ll
220,7
7,7
27,86
3,49 24,28
13,43
3,83
27,50
!!!!!
0,25
:x:::x:x:xi&x::
iiifill
%RM i %RN %NS %RE
M C(g)
6,09
%i;
1,07
2,11
50,41
10,22
IM
2,11
47,62
st:u
1,67
2,11
79,18
7.25
Onde:
T = Tempo de agitao
MS = Massa de sementes
MC = Massa do concentrado aps secagem
%NE = Percentual de norbixina no concentrado (base seca)
%RM = Percentual do rendimento mssico calculado como a razo entre a
massa do concentrado e a massa de sementes
%RN = Percentual do rendimento de norbixina calculado como a razo entre a
massa de norbixina (base seca) e a massa de sementes
%NS = Percentual de norbixina nas sementes
%RE = Percentual do rendimento de extrao calculado como a razo entre a
massa de norbixina no concentrado (base seca) e a massa de norbixina nas sementes
%U = Percentual de umidade no extrato concentrado
Depois da etapa de agitao mecnica, o extrato em suspenso foi separado das

sementes atravs de peneirao com malha de 10 Mesh. Em seguida, a suspenso foi
colocada em uma proveta de 1000 mL para sedimentao do extrato, empregando-se os
mesmos procedimentos da extrao com gua.
Comparando-se o tempo de agitao do processo, verifica-se que para as

sementes D h um aumento de 1,6 vezes no rendimento da extrao e no rendimento
mssico, na agitao de 2 horas em relao a 0,25 horas, conforme mostra a Tabela 15.
72
Tabela 15 - Efeito do Tempo de Agitao das Sementes D na Extrao com Etanol

0,5
4,15
6,09
47,62
79*18
24,28
27,50
Tempo Agitao {h}

Rendimento Mssico %
3,83
Rendimento Ix tra a % 50,41

% Norbix.(BS)
27,86
O rendimento mssico na extrao com agitao de 2 horas foi de 6,09%,

utilizando sementes com 2,11% de norbixina. Em um processo semelhante,
PRENTICE-HERNANDEZ e RUSIG (1992) obtiveram 4,33% e 5,21% utilizando
sementes com 1,88% e 2,35% de bixina, respectivamente. BHALKAR e DUBASH
(1983) utilizaram uma soluo de clorofrmio a 25% em etanol numa relao de 1:4
(sementes:solvente) mantendo em agitao por 1 hora e substituindo o solvente a cada
hora, obtendo um rendimento da extrao de 76,48%. Neste trabalho o rendimento
mximo encontrado, utilizando como solvente apenas o etanol foi de 79,18% em um
processo de 2 horas de agitao.
Com objetivo de aumentar o rendimento do processo, realizaram-se testes de

extrao de corantes de urucum com etanol deixando as sementes em infuso durante
tempos determinados. Depois deste tempo de infuso, as sementes foram levadas
agitao, utilizando-se os mesmos parmetros do processo de extrao sem etapa prvia
de infuso. Os resultados so apresentados na Tabela 16.
RESUL TDOS E DISCUSSO
73
Tabela 16-A - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes C na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 0,5 horas
Tempo Infuso (li)
0,5
Rendimento Mssico %
4,21
4.30
Rendimento
&1,92
trao %
% Norbix. (BS)
32,06
26,39
Tabela 16-B - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 0,5 horas
Tempo Infuso (h)
0,5
Rendimento Mssico %
4,15
3.93
Rendimento Extrao %
47,62
4JM
% Norbix.(BS)
24,28
2 ' 741
Tabela 16-C - Efeito do Tempo de Infuso das Sementes D na Extrao com

Etanol e Tempo de Agitao de 2 horas
Tempo Infuso (h)
Rendimento Mssico %
6,09
4,90
Rendimento Extrao %
79,1-8
59,5 J
% Norbix.(BS)
27,50
25,67
Com base na Tabela 16, podemos observar que os valores dos rendimentos so
bem semelhantes, ou seja, na extrao de corantes de urucum com etanol no
vantagem adotar uma etapa de infuso antes da etapa de agitao. O desprendimento das
partculas do ariolo da semente ocorre rapidamente, no necessitando portanto desta
etapa de infuso.
74
4.2.2.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum
Os valores obtidos de altura,do espessado em funo do tempo so apresentados

