Manual Prácticas Biol Cel Agosto 2016

UNIVERSIDAD AUTNOMA
DE NAYARIT
REA DE CIENCIAS DE LA SALUD
UNIDAD ACADMICA DE CIENCIAS QUMICO

BIOLGICAS Y FARMACUTICAS
MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO DE LA UNIDAD DE

APRENDIZAJE DE BIOLOGA CELULAR EDICIN 2016
Academia de Biologia Celular
Responsables de la elaboracin del
Manual de Biologa Celular.
Coordinacin de Elaboracin de
Manuales
QFB Nadia Roxana Martnez Rubio

Directora de la UACQBF-UAN
Ciudad de la Cultura Amado Nervo, Tepic Nayarit, agosto 2016.

Este documento cuenta con 67 hojas tiles incluyendo esquemas, dibujos y anexos.
UNIVERSIDAD AUTNOMA
DE NAYARIT
REA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Directorio
Rector
M.en C Jorge Ignacio Pea Gonzlez
Secretario General
MA. Adrin Navarrete Mndez
Secretaria de Docencia
Mtra. Norma Liliana Galvn Meza
Coordinadora del rea de Ciencias de la Salud
M.C. Mara Raquel Moya Garca
Director de la Unidad Acadmica de Ciencias Qumico Biolgicas y Farmacuticas
QFB Nadia Roxana Martnez Rubio
Subdireccin Acadmica
Integrantes de la Academia de Biologa Celular participantes en la actualizacin:
Dra. Ma. de Jess Durn Avelar.
Dr. Norberto Vibanco Prez
Dr. Jos Francisco Zambrano Zaragoza
Dr. Eduardo Mendeleev Becerra Verdn
Q.F.B. Mayra Cristina Ros Medrano
Q.F.B Zulia Fernandina Nieves Lpez
Q.F.B. Jaime Snchez Meza
pDr. Alejandro Vzquez Reyes
MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR

2016
NDICE
Pg.
INTRODUCCIN
PROPSITO DEL SISTEMA DE PRCTICAS
2.1
Encuadre del sistema de prcticas dentro de la profesin
2.2
Niveles de desempeo
DESCRIPCIN DEL SISTEMA DE PRCTICAS
3.1
Estructura y programa del sistema de prcticas
PRCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS
10
4.1
Reglamento aplicable a la prctica y el mbito donde se desempea
10
4.2
Disposiciones de orden general
10
4.3
Criterios generales de evaluacin de laboratorio
17
DESCRIPCIN DE LAS PRCTICAS
19
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA PRIMERA PRCTICA
20
NMERO DE ALUMNOS POR UNIDAD DE PRCTICA
21
INTRODUCCIN DE LA PRIMERA PRCTICA
21
PROPSITO ESPECFICO DE LA PRIMERA PRCTICA
26
10
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA PRIMERA PRCTICA
26
10.1
Normas Oficiales Mexicanas especficas para la prctica
26
11
DESARROLLO DE LA PRIMERA PRCTICA
26
12
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA PRIMERA PRCTICA
26
12.1
Lineamientos generales para la evaluacin
27
12.2
Evaluacin intermedia
27
12.3
Mtodo de asignacin de calificaciones de la prctica
27
13
RESULTADOS
27
14
CUESTIONARIO
28
15
BIBLIOGRAFA
28
16
PARA SABER MS
28
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA SEGUNDA PRCTICA
29
17
30
18
INTRODUCCIN DE LA SEGUNDA PRCTICA
30
19
PROPSITO ESPECFICO DE LA SEGUNDA PRCTICA
30
20
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA SEGUNDA PRCTICA
30
20.1
30
21
DESARROLLO DE LA SEGUNDA PRCTICA
30
22
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA SEGUNDA PRCTICA
32
22.1
32
22.2
32

2016
22.3
32
23
RESULTADOS
33
24
CUESTIONARIO
33
25
BIBLIOGRAFA
33
26
PARA SABER MS
33
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA TERCERA PRCTICA
34
27
35
28
INTRODUCCIN DE LA TERCERA PRCTICA
35
29
PROPSITO ESPECFICO DE LA TERCERA PRCTICA
37
30
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA TERCERA PRCTICA
37
30.1
37
31
DESARROLLO DE LA TERCERA PRCTICA
38
32
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA TERCERA PRCTICA
39
32.1
39
32.2
39
32.3
39
33
RESULTADOS
40
34
CUESTIONARIO
40
35
BIBLIOGRAFA
40
36
PARA SABER MS
40
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA CUARTA PRCTICA
41
37
42
38
INTRODUCCIN DE LA CUARTA PRCTICA
42
39
PROPSITO ESPECFICO DE LA CUARTA PRCTICA
43
40
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA CUARTA PRCTICA
43
40.1
43
41
DESARROLLO DE LA CUARTA PRCTICA
43
42
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA CUARTA PRCTICA
44
42.1
44
42.2
44
42.3
44
43
RESULTADOS
45
44
CUESTIONARIO
45
45
BIBLIOGRAFA
45
46
PARA SABER MS
45
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA QUINTA PRCTICA
46
47
47

2016
48
INTRODUCCIN DE LA QUINTA PRCTICA
47
49
PROPSITO ESPECFICO DE LA QUINTA PRCTICA
50
50
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA QUINTA PRCTICA
50
50.1
50
51
DESARROLLO DE LA QUINTA PRCTICA
50
52
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA QUINTA PRCTICA
53
52.1
53
52.2
53
52.3
53
53
RESULTADOS
53
54
CUESTIONARIO
54
55
BIBLIOGRAFA
54
56
PARA SABER MS
54
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA SEXTA PRCTICA
55
57
56
58
INTRODUCCIN DE LA SEXTA PRCTICA
56
59
PROPSITO ESPECFICO DE LA SEXTA PRCTICA
58
60
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA SEXTA PRCTICA
58
60.1
58
61
DESARROLLO DE LA SEXTA PRCTICA
58
62
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA SEXTA PRCTICA
59
62.1
59
62.2
60
62.3
60
63
RESULTADOS
60
64
CUESTIONARIO
60
65
BIBLIOGRAFA
60
66
PARA SABER MS
61
HOJA DE IDENTIFICACIN DE LA SPTIMA PRCTICA
61
67
62
68
INTRODUCCIN DE LA SEXTA PRCTICA
62
69
PROPSITO ESPECFICO DE LA SEXTA PRCTICA
63
70
NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA SEXTA PRCTICA
63
70.1
63
71
DESARROLLO DE LA SEXTA PRCTICA
63
72
SISTEMA DE EVALUACIN DE LA SEXTA PRCTICA
64
72.1
64

2016
72.2
72.3
64
64
73
RESULTADOS
64
74
CUESTIONARIO
64
75
BIBLIOGRAFA
65
76
PARA SABER MS
65
77
ANEXOS
66
78
BIBLIOGRAFA
67

2016
1. INTRODUCCIN
2.- PROPSITO DEL SISTEMA DE PRCTICAS
Este manual est diseado para los estudiantes de Qumico Farmacobilogo. Se

realiz como complemento de la unidad de aprendizaje de Biologa Celular de la carrera de
Qumico Farmacobilogo de la Unidad Acadmica de Ciencias Qumico Biolgicas y
Farmacuticas de la Universidad Autnoma de Nayarit.
Se pretende que los conocimientos adquiridos, as como el desarrollo de habilidades y

destrezas, puedan aplicarlos en otras Unidades de aprendizaje posteriores durante y
despus de su formacin profesional.
2.1. Encuadre del sistema de prcticas dentro de la profesin

El objetivo fundamental de este manual es proporcionar al estudiante los
conocimientos bsicos respecto a las tcnicas comnmente empleadas en un laboratorio de
biologa celular.
El formar profesionistas con los conocimientos adecuados en las tcnicas de biologa

celular, como el uso y manejo del microscopio, adems desarrollar sus capacidades tericoprcticos en el empleo de tcnicas de biologa celular.

