Universidad Galileo

Facultad de Qumica, Biologa y Farmacia

Licenciatura en Qumico Farmacutico
Laboratorio de microbiologa bsica
Darlin Jeanneth Lopez Caal
Carn: 12003487
.

Reporte No. 3
TINCION DIFERENCIAL DE GRAM
Introduccin
El siguiente reporte corresponde a la Practica no. 3 Tincin Gram .
La tincin de Gram es una tcnica diferencial comnmente empleada en el
diagnostico microbiolgico, la mayor parte de las muestras sometidas a examen
que se sospecha infeccin bacteriana deben ser extendidas en frotis laminillas de
vidrio, teidas y examinadas en el microscopio
.

Objetivos
1. Identificar la morfologa y tipo de tincin de la cepas proporcionadas
2. Que como alumno hacer la tincin de manera correcta para la observacin
de bacterias
Marco Terico
Los reactivos empleados en la tincin de gram son el cristal violeta que es el
colorante bsico, el lugol como mordiente, alcohol cetona decolorante y safranina
como colorante de contraste .Las bacterias Gram positivas, debido a la estructura
y composicin bioqumica de su pared celular retienen el complejo cristal violetalugol y aun despus del tratamiento con el decolorante conserva el colorante
bsico, por loque se observan de color prpura o violeta al microscopio. Las
bacterias Gram negativas pierden el colorante bsico cuando son tratadas con el
decolorante debido a que el alcohol disuelve el contenido lipdico de la pared
celular (lo que aumntala permeabilidad celular), dando como resultado la prdida
del complejo cristal violeta-lugol. Las bacterias decoloradas captan entonces el
colorante de contraste, razn por la cual estas bacterias se observan de color rojo
al microscopio.
DATOS Y PROCEDIMIENTOS
Materiales
Instrumentos
o Laminillas
o Cubreobjetos
o microscopio
Reactivos
o
o
o
o

cristal violeta
lugol
acetona
alcohol acido

o safranina
PROCEDIMIENTO
o Se prepar un frotis colocando el frote sobre el soporte de tincin
o Luego se cubri con cristal violeta por 1 minuto
o Luego se lav el frote y cubrir con solucin de lugol por otro minuto
o Se volvi a lavar con agua del chorro , agregando 4 gotas de alcohol
acido sobre el chorro encendido
o Cubriendo la lmina con solucin de safranina por 1 minuto
o Dejar secar a temperatura ambiente
Discusin de Resultados
En la prctica de tincin de Gram y en los frotis que se colocaron en microscopios
fueron Gram positivos todas muestras ya que al ser tratados con lugol su
coloracin fue gris a negro, luego al ser lavado con alcohol acido su coloracin no
cambio, con lo que podemos que es una de la principales caracterizas de las
bacterias Gram positivas y en las diferentes muestras observamos cocos en
racimos, tambin cocos sueltos.

Conclusiones
- El tamao de las bacterias puede dificultad la visin del microscopio
- La tcnica de tincin tienen como finalidad crear un contraste entre la celula
y el medio que la rodea y una de las mas importante , tanto por su
aplicacin clnica para hacer una identificacin preliminar de la bacteria
causal de la infeccin y por su practicidad, es la tincin de Gram.

Bibliografa
Jawetz E., et al. Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg. Editorial
Manual Moderno, 19a Ed. Mxico 2008; 702-703.
Murray PR, et al. Microbiologa Mdica. Editorial Elsevier Mosby. 6a Ed. Espaa
2009: 158-159.
Caldas A. L., Gua de Microbiologa y Parasitologa bsico clnica. Disponible en:
http://www.facultadsalud.unicauca.edu.co/Documento
s2010/DptoMedInt/Tencion_de_gram.pdf