na Tabela 17.
Tabela 17 - Altura do Espessado em Funo do Tempo para Sedimentao

de Extrato de Urucum em Etanol
Tempo (min) Ensaio 1 (cm) Tempo (min) Ensaio 2 (cm)
0
36,0
111I1111I1III111I
35,S
#11111
llliS Ilil
10
llllillll
34,3
,
>
/
5
14
W S
19
20
32,7
25
24
32,0
30
29
31,0
W rnm sm m
34
30,2
39
40
29,4
l
ll
l
ll
i ll l l l
44
28j5
49
50
27,5
54
llllillll:I lllilllii
74
60
22,6
91
20,3
65
70
114
16,8
IM IliM Illl
15,7
126
137
14,5
80
144
14,0
90
148
100
13,7
U0
m
12,5
169
221
12,2
244
188
11,0
191
301
10,8
301
226
400
500
5,0
30,Oi
29,0
28,0
28,0:
27,6
27.0
2(0
26.U
25,5
25,0
24.5
2 5:
23,0
2X 5!
22,0
2 \S
21,0
20,0
19,0
18,0
9,0
8.7
8,0
7,5
6,2
Os valores obtidos nos ensaios experimentais so apresentadois na forma grfica

nas Figuras 28a e 28b. Estes grficos so necessrios para o projeto do sedimentador de
extrato.
75
Sedimentao com Etanol - Ensaio 1
Tempo (min)
Figura 28a - Altura do Espessado de Concentrado de Urucum versus Tempo do

Ensaio 1
Sedimentao com Etanol - Ensaio 2
Tempo (min)
Figura 28b - Altura do Espessado de Concentrado de Urucum versus Tempo do

Ensaio 2
76
Aps a sedimentao completa do extrato, o sobrenadante foi removido e o

espessado foi seco em estufa temperatura de 60 C. O extrato seco foi pulverizado em
almofariz e colocado em dessecador.
Com os resultados obtidos na sedimentao, pode-se calcular a rea de um

sedimentador para uma dada capacidade de operao.
4.2.3 - Anlise Comparativa dos Rendimentos Obtidos nos Processos de

Extrao Investigados
Para que se tenha uma viso geral do processo de extrao por agitao
mecnica, os dados de percentuais de norbixina e percentual de rendimento de extrao
versus tempo total de processo so apresentados nas Figuras a seguir.
A Figura 29 ilustra os percentuais de nprbixina nos extratos obtidos no processo

de agitao mecnica utilizando gua e etanol como fase lquida, considerando o tempo
total de processo, ou seja, somando o tempo de agitao com o tempo de infuso. Na
Figura 30 tem-se um comparativo dos percentuais de rendimento de extrao,
considerando tambm o tempo total de processo.
Pelas Figuras 29 e 30, verifica-se um melhor rendimento nas extraes

utilizando como fase lquida o etanol, ficando em torno de 75% para as sementes C e
70% para as sementes D, com um percentual de norbixina mdio de 29% e 26%,
respectivamente, em um intervalo de 50 a 360 minutos de tempo total de processo.
77
Comparativos dos Percentuais de Norbixina nos Extratos

35
Extr.Agit.Mecnica
Sementes C-gua
30
Extr.Agit.Mecnica
Sementes C-Etanol
<o 25
c
Extr.Agit.Mecnica
Sementes D-gua
'><
S
20
- - M Extr .Agit.Mecnica
Sementes D-Etanoi
z 15
TdJ)
5- io
14,81
H,88
1077
0
50
100
150
200
250
300
350
400
Tempo Total de Processo (min)
Figura 29 - Comparativo dos Percentuais de Norbixina nos Extratos
Comparativos dos Percentuais de Rendimento de Extrao
Extr.Agit.Mecnica
Sementes C-gua
Extr.Agit.Mecnica
Sementes C-Etanol
Extr.Agit.Mecnica
Sementes D-gua
-X -" Extr.Agit.Mecnica
Sementes D-Etanol
Figura 30 - Comparativo dos Percentuais de Rendimento de Extrao
78
4.3 - Sedimentador Utilizando Etanol como Solvente
A concentrao de partculas alimentadas e retiradas do sedimentador so iguais

a 14,29 e 50,5 K g /m 3 , respectivamente. Estas concentraes so calculadas a partir
das Equaes (4.3-1) e (4.3-2).
A seguir o mtodo de Kynch ser aplicado para o projeto da rea do

sedimentador considerando-se o processo de extrao por agitao mecnica utilizando
etanol, conforme descrito anteriormente. Neste caso a massa de urucum ( M as) foi de
211,3 g, possuindo um rendimento de extrao ( R ) igual a 4,78%. A base de clculo
ser de 30 ton/ms de sementes de urucum.
CQ =
as
VT
= C0 = 211>3-00478 = c =0,01429g/mL => CD=14,29Kg/m3

700
o
o
(4.3-1)
911
CE = ---- ^
047R
----- => CE = 0,0505g/mL => CE = 50,5K g/m 3
(4.3-2)
A vazo de alimentao do sedimentador pode ser calculada conforme a