2016
2.2 Niveles de desempeo

Nivel
Descripcin
Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere
baja autonoma.
Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas a
diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo
grado de responsabilidad y autonoma en las decisiones. A menudo requiere colaboracin

con otros y trabajo en equipo.
Se requiere un importante nivel de toma decisiones. Tiene bajo su responsabilidad recursos
materiales con los que opera su rea. As como control de recursos financieros para
adquisicin de insumos.
Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que
mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar
y dirigir grupos de trabajo.
Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que
mostrar un alto nivel de creatividad, as como buscar y lograr la cooperacin entre grupos e
individuos que participan en la implantacin de un problema de magnitud institucional.
El sistema de prcticas que se aborda en el presente manual te permitir llegar a un nivel de

desempeo del Conocer planteado en el nivel 2, ya que realizars diversas actividades, con
diferente grado de dificultad en laboratorio que te permitirn llegar a conocer las tcnicas
bsicas de biologa celular.
Las razones por las que se asume que se obtendr un nivel de desempeo de este nivel se
debe a que:
1. La realizacin de las prcticas en forma y tiempo presupone el dominio de diferentes
habilidades y conocimientos.
2. Se manejarn materiales, reactivos, as como equipo empleado en cada prctica.
3. La elaboracin del reporte de prctica requiere de disciplina y laboriosidad, bsqueda
de informacin, as como la utilizacin de herramientas computacionales.
4. Las prcticas debern realizarse en equipo, requieren de la participacin integrada de
los participantes. La capacidad de liderazgo deber ser usada en forma ptima para
realizar los diversos pasos de la prctica.
5. La evaluacin se determinar con base en los criterios establecidos.

2016
3. DESCRIPCIN DEL SISTEMA DE PRCTICAS

3.1 Estructura y programa del sistema de prcticas
Las prcticas que se presentan en este manual, se realizarn con el apoyo de equipo,
materiales y reactivos con los que cuenta la Unidad Acadmica; sin embargo, para realizar
algunas de ellas tendrn que investigar de manera individual lo que se realizar durante las
prcticas, para llevarlas a buen trmino. Con ello se busca que sean independientes y
capaces de realizar las prcticas de manera individual, permitiendo que el profesor sea un
gua. Se pretende que de esta manera el alumno integre los conocimientos tericos
adquiridos en el aula y desarrolle habilidades de observacin, identificacin y de anlisis. Las
destrezas que puede llegar a adquirir sern en relacin a manejos de equipos, precisin para
pesar, para medir, entre otros, para lo cual se requiere que presenten una actitud de
responsabilidad y cumplimiento de las normas de seguridad y trabajo en el laboratorio, que
sean metdicos y disciplinados durante el desarrollo de la prctica, as como de cooperacin
para trabajar en equipo. Este programa est diseado de manera secuencial y acorde con la
parte terica revisada en el aula.
Programa del sistema de prcticas
Prcticas programadas
mbito de
desarrollo
Duracin en horas para cada prctica y

semana del semestre en que se realizar
1. Manejo del microscopio.
Laboratorio
3 horas
2. Tincin simple
Laboratorio
3 horas
Laboratorio
3 horas
4. Difusin simple.
Laboratorio
3 horas
5. Movimiento ciliar
Laboratorio
3 horas
6. Corpsculo de Barr
Laboratorio
3 horas
7. Mitosis
Laboratorio
3 horas
3. Conteo celular: Uso del

hemocitmetro

2016
4. PRCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS

4.1 Reglamento aplicable a la prctica y el mbito donde se desempean
El Laboratorio debe seguir prcticas generales de seguridad basadas en la Normas
Oficiales Mexicanas de las cuales se han seleccionado algunas que determinan su buen
funcionamiento y se describen a continuacin:
ESPECIFICACIONES
NORMAS OFICIALES MEXICANAS
CONDICIONES DEL MEDIO AMBIENTE

El laboratorio cuenta con las condiciones y niveles de iluminaciones
suficientes y adecuadas para el tipo de actividad que realiza.
Se cuenta con normas de Seguridad e Higiene que permitan
reducir el riesgo de accidentes en el rea de trabajo.
Se prohbe en zonas controladas el consumo de alimentos, bebidas
y tabaco, el uso de cosmticos y sustancias para ser aplicadas en
la piel, as como el empleo de pauelos que no sean desechables.
NOM-025-STPS-1999
NOM-017-STP-2001
NOM-087-ECOL-1995
SISTEMA CONTRA INCENDIOS

Se instalarn equipos contra incendio de acuerdo al grado de
riesgo de incendio, a la clase de fuego que se pueda presentar en
el laboratorio y a la cantidad de materiales en el almacn y
proceso.
La puertas de salida normales de las rutas de evacuacin y de las
salidas de emergencia, debern ser libres de obstculos,
candados, picaportes o cerraduras con seguros puestos durante
las horas laborales
Los extintores deben ser revisados al momento de su instalacin y,
posteriormente, a intervalos no mayores de un mes.
NOM-002-STPS-2000
NOM-002-STPS-2000
NOM-002-STPS-2000
EQUIPOS DE PROTECCIN
Equipo de personal, seleccin, uso y manejo en los centros de
NOM-017-STPS-2001
trabajo
Sistema para la identificacin y comunicacin de peligros y riesgos
NOM-018-STPS-2000
por sustancias qumicas peligrosas en los centros de trabajo
Las reglas bsicas al interior del laboratorio pretenden servir de gua para que no se
presenten percances durante la realizacin de las prcticas.
4.2 Disposiciones de orden general
Que toda persona que haga uso de los laboratorios de prcticas de las unidades de
aprendizaje de la unidad acadmica conozca y acate los lineamientos y normas a seguir en
ellos, para mantener su buen funcionamiento, as como los derechos y obligaciones que
10

2016
como usuario de laboratorio tienen para salvaguardar la seguridad de todos los que en ellos
trabajen.
ARTCULO 1.- Las prcticas sern estrictamente supervisadas por el docente responsable.
En caso contrario, estas no podrn realizarse debiendo ser reprogramadas de acuerdo con la
disponibilidad del laboratorio.
Excepcionalmente la direccin de la unidad acadmica podr nombrar un suplente.
ARTCULO 2.- Durante las sesiones, queda estrictamente prohibido hacer uso de juegos
electrnicos, celulares, computadoras porttiles, reproductoras de msica y todo equipo
ajeno a la prctica. El hacer caso omiso de esto, obligar a pedir la salida inmediata del
laboratorio. En este caso se considerar inasistencia a la prctica correspondiente.
ARTCULO 3.- Se prohbe fumar y consumir alimentos y bebidas dentro del laboratorio.
ARTCULO 4.- Es obligatorio traer uas recortadas y cabello recogido.
ARTCULO 5.- En caso de utilizar el microscopio queda estrictamente prohibido traer rmel en
las pestaas, de lo contrario no podr realizar la prctica. En este caso se considerar
inasistencia a la prctica correspondiente.
ARTCULO 6.- Durante el desarrollo de las prcticas, es obligatorio el uso de bata blanca
debidamente cerrada, as como zapato cerrado y de piso. En caso de ser necesario, deber
usarse guantes, cubre boca y/o mascarilla, cofia, lentes de seguridad.
ARTCULO 7.- Todas las sustancias, equipos y materiales debern ser manejadas con el
mximo cuidado, atendiendo a las indicaciones de los manuales de procedimiento, de
seguridad y dems normas aplicables, segn sea el caso.
ARTCULO 8.- En caso de cualquier accidente personal, de equipo o material de trabajo;

debe notificarse inmediatamente al maestro o al responsable.
11

2016
ARTCULO 9.- La basura debe colocarse en los recipientes correspondientes y los Residuos
Peligrosos Biolgico-Infecciosos debern tratarse de acuerdo a lo establecido en la norma
NOM-087-ECOL-2002.
ARTCULO 10.- En caso de requerir que algn equipo trabaje de manera continua, deber
dejarse en el interior del laboratorio correspondiente, la informacin acerca del tipo de
reaccin o proceso en desarrollo, las posibles fuentes de problema, la manera de controlar
los eventuales accidentes y la forma de localizar al responsable de la unidad de aprendizaje.
ARTCULO 11.- Se prohbe realizar cualquier tipo de actividades ajenas al desarrollo de

prctica.
DE LOS ALUMNOS
ARTCULO 14.- Los alumnos tendrn las siguientes obligaciones:
a) Ingresar al laboratorio a la hora indicada para la prctica y permanecer en l hasta el

trmino de ella.
b) Respetar la tolerancia mxima para entrar al laboratorio, que ser de 10 minutos con
respecto a la hora programada. Si se excede de este tiempo se considerar como
inasistencia injustificada.
c) En caso de inasistencia justificada con escrito de la Direccin, el alumno reprogramar la

prctica con el maestro considerando la disponibilidad del laboratorio.
d) Colocar mochilas o cualquier otro material ajeno a la prctica en el lugar establecido para
ello.
e) Responsabilizarse del material y equipo que utilicen en las diferentes actividades

desarrolladas
en
los
12
laboratorios.