Equao (4.3-3), sendo igual a 0,63 m 3j h . Considera-se que a empresa opera 20 dias
por ms, com um expediente de 8 horas dirias. O volume especfico do etanol igual a
789,0 K g/m 3 .
= 30000.0,05 Kg_ J _ m l J_ms 1
0,019 ms 789 Kg 20 dias 8 h
=>
m, /h
79
A concentrao e a velocidade crtica foram encontradas pelo mtodo de

tentativa, onde utilizou-se o ensaio de sedimentao, apresentado na Figura 28a. A
concentrao C encontrada igual a 30,50K g /m 3 e a velocidade u igual a 0,01803
m/h.
Aplicando-se a Equao 3.5.2-1, tem-se que S = 6,48 m 2, dando um dimetro do

sedimentador igual a 2,88 m .
4.4 - Sedimentador Utilizando gua como Solvente
A concentrao de partculas alimentadas e retiradas do sedimentador so iguais

a 7,15 e 25,0 K g jm 3 , respectivamente. Estas concentraes so calculadas a partir das
Equaes (4.4-1) e (4.4-2).
Analogamente ao procedimento anterior, ser aplicado o mtodo de Kynch, para

o projeto da rea do sedimentador considerando-se o processo de extrao por agitao
mecnica utilizando gua. Neste caso a massa de urucum (M as) foi de 220,5g,
possuindo um rendimento de extrao (R ) igual a 2,27%. A base de clculo ser de 30
ton/ms de sementes de urucum.
M nvR
220,5 0 0227
.
, ,
C = - p - C = ---- ^ ------= C, =0,00715g/mL => C. =7,15Kg/m3
(4.4-1)
80
990 S O D997
C e = ---- L20----- : => C e = 0250g/ mL => C e = 25,0Kg/m3
(4.4-2)
A vazo de alimentao do sedimentador pode ser calculada conforme a

Equao (4.4-3), sendo igual a 0,56 m 3/ h . Considera-se que a empresa opera 20 dias
por ms, com um expediente de 8 horas dirias. O volume especfico da gua igual a
1000,0 K g/m 3 .
_ 30000.0,0227 Kg
1 m3 1 ms 1 dias -;>
Q. = 0,56 m3/h
~
0,00759
ms 1000 Kg 20 dias 8 h
(4.4-3)
A concentrao e a velocidade crtica foram encontradas pelo mtodo de

tentativa, onde utilizou-se o ensaio de sedimentao, apresentado na Figura 26. A
concentrao C encontrada igual a 20,34 K g /m 3 e a velocidade u igual a
0,0312tw//2.
Aplicando-se a Equao 3.5.2-1, tem-se que S = l,176m2, dando um dimetro
do sedimentador igual a 1,22 m .
4.5 - Anlise Espectrofotomtrica e Cromatogrfica - HPLC
A Figura 31 apresenta o espectro de absoro do padro de bixina em soluo de

NaOH 0,1 N. As absorbncias mximas foram 481 e 452 nm. As Figuras 32 a 35
apresentam a o espectro de absoro de vrias amostras em soluo de NaOH 0,1 N e a
Figura 36 apresenta o espectro de absoro das sementes D em soluo de KOH 0,5%.
81
As absorbncias mximas encontradas esto na Tabela 18. Os valores encontrados esto

de acordo com as absorbncias mximas encontradas por REITH e GIELEN (1971) e
SCOTTER et al. (1994).
E s p e c tro d e A b s o r o
Comprimento de onda (nm)
Figura 31
- Espectro de Absoro do Padro de Bixina em Soluo de NaOH

0,1N
E s p e c tro d e A b s o r o
Figura 32 - Espectro de Absoro de Extrato Concentrado Proveniente da

Extrao das Sementes D com Etanol com Agitao de 30 minutos
82
Espectro de Absoro
(100/div)
600

Extrao das Sementes D com gua com Infuso de 1 hora e Agitao de 2 horas
E s p e c tro de A b s o r o

Extrao das Sementes C com Etanol com Infuso de 30 minutos e Agitao de 30
minutos
83
Espectro de A bsoro

Extrao das Sementes C com gua com Infuso de 4 horas e Agitao de 2 horas
Espectro de Absoro
Figura 36 - Espectro de Absoro das Sementes D em soluo de KOH 0,5%
84
Tabela 18 - Absorbncias Mximas dos Espectros das Figuras 32 a 36

Figura
Absorbncia Mxima (nm)
iVIeio <le Leitura
Figura 32
481 e 453
Soluo de NaOH 0,1 N
Figura 33
48Ue 452
Soluo de NaOH 0 J N
Figura 34
481 e 453
Soluo do NaOH 0,1 N
Figura 35
481 c 453
Soluo de NaOH 0.1 N*
Figura 36
481 e 452
Soluo de KOH 0,5%
As Figuras 37 a 40 mostram os cromatogramas do padro de bixina e de