2016
f) Hacer buen uso del material y equipo de laboratorio. Si por descuido, negligencia o uso
indebido este es daado por una persona, el importe de la reparacin o sustitucin del mismo
ser cubierto por el alumno o equipo correspondiente.
g) El alumno que sustraiga material, sustancias y/o equipo de laboratorio se le prohibir el

ingreso al Laboratorio y se aplicarn las sanciones correspondientes establecidas en la Ley
Orgnica Universitaria y el Estatuto de Gobierno.
h) Si se requiere material adicional para realizar la prctica, deber solicitarse al responsable

del laboratorio.
i) Al terminar las actividades desarrolladas debern entregar su material limpio y dejar

aseada el rea de trabajo.
j) Por ningn motivo deben permanecer los alumnos en el laboratorio despus de la salida
del maestro o responsable de laboratorio.
k) Las dems que se establezcan en el Consejo del rea de Ciencias de la Salud o Consejo
del Programa Acadmico.
Procedimientos generales de seguridad durante el desarrollo de la prctica
a) Deteccin de riesgos
Tipo de riesgo
Como evitarlos
Cortaduras
Trabajar apegado al protocolo de la

prctica.
Reactivos mal
cerrados
(salpicadura en la
Supervisar que los reactivos estn

colocados de acuerdo a su grado de
toxicidad.
13
Como proceder en caso

de un accidente
Detener el sangrado y
hacer curacin en caso de
no requerir atencin
Mdica
De manera general lavar
inmediatamente con
abundante agua. Es

2016
piel)
Que los frascos permanezcan
cerrados y ventilados.
conveniente retirar la ropa

para evitar que el
corrosivo quede atrapado
entre la ropa y la piel.
Revisar particularidades
en cada prctica.
b) Desechos o residuos:
Tipo de desechos
Como descartarlos
Vidrios y agujas
En depsitos de basura
RPBI (Residuos
Peligrosos BiolgicoInfecciosos)
Basura comn
Tipo de contenedor
Depositarlos en
contenedores para material
punzo cortante.
Depositarlos
en
contenedores
con
accionador de Pie y en
bolsas rojas con la leyenda
RPBI
Depositarlos
en
contenedores
con
accionado de Pie y en
bolsas negras, rotular con
la leyenda basura comn.
c) Al comenzar la prctica de laboratorio, el auxiliar entregar el equipo que se emplear.
d) Informar al profesor de laboratorio de cualquier accidente y memorizar la ubicacin en el

laboratorio de los dispositivos de seguridad, para una rpida intervencin.
e) Es recomendable estudiar con anticipacin la prctica que se va a realizar.

f) Abstenerse de probar sustancias y tambin de olerlas.
g) La manipulacin de cidos concentrados deber efectuarse dentro de la campana de

extraccin, para evitar salpicaduras que puedan afectar a uno mismo o a los compaeros.
h) Nunca mezclar las sustancias qumicas a menos que el procedimiento lo seale.
14

2016
i) Antes de usar un reactivo qumico o una solucin leer cuidadosamente la etiqueta para
identificar el contenido y tomar exactamente la cantidad necesaria y tapar el recipiente.
j) Usar pinzas para manejar objetos y recipientes que hayan sido calentados.
k) Al trmino de la prctica se debe entregar perfectamente limpio y en buen estado el

equipo que se us. Limpiar la mesa de trabajo y cerrar muy bien las llaves del agua y del gas.
l) Utilizar guantes de ltex en cada prctica y en caso de ser necesario, mascarilla de

seguridad.
Recomendaciones para el buen logro de las prcticas
a) Estudiar previamente la prctica a realizar, con el propsito de comprender sus objetivos,

los principios en que se fundamenta y el procedimiento a seguir.
b) Observar con atencin las instrucciones especiales que el instructor les d.
c) Si el material se encuentra aparentemente limpio, lavarlo primero con agua de la llave,

luego con agua destilada y colocarlo sobre un papel absorbente o en el escurridor.
d) La mesa de trabajo siempre se limpiar con etanol 70% antes y despus de haber
realizado la prctica.
f) Verificar que los equipos que se vayan a utilizar estn calibrados y en buen estado, caso
contrario reportarlo al instructor.
Registro y evaluacin del experimento
15

2016
a) Previo al inicio de la prctica incluir en la bitcora: portada, lista de reactivos, materiales y

equipos, diagrama de flujo, cuestionario y bibliografa.
b) Registrar en la bitcora los resultados o datos obtenidos durante el transcurso de la

prctica.
c) De manera individual se anexar a la bitcora una discusin y conclusiones con base en

los resultados obtenidos en la prctica, esto ser en el lapso de tiempo contemplado para la
prctica.
16

2016
4.3 Criterios de Evaluacin del curso de laboratorio de Biologa Celular
A lo largo del Curso se desarrollarn prcticas de laboratorio sobre tcnicas bsicas de

Biologa Celular, cuyos contenidos especficos sern determinados en funcin de la
complementariedad a la instruccin previa recibida por el alumno en esta Unidad de
Aprendizaje.
En la evaluacin del laboratorio se seguirn los siguientes criterios:
A. Actividades prcticas 20%
Desarrollo de la prctica
10%
Puntualidad
1%
Atuendo
Participacin
activa
1%
Atencin
2%
Disciplina
1%
5%
Bitcora
5%
Examen prctico
5%
Se realizar del 06 al 08 de diciembre en horario

de cada grupo
1.- Se entregar al finalizar cada prctica una bitcora individual.

2.- Ser obligatoria la asistencia a cada una de las prcticas para poder demostrar el
aprovechamiento mediante la presentacin de la bitcora.
3.- La portada, lista de material, reactivos y equipos, diagrama de flujo, cuestionario y
bibliografa tendrn que presentarse al inicio de cada sesin, mientras que los resultados se
registrarn conforme se obtengan, los comentarios y explicaciones de los resultados se
elaborarn al concluir la prctica en las horas asignadas.
4.- Trabajos entregados con redaccin igual quedarn anulados, sin poder recuperar la
calificacin.
5.- La calificacin de la bitcora de cada prctica se emitir con base a una escala del 1 al
100
17

2016
CONTENIDO DE BITCORA
1. Portada:
UAN, UACQBF, QFB, nmero de prctica, nombre de la prctica, nombre del alumno,
grupo y fecha.
2. Diagrama de flujo (5%)
3. Cuestionario (10%)
4. Bibliografa (5%) Mnimo 3 referencias
5. Resultados (40%)
6. Comentarios y explicaciones de los resultados (40%)
B. Fundamentos de actividades prcticas
15%
1.- Se realizarn dos evaluaciones escritas sobre fundamentos de actividades prcticas que
contendr preguntas abiertas, de opcin mltiple, falsa y verdadera y/o relacin de columnas.
Primer evaluacin
Miercoles 12 de octubre 13:00 h.
Segunda evaluacin
Miercoles 30 de noviembre 13:00 h.
La realizacin de las prcticas es obligatoria.
18

2016
DESCRIPCIN DE LAS PRCTICAS
19

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 1
MANEJO DEL MICROSCOPIO
Elaborado por:
Academia de Biologa Celular
20

2016
7. NMERO DE ALUMNOS POR UNIDAD DE PRCTICA

Para la realizacin de la prctica es necesario trabajar en equipo, cada equipo
estar integrado con un mximo de cuatro estudiantes.
8. INTRODUCCIN
El microscopio es una herramienta de uso ineludible en el campo de diversas reas
cientficas, tal es el caso de la Histologa, Embriologa, Microbiologa, Biologa Celular,
Diagnstico Clnico, Micologa, Protozoologa, Parasitologa, Histopatologa, entre otras.
Se considera como una herramienta que ha jugado un papel importante en los avances
cientficos; se puede decir que seala el inicio de la Biologa moderna, a partir de las
observaciones de los estudiosos del siglo XVII; Leeuwenhoek, Hooke y otros.
El microscopio es un instrumento ptico mecnico que modula energa y aumenta el ngulo
de visin humana para producir imgenes amplificadas de un objeto cualquiera. Actualmente
existen varios tipos de microscopios, los cuales se han clasificado de acuerdo a diferentes
criterios como son:
1. Nmero de pasos de imagen producidos en el microscopio.
2. Tipo de energa empleada o modulada por el microscopio en la produccin de la
imagen.
Segn el nmero de pasos de imagen los microscopios se clasifican en simples o
compuestos. Al considerar el tipo de energa que utilizan para la formacin de la imagen, se
pueden clasificar en: fotnicos, electrnicos y de rayos X.
En general, cualquier microscopio requiere los siguientes elementos: una fuente (como
un haz de fotones o de electrones), una muestra sobre la que acta dicha fuente, un receptor
de la informacin proporcionada por la interaccin de la fuente con la muestra, y un
procesador de esta informacin (en general, un ordenador).
El microscopio, de micro- (pequeo) y scopio (observar), es un instrumento que
permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo
ms comn y el primero que se invent fue el microscopio ptico. Se trata de un instrumento
21

2016
ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del
objeto y que funciona por refraccin.
MICROSCOPIO COMPUESTO. El microscopio compuesto u ptico est formado por dos
lentes, el cual se compone de una parte mecnica y una ptica.
En su trayectoria el haz luminoso procedente de la lmpara que pasa primero
directamente a travs del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee
el condensador, la luz es concentrada sobre la preparacin a observar, la laminilla colocada
en la platina. As el haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar al lente
ocular, donde es captado por el ojo del observador (ver Figura 1).
Fig. 1 Partes de las que estn formados los microscopios compuestos

As, la imagen ampliada por el lente objetivo a manera de lupa se modifica mediante
otro sistema de lentes, el ocular. El aumento final conseguido es igual al producto de los
aumentos del objetivo por los del ocular. En el microscopio ptico este aumento tiene un
22

2016
lmite, que se denomina "poder de resolucin" y que es aproximadamente de 1200 aumentos;

esto es detalles, hasta de 0.2 m.
Parte Mecnica. La base del microscopio, suficientemente pesada para ser estable, soporta
la platina fija, sobre la que se coloca la preparacin a observar.
La preparacin se mantiene por un carro, con desplazamientos rectangulares, con un vernier.
En algunos aparatos la platina puede tener desplazamientos verticales. Gracias a una
cremallera (tornillos macros y micromtricos) que regulan la puesta a punto. En otros casos la
platina solo se desplaza horizontalmente.
El brazo, parte rgida, soporta el dispositivo porta ocular y el revlver o portaobjetivos.
En el monocular los dos dispositivos estn separados por un tubo, de manera que la
distancia entre el ocular y el objetivo sea de 170 mm.
En los binoculares, un sistema de prismas reemplaza al tubo.
El dispositivo porta ocular es un tubo simple en el monocular o en el binocular, es donde se
encuentran los prismas. Los dos oculares se pueden desplazar de acuerdo a la distancia
entre ambas pupilas del observador, y adems uno de los oculares es mvil sobre su eje para
corregir las diferencias de convergencia entre los dos ojos.
El portaobjetivos o revlver, permite su desplazamiento por rotacin y permite sustituirlos.
Bajo la platina se halla el porta condensador mvil, conteniendo el diafragma. Debajo de l,
un espejo permite regular la fuente luminosa.
Parte ptica. La fuente luminosa, es de filamento de tungsteno. El espejo, que tiene una
cara plana y la otra cncava, debe, a partir de una fuente luminosa, enviar un haz de rayos
paralelos al eje ptico del microscopio.
El condensador, es una lente que enfoca la luz en el preparado, permitiendo la formacin de
un cono con el vrtice en el preparado y la base en el lente frontal del objetivo. La entrada de
luz se regula con el diafragma iris. El dimetro de abertura del diafragma depende del campo
y debe coincidir con l. La abertura de luz debe ser menor a la abertura del objeto usado. Se
regula por medio de diafragmas anulares.
23

2016
Las caractersticas de los objetivos son las siguientes:

Abertura numrica (AN); que es igual al ndice de refraccin del medio (n) en el que la lente
se encuentra (1 para el aire, 1.33 para el agua pura, y hasta 1.56 para algunos aceites) por el
seno del semi-ngulo mximo formado por los rayos que pueden penetrar en el lente frontal
del objetivo (Fig. 2)
Aire
Aceite
Fig. 2 Ganancia en apertura con aceite de inmersin (derecha) en contraste con

un objetivo seco (izquierda)
Aumento; agrandamiento de la imagen introducida por el objetivo, el objetivo produce una
imagen real del preparado dentro del microscopio. El aumento se mide en dimetros (X). Hay
diferentes tipos objetivos de los, 4X, 10X, 40X y l00X (inmersin en aceite).
Correccin de aberraciones; para formar una imagen clara, el lente debe enfocar cada rayo
de luz desde un punto del preparado dando un punto de la imagen. Cuando esto falla, se
llama aberracin.
Microscopio confocal laser
La microscopa lser confocal es una nueva tcnica de observacin microscpica que est
logrando excelentes resultados en diversas ramas de la ciencia (medicina, biologa,
materiales, geologa, etc.) Su xito se debe a las indudables ventajas que ofrece frente a la
microscopa ptica tradicional (imgenes de mayor nitidez y contraste, mayor resolucin
vertical y horizontal, etc.) y, sobre todo, a la posibilidad de obtener "secciones pticas" de la
muestra, lo que permite su estudio tridimensional.
24

2016
Microscopios electrnicos
Estos microscopios son grandes y complejos. Utilizan electrones en vez de luz y aumentan
los objetos hasta 250,000 veces. Las imgenes que se producen son en blanco y negro, y
muchas veces tienen colores falsos.
El microscopio electrnico de barrido (MEB) sirve para examinar la superficie de los objetos.
Produce imgenes de gran aumento (ms de cien mil veces, ofrece un poder de resolucin
de aproximadamente 2 nm) y muestra la forma real de los objetos. Adems de mostrar
increbles figuras, el microscopio electrnico investigador muestra detalles que pueden ser de
vital importancia para cientficos en muchas reas, como la medicina. Trabaja examinando la
superficie de un objeto con un delgado haz electrnico. El microscopio electrnico de
transmisin (MET) trabaja iluminando, un ejemplar en la platina con un haz de electrones y
enfocando y aumentando la imagen con lentes magnticas. Esta imagen electrnica, que es
invisible, se transforma en una imagen normal, visible mediante una pantalla especial.
Microscopio digital
Es un microscopio que utiliza una conexin USB a la computadora para producir imgenes o
videos a todo color en la pantalla del monitor. Las imgenes que se originan son digitales que
se pueden almacenar, borrar o editar, imprimirlas; insertarlas en distintos tipos de
producciones: presentaciones multimedia, documentos, sitio web, a un mensaje electrnico,
etc.
Microscopio cuntico
El microscopio cuntico es un microscopio que forma parte de los instrumentos llamados
nanoscopios porque posibilitan ver objetos del tamao en nanmetros y an menores, se
conoce como "microscopio de barrido de efecto tnel" (STM) y fue presentado en 1982 por
Heinrich Rohrer y Gerd Binnig. Ambos recibieron por esto el Premio Nobel de Fsica en 1986.
25

2016
9. PROPSITO ESPECFICO DE LA PRCTICA:

Conocer y manejar el microscopio compuesto, adems de conocer el funcionamiento de
otros tipos de microscopios.
10. NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA PRCTICA

Normas de seguridad especficas
Las referidas en las prcticas generales de seguridad.
11. DESARROLLO DE LA PRCTICA

MATERIAL
Papel seda.
Preparaciones fijas
Abatelenguas.
Palillos de dientes.
Microscopios compuestos
Bata y guantes de ltex
Portaobjetos y cubreobjetos
Azul de metileno
Goteros.
Agua de estanque.
METODOLOGA
1. Familiarizarse con cada una de las partes del microscopio y sus nombres.
2. Limpiar los lentes de los objetivos con el papel seda.
3. Limpiar objetivo de inmersin con papel seda, no usar solventes orgnicos, ya que puede
disolver el material que mantiene sujeta la lente.
4. Familiarizarse con el funcionamiento de cada parte que compone el microscopio.
5. Observar a travs de los oculares utilizando ambos ojos y ajustar la entrada de luz
abriendo o cerrando el diafragma.
6. Observar las preparaciones fijas que sern proporcionadas por tu profesor. Empezar a
observar con el objetivo de menor aumento y aumentar gradualmente la resolucin.
Esquematizar las observaciones de cada caso indicando el aumento utilizado.
7. Observar una gota del agua de estanque. Utilizar el mtodo anterior. Esquematizar las
observaciones
de
cada
caso
indicando
26
el
aumento
utilizado.

2016
8. Realizar un raspado de la cavidad oral de tu compaero. Utilizar clulas del carrillo.