algumas amostras, utilizando-se como condio cromatogrfica a tcnica descrita por
BARONCELLI et al, 1997. Em seu artigo, a norbixina deveria ter um tempo de
reteno de cerca de 14 minutos, porm a realizada neste trabalho teve um tempo de
reteno de 24 minutos. Isto pode ser explicado devido sensibilidade das anlises
cromatogrficas, em que podem ocorrer mudanas significativas nos cromatogramas,
mesmo quando se tem pequenas diferenas na fase mvel, diferente marca de coluna e
do equipamento, etc.
Foi utilizado um sistema isocrtico, coluna Nucleosil 120-5 Cl 8 (250 X 4,6 mm)
e pr-coluna Nucleosil 5 C18 120 (30 X 4,6 mm), deteco UV-Visvel a 405 nm, fase
mvel: metanol:gua:cido actico (87:12:1) a 1 mL/min. A fase mvel foi filtrada em
membrana milipore de 0,45 |j.m. As amostras para a anlise foram dissolvidas em
metanol e filtradas nas mesmas condies da fase mvel.
85
Figura 37 - Cromatograma do Padro de Bixina em Metanol:gua:cido Actico

(87:12:1) a 300 ppm
Figura 38 - Cromatograma de Extrato de Urucum com Granulometria entre 100 e

250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes C em Metanol:gua:cido
Actico (87:12:1) a 300 ppm
86

r
250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes A em Metanol:Agua:Acido

Actico (87:12:1) a 2000 ppm
Figura 40 - Cromatograma de um Concentrado de Extrato de Urucum em

Metanol:gua:cido Actico (87:12:1) a 300 ppm
RESUL TDOS E DISCUSSO
87
Outra tcnica utilizada, descrita por ROUSEFF (1988), consiste na separao

isocrtica utilizando como fase mvel tetrahidrofurano:gua (58:42) a lmL/min, coluna
Nucleosil 120-5 C18 (250 X 4,6 mm) e pr-coluna Nucleosil 5 C18 120 (30 X 4,6 mm),
deteco UV-Visvel a 464 nm.
A separao ocorreu rapidamente em aproximadamente 8 minutos, conforme

pode ser visto nas Figuras 41 e 42, que representam respectivamente, a amostra de
padro de bixina a 40 ppm e a amostra do extrato das sementes C, obtido pela extrao
mecnica e da granulometria entre 100-250 Mesh, em concentrao de 100 ppm. Como
executado na tcnica anterior, a fase mvel foi filtrada em membrana milipore de 0,45
^m e as amostras para a anlise foram dissolvidas nesta e filtradas nas mesmas
condies.
Figura 41 - Cromatograma do Padro de Bixina em Tetrahidrofurano:gua

(58:42) a 40 ppm
88

250 Mesh Extrado pelo Moinho de Bolas das Sementes C em
Tetrahidrofurano:gua (58:42) a 100 ppm
A Tabela 19 mostra o comparativo dos percentuais de norbixina de algumas

amostras das anlises feitas por cromatografia lquida e por espectrofotometria e a
variao
do
percentual
obtido
por
cromatografia
com
relao
anlise
espectrofotomtrica.
Devido ao fato de no se ter um padro analtico puro de bixina, utilizou-se

como referncia o teor de norbixina do padro obtido pela anlise espectrofotomtrica,
para as anlises cromatogrfcas das amostras.
Nota-se a instabilidade dos resultados obtidos por cromatografia em relao a

anlise espectrofotomtrica, reforando que a anlise quantitativa mais adequada ainda
a espectrofotometria conforme CARVALHO et al. (1993), e tambm, pela falta de
padres analticos puros para a cromatografia.
89
Tabela 19 - Comparativo dos Percentuais de Norbixina das Anlises

Cromatogrficas e Espectrofotomtricas
A m ostra
% Norbixirti por % Norbixina por

Cromatografia Espectrofotometria
Variaf*o(*)
Padro
18,20 %
18,20%
DlOO1 - 40 ppm
6.42%
5.77%
11.26%
DE003 -21,31 ppm
28,09%
25,67%
9,43%
DB003 - 40 ppm
2W %
25,67%
15,82%
DE005 - 44 ppm
24,18%
25,19%
4,01%
26, 11%
25, 19%
3,65%
DE005 - 6> ppm
(*) Variao entre o percentual de norbixina obtido por cromatografia em relao a
anlise espectrofotomtrica.
4.6 - Purificao da Bixina
Com a finalidade de aumentar o percentual de bixina no extrato concentrado,

algumas amostras foram submetidas a um processo de purificao utilizando a
solubilizaao em soluo de NaOH e precipitao com soluo de HC1, e outras,
utilizando um processo de purificao com cido actico glacial, descritas a seguir.
Uma amostra de 20,0547 g de concentrado obtido atravs de extrao mecnica,

com granulometria entre 100 e 250 Mesh de fraes misturadas das sementes A e B com
concentrao inicial de norbixina de 6,04% foi dissolvida em 500 mL de soluo de
NaOH 0,1N, tendo como pH inicial 12,45. A soluo foi ento filtrada a vcuo com
papel filtro para a retirada dos slidos insolveis. Desta soluo, o pH foi baixado para
4,99 com o auxlio de uma soluo de HC1 10%. A soluo foi mantida em repouso por
24 horas. Aps, a soluo foi filtrada a vcuo com papel filtro e a pasta concentrada foi
90
dividida em duas partes onde uma foi lavada com gua destilada e a outra no. Os
concentrados foram ento secos em estufa a 40 C por 8 horas.
A concentrao de norbixina na amostra purificada lavada com gua destilada

foi de 10,97% e a que no sofreu lavagem, foi de 11,59%. Verifica-se que no houve
alterao significativa devido ao processo de lavagem, dando uma concentrao mdia
de norbixina igual a 11,28%). O rendimento mssico do processo foi de 26,98% e o
rendimento da extrao foi de 51,77%.
O mesmo processo foi repetido com a mesma amostra, porm com uma
quantidade de 0,5g, sendo obtida para este caso, a concentrao em norbixina da
amostra purificada de 12,08%. O rendimento mssico do processo foi de 24,06% e o
rendimento da extrao foi de 48,12%.
Em um outro processo de purificao, uma amostra de 5 g de concentrado obtido

atravs de extrao mecnica, com granulometria entre 100 e 250 Mesh de fraes
misturadas das sementes^ qB foi dissolvida em 50 mL de cido actico glacial.
Deixou-se a soluo entrar em ebulio e foi mantido assim durante 5 minutos

para a solubilizao da bixina no cido. A soluo foi succionada com o auxlio de uma
bomba de vcuo para um filtro sinterizado hermeticamente fechado para separar da
soluo as impurezas insolveis. A soluo filtrada foi ento transferida para um Becker
e resfriada a uma temperatura de 9 C durante 48 horas. Aps este tempo, a soluo foi
centrifugada a 1000 rpm durante 20 minutos e a pasta concentrada foi lavada com gua
destilada e novamente centrifugada. Este procedimento foi repetido mais duas vezes,
91
com a finalidade de remover o cido actico remanescente. Aps a etapa de

centrifugao e lavagem, o concentrado foi seco temperatura ambiente em uma
cmara com circulao de ar.
A concentrao inicial de norbixina na amostra do concentrado obtido atravs de

extrao mecnica, com granulometria entre 100 e 250 Mesh de fraes misturadas das
sementes A e B utilizada no processo de purificao, foi de 6,04% e a concentrao de
norbixina desta amostra purificada utilizando a solubilizao em cido actico foi de
42,97%. Tambm foi analisada a concentrao de norbixina no resduo remanescente no
filtro, do processo de filtrao, o qual apresentou um teor de 0,27% de norbixina.
O rendimento mssico do processo foi de 11,68% e o percentual do rendimento

de extrao foi de 83,11%. A Figura 43 mostra o Padro de bixina e a Figura 44 mostra
a amostra purificada atravs de cido actico, de extrato de sementes A e B com
classificao granulomtrica entre 100 e 250 Mesh.
Figura 43 - Padro de Bixina
92
Figura 44 - Amostra Purificada de Extrato de Sementes A e B entre 100 e

250 Mesh
A micrografia tica com um aumento de 40 vezes apresentada nas Figuras 45 e

46 para a amostra inicial e para a amostra purificada obtida, respectivamente. As
Figuras 47 e 48 ilustram a estrutura do extrato de urucum e da amostra purificada, onde
no ltimo caso pode ser observado o arranjo cristalino das mesmas. Estas figuras foram
obtidas utilizando-se um microscpio eletrnico de varredura. Observa-se uma
formao cristalina bem definida na amostra purificada.
Figura 45 - Micrografia tica da Amostra de Extrato de Sementes A e B

entre 100 e 250 Mesh
93
Figura 46 - Micrografia tica da Amostra Purificada de Extrato de

Sementes A e B entre 100 e 250 Mesh
Figura 47a - Micrografia Eletrnica de Varredura do Extrato de Urucum
Figura 47b - Micrograia Eletrnica de Varredura do Extrato de Urucum
Figura 47c - Micrografia Eletrnica de Varredura do Extrato de Urucum
94
95
Figura 48a - Micrografia Eletrnica de Varredura da Amostra Purificada do

Extrato de Urucum
96
RESIJL TADOS E DISCUSSO
Figura 48b - Micrografia Eletrnica de Varredura da Amostra Purificada do

Extrato de Urucum
Figura 48c - Micrografia Eletrnica de Varredura da Amostra Purificada do

Extrato de Urucum
97
Figura 48d - Micrografia Eletrnica de Varredura da Amostra Purificada do