9. Colocar una pequea gota en un portaobjetos y homogeneizar en ella lo obtenido del
raspado.
10. Colocar una gota de azul de metileno, un cubreobjetos y observar la preparacin.
Empezar con el objetivo de menor aumento.
11. Esquematizar los resultados indicando el aumento utilizado
12. SISTEMA DE EVALUACIN DE LA PRCTICA

12.1 Lineamientos generales para la evaluacin.
La evaluacin ser de acuerdo con los criterios de desempeo especificados como se indic
previamente, adems se incluirn preguntas relacionadas con esta prctica en la evaluacin
parcial o final del curso.
Las destrezas se revisarn durante la prctica y a travs de la observacin y
cuestionamientos por parte del maestro, as como las actividades del estudiante. Las
actitudes se evaluarn a travs de la responsabilidad del estudiante ante su prctica y su
entorno.
12.2 Evaluacin intermedia: Los puntos a evaluar en esta parte intermedia de la
prctica son:
Forma de trabajar en equipo
Manejo de la tcnica
Manejo del equipo de manera correcta
Recomendaciones para continuar el desarrollo de la prctica
12.3
Se calificar bajo los siguientes criterios sealados en los Criterios de Evaluacin del
curso de laboratorio de Biologa Celular (pgina 17).
13. RESULTADOS
Realizar un esquema de sus resultados y discutirlos
27

2016
14. CUESTIONARIO
1. Cmo se calcula el aumento de observacin en el microscopio compuesto?
2. Explica el funcionamiento de los siguientes microscopios.
I. Microscopio electrnico.
II. Microscopio electrnico de barrido.
III. Microscopio de contraste de fases.
IV. Microscopio de fluorescencia.
3. Cul es la mejor forma de visualizar (a) una clula cutnea viva, (b) la mitocondria de una
levadura, (c) una bacteria y (d) un microtbulo? Argumenta tu respuesta.
15. BIBLIOGRAFA*.
16. PARA SABER MS.

Consulta de artculos cientficos, notas cientficas, avances de investigacin y pginas de
Internet relacionados con el tema, as como la realizacin de glosario de trminos
relacionados con la prctica.
28

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 2
TINCIN SIMPLE DE CLULAS
Elaborado por:
29

2016

estar integrado con un mximo de cuatro alumnos por prctica.
18. INTRODUCCIN
Con respecto a clulas vegetales concretamente, estudiaremos los bulbos de la cebolla, los
cuales estn formados por clulas vivas pluripotenciales o meristemticas de las cuales
pueden crecer hojas y races cuando la cebolla se planta o cuando se almacena en un lugar
hmedo. Otras clulas del bulbo son menos activas y forman una capa que recubre las hojas
de la cebolla. Una de las caractersticas notorias en las clulas vegetales, es la presencia de
la pared celular, esta no se presenta en las clulas animales y es de composicin qumica
diferente a la que presentan las bacterias.
En cuanto a las clulas animales, estudiaremos clulas de la cavidad oral y

observaremos las diferencias que existen con las vegetales, algunas diferencias pueden
observarse con el microscopio ptico; otras, necesitan de tcnicas ms complejas y
microscopios con mayor poder de resolucin, tal es el caso de los cloroplastos.
19. PROPSITO ESPECFICO DE LA PRCTICA

El alumno aprender a realizar tinciones de clulas vegetales y clulas animales para
observar su morfologa y, sus diferencias estructurales y su tamao.

Las normas oficiales mexicanas especificas para la prctica.

MATERIAL
Microscopio ptico de campo claro
Bulbos de cebolla
30

2016
Solucin de lugol y azul de metileno
Un gotero de agua destilada
Un portaobjetos y cubreobjetos
Una navaja de rasurar
Clulas de la cavidad oral
Palillos de dientes
METODOLOGA
Parte 1
1. Desprender la capa ms delgada y transparente de la cebolla que corresponde a la
epidermis
2. Preparar un pedazo de la epidermis de aproximadamente 1 cm
3. Colocarlo sobre un portaobjetos de manera que la superficie de contacto con el bulbo

(cara interna de la hoja) quede hacia arriba.
4. Teir la preparacin con una gota de azul de metileno.
5. Realizar nuevamente los pasos 1 a 3.
6. Teir la preparacin con una gota de lugol.
7. Realizar los dibujos correspondientes, identificar las estructuras observadas. Indicar en
cada caso los aumentos de las observaciones
8. Observar con el objetivo de menor aumento y contestar lo siguiente:
9. Cul es la forma general de las clulas?
10. Tienen paredes celulares? Mencionar su funcin y composicin qumica
11. Cul es el color y forma del ncleo?
12. Qu posicin guarda el ncleo con relacin a la clula completa?
13. Describir las caractersticas del citoplasma de las clulas.
Parte 2
1. Colocar una gota de azul de metileno en un portaobjetos limpio.
31

2016
2. Con el extremo ms ancho del palillo de dientes frotar ligeramente la cara interna de la
mejilla. Mezclar la muestra con movimiento rotatorios con el azul de metileno colocado en
el portaobjetos
3. Cubrir preparacin con cubreobjetos.
4. Realizar nuevamente los pasos 1, 2 y 3 empleando lugol.
5. Localizar las clulas a bajo aumento. Buscar las clulas completas y aplanadas (no
dobladas o rotas). Centrarlas en el campo y observalas a mayor aumento.
6. Identificar el ncleo y el citoplasma.
7. Realizar los dibujos correspondientes indicando los aumentos a los que se realiz
la observacin.
8. Cul es la relacin entre el dimetro de la clula y la del ncleo?
9. Comparar morfologa y estructura entre las clulas vegetales y animales.

22.1 Lineamientos Generales para la Evaluacin
entorno.

prctica son:
Manejo de la tcnica
32

2016
22.3 Mtodo de asignacin de calificaciones de la prctica
23. RESULTADOS
Realizar un esquema de los resultados y discutirlos
24. CUESTIONARIO
1. De acuerdo a las observaciones qu diferencias estructurales y morfolgicas se
encontraron entre clulas vegetales y animales? Nota: contestar esta pregunta una
vez obtenidos los resultados en la prctica.
2. Mencionar brevemente las diferencias entre tamao, morfologa y estructura
existentes entre bacterias, protozoarios, hongos, plantas y animales.
3. Explicar el fundamento de los colorantes empleados en la prctica.
25 . BIBLIOGRAFA *
26 . PARA SABER MS
33

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 3
CONTEO CELULAR: USO DEL HEMOCITMETRO
Elaborado por:
Academia de Biologa Celular.
34

2016

28. INTRODUCCIN
En las investigaciones realizadas en el campo de la Biologa Celular con
frecuencia se llega a la necesidad de conocer con exactitud la cantidad de clulas
utilizadas en los experimentos.
Para hacer un recuento directo de
una poblacin celular se necesita un
microscopio de campo claro y una
cmara de Neubauer.
La cmara de Neubauer, tambin
es conocida como hemocitmetro o
cmara cuenta glbulos, consta de un
cubreobjetos de un grosor mayor que los
Fig. 3 Hemocitmetro o Cmara de
cubreobjetos de uso comn (Fig. 3).
Neubauer
En la cara superior del portaobjetos, se encuentran cuatro canales longitudinales y un

canal transversal central, a cuyos lados superior e inferior existen grabados dos cuadrados de
2
9 mm de superficie, subdivididos a su vez en una en una cuadrcula ms fina (Fig. 4).

2
Con el objetivo de 10X (seco dbil) podemos enfocar uno solo de los cuadrados de 1 mm de
2
superficie. De los 9 cuadrados de 1 mm se emplea el cuadrado central para contar con el

nmero de clulas de una muestra problema.
35

2016
La superficie del cuadro

central
es
de
mm
subdividida en 25 cuadros que

miden 0.2 mm por lado y por lo
tanto con una superficie cada
2
uno de ellos de 0.04 mm (Fig.

4).
Al
colocar
cubreobjetos
encima
el
de
la
superficie donde se encuentra

grabada la cuadrcula, existe
entre
ellos
(cuadrcula
portaobjetos) una distancia fija

(profundidad) de 0.1 mm. Por
tanto el volumen de la muestra
problema
es
uno
de
los
2
cuadros grandes (de 1 mm de

superficie) ser igual a 1.0
2
Fig. 4 Cuadrcula de conteo

celular de la cmara de
Neubauer
mm 0.1 mm = 0.1 mm .
Las tcnicas de conteo consideran el nmero de individuos presentes en una muestra de

volumen determinado y comnmente se expresan como nmero de clulas por cada milmetro, ya
3
que 1 mL = 1 cm = 1000 mm y como 1000 mm = 10,000 0.1 mm , entonces 1 mL = 10,000

3
veces el volumen de la muestra, que como ya se vio, es siempre de 0.1 mm .
Vamos a suponer que se hizo un conteo de clulas en el cuadro central de la

cuadrcula, obtenindose la cifra de 320 clulas. Para expresar el nmero de clulas por
3
mililitro, se multiplica 320 10,000 mm . El resultado es de 3200,000 clulas / mL.

36

2016
PROBLEMAS DE CONTEO
En la prctica de la cuantificacin del nmero de clulas presentes en una muestra problema,
pueden surgir diferentes situaciones que pueden ser resueltas de la siguiente manera:
2
1. Se puede dar el caso de que existan entre 200 y 300 clulas en los cuadros de 1mm de
superficie, en tal situacin solamente hay que multiplicar por 10,000 el nmero de clulas
contadas. El resultado ser igual al nmero de clulas/ mL.
2. Puede ser que en el cuadro central (1 mm
de superficie) el nmero de clulas sea
inferior a 200, en cuyo caso ser necesario usar ms cuadros para llegar a contar las 200
o 300 clulas requeridas.
3. En el cuadro central puede haber un nmero muy superior a 200 clulas, por lo que sera
sumamente laborioso hacer el conteo de todas ellas. En este caso se toman en cuenta
2
los cuadros ms pequeos (de 0.04 mm de superficie) y se hace el conteo de 200 a 300
solamente.
4. Para obtener el resultado se divide el nmero total de clulas contadas entre el nmero
2
de cuadros de 0.04 mm de superficie que forman el cuadro grande central de 1mm de

superficie, el resultado ser el nmero de clulas por mL, solamente hay que multiplicar el
dato anterior por 10,000.
5. Puede haber un nmero tan elevado de clulas que sea imposible discriminar unas de
otras impidiendo un conteo correcto; en este caso habr que diluir la suspensin
multiplicando el nmero final de clulas por el factor de dilucin empleado.

El alumno aprender a utilizar el hemocitmetro para realizar conteos de clulas que se
encuentran en suspensin y as determinar el nmero de clulas por mililitro contenidas
en una suspensin.

Las normas oficiales mexicanas especficas para la prctica.
37

2016

MATERIAL
Micropipetas
Azul de tripn 0.4%
Suspensin de levaduras
Palillos o abatelenguas
Papel seda
Agua destilada
Cmara de Neubauer
Microscopio compuesto

METODOLOGA
Parte A
1. Limpiar con papel seda la cmara de Neubauer.
2. Colocar el cubreobjetos en el lugar correspondiente.
3. Pipetear 0.1 mL de suspensin; colocar la punta de la micropipeta en la cmara de tal
manera que la muestra vaya entrando por capilaridad, sin caer en los canales. Si se
llegaran a formar burbujas, repetir todo el procedimiento, lavar la cmara previamente con
agua destilada.
4. Colocar la cmara de Neubauer en la platina del microscopio y enfocar con el objetivo de
4X.
5. Localizar el cuadro central y enfocar las clulas de levadura que se encuentran.
6. La cuadrcula que se usa como gua para el conteo es de 0.2 0.2 mm. Al contar el
nmero de clulas en la cuadrcula se deben de tomar dos precauciones:
a) No contar la misma clula en ms de una ocasin.
b) No dejar de contar clulas.
7. Para obtener resultados lo ms exactos posibles, hay que contar entre 200 y 300 clulas
en cada muestra.
Parte B
1. Realizar raspado con un abatelenguas de la parte interna de la mejilla.
2. Mezclar las clulas obtenidas con 200 L de azul tripn al 0.4%.
3. Cargar la cmara de Neubauer para su conteo al microscopio.
4. Determinar por separado el nmero de clulas viables (sin teir) y no viables (teidas de
azul).
38

2016

entorno.

prctica son:
Manejo de la tcnica

33. RESULTADOS
1. Esquematizar y explicar los resultados.
2. Calcular el nmero de clulas por mL.
3. Calcular el porcentaje de viabilidad.
4.- Anotar observaciones y discutirlas.
39

2016
34. CUESTIONARIO
1. Suponga que se realiz un conteo en la parte central del hemocitmetro de una
suspensin que contena diversos tipos de protozoarios, donde la muestra problema se
6
diluy 1:10. Se hizo la cuenta y se obtuvo un resultado de 2.5 10 protozoarios/mL es

correcto el dato?
2. Suponga que el cuadrado grande del centro de la celdilla contiene 53 clulas de levadura.
Se hace la cuenta de los cuatro cuadros de los vrtices y se encuentra que contiene 51,
54, 55 y 60 clulas respectivamente. Cul es la mejor estimacin del nmero total de
clulas de levadura en cada mL del cultivo original?
3. Se tiene una suspensin de clulas de levadura de la que se sospecha que contiene
aproximadamente 3 10
clulas en cada mL Cuntas clulas habr en cada
diezmilsimo de mL? Cunto habr que diluir una muestra de este cultivo antes de hacer
la cuenta en el hemocitmetro para obtener aproximadamente 300 clulas en uno de los
cuadros grandes?
35 . BIBLIOGRAFA *
36 . PARA SABER MS
40

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 4
DIFUSIN SIMPLE
Hipertnica
Isotnica
Elaborado por:
41
Hipotnica

2016

38. INTRODUCCIN
Las clulas mantienen una composicin inica interna, diferente a la del medio que la rodea y
esa diferencia es fundamental para mantener las funciones celulares, y cuando hablamos de
la diferencia interna y externa nos referimos a que de por medio existe una membrana
compuesta por una bicapa lipdica, cuya naturaleza mayoritaria son los fosfolpidos,
molculas anfipticas, con cabeza polar y dos colas hidrocarbonadas hidrfbicas, que en un
ambiente acuoso forman la bicapa con centro hidrfobo; este arreglo hace prcticamente
impermeable a todo tipo de iones con elevado grado de hidratacin, aunque si transcurre un
tiempo suficiente, prcticamente cualquier molcula difundir a travs de esta bicapa; sin
embargo, el tiempo depender del tamao y las caractersticas de solubilidad de la molcula
a travesar; es decir, entre ms pequea sea la molcula y ms hidrofbica o no polar, mayor
ser la velocidad de difusin. Debido a sus caractersticas de ser pequeas polares pero no
cargadas, las molculas de agua atraviesan con relativa libertad la bicapa; esto es, el agua se
desplaza hacia adentro y hacia afuera por la diferencia del gradiente de concentracin de
solutos dentro y fuera de la clula, a este fenmeno se le conoce como smosis. Si a una
clula se le coloca en una solucin hipertnica, el movimiento del agua ser hacia fuera de la
clula ocasionando que la clula se encoja o se crene, pero si de lo contrario se coloca en un
medio hipotnico esta se desplazar hacia el interior y ocasionar que la clula se hinche.
Crenada
Normal
Hipertnica
Isotnica
Hinchada
Lisada
Eritrocito
Concentracin inica en
el medio extracelular
42
Hipotnica Muy hipotnica

2016

Determinar el efecto de soluciones de NaCl y glucosa a diferente concentracin
sobre eritrocitos y cuantificar el efecto.


MATERIAL Y EQUIPO
Eritrocitos lavados
Hemocitmetro
Micropipetas
Solucin salina al 0.4, 0.85 y 1.5%
6 tubos de 1.7mL
Solucin de glucosa al 1.5, 3 y 6%
Microscopio compuesto
METODOLOGA
1. Marcar los tubos que contienen las soluciones del 1 al 6 de acuerdo a la solucin
que se va a agregar.
2. De acuerdo a la siguiente tabla:
Tubo
No.
1
NaCl
%
0.40
mL
0.85
1.50
Eritrocitos
L
2
Tubo
No.
4
Glucosa
mL
1.5
3.0
6.0
3. Realizar el conteo de los tubos 1 y 4 al minuto 0 y al minuto 3.