Extrato de Urucum
Um outro procedimento utilizado para a extrao e purificao do corante de

urucum foi a utilizao do extrator a GLP, patente n PI9804199-1/INPI, de 16/10/1998.
Uma amostra de concentrado obtido atravs de extrao mecnica, com

granulometria entre 80 e 100 Mesh de fraes misturadas das sementes A e B, com
concentrao inicial de norbixina de 5,12%, solubilizada em GLP, em uma cmara
pressurizada. A soluo de corante no GLP passa atravs de um filtro sinterizado, sendo
coletada em uma outra cmara. Na seqncia a soluo despressurizada em um frasco
coletor.
Foi obtido um produto lquido no frasco coletor com uma colorao

avermelhada, evidenciando a remoo de leo que estaria contido no concentrado de
corante de urucum e algum percentual de corante. Este lquido apresentou um
98
percentual de norbixina de 0,73% e a amostra que sofreu a extrao apresentou um

percentual de 5,50%.
Como pode-se verificar, a amostra aps a extrao apresenta um pequeno

aumento no percentual de norbixina, de 7,42%, evidenciando a extrao de leo do
concentrado.
Este processo de extrao merece maiores estudos, como a caracterizao do

leo extrado e concentrao deste, podendo ser utilizado como uma possvel etapa que
antecederia ao processo de purificao ou ainda, ao processo de extrao, com o
objetivo de remoo do leo de urucum no concentrado ou nas sementes.
Um importante aspecto deste processo o fato da total remoo do solvente por

despressurizao, evitando desta forma a contaminao do corante extrado.
4.7 - Extrao do leo das Sementes
A extrao do leo foi realizada utilizando-se um extrator do tipo Soxhlet. No

extrator foi colocado um cartucho feito de papel filtro, e este preenchido com sementes
A (5 anos de estocagem) que foram previamente trituradas com o objetivo de aumentar a
rea superficial e proporcionar um ataque mais eficiente do solvente utilizado na
extrao, que foi o hexano e o ter de petrleo. Os parmetros utilizados, bem como o
rendimento do processo so mostrados na Tabela 20 e Figura 49, respectivamente.
99
Tabela 20 - Parmetros do Processo de Extrao do leo das Sementes de Urucum

- Sementes A
Tempo (h)
Massa leo
Massa
Sementes (g)
(l)
Volume
Solvente
Tipo de
Solvente
ter de
Petroleo
ter de
Petrleo
ter de
Petrleo
Eter de
PclTlO
IIIIillIllIH
% Rendimento
2,13
1,25
111,46
2,38
500
4 A0
52,02
1,50
300
4,00
117,83
3,11
500
6,00
77,55
2,04
300
3,00
100,17
1,63
250
Hexano
1,63
4.00
100,21
2,09
300
Hexano
2.08
6,00
101,63
2,14
300
Hexano
2,11
6,50
51,30
3,2$
300
Hexano
lllp llll
6,50
103,30
2,16
250
Hexano
2,09
13,50
102*77
2,05
300
Hevano
2,00
2,64
2,62
Rendimento da Extrao de Oleo das Sementes
Eter de Petrleo
EJ hexano
Tempo (h)
Figura 49 - Rendimento da Extrao do leo das Sementes de Urucum - Sementes A
RESUL TAJDOS E DISCUSSO
100
4.7.1 - Caracterizao do leo das Sementes
Em anlise realizada por cromatografia gasosa em amostra do leo extrado das

sementes de urucum (Figura 50), verifica-se a ocorrncia dos cidos graxos citados por
SILVA (1999), conforme a Tabela 21, sendo que a amostra analisada no apresentou os
cidos cprico e esterico.
Tabela 21 - Composio em cidos Graxos do leo das Sementes
Aeidos Graxos
Noine
leo
d semente
Massa % M a m
% Molar
Cprico
172,27
10,706
16,145
Palmitico
256.43
16,411
16,626
r.slearico
284.48
4,629
4,227
Oleico
282.47
33,#19
31.195
Linoleico
280,45
34,336
31,806
F IO tA , f PMBG\GRAXOC9.D
Figura 50 - Composio em cidos Graxos da Amostra de leo de Sementes de

Urucum
101
A seguir sero apresentadas as principais concluses obtidas neste trabalho, bem

como sugestes para o desenvolvimento de trabalhos futuros.
CONCLUSO E SUGESTES
102
5 - CONCLUSO E SUGESTES
Neste trabalho foram estudadas diversas rotas para a extrao e purificao de

corantes de urucum.
Os resultados deste trabalho indicam que a distribuio granulomtrica das

partculas de extrato de urucum na extrao mecnica, utilizando moinho de bolas, no
depende do tempo de estocagem das sementes. J o percentual de norbixina extrado
em funo deste tempo de estocagem, sendo que para menores tempos de estocagem,
obtm-se maiores teores de norbixina no extrato. Este comportamento est em
concordncia com a literatura e se deve instabilidade dos corantes principalmente
luz, temperatura e elevados teores de umidade.
A taxa de extrao mecnica de bixina superior a 3 vezes nas sementes com