4. Para el resto de los tubos realizar el conteo al minuto 2 y 7.
43
Eritrocitos
L
2

2016
4. Determinar el nmero de clulas crenadas, normales e hinchadas por mililitro en

un hemocitmetro en cada una de las soluciones.

entorno.

prctica son:
Manejo de la tcnica

44

2016
43. RESULTADOS
1. Explicar los resultados con cada una de las soluciones utilizadas en la prctica
2. Hacer un clculo del nmero de clulas/mL hinchadas, crenadas y normales para
cada una de las soluciones utilizadas en la prctica
3. Determinar la velocidad de lisis celular en cada caso y explicar el resultado
44. CUESTIONARIO
1
De acuerdo a las observaciones, qu soluciones utilizadas en la prctica se

comportaron como isotnicas, hipertnicas e hipotnicas? Nota: contestar esta
pregunta una vez obtenidos los resultados en la prctica.
2 Explicar cmo contribuyen las macromolculas intracelulares en la osmolaridad

celular.
3 Explicar qu es el equilibrio de Donnan
45 . BIBLIOGRAFA *
46 . PARA SABER MS
45

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 5
MOVIMIENTO CILIAR
Elaborado por:
46

2016

48. INTRODUCCIN
Los cilios son estructuras piliformes de alrededor de 0.25 m de dimetro cubiertas de
membrana plasmtica que parten de la superficie de varios tipos de clulas eucariotas, tanto
individuales como asociadas en tejidos. Cada cilio contiene una porcin central formada por
un haz de microtbulos que provienen de un cuerpo basal localizado en el citoplasma, el
cuerpo o corpsculo basal acta como centro organizador del cilio.
47

2016
Los microtbulos estn formados por subunidades de tubulina, en un arreglo ultra estructural
caracterstico, 9 + 2 en el cilio y 9 + 0 en el cuerpo basal. Adems de la tubulina, se
encuentran otras protenas involucradas, las cuales funcionan coordinadamente para producir
el movimiento.
CILIO
Par de microtbulos
48

2016
El movimiento ciliar tiene diversas funciones: desplazar al individuo, eliminar partculas de

desecho o txicas, formar corrientes para el intercambio gaseoso y alimenticio, actividad
sensorial, entre otras.
El movimiento ciliar ocurre en dos fases. En la primera fase es un movimiento rpido de
barrido en un solo plano que se produce por flexin de la regin basal del cilio,
describindose un ngulo de 90. Llamada cmo golpe eficaz.
En la segunda fase es un movimiento lento del cilio para recuperar su posicin original. Este
movimiento ocurre describiendo una curva y se denomina golpe de retorno. La recuperacin
comienza en la zona flexionada del cilio pero la flexin se va propagando hacia la punta a
medida que el cilio gira.
Los cilios de una clula se mueven de forma coordinada, que es metacrnica en el plano de
movimiento: cada cilio realiza el mismo movimiento con el anterior pero con un retraso de
fracciones de segundo y es isocrnica respeto al plano perpendicular al plano de movimiento,
es decir, todos los cilios del plano estn en la misma fase de movimiento.
El movimiento se produce por desplazamiento de unos dobletes respecto a los otros. El

mecanismo y desplazamiento se debe la actuacin de los brazos de dinena.
El deslizamiento activo se produce por sucesivas conexiones y desconexiones de los brazos
del microtbulo A de un doblete con el B del siguiente doblete, es un mecanismo similar a la
contraccin muscular, requiriendo gasto de energa. Los brazos de dinena tienen actividad
ATPasa y actan en presencia de calcio y magnesio. Los microtbulos del par central
tambin intervienen en el movimiento debido a que la vaina que los rodea est unida a los
dobletes por los radios.
El movimiento ciliar es diferente en varias especies de organismos. En las clulas ciliadas de
algunos rganos, como las branquias de moluscos bivalvos o en la trquea de varios
vertebrados, el movimiento ciliar es metacrnico.
La estructura de los flagelos es similar a la de los cilios pero de mayor grosor y tamao. Si
realizamos un corte transversal en la porcin media del flagelo observamos que la estructura
del axonema tambin es de 9 + 2 (igual que del cilio). Los flagelos bacterianos
49

2016
son muy diferentes a los de eucariotas. Consiste en una fibra nica de triple hlice de 10-20
nm de espesor y varias micras de largo que nace en el grnulo basal. La fibra est formada
por la protena flagelina.
El movimiento flagelar es ms complicado que el ciliar: es en tercera dimensin y puede
variar de unos flagelos a otros. Se trata de una mezcla de movimientos complejos en los que
se combinan movimientos ondulares y movimientos en sacacorchos
49. PROPSITOS DE LA PRCTICA

El propsito de sta prctica es observar el movimiento ciliar metacrnico en las branquias
del ostin (Cassostrea sp.).
Observar el movimiento de los cilios de un protozoario (Paramecium sp.)
Observar el movimiento de un espermatozoide de ratn y comparar la forma del movimiento
con la de los cilios de ostin.


MATERIAL.
Cajas de Petri
Tijeras, bistur
Aceite de inmersin
Pinzas de diseccin.
Tres ostiones por equipo o grupo de trabajo.
Microscopio compuesto o de campo claro
50

2016
SOLUCIONES
Solucin No. 1 Cianuro de potasio (KCN) 0.05 M. Filtrar el lquido obtenido de siete ostiones
y preparar con ste una solucin de KNC 50 mM, suficiente para todo el
grupo. ES ESTRICTAMENTE NECESARIO EL USO DE GUANTES DE
LTEX.
Solucin No. 2. Humo de tabaco. Filtrar el lquido de siete ostiones y preparar con ste una
solucin saturada de CO2 burbujeada con humo de cigarro.
METODOLOGA
Parte A
1. Abrir las valvas del ostin.
2. Cortar el msculo aductor que une al ostin con su valva derecha.
3. Colocar en la caja de Petri el organismo sobre su valva izquierda, tratando de no
derramar el lquido que contiene.
4. Descubrir el cuerpo del molusco cortando el manto que lo cubre.
5. Tomar trozos de la regin de las branquias, de aproximadamente 5 mm. por lado cada
uno y colocarlos en un portaobjetos.
6. Agregar al portaobjetos 2 gotas del lquido natural contenido en el ostin o solucin salina
fisiolgica a temperatura ambiente.
7. Colocar un cubreobjetos, presionar ligeramente y observar al microscopio
51

2016
Representacin Esquemtica de Cassostrea sp.
Parte B
1. En un portaobjetos aadir una gota de semen.
2. Colocar un cubreobjetos y observar al microscopio a diferentes aumentos,
procurando que la preparacin no se seque.
52

2016

52.1 Lineamientos Generales para la Evaluacin.
entorno.

prctica son:
Manejo de la tcnica

53. RESULTADOS
1. Esquematizar y anotar lo observado en cada parte de la prctica.
2. Comparar los movimientos ciliares en cada caso y contrastarlo con los movimientos
flagelares.
53

2016
54. CUESTIONARIO
1. Cules son las estructuras de movimiento en procariotas y eucariotas? Compara la
ultraestructura de ambas.
2. Mencionar en que especies se observan los cilios de ultraestructura 9 + 2. Existen
organismos superiores que presentan estas estructuras? Menciona ejemplos de clulas
con cilios.
3. Explica cul es la importancia del citoesqueleto en los procesos de movimiento y
desplazamiento.
55 . BIBLIOGRAFA *
56 . PARA SABER MS
54

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO. 6
OBSERVACIN DE CORPSCULO DE BARR
Elaborado por:
55

2016

58. INTRODUCCIN
Cuando se tien clulas con colorantes bsicos, sus ncleos presentan zonas densamente
teidas como las observadas alrededor del nuclolo, correspondientes a la heterocromatina y
zonas con coloracin ligera, la eucromatina.
Barr M. (1962), y Bertram C. (1964), al estudiar la

fisiologa neural en gatos observaron la presencia
de un pequeo cuerpo basfilo redondeado en el
ncleo de gatos hembras. Despus de varios
estudios, se concluy que se trataba de cromatina
sexual.
Posteriormente se comprob que este cuerpo era

solo uno de los dos cromosomas X, el cual se
conservaba condensado y el segundo, extendido
y por tanto imposible de detectar. Este cuerpo
puede ser identificado durante la interfase con el
F
microscopio de luz.
i
Como las mujeres y los animales hembras poseen
g
cromosomas
X
provenientes
de
ambos
.
progenitores, el azar determina cul de ellos
7quedar condensado y por consiguiente sin
expresarse.
M
De hecho se ha observado que en un solo organismo, las clulas somticas presentan un
i
mosaico de cromosomas sexuales condensados.
Esto es dentro de un mismo organismo las
c
clulas hepticas pueden presentar condensado
el cromosoma Xp y las clulas epiteliales el
r
o
Cromosoma Xm.
g
r 56
a
f

2016
Clula embrionaria
Condensacin aleatoria de un
cromosoma X
Herencia directa del modelo de condensacin cromosmica
Herencia directa del modelo de condensacin cromosmica
Slo Xm es activo en esta clona
Slo Xp es activo en esta clona
Una vez que alguno del par allico se condense, ste permanecer as, a lo largo de varias
divisiones celulares. Sin embargo el patrn de condensacin puede cambiar despus de
varias generaciones, principalmente en la produccin de clulas germinales. La condensacin
del cromosoma X se origina a partir de la parte media del cromosoma llamado centro XIC (X
inactivacin center) y se distribuye a lo largo del cromosoma, hasta quedar totalmente
condensado.
57

2016
Para lograr la inactivacin del cromosoma X, convergen mltiples seales de silenciamiento

empezando por la presencia de transcritos antisentido que parecen ser la seal para atraer
modificaciones de la cromatina tales como la desacetilacin de histonas, metilacin del ADN y
metilacin de la histona H3 entre otras. As el cromosoma X se ver silenciado en la
expresin de sus genes, por medio de la formacin de una cromatina compacta, en la mayor
parte de su extensin.
Se ha descubierto que el nmero de corpsculos de Barr es igual al nmero de cromosomas
X menos uno.

El alumno observar el corpsculo de Barr en clulas de epitelio bucal de mujeres y
comparar con el mismo tipo celular en hombres; adems, entender el significado de la
presencia de estos cuerpos en las clulas somticas.


MATERIAL
Portaobjetos
Cubreobjetos
Clulas de epitelio bucal de mujeres y
hombres.
Abatelenguas
Barniz
Microscopio compuesto o de campo
claro
SOLUCIONES
1. Alcohol cido: etanol-actico (3:1)
2. HCl 1N
3. Acetorcena al 2%
4. cido actico
58

2016
METODOLOGA
1. Lavar perfectamente los portaobjetos y cubreobjetos con una mezcla de alcohol etlico
96% y agua destilada (1:1). Mantenerlos en refrigeracin hasta su uso.
2. Con el abatelenguas raspar la parte interna de la mejilla para tomar la muestra de
epitelio y se distribuye en una misma direccin sobre un portaobjetos limpio y seco.
3. Etiquetar el portaobjetos segn el origen de la muestra
4. Agregar tres gotas de acetorcena al 2%, colocar cubreobjetos y dejar teir durante 5
minutos.
5. Cubrir la laminilla con una toalla de papel absorbente y presionar de manera uniforme
para quitar el exceso de tincin.
6. Sellar los bordes del cubreobjetos con barniz.
7. Observar al microscopio con los objetivos de bajo aumento despus con el de
inmersin.
APNDICE
Preparacin de acetorcena al 2%
En un frasco resistente a temperatura, disolver 2 gramos de orcena en 45 mL de cido
actico; esto se hace a bao Mara, de la siguiente manera: cuando el agua est hirviendo, se
mete el frasco con orcena y cido actico durante 20 min. Se apaga el bao y la solucin se
deja enfriar a temperatura ambiente. Se filtra con papel filtro y posteriormente se agregan 55
mL de agua para alcanzar los 100 mL.

entorno.
59

2016

prctica son:
Manejo de la tcnica
63. RESULTADOS
Realice un esquema de sus resultados y explquelos.
64. CUESTIONARIO
1. Explicar el proceso por medio del cual se establece el mosaico de clulas femeninas
2. Cules son las limitantes de esta tcnica?
3. La inactivacin del cromosoma X, se lleva a cabo con la participacin de los
elementos XIC y XIST ARN. Explicar estos mecanismos
65 . BIBLIOGRAFA *
66 . PARA SABER MS
60

2016
UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE NAYARIT

PRCTICA NO . 7
MITOSIS CELULAR
Elaborado por:
61

2016

68. INTRODUCCIN
Cuando son favorables las condiciones en que se encuentra un organismo unicelular
(como las bacterias, levaduras, etc.) llega a su tamao mximo, y cuando esto sucede
sobrevienen cambios fsico-qumicos y bioqumicos muy complejos que dan lugar como
consecuencia a la reproduccin celular (divisin celular).
En organismos pluricelulares a partir de un huevo fertilizado, se requieren varias series de
divisiones celulares. Este ciclo de duplicacin y divisin, esencial para la reproduccin de
todos los organismos vivos, se conoce como ciclo celular.
Las clulas alternan una fase de reproduccin con otra fase en la que tienen lugar el
metabolismo natural de la clula. Las principales diferencias entre estas dos fases son muy
notorias en el ncleo. Cuando no se encuentra en divisin se conoce como ncleo interfsico,
en esta fase los cromosomas no son evidentes.
El proceso de divisin celular incluye varias fases: profase, metafase, anafase y telofase.
La mitosis es esencialmente la misma en clulas vegetales y animales, y solo existen
diferencias en los detalles las estructuras celulares son difciles de observar debido a que
carecen de color y son casi transparentes en la clula viva.
Profase:
Condensacin de
cromosomas
Prometafase:
Asociacin de
cromosomas
Metafase:
Alineamiento de
cromosomas
62
Anafase:
Separacin de
cromosomas
Telofase:
Relajacin de
cromosomas

2016

Observar las fases de la mitosis en clulas vivas y tratar de identificar las fases tanto en las
preparaciones como esquemticamente.


MATERIAL
Semillas en germinacin (frjol , haba u otra)
Navaja
Pinzas y alfileres
HCl, 10 N
Acetorcena
Portaobjetos
Cubreobjetos
METODOLOGA.
1. Con la navaja, cortar la zona del meristemo apical de la raz germinada (punta de la raz),
colocar los fragmentos en el portaobjetos y agregar 3 gotas de HCl. Dejar por 15 minutos
2. Retirar el exceso de HCl con papel absorbente.
3. Aplicar 3 gotas de acetorcena. Comprimir (squash) sobre la preparacin y dejar reposar
por 15 minutos.
4. Realizar las observaciones correspondientes y los esquemas de lo observado
5. Observar el esquema anexo que corresponde a clulas de una raz de cebolla. Cuntas
fases de la divisin puedes reconocer? Numralas y mrcalas indicando la fase en la que
se encuentra.
63

2016

entorno.

prctica son:
Manejo de la tcnica
73. RESULTADOS
Realice un esquema de sus resultados y explquelos.
74. CUESTIONARIO
1.- Describir las etapas de la divisin celular.
2.- Cules cambios en la clula indican que la divisin esta prxima a efectuarse?
3.- Mencionar por separado las diferencias y semejanzas entre las mitosis de clulas
vegetales y clulas animales.
64

2016
75. BIBLIOGRAFA *
76. PARA SABER MS
internet relacionados con el tema, as como la realizacin de glosario de trminos
65

2016
77 . ANEXOS
ANEXO 1 Tabla de cotejo
Tabla de cotejo
Acreditacin
Evidencias
Alumno
Docente
No
Porcentaje
No
PARTICIPACIN ACTIVA
Respondi cuestiones relacionadas con
la prctica.
Trajo el protocolo de la prctica en
forma completa?
5%
Present el material y equipo

necesarios para la prctica completa.
Intervino en realizar los procedimientos
de la prctica.
PUNTUALIDAD
1%
Asisti con puntualidad a la prctica

ATUENDO
Visti adecuadamente para realizar la
1%
prctica.
Port el equipo de proteccin personal
DISCIPLINA
Tuvo un comportamiento adecuado en
el rea de trabajo, siguiendo la
1%
normatividad
Limpi y orden el rea de trabajo
ATENCIN
Atendi a las instrucciones para la
2%
realizacin de la prctica.
66

2016
78. BIBLIOGRAFA*
Alberts B., Johnson A., Lewis J., Raff M., Roberts K., Walker P. 2010. Biologa
molecular de la clula. 5ta. Ed. Editorial Omega, Barcelona, Espaa.
Hernndez S. I y Hernndez A. Prcticas de Biologa. EDUG/Universidad de

Guadalajara.
Ramrez Luna J y Reyes Lpez A. 2003. Manual de prcticas de Biologa. 1ra edicin.
Pearson Prentice Hall.
Lehninger A. L., Nelson D. L., Cox M. M. Principios de Bioqumica. 3ra edicin.

Ediciones Omega.
Complementar con la bibliografa del curso terico.
67

Manual Prácticas Biol Cel Agosto 2016

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