um ano de armazenamento do que nas sementes com 5 anos, correspondente a
0,189% h'1 e 0,052% h1, respectivamente.
CONCLUSO E SUGESTES
103
Na faixa granulomtrica de 100-250 Mesh, encontrado o maior percentual de

norbixina no extrato, correspondendo a 9,35% para o lote B e 3,41% para o lote A. Nas
fraes granulomtricas de maior tamanho de partcula, h
presena de muitas
partculas provindas da quebra das sementes. A quebra das sementes, no desejada por
gerar finas partculas de material celulsico que funcionam como impurezas do extrato
obtido.
Pode-se ento, afirmar que quanto maior for o tempo de residncia das sementes
no moinho de bolas, maior ser a massa de extrato obtido. Aps o processo de
classificao das partculas, a frao de menor granulometria, entre 100 e 250 Mesh, a
que apresenta maior concentrao de bixina. Portanto, quando se requer alto teor do
corante, as outras faixas granulomtricas necessitaro passar por outro processo de
extrao, por apresentarem baixos teores de bixina, o que ocasiona uma elevao de
custo do processo.
A desvantagem deste processo de extrao o elevado tempo de processamento,

aliado necessidade de recuperao da massa de corante de urucum contida nas fraes
granulomtricas de maior tamanho.
A extrao mecnica, utilizando gua como fase lquida, no apresentou uma

variao significativa do teor de norbixina em funo da granulometria do extrato
obtido; no entanto os rendimentos mssicos obtidos foram muito baixos: 0,67% para o
lote C e 5,53% para o lote D, correspondendo a teores de norbixina de 11,88% e
19,98%, respectivamente, considerando-se um tempo de agitao de duas horas para
ambos os casos.
CONCLUSO E SUGESTES
104
O tempo de agitao mostrou ser uma varivel que interfere no processo,

elevando o rendimento de extrao de 4,86% para 14,83%, quando este passa de 2 para
4 horas. Um fato importante observado que o percentual de norbixina do extrato no
afetado pelo tempo de agitao, sendo de aproximadamente 11% para o lote C.
A incluso de uma etapa prvia de infuso das sementes, no processo de

agitao mecnica, mostra-se benfica tanto para o rendimento mssico quanto para o
rendimento da extrao do corante das sementes quando se utiliza gua como fase
lquida. Neste caso, o teor de norbixina no extrato para o lote C foi da ordem de 21%. A
principal desvantagem da etapa de infuso seria o desenvolvimento de fungos para um
tempo muito grande de processo.
No processo de extrao por agitao mecnica, utilizando etanol como fase

lquida, no h necessidade de uma etapa prvia de infuso das sementes, pois os
resultados obtidos no mostraram incremento na eficincia do processo com o aumento
do tempo de infuso.
A extrao por agitao mecnica utilizando etanol como fase lquida mostrouse mais eficiente em termos de tempo de processo do que a comparada com a extrao
utilizando gua. Neste processo os rendimentos de extrao obtidos foram de 79,18%,
com um percentual de norbixina no extrato de 27,50% para o lote D e 32,06% para o
lote C.
CONCLUSO E SUGESTES
105
Pelos resultados obtidos, o processo de extrao utilizando agitao mecnica

com etanol foi o que apresentou um melhor desempenho para aplicao em processo
industrial.
Conforme verificado na literatura, existe uma grande demanda de corante de

urucum com elevada pureza, especialmente para usos na indstria de cosmticos,
farmacutica e alimentcia. Os resultados obtidos nas etapas de purificao foram
satisfatrios, com teores de norbixina no produto purificado de 42,97%, sendo este teor
equiparado ao teor do padro de bixina utilizado.
No processo de purificao dos extratos de urucum, visando uma concentrao

maior do corante, a utilizao do processo a quente, que envolve a solubilizao do
extrato em cido actico glacial e posterior etapa de resfriamento, mostrou-se eficiente,
onde obteve-se um rendimento de extrao de 83,11% e mssico de 11,68%. J no
processo que envolve solubilizao do extrato em meio alcalino e posterior precipitao
com cido, o rendimento da extrao foi de 51,77% e o mssico foi de 26,98%. No
processo utilizando GLP, verificou-se que a extrao que ocorre a do leo contido no
extrato, ocasionando um pequeno aumento na concentrao em norbixina do extrato.
Este processo de extrao merece maiores estudos, como uma possvel etapa que
antecederia ao processo de purificao ou ainda, ao processo de extrao, com o
objetivo de remoo do leo de urucum no concentrado ou nas sementes.
As extraes de leo das sementes de urucum mostraram que, nas condies de

processo, o rendimento passa a ser praticamente constante nas extraes acima de 4
horas, correspondendo a 2,35%.
CONCLUSO E SUGESTES
106
Como sugestes para futuros trabalhos, poder-se-ia realizar a separao dos

diversos
corantes
do
urucum,
incluindo
os
ismeros,
atravs
de tcnicas
cromatogrficas.
Sugere-se ainda o desenvolvimento de novas rotas para a remoo do leo do

extrato de urucum, por processos que no levem contaminao do produto.
Outro importante aspecto a ser investigado a determinao da viabilidade

econmica para a utilizao industrial dos processos testados em escala laboratorial.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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114
ANEXOS
ANEXOS
Percentual de Norbixina em Base Seca e Percentual de Umidade das Sementes

Utilizadas
Semente
% Norbixina em
Base Seca
0.54
illliil!!!
llliilii B
r>
| | j |
% Umidade
11,80
13.60
1.05
10.65
2,11
7,86
Onde:
A = Sementes com 5 anos de armazenamento
B = Sementes com 1 ano de armazenamento
C = Sementes com 3 meses de armazenamento
D = Sementes com 1 ms de armazenamento

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Universidade Federal de Santa Catarina

EXTRAO E PURIFICAO DE CORANTES DE

Dissertao submetida ao Programa de Ps-Graduao em Engenharia

Ricardo Wissmann Alves

Florianpolis, fevereiro de 2001

Extrao e Purificao de Corantes de Uruciim

Ricardo Wissmann Alves

Dissertao julgada para obteno do ttulo de Mestre em Engenharia Qumica, rea de

Prof. Dr2. Edna Regina Amante

Florianpolis, 19 de Fevereiro de 2001

" melhor acender uma pequena

Agradeo tambm minha co-orientadora, Prof Dra Selene Maria de Arruda

Aos meus colegas do laboratrio - LABMASSA, Jaime Humberto Palacio

Um agradecimento especial a Michael Bechtold que teve uma participao

Aos meus colegas de mestrado, Alexandra Fchter, Audrei Gimnez Baranano,

s minhas grandes amigas, Cntia Marangoni, Cludia Terezinha Kniess,

Em especial minha grande amiga Cristiana Gomes de Oliveira, que sempre

Aos professores do Departamento de Engenharia Qumica que contriburam para

Ao secretrio da coordenadoria do CPGENQ, o amigo Edvilson da Silva, pela

A Agncia FINEP/PADCT, que atravs do financiamento do projeto Purificao

A CAPES, instituio oficial que outorgou a bolsa que permitiu o

A todas as pessoas que de alguma maneira contriburam para a realizao deste

A Deus, por ter me dado uma nova chance.

CAPTULO 2 - REVISO BIBLIOGRFICA.........................................

2.2 - Usos e Utilidades.......................................................................

2.2.1 - Extrato de Urucum.........................................................

2.3 - Propriedades dos Pigmentos....................................................

2.4 - Processos de Obteno de Corante de Urucum....................

2.4.1- Processos de Extrao Mecnica..................................

2.4.1.1 - Extrao por Atrito........................................

2.4.2 - Processos de Extrao com Solventes..........................

2.5 - Procedimentos Analticos Utilizados na Anlise da

2.5.1- Mtodos Espectrofotomtricos....................................

2.5.2 - Cromatografa Lquida de Alta Eficincia (HPLC).....

2.5.3 - Cromatografa em Camada Delgada............................

2.5.4 - Cromatografia em Papel...............................................

3.1 - Sementes de Urucum...............................................................

3.2 - Padro de Bixina......................................................................

3.3 - Reagentes e Materiais Diversos..............................................

3.5 - Procedimento Experimental....................................................

3.5.1 - Extrao do Corante do Ariolo da Semente do

3.5.1.1 - Extrao por Moinho de Bolas.......................

3.5.1.2 - Classificao Granulomtrica.........................

3.5.1.3 - Extrao por Agitao Mecnica....................

3.5.1.4 - Sedimentao do Concentrado de Urucum.....

3.5.2 - Projeto do Sedimentador................................................

3.5.3- Purificao da Bixina.....................................................

3.5.4- Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC).......

3.5.5 - Teor de Bixina nos Extratos...........................................

3.5.6 - Caracterizao do leo quanto aos cidos Graxos.......

3.5.7- Determinao de Bixina na Semente..............................

3.5.8 - Determinao de Norbixina na Semente........................

3.5.9 - Determinao de Umidade.............................................

3.5.10- Determinao de Cinzas...............................................

4.1 - Extrao Mecnica por Moinho de Bolas................................

4.2 - Extrao por Agitao Mecnica..............................................

4.2.1- Extrao Utilizando Agua...............................................

4.2.1.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum......

4 .2.2- Extrao Utilizando Etanol........... ..................................

4.2.2.1 - Sedimentao do Concentrado de Urucum......

4.2.3 - Anlise Comparativa dos Rendimentos Obtidos nos

4.3 - Sedimentador Utilizando Etanol como Solvente....................

4.4 - Sedimentador Utilizando gua como Solvente